CN113267590A - 一种红景天质量分级评价方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提出了一种红景天质量分级评价方法,所述红景天质量分级评价方法为:(1)采用高效液相色谱同时测定待测红景天样品中红景天苷、1,2,3,4,6‑O‑没食子酰葡萄糖与红景天素的含量;(2)通过红景天苷含量与1,2,3,4,6‑O‑没食子酰葡萄糖含量的乘积值、红景天苷含量与红景天素含量的比值对红景天进行质量分级。本发明所述红景天质量分级评价方法以红景天发挥药效作用的主要化学成分为基础,通过数学统计分析,探索内在规律,按照计算结果进行分级,能够保证分级结果的客观性和准确性。

Description

一种红景天质量分级评价方法
技术领域
本发明涉及化学检测技术领域,具体涉及一种红景天质量分级评价方法。
背景技术
中药既是药品,又是市场流通、交换和经营中的商品。此外,中药还具有农产品的特征,地理、气候、土壤、环境、种植、采收、加工、储藏等因素和环节都会对其生产造成影响,导致质量出现差异。因此,分级标准的制定具有必要性。
红景天属的植物种类较多,在千余年的使用过程中,存在多种红景天混用的现象,目前尚无红景天质量分级标准的制定研究。现行质量标准中收载的红景天为大花红景天,仅控制其中红景天苷的含量,难以区分正品与部分近缘混淆品,亦无法准确判断正品质量的优劣。此外,红景天苷的苷元酪醇、红景天素等黄酮类成分、没食子酰葡萄糖等鞣质类成分也是红景天的主要药效成分之一,其含量是否与红景天的品质相关,有必要进一步探究。
CN106771013A公开了一种安全、高效、便捷的红景天中药饮片。该发明提供的红景天定性定量中药饮片制造工艺,采用一种炮制工艺,将符合采购标准的红景天制备成中药饮片,可冲泡服用改变传统煎煮服用方法,同时提供一种红景天质量标准,在现有质量标准的基础上增加相关检测项目,并提高含量测定中的红景天苷的标准限度,可有效对红景天的质量进行控制,提高了药品的质量标准,增加了用药安全性。
CN111505193A公开了一种红景天配方颗粒的质量标准检测方法,包括红景天配方颗粒的鉴别、红景天配方颗粒的检查、红景天配方颗粒相关物质的含量测定。本发明针对红景天配方颗粒提供了系统化,科学化的质量标准检测方法,包括其鉴别、各项理化指标的检查以及相关成分含量的测定,测定方法使用参数精准控制,能完全反应出红景天配方颗粒的质量,更有效地控制产品质量,并可作为大规模生产的红景天配方颗粒疗效一致性的评价依据,具有较高的科学指导和产业调控价值。
因此,迫切需要将传统经验与现代方法有机结合,建立科学的红景天质量等级评价系统,制定适应当前药材和饮片生产、流通实际的等级标准,从而规范市场,提高质量,引导优质优价,保证临床用药的安全有效。
发明内容
针对现有技术存在的不足,本发明的目的在于提供一种红景天质量分级评价方法,所述红景天质量分级评价方法以红景天发挥药效作用的主要化学成分为基础,通过数学统计分析,探索内在规律,按照计算结果进行分级,能够保证分级结果的客观性和准确性。
为达此目的,本发明采用以下技术方案:
第一方面,本发明提供一种红景天质量分级评价方法,所述红景天质量分级评价方法为:
(1)采用高效液相色谱同时测定待测红景天样品中红景天苷、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖与红景天素的含量;
(2)通过红景天苷含量与1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖含量的乘积值、红景天苷含量与红景天素含量的比值对红景天进行质量分级。
本发明建立了同时测定红景天苷、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖含量的高效液相色谱方法,筛选有代表性的、特征性的指标性成分,首次以红景天有效成分含量之间的比值和乘积关系为指标,建立红景天饮片质量分级评价系统。对有效成分含量结果进行深入的数据统计分析,挖掘含量与质量的内部规律,制定合理的计算模式,进一步寻找成分与中药质量等级之间的关联性,进一步制定中药材及饮片的质量分级系统。
1、红景天苷的限度规定:采用建立的多成分含量测定方法对样品进行测定,以现行质量标准限度作为红景天苷的限度要求(按干燥品计算,含红景天苷不得少于0.50%)。
2、酪醇的限度规定:酪醇为红景天苷的苷元,也是红景天的有效成分之一,在一定条件下,红景天苷可转化为酪醇,因此,是否有必要对酪醇的限度进行要求值得探讨。经测定,红景天样品中酪醇含量较低,约80%的样品中酪醇含量低于0.20%;红景天苷的规定限度为0.50%,合格率为99%;以0.70%作为红景天苷和酪醇总量的限度进行数据分析,98%样品含量在0.70%以上,合格率基本无变化,各结果的频数分布图见图2A、图2B、图2C所示,因此,本质量分级标准中未对酪醇进行限度规定。
3、黄酮类成分红景天素与性状分类的相关性分析:红景天中的黄酮类成分具有抗氧化、抗缺氧、抗疲劳等作用,红景天素是红景天中的主要黄酮类成分,其含量可以作为评判红景天质量的重要指标之一。
对红景天样品的含量测定结果进行数据分析发现:已除去表皮的红景天样品中红景天苷的含量较高,红景天素含量较低;而未除去表皮样品中红景天苷含量较低,红景天素含量较高,经试验验证,表皮中红景天素的含量约为内部的2~7倍,而红景天苷的含量仅为内部的二分之一。
现行质量标准规定红景天仅需除去最外层的粗皮,而表皮是要求保留的,且其表皮中含量较高的红景天素也是红景天的有效成分之一,则除去表皮会影响红景天的整体药效,间接影响其质量。因此,对红景天素的含有量加以控制是必要的,通过数据分析发现,除去表皮与未除去表皮样品中红景天苷与红景天素含量的比值差异较大,未除去表皮样品中红景天苷与红景天素的比值偏低,除去表皮样品中红景天苷与红景天素的比值偏高,结果如图3所示,红景天苷与红景天素含量(%)比值箱式图,以红景天苷与红景天素含量的比值作为评价指标,当红景天苷/红景天素≤10时,认为红景天饮片质量较优;当红景天苷/红景天素>10时,认为红景天饮片质量中等。
4、鞣质类成分1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖与红景天真伪的相关性分析:1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖等鞣质类成分是红景天发挥活血化瘀等作用的有效成分。经测定,红景天中1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖的含量较高,红景天伪品中该成分含量较低,部分红景天伪品甚至不含有该成分。考虑到各种伪品中红景天苷和1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖两个成分的含量总会有一个非常低,而正品中二者含量均较高,基于该情况,同时结合统计学分析,发现将红景天苷含量与1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖含量的乘积作为评价指标,当二者乘积≥2×10-6时为正品,当二者乘积<2×10-6时为疑似伪品(样品是否为伪品的最终判定需同时结合性状、鉴别、特征图谱等项目结果)。其结果的箱式图见图4红景天苷含量与1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖含量乘积箱式图。
优选地,所述高效液相色谱采用的色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱。
其中,十八烷基硅烷键合硅胶(ODS,ostade-cylsilane),完全球型、表面光滑的多孔硅胶,具有非常高的表面键合覆盖率。反相键合相表面具有非极性烷基官能团及未被取代的硅醇基。
优选地,所述十八烷基硅烷键合硅胶柱的规格为:4.6mm×250mm,5μm。
优选地,步骤(1)中,所述高效液相色谱中,流动相A为乙腈,流动相B为磷酸水溶液。
优选地,所述磷酸水溶液的浓度为0.4~0.6v%,例如可以是0.4v%、0.42v%、0.44v%、0.46v%、0.48v%、0.5v%、0.52v%、0.54v%、0.56v%、0.58v%、0.6v%等。
优选地,所述高效液相色谱中按梯度洗脱程序进行洗脱,所述高效液相色谱的分析梯度为:0~12min,3%A;12~12.1min,3%A~7%A;12.1~28min,7%A;28~28.1min,7%A~17%A;28.1~50min,17%A;50~50.1min,17%A~20%A;50.1~55min,20%A;55~55.1min,20%A~22%A;55.1~75min,22%A。
在本发明中,洗脱程序中的百分比指的是体积百分比;其中,体积变化均为匀速变化,例如“12~12.1min,3%A~7%A”指的是从12min开始至12.1min,流动相A由占比3v%匀速变化为7v%。
优选地,所述高效液相色谱中,流速为0.8~1.0mL/min,例如可以是0.8mL/min、0.85mL/min、0.9mL/min、0.95mL/min、1.0mL/min等。
优选地,步骤(1)中,所述高效液相色谱的检测波长为210~230nm(例如可以是210nm、215nm、220nm、225nm、230nm等)或265~285nm(例如可以是265nm、270nm、275nm、280nm、285nm等),优选为275nm。
优选地,步骤(1)中,所述高效液相色谱中,按红景天苷峰计算理论板数不低于5000,例如可以是5000、5100、5200、5300、5400、5500、5600、5700、5800、5900、6000等。
优选地,步骤(1)中,所述高效液相色谱的分析时间为70min以上,例如可以是70min、71min、72min、73min、74min、75min、76min、77min、78min、79min、80min等。
优选地,步骤(1)中,所述待测红景天样品的浓度为45~55mg/mL,例如可以是45mg/mL、46mg/mL、47mg/mL、48mg/mL、49mg/mL、50mg/mL、51mg/mL、52mg/mL、53mg/mL、54mg/mL、55mg/mL等。
优选地,步骤(1)中,所述待测红景天样品的溶剂为甲醇。
优选地,步骤(1)中,所述待测红景天样品的进样体积为5-10μL,例如可以是5μL、6μL、7μL、8μL、9μL、10μL等,优选为10μL。
优选地,步骤(2)中,所述红景天苷含量与1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖含量的乘积值<2×10-6(例如可以是1.9×10-6、1.8×10-6、1.6×10-6、1.4×10-6、1.2×10-6、1×10-6、5×10-7、1×10-7等),所述待测红景天样品的质量分级为疑似伪品。
优选地,步骤(2)中,所述红景天苷含量与1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖含量的乘积值≥2×10-6(例如可以是2×10-6、4×10-6、6×10-6、8×10-6、1×10-5等),需再通过红景天苷含量对红景天进行质量分级。
优选地,步骤(2)中,所述红景天苷含量<0.50%(例如可以是0.49%、0.48%、0.46%、0.44%、0.42%、0.4%等,所述待测红景天样品的质量分级为质劣。
优选地,步骤(2)中,所述红景天苷含量≥0.50%(例如可以是0.50%、0.52%、0.54%、0.56%、0.58%、0.6%等),需再通过红景天苷含量与红景天素含量的比值进行质量分级。
优选地,所述红景天苷含量与红景天素含量的比值>10(例如可以是10.2、10.4、10.6、10.8、11等),所述待测红景天样品的质量分级为质中;
优选地,所述红景天苷含量与红景天素含量的比值≤10(例如可以是10、9.8、9.6、9.4、9.2、9等),所述待测红景天样品的质量分级为质优。
优选地,所述红景天质量分级评价方法具体包括以下步骤:
(1)采用高效液相色谱同时测定待测红景天样品中红景天苷、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖和红景天素3个指标的含量;
其中,采用的色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱,流动相A为乙腈,流动相B为0.4~0.6v%的磷酸水溶液,检测波长为210~230、265~285nm,按红景天苷峰计算理论板数不低于5000;
(2)通过红景天苷含量与1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖含量的乘积值对红景天进行质量分级,二者乘积值<2×10-6,待测红景天样品的质量分级为疑似伪品,二者乘积值≥2×10-6,需再通过红景天苷含量对红景天进行质量分级;
所述红景天苷含量<0.50%,所述待测红景天样品的质量分级为质劣,所述红景天苷含量≥0.50%,需再通过红景天苷含量与红景天素含量的比值进行质量分级;
所述红景天苷含量与红景天素含量的比值>10,所述待测红景天样品的质量分级为质中,所述红景天苷含量与红景天素含量的比值≤10,所述待测红景天样品的质量分级为质优。
与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:
(1)本发明以红景天发挥药效作用的主要化学成分为基础,通过数学统计分析,探索内在规律,按照计算结果进行分级,能够保证分级结果的客观性和准确性;
(2)本发明所述分级评价方法克服了采用传统性状特征评价药材质量的局限性,不依赖于等级评价人员的丰富经验,避免了主观性,更加标准化;
(3)本发明所述分级评价方法筛选出3个化学成分作为指标性成分,且均与药效相关,增强了中药材质量控制的科学性和整体性,为药材真伪鉴定和优劣评价提供了依据;
(4)本发明所述分级评价方法建立的中药饮片等级分类方法可以推广应用到其他药材质量评价中,为规范市场、引导优质优价,提高药材质量、保证临床药效起到了积极推动作用。
附图说明
图1为本发明所述红景天质量分级评价流程示意图。
图2A为不同含量的红景天苷的频数分布图;
图2B为不同含量的酪醇的频数分布图;
图2C为红景天苷和酪醇含量总和频数分布图。
图3为红景天苷与红景天素含量比值箱式图。
图4为红景天苷含量与1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖含量乘积箱式图。
图5为实施例1中对照品的高效液相色谱图。
图6为实施例1中测定待测红景天样品的高效液相色谱图。
图7为实施例2中测定待测红景天样品的高效液相色谱图。
图8为实施例3中测定待测红景天样品的高效液相色谱图。
图9为实施例4中测定待测红景天样品的高效液相色谱图。
图10为实施例5中测定待测红景天样品的高效液相色谱图。
图11为实施例6中测定待测红景天样品的高效液相色谱图。
图12为实施例7中测定待测红景天样品的高效液相色谱图。
具体实施方式
下面结合附图并通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了,所述具体实施方式仅仅是帮助理解本发明,不应视为对本发明的具体限制。
实施例1
本实施例提供一种红景天质量分级评价方法,所述红景天质量分级评价方法为:
(1)采用高效液相色谱同时测定待测红景天样品中红景天苷、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖和红景天素3个指标的含量;
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以0.5v%磷酸溶液为流动相B,按梯度洗脱程序进行洗脱;检测波长为275nm。理论板数按红景天苷峰计算应不低于5000;
对照品溶液的制备:取红景天苷、酪醇、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖、红景天素对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1mL含红景天苷400μg、酪醇50μg、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖200μg、红景天素50μg的混合溶液,即得;
供试品溶液的制备:取红景天样品一(产地:西藏)粉末(过三号筛)约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入加甲醇10mL,密塞,称定重量,超声处理30min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL,注入高效液相色谱仪,测定,即得,按上述方法对红景天样品进行测定。
图5为实施例1中对照品的高效液相色谱图。图6为实施例1中测定待测红景天样品的高效液相色谱图。根据图5各成分出峰位置,得到图6中待测红景天样品中红景天苷的含量为0.76%、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖的含量为0.10%和红景天素的含量为0.10%;
(2)计算红景天苷含量与1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖含量的乘积值为8×10-6,红景天苷含量为0.76%、红景天苷含量与红景天素含量的比值为8;
根据图1所示的本发明所述红景天质量分级评价流程示意图,判断该待测红景天样品为质优级别。
实施例2
本实施例提供一种红景天质量分级评价方法,所述红景天质量分级评价方法为:
(1)采用高效液相色谱同时测定待测红景天样品中红景天苷、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖和红景天素3个指标的含量;
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以0.5v%磷酸溶液为流动相B,按梯度洗脱程序进行洗脱;检测波长为275nm。理论板数按红景天苷峰计算应不低于5000;
对照品溶液的制备:取红景天苷、酪醇、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖、红景天素对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1mL含红景天苷400μg、酪醇50μg、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖200μg、红景天素50μg的混合溶液,即得。;
供试品溶液的制备:取红景天样品二(产地:西藏)粉末(过三号筛)约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入加甲醇10mL,密塞,称定重量,超声处理30min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL,注入高效液相色谱仪,测定,即得,按上述方法对红景天样品进行测定。
图7为实施例2中测定待测红景天样品的高效液相色谱图。如图7所示,待测红景天样品中红景天苷的含量为1.13%、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖的含量为0和红景天素的含量为0.03%;
(2)计算红景天苷含量与1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖含量的乘积值为0,红景天苷含量为1.13%、红景天苷含量与红景天素含量的比值为38;
根据图1所示的本发明所述红景天质量分级评价流程示意图,判断该待测红景天样品为疑似伪品级别。
实施例3
本实施例提供一种红景天质量分级评价方法,所述红景天质量分级评价方法为:
(1)采用高效液相色谱同时测定待测红景天样品中红景天苷、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖和红景天素3个指标的含量;
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以0.5v%磷酸溶液为流动相B,按梯度洗脱程序进行洗脱;检测波长为275nm。理论板数按红景天苷峰计算应不低于5000;
对照品溶液的制备:取红景天苷、酪醇、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖、红景天素对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1mL含红景天苷400μg、酪醇50μg、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖200μg、红景天素50μg的混合溶液,即得。;
供试品溶液的制备:取红景天样品三(产地:西藏)粉末(过三号筛)约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入加甲醇10ml,密塞,称定重量,超声处理30min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL,注入高效液相色谱仪,测定,即得,按上述方法对红景天样品进行测定。
图8为实施例3中测定待测红景天样品的高效液相色谱图。如图8所示,待测红景天样品中红景天苷的含量为1.10%、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖的含量为0.36%和红景天素的含量为0.04%;
(2)计算红景天苷含量与1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖含量的乘积值为4×10-5,红景天苷含量为1.10%、红景天苷含量与红景天素含量的比值为28;
根据图1所示的本发明所述红景天质量分级评价流程示意图,判断该待测红景天样品为质中级别。
实施例4
本实施例提供一种红景天质量分级评价方法,所述红景天质量分级评价方法为:
(1)采用高效液相色谱同时测定待测红景天样品中红景天苷、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖和红景天素3个指标的含量;
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以0.5v%磷酸溶液为流动相B,按梯度洗脱程序进行洗脱;检测波长为275nm。理论板数按红景天苷峰计算应不低于5000;
对照品溶液的制备:取红景天苷、酪醇、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖、红景天素对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1mL含红景天苷400μg、酪醇50μg、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖200μg、红景天素50μg的混合溶液,即得;
供试品溶液的制备:取红景天样品四(产地:西藏)粉末(过三号筛)约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入加甲醇10mL,密塞,称定重量,超声处理30min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL,注入高效液相色谱仪,测定,即得,按上述方法对红景天样品进行测定。
图9为实施例4中测定待测红景天样品的高效液相色谱图。如图9所示,待测红景天样品中红景天苷的含量为0.44%、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖的含量为0.16%和红景天素的含量为0.43%;
(2)计算红景天苷含量与1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖含量的乘积值为7×10-6,红景天苷含量为0.44%、红景天苷含量与红景天素含量的比值为1;
根据图1所示的本发明所述红景天质量分级评价流程示意图,判断该待测红景天样品质劣级别。
实施例5
本实施例提供一种红景天质量分级评价方法,与实施例1的区别仅在于,采用C8色谱柱,其他步骤同实施例1。
图10为实施例5中测定待测红景天样品的高效液相色谱图。如图10所示,红景天苷与其它物质分离度不符合要求,1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖出现前沿峰,峰形较差。
实施例6
本实施例提供一种红景天质量分级评价方法,与实施例1的区别仅在于,以240nm为检测波长,其他步骤同实施例1。
图11为实施例6中测定待测红景天样品的高效液相色谱图。如图11所示,红景天苷、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖在波长为240nm时吸收很小,灵敏度不符合要求。
实施例7
本实施例提供一种红景天质量分级评价方法,与实施例1的区别仅在于,所述高效液相色谱的分析时间为60min,其他步骤同实施例1。
图12为实施例7中测定待测红景天样品的高效液相色谱图,如图12所示,红景天素未出峰。
申请人声明,本发明通过上述实施例来说明所述量子点及其制备方法和应用,但本发明并不局限于上述实施例,即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了,对本发明的任何改进,对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等,均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

Claims (10)

1.一种红景天质量分级评价方法,其特征在于,所述红景天质量分级评价方法为:
(1)采用高效液相色谱同时测定待测红景天样品中红景天苷、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖与红景天素的含量;
(2)通过红景天苷含量与1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖含量的乘积值、红景天苷含量与红景天素含量的比值对红景天进行质量分级。
2.根据权利要求1所述的红景天质量分级评价方法,其特征在于,步骤(1)中,所述高效液相色谱采用的色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱;
优选地,所述十八烷基硅烷键合硅胶柱的规格为:4.6mm×250mm,5μm。
3.根据权利要求1或2所述的红景天质量分级评价方法,其特征在于,步骤(1)中,所述高效液相色谱中,流动相A为乙腈,流动相B为磷酸水溶液;
优选地,所述磷酸水溶液的浓度为0.4~0.6v%;
优选地,所述高效液相色谱中,流速为0.8~1.0mL/min。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的红景天质量分级评价方法,其特征在于,步骤(1)中,所述高效液相色谱的检测波长为210~230nm或265~285nm。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的红景天质量分级评价方法,其特征在于,步骤(1)中,所述高效液相色谱中,按红景天苷峰计算理论板数不低于5000。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的红景天质量分级评价方法,其特征在于,步骤(1)中,所述高效液相色谱的分析时间为70min以上;
优选地,步骤(1)中,所述待测红景天样品的浓度为45~55mg/mL;
优选地,步骤(1)中,所述待测红景天样品的溶剂为甲醇;
优选地,步骤(1)中,所述待测红景天样品的进样体积为5-10μL。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的红景天质量分级评价方法,其特征在于,步骤(2)中,所述红景天苷含量与1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖含量的乘积值<2×10-6,所述待测红景天样品的质量分级为疑似伪品。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的红景天质量分级评价方法,其特征在于,步骤(2)中,所述红景天苷含量与1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖含量的乘积值≥2×10-6,需再通过红景天苷含量对红景天进行质量分级;
优选地,步骤(2)中,所述红景天苷含量<0.50%,所述待测红景天样品的质量分级为质劣。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的红景天质量分级评价方法,其特征在于,步骤(2)中,所述红景天苷含量≥0.50%,需再通过红景天苷含量与红景天素含量的比值进行质量分级;
优选地,所述红景天苷含量与红景天素含量的比值>10,所述待测红景天样品的质量分级为质中;
优选地,所述红景天苷含量与红景天素含量的比值≤10,所述待测红景天样品的质量分级为质优。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的红景天质量分级评价方法,其特征在于,所述红景天质量分级评价方法具体包括以下步骤:
(1)采用高效液相色谱同时测定待测红景天样品中红景天苷、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖和红景天素3个指标的含量;
其中,采用的色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱,流动相A为乙腈,流动相B为0.4~0.6v%的磷酸水溶液,检测波长为210~230、265~285nm,按红景天苷峰计算理论板数不低于5000;
(2)通过红景天苷含量与1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖含量的乘积值对红景天进行质量分级,二者乘积值<2×10-6,待测红景天样品的质量分级为疑似伪品,二者乘积值≥2×10-6,需再通过红景天苷含量对红景天进行质量分级;
所述红景天苷含量<0.50%,所述待测红景天样品的质量分级为质劣,所述红景天苷含量≥0.50%,需再通过红景天苷含量与红景天素含量的比值进行质量分级;
所述红景天苷含量与红景天素含量的比值>10,所述待测红景天样品的质量分级为质中,所述红景天苷含量与红景天素含量的比值≤10,所述待测红景天样品的质量分级为质优。
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