CN113243477A - 用于防止饮料褐变的组合物及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种用于防止饮料褐变的组合物及其应用。本发明提供的防止饮料褐变组合物包括小球藻酶解物以及维生素C，该组合物能够有效防止果汁饮料的褐变反应，尽管有研究表明了维生素C可以抑制褐变，但是其抑制效果并不显著，而通过本发明小球藻酶解物的加入显著提高了防止褐变的效果。另外，小球藻酶解物含有大量的活性多肽成分，其与市面上常见的蛋白饮料相比，多肽活性成分要更易吸收起到活性作用。

Description

用于防止饮料褐变的组合物及其应用
技术领域
本发明属于饮料技术领域，具体涉及一种用于防止饮料褐变的组合物。
背景技术
饮料在人们的日常生活中占据一定位置，饮料消费市场也越来越大，基于营养和口味的双重考虑，目前果汁饮料由于不添加大量色素和添加剂，日益受到消费者的喜爱，而纯果汁饮料存在一个严重的问题即易褐变，有研究表明添加D-异抗坏血酸钠能够防止褐变，但是实际应用的效果并不明显。
小球藻（Chlorella）是一类单细胞的绿藻，含有大量可利用的蛋白质、碳水化合物、维生素、叶绿素、矿物质以及微量元素，营养成分含量丰富。小球藻在食品、饲料、医药等多个领域具有众多潜在的应用价值，被联合国粮农组织列为21世纪人类绿色营养源健康食品。目前针对小球藻蛋白质的基础及应用研究尚处于初级阶段，小球藻蛋白的应用开发对于小球藻资源的综合利用具有重要意义。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种用于防止饮料褐变的组合物，目的之二是提供该组合物的具体应用，以弥补现有技术的不足。
为达到上述目的，本发明采取的具体技术方案为：
一种用于防止饮料褐变的组合物，包括小球藻酶解物；该小球藻酶解物包括小球藻多肽提取物和小球藻多糖；其中，小球藻多肽提取物和小球藻多糖的比例是1:2~10:1。
进一步的，所述用于防止饮料褐变的组合物还包括维生素C。
更进一步的，所述小球藻酶解物和维生素C的配比是1:1~20:1。
其中，饮料中添加量为：维生素C的浓度 0.25~1%（w/v），小球藻酶解物的浓度为1~5%（w/v）。
进一步的，所述用于防止饮料褐变的组合物还包括其他抗氧化的可食用成分。
进一步的，所述小球藻酶解物的制备方法包括以下步骤：
（1）小球藻粉与蒸馏水按1:5~1:15（w/v）的比例混匀，用NaOH溶液调节混合液pH至8.0~10.0，得到小球藻碱性混合液；
（2）将碱性混合液进行破壁处理后，离心，取上清液，真空冷冻干燥或喷雾干燥即得小球藻粗提物A；
（3）小球藻粗提物A按1:5~1:15（w/v）的比例加入乙醇，涡旋混匀，离心，弃去上清液；将沉淀干燥后，即得小球藻粗提物B；
（4）小球藻粗提物B与蒸馏水按1:5~1:15（w/v）的比例混匀，进行酶解；酶底比为0.5~4.0%；酶解时间为2~24 h。酶解后于沸水浴中灭酶，离心，收集上清液，通过真空冷冻干燥或喷雾干燥即得小球藻酶解物。
进一步的，所述（2）中的破壁处理方法包括：高压均质法、超声波破碎法或球磨法中的一种或多种组合。
更进一步的，所述（2）中的破壁处理方法为高压均质法，均质次数为1~5次，均质压力为800~2500 bar。
进一步的，上述方法包括（5）脱色处理：将未脱色的所述小球藻酶解物配制成水溶液，加入体积分数为0.5%~2.0%的活性炭，水浴震荡0.5~5.0 h，过滤，收集上清液，干燥即得精制小球藻酶解物。
进一步的，所述（4）中选用的酶包括：中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶或菠萝蛋白酶中的一种或多种组合。
更进一步的，所述（4）中所用的酶为碱性蛋白酶。
进一步的，所述用于防止饮料褐变的组合物能够应用于饮料制品中，用于防止饮料褐变，且提供小球藻多肽和多糖活性成分。
本发明的优点和有益效果：
本发明提供的防止饮料褐变组合物包括小球藻多肽和多糖活性成分以及维生素C，该组合物能够有效防止果汁饮料的褐变反应，尽管有研究表明了维生素C可以防止褐变，但是其抑制效果并不显著，而通过本发明小球藻酶解物的加入可以显著提高防止饮料褐变的效果。另外，小球藻酶解物含有大量的活性多肽成分，其与市面上常见的蛋白饮料相比，多肽活性成分更易被吸收。
本发明提供的防止饮料褐变组合物能够对饮料，尤其是纯果汁饮料起到明显防止褐变的效果，果汁饮料中小球藻酶解物的加入可以提供大量的多肽活性成分，基于该组合物制备的饮料既营养又具有保健功效，可以满足大众对于健康、绿色理念的追求。
附图说明
图1为实施例中不同果汁样品的DPPH清除能力对比图。
具体实施方式
以下通过具体实施例并结合附图对本发明进一步解释和说明。
实施例1
一种小球藻酶解物的制备方法，包括以下步骤：
（1）小球藻粉与蒸馏水按照1:5（w/v）的比例混匀，用NaOH溶液调节混合液pH至8.0，得到小球藻碱性混合液；
（2）将碱性混合液进行超声破碎处理，功率为450 W，超声4 s，间隔4 s。6000 rpm离心30 min，取上清液，真空冷冻干燥即得小球藻粗提物A；
（3）小球藻粗提物A按照1:5（w/v）的比例加入乙醇，涡旋混匀，6000 rpm离心30min，弃去上清液。将沉淀干燥后，即得小球藻粗提物B；
（4）小球藻粗提物B与蒸馏水按照1:5（w/v）的比例混匀，加入中性蛋白酶酶解；酶底比为2%；酶解方式：温度50 ℃、酶解时间为2~16 h。酶解后于沸水浴灭酶，冷却。8000 rpm离心10 min，收集上清液，真空冷冻干燥即得未脱色小球藻酶解物。
实施例2
一种小球藻酶解物的制备方法，步骤如下：
（1）小球藻粉与蒸馏水按照1:8（w/v）的比例混匀，用NaOH溶液调节混合液pH至9.0，得到小球藻碱性混合液；
（2）将碱性混合液通过高压均质机均质1次，均质压力为2500 bar。8000 rpm离心15min，取上清液，喷雾干燥即得小球藻粗提物A；
（3）小球藻粗提物A按照1:8（w/v）的比例加入乙醇，涡旋混匀，8000 rpm离心15min，弃去上清液。将沉淀干燥后，即得小球藻粗提物B；
（4）小球藻粗提物B与蒸馏水按照1:8（w/v）的比例混匀，加入碱性蛋白酶酶解；酶底比为2%；酶解方式：温度55 ℃、酶解时间为2~16 h。酶解后于沸水浴中灭酶，冷却。8000rpm离心10 min，收集上清液，喷雾干燥即得未脱色小球藻酶解物。
实施例3
一种小球藻酶解物的制备方法，步骤如下：
（1）小球藻粉与蒸馏水按照1:10（w/v）的比例混匀，用NaOH溶液调节混合液pH至8.0，得到小球藻碱性混合液；
（2）将碱性混合液通过高压均质机均质5次，均质压力为800 bar。7000 rpm离心20min，取上清液，真空冷冻干燥即得小球藻粗提物A；
（3）小球藻粗提物A按照1:10（w/v）的比例加入乙醇，涡旋混匀，7000 rpm离心20min，弃去上清液。将沉淀干燥后，即得小球藻粗提物B；
（4）小球藻粗提物B与蒸馏水按照1:10（w/v）的比例混匀，加入木瓜蛋白酶酶解；酶底比2%；酶解方式：温度55 ℃、酶解时间为2~16 h。酶解后于沸水浴中灭酶，冷却。8000 rpm离心10 min，收集上清液，真空冷冻干燥即得未脱色小球藻酶解物。
实施例4
一种小球藻酶解物的制备方法，步骤如下：
（1）小球藻粉与蒸馏水按照1:15（w/v）的比例混匀，用NaOH溶液调节混合液pH至10.0，得到小球藻碱性混合液；
（2）将碱性混合液通过高压均质机均质3次，均质压力为1500 bar。10000 rpm离心10 min，取上清液喷雾干燥即得小球藻粗提物A；
（3）小球藻粗提物A按照1:15（w/v）的比例加入乙醇，涡旋混匀，10000 rpm离心10min，弃去上清液。将沉淀干燥后，即得小球藻粗提物B；
（4）小球藻粗提物B与蒸馏水按照1:15（w/v）的比例混匀，加入风味蛋白酶酶解；酶底比2%；酶解方式：温度55 ℃、酶解时间为2~16 h。酶解后于沸水浴中灭酶，冷却。8000 rpm离心10 min，收集上清液，喷雾干燥即得未脱色小球藻酶解物。
结果分析：
一、小球藻酶解物得率分析
将实施例1-4中制备的未脱色小球藻酶解物进行称重，计算得率。
表1. 不同酶及酶解时间制备小球藻酶解物的得率
得率（%） 16 h 8 h 4 h 2 h
实施例1 49.05 ± 1.19<sup>b</sup> 45.57 ± 1.21<sup>b</sup> 46.31 ± 0.61<sup>c</sup> 41.15 ± 1.64<sup>b</sup>
实施例2 58.83 ± 1.18<sup>a</sup> 57.01 ± 0.85<sup>a</sup> 56.62 ± 2.68<sup>a</sup> 45.22 ± 2.09<sup>a</sup>
实施例3 46.52 ± 2.06<sup>b</sup> 39.27 ± 2.02<sup>d</sup> 49.91 ± 1.19<sup>b</sup> 37.75 ± 3.38<sup>c</sup>
实施例4 40.48 ± 1.08<sup>c</sup> 41.48 ± 1.78<sup>c</sup> 41.82 ± 1.85<sup>d</sup> 31.12 ± 1.90<sup>d</sup>
实验结果：由表1知，4个实施例制备的小球藻酶解物得率均较高，其中，实施例2即由碱性蛋白酶制备的小球藻酶解物得率最高。
二、抗氧化活性分析
DPPH法：
取实施例1-4中的未脱色小球藻酶解物，用pH5.5的50 mM醋酸盐缓冲液配成一系列浓度梯度的样品溶液。
准确称取0.0059 g DPPH，用无水乙醇配成100 mL的DPPH乙醇溶液。
测定方法：
样品组：2 mL DPPH乙醇溶液 + 2 mL样品溶液
空白组：2 mL DPPH乙醇溶液 + 2 mL无水乙醇
对照组：2 mL样品溶液 + 2 mL无水乙醇
在室温下避光反应60 min后，在525 nm处测定吸光度值，每个样品测三个平行。
ABTS法
取实施例1-4中的小球藻酶解物，用pH7.4的50 mM PBS配置成浓度为0.1 mg/mL的样品溶液。
将等体积的 ABTS溶液和过硫酸钾溶液混合，在室温黑暗处放置12~16 h得到母液。母液需用pH 7.4的50 mM PBS适当稀释30~50倍，使对照组在734 nm处的吸光度值控制在0.7 ± 0.05。
样品组：10 μL 0.1 mg/mL样品溶液 + 200 μL ABTS溶液；
标准品组：各浓度梯度的Trolox标准溶液10 μL + 200 μL ABTS溶液；
空白组：10 μLPBS + 200 μL ABTS溶液。
在室温下避光反应60 min后，在734 nm处测定吸光值，每个样品测三个平行。
表2. 不同酶及酶解时间制备小球藻酶解物的DPPH半抑制浓度
IC50（mg/mL） 16 h 8 h 4 h 2 h
实施例1 1.88 ± 0.08<sup>c</sup> 2.55 ± 0.04<sup>b</sup> 1.49 ± 0.03<sup>b</sup> 1.42 ± 0.04<sup> c</sup>
实施例2 1.38 ± 0.19<sup>d</sup> 1.73 ± 0.03<sup>d</sup> 2.54 ± 0.02<sup>a</sup> 1.15 ± 0.01<sup>d</sup>
实施例3 3.15 ± 0.01<sup>a</sup> 3.32 ± 0.09<sup>a</sup> 1.20 ± 0.07<sup>c</sup> 2.55 ± 0.03<sup>a</sup>
实施例4 2.42 ± 0.04<sup>b</sup> 2.15 ± 0.01<sup>c</sup> 1.37 ± 0.14<sup>bc</sup> 1.52 ± 0.01<sup>b</sup>
表3. 不同酶及酶解时间制备小球藻酶解物的ABTS清除能力
抗氧化能力（mmol TE/g） 2 h 4 h 8 h 16 h
实施例1 0.54 ± 0.01<sup>b</sup> 0.54 ± 0.02<sup>b</sup> 0.27 ± 0.04<sup>b</sup> 0.48 ± 0.05<sup>b</sup>
实施例2 0.45 ± 0.02<sup>c</sup> 0.71 ± 0.05<sup>a</sup> 0.37 ± 0.04<sup>a</sup> 0.87 ± 0.05<sup>a</sup>
实施例3 0.65 ± 0.01<sup>a</sup> 0.50 ± 0.02<sup>b</sup> 0.12 ± 0.03<sup>c</sup> 0.36 ± 0.05<sup>c</sup>
实施例4 0.47 ± 0.02<sup>c</sup> 0.52 ± 0.07<sup>b</sup> 0.30 ± 0.02<sup>ab</sup> 0.54 ± 0.02<sup>b</sup>
实验结果：由表2和3可知，所有实施例制备的小球藻酶解物均具有较强的抗氧化能力。
实施例5
将实施例2中未脱色小球藻酶解物配制成40 mg/ mL的水溶液，加入体积分数0.5%的活性炭，25℃水浴震荡1 h，过滤，收集上清液，冻干即得精制小球藻酶解物，通过DPPH、ABTS法测定其抗氧化性。
实施例6
将实施例2中将未脱色小球藻酶解物配制成40 mg/mL的水溶液，加入体积分数2.0%的活性炭，25℃水浴震荡1 h，过滤，收集上清液，冻干即得精制小球藻酶解物，通过DPPH、ABTS法测定其抗氧化性。
表4. 不同浓度活性炭处理制备精制小球藻酶解物的DPPH半抑制浓度
IC50（mg/mL） 0.5%活性炭 2.0%活性炭
2 h 3.77 ± 0.12<sup>d</sup> 5.62 ± 0.17<sup>d</sup>
4 h 5.40 ± 0.21<sup>a</sup> 5.53 ± 0.15<sup>a</sup>
8 h 2.75 ± 0.02<sup>b</sup> 2.89 ± 0.04<sup>c</sup>
16 h 2.36 ± 0.11<sup>c</sup> 3.12 ± 0.11<sup>b</sup>
表5. 不同浓度活性炭处理制备精制小球藻酶解物的ABTS清除能力
抗氧化能力（mmol TE/g） 0.5%活性炭 2.0%活性炭
2 h 0.22 ± 0.01<sup>b</sup> 0.34 ± 0.02<sup>a</sup>
4 h 0.48 ± 0.04<sup>a</sup> 0.16 ± 0.01<sup>b</sup>
8 h 0.24 ± 0.03<sup>b</sup> 0.14 ± 0.03<sup>b</sup>
16 h 0.53 ± 0.02<sup>a</sup> 0.35 ± 0.01<sup>a</sup>
实验结果：由表4-5综合分析，经活性炭处理后，小球藻酶解物仍具有显著的抗氧化能力。
将实施例2中的未脱色小球藻酶解物样品（A4）以及实施例5中0.5%活性炭处理制备的精制小球藻酶解物样品（A4-0.5AC）进行基本成分、氨基酸组成和肽段组成分析。
表6. 小球藻酶解物的基本成分分析
样品 蛋白质 总糖 脂质 灰分
A4 51.14 ± 0.27 42.35 ± 2.47 5.32 ± 0.02 3.65 ± 0.07
A4-0.5AC 47.60 ± 0.52 32.06 ± 0.83 5.43 ± 0.11 2.94 ± 0.22
通过表6可以看出：小球藻酶解物的主要活性成分是蛋白质和多糖，其他物质含量较低。
表7. 小球藻酶解物的氨基酸组成分析
氨基酸 A4（mg/100 mg） A4-0.5AC（mg/100 mg）
天冬氨酸Asp 4.48 4.50
苏氨酸Thr 2.41 2.46
丝氨酸Ser 2.07 2.13
谷氨酸Glu 6.67 6.95
甘氨酸Gly 2.77 2.69
丙氨酸Ala 4.36 4.47
缬氨酸Val 3.69 3.70
甲硫氨酸Met 1.35 1.41
异亮氨酸Ile 1.60 1.71
亮氨酸Leu 4.66 4.36
酪氨酸Tyr 2.13 1.88
苯丙氨酸Phe 1.62 1.83
赖氨酸Lys 2.58 2.40
组氨酸His 0.94 0.90
精氨酸Arg 2.55 2.14
脯氨酸Pro 1.83 1.57
TEAA/TAA（%） 39.18 39.63
小球藻酶解物的氨基酸组成如表7所示。经过0.5%活性炭脱色处理后，小球藻酶解物的氨基酸组成以及各氨基酸的含量无显著变化。活性炭脱色处理后小球藻酶解物中含量较高的氨基酸有Glu、Asp、Ala、Leu、Val，五种氨基酸约占全部氨基酸总量的 53.17%；必需氨基酸约占全部氨基酸总量的值（TEAA/TAA）为39.63%，符合世界卫生组织和联合国粮农组织提出的人体必需氨基酸的需求模式（TEAA/TAA约为40%）。因此，将小球藻酶解物加入到苹果汁中，也为苹果汁提供了良好的蛋白源。
表8. 小球藻酶解物中小球藻多肽提取物的肽段组成分析
氨基酸序列 肽链长度 氨基酸序列 肽链长度
AAAGTVF 7 DALYPGEAFDPL 12
AAALSLT 7 DAPLPL 6
AAPFPA 6 DAVYPGGNFDPL 12
ACDPL 5 DGGLDIPHNE 10
ADDLFL 6 DGLVPL 6
AHEPGYPGGIF 11 DLGGGTF 7
APFDPL 6 DVGGQDKIRPL 11
APFVPG 6 DVTIPA 6
APGGAVPA 8 DVTPIPTDSTR 11
APGPL 5 EAEMPGL 7
EGVGGL 6 EAFDPL 6
ELAGI 5 FEEVE 5
ELGGL 5 FFDPL 5
ELPVL 5 GADLF 5
EVAGLA 6 GAFDPM 6
IGAGAP 6 GALLL 5
IGELFP 6 GLADDPDTFAEL 12
IGGVGI 6 GLADDPDTL 9
LGAGGF 6 GLADDPDTLAEL 12
LGAGPL 6 PDSTGQYI 8
PGVNLS 6 PFGGLP 6
PGVVVA 6 PGFDPL 6
TLELGASII 9 PGGDFL 6
TPCIL 5 TALPYPPT 8
VDVPVVG 7 TDAGVI 6
表8列出了小球藻酶解物中检测到的部分代表性多肽序列。由表可知，小球藻酶解物中含有丰富的肽段序列，且小球藻酶解物中含有较多包含芳香族氨基酸的肽段序列，这些含有芳香族氨基酸的肽段序列可能对与小球藻酶解物的抗氧化能力具有显著的贡献作用。
实施例7
一种添加防止褐变组合物的果汁饮料制备方法包括以下步骤：
（1）向容器中加入苹果浊汁20 mL、小球藻酶解物0.5 g、维生素C 0.125 g、白砂糖5 g、适量纯净水并搅拌混合均匀。
（2）向步骤（1）所得混合液中加入CMC-Na 0.10 g、卡拉胶0.10 g、果胶0.10 g并搅拌混匀。
（3）对步骤（2）所得的果汁饮料粗品进行均质处理，用纯净水定容至50 mL，然后进行巴氏杀菌和热灌装处理，冷却，即为成品果汁饮料。
对比例1：
一种果汁饮料的制备方法，步骤如下：
（1）向容器中加入苹果浊汁20 mL、白砂糖5 g、适量纯净水并搅拌混合均匀。
（2）向步骤（1）所得混合液中加入CMC-Na 0.10 g、卡拉胶 0.10 g、果胶0.10 g并搅拌混匀。
（3）对步骤（2）所得的果汁饮料粗品进行均质处理，用纯净水定容至50 mL，然后进行巴氏杀菌和热灌装处理，冷却，即为成品果汁饮料。
对比例2
一种果汁饮料的制备方法，步骤如下：
（1）向容器中加入苹果浊汁20 mL、维生素C 0.625 g、白砂糖5 g、适量纯净水并搅拌混合均匀。
（2）向步骤（1）所得混合液中加入CMC-Na 0.10 g、卡拉胶 0.10 g、果胶0.10 g并搅拌混匀。
（3）对步骤（2）所得的果汁饮料粗品进行均质处理，用纯净水定容至50 mL，然后进行巴氏杀菌和热灌装处理，冷却，即为成品果汁饮料。
对比例3
一种果汁饮料的制备方法，步骤如下：
（1）向容器中加入苹果浊汁20 mL、小球藻酶解物0.625 g、白砂糖5 g、适量纯净水并搅拌混合均匀。
（2）向步骤（1）所得混合液中加入CMC-Na 0.10 g、卡拉胶 0.10 g、果胶0.10 g并搅拌混匀。
（3）对步骤（2）所得的果汁饮料粗品进行均质处理，用纯净水定容至50 mL，然后进行巴氏杀菌和热灌装处理，冷却，即为成品果汁饮料。
选取10名感官评定员，对实施例7、对比例1-3制得的果汁饮料进行感官评定，对饮料的色泽、状态、口感、气味进行评价，具体评价项目标准和评价结果如下表所示。
表9. 果汁的感官评分标准
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表10. 果汁的感官评分结果
评价项目 实施例7 对比例1 对比例2 对比例3
色泽（25分） 21.6 22.3 22.4 21.4
状态（15分） 13.2 13.8 13.8 13.0
口感（40分） 35.8 32.1 32.5 35.2
气味（20分） 16.0 16.7 16.8 15.5
总分（100分） 86.6 84.9 85.5 85.1
由表10可知，虽然小球藻本身呈现绿色且具有藻腥味，但用活性炭对小球藻酶解物进行脱色脱腥处理后加入果汁中，与普通果汁相比，并没有对果汁的色泽、状态、气味造成很大影响，而小球藻酶解物的加入可以显著改善果汁的口感。
称取5 g果汁，加入15 mL体积分数95%乙醇溶液，搅拌均匀，以3000 rpm离心30min，取上清液于420 nm处测定吸光值，衡量样品褐变度大小。由表11所知，只选取维生素C或精制小球藻酶解物作为护色成分（对比例2、3），二者褐变值无显著性差异（P > 0.05），说明小球藻酶解物具有和维生素C相似的护色效果；当护色成分配比为维生素C 0.1 g/L，小球藻酶解物0.4 g/L时，对苹果汁的护色效果最好，比0.5 g/L维生素C处理后果汁的褐变度显著降低了28.63%（P < 0.05）。这一结果说明抗坏血酸与小球藻酶解物结合按一定比例复配可以使苹果汁达到良好的护色效果。
表11. 不同护色剂处理下苹果汁的褐变度分析
样品 实施例7 对比例1 对比例2 对比例3
褐变值 0.0967± 0.0011<sup>c</sup> 0.1498 ± 0.0006<sup>a</sup> 0.1355± 0.0007<sup>b</sup> 0.1336± 0.0004<sup>b</sup>
将实施例和对比例的果汁产品进行DPPH、ABTS抗氧化性分析，结果如图1和表12所示：
表12. 果汁样品的ABTS清除能力分析
抗氧化能力（mM） 实施例7 对比例1
De 原液 1.43 ± 0.01 0.84 ± 0.01
稀释2倍 1.41 ± 0.01 0.41 ± 0.01
稀释5倍 1.32 ± 0.01 0.10 ± 0.01
稀释10倍 0.82 ± 0.01 None
稀释15倍 0.52 ± 0.01 None
稀释20倍 0.31 ± 0.01 None
注∶“None”表示抗氧化能力过低。
由图1可知，实施例7和对比例1的DPPH清除率差别不大，分别为96.75%和92.02%，随着果汁稀释倍数不断增大，实施例的DPPH清除率明显高于对比例。由表12知，无论是原液还是稀释后的果汁，实施例的ABTS清除能力都要明显高于对比例。由此可知，与普通果汁相比，添加防止褐变组合物的果汁具备更高的抗氧化性，也说明防止褐变组合物的加入有效抑制了果汁的褐变。该种方法制得的饮料既营养又具有保健功效，可以满足人们对健康、绿色理念的追求。

Claims (10)

1.一种用于防止饮料褐变的组合物，其特征在于，该组合物包括小球藻酶解物；所述小球藻酶解物包括小球藻多肽提取物和小球藻多糖。
2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包括维生素C，或其他抗氧化的可食用成分。
3.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述小球藻酶解物的制备方法包括以下步骤：
(1)小球藻粉与蒸馏水按照1:5～1:15(w/v)的比例混匀，用NaOH溶液调节混合液pH至8.0～10.0，得到小球藻碱性混合液；
(2)将小球藻碱性混合液进行破壁处理，离心，取上清液，真空冷冻干燥或喷雾干燥即得小球藻粗提物A；
(3)小球藻粗提物A按照1:5～1:15(w/v)的比例加入乙醇，涡旋混匀，离心，弃去上清液；将沉淀干燥后，得到小球藻粗提物B；
(4)小球藻粗提物B与蒸馏水按照1:5～1:15(w/v)的比例混匀，进行酶解；酶底比为0.5～4.0％；酶解时间为2～24h；酶解后于沸水浴中灭酶，离心，收集上清液，干燥后即得小球藻酶解物。
4.如权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述的破壁处理方法包括：高压均质法、超声波破碎法或球磨法中的一种或多种组合。
5.如权利要求4所述的组合物，其特征在于，所述的破壁方法为高压均质法，均质次数为1～5次，均质压力为800～2500bar。
6.如权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述方法还包括(5)脱色处理：将未脱色的所述小球藻酶解物配制成水溶液，加入体积分数为0.5％～2.0％的活性炭，震荡反应0.5～5.0h，过滤，收集上清液，干燥即得精制小球藻酶解物。
7.如权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述(4)中酶解选用的酶包括：中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶或菠萝蛋白酶中的一种或多种组合。
8.如权利要求7所述的组合物，其特征在于，所述(4)中酶解用酶为碱性蛋白酶。
9.权利要求1所述的组合物能够应用于饮料制品中。
10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，在饮料制品中，维生素C的浓度为0.25～1％(w/v)，小球藻酶解物的浓度为1～5％(w/v)。
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