CN113272306A

CN113272306A - 化学化合物

Info

Publication number: CN113272306A
Application number: CN201980087712.2A
Authority: CN
Inventors: 杰森·D·斯皮克; 巴拉特·潘迪; 乔·B·佩拉莱斯; 伟明·范
Original assignee: Avista Pharma Solutions Inc
Current assignee: Avista Pharma Solutions Inc
Priority date: 2018-11-05
Filing date: 2019-11-04
Publication date: 2021-08-17
Also published as: CA3118488A1; US20200138811A1; US10744136B2; EP3877389A1; KR20210072125A; EP3877389A4; JP2022506682A; MX2021005334A; AU2019375412A1; BR112021008742A2; CL2021001177A1; WO2020096948A1

Abstract

本发明描述了新颖的化合物、或其药学上可接受的盐、包含它们的药物组合物及其医学用途。本发明的化合物具有作为Janus激酶抑制剂的活性，并且可用于治疗或控制瘙痒症，所述瘙痒症与过敏性皮炎、动物中的特应性皮炎和其中免疫抑制/免疫调节将是期望的其他紊乱和适应症相关。本文还描述了通过施用作为JAK 1抑制剂的本发明的化合物来治疗瘙痒症和特应性皮炎的方法。

Description

化学化合物

相关申请的交叉引用

本申请要求于2018年11月5日提交的美国临时专利申请第62/755,679号的权益，其全部内容据此通过引用并入本文。

发明领域

本发明描述了新颖的化合物、或其药学上可接受的盐、包含它们的药物组合物及其医学用途。本发明的化合物具有作为Janus激酶(Janus Kinase)(JAK)抑制剂的活性，并且可用于治疗或控制瘙痒症，所述瘙痒症与过敏性皮炎、或动物中的特应性皮炎和其中免疫抑制/免疫调节将是期望的其他紊乱和适应症(indication)相关。本文还描述了通过施用作为JAK抑制剂的本发明的化合物来治疗瘙痒症和特应性皮炎的方法。

背景

瘙痒症(Pruritus)被定义为触发痒(itch)的不愉快的感觉，即抓痒(scratch)的欲望。像疼痛那样，痒是身体的基本防御机制中的一种。痒的基本生物学功能是警示动物存在潜在有害的毒素或其他危险因素，诸如携带疾病的昆虫，并且刺激旨在消除这些危险因素的反射。痒可以急性地表现，就像去除跳蚤和其他寄生虫的反射那样。可选择地，像疼痛那样，慢性痒可以成为自我延续的(self-perpetuating)和自身病理性的。当外周神经和中枢神经被过度刺激时产生慢性痒，所述过度刺激导致瘙痒症介导的神经纤维的激活和增殖。致敏的神经纤维(sensitized nerve fiber)已经表现出更容易刺激瘙痒症。慢性痒不仅需要对症治疗，还需要彻底的诊断处理来确定潜在的原因，以及多元模式疗法(multimodal therapy)来管理隐藏的影响。

蛋白激酶是催化蛋白质中特定残基的磷酸化的酶的家族，宽泛地被分类为酪氨酸激酶和丝氨酸/苏氨酸激酶。不适当的激酶活性已经涉及到许多疾病中，所述不适当的激酶活性由突变、过度表达或不适合的调节、调节异常(dys-regulation)或去调节(de-regulation)以及生长因子或细胞因子的产生过度或产生不足引起，所述疾病包括但不限于癌症、心血管疾病、过敏症、哮喘和其他呼吸系统疾病、自身免疫性疾病、炎性疾病、骨病、代谢紊乱以及神经紊乱和神经退行性紊乱诸如阿尔茨海默病。不适当的激酶活性触发与细胞生长、细胞分化、存活、凋亡、有丝分裂、细胞周期控制和细胞运动性有关的多种生物细胞响应，这些响应与前述疾病和相关疾病有关。因此，蛋白激酶已经由于用于治疗性干预的靶标而作为重要的一类酶兴起。特别地，细胞蛋白酪氨酸激酶的JAK家族(JAK-1、JAK-2、JAK-3和Tyk-2)在细胞因子信号传导中起核心作用(Kisseleva等人,Gene,2002,285,1；Yamaoka等人,Genome Biology 2004,5,253)。在细胞因子与它们的受体结合时，细胞因子激活JAK，然后使细胞因子受体磷酸化，从而为信号传导分子，特别是信号转导和转录激活因子(signal transducer and activator of transcription)(STAT)家族的成员创建停泊位点(docking site)，这最终导致基因表达，从而刺激生物响应，诸如痒信号。JAK-STAT途径的激活还导致若干其他辅助生物活性(ancillary biologic activity)，这些辅助生物活性促成炎症和瘙痒症过程，这些过程促成动物中的急性过敏反应，但还可能加重临床体征并且促成慢性过敏。

对于控制包括哺乳动物、鸟类和鱼的动物中的特应性皮炎的安全且有效的剂存在相当大的需求。哺乳动物的实例包括但不限于人类、牛(cattle)、绵羊、山羊、美洲驼(llamas)、羊驼(alpacas)、猪、马、驴、狗、猫和其他家畜哺乳动物或家养哺乳动物(domestic mammal)。鸟类的实例包括火鸡、鸡、鸵鸟和其他家畜鸟类或家禽。目前治疗动物中的特应性皮炎的市场由皮质类固醇主导，皮质类固醇在动物中，特别是在伴侣动物诸如狗中引起令人烦恼的且不合意的副作用。抗组胺药也被使用，但有效性差。环孢菌素的制剂(ATOPICA^TM)目前正被销售用于狗和猫中的特应性皮炎，但价格昂贵并且具有缓慢的效力开始(onset of efficacy)。此外，ATOPICA^TM存在GI耐受性问题。WO 2010/020905公开了用于治疗瘙痒症的JAK抑制剂。

概述

本发明的化合物是对包括JAK 1的JAK具有效力的新颖的JAK抑制剂。这些化合物将是类固醇使用或已经在市场上的JAK抑制剂的替代物，并且提供了慢性瘙痒症和炎症的解决方案，这些慢性瘙痒症和炎症将以特应性皮炎持续存在，或者在去除过敏原或病原体(causative agent)之后缓慢消退，所述过敏原或病原体诸如在跳蚤过敏性皮炎中的跳蚤。

本发明的一种实施方案包括式I的化合物或其药用盐或兽医用盐(veterinarysalt)：

其中

X是N、CH或CR³；

Y是N、CH或CR³；

R¹是(CH₂)_nSO₂N(R²)₂、(CH₂)_mNHSO₂R²、(CH₂)_nCON(R²)₂或(CH₂)_mNHCOR²，

n是0、1、2、3或4；

m是0、1、2、3或4；

每个R²单独地是氢、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_2-6烯基、C_2-6卤代烯基、C_2-6炔基、C_2-6卤代炔基、未被取代的或被取代的环烷基、未被取代的或被取代的芳基、或未被取代的或被取代的杂芳基；或者

两个R²可以与它们所附接的氮结合以形成未被取代的或被取代的5至7元环，所述5至7元环可以包括选自N、O或S的一个或更多个另外的杂原子，并且可以包括一个或更多个不饱和度；

并且

每个R³单独地是C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_2-6烯基、C_2-6卤代烯基、C_2-6炔基、C_2-6卤代炔基、羟基、C_1-6烷氧基、C_1-6卤代烷氧基、C_1-6烷基磺酰基、C_1-6烷硫基、巯基、卤素、硝基、氰基、氨基、C_1-6烷基氨基、未被取代的或被取代的环烷基、未被取代的或被取代的芳基、或未被取代的或被取代的杂芳基，

当X是CR³并且Y是CR³时，每个CR³可以与它们所附接的原子结合，以形成稠合的5至7元环。

在一种实施方案中，X是CH。在一种实施方案中，Y是CH。在一种实施方案中，X和Y两者均是CH。

在一种实施方案中，X和Y中的一个或更多个是CR³，其中每个R³是卤素、氰基或C_1-6烷基。

在一种实施方案中，R¹是(CH₂)_nSO₂NHR²或(CH₂)_mNHSO₂R²。

在一种实施方案中，n是0或1。在一种实施方案中，m是0或1。

在一种实施方案中，R²是C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、未被取代的或被取代的环烷基、或未被取代的或被取代的芳基。在一种实施方案中，R²是C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、或未被取代的或被取代的环烷基。

在一种实施方案中，本发明包括式(I)的化合物，其中R¹是(CH₂)_nSO₂NHR²。在一种实施方案中，本发明包括式(I)的化合物，其中n是0。在一种实施方案中，本发明包括式(I)的化合物，其中n是1。在一种实施方案中，本发明包括式(I)的化合物，其中R²是C_1-6烷基。在一种实施方案中，本发明包括式(I)的化合物，其中R²是未被取代的或被取代的环烷基。在一种实施方案中，本发明包括式(I)的化合物，其中R²是C_1-6卤代烷基。在一种实施方案中，本发明包括式(I)的化合物，其中R²是未被取代的或被取代的芳基。在一种实施方案中，本发明包括式(I)的化合物，其中R²是被一个或更多个卤素、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_2-6烯基、C_2-6卤代烯基、C_2-6炔基、C_2-6卤代炔基、CN、NO₂、NH₂、N(C_1-6烷基)₂、OH或OC_1-6烷基取代的芳基。

在一种实施方案中，本发明包括式(I)的化合物，其中R¹是(CH₂)_mNHSO₂R²。在一种实施方案中，本发明包括式(I)的化合物，其中m是0。在一种实施方案中，本发明包括式(I)的化合物，其中m是1。在一种实施方案中，本发明包括式(I)的化合物，其中R²是C_1-6烷基。在一种实施方案中，本发明包括式(I)的化合物，其中R²是未被取代的或被取代的环烷基。在一种实施方案中，本发明包括式(I)的化合物，其中R²是卤代烷基。在一种实施方案中，本发明包括式(I)的化合物，其中R²是未被取代的或被取代的芳基。在一种实施方案中，本发明包括式(I)的化合物，其中R²是被一个或更多个卤素、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_2-6烯基、C_2-6卤代烯基、C_2-6炔基、C_2-6卤代炔基、CN、NO₂、NH₂、N(C_1-6烷基)₂、OH或OC_1-6烷基取代的芳基。

一种实施方案包括选自以下的化合物：

N-甲基-6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺；

N-乙基-6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺；

6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]-N-丙基-螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺；

N-异丙基-6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺；

N-环丙基-6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺；

6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]-N-(2,2,2-三氟乙基)螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺；

N-异丁基-6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺；

N-叔丁基-6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺；

N-环丁基-6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺；

N-环戊基-6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺；

N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]苯磺酰胺；

2-氯-N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]苯磺酰胺；

4-氯-N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]苯磺酰胺；

N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]-4-(三氟甲基)苯磺酰胺；

N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]甲烷磺酰胺；

N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]乙烷磺酰胺；

N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]丙烷-1-磺酰胺；

N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]丙烷-2-磺酰胺；

2-甲基-N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]丙烷-1-磺酰胺；

N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]环戊烷磺酰胺；

3,3,3-三氟-N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]丙烷-1-磺酰胺；

N-((6-(甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)螺[3.3]庚-2-基)甲基)甲烷磺酰胺；

N-((6-(甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)螺[3.3]庚-2-基)甲基)乙烷磺酰胺；

N-甲基-6-[甲基(9H-嘌呤-6-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺；

(对映异构体A)-N-甲基-6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺；

(对映异构体B)-N-甲基-6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺；

6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺；

N,N-二甲基-6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺；

N-甲基-N-(2-吡咯烷-1-基磺酰基螺[3.3]庚-6-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺；

或其兽医用盐或药学上可接受的盐。

在一种实施方案中，本发明包括一种组合物，所述组合物包含本发明的化合物和药学上可接受的载体或兽医学可接受的载体。

在一种实施方案中，本发明包括包含本发明的化合物和一种或更多种其他药用活性物质(pharmaceutically active substance)或兽医用活性物质(veterinary activesubstance)的组合。

在一种实施方案中，本发明包括一种用于治疗瘙痒症或特应性皮炎的方法，该方法包括向有相应需要的受试者施用有效量的本发明的化合物。在一种实施方案中，受试者是动物，包括哺乳动物、鸟类和鱼。哺乳动物的实例包括但不限于人类、牛、绵羊、山羊、美洲驼、羊驼、猪、马、驴、狗、猫和其他家畜哺乳动物、家养哺乳动物或伴侣哺乳动物。鸟类的实例包括火鸡、鸡、鸵鸟和其他家畜鸟类或家禽。在另一种实施方案中，受试者是哺乳动物。在另一种实施方案中，受试者是伴侣动物。

在一种实施方案中，本发明包括用于在医疗中使用的本发明的化合物。

在一种实施方案中，本发明包括用于制备用于治疗瘙痒症或特应性皮炎的药物的本发明的化合物。

在一种实施方案中，本发明包括本发明的化合物用于治疗瘙痒症或特应性皮炎的用途。

尽管没有具体地描述，但是一个或更多个方面和实施方案可以并入不同的实施方案中。即，所有方面和实施方案可以以任何方式或任何组合来组合。

详述

本发明的化合物是对包括JAK 1的JAK具有效力的新颖的JAK抑制剂。这些化合物将是类固醇使用和已经在市场上的JAK抑制剂的替代物，并且提供了慢性瘙痒症和炎症的解决方案，这些慢性瘙痒症和炎症将以特应性皮炎持续存在，或者在去除过敏原或病原体之后缓慢消退，所述过敏原或病原体诸如例如在跳蚤过敏性皮炎中的跳蚤。

定义

当提及本文公开的化合物时，以下术语具有以下含义，除非另有指明。以下定义旨在澄清但不限制所定义的术语。如果本文使用的特定术语没有被具体地定义，则这样的术语不应当被认为是不明确的。相反，术语在它们被接受的含义内使用。

如本文中使用的，“烷基”指的是具有从1个至20个碳原子、优选地1个-8个碳原子、优选地1个-6个碳原子的一价饱和脂族烃基团。烃链可以是直链或支链的。说明性的烷基基团包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基和叔丁基。类似地，“烯基”基团指的是具有存在于链中的一个或更多个双键的烃基基团(alkyl group)，并且“炔基”基团指的是具有存在于链中的一个或更多个三键的烃基基团。

如本文中使用的，“芳基”指的是侧接的或稠合的碳环芳族环体系，诸如苯基、萘基、四氢萘基、二氢化茚(indane)或联苯基。

如本文中使用的，“环烷基”指的是包含从3个至6个环原子的不饱和的或部分饱和的烃环。说明性的环烷基基团包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基，以及其部分饱和的形式，诸如环己烯基和环己二烯基。

如本文中使用的，“卤素(halogen)”或“卤代(halo)”指的是卤素。在一些实施方案中，卤素优选地是Br、Cl或F。

如本文中使用的，“卤代烷基”、“卤代烯基”和“卤代炔基”指的是其中至少一个氢原子被卤素取代的、具有从1个至20个碳原子、优选地1个-8个碳原子、优选地1个-6个碳原子的各自相应的烃基基团，其包括但不限于全卤代基团(perhalo group)，其中所有氢原子被卤素原子代替。链可以是直链或支链的。说明性的卤代烷基基团包括三氟甲基、三氯甲基、三氟乙基、三氟丙基、三氟丁基和五氟乙基。类似地，“卤代烯基”基团指的是具有存在于链中的一个或更多个双键的卤代烃基基团，并且“卤代烯基”基团指的是具有存在于链中的一个或更多个三键的卤代烃基基团。

术语“杂芳基”或“杂芳族”指的是具有选自碳和至少一个(典型地1个-4个，更典型地1个或2个)杂原子(例如氧、氮或硫)的5个至14个环原子的芳族环基团。它们包括单环和多环，其中单环的杂芳族环与一个或更多个其他碳环芳族环或杂芳族环稠合。单环的杂芳基基团的实例包括呋喃基(例如2-呋喃基、3-呋喃基)、咪唑基(例如N-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、5-咪唑基)、异噁唑基(例如3-异噁唑基、4-异噁唑基、5-异噁唑基)、噁二唑基(例如2-噁二唑基、5-噁二唑基)、噁唑基(例如2-噁唑基、4-噁唑基、5-噁唑基)、吡唑基(例如3-吡唑基、4-吡唑基)、吡咯基(例如1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基)、吡啶基(例如2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基)、嘧啶基(例如2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基)、哒嗪基(例如3-哒嗪基)、噻唑基(例如2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基)、三唑基(例如2-三唑基、5-三唑基)、四唑基(例如四唑基)和噻吩基(例如2-噻吩基、3-噻吩基)。单环的六元含氮杂芳基基团的实例包括嘧啶基、吡啶基和哒嗪基。多环的芳族杂芳基基团的实例包括咔唑基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、苯并三唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、异喹啉基、吲哚基、异吲哚基、吖啶基或苯并异噁唑基。

如本文中使用的，“任选地被取代的”指的是对否则将存在于取代基上的氢原子的取代。当讨论环体系时，任选的取代通常是用1个、2个或3个取代基代替通常存在的氢。然而，当提及直链部分和支链部分时，取代基的数目可以更多，在氢通常存在的任何地方发生。取代基可以是相同的或不同的。说明性的取代基包括硝基、-NR'R”、氰基、-NR'COR”'、烷基、烯基、-C(O)、-SO₂R”'、-NR'SO₂R”'、-SO₂NR'R”、-CONR'R”、-CONHC₆H₅、羟基、烷氧基、烷基磺酰基、卤代烷基、卤代烯基、卤代烷氧基、巯基(-SH)、烷硫基、卤素、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，正如各自在本领域中理解的，并且其中R'和R”是相同的或不同的，并且各自表示氢或烷基；或者当R'和R”各自附接至氮原子时，它们可以形成包含从4个至6个环原子的饱和的或不饱和的杂环，并且其中R”'是烷基或卤代烷基。

如本文中使用的，短语兽医用盐或兽医学上可接受的盐、或者药用盐或药学上可接受的盐指的是保留其生物学性质并且是无毒的或不以其他方式对于兽医用途或药学用途是不合意的、本文公开的化合物的任何盐。这样的盐可以源自本领域已知的多种有机抗衡离子和无机抗衡离子。这样的盐包括与诸如以下的有机酸或无机酸形成的酸加成盐：盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、氨基磺酸、乙酸、三氟乙酸、三氯乙酸、丙酸、己酸、环戊基丙酸、乙醇酸、戊二酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、山梨酸、抗坏血酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、苦味酸、肉桂酸、扁桃酸、酞酸、月桂酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、1,2-乙烷-二磺酸、2-羟基乙烷磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑酸、樟脑磺酸、4-甲基双环[2.2.2]-辛-2-烯-1-甲酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、月桂基硫酸、葡萄糖酸、苯甲酸、谷氨酸、羟基萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、环己基氨基磺酸、奎宁酸、粘康酸和类似的酸。

仅以实例的方式，盐还包括无毒的有机酸或无机酸的盐，诸如卤化物例如氯化物和溴化物、硫酸盐、磷酸盐、氨基磺酸盐、硝酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、三氯乙酸盐、丙酸盐、己酸盐、环戊基丙酸盐、乙醇酸盐、戊二酸盐、丙酮酸盐、乳酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、山梨酸盐、抗坏血酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸盐、苦味酸盐、肉桂酸盐、扁桃酸盐、酞酸盐、月桂酸盐、甲烷磺酸盐(甲磺酸盐(mesylate))、乙烷磺酸盐、1,2-乙烷-二磺酸盐、2-羟基乙烷磺酸盐、苯磺酸盐(benzene sulfonate)(苯磺酸盐(besylate))、4-氯苯磺酸盐、2-萘磺酸盐、4-甲苯磺酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、4-甲基双环[2.2.2]-辛-2-烯-1-甲酸盐、葡庚糖酸盐、3-苯基丙酸盐、三甲基乙酸盐、叔丁基乙酸盐、月桂基硫酸盐、葡萄糖酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、羟基萘甲酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、环己基氨基磺酸盐、奎宁酸盐、粘康酸盐和类似物。

可以被用于形成碱加成盐的无机碱的实例包括但不限于金属氢氧化物，诸如氢氧化锂、氢氧化钠和氢氧化钾；金属氨化物(metal amide)，诸如氨基锂和氨基钠；金属碳酸盐，诸如碳酸锂、碳酸钠和碳酸钾；以及铵碱，诸如氢氧化铵和碳酸铵。

可以被用于形成碱加成盐的有机碱的实例包括但不限于金属醇盐，诸如醇锂、醇钠和醇钾，包括甲醇锂、甲醇钠、甲醇钾、乙醇锂、乙醇钠、乙醇钾和叔丁醇钾；季铵氢氧化物，诸如氢氧化胆碱；以及胺，包括但不限于脂族胺(即烷基胺、烯基胺、炔基胺和脂环族胺)、杂环胺、芳基胺、杂芳基胺、碱性氨基酸、氨基糖和聚胺。

根据本发明的实施方案，碱可以是季铵氢氧化物，其中季铵离子的烷基基团中的一个或更多个任选地被一个或更多个合适的取代基取代。优选地，至少一个烷基基团被一个或更多个羟基基团取代。根据本发明可以被使用的季铵氢氧化物的非限制性实例包括氢氧化胆碱、氢氧化三甲基乙基铵、氢氧化四甲基铵，并且优选地是氢氧化胆碱。根据本发明的实施方案，烷基胺碱可以是被取代的或未被取代的。根据本发明可以被使用的未被取代的烷基胺碱的非限制性实例包括甲胺、乙胺、二乙胺和三乙胺。被取代的烷基胺碱优选地是被一个或更多个羟基基团取代的，并且优选地被一个至三个羟基基团取代。根据本发明可以被使用的被取代的烷基胺碱的非限制性实例包括2-(二乙基氨基)乙醇、N,N-二甲基乙醇胺(丹醇(deanol))、氨丁三醇、乙醇胺和二乙醇胺(diolamine)。

在某些情况中，所描述的取代基可以有助于光学异构化和/或立体异构化。将具有相同的分子式但在性质或其原子的结合顺序方面或在其原子在空间中的排列方面不同的化合物称为“异构体”。其原子在空间中的排列方面不同的异构体被称为“立体异构体”。将不是彼此镜像的立体异构体称为“非对映异构体”，并且将是彼此不可重叠的镜像的立体异构体称为“对映异构体”。当化合物具有不对称中心时，例如当其被键合至四种不同的基团时，成对的对映异构体是可能的。对映异构体可以由它的不对称中心的绝对构型来表征并且根据Cahn和Prelog规则被指定为(R)或(S)(Cahn等人,1966,Angew.Chem.78:413-447,Angew.Chem.,Int.Ed.Engl.5:385-414(勘误表:Angew.Chem.,Int.Ed.Engl.5:511)；Prelog和Helmchen,1982,Angew.Chem.94:614-631,Angew.Chem.Internat.Ed.Eng.21:567-583；Mata和Lobo,1993,Tetrahedron:Asymmetry 4:657-668)，或可以通过其中分子旋转偏振光的平面的方式来表征并且被指定为右旋的或左旋的(即，分别地指定为(+)-异构体或(-)-异构体)。手性化合物可以作为单独的对映异构体或作为其混合物存在。包含相等比例的对映异构体的混合物被称为“外消旋混合物”。

在某些实施方案中，本文公开的化合物可以具有一个或更多个不对称中心；并且因此，这样的化合物可以作为单独的(R)-或(S)-对映异构体或作为其混合物产生。除非另有指示，例如通过指定在式的任何位置处的立体化学，否则在本说明书和权利要求书中的特定化合物的描述或命名意图包括单独的对映异构体及其混合物(外消旋的或以其他方式的)两者。用于确定立体化学和分离立体异构体的方法是本领域熟知的。

在某些实施方案中，本文公开的化合物是“立体化学纯的”。立体化学纯的化合物具有将被本领域技术人员认为是“纯的”立体化学纯度水平。当然，此纯度水平可以小于100％。在某些实施方案中，“立体化学纯的”指定大体上不含、即至少约85％或更多不含替代异构体的化合物。在特定实施方案中，化合物是至少约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％、约99.5％或约99.9％不含其他异构体。

如本文中使用的，术语“受试者”和“患者”在本文可互换地使用。术语“受试者(subject)”和“受试者(subjects)”指的是人类。在一种实施方案中，受试者是伴侣动物，诸如狗或猫。在另外的实施方案中，受试者是具有农业重要性的动物，诸如绵羊、母牛、马、山羊、鱼、猪或家禽(诸如鸡、火鸡、鸭或鹅)。在另一种实施方案中，受试者是灵长类动物诸如猴，例如食蟹猴(cynomolgous monkey)、黑猩猩和人类或者非灵长类动物。

此外，由式(I)代表的化合物的药学上可接受的前药也包括在本发明中。药学上可接受的前药指的是具有这样的基团的化合物，该基团可以通过溶剂分解或在生理条件下被转化为氨基基团、羟基基团、羧基基团或类似基团。形成前药的基团的实例包括如在Prog.Med.,5,2157-2161(1985)或“Pharmaceutical Research and Development”(Hirokawa Publishing Company,1990),第7卷,Drug Design,163-198中描述的那些。术语前药在整个说明书中被用于描述在施用至患者时提供活性化合物的化合物的任何药学上可接受的形式。药学上可接受的前药指的是在宿主中被代谢，例如被水解或被氧化以形成本发明的化合物的化合物。前药的典型实例包括在活性化合物的官能部分上具有生物不稳定的保护基团(biologically labile protecting group)的化合物。前药包括可以被氧化、还原、胺化(aminate)、去氨基化(deaminate)、羟基化、去羟基化、水解、脱水(dehydrolyze)、烷基化、去烷基化、酰化、去酰化、磷酸化、去磷酸化以产生活性化合物的化合物。

本发明包括所有药学上可接受的同位素标记的本发明的化合物，其中一个或更多个原子被具有相同原子序数但原子质量或质量数与自然界中常见的原子质量或质量数不同的原子代替。适合于包含在本发明的化合物中的同位素的实例包括氢的同位素诸如²H和³H，碳诸如¹¹C、¹³C和^MC，氯诸如³⁶Cl，氟诸如¹⁸F，碘诸如¹²³I和¹²⁵I，氮诸如¹³N和¹⁵N，氧诸如¹⁵O、¹⁷O和¹⁸O，磷诸如³²P以及硫诸如³⁵S。本发明的某些同位素标记的化合物，诸如并入放射性同位素的那些化合物，可以在药物或底物组织分布研究中是有用的。放射性同位素氚即³H，以及碳-14即¹⁴C，考虑到其并入的容易性和检测的现成工具，对于该目的是特别有用的。用较重的同位素诸如氘即²H取代可以提供某些治疗优点，并且因此在一些情况下可以是优选的，这些治疗优点由较大的代谢稳定性产生，例如增加的体内半衰期或降低的剂量要求。用发射正电子的同位素诸如¹¹C、¹⁸F、¹⁵O和¹³N进行取代，可以在正电子发射断层扫描成像术(Positron Emission Topography)(PET)研究中用于检查底物受体占用(substratereceptor occupancy)。同位素标记的本发明的化合物通常可以这样制备：通过本领域技术人员已知的常规方法，或通过类似于在所附实施例和制备中描述的工艺的工艺，使用恰当的同位素标记的试剂来代替先前使用的非标记的试剂。

组合物及施用方法

在本文公开的方法中使用的式(I)的化合物可以在某些实施方案中使用兽医用组合物或药物组合物来施用，所述兽医用组合物或药物组合物包含至少一种式(I)的化合物，其在适当的情况下呈盐形式，单独使用或以与一种或更多种相容的并且兽医学可接受的载体或药学上可接受的载体诸如稀释剂或佐剂或与另一种剂组合的形式使用。提供了包含式(I)的衍生物或其盐和可接受的赋形剂、载体或稀释剂的组合物。组合物还可以呈多种形式，所述形式包括但不限于口服制剂、注射制剂以及局部制剂、皮肤制剂或皮下制剂。

组合物可以呈适合于口服用途的形式，例如作为膳食补充剂(dietarysupplement)、糖锭、锭剂、可咀嚼物(chewables)、片剂、硬胶囊或软胶囊、乳液、水性或油性悬浮液、水性或油性溶液、可分散的粉末或颗粒剂、糖浆或酏剂。意图用于口服用途的组合物可以根据本领域中用于制造兽医用组合物或药物组合物的任何已知的方法来制备，并且这样的组合物可以包含选自由甜味剂、苦味剂(bittering agent)、调味剂(flavoringagent)、着色剂以及防腐剂组成的组的一种或更多种剂，以便提供精致且可口的制品。

锭剂是包含一种或更多种活性成分的固体组合物，其意图通过在口腔中的被动温育在口腔中缓慢地溶解或崩解，或者通过吮吸或咀嚼主动地溶解或崩解。它们可以被用于全身作用，如果药物通过口腔内膜(buccal lining)或食管内膜被吸收或者被吞咽的话。特别地，软锭剂可以被咀嚼或被允许在口中缓慢地溶解。这些剂型具有被调味的优点并且因此易于施用至人类患者和动物患者两者；具有易于改变且可以是患者特异性的配方；可以向口腔和消化系统递送准确量的活性成分；并且允许药物与口腔或食管腔保持接触持续延长的时间段。

片剂可以包含活性成分，该活性成分与适合于制造片剂的无毒的药学上可接受的赋形剂掺混。这些赋形剂可以是，例如，惰性稀释剂，诸如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；成粒剂和崩解剂，例如，玉米淀粉或海藻酸；结合剂，例如淀粉、明胶或阿拉伯胶；以及润滑剂，例如，硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。片剂可以无包衣或它们可以通过已知的技术被包衣以延迟在胃肠道中的崩解和吸收并因此在较长的时间段内提供持续作用。

用于口服用途的制剂可以是硬明胶胶囊，其中活性成分与例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土的惰性固体稀释剂混合。胶囊也可以是软明胶胶囊，其中活性成分与水或可混溶的溶剂诸如丙二醇、PEG和乙醇混合，或者与油介质例如花生油(peanut oil)、液体石蜡或橄榄油混合。

组合物还可以呈水包油或油包水的乳液的形式。油相可以是植物油，例如橄榄油或花生油(arachis oil)、或矿物油例如液体石蜡，或这些的混合物。合适的乳化剂可以是天然存在的磷脂，例如大豆卵磷脂；和衍生自脂肪酸和己糖醇酸酐的酯或偏酯(partialester)，例如失水山梨醇单油酸酯；以及所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯。乳液还可以包含甜味剂、苦味剂、调味剂和防腐剂。

在制剂的一种实施方案中，组合物呈微乳液的形式。微乳液非常适合作为液体载体媒介物。微乳液是包括水相、油相、表面活性剂和助表面活性剂的四元体系。它们是半透明的且各向同性的液体。微乳液包含水相的微滴在油相中的稳定分散体，或者相反地包含油相的微滴在水相中的稳定分散体。这些微滴的尺寸小于200nm(对于乳液为1000nm至100,000nm)。界面膜包含交替的表面活性(SA)分子和助表面活性(co-surface-active)(Co-SA)分子，其通过降低界面张力允许微乳液被自发地形成。在油相的一种实施方案中，油相可以由矿物油或植物油形成，由不饱和的聚糖基化的甘油酯(polyglycosylated glyceride)形成或由甘油三酯形成，或者可选择地由这样的化合物的混合物形成。在油相的一种实施方案中，油相包含甘油三酯；在油相的另一种实施方案中，甘油三酯是中链甘油三酯，例如C₈-C₁₀辛酸甘油三酯/癸酸甘油三酯。在另一种实施方案中，油相将代表％v/v范围，该范围选自由约2％至约15％；约7％至约10％；和约8％至约9％v/v的微乳液组成的组。水相包括例如水或二醇衍生物，诸如丙二醇、二醇醚、聚乙二醇或甘油。在二醇衍生物的一种实施方案中，二醇选自由以下组成的组：丙二醇、二乙二醇单乙醚、二丙二醇单乙醚及其混合物。通常，水相将代表在微乳液中从约1％至约4％v/v的比例。用于微乳液的表面活性剂包括二乙二醇单乙醚、二丙二醇单甲醚、聚二醇化的C₈-C₁₀甘油酯或聚甘油-6二油酸酯。除了这些表面活性剂，助表面活性剂包括短链醇，诸如乙醇和丙醇。一些化合物是上文讨论的三种组分例如水相、表面活性剂和助表面活性剂所共有的。然而，对于相同制剂的每种组分，使用不同的化合物完全在技术人员的技能水平之内。在一种实施方案中，对于表面活性剂/助表面活性剂的量，助表面活性剂与表面活性剂的比率将是从约1/7至约1/2。

在另一种实施方案中，对于助表面活性剂的量，在微乳液中将存在从约25％至约75％v/v的表面活性剂和从约10％至约55％v/v的助表面活性剂。

油性悬浮液可以通过将活性成分悬浮于植物油例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油中或者悬浮于矿物油诸如液体石蜡中来配制。油性悬浮液可以包含增稠剂，例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可以添加甜味剂诸如蔗糖、糖精或阿斯巴甜、苦味剂和调味剂，以提供可口的口服制品。这些组合物可以通过添加抗氧化剂诸如抗坏血酸或其他已知的防腐剂来保存。

水性悬浮液可以包含与适合于制造水性悬浮液的赋形剂掺混的活性材料。这样的赋形剂是悬浮剂，例如，羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯树胶；分散剂或润湿剂可以是天然存在的磷脂例如卵磷脂、或环氧烷烃与脂肪酸的缩合产物例如聚氧乙烯硬脂酸酯、或环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物例如十七基环氧乙烷鲸蜡醇(heptadecaethyleneoxycetanol)、或环氧乙烷与衍生自脂肪酸的偏酯和己糖醇的缩合产物例如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯、或环氧乙烷与衍生自脂肪酸的偏酯和己糖醇酐的缩合产物例如聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯。水性悬浮液还可以包含一种或更多种防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯、一种或更多种着色剂、一种或更多种调味剂和一种或更多种甜味剂和/或苦味剂诸如上文陈述的那些。

适合于通过添加水来制备水性悬浮液的可分散的粉末和颗粒剂提供与分散剂或润湿剂、悬浮剂和一种或更多种防腐剂掺混的活性成分。合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂由上文已经提及的那些示例说明。还可以存在另外的赋形剂，例如甜味剂、苦味剂、调味剂和着色剂。

可以用例如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖的甜味剂来配制糖浆和酏剂。这样的制剂还可以包含缓和剂、防腐剂、调味剂和着色剂。

组合物可以呈无菌可注射的水性或油性悬浮液的形式。该悬浮液可以使用上文已经提及的那些合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂根据已知技术来配制。无菌可注射制品也可以是在无毒的、胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射的溶液或悬浮液，例如作为在1,3-丁二醇中的溶液。在可以被采用的可接受的媒介物和溶剂中的是水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。还可以使用共溶剂，诸如乙醇、丙二醇或聚乙二醇。可以使用防腐剂，诸如苯酚或苄醇。

此外，无菌的不挥发性油(fixed oil)常规地作为溶剂或悬浮介质被利用。为了此目的，可以利用任何无刺激性的不挥发性油，包括合成的单酸甘油酯或甘油二酯。此外，脂肪酸诸如油酸在制备血管注射剂中找到用途。

局部制剂、皮肤制剂和皮下制剂可以包括乳液、霜剂、软膏剂、凝胶或糊剂。

可以被用于本发明的有机溶剂包括但不限于：柠檬酸乙酰三丁基酯、脂肪酸酯诸如二甲酯、己二酸二异丁基酯、丙酮、乙腈、苄醇、二乙二醇丁醚(butyl diglycol)、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺、二丙二醇正丁基醚、乙醇、异丙醇、甲醇、乙二醇单乙基醚、乙二醇单甲基醚、单甲基乙酰胺、二丙二醇单甲基醚、液体聚氧乙二醇、丙二醇、2-吡咯烷酮(例如N-甲基吡咯烷酮)、二乙二醇单乙基醚、乙二醇和邻苯二甲酸二乙基酯，或这些溶剂中的至少两种的混合物。

作为媒介物或稀释剂，本发明的组合物可以包含植物油，诸如但不限于大豆油、花生油(groundnut oil)、蓖麻油、玉米油、棉籽油、橄榄油、葡萄籽油、向日葵油等；矿物油，诸如但不限于矿脂、石蜡、硅酮等；脂族烃或环烃，或可选择地，例如中链(诸如C₈-C₁₂)甘油三酯。

剂型可以包含从约0.5mg至约5g的活性剂。

在本发明的一种实施方案中，活性剂以约0.05％至10％重量/体积的浓度存在于制剂中。

式(I)的化合物可以原样使用，或者以它们的制品或制剂的形式作为组合使用。

根据本发明的式(I)的化合物可以与一种或更多种具有相同的活性范围(sphereof activity)的剂组合，例如以增加活性，或者与具有另一活性范围的物质组合，例如以扩展活性范围。已经发现式(I)的化合物具有作为JAK抑制剂的活性。因此，本发明的化合物还可以与抑制JAK活性的其他剂组合。这样的JAK抑制剂可以包括小分子、核酸例如JAK反义核酸、氨基酸、肽、碳水化合物和抗JAK抗体。优选地，这样的剂与药学上可接受的递送媒介物或载体组合。JAK抗体的实例包括例如多克隆抗体、单克隆抗体、人源化抗体、抗独特型抗体、嵌合抗体或单链抗体，Fab、F(ab’)₂和Fab表达文库片段，scFV分子及其表位结合片段。根据标准技术制备针对JAK基因或针对抑制其表达的mRNA的反义寡核苷酸(参见，例如，Agrawal等人,Methods in Molecular Biology:Protocols for Oligonucleotides andAnalogs,第20卷,(1993))。对于抗JAK抗体，优选的剂量通常是0.2mg/kg体重至20mg/kg体重。通常，部分人源化的抗体和完全人源化的抗体在人体内具有比其他抗体长的半衰期。因此，较低的剂量和较低频率的施用是可能的。诸如脂质化(lipidation)的改性可以被用于使抗体稳定化以及增强吸收和组织渗透。用于抗体的脂质化的方法描述于Cruikshank等人,J.Acquired Immune Deficiency Syndromes Hum.Retrovirol.14:193,(1997)中。

根据本发明的式(I)的化合物可以与调节哺乳动物免疫系统的一种或更多种剂或与抗炎剂组合。这些剂可以包括括但不限于环孢菌素A，例如

或

雷帕霉素、FK-506(他克莫司)、来氟米特、脱氧精胍菌素(deoxyspergualin)、麦考酚酯(mycophenolate)例如

硫唑嘌呤例如

达利珠单抗(daclizumab)例如

OKT3例如

AtGam、阿司匹林、对乙酰氨基酚、布洛芬、萘普生、吡罗昔康和抗炎类固醇例如泼尼松龙或地塞米松。根据本领域技术人员已知的标准药物实践，这些剂可以作为相同剂型或单独剂型的一部分，经由相同或不同的施用途径，并且以相同或不同的施用日程安排来施用。

用于递送至人类或其他哺乳动物的、包含式(I)的化合物的药物制品优选地呈单位剂型，其中该制品被细分为包含适量活性组分的单位剂量。单位剂型可以是包含离散量制品的包装制品，诸如包装的片剂、胶囊和在小瓶或安瓿中的粉末。此外，单位剂型可以是胶囊、片剂或锭剂本身，或者其可以是呈包装形式的适当数目的这些剂型中的任一种。

根据特定应用和活性组分的效能(potency)，单位剂量制品中活性组分的量可以从约0.1mg至约1000mg变化或调节。如果需要，组合物还可以包含其他相容的治疗剂。

在用于治疗或减轻人类或其他哺乳动物中的与过敏性皮炎和特应性皮炎相关的瘙痒症的治疗用途中，在治疗方法中使用的化合物以每间隔时间约0.1mg/kg至约100mg/kg、每间隔时间约0.1mg/kg至约50.0mg/kg、每间隔时间约0.1mg/kg至约10.0mg/kg、每间隔时间约0.1mg/kg至约5.0mg/kg、每间隔时间约0.1mg/kg至约2.5mg/kg、每间隔时间约0.1mg/kg至约2.0mg/kg、每间隔时间约0.1mg/kg至约1.0mg/kg、每间隔时间约0.4mg/kg至约1.0mg/kg或每间隔时间约0.4mg/kg至约0.6mg/kg的初始剂量被施用。优选的时间间隔可以是每天、每周、每月、每季度、每半年或每年。剂量可以取决于患者的要求而变化，例如，被治疗的人类或哺乳动物的大小、被治疗的状况的严重程度、施用途径和使用的化合物的效能。对用于特定情况的适合的剂量和施用途径的确定在技术人员的技能范围内。通常，治疗将以较小的剂量开始，该较小的剂量小于化合物的最佳剂量，可以以小的增量增加，直到达到在特定状况情形下的最佳效果。为方便起见，如果需要，可以将每日总剂量分开并且在一日期间按份施用。

在治疗用途中，式(I)的化合物可用于制备用于治疗以下的方法的药物：狼疮、多发性硬化、类风湿性关节炎、银屑病、I型糖尿病和来自糖尿病的并发症、癌症、哮喘、特应性皮炎、自身免疫性甲状腺紊乱、溃疡性结肠炎、克罗恩病、阿尔茨海默病、白血病、骨关节炎、瘙痒症的控制、慢性呼吸系统疾病和其中免疫抑制/免疫调节将是期望的其他适应症。

特别地，式(I)的化合物可以在以下的领域中使用：兽医学、畜牧业，并且特别地，温血脊椎动物，包括伴侣动物诸如狗和猫、马、家畜和家禽。

与至少一种其他兽医用剂结合的本发明的化合物、其立体异构体及其兽医学可接受的盐或药学上可接受的盐以及包含本发明的化合物的组合物在控制伴侣动物特别是狗和猫、家畜和鸟类的瘙痒症和特应性皮炎中具有特别的价值。

本发明的任何化合物，或本发明的化合物和任选地至少一种另外的兽医用剂的合适组合，可以直接地施用至动物和/或通过将其施加至动物居住在其中的局部环境(诸如垫料、围栏及类似物)间接地施用至动物。直接施用包括使受试者动物的皮肤、毛皮(fur)或羽毛与化合物接触，或者通过将化合物喂料或注射到动物中。

如本文描述的，式(I)的化合物、其立体异构体及其兽医学可接受的盐以及与至少一种另外的兽医用剂的组合被认为对于治疗和控制与瘙痒症和特应性皮炎相关的多种症状具有价值。

本发明还涉及将本发明的化合物单独地或与至少一种另外的兽医用剂以及任选地兽医学可接受的赋形剂、稀释剂或载体组合地施用至健康动物的方法，所述方法包括施加至所述动物以减轻或消除与瘙痒症和特应性皮炎相关的症状。

本发明明确地涵盖表1中提供的那些化合物。包含治疗上可接受量的任何这些化合物的组合物也在本发明的范围内。组合物还可以包含兽医学可接受的赋形剂、稀释剂、载体或其混合物。这样的组合物可以施用至有相应需要的动物，以治疗或控制瘙痒症和特应性皮炎。如本文所描述的，组合物还可以包含另外的兽医用剂。

表1

实验程序

实施例

以下实施例提供了对用于制备本发明的化合物的工艺条件的更详细的描述。然而，应当理解，如本文中充分描述的和如权利要求中所叙述的本发明不意图受以下制备方案或制备模式的细节所限制。

合成

通常，本发明的化合物可以通过对于本领域技术人员明显的任何方法制备、分离或获得。示例性的制备方法由以下方案说明。

方案1(实施例1作为说明)：

实施例1

化合物1：N-甲基-6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺

中间体1：6-(甲基氨基)螺[3.3]庚-2-醇

向1升烧瓶中加入N-(2-羟基螺[3.3]庚-6-基)氨基甲酸叔丁酯(16.0g，70mmol)和甲苯(200mL)。在2小时内滴加Red-Al(116mL，420mmol，70％在甲苯中)，并且将内部温度控制在低于35℃。在加入之后，将混合物缓慢加热至130℃，并且在该温度搅拌持续约4小时。然后将其冷却至<5℃。混合物用饱和Na₂SO₄溶液(～200mL)逐滴猝灭。将内部温度控制在低于20℃。将固体过滤，并且将水溶液用DCM(3X200mL)萃取。将合并的溶液经MgSO₄干燥。在过滤和真空浓缩之后，其给出粘性油(9.0g，75％)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 1.69-1.88(m,4H)2.09-2.37(m,8H)2.97-3.05(m,0.5H)3.23-3.32(m,8H)3.36-3.40(m,1H)3.42-3.48(m,1H)3.57-3.62(m,4H)3.99-4.07(m,0.5H)。LCMS(M/Z):142(M+H)。

中间体2：6-[甲基-[7-(对甲苯基磺酰基)吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]氨基]螺[3.3]庚-2-醇

向6-(甲基氨基)螺[3.3]庚-2-醇(8.46g，～60mmol)在t-BuOH(140mL)中的溶液加入DIPEA(32mL，180mmol)和4-氯-7-(对甲苯基磺酰基)吡咯并[2,3-d]嘧啶(18.4g，60mmol)。将混合物在110℃加热持续1天。真空去除溶剂。残余物通过ISCO柱(300g，用EtOAc和庚烷洗脱)纯化。在浓缩之后，其给出灰白色固体(17.0g，79.4％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.82(ddd,J＝15.03,10.93,7.81Hz,2H)2.06-2.24(m,5H)2.29-2.40(m,4H)3.10-3.14(m,3H)3.18-3.27(m,1H)3.90-3.99(m,1H)4.88(d,J＝6.25Hz,1H)4.97(br t,J＝8.59Hz,1H)6.85(d,J＝4.10Hz,1H)7.39(m,J＝8.00Hz,2H)7.57(d,J＝4.10Hz,1H)7.93(m,J＝8.20Hz,2H)8.19(s,1H)；LCMS(M/Z):413(M+H)。

中间体3：[6-[甲基-[7-(对甲苯基磺酰基)吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]氨基]螺[3.3]庚-2-基]4-甲基苯磺酸酯

向1升圆底烧瓶中加入6-[甲基-[7-(对甲苯基磺酰基)吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]氨基]螺[3.3]庚-2-醇(～22.3g，54.1mmol)、DCM(200mL)、DMAP(1.31g，10.8mmol)、Et₃N(15.3ml，108.2mmol)和TsCl(11.9g，62.2mmol)。在室温进行反应持续约20小时，由LCMS监测。然后用水(100mL)处理混合物。水溶液用DCM(100mL X 2)萃取。将合并的有机溶液经Na₂SO₄干燥。在过滤和浓缩之后，其给出浅棕色固体(38.3g)。粗制材料通过ISCO(330g柱)纯化，并且用EtOAc和庚烷洗脱。其给出淡黄色固体(29.4g，96％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm)1.20(s,1H)1.99-2.25(m,7H)2.32(s,4H)2.40(s,4H)3.09(s,3H)4.69(t,J＝7.22Hz,1H)4.92(s,1H)5.72(s,1H)6.84(d,J＝4.10Hz,1H)7.36-7.47(m,5H)7.56(d,J＝4.30Hz,1H)7.75(d,J＝8.40Hz,2H)7.92(d,J＝8.40Hz,2H)8.17(s,1H)；LCMS(M/Z):567(M+H)。

中间体4：S-[6-[甲基-[7-(对甲苯基磺酰基)吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]氨基]螺[3.3]庚-2-基]硫代乙酸酯(ethanethioate)

向含有化合物6-[甲基-[7-(对甲苯基磺酰基)吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]氨基]螺[3.3]庚-2-基]4-甲基苯磺酸酯(29.4g，～51.9mmol)的1升圆底烧瓶中加入DMSO(200mL)和硫代乙酸钾(～33.1g，289mmol)。反应在60℃加热持续20小时，由LCMS监测。然后，将其用5％NaHCO₃(200mL)处理并且用EtOAc(3X200mL)萃取。将合并的有机溶液经Na₂SO₄干燥。在过滤和浓缩之后，其给出浅褐色固体(25.3g，～100％)。LCMS(M/Z):471(M+H)。将其不经进一步纯化直接用于下一步骤。

中间体5：6-[甲基-[7-(对甲苯基磺酰基)吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酸

向配备有温度计、滴液漏斗(additional funnel)和氮气适配器的1升三颈烧瓶中加入S-[6-[甲基-[7-(对甲苯基磺酰基)吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]氨基]螺[3.3]庚-2-基]硫代乙酸酯(～9.8g，～20mmol)和甲酸(80mL)。然后在1.5小时内加入H₂O₂(30％在水中，～25mL)。根据需要将其用冰水浴冷却，以将温度保持在低于35℃。在加入之后，将反应混合物冷却至室温，并且在室温搅拌持续30min。在冷却至0℃-5℃之后，反应混合物用逐份的NaHSO₃和Na₂S₂O₅(33％在水中，～100mL)猝灭，将温度保持在低于35℃。在0℃-5℃加入NaOH的水溶液(33％)，直到达到pH＝4-5(内部温度控制在＜35℃)。将所得到的白色固体过滤并且用泵干燥过夜。其给出棕褐色固体(～16.6g，包含盐，60％纯度)。¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 2.21-2.39(m，4H)2.40(s，3H)2.42-2.50(m，3H)2.51-2.57(m，1H)3.22-3.24(s，3H)3.51(quin，J＝8.36Hz，1H)4.92-5.01(m，1H)6.85(d，J＝4.15Hz，1H)7.37(d，J＝8.54Hz，2H)7.56(d，J＝4.15Hz，1H)7.95-8.00(m，2H)8.20(s，1H)8.42(s，2H，HCO₂Na)；LCMS(M/Z)：477(M+H)。

N-甲基-6-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺，

化合物1.将中间体5，6-[甲基-[7-(对甲苯基磺酰基)吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酸(～476mg，粗品，包含盐，～0.66mmol)悬浮在DCM(4mL)中。然后加入SOCl₂(4mL)，接着加入4滴DMF。然后将反应混合物加热至回流持续4h(加热块温度在55℃-60℃)。然后将反应混合物冷却至室温。将干燥的甲苯加入到溶液中。真空去除溶剂。残余物溶解在THF(2mL)中，并且加入过量的CH₃NH₂(2M在THF中，4mL)。将反应混合物搅拌过夜。然后将反应混合物用水(～10mL)处理并且用EtOAc(3x20mL)萃取。在去除溶剂之后，残余物通过C18 ISCO柱(50g)进一步纯化，并且用MeOH和水洗脱。在去除溶剂之后，其给出白色固体(～274mg，～85％)。

向该磺酰胺(274mg，～0.54mmol)在异丙醇(4mL)和水(3mL)中的溶液添加LiOH.H₂O(419mg，10mmol)。混合物在50℃-55℃搅拌持续4小时，并且在室温搅拌过夜。在去除溶剂之后，将残余物溶解在水(～2mL)和MeOH(～1mL)中。其通过C18 ISCO柱(50g)纯化，并且用MeOH和水洗脱。在浓缩之后，其给出白色固体(128mg，71％)。¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 2.27-2.42(m，4H)2.42-2.61(m，4H)2.68(s，3H)3.27(s，3H)3.86(quin，J＝8.25Hz，1H)5.05(quin，J＝8.54Hz，1H)6.61(d，J＝3.51Hz，1H)7.07(d，J＝3.51Hz，1H)8.07(s，1H)；LCMS(M/Z)：336(M+H)。

通过以类似的方式进行，还制备了以下化合物。

实施例2：

化合物2：N-乙基-6-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺

N-乙基-6-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺2：¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 1.15(t，J＝7.22Hz，3H)2.26-2.60(m，9H)3.07(q，J＝7.22Hz，2H)3.82(quin，J＝8.30Hz，1H)4.99-5.13(m，1H)6.61(d，J＝3.51Hz，1H)7.08(d，J＝3.71Hz，1H)8.07(s，1H)；LCMS(M/Z)：350(M+H)。

实施例3：

化合物3：6-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]-N-丙基-螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺

6-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]-N-丙基-螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺3：¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 0.93(t，J＝7.32Hz，3H)1.53(sxt，J＝7.26Hz，2H)2.26-2.57(m，8H)2.98(t，J＝7.13Hz，2H)3.75-3.89(m，1H)4.96-5.12(m，1H)6.61(d，J＝3.71Hz，1H)7.08(d，J＝3.71Hz，1H)8.07(s，1H)；LCMS(M/Z)：364(M+H)。

实施例4：

化合物4：N-异丙基-6-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺

N-异丙基-6-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺4：¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 1.17(d，J＝6.64Hz，6H)2.23-2.60(m，8H)3.51(dt，J＝13.18，6.49Hz，1H)3.72-3.87(m，1H)5.00-5.13(m，1H)6.61(d，J＝3.71Hz，1H)7.08(d，J＝3.51Hz，1H)8.07(s，1H)；LCMS(M/Z)：364(M+H)。

实施例5：

化合物5：N-环丙基-6-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺

N-环丙基-6-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺5：¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 0.52-0.72(m，4H)2.25-2.65(m，10H)3.93(quin，J＝8.30Hz，1H)4.98-5.13(m，1H)6.62(d，J＝3.71Hz，1H)7.08(d，J＝3.51Hz，1H)8.07(s，1H)；LCMS(M/Z)：362(M+H)。

实施例6：

化合物6：6-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]-N-(2，2，2-三氟乙基)螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺

6-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]-N-(2，2，2-三氟乙基)螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺6：¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 2.24-2.61(m，8H)3.72(q，J＝9.18Hz，2H)3.84(quin，J＝8.25Hz，1H)4.98-5.13(m，1H)6.61(d，J＝3.71Hz，1H)7.08(d，J＝3.71Hz，1H)8.07(s，1H)；LCMS(M/Z)：404(M+H)。

实施例7：

化合物7：N-异丁基-6-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺

N-异丁基-6-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺7：¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 0.92(d，J＝6.83Hz，6H)1.71(dt，J＝13.47，6.74Hz，1H)2.28-2.57(m，8H)2.83(d，J＝6.83Hz，2H)3.81(t，J＝8.30Hz，1H)4.98-5.15(m，1H)6.61(d，J＝3.51Hz，1H)7.08(d，J＝3.71Hz，1H)8.07(s，1H)；LCMS(M/Z)：378(M+H)。

实施例8：

化合物8：N-叔丁基-6-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺

N-叔丁基-6-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺8：¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 1.34(s，9H)2.31-2.43(m，4H)2.47-2.61(m，4H)3.80(quin，J＝8.29Hz，1H)5.04-5.13(m，1H)6.65(d，J＝3.66Hz，1H)7.11(d，J＝3.66Hz，1H)8.11(s，1H)；LCMS(M/Z)：378(M+H)。

实施例9：

化合物9：N-环丁基-6-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺

N-环丁基-6-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺9：¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 1.53-1.72(m，2H)1.99(ddd，J＝10.92，9.21，1.83Hz，2H)2.28-2.47(m，8H)2.48-2.56(m，3H)2.86(s，1H)3.30-3.31(m，3H)3.73(t，J＝8.29Hz，1H)3.84(dd，J＝8.78，7.81Hz，1H)4.91-5.12(m，1H)6.65(d，J＝3.66Hz，1H)7.11(d，J＝3.66Hz，1H)8.11(s，1H)；LCMS(M/Z)：376(M+H)。

实施例10：

化合物10：N-环戊基-6-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺

N-环戊基-6-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺10：¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 1.46-1.64(m，5H)1.68-1.77(m，2H)1.90-2.00(m，2H)2.33-2.44(m，4H)2.47-2.61(m，4H)3.66-3.73(m，1H)3.84(quin，J＝8.29Hz，1H)5.04-5.13(m，1H)6.65(d，J＝3.66Hz，1H)7.11(d，J＝3.66Hz，1H)8.11(s，1H)；LCMS(M/Z)：390(M+H)。

实施例11：

化合物11：N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]苯磺酰胺

方案2(实施例11作为说明)：

中间体1：N-[6-(甲基氨基)螺[3.3]庚-2-基]氨基甲酸叔丁酯

向N-(2-氧代螺[3.3]庚-6-基)氨基甲酸叔丁酯(2.08g，9.2mmol)在THF(50mL)中的溶液加入MeNH₂(13mL，26mmol)。混合物在约-20℃搅拌持续3小时，并且然后在室温搅拌经过周末。在冷却至约-20℃并且搅拌持续2小时之后，加入NaBH(OAc)₃(6.32g，30mmol)。将混合物搅拌持续1h，并且用10％NaHCO₃(30mL)处理。然后将其用10％NaOH处理直至pH＝～11。将其用DCM(3X40mL)萃取。将合并的有机溶液经Na₂SO₄干燥。在过滤和浓缩之后，其给出作为无色油的产物(～2.40g，100％)。LCMS(M/Z):241(M+H)。将材料不经纯化直接用于下一步骤。

中间体2：N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]氨基甲酸叔丁酯

向微波小瓶中加入N-[6-(甲基氨基)螺[3.3]庚-2-基]氨基甲酸叔丁酯(0.96g，4.0mmol，粗品)、4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(0.61g，4.0mmol)、DIPEA(1.03mL，8.0mmol)和CH₃CN(6mL)。混合物在微波(75W和250psi)中于100℃加热持续1h。将反应冷却至室温并且允许静置。将固体(产物)过滤并且用CH₃CN洗涤。将滤液浓缩并且经真空干燥。合并的固体是灰白色固体(～0.66g，46％)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 1.41(s,9H)1.89-2.08(m,2H)2.20-2.37(m,4H)2.38-2.57(m,2H)3.27(s,3H)3.94(br.s.,1H)4.97-5.15(m,1H)6.60(d,J＝3.71Hz,1H)7.07(d,J＝3.71Hz,1H)8.07(s,1H)；LCMS(M/Z):358(M+H)。

中间体3：N2-甲基-N2-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)螺[3.3]庚烷-2,6-二胺

向含有N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]氨基甲酸叔丁酯(～18mg，0.05mmol)的40-mL小瓶中加入MeOH(0.5mL)，然后加入在二氧六环(1mL)中的4M HCl。将混合物在RT搅拌持续1h。在浓缩之后，其给出作为白色固体的产物(～13mg，～89％)。LCMS(M/Z):258(M+H)。混合物不经纯化直接使用。

N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]苯磺酰胺11

向含有N2-甲基-N2-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)螺[3.3]庚烷-2,6-二胺(～13mg，0.051mmol)的40-mL小瓶中加入DMF(1.5mL)、DMAP(～6.1mg，0.050mmol)、DIPEA(～87μl，0.50mmol)和PhSO₂Cl(～13mg在0.13mL DMF中，0.075mmol)。将混合物在室温搅拌持续30分钟，由LCMS监测。在另外的30min之后，混合物用水(0.2mL)处理，真空去除DIPEA，并且剩余的DMF溶液在用MeOH和水洗脱的C18 ISCO柱(50g)上进行色谱分离。在浓缩和冻干之后，其给出作为白色固体的产物(～11mg，52％)。¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δpm 1.75-1.95(m，2H)2.01-2.41(m，6H)3.22(s，3H)3.66(t，J＝8.00Hz，1H)4.91-5.04(m，1H)6.56(d，J＝3.51Hz，1H)7.05(d，J＝3.51Hz，1H)7.50-7.68(m，3H)7.80-7.88(m，2H)8.04(s，1H)；LCMS(M/Z)：398(M+H)。

通过以类似的方式进行，制备了以下化合物。

实施例12：

化合物12：2-氯-N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]苯磺酰胺

2-氯-N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]苯磺酰胺12：¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 1.94-2.09(m，3H)2.12-2.37(m，5H)3.21(s，3H)3.65(quin，J＝8.20Hz，1H)4.90-5.03(m，1H)6.56(d，J＝3.51Hz，1H)7.05(d，J＝3.51Hz，1H)7.42-7.53(m，1H)7.58(d，J＝3.71Hz，2H)8.00-8.09(m，2H)；LCMS(M/Z)：432(M+H)。

实施例13：

化合物13：4-氯-N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]苯磺酰胺

4-氯-N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]苯磺酰胺13：¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δpm 1.73-1.96(m，2H)2.04-2.28(m，4H)2.28-2.42(m，2H)3.22(s，3H)3.67(quin，J＝8.15Hz，1H)4.91-5.06(m，1H)6.56(d，J＝3.71Hz，1H)7.06(d，J＝3.51Hz，1H)7.57(d，J＝8.59Hz，2H)7.81(d，J＝8.59Hz，2H)8.04(s，1H)；LCMS(M/Z)：432(M+H)。

实施例14：

化合物14：N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]-4-(三氟甲基)苯磺酰胺

N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]-4-(三氟甲基)苯磺酰胺14：¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 1.79-1.97(m，2H)2.07-2.29(m，4H)2.29-2.42(m，2H)3.22(s，3H)3.72(quin，J＝8.15Hz，1H)4.92-5.04(m，1H)6.57(d，J＝3.71HZ，1H)7.05(d，J＝3.51Hz，1H)7.88(d，J＝8.20Hz，2H)7.99-8.07(m，3H)；LCMS(M/Z)：466(M+H)。

实施例15：

化合物15：N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]甲烷磺酰胺

方案3(实施例15作为说明)：

中间体1：N-[2-[甲基-[7-(对甲苯基磺酰基)吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]氨基]螺[3.3]庚-6-基]氨基甲酸叔丁酯

向微波小瓶中加入N-[6-(甲基氨基)螺[3.3]庚-2-基]氨基甲酸叔丁酯(0.48g，2.0mmol，粗品)、4-氯-7-(对甲苯基磺酰基)吡咯并[2,3-d]嘧啶(0.61g，2.0mmol)、DIPEA(0.5mL)和CH₃CN(5mL)。混合物在微波(75W和250psi)中于100℃加热持续1小时。然后将其冷却至室温。在去除溶剂之后，将其通过二氧化硅ISCO柱纯化，并且用DCM和MeOH洗脱。在浓缩之后，其给出灰白色固体(～0.64g，62.7％)。LCMS(M/Z):512(M+H)。

中间体2：N2-甲基-N2-[7-(对甲苯基磺酰基)吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]螺[3.3]庚烷-2,6-二胺

向含有N-[2-[甲基-[7-(对甲苯基磺酰基)吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]氨基]螺[3.3]庚-6-基]氨基甲酸叔丁酯(～1.24g，2.2mmol)的40-mL小瓶中加入MeOH(1mL)，然后加入在二氧六环(4mL)中的4M HCl。将混合物在室温搅拌持续1小时。在浓缩之后，其给出作为淡黄色固体的产物(1.12g，～100％)。LCMS(M/Z):412(M+H)。混合物不经纯化直接使用。

中间体3：N-[2-[甲基-[7-(对甲苯基磺酰基)吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]氨基]螺[3.3]庚-6-基]甲烷磺酰胺

向含有N2-甲基-N2-[7-(对甲苯基磺酰基)吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]螺[3.3]庚烷-2,6-二胺(～20mg，0.05mmol)的40-mL小瓶中加入DCM(1.5mL)、DMAP(～6.1mg，0.05mmol)、DIPEA(～87μl，0.05mmol)和MeSO₂Cl(2滴)。将混合物在室温搅拌持续2小时。在去除溶剂之后，粗制材料(～20mg，～100％)被直接用于下一步骤。LCMS(M/Z):490(M+H)。

N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]甲烷苯磺酰胺15

向该磺酰胺(～20mg，～0.05mmol)在异丙醇(1mL)和水(1mL)中的溶液添加LiOH.H₂O(42mg，1mmol)。混合物在50℃-55℃搅拌持续2小时，并且在室温搅拌过夜。在去除溶剂之后，将其通过C18 ISCO柱(50g)纯化并且用MeOH和水洗脱。在浓缩之后，其给出白色固体(1.5mg，9.0％)。¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 1.20(d，J＝6.83Hz，1H)2.00-2.15(m，2H)2.20-2.52(m，5H)2.55-2.67(m，1H)2.87(s，3H)3.75-3.86(m，1H)4.99-5.15(m，1H)6.61(d，J＝3.71Hz，1H)7.08(d，J＝3.71Hz，1H)8.07(s，1H)；LCMS(M/Z)：336(M+H)。

通过以类似的方式进行，制备了以下化合物。

实施例16：

化合物16：N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]乙烷磺酰胺

N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]乙烷磺酰胺16：¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δpm 1.29(t，J＝7.42Hz，3H)2.01-2.15(m，2H)2.23-2.48(m，5H)2.53-2.66(m，1H)2.97(q，J＝7.42Hz，2H)3.22-3.28(m，3H)3.73-3.82(m，1H)5.02-5.11(m，1H)6.61(d，J＝3.51Hz，1H)7.08(d，J＝3.51Hz，1H)8.07(s，1H)；LCMS(M/Z)：350(M+H)。

实施例17：

化合物17：N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]丙烷-1-磺酰胺

N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]丙烷-1-磺酰胺17：¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δpm 1.04(t，J＝7.42Hz，3H)1.72-1.82(m，2H)2.01-2.15(m，2H)2.23-2.48(m，5H)2.56-2.63(m，1H)2.91-2.97(m，2H)3.22-3.27(m，3H)3.73-3.82(m，1H)5.02-5.12(m，1H)6.61(d，J＝3.71Hz，1H)7.08(d，J＝3.71Hz，1H)8.07(s，1H)；LCMS(M/Z)：364(M+H)。

实施例18：

化合物18：N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]丙烷-2-磺酰胺

N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]丙烷-2-磺酰胺18：¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δpm 1.22-1.36(m，6H)2.08-2.20(m，2H)2.26-2.49(m，5H)2.54-2.72(m，1H)3.04(s，1H)3.12(quin，J＝6.83Hz，1H)3.34-3.47(m，1H)3.71-3.87(m，1H)5.10(ddd，J＝9.45，7.75，1.83Hz，1H)6.64(d，J＝3.69Hz，1H)7.11(d，J＝3.42Hz，1H)8.10(s，1H)；LCMS(M/Z)：364(M+H)。

实施例19：

化合物19：2-甲基-N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]丙烷-1-磺酰胺

2-甲基-N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]丙烷-1-磺酰胺19：¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 1.11(dd，J＝6.83，0.73Hz，6H)2.06-2.24(m，3H)2.26-2.42(m，4H)2.45-2.51(m，1H)2.63(ddd，J＝10.98，7.07，5.61Hz，1H)2.89(d，J＝6.34Hz，2H)3.30-3.31(m，3H)3.77-3.85(m，1H)5.06-5.14(m，1H)6.64(d，J＝3.66Hz，1H)7.11(d，J＝3.42Hz，1H)8.10(s，1H)；LCMS(M/Z)：378(M+H)。

实施例20：

化合物20：N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]环戊烷磺酰胺

N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]环戊烷磺酰胺20：¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 1.59-1.73(m，2H)1.73-1.84(m，2H)1.88-2.05(m，4H)2.05-2.21(m，3H)2.27-2.42(m，4H)2.44-2.50(m，1H)2.55-2.71(m，2H)3.27-3.31(m，3H)3.34-3.40(m，1H)3.40-3.51(m，1H)3.79-3.87(m，1H)5.05-5.15(m，1H)6.61-6.67(m，1H)7.11(d，J＝3.66Hz，1H)8.08-8.12(m，1H)；LCMS(M/Z)：390(M+H)。

实施例21：

化合物21：3，3，3-三氟-N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]丙烷-1-磺酰胺

3，3，3-三氟-N-[2-[甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚-6-基]丙烷-1-磺酰胺21：¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 2.04-2.18(m，2H)2.27-2.44(m，4H)2.47-2.52(m，1H)2.59-2.71(m，3H)3.17-3.28(m，2H)3.30-3.31(m，3H)3.81-3.89(m，1H)5.06-5.15(m，1H)6.64(d，J＝3.66Hz，1H)7.11(d，J＝3.42Hz，1H)8.10(s，1H)；LCMS(M/Z)：418(M+H)。

实施例22：

化合物22：N-((6-(甲基(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基)螺[3.3]庚-2-基)甲基)甲烷磺酰胺

方案4(实施例22作为说明)：

中间体1：4-氯-7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

将4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(5.00g，32.6mmol)在DMA(40mL)中的溶液以调节过量气体形成的速率插管添加(cannulate)到NaH(1.56g，39.1mmol，60％在矿物油中)在DMA(40mL)中的冷却的(0℃)悬浮液中。在插管添加完成之后，反应在冰浴中搅拌持续30分钟，然后滴加SEMCl(6.92mL，39.1mmol)在DMA(20mL)中的溶液。在滴加完成之后，将反应从冰浴中移除并且被允许在室温搅拌持续1h。将反应缓慢倒入水(100mL)中，并且混合物用3X150mL EtOAc萃取。合并的有机部分用1X100mL饱和NaCl水溶液洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤，并且真空浓缩。所得的残余物在硅胶上进行色谱分离(330g Isco柱，0％至25％EtOAc在庚烷中，经35.4min.)，以给出8.23g(89％)作为无色油的4-氯-7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ＝8.66(s,1H),7.85(d,J＝3.7Hz,1H),6.69(d,J＝3.7Hz,1H),5.62(s,2H),3.52-3.46(m,2H),0.82-0.75(m,2H),-0.12--0.16(m,9H)。LC/MS RT＝1.49min.,284.2[M+H]⁺。

中间体2：6-(甲基氨基)螺[3.3]庚-2-醇

在25分钟内，向在配备有回流冷凝器、N₂管线、隔膜(septum)和热电偶套管的0.25L 3颈圆底烧瓶中的(6-羟基螺[3.3]庚-2-基)氨基甲酸叔丁酯(2.50g，11.0mmol)在甲苯(26mL)中的冷却的(13℃)悬浮液中滴加REDAl(19.0mL，68.4mmol，3.60摩尔浓度)在甲苯中的溶液，同时保持内部温度低于30℃。在添加完成之后，将反应加热至回流持续1h，然后将其冷却至2℃。反应在缓慢加入饱和Na₂SO₄水溶液(40mL)的情况下被猝灭。所得的混合物在布氏漏斗上过滤，并且固体用10mL的DCM冲洗。分离有机层，并且用4X20mL的DCM萃取水层。合并的有机部分用MgSO₄干燥，过滤并且真空浓缩，以给出1.08g(70％)作为无色油的6-(甲基氨基)螺[3.3]庚-2-醇。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ＝4.08(quin,J＝7.4Hz,1H),3.10-2.98(m,1H),2.43-2.34(m,1H),2.31-2.12(m,6H),1.95-1.84(m,2H),1.77(td,J＝8.4,10.9Hz,2H)。LC/MS RT＝1.49min.,284.2[M+H]⁺。

中间体3：6-(甲基(7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)螺[3.3]庚-2-醇

将4-氯-7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(2.17g，7.65mmol)、6-(甲基氨基)螺[3.3]庚-2-醇(1.08g，7.65mmol)和EtN(i-Pr)₂(4.00mL，22.9mmol)在正丁醇(15mL)中的混合物加热至110℃持续18h。将溶液冷却至室温，真空浓缩，并且所得的残余物在硅胶上进行色谱分离(120g Isco柱，0％至100％EtOAc在庚烷中，经36min.，然后100％EtOAc持续10min.)，以给出1.30g(44％)作为棕褐色固体的6-(甲基(7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)螺[3.3]庚-2-醇。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ＝8.13(s,1H),7.29(d,J＝3.7Hz,1H),6.61(d,J＝3.7Hz,1H),5.47(s,2H),5.16-5.05(m,1H),4.90(d,J＝6.4Hz,1H),4.03-3.93(m,1H),3.48-3.42(m,2H),3.18(s,3H),2.44-2.36(m,1H),2.26-2.16(m,4H),2.16-2.08(m,1H),1.91-1.79(m,2H),0.82-0.75(m,2H),0.08-0.14(m,9H)。LC/MS RT＝0.90min.,389.2[M+H]⁺。

中间体4：6-(甲基(7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)螺[3.3]庚-2-基4-甲基苯磺酸酯

向6-(甲基(7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)螺[3.3]庚-2-醇(1.30g，3.35mmol)、DMAP(82.0mg，0.669mmol)和NEt₃(1.50mL，10.7mmol)在DCM(17mL)中的溶液加入TsCl(1.08g，5.69mmol)。反应在室温搅拌持续16h，然后将反应倒入水(15mL)中。将有机层分离并且水层用3X10mL的EtOAc萃取。合并的有机层用1X10mL饱和NaHCO₃水溶液、1X10mL饱和NaCl水溶液洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤并且真空浓缩。所得的残余物在硅胶上进行色谱分离(40g Isco柱，0％至75％EtOAc在庚烷中，经19min.)以给出1.70g(94％)作为棕色油的6-(甲基(7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)螺[3.3]庚-2-基4-甲基苯磺酸酯。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ＝8.12(s,1H),7.76(d,J＝8.4Hz,2H),7.46(d,J＝8.2Hz,2H),7.28(d,J＝3.7Hz,1H),6.60(d,J＝3.7Hz,1H),5.46(s,2H),5.04(t,J＝8.1Hz,1H),4.77-4.66(m,1H),3.48-3.41(m,2H),3.14(s,3H),2.45-2.39(m,4H),2.29-2.09(m,6H),2.05(dd,J＝7.5,12.0Hz,1H),0.81-0.75(m,2H),-0.10--0.14(m,9H)。LC/MS RT＝1.55min.,543.2[M+H]⁺。

中间体5：6-(甲基(7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)螺[3.3]庚烷-2-腈

将6-(甲基(7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)螺[3.3]庚-2-基4-甲基苯磺酸酯(0.300g，0.553mmol)和KCN(108mg，1.66mmol)的混合物用无水DMSO(2mL)稀释，并且将反应加热至90℃持续27h。允许反应冷却至室温，倒入水(10mL)中，并且用4X5mL的EtOAc萃取。合并的有机部分用1X3mL水、1X3mL饱和NaCl水溶液洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤，并且真空浓缩。所得的残余物在硅胶上进行色谱分离(24g Isco柱，0％至100％EtOAc在庚烷中，经15min.)以给出115mg(52％)作为棕褐色固体的6-(甲基(7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)螺[3.3]庚烷-2-腈。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ＝8.14(s,1H),7.30(d,J＝3.7Hz,1H),6.63(d,J＝3.7Hz,1H),5.47(s,2H),5.12-5.01(m,1H),3.48-3.42(m,2H),3.24(t,J＝8.4Hz,1H),3.18(s,3H),2.57-2.50(m,1H),2.44-2.21(m,7H),0.81-0.76(m,2H),-0.12(s,9H)。LC/MS RT＝1.09min.,398.3[M+H]⁺。

中间体6：N-(6-(氨基甲基)螺[3.3]庚-2-基)-N-甲基-7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺

向6-(甲基(7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)螺[3.3]庚烷-2-腈(115mg，0.289mmol)在THF(2.4mL)中的冷却的(0℃)溶液中加入LAH(27mg，0.72mmol)。反应在0℃搅拌2h，然后用Na₂SO₄·10H₂O(350mg，分批加入)猝灭。继续搅拌，直到没有观察到气体析出，并且混合物用DCM(10mL)稀释，并且在布氏漏斗上通过硅藻土过滤。将母液真空浓缩，以给出115mg作为无色油的N-(6-(氨基甲基)螺[3.3]庚-2-基)-N-甲基-7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺，其不经进一步纯化被使用。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ＝8.13(s,1H),7.19(d,J＝3.7Hz,1H),6.67(d,J＝3.7Hz,1H),5.53(s,2H),5.04(quin,J＝8.5Hz,1H),3.54-3.48(m,2H),3.27(s,3H),2.63(d,J＝6.8Hz,2H),2.48-2.40(m,1H),2.33-2.24(m,4H),2.15-2.06(m,1H),1.74(dd,J＝6.8,12.1Hz,1H),1.61-1.53(m,2H),0.87-0.80(m,2H),-0.08--0.12(m,9H)。LC/MSRT＝0.61min.,402.2[M+H]⁺。

中间体7：N-((6-(甲基(7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)螺[3.3]庚-2-基)甲基)甲烷磺酰胺

向N-(6-(氨基甲基)螺[3.3]庚-2-基)-N-甲基-7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(57mg，0.14mmol)和NEt₃(59mL，0.43mmol)在DCM(1.4mL)中的溶液中加入甲烷磺酰氯(13mL，0.17mmol)。将反应搅拌持续2.75h，然后将其真空浓缩，并且残余物在硅胶上进行色谱分离(12g Isco柱，0％至100％EtOAc在庚烷中，经16min)以给出38mg(56％)作为白色固体的N-((6-(甲基(7-(2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)螺[3.3]庚-2-基)甲基)甲烷磺酰胺。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ＝8.14(s,1H),7.21(d,J＝3.7Hz,1H),6.69(d,J＝3.7Hz,1H),5.53(s,2H),5.06-4.95(m,1H),3.55-3.48(m,2H),3.27(s,3H),3.05(d,J＝7.2Hz,2H),2.92-2.87(m,3H),2.49-2.36(m,2H),2.35-2.25(m,4H),2.11(ddd,J＝3.5,8.0,11.5Hz,1H),1.95-1.78(m,2H),0.87-0.81(m,2H),-0.07--0.11(m,9H)。LC/MS RT＝1.08min.,480.2[M+H]⁺。

N-((6-(甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)螺[3.3]庚-2-基)甲基)甲烷磺酰胺22

向N-((6-(甲基(7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)螺[3.3]庚-2-基)甲基)甲烷磺酰胺(38mg，0.079mmol)在DMF(1mL)中的溶液中加入乙二胺(11mL，0.16mmol)和TBAF(0.16mL，0.16mmol，1摩尔浓度)在THF中的溶液。将反应加热至60℃持续24h，然后加入在THF中的另外的TBAF(0.32mL，0.32mmol，1摩尔浓度)。将反应的温度升高至90℃并且搅拌另外的72h，然后真空浓缩溶液，并且所得的残余物在C18反相柱上进行色谱分离(43g C18 Isco柱，100％水1分钟，然后在15min内0％至100％MeOH在水中)以给出18mg(64％)作为白色固体的N-((6-(甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)螺[3.3]庚-2-基)甲基)甲烷磺酰胺22。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ＝8.07(s,1H),7.07(d,J＝3.7Hz,1H),6.60(d,J＝3.7Hz,1H),5.05(quin,J＝8.6Hz,1H),3.27(s,3H),3.05(d,J＝7.2Hz,2H),2.90(s,3H),2.48-2.36(m,2H),2.34-2.24(m,4H),2.11(ddd,J＝3.4,8.1,11.6Hz,1H),1.92(dd,J＝7.4,10.9Hz,1H),1.82(dd,J＝7.7,11.8Hz,1H)。LC/MSRT＝0.32min.,350.2[M+H]⁺

通过以类似的方式进行，制备了以下化合物。

实施例23：

化合物23：N-((6-(甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)螺[3.3]庚-2-基)甲基)乙烷磺酰胺

N-((6-(甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)螺[3.3]庚-2-基)甲基)乙烷磺酰胺23

¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ＝8.07(s,1H),7.07(d,J＝3.7Hz,1H),6.60(d,J＝3.5Hz,1H),5.05(quin,J＝8.6Hz,1H),3.27(s,3H),3.06-2.98(m,4H),2.47-2.36(m,2H),2.35-2.24(m,4H),2.11(ddd,J＝3.7,8.1,11.5Hz,1H),1.91(dd,J＝7.3,10.8Hz,1H),1.81(dd,J＝7.5,11.6Hz,1H),1.29(t,J＝7.3Hz,3H)。LC/MS RT＝0.39min.,364.2[M+H]⁺。

实施例24：

化合物24：N-甲基-6-[甲基(9H-嘌呤-6-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺

方案5(实施例24作为说明)

中间体1：N-(2-羟基螺[3.3]庚-6-基)-N-甲基-氨基甲酸苄酯

将氯甲酸苄酯(1.50mL，10.5mmol)加入6-(甲基氨基)螺[3.3]庚-2-醇(1.59g，10.5mmol)、碳酸钠水溶液(21.1mL，21.1mmol的1N溶液)和EtOAc(10.5mL)处于0℃的搅拌的溶液。在添加完成之后，移除冰水浴，并且反应混合物在环境温度搅拌持续4小时，然后将层分离，并且水层用EtOAc(2x10mL)洗涤。将有机层合并，用盐水(1x10mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤，并且浓缩成无色油(2.46g，85％)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d):δppm 1.91(dt,J＝11.42,6.98Hz,2H),2.03(s,1H),2.05-2.21(m,4H),2.27(dt,J＝11.66,5.98Hz,1H),2.43-2.51(m,1H),2.82(s,3H),4.18(quin,J＝7.22Hz,1H),5.10(s,2H),7.31-7.38(m,5H)；m/z276[M+H]⁺。

中间体2：[6-[苄氧羰基(甲基)氨基]螺[3.3]庚-2-基]4-甲基苯磺酸酯

将对甲苯磺酰氯(2.09g，11.0mmol)加入到N-(2-羟基螺[3.3]庚-6-基)-N-甲基-氨基甲酸苄酯(2.35g，8.55mmol)、三乙胺(2.66mL，19.1mmol)、DMAP(233mg，1.91mmol)和CH₂Cl₂(36mL)的搅拌的溶液中。将反应混合物搅拌持续18小时，然后将溶液倒入水(50mL)中，并且将层分离。水层用EtOAc(2x50mL)萃取。将有机层合并，用盐水(1x50mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤，浓缩，并且通过采用在庚烷中0％至75％EtOAc的梯度的硅胶色谱法来纯化，以提供作为无色油的标题化合物(3.14g，86％)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d):δppm 2.17-2.34(m,3H),2.37-2.64(m,6H),2.78(d,J＝5.27Hz,3H),3.18(s,3H),3.74(quin,J＝8.30Hz,1H),3.95(q,J＝5.08Hz,1H),4.94-5.06(m,1H),6.59(d,J＝4.10Hz,1H),7.27(s,2H),7.44(d,J＝4.10Hz,1H),8.03(d,J＝8.39Hz,2H),8.37(s,1H)；m/z 430[M+H]⁺。

中间体3：S-[6-[苄氧羰基(甲基)氨基]螺[3.3]庚-2-基]硫代乙酸酯

将硫代乙酸钾(6.62g，58.0mmol)加入到[6-[苄氧羰基(甲基)氨基]螺[3.3]庚-2-基]4-甲基苯磺酸酯(5.00g，11.6mmol)和DMSO(50mL)的搅拌的溶液中。将外部温度升高至60℃，并且最初不均质的溶液变得均质。在60℃17小时之后，将溶液冷却，并且用EtOAc(50mL)和NaHCO₃水溶液(75mL)稀释反应混合物。将层分离并且水层用EtOAc(2x50mL)萃取。将有机层合并，用盐水(1x50mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤，浓缩，并且通过采用在庚烷中0％至40％EtOAc的梯度的硅胶色谱法来纯化，以提供作为无色油的标题化合物(3.26g，84％)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d):δppm 1.98-2.20(m,5H),2.25(s,3H),2.29-2.44(m,2H),2.56(ddd,J＝11.47,7.66,3.90Hz,1H),2.81(s,3H),3.93(quin,J＝8.35Hz,1H),4.15-4.64(m,1H),5.09(s,2H),7.26-7.37(m,4H)；m/z 334[M+H]⁺。

中间体4：N-(2-氯磺酰基螺[3.3]庚-6-基)-N-甲基-氨基甲酸苄酯

在环境温度，以使得溶液的内部温度不超过30℃的速率将S-[6-[苄氧羰基(甲基)氨基]螺[3.3]庚-2-基]硫代乙酸酯和乙腈(11mL)的溶液缓慢滴加到NCS(2.87g，20.9mmol)、乙酸:H₂O(0.80mL的按体积计1:1的溶液)和乙腈(12mL)的搅拌的溶液中。在15分钟之后，将混合物用EtOAc(80mL)稀释，用饱和NaHCO₃水溶液(1x20mL)洗涤，用盐水(1x20mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤，浓缩并且通过采用在庚烷中0％至40％EtOAc的梯度的硅胶色谱法来纯化，以给出作为白色固体的标题化合物(1.53g，61％)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d):δppm 2.17-2.26(m,2H),2.27-2.38(m,2H),2.45(ddd,J＝12.45,8.74,3.22Hz,1H),2.57-2.65(m,1H),2.66-2.81(m,3H),2.82(s,3H),4.29(quin,J＝8.20Hz,1H),4.35-4.55(m,1H),5.10(s,2H),7.28-7.38(m,6H)；m/z 358[M+H]⁺。

中间体5：N-甲基-N-[2-(甲基氨磺酰基)螺[3.3]庚-6-基]氨基甲酸苄酯

将甲胺(10.7mL，4.28mmol在THF中的2M溶液)滴加到N-(2-氯磺酰基螺[3.3]庚-6-基)-N-甲基-氨基甲酸苄酯(1.53g，4.28mmol)和THF(12.2mL)在0℃的溶液中。随着反应混合物被搅拌过夜，其被允许加温到环境温度。在17h之后，将溶液倒入水(50mL)中并且用EtOAc(3x50mL)萃取。将有机萃取物合并，用盐水(1x30mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤，浓缩，并且通过采用在庚烷中0％至100％EtOAc的梯度的硅胶色谱法来纯化，以给出作为白色固体的标题化合物(1.19g，79％)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d):δppm 2.09-2.17(m,2H),2.18-2.34(m,3H),2.35-2.43(m,1H),2.44-2.55(m,2H),2.76(d,J＝5.47Hz,3H),2.81(s,3H),3.70(quin,J＝8.39Hz,1H),3.97(q,J＝4.95Hz,1H),5.09(s,2H),7.28-7.38(m,5H)；m/z353[M+H]⁺。

中间体6：N-甲基-6-(甲基氨基)螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺

将已经用氮气冲洗过(flush)的500mL圆底烧瓶装载有湿的5％Pd/C(700mg)；使用微量EtOAc来冲洗(rinse down)烧瓶的颈部。加入N-甲基-N-[2-(甲基氨磺酰基)螺[3.3]庚-6-基]氨基甲酸苄酯(700mg，1.99mmol)和EtOH(70mL)。空气被抽空，并且用氢气代替。在18小时之后，气氛用氮气代替，并且混合物在用大量EtOAc洗脱的情况下通过硅藻土的垫过滤。浓缩滤液，以提供作为白色固体的标题化合物(395mg，91％)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d4):δppm 1.78-1.90(m,2H),2.20-2.32(m,5H),2.35-2.48(m,4H),2.65(s,3H),3.05-3.16(m,1H),3.81(quin,J＝8.30Hz,1H)；m/z 219[M+H]⁺。

在5mL wheaton小瓶中，将6-氯-9H-嘌呤(0.34mmol，87.0mg)和N-甲基-6-(甲基氨基)螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺(0.34mmol，52.0mg)放入正丁醇(3.0mL)中。向其中加入N,N-二异丙基乙胺(0.29mL，1.7mmol)。将反应在80℃搅拌持续16h。冷却并且浓缩反应。使用乙腈(2x2.0mL)研磨粗品，以给出67mg的产物(纯度85％)。这在使用水/甲醇作为洗脱剂的制备型HPLC上进一步纯化，以给出具有93％纯度的产物。LC-MS 337(M+H)；¹H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm2.11-2.43(m,8H)2.49-2.58(m,3H)3.31-3.36(m,2H)3.69-3.89(m,1H)5.24-6.04(m,1H)6.62-6.93(m,1H)7.88-8.12(m,1H)8.13-8.29(m,1H)11.86-13.35(m,1H)；

通过以类似的方式进行，制备了以下。

实施例25：

化合物25：N-甲基-6-[甲基(1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺

N-甲基-6-[甲基(1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺：LC-MS 337(M+H)；¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 2.08-2.44(m,7H)2.51-2.58(m,3H)3.17-3.24(m,3H)3.60-3.92(m,1H)4.68-5.48(m,1H)6.40-7.01(m,1H)8.16(d,J＝18.35Hz,2H)12.55-13.69(m,1H)。

实施例26和实施例27：

化合物26和化合物27：N-甲基-6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺的对映异构体的分离

将外消旋物质溶解在MeOH中。对映异构体A和对映异构体B的分离在用等度溶剂(70％EtOH和30％己烷)洗脱的手性Tech Chiralpak IF半制备型柱(30x250mm，5微米)上进行。对映异构体A在11.1min至12.1min之间收集。对映异构体B在12.7min至14.1min之间收集。对映异构体A和对映异构体B在用等度溶剂(60％EtOH和40％己烷)洗脱的手性TechChiralpak IF-3分析柱(4.6x150mm，3微米)上进行分析。

化合物26：对映异构体A：¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 2.30-2.41(m,4H)2.44-2.59(m,4H)2.68(s,3H)3.27(s,3H,与MeOH-d4重叠)3.87(quin,J＝8.30Hz,1H)5.01-5.10(m,1H)6.61(d,J＝3.71Hz,1H)7.08(d,J＝3.71Hz,1H)8.07(s,1H)；LCMS(M/Z):336(M+H)；在Chiralpak IF-3柱上的保留时间：6.56min。

化合物27：对映异构体B：¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 2.30-2.41(m,4H),2.44-2.59(m,4H)2.68(s,3H)3.27(s,3H,与MeOH-d4重叠)3.87(quin,J＝8.30Hz,1H)5.01-5.10(m,1H)6.61(d,J＝3.51Hz,1H)7.08(d,J＝3.71Hz,1H)8.07(s,1H)；LCMS(M/Z):336(M+H)；在Chiralpak IF-3柱上的保留时间：8.59min(宽峰)。

通过以类似于先前的实施例的方式进行，制备了以下。

实施例28：

化合物28：6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺

6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺：¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.07(s,1H),7.08(d,J＝3.7Hz,1H),6.62(d,J＝3.7Hz,1H),5.13-5.00(m,1H),3.83-3.72(m,1H),3.28(s,3H,与MeOH-d4重叠),2.63-2.22(m,9H)；LCMS(M/Z):322(M+H)。

实施例29：

化合物29：N,N-二甲基-6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺

N,N-二甲基-6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺：¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.07(s,1H),7.08(d,J＝3.5Hz,1H),6.62(d,J＝3.7Hz,1H),5.13-5.01(m,1H),3.93(t,J＝8.4Hz,1H),3.28(s,3H),2.82(s,6H),2.65-2.46(m,4H),2.41-2.26(m,4H)；LCMS(M/Z):350(M+H)。

实施例30：

化合物30：N-甲基-N-(2-吡咯烷-1-基磺酰基螺[3.3]庚-6-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺

N-甲基-N-(2-吡咯烷-1-基磺酰基螺[3.3]庚-6-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺：¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.08(br s,1H),7.08(d,J＝3.5Hz,1H),6.62(d,J＝3.7Hz,1H),5.16-4.95(m,1H),3.96(quin,J＝8.4Hz,1H),3.27(s,3H,与MeOH-d4重叠),2.69-2.21(m,8H),1.97-1.83(m,4H)；LCMS(M/Z):376(M+H)。

缩写：

DCM＝二氯甲烷

DMA＝二甲基乙酰胺

DMF＝二甲基甲酰胺

DMAP＝4-二甲基氨基吡啶

LAH＝氢化铝锂

NaH＝氢化钠

REDAl＝双(2-甲氧基乙氧基)铝氢化钠

SEMCl＝2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯

TBAF＝四丁基氟化铵

THF＝四氢呋喃

TsCl＝对甲苯磺酰氯

评价

使用下文描述的测试方法测试本发明的化合物的生物活性。

如下文所描述的，以Thermo Fisher Scientific，使用其Z’-Lyte^TM方案关于Jak1活性对实施例化合物进行筛选。针对其他激酶的选择性筛选可以按照类似的程序进行。

Z'-LYTE测定条件：测试化合物在孔中在1％DMSO(最终)中进行筛选。使用三种筛选浓度(10nM、100nM和1000nM)的测试化合物。

肽/激酶混合物：将所有肽/激酶混合物在合适的激酶缓冲液中稀释至2X工作浓度(对于JAK1，2X JAK1/Tyr 06混合物在50mM HEPES pH 6.5、0.01％BRIJ-35、10mM MgCl₂、1mM EGTA、0.02％NaN₃中制备。最终10μL激酶反应由以下组成：在50mM HEPES pH 7.0、0.01％BRIJ-35、10mM MgCl₂、1mM EGTA、0.01％NaN₃中的21.2ng-91.5ng JAK1和2μM Tyr06。在1小时的激酶反应温育之后，加入5μL的1:128稀释的显影试剂A(DevelopmentReagent A))。

ATP溶液：将所有的ATP溶液在激酶缓冲液中稀释至4X工作浓度(50mM HEPES pH7.5、0.01％BRIJ-35、10mM MgCl₂、1mM EGTA)。

ATP：Km表观值先前使用Z'-LYTE测定法确定。

10X新颖的PKC脂质混合物：2mg/ml磷脂酰丝氨酸，0.2mg/ml DAG在20mM HEPES中，pH 7.4，0.3％CHAPS。

对于5mL 10X新颖的PKC脂质混合物：

1.向玻璃管中加入10mg磷脂酰丝氨酸(Avanti极性脂质部分(Avanti PolarLipids Part)#8400032C或840039C)和1mg DAG(Avanti极性脂质部分#800811C)。

2.通过在氮气流下蒸发至透明的薄膜，从脂质混合物中去除氯仿。管以一定角度的连续旋转以确保脂质溶液的最大表面积，将促成最薄的膜。

3.向干燥的脂质混合物中加入5mL重悬缓冲液，20mM HEPES、0.3％CHAPS、pH 7.4。

4.温和地加热至50℃-60℃持续1-2分钟，并且在短时间间隔内进行涡旋，直到脂质溶解为透明或轻微浑浊的溶液。典型地，脂质在2-3次加热/涡旋循环之后处于溶液中。

5.冷却至室温，等分试样分成单次使用体积，并在-20℃储存。

测定方案条形码化的Corning，低体积NBS，黑色384孔板(Corning目录号4514)

1. 100nL-100X测试化合物在100％DMSO中

2. 2.4μL-激酶缓冲液

3. 5μL-2X肽/激酶混合物

4. 2.5μL-4X ATP溶液

5. 30秒的板振摇

6.在室温60分钟的激酶反应温育

7. 5μL-显影试剂溶液

8. 30秒的板振摇

9.在室温60分钟的显影反应温育

10.在荧光读板器上读取并且分析数据。

表：数据概述

本公开内容的实施方案包括：

1.一种式I的化合物或其药用盐或兽医用盐，

其中

X是N、CH或CR³；

Y是N、CH或CR³；

n是0、1、2、3或4；

m是0、1、2、3或4；

并且

2.根据1所述的化合物，其中R¹是(CH₂)_nSO₂NHR²或(CH₂)_mNHSO₂R²。

3.根据1或2所述的化合物，其中R¹是(CH₂)_nSO₂NHR²。

4.根据1-3中的一项所述的化合物，其中n是0。

5.根据1-3中的一项所述的化合物，其中n是1。

6.根据1-5中任一项所述的化合物，其中R²是C_1-6烷基、未被取代的或被取代的环烷基、C_1-6卤代烷基、或未被取代的或被取代的芳基。

7.根据6所述的化合物，其中所述环烷基或芳基被一个或更多个卤素、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_2-6烯基、C_2-6卤代烯基、C_2-6炔基、C_2-6卤代炔基、CN、NO₂、NH₂、N(C_1-6烷基)₂、OH或OC_1-6烷基取代。

8.根据1或2所述的化合物，其中R¹是(CH₂)_mNHSO₂R²。

9.根据1、2或8中的一项所述的化合物，其中m是0。

10.根据1、2或9中的一项所述的化合物，其中m是1。

11.根据1、2或8-10中任一项所述的化合物，其中R²是C_1-6烷基、未被取代的或被取代的环烷基、C_1-6卤代烷基、或未被取代的或被取代的芳基。

12.根据11所述的化合物，其中所述环烷基或芳基被一个或更多个卤素、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_2-6烯基、C_2-6卤代烯基、C_2-6炔基、C_2-6卤代炔基、CN、NO₂、NH₂、N(C_1-6烷基)₂、OH或OC_1-6烷基取代。

13.根据1-12中任一项所述的化合物，其中X是CH。

14.根据1-13中任一项所述的化合物，其中Y是CH。

15.根据1-12中任一项所述的化合物，其中X和Y中的一个或更多个是CR³，其中每个R³是卤素、氰基或C_1-6烷基。

16.一种化合物，所述化合物选自：

N-甲基-6-[甲基(9H-嘌呤-6-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺；

6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺；

N,N-二甲基-6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺；和

N-甲基-N-(2-吡咯烷-1-基磺酰基螺[3.3]庚-6-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺，

或其兽医用盐或药用盐。

17.一种组合物，所述组合物包含根据1-16中任一项的化合物和药学上可接受的载体或兽医学可接受的载体。

18.包含根据1-16中任一项的化合物和一种或更多种其他药用活性物质或兽医用活性物质的组合。

19.一种用于治疗瘙痒症或特应性皮炎的方法，所述方法包括：

向有相应需要的受试者施用有效量的根据1-16中任一项的化合物。

20.根据19所述的方法，其中所述受试者是哺乳动物。

21.根据20所述的方法，其中所述哺乳动物选自人类、牛、绵羊、山羊、美洲驼、羊驼、猪、马、驴、狗、猫、家畜哺乳动物、家养哺乳动物或伴侣哺乳动物。

22.根据1-16中任一项所述的化合物，用于在医疗中使用。

23.根据1-16中任一项所述的化合物，用于制备用于治疗瘙痒症或特应性皮炎的药物。

24.根据1-16中任一项的化合物用于治疗瘙痒症或特应性皮炎的用途。

在本说明书中引用的所有出版物、专利和专利申请通过引用并入本文，用于这样的引用被使用的教导。

用于本文描述的实验的测试化合物以游离形式或盐的形式被使用。

观察到的具体响应可以根据并且取决于所选择的特定活性化合物或是否有存在的载体，以及所使用的制剂类型和施用模式而变化，并且根据本发明的实践设想结果的这样的预期的变化或差异。

尽管本文详细地说明和描述了本发明的具体实施方案，但是本发明不限于此。上文的详细描述作为本发明的示例被提供，并且不应当被解释为构成本发明的任何限制。对于本领域的技术人员来说，修改将是明显的，并且不脱离本发明的精神的所有修改都意图被包括在所附权利要求的范围内。

Claims

1.一种式I的化合物或其药用盐或兽医用盐，

其中

X是N、CH或CR³；

Y是N、CH或CR³；

n是0、1、2、3或4；

m是0、1、2、3或4；

并且

2.根据权利要求1所述的化合物，其中R¹是(CH₂)_nSO₂NHR²或(CH₂)_mNHSO₂R²。

3.根据权利要求1或2所述的化合物，其中R¹是(CH₂)_nSO₂NHR²。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其中n是0。

5.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其中n是1。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物，其中R²是C_1-6烷基、未被取代的或被取代的环烷基、C_1-6卤代烷基、或未被取代的或被取代的芳基。

7.根据权利要求6所述的化合物，其中所述环烷基或芳基被一个或更多个卤素、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_2-6烯基、C_2-6卤代烯基、C_2-6炔基、C_2-6卤代炔基、CN、NO₂、NH₂、N(C_1-6烷基)₂、OH或OC_1-6烷基取代。

8.根据权利要求1或2所述的化合物，其中R¹是(CH₂)_mNHSO₂R²。

9.根据权利要求1、2或8中任一项所述的化合物，其中m是0。

10.根据权利要求1、2或9中任一项所述的化合物，其中m是1。

11.根据权利要求1、2或8-10中任一项所述的化合物，其中R²是C_1-6烷基、未被取代的或被取代的环烷基、C_1-6卤代烷基、或未被取代的或被取代的芳基。

12.根据权利要求11所述的化合物，其中所述环烷基或芳基被一个或更多个卤素、C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、C_2-6烯基、C_2-6卤代烯基、C_2-6炔基、C_2-6卤代炔基、CN、NO₂、NH₂、N(C_1-6烷基)₂、OH或OC_1-6烷基取代。

13.根据权利要求1-12中任一项所述的化合物，其中X是CH。

14.根据权利要求1-13中任一项所述的化合物，其中Y是CH。

15.根据权利要求1-12中任一项所述的化合物，其中X和Y中的一个或更多个是CR³，其中每个R³是卤素、氰基或C_1-6烷基。

16.一种化合物，所述化合物选自：

N-甲基-6-[甲基(9H-嘌呤-6-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺；

6-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]螺[3.3]庚烷-2-磺酰胺；

或其兽医用盐或药用盐。

17.一种组合物，所述组合物包含根据权利要求1-16中任一项的化合物和药学上可接受的载体或兽医学可接受的载体。

18.包含根据权利要求1-16中任一项的化合物和一种或更多种其他药用活性物质或兽医用活性物质的组合。

向有相应需要的受试者施用有效量的根据权利要求1-16中任一项的化合物。

20.根据权利要求19所述的方法，其中所述受试者是哺乳动物。

21.根据权利要求20所述的方法，其中所述哺乳动物选自人类、牛、绵羊、山羊、美洲驼、羊驼、猪、马、驴、狗、猫、家畜哺乳动物、家养哺乳动物或伴侣哺乳动物。

22.根据权利要求1-16中任一项所述的化合物，用于在医疗中使用。

23.根据权利要求1-16中任一项所述的化合物，用于制备用于治疗瘙痒症或特应性皮炎的药物。

24.根据权利要求1-16中任一项的化合物用于治疗瘙痒症或特应性皮炎的用途。