CN113281525A

CN113281525A - 一种检测母猪排卵量的方法

Info

Publication number: CN113281525A
Application number: CN202110401761.8A
Authority: CN
Inventors: 金义达; 洪琼花
Original assignee: Kunming Tian Tian Biotechnology Co ltd
Current assignee: Kunming Tian Tian Biotechnology Co ltd
Priority date: 2021-04-14
Filing date: 2021-04-14
Publication date: 2021-08-20

Abstract

本发明提供一种检测母猪排卵量的方法，包括：采集发情猪的猪血或尿液，插入猪的促黄体生成素LH检测试纸，试纸上质控线C与检测线T都显色，与促黄体生成素LH比色卡对比，LH≦10mIU/ml,母猪卵细胞未成熟，至发情结束后，LH持续≦10mIU/ml,该猪不排卵，淘汰；LH在10—20mIU/ml时，每隔4小时重复一次检测，直至LH达到35‑‑100mIU/ml，距离排卵时间10‑‑‑15小时；同时LH<40 mIU/ml,排卵量≤7枚；LH≥40—60 mIU/ml，排卵量≥8‑‑10枚；LH≥60—80 mIU/ml，排卵量≥11‑‑‑12枚；LH≥80—100 mIU/ml，排卵量≥13‑‑‑15枚；LH>100 mIU/ml，排卵量>15枚；配种后，获得多胎仔猪数量。

Description

一种检测母猪排卵量的方法

技术领域

本发明涉及一种检测方法，尤其是一种检测母猪排卵量的方法，属于动物检测方法技术领域。

背景技术

母猪能否被合理淘汰，直接影响养猪场的经济效益。现有种母猪的淘汰分为自然淘汰与异常淘汰。异常淘汰是指：因患肢蹄病、乳房炎、子宫炎等疾病而无法繁育后代的母猪必须淘汰。自然淘汰是指：对一些繁殖数量低下的母猪必须定期淘汰，否则将导致生产成本增加，育种水平低下，不利于提高养猪场的经济效益。通常母猪的生育次数为７～８次，个别母猪可达到1０次，当母猪生育一定次数后，其生殖器官的功能减退，繁殖能力下降，此时应给予淘汰。另外，由于现有的淘汰均是被动的，即要出现下列情况时才能淘汰：1）后备母猪８月龄还不发情或者发情症状不明显的；2）虽已产仔猪但在断奶30天后仍不发情，且催情合仍无效果的；3）配种后出现习惯性流产的；4）连产两胎且产仔数量均在７头以下或者仔猪存活率均低于７０％的。由此可知，现有技术对母猪的淘汰不仅周期长，淘汰一头母猪平均所需时间10--12个月，而且成本高，平均每月每头母猪需要多支出600元饲养成本，直接影响整个养猪场的经济效益及日后的发展。因此，有必要对现有的被动式淘汰方式加以改进。

发明内容

母猪卵细胞的成熟、卵泡的破裂、排卵的数量等，均会受促黄体生成素LH高峰的影响，通常母猪会在出现促黄体生成素LH高峰后的27-33个小时之间排卵，促黄体生成素LH高峰是指基础水平的8倍以上，并且排卵数量越多，促黄体生成素LH峰值水平越高，排卵数量越少，促黄体生成素LH峰值水平越低，而且第一个及最后一个卵泡破裂之间的时间是1—3小时，诱导排卵时可达6小时，因此越靠近排卵时间完成配种或输精，配种的成功率就越高，获得的受胎数量也就越多，产仔猪的数量也就越多。当发情期促黄体生成素LH峰值水平越低，获得的受胎数量也就越少。为此，本发明基于这一自然规律，提供一种母猪排卵数量的检测方法，为母猪的淘汰以及准确配种提供可靠的技术支撑，最大限度地及时淘汰不合格母猪，降低养殖成本。

本发明通过下列技术方案完成：一种检测母猪排卵量的方法，其特征在于包括下列步骤：

1）取1--10 ml发情期母猪血于阴凉处静置1-2小时，分离出血清；或者收集母猪在上次小便后1-2小时再小便的尿液1-10ml；

2）将猪的促黄体生成素LH检测试纸插入步骤1）的血清或者尿液中5--10秒，取出，于15-18分钟后，观察该促黄体生成素LH检测试纸中的质控线C与检测线T是否显色：

3）显色结果如下：

促黄体生成素LH检测试纸质控线C未显色、检测线T显色，表明检测结果无效，需要重复检测；

促黄体生成素LH检测试纸质控线C显色、检测线T未显色，表明母猪的促黄体生成素LH水平低下，需要隔日再检测；

促黄体生成素LH检测试纸质控线C及检测线T都显色，用该显色与促黄体生成素LH比色卡进行下列对比；

31）当促黄体生成素LH≦10mIU/ml,表明母猪的促黄体生成素LH处于基础水平，卵细胞尚未成熟，不能配种，再重复检测促黄体生成素LH，直至发情结束，其促黄体生成素LH仍持续≦10mIU/ml,表明该猪不会排卵，淘汰；

32）当促黄体生成素LH在10—20mIU/ml时，表明母猪开始进入排卵期，需要每隔4小时重复步骤1）-3）进行一次检测，每天检测三次，直至母猪的促黄体生成素LH达到35--100mIU/m时，表明母猪的促黄体生成素LH高峰到来，距离排卵时间10---15小时；同时与促黄体生成素LH比色卡对比，按下列确定母猪的排卵数量：

促黄体生成素LH<40 mIU/ml,排卵量≤7枚，排卵量少淘汰该母猪；

促黄体生成素LH≥40—60 mIU/ml，排卵量≥8--10枚；

促黄体生成素LH≥60—80 mIU/ml，排卵量≥11---12枚；

促黄体生成素LH≥80—100 mIU/ml，排卵量≥13---15枚；

促黄体生成素LH>100 mIU/ml，排卵量>15枚；

4）根据步骤3）的检测结果，对于促黄体生成素LH达到35—100 mIU/ml的母猪，在10---15小时内进行自然或人工配种后，公猪的精子进入到母猪体内的存活时间是8-48小时，即完成配种。

所述步骤2）猪的促黄体生成素LH检测试纸经过下列方法制备：

21）按下列制备各组分：

金溶液：将质量浓度为1%的氯金酸溶液2ml和质量浓度为1%的柠檬酸钠溶液2ml，加入到纯化水中至100ml，加热至溶液呈现紫红色后，冷却至室温，得金溶液；

封闭液：将0.005g牛血清白蛋白溶解在300ul纯化水中，加入30ul 医用级碳酸钾溶液，混合均匀，得330ul封闭液；

样本垫处理液：将0.605g三羧甲氨基甲烷和1.5g氯化钠完全溶解在100ml纯化水中，得样本垫处理液；

胶体金结合物稀释液：将0.605g三羧甲氨基甲烷、0.2g聚乙烯吡咯烷酮、5g蔗糖、0.9g氯化钠、0.5g牛血清白蛋白、3ml羊血清和0.15ml吐温20，与100ml纯化水混合均匀，得胶体金结合物稀释液；

LH包被液：将100-200mg猪的促黄体生成激素单克隆α亚级抗体LHmAbCoating和质量浓度为1%的海藻糖溶液1ml，溶解在0.01M PBS缓冲液100ml中，混合均匀，得LH包被液；

IgG包被液：将羊抗鼠IgG抗体100mg和质量浓度为1%的海藻糖溶液1ml，溶解在0.01M PBS缓冲液100ml中，混合均匀，得IgG包被液；

22）在底板上划膜

22A）将NC膜贴在PVC板上表面的中部，得底板；

22B）按0.8μl/cm的量，以500mm/s的速度，将步骤21）的IgG包被液均匀地划在步骤22A）底板上的NC膜的上端作为质控线C，将LH包被液均匀地划在NC膜的下端作为检测线T，质控线C与检测线T相距6mm±1mm，质控线C距离NC膜上端8mm±1mm，检测线T距离NC膜下端7mm±1mm，然后放入干燥箱内，于温度为25℃±2℃、湿度≤30％下干燥18h±2h，得划膜板；

23）金垫制备

23A）在100ml步骤21）的金溶液中加入1.2ml医用级碳酸钾溶液、1.5-2mg LH单克隆抗体LHmb2，搅拌40min，滴加330ul封闭液，搅拌10min，于4℃、12000r/min的条件下离心40min，弃上清液，取余液5.3 ml，加入40ml 胶体金结合物稀释液，混匀；

23B）将步骤23A）混匀的胶体金结合物稀释液40ml均匀铺在1080cm²玻璃纤维素膜上，然后放入干燥箱内，于温度为25℃±2℃、湿度≤30％下干燥18h±2h，得金垫；

24）样本垫制备

24A）按30ml/张的量，将步骤21）的样本垫处理液均匀铺在玻璃纤维素膜上，然后放入干燥箱内，于温度为25℃±2℃、湿度≤30％下干燥18h±2h，得样本垫；

25）贴板

25A）将步骤23）的金垫贴于步骤22B）划膜板的NC膜下端，并使1-2mm的金垫后端搭在NC膜上；

25B）将步骤24）的样本垫贴于步骤25A）的金垫前端上面，并使样本垫后端完全搭在金垫上，样本垫前端贴于PVC板前端；

25C）将吸水垫贴于25B）的PVC板后端，并使1-2mm的吸水垫前端搭在NC膜后端；

26）将步骤25C）贴板切割成3.0±0.5mm的试纸条，得猪促黄体生成素LH检测试纸。

所述促黄体生成素LH比色卡为市购产品。

本发明具有下列优点和效果：采用上述方案，可方便地在母猪发情时，提取其血清或尿液，用本发明提供的促黄体生成素LH检测试纸进行促黄体生成素LH的检测，通过检测母猪的促黄体生成素LH水平，并与促黄体生成素LH的比色卡进行对比，可以准确检测母猪排卵的数量，进而淘汰不排卵或排卵数量少的母猪，并将母猪的排卵时间准确预测在8—15小时内，可在这一时间内进行自然或人工配种，由于公猪的精子进入到母猪体内保持受精能力的时间是8-48小时，因此，可大大提高猪的配种成功率，检测受胎数量，以获得高效繁殖率，从根本上解决了现有技术只能被动地通过母猪配种后的产仔量来确定是否淘汰、耗时长、饲养成本高的弊端，节约了大量的人力、物力、财力、时间，提高猪的受胎数量，为养殖户或养殖企业创造更高的经济利益提供可靠的技术支持。

附图说明

图1为猪的促黄体生成素LH检测试纸结构示意图；

图2为市购的促黄体生成素LH比色卡图。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明做进一步说明。

实施例1

猪的促黄体生成素LH检测试纸经过下列方法制备：

1）按下列制备各组分：

11）金溶液：将质量浓度为1%的氯金酸溶液2ml、质量浓度为1%的柠檬酸钠溶液2ml，加入到纯化水中至100ml，混合均匀，加热至溶液呈现紫红色后，冷却至室温，得金溶液；

12）封闭液：将0.005g牛血清白蛋白溶解在300ul纯化水中，加入30ul 医用级碳酸钾溶液，混合均匀，得330ul封闭液；

13）样本垫处理液：将0.605g三羧甲氨基甲烷和1.5g氯化钠完全溶解在100ml纯化水中，得样本垫处理液；

14）胶体金结合物稀释液：将0.605g三羧甲氨基甲烷、0.2g聚乙烯吡咯烷酮、5g蔗糖、0.9g氯化钠、0.5g牛血清白蛋白、3ml羊血清和0.15ml吐温20，与100ml纯化水混合均匀，得胶体金结合物稀释液；

15）LH包被液：将150mg猪的促黄体生成素单克隆α亚级抗体LHmAbCoating和质量浓度为1%的海藻糖溶液1ml，溶解在0.01M PBS缓冲液100ml中，混合均匀，得LH包被液；

16）IgG包被液：将羊抗鼠IgG抗体100mg和质量浓度为1%的海藻糖溶液1ml，溶解在0.01M PBS缓冲液100ml中，混合均匀，得IgG包被液；

上述各组分的量是用于5块6cm×30cm的PVC板，每块PVC板切为100条3mm×6cm的试纸条；

2）在底板上划膜

2A）将NC膜分别贴在5块PVC板上表面的中部，得底板；

2B）用XYZ3010喷金划膜仪，并按0.8μl/cm的量，以500mm/s的速度，将步骤16）的IgG包被液均匀地划在5块步骤2A）底板上的NC膜的上端作为质控线C、将步骤15）的LH包被液均匀地划在5块步骤2A）底板上的NC膜的下端作为检测线T，质控线C与检测线T相距6mm±1mm，质控线C距离NC膜上端8mm±1mm，检测线T距离NC膜下端7mm±1mm，然后放入干燥箱内，于温度为25℃、湿度≤30％下干燥18h，得划膜板；

3）金垫制备

3A）在100ml步骤11）的金溶液中加入1.2ml 医用级碳酸钾溶液、1.5mg LH单克隆抗体LHmb2，搅拌40min，滴加330ul步骤12）的封闭液，搅拌10min，于4℃、12000r/min的条件下离心40min，弃上清液，取余液5.3 ml，加入40ml 步骤14）的胶体金结合物稀释液，混匀，得45.3ml胶体金结合物稀释液的混合液；

3B）将步骤3A）的45.3ml胶体金结合物稀释液的混合液均匀铺在5块玻璃纤维素膜RB65上，每块玻璃纤维素膜RB65尺寸为6mm×30cm，然后放入干燥箱内，于温度为25℃、湿度≤30％下干燥18h，得金垫；

4）样本垫制备

4A）按30ml/张的量，将步骤13）的样本垫处理液均匀铺在5块玻璃纤维素膜SB06上，每块玻璃纤维素膜RB65尺寸为20mm×30cm，然后放入干燥箱内，于温度为25℃、湿度≤30％下干燥18h，得样本垫；

5）每一块贴板的制备

5A）将步骤3）的金垫贴于步骤2B）划膜板的NC膜右端，并使1mm的金垫左端搭在NC膜上；

5B）将步骤4）的样本垫贴于步骤5A）的金垫右端，并使样本垫左端完全搭在金垫上，样本垫右端贴于PVC板右端；

5C）将吸水垫贴于5B）的PVC板左端，并使1mm的吸水垫右端搭在NC膜左端；

6）将步骤5C）的每一块贴板切割成100条6cm×3mm的试纸条，装盒，得500条促黄体生成素LH检测试纸，每一条促黄体生成素LH检测试纸的侧视结构如图1。

实施例2

检测大白母猪排卵量的方法，包括下列步骤：

1）取样，利用采血针与抗凝血管从大白母猪颈脖静脉处抽取5毫升猪血，于阴凉处静置1小时，分离出血清；

2）检测，将一条实施例1的猪的促黄体生成素LH检测试纸插入步骤1）的血清中10秒，取出，于15分钟后观察该促黄体生成素LH检测试纸中的质控线C与检测线T是否显色：

3）检测结果如下：

促黄体生成素LH检测试纸和质控线C未显色、检测线T显色，表明本次检测结果无效；

4）当即再重复步骤1）、2），得到下列检测结果：

促黄体生成素LH检测试纸质控线C和检测线T都显色，用该促黄体生成素LH检测试纸上的显色与市购的促黄体生成素LH比色卡（如图2）进行下列对比；

41）促黄体生成素LH≦10mIU/ml,表明该大白母猪的促黄体生成素LH处于基础水平，卵细胞尚未成熟，不能配种，再重复检测促黄体生成素LH，直至发情结束，其促黄体生成素LH仍持续≦10mIU/ml,表明该猪不会排卵，淘汰。

实施例3

检测大白母猪排卵量的方法，包括下列步骤：

1）取样，利用采血针与抗凝血管从大白母猪颈脖静脉处抽取6毫升羊血，于阴凉处静置2小时，分离出血清；

2）检测，将一条实施例1的促黄体生成素LH检测试纸插入步骤1）的血清中5秒，取出，于18分钟后观察该促黄体生成素LH检测试纸中的质控线C与检测线T是否显色：

3）检测结果如下：

促黄体生成素LH检测试纸质控线C显色、检测线T未显色，表明该母猪的促黄体生成素LH水平低下，二天后重复步骤1）、2）进行检测，结果如下：

促黄体生成素LH为20mIU/ml，表明该大白母猪开始进入排卵期，之后每隔4小时重复步骤1）、2）进行一次检测，每天检测三次，第二天该大白母猪的促黄体生成素LH为40mIU/ml，表明该大白母猪的促黄体生成素LH高峰出现，距离排卵时间14---14.5小时；同时与促黄体生成素LH比色卡对比，按下列确定该母猪的排卵数量：

促黄体生成素LH为40 mIU/ml,排卵量≥8--10枚；

4）根据步骤3）的检测结果，进行自然配种，之后没有再发情，该大白母猪受孕，115天后产小猪10头。

实施例4

检测黑母猪排卵量的方法，包括下列步骤：

1）取样，利用采血针与抗凝血管从黑母猪颈脖静脉处抽取2毫升羊血，于阴凉处静置1.5小时，分离出血清；

2）检测，将一条实施例1的促黄体生成素LH检测试纸插入步骤1）的血清中，8秒，取出，于16分钟后观察该试纸中的质控线C与检测线T是否显色：

3）检测结果如下：

试纸质控线C和检测线T都显色，用该试纸上的显色与LH比色卡（如图2）进行下列对比；

促黄体生成素LH为15mIU/ml，表明该大白猪母猪开始进入排卵期，之后每隔4小时重复步骤1）、2）进行一次检测，每天检测三次，第二天该黑母猪的促黄体生成素LH为80mIU/ml，表明该黑母猪的促黄体生成素LH高峰出现，距离排卵时间12---14.5小时；同时由于该黑母猪的促黄体生成素LH为80 mIU/ml，排卵量≥11---12枚；

4）根据步骤3）的检测结果，进行自然配种，之后没有再发情，该黑母猪受孕，114天后产小猪11头。

实施例5

检测长白猪母猪排卵量的方法，包括下列步骤：

1）取样，收集长白猪母猪在上次小便后1小时再小便的尿液10ml；

2）检测，将一条实施例1的促黄体生成素LH检测试纸插入步骤1）的尿液中7秒，取出，于16分钟后观察该试纸中的质控线C与检测线T是否显色：

3）检测结果如下：

促黄体生成素LH检测试纸质控线C和检测线T都显色，用该促黄体生成素LH检测试纸上的显色与LH比色卡（如图2）进行下列对比；

促黄体生成素LH为20mIU/ml，表明该长白猪母猪开始进入排卵期，之后每隔4小时重复步骤1）、2）进行一次检测，每天检测三次，第二天该长白猪母猪的促黄体生成素LH为100 mIU/ml，表明该长白猪母猪的促黄体生成素LH高峰出现，距离排卵时间8小时；同时该长白猪母猪的促黄体生成素LH为100 mIU/ml，排卵量≥13---15枚；

4）根据步骤3）的检测结果，按常规进行人工授精，之后该长白猪母猪没有再发情，表明已受孕，115天后产小猪14头。

实施例6

检测猪排卵量的方法，包括下列步骤：

1）取样，收集杜洛克猪母猪在上次小便后2小时再小便的尿液8ml；

2）检测，将一条实施例1的促黄体生成素LH检测试纸插入步骤1）的尿液中7秒，取出，于17分钟后观察该试纸中的质控线C与检测线T是否显色：

3）检测结果如下：

促黄体生成素LH为20mIU/ml，表明该杜洛克猪母猪开始进入排卵期，之后每隔4小时重复步骤1）、2）进行一次检测，每天检测三次，第二天该杜洛克猪母猪的促黄体生成素LH为>100mIU/m，表明该杜洛克猪母羊的促黄体生成素LH高峰出现，距离排卵时间8小时；同时该杜洛克猪母猪的促黄体生成素LH为>100mIU/m，排卵量>15枚；

4）根据步骤3）的检测结果，按常规进行人工授精，之后该杜洛克猪母猪没有再发情，表明已受孕，115天后产小猪18头。

上述LH比色卡均为常规产品。

下面通过对比实验证明本发明的效果：

采用实施例3-6的方法，分别对120头母猪进行检测，其中：

大白猪的母猪30头作为第一组，采用与实施例3相同的方法进行检测、配种；

长白猪的母猪30头作为第二组，采用与实施例4相同的方法进行检测、配种；

杜洛克猪的母猪30头作为第三组，采用与实施例5相同的方法进行检测、配种；

混合猪30头作为第四组，大白猪、长白猪、杜洛克猪各10头，采用与实施例6相同的方法进行检测、配种；

检测结果如下：

第一组有29头受孕，1头返情，产仔300头，平均：10.3头仔猪/母猪；

第二组有30头受孕，0头返情，产仔320头，平均：10.6头仔猪/母猪；

第三组有30头受孕，0头返情，产仔330头，平均：11头仔猪/母猪；

第四组有27头受孕，3头返情，大白猪、长白猪、杜洛克猪各1头，共产仔324头，平均：12头仔猪/母猪。

对比例1

取30头大白猪的母猪，按常规进行自然配种，其中24头受孕，其余6头返情，配种成功率为80%，产仔192头，其中18头母猪共产仔160头，平均：8.8头仔猪/母猪，其余6头大白猪的母猪产仔只为32头，其中二头母猪各产仔6头，四头母猪各产仔5头，均不足7头，本该淘汰这6头母猪的，但因没有用本发明方法进行检测，所以浪费了时间，增加了饲养成本。

对比例2

取30头长白猪的母猪，按常规进行人工受精，其中23头受孕，其余7头返情，配种成功率为76.6%，共产仔186头，其中16头母猪共产仔144头，平均：9头仔猪/母猪，其余7头大白猪的母猪产仔只为42头，其中二头母猪各产仔6头，六头母猪各产仔5头，均不足7头，本该淘汰这7头母猪的，但因没有用本发明方法进行检测，所以浪费了时间，增加了饲养成本。

对比例3

取30头杜洛克猪的母猪，按常规进行人工受精，其中25头受孕，其余5头返情，产仔182头，其中有6头产仔不足7头，本该淘汰这6头母猪的，但因没有用本发明方法进行检测，所以浪费了时间，增加了饲养成本。

Claims

1.一种检测猪排卵量的方法，其特征在于包括下列步骤：

1）将1--10 ml发情母猪血于阴凉处静置1-2小时，分离出血清；或者收集母猪在上次小便后1-2小时再小便的尿液1-10ml；

2）将猪的促黄体生成素LH检测试纸插入步骤1）的血清或者尿液中5--10秒，取出，于15-18分钟后，观察该检测试纸中的质控线C与检测线T是否显色：

3）显色结果如下：

试纸质控线C未显色、检测线T显色，表明检测结果无效，需要重复检测；

试纸质控线C显色，检测线T未显色，表明母猪的促黄体生成素LH水平低下，需要隔日再检测；

试纸质控线C及检测线T都显色，用该显色与LH比色卡进行下列对比；

促黄体生成素LH≥40—60 mIU/ml，排卵量≥8--10枚；

促黄体生成素LH≥60—80 mIU/ml，排卵量≥11---12枚；

促黄体生成素LH≥80—100 mIU/ml，排卵量≥13---15枚；

促黄体生成素LH>100 mIU/ml，排卵量>15枚；

2.根据权利要求1所述的检测猪的配种时机的方法，其特征在于所述步骤2）猪的促黄体生成素LH检测试纸经过下列方法制备：

21）按下列制备各组分：

封闭液：将0.005g牛血清白蛋白溶解在300ul纯化水中，加入30ul 碳酸钾溶液，混合均匀，得330ul封闭液；

样本垫处理液：将0.605g三羧甲氨基甲烷、1.5g氯化钠完全溶解在100ml纯化水中，得样本垫处理液；

胶体金结合物稀释液：将0.605g三羧甲氨基甲烷，0.2g聚乙烯吡咯烷酮，5g蔗糖，0.9g氯化钠，0.5g牛血清白蛋白，3ml羊血清，0.15ml吐温20，与100ml纯化水混合均匀，得胶体金结合物稀释液；

LH包被液：将100-200mg猪的促黄体生成素单克隆α亚级抗体LHmAbCoating、质量浓度为1%的海藻糖溶液1ml溶解在0.01M PBS缓冲液100ml中，混合均匀，得LH包被液；

IgG包被液：将羊抗鼠IgG抗体100mg、质量浓度为1%的海藻糖溶液1ml溶解在0.01M PBS缓冲液100ml中，混合均匀，得IgG包被液；

22）在底板上划膜

22A）将NC膜贴在PVC板上表面的中部，得底板；

23）金垫制备

23A）在100ml步骤21）的金溶液中加入1.2ml 碳酸钾溶液、1.5-2mg LH单克隆抗体LHmb2，搅拌40min，滴加330ul封闭液，搅拌10min，于4℃、12000r/min的条件下离心40min，弃上清液，取余液5.3 ml，加入40ml 胶体金结合物稀释液混匀；

23B）将40ml胶体金结合物稀释液均匀铺在1080cm²玻璃纤维素膜上，然后放入干燥箱内，于温度为25℃±2℃、湿度≤30％下干燥18h±2h，得金垫；

24）样本垫制备

25）贴板