CN113237986B - 液相色谱仪及分析执行方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种液相色谱仪及分析执行方法，当流路切换阀处于第一流路状态时，将由水系溶剂供给部所供给的水系溶剂引导至第一流路，利用设于第一流路的pH计来测定水系溶剂的pH值。当流路切换阀处于第二流路状态时，将由水系溶剂供给部所供给的水系溶剂引导至第二流路。在较流路切换阀更靠下游，利用试样供给部来供给分析对象的试样。将经过第二流路的溶剂及由试样供给部所供给的试样导入至分离管柱。利用检测器对经过分离管柱的试样进行检测。

Description

液相色谱仪及分析执行方法

技术领域

本发明涉及一种液相色谱仪(liquid chromatograph)及分析执行方法。

背景技术

作为将试样所含的物质分离为各不同成分的装置，已知有液相色谱仪。例如，日本专利特开2015-17924号公报所记载的液相色谱仪中，将分析对象的试样导入至管柱。而且，一边将水系溶剂与有机溶剂混合一并供给于管柱。关于导入至管柱的试样，利用化学性质或组成的不同将各成分洗脱后，利用检测器进行检测。基于由检测器所得的检测结果来制作色谱图(chromatogram)。

液相色谱仪中，必须根据分析对象的试样来适当选择分析方法的各参数，以使色谱图的波峰分离而不重叠。此处，分析方法的参数例如包含试样的注入量、管柱的种类、管柱的温度、检测波长或流动相的酸碱度(potential of hydrogen，pH)值。

发明内容

如上文所述，流动相的pH值对试样的分析结果造成影响，因而为了适当地设定分析方法，要求准确地测定流动相的pH值。但是，液相色谱仪中，难以准确地测定流动相的pH值而不妨碍试样的准确分析。

本发明的目的在于提供一种液相色谱仪及分析执行方法，可准确地测定流动相的pH值而不妨碍试样的准确分析。

本发明的一形态涉及一种液相色谱仪，包括：第一流路；第二流路；第一水系溶剂供给部，供给水系溶剂；流路切换阀，可切换为第一流路状态与第二流路状态，所述第一流路状态将由所述第一水系溶剂供给部所供给的水系溶剂引导至所述第一流路，所述第二流路状态将由所述第一水系溶剂供给部所供给的水系溶剂引导至所述第二流路；pH计，设于所述第一流路，对所述流路切换阀处于所述第一流路状态时流经所述第一流路的水系溶剂的pH值进行测定；试样供给部，在较所述流路切换阀更靠下游，供给分析对象的试样；分离管柱，导入有经过所述第二流路的溶剂及由所述试样供给部供给的试样；以及检测器，对经过所述分离管柱的试样进行检测。

本发明的另一形态涉及一种分析执行方法，包括下述步骤：利用水系溶剂供给部来供给水系溶剂；当流路切换阀处于第一流路状态时，将由所述水系溶剂供给部所供给的水系溶剂引导至第一流路；利用设于所述第一流路的pH计来测定被引导至所述第一流路的水系溶剂的pH值；当流路切换阀处于第二流路状态时，将由所述水系溶剂供给部所供给的水系溶剂引导至第二流路；在较所述流路切换阀更靠下游，供给分析对象的试样；将经过所述第二流路的溶剂及所供给的试样导入至分离管柱；以及对经过所述分离管柱的试样进行检测。

根据本发明，可准确地测定流动相的pH值而不妨碍试样的准确分析。

附图说明

图1为表示本发明的一实施方式的液相色谱仪的结构的示意图。

图2为表示变形例的液相色谱仪的结构的示意图。

图3为表示另一实施方式的液相色谱仪的结构的示意图。

图4为表示第一参考例的液相色谱仪的结构的示意图。

图5为表示第二参考例的液相色谱仪的结构的示意图。

图6为表示第三参考例的液相色谱仪的结构的示意图。

图7为表示第四参考例的液相色谱仪的结构的示意图。

具体实施方式

(1)液相色谱仪的结构

以下，一面参照图式，一面对本发明的实施方式的液相色谱仪及分析执行方法进行详细说明。图1为表示本发明的一实施方式的液相色谱仪的结构的示意图。如图1所示，本实施方式中，液相色谱仪100包括水系溶剂供给部10、有机溶剂供给部20、流路切换阀30、pH计40、混合部50、试样供给部60、管柱烘箱70、检测器80及处理部90。

水系溶剂供给部10包含多个(本例中为4个)溶剂瓶11～14、流路切换阀15及送液泵16。溶剂瓶11～溶剂瓶14分别蓄积不同种类的水系溶剂。流路切换阀15为选择部的示例，通过切换所述流路切换阀15与溶剂瓶11～溶剂瓶14之间的流路，从而从溶剂瓶11～溶剂瓶14中选择一个以上的溶剂瓶。送液泵16对由流路切换阀15所选择的溶剂瓶中蓄积的水系溶剂进行压送。

有机溶剂供给部20包含多个(本例中为4个)溶剂瓶21～24、流路切换阀25及送液泵26。溶剂瓶21～溶剂瓶24分别蓄积不同种类的有机溶剂。流路切换阀25通过切换所述流路切换阀25与溶剂瓶21～溶剂瓶24之间的流路，从而从溶剂瓶21～溶剂瓶24中选择一个以上的溶剂瓶。送液泵26对由流路切换阀25所选择的溶剂瓶中蓄积的有机溶剂进行压送。

流路切换阀30可在第一流路状态与第二流路状态之间进行切换，设于送液泵16的下游。第一流路状态下，流路切换阀30将由送液泵16所压送的水系溶剂经由其中一个流路31导向未图示的废液部。第二流路状态中，流路切换阀30将由送液泵16所压送的水系溶剂经由另一个流路32导向混合部50。

流路切换阀30在测定水系溶剂的pH值时切换为第一流路状态，在试样的分析时切换为第二流路状态。pH计40设于流路31，对流路切换阀30处于第一流路状态时流经流路31的水系溶剂的pH值进行测定。由pH计40所测定的水系溶剂的pH值也可作为分析方法的一个参数而由处理部90保存。此时，可容易地进行探索最优分析方法的方法探索(methodscouting)。

流路31的下游部连接于经维持于大气压的废液部，因而流路31内的压力相对低。具体而言，流路31内的压力小于1MPa，本例中为0.4MPa～0.2MPa。另一方面，流路32的下游部连接于下文将述的分离管柱，因而流路32内的压力相对较高。具体而言，流路32内的压力大于40MPa，本例中为100MPa以上。而且，本例中，流路31的截面积大于流路32的截面积。

混合部50例如为梯度混合器(gradient mixer)。混合部50将流路切换阀30处于第二流路状态时流经流路32的水系溶剂、与由送液泵26所压送的有机溶剂以任意的比率混合，由此生成各种溶剂(流动相)。试样供给部60例如为自动进样器(auto sampler)，将分析对象的试样与由混合部50所混合的溶剂一起导入至分离管柱。

管柱烘箱70收容多个(本例中为6个)分离管柱71～76及流路切换阀77、流路切换阀78，将内部的温度调整为一定值。多个分离管柱71～76在流路切换阀77与流路切换阀78之间并联。各分离管柱71～76将所导入的试样利用化学性质或组成的差异而分离为各成分。流路切换阀77、流路切换阀78通过切换此流路切换阀77、流路切换阀78间的流路，从而从分离管柱71～分离管柱76中选择供导入试样的分离管柱。

检测器80例如包含吸光度检测器或折射率(Refractive Index，RI)检测器，对由任一个管柱所分离的试样的成分进行检测。经过检测器80的试样及溶剂经由流路81而废弃。

处理部90包含中央处理器(Central Processing Unit，CPU)及存储器(memory)、或微计算机(microcomputer)等，控制水系溶剂供给部10、有机溶剂供给部20、流路切换阀30、混合部50、试样供给部60、管柱烘箱70及检测器80各自的动作。而且，处理部90对由检测器80所得的检测结果进行处理，由此生成表示管柱对各成分的保持时间与检测强度的关系的色谱图。

(2)效果

本实施方式的液相色谱仪100中，利用水系溶剂供给部10来供给水系溶剂。当流路切换阀30处于第一流路状态时，将由水系溶剂供给部10所供给的水系溶剂引导至流路31。利用设于流路31的pH计40，对被引导至流路31的水系溶剂的pH值进行测定。

当流路切换阀30处于第二流路状态时，由水系溶剂供给部10供给的水系溶剂被引导至流路32。利用有机溶剂供给部20来供给有机溶剂。利用混合部50将流经流路32的水系溶剂与由有机溶剂供给部20所供给的有机溶剂混合。利用试样供给部60来供给分析对象的试样。将经混合的溶剂及所供给的试样导入至分离管柱71～分离管柱76的任一个。利用检测器80对经过分离管柱71～分离管柱76的任一个的试样进行检测。

根据所述结构，即便在将有机溶剂用于试样的分析的情况下，有机溶剂也不会流至流路31，因而不会在流经流路31的水系溶剂中混合有机溶剂。因此，可在流路31中准确地测定流动相的pH值。而且，即便从pH计40释出KCl(氯化钾)等的电解质溶液，所述电解质溶液也不会流至流路32。因此，电解质溶液不会流至检测器80，也不会对试样的分析造成影响。

进而，流路31内的压力小于1MPa。如此，流路31内的压力充分低，因而即便在将pH计40设于流路31的情况下，也容易防止pH计40破损。而且，流路切换阀30位于较试样供给部60更靠上游，因而即便在由试样供给部60供给的试样包含蛋白质的情况下，所述蛋白质也不会附着于pH计40的玻璃电极。这些情况的结果为，可准确地测定流动相的pH值而不妨碍试样的准确分析。

而且，本实施方式中，流路31的截面积大于流路32的截面积。此时，即便在流路切换阀30刚从第二流路状态切换至第一流路状态后，也不会将水系溶剂以高压力的状态引导至流路31。由此，可更容易地防止设于流路31的pH计40破损。

(3)变形例

本实施方式中，液相色谱仪100包含有机溶剂供给部20，但实施方式不限定于此。图2为表示变形例的液相色谱仪100的结构的示意图。如图2所示，变形例的液相色谱仪100包含水系溶剂供给部10a代替有机溶剂供给部20。水系溶剂供给部10a具有与水系溶剂供给部10相同的结构，包含溶剂瓶11a～溶剂瓶14a、流路切换阀15a及送液泵16a。

流路切换阀30配置于混合部50与试样供给部60之间。混合部50将由水系溶剂供给部10的送液泵16所压送的水系溶剂、与由水系溶剂供给部10a的送液泵16a所压送的水系溶剂以任意的比率混合，由此生成各种水系溶剂作为流动相。

第一流路状态下，流路切换阀30将由混合部50所生成的水系溶剂经由其中一个流路31导向未图示的废液部。第二流路状态下，流路切换阀30将由混合部50所生成的水系溶剂经由另一个流路32导向试样供给部60。pH计40设于流路31，对流路切换阀30处于第一流路状态时流经流路31的水系溶剂的pH值进行测定。

所述结构中，流路切换阀30也位于较试样供给部60更靠上游，因而即便在由试样供给部60所供给的试样包含蛋白质的情况下，所述蛋白质也不会附着于pH计40的玻璃电极。因此，可准确地测定水系溶剂的pH值而不妨碍试样的准确分析。

变形例中，液相色谱仪100包含水系溶剂供给部10a及混合部50，但实施方式不限定于此。液相色谱仪100也可不含水系溶剂供给部10a及混合部50。此时，流路切换阀30配置于水系溶剂供给部10与试样供给部60之间。

(4)另一实施方式

所述实施方式中，流路切换阀30设于送液泵16的下游。根据所述结构，即便在将多种水系溶剂用于试样的分析的情况下，也在送液泵16的下游将多种水系溶剂充分混合。由此，可在流路31中利用pH计40准确地测定流动相的pH值。另一方面，实施方式不限定于此。流路切换阀30也可设于送液泵16的上游。

以下，针对另一实施方式的液相色谱仪100，对与图1的液相色谱仪100的不同点进行说明。图3为表示另一实施方式的液相色谱仪100的结构的示意图。如图3所示，本实施方式中，流路切换阀30配置于流路切换阀15与送液泵16之间。

第一流路状态下，流路切换阀30将由流路切换阀15所选择的溶剂瓶中蓄积的水系溶剂经由其中一个流路31导向未图示的废液部。第二流路状态下，流路切换阀30将由流路切换阀15所选择的溶剂瓶中蓄积的水系溶剂经由另一个流路32导向送液泵16。pH计40设于流路31，对流路切换阀30处于第一流路状态时流经流路31的水系溶剂的pH值进行测定。

本实施方式中，流路32内的压力相对低。因此，即便在流路切换阀30刚从第二流路状态切换至第一流路状态后，也不会将水系溶剂以高压力的状态引导至流路31。因此，可更容易地防止设于流路31的pH计40破损。此外，本实施方式中，液相色谱仪100包含有机溶剂供给部20及混合部50，但实施方式不限定于此。液相色谱仪100也可不含有机溶剂供给部20及混合部50。

(5)参考例

针对参考例的液相色谱仪，对与图1的液相色谱仪100的不同点进行说明。图4为表示第一参考例的液相色谱仪的结构的示意图。如图4所示，本例的液相色谱仪100A不含有机溶剂供给部20、流路切换阀30及混合部50。而且，pH计40设于流路81，对流经流路81的流动相的pH值进行测定。

本例中，流路81内的压力相对低。因此，防止pH计40破损。而且，pH计40位于较检测器80更靠下游，因而从pH计40释出的电解质溶液不会流入检测器80。因此，如本例般，在溶剂不含有机溶剂的情况下，可在流路81中利用pH计40准确地测定水系溶剂的pH值而不妨碍试样的准确分析。

但是，pH计40位于较试样供给部60更靠下游，因而在由试样供给部60所供给的试样包含蛋白质的情况下，所述蛋白质会附着于pH计40的玻璃电极。因此，无法在流路81中利用pH计40准确地测定水系溶剂的pH值。

图5为表示第二参考例的液相色谱仪的结构的示意图。如图5所示，本例的液相色谱仪100B不含流路切换阀30。而且，与第一变形例同样地，将pH计40设于位于较检测器80更靠下游且内部的压力相对低的流路81。此时，防止pH计40破损及试样的准确分析受妨碍。

但是，包含有机溶剂的溶剂流经pH计40，因而无法准确地测定水系溶剂的pH值。而且，在由试样供给部60所供给的试样包含蛋白质的情况下，所述蛋白质也会附着于pH计40的玻璃电极，因而无法准确地测定水系溶剂的pH值。

图6为表示第三参考例的液相色谱仪的结构的示意图。如图6所示，本例的液相色谱仪100C不含流路切换阀30，在送液泵16与混合部50之间的流路设有pH计40。此时，防止有机溶剂流经pH计40。但是，所述流路内的压力相对较高，因而pH计40破损。因此，无法测定水系溶剂的pH值。而且，从pH计40释出的电解质溶液流入检测器80。因此，妨碍试样的准确分析。

图7为表示第四参考例的液相色谱仪的结构的示意图。如图7所示，本例的液相色谱仪100D不含流路切换阀30，在流路切换阀15与送液泵16之间的流路设有pH计40。此时，防止有机溶剂流经pH计40及pH计40破损。但是，从pH计40释出的电解质溶液流入检测器80，因而妨碍试样的准确分析。

(6)形态

(第1项)一形态的液相色谱仪也可包括：

第一流路；

第二流路；

第一水系溶剂供给部，供给水系溶剂；

流路切换阀，可切换为第一流路状态与第二流路状态，所述第一流路状态将由所述第一水系溶剂供给部所供给的水系溶剂引导至所述第一流路，所述第二流路状态将由所述第一水系溶剂供给部所供给的水系溶剂引导至所述第二流路；

pH计，设于所述第一流路，对所述流路切换阀处于所述第一流路状态时流经所述第一流路的水系溶剂的pH值进行测定；

试样供给部，在较所述流路切换阀更靠下游，供给分析对象的试样；

分离管柱，导入有经过所述第二流路的溶剂及由所述试样供给部所供给的试样；以及

检测器，对经过所述分离管柱的试样进行检测。

所述液相色谱仪中，利用第一水系溶剂供给部来供给水系溶剂。当流路切换阀处于第一流路状态时，将由第一水系溶剂供给部所供给的水系溶剂引导至第一流路。利用设于第一流路的pH计，对被引导至第一流路的水系溶剂的pH值进行测定。

当流路切换阀处于第二流路状态时，将由第一水系溶剂供给部所供给的水系溶剂引导至第二流路。在较流路切换阀更靠下游，利用试样供给部来供给分析对象的试样。将经过第二流路的溶剂及所供给的试样导入至分离管柱。利用检测器对经过分离管柱的试样进行检测。

根据所述结构，流路切换阀位于较试样供给部更靠上游，因而即便在由试样供给部所供给的试样包含蛋白质的情况下，所述蛋白质也不会附着于pH计的玻璃电极。因此，可在第一流路中准确地测定流动相的pH值。而且，即便在从pH计释出电解质溶液的情况下，所述电解质溶液也不会流至第二流路。因此，电解质溶液不会流至检测器，也不会对试样的分析造成影响。这些情况的结果为，可准确地测定流动相的pH值而不妨碍试样的准确分析。

(第2项)根据第1项所记载的液相色谱仪，也可还包括：

有机溶剂供给部，供给有机溶剂；以及

混合部，将所述流路切换阀处于所述第二流路状态时流经所述第二流路的水系溶剂、与由所述有机溶剂供给部所供给的有机溶剂混合，

所述流路切换阀设于所述混合部的上游，

所述分离管柱中，导入有由所述混合部所混合的溶剂及由所述试样供给部所供给的试样。

根据所述结构，即便在将有机溶剂用于试样的分析的情况下，有机溶剂也不会流至第一流路，因而流经第一流路的水系溶剂中不会混合有机溶剂。因此，可在第一流路中准确地测定流动相的pH值。

(第3项)根据第2项所记载的液相色谱仪，其中也可为，

所述第一水系溶剂供给部包含：

选择部，从多种水系溶剂中选择一种以上的水系溶剂；以及

送液泵，压送由所述选择部所选择的水系溶剂，

所述流路切换阀设于所述送液泵与所述混合部之间，在处于所述第二流路状态时，将由所述送液泵所压送的水系溶剂经由所述第二流路引导至所述混合部。

根据所述结构，即便在将多种水系溶剂用于试样的分析的情况下，也在送液泵的下游将多种水系溶剂充分混合。由此，可准确地测定流动相的pH值。

(第4项)根据第1项或第2项所记载的液相色谱仪，其中也可为，

所述第一水系溶剂供给部包含：

选择部，从多种水系溶剂中选择一种以上的水系溶剂；以及

送液泵，压送由所述选择部所选择的水系溶剂，

所述流路切换阀设于所述选择部与所述送液泵之间，在处于所述第二流路状态时，将由所述选择部所选择的水系溶剂经由所述第二流路引导至所述送液泵。

根据所述结构，第二流路内的压力相对低，因而即便在流路切换阀刚从第二流路状态切换至第一流路状态后，也不会将水系溶剂以高压力的状态引导至第一流路。由此，可更容易地防止设于第一流路的pH计破损。

(第5项)根据第1项所记载的液相色谱仪，也可还包括：

第二水系溶剂供给部，供给水系溶剂；以及

混合部，将由所述第一水系溶剂供给部所供给的水系溶剂、与由所述第二水系溶剂供给部所供给的水系溶剂混合，

所述流路切换阀在处于所述第一流路状态时，将由所述混合部所混合的水系溶剂引导至所述第一流路，在处于所述第二流路状态时，将由所述混合部所混合的水系溶剂引导至所述第二流路，

所述分离管柱中，导入有经过所述第二流路的溶剂及由所述试样供给部所供给的试样。

此时，利用混合部将由第一水系溶剂供给部及第二水系溶剂供给部分别供给的水系溶剂混合，将经混合的水系溶剂引导至第一流路。由此，可在第一流路中准确地测定流动相的pH值。

(第6项)根据第1项至第5项中任一项所记载的液相色谱仪，其中，

所述第一流路内的压力也可小于1MPa。

根据所述结构，第一流路内的压力充分低，因而即便在将pH计设于第一流路的情况下，也容易防止pH计破损。由此，可在第一流路中准确地测定流动相的pH值。

(第7项)根据第1项至第6项中任一项所记载的液相色谱仪，其中，

所述第一流路的截面积也可大于所述第二流路的截面积。

此时，即便在流路切换阀刚从第二流路状态切换至第一流路状态后，也不会将水系溶剂以高压力的状态引导至第一流路。由此，可更容易地防止设于第一流路的pH计破损。

(第8项)另一形态的分析执行方法也可包括下述步骤：

利用水系溶剂供给部来供给水系溶剂；

当流路切换阀处于第一流路状态时，将由所述水系溶剂供给部所供给的水系溶剂引导至第一流路；

利用设于所述第一流路的pH计对被引导至所述第一流路的水系溶剂的pH值进行测定；

当流路切换阀处于第二流路状态时，将由所述水系溶剂供给部所供给的水系溶剂引导至第二流路；

在较所述流路切换阀更靠下游，供给分析对象的试样；

将经过所述第二流路的溶剂及所供给的试样导入至分离管柱；以及

对经过所述分离管柱的试样进行检测。

根据所述分析执行方法，流路切换阀位于较供给试样的位置更靠上游，因而即便在所供给的试样包含蛋白质的情况下，所述蛋白质也不会附着于pH计的玻璃电极。因此，可在第一流路中准确地测定流动相的pH值。而且，即便在从pH计释出电解质溶液的情况下，所述电解质溶液也不会流至第二流路。因此，电解质溶液不会流至检测器，也不会对试样的分析造成影响。这些情况的结果为，可准确地测定流动相的pH值而不妨碍试样的准确分析。

Claims (7)

1.一种液相色谱仪，其中，包括：

第一流路；

第二流路；

第一水系溶剂供给部，包含送液泵，并供给水系溶剂；

流路切换阀，设置于比所述送液泵更靠上游的位置，能够切换为第一流路状态与第二流路状态，所述第一流路状态将由所述第一水系溶剂供给部所供给的水系溶剂引导至所述第一流路，所述第二流路状态将由所述第一水系溶剂供给部所供给的水系溶剂引导至所述第二流路；

酸碱度计，设于所述第一流路，对所述流路切换阀处于所述第一流路状态时流经所述第一流路的水系溶剂的酸碱度值进行测定；

试样供给部，对较所述流路切换阀更靠下游的位置，供给分析对象的试样；

分离管柱，导入有经过所述第二流路的溶剂及由所述试样供给部所供给的试样；以及

检测器，对经过所述分离管柱的试样进行检测。

2.根据权利要求1所述的液相色谱仪，其中，还包括：

有机溶剂供给部，供给有机溶剂；以及

混合部，将所述流路切换阀处于所述第二流路状态时流经所述第二流路的水系溶剂、与由所述有机溶剂供给部所供给的有机溶剂混合，

所述流路切换阀设于所述混合部的上游，

所述分离管柱中，导入有由所述混合部所混合的溶剂及由所述试样供给部所供给的试样。

3.根据权利要求2所述的液相色谱仪，其中，所述第一水系溶剂供给部包含：

选择部，从多种水系溶剂中选择一种以上的水系溶剂；以及

所述送液泵压送由所述选择部所选择的水系溶剂，

所述流路切换阀设于所述送液泵与所述混合部之间，在处于所述第二流路状态时，将由所述送液泵所压送的水系溶剂经由所述第二流路引导至所述混合部。

4.根据权利要求1或2所述的液相色谱仪，其中，所述第一水系溶剂供给部包含：

选择部，从多种水系溶剂中选择一种以上的水系溶剂；以及

所述送液泵压送由所述选择部所选择的水系溶剂，

所述流路切换阀设于所述选择部与所述送液泵之间，在处于所述第二流路状态时，将由所述选择部所选择的水系溶剂经由所述第二流路引导至所述送液泵。

5.根据权利要求1、2或3所述的液相色谱仪，其中，所述第一流路内的压力小于1MPa。

6.根据权利要求1、2或3所述的液相色谱仪，其中，所述第一流路的截面积大于所述第二流路的截面积。

7.一种分析执行方法，其中，包括下述步骤：

利用水系溶剂供给部来供给水系溶剂，所述水系溶剂供给部包含送液泵；

当流路切换阀处于第一流路状态时，将由所述水系溶剂供给部所供给的水系溶剂引导至第一流路，所述流路切换阀设置于比所述送液泵更靠上游的位置；

利用设于所述第一流路的酸碱度计对被引导至所述第一流路的水系溶剂的酸碱度值进行测定；

当流路切换阀处于第二流路状态时，将由所述水系溶剂供给部所供给的水系溶剂引导至第二流路；

对较所述流路切换阀更靠下游的位置，供给分析对象的试样；

将经过所述第二流路的溶剂及所供给的试样导入至分离管柱；以及

对经过所述分离管柱的试样进行检测。