CN113230420A - 包含亚甲蓝类活体染料的水基乳剂、该乳剂的应用以及包含该乳剂的药物组合物 - Google Patents

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Abstract

本申请公开涉及一种稳定的水基乳剂，其包含亚甲蓝类活体染料和油脂，并且在该乳剂中，所述油脂的浓度为<50重量％，以及所述亚甲蓝类活体染料与所述油脂的重量比为>1/75或(1‑75)/75、优选为≧1/37.5或(1‑37.5)/37.5。还涉及该乳剂的应用和制备方法，以及包含该乳剂的药物组合物。

Description

包含亚甲蓝类活体染料的水基乳剂、该乳剂的应用以及包含 该乳剂的药物组合物
技术领域
本申请公开涉及一种包含亚甲蓝类活体染料的水基乳剂、该乳剂的应用以及包含该乳剂的药物组合物，以及包括施用该水基乳剂或药物组合物的一种治疗实体肿瘤的方法。
背景技术
可注射油可以作为液体载体(例如显影载体、栓塞载体、缓释载体等等)用于制备用于治疗实体肿瘤的注射剂。然而，注射剂量限制往往限制了这些可注射油的临床应用。例如，包含植物油和显影物质(例如碘)的油脂(例如碘化油)作为显影剂的可用剂量约为<25ml。又例如，当植物油用作栓塞载体时，栓塞剂量也约为<25ml。要得到较完全的造影或/和栓塞效果须提高显影剂或/和栓塞剂用量，但油脂剂量过大又易引发较严重副作用(例如加重肝功能损害)。加入副作用更小的水稀释油脂有利于提高注射剂量(例如≥50ml)。可是油脂和水之间互相排斥，难以形成稳定的乳化体系，甚至在注射完成前就出现非极性液相和极性液相的两相分层。例如，碘化油-水混合液体用作显影剂时，往往需要高比例(例如W油脂/W水≥1.0)的油脂来实现有效乳化从而其剂量提高不大。又例如，碘化油-水混合液体用作常规抗肿瘤药的载体时，也往往需要高比例(例如W油脂/W水≥1.0)的油脂来实现有效乳化从而其剂量提高仍然不大。
因而，为了提高包含油脂和水的注射乳剂的稳定性或/和降低必须使用的油脂浓度(剂量)，需要开发新的乳化增强技术，以满足现有技术尚不能满足的该种需求。
发明内容
根据本发明的一个方面，其提供一种稳定的水基乳剂，其包含亚甲蓝类活体染料和油脂，并且在该乳剂中，所述油脂的浓度为<50重量％，以及所述亚甲蓝类活体染料与所述油脂的重量比为>1/75或(1-75)/75、优选为≧1/37.5或(1-37.5)/37.5。该水基乳剂可以是可注射的水基乳剂。
根据本发明的另一个方面，其提供根据本发明的水基乳剂在制备用于治疗实体肿瘤的药物组合物中的应用。在一个实施方案中，所述药物组合物还任选地包含一种或多种抗肿瘤药。
根据本发明的再一个方面，其提供一种用于治疗实体肿瘤的药物组合物，其包含根据本发明的水基乳剂。在一个实施方案中，所述药物组合物还可任选地包含一种或多种抗肿瘤药。
根据本发明的又一个方面，其提供一种治疗实体肿瘤的方法，其包括向有此需要的个体体内给药有效治疗所需体积的根据本发明的水基乳剂或者药物组合物。
根据本发明的又一个方面，其提供一种制备根据本发明的水基乳剂的方法，其包括以下步骤：1)制备包含亚甲蓝类活体染料和任选存在的其他水溶性组分的水溶液；2)制备包含油脂和任选存在的其他亲脂性组分的油溶液；以及3)将步骤1)中制备的水溶液与步骤2)中制备的油溶液充分混合。
根据本发明的又一个方面，其提供一种制备根据本发明的药物组合物的制备方法，其包括以下步骤：1)制备包含亚甲蓝类活体染料、任选存在的水溶性抗肿瘤药和任选存在的其他水溶性组分的水溶液；2)制备包含油脂、任选存在的亲脂性抗肿瘤药和任选存在的其他亲脂性组分的油溶液；3)将步骤1)中制备的水溶液与步骤2)中制备的油溶液充分混合。
根据本发明的又一个方面，其提供一种用于治疗实体肿瘤的装置，其包括容器A和容器B，其中所述容器A容纳可注射水溶液，其中所述水溶液包含根据制剂或给药浓度所需量的亚甲蓝类活体染料和任选存在的其他水溶性组分；以及所述容器B容纳可注射油溶液，其中所述油溶液包含根据制剂或给药浓度所需量的油脂和任选存在的其他亲脂性组分；其中所述水溶液与所述油溶液的配比使得在由此形成的乳剂中，所述油脂的浓度为<50重量％，以及所述亚甲蓝类活体染料与所述油脂的重量比为>1/75或(1-75)/75、优选为≧1/37.5或(1-37.5)/37.5。该水基乳剂可以是可注射的水基乳剂。
根据本发明的又一个方面，其提供一种显影剂，其为包含亚甲蓝类活体染料和碘化油的水基乳剂，并且在该乳剂中，所述碘化油的浓度为<50重量％，以及所述亚甲蓝类活体染料与所述碘化油的重量比为>1/75或(1-75)/75、优选为≧1/37.5或(1-37.5)/37.5。
根据本发明的注射用水基乳剂与实体肿瘤瘤内给药的注射乳剂的现有技术相比具有以下优点：优选条件下的亚甲蓝类活体染料可以在低油脂浓度条件下明显提高乳剂的油相-水相分散稳定性。例如，与利用现有乳剂作为显影注射剂的技术相比，显示出明显提高(2倍至20倍以上)的可用剂量、从而可明显提高显影区域；与利用现有乳剂作为栓塞注射剂的技术相比，显示出明显提高(2倍至20倍以上)的可用剂量、从而可明显提高栓塞区域和/或栓塞疗效；与利用现有乳剂作为显影、栓塞和/或病理结构破坏药物注射剂的技术相比，显示出可用剂量最大化、活性成分水溶液被油脂的稀释最小化、等等优点，可以产生更好的药效。根据包含本发明的注射用水基乳剂的药物组合物与实体肿瘤瘤内给药的抗肿瘤注射乳剂的现有技术相比具有以下优点：低油脂浓度可明显提高(2倍至20倍以上)可用剂量，且可以更好地保留抗肿瘤药的活性。此外，该应用和组合物制备方便、成本便宜，特别有助于使难以承受高额费用的广大人群也享受到安全、有效治疗。
具体实施方式
本发明的发明人在一个配制油-水两相混合物乳剂的实验中意外地发现，亚甲蓝的加入在某些特定的条件下能明显减小油-水两相分层速度。这些特定条件并非亚甲蓝类活体染料在常规油-水两相混合物乳剂中的组分量比，而是如以下所限定的。
在本申请公开的一个方面中，其提供一种稳定的水基乳剂，其包含亚甲蓝类活体染料和油脂。在一个实施方案中，所述油脂的浓度为<50重量％。在一个实施方案中，所述亚甲蓝类活体染料与所述油脂的重量比(W油脂/W亚甲蓝类活体染料)为>1/75或(1-75)/75、优选为≧1/37.5或(1-37.5)/37.5。在一个实施方案中，该水基乳剂为可注射水基乳剂。
在本申请公开的另一个方面中，其提供上述水基乳剂在制备用于治疗实体肿瘤的药物组合物中的应用。在一个实施方案中，所述药物组合物还任选地包含一种或多种抗肿瘤药。
在本申请公开的又一个方面中，其提供一种用于治疗实体肿瘤的药物组合物，其包含可注射水基乳剂，且其中所述水基乳剂包含亚甲蓝类活体染料和油脂。在一个实施方案中，所述油脂的浓度为<50重量％。在一个实施方案中，所述亚甲蓝类活体染料与所述油脂的重量比(W油脂/W亚甲蓝类活体染料)为>1/75或(1-75)/75、优选为≧1/37.5或(1-37.5)/37.5。在一个实施方案中，所述药物组合物还包含一种或多种抗肿瘤药。
在本申请公开的又一个方面中，其提供一种治疗实体肿瘤的方法，其包括向有此需要的个体瘤内给药有效治疗量的水性乳剂或者包含该水性乳剂的药物组合物，且其中所述水基乳剂包含亚甲蓝类活体染料和油脂。在一个实施方案中，所述亚甲蓝类活体染料与所述油脂的重量比(W油脂/W亚甲蓝类活体染料)为>1/75或(1-75)/75、优选为≧1/37.5或(1-37.5)/37.5。在一个实施方案中，所述药物组合物还包含一种或多种抗肿瘤药。
在本申请公开的范围中，所用术语“油脂”是指药学上可以接受的油及其亲油性衍生物，优选为选自中国、美国或欧洲官方药典或指南所载的可注射油及其可注射亲油性衍生物。在本申请公开的范围中，所用术语“亚甲蓝类活体染料”是指在乳剂中显示出与亚甲蓝类似的抗油-水分层作用的活体染料。术语“活体染料”是指药学上可以接受的能够使靶区有选择性的将特定波长的光吸收或反射的芳香化合物，其可以例如包括以下之一种或多种有机染料及其衍生物：亚甲蓝(包括其水合物)、专利蓝、异硫蓝、甲苯胺蓝、台盼蓝、碱性蓝、伊红、碱性品红、结晶紫、龙胆紫、中性红、詹纳斯绿B、番红、孟加拉红等。
在本申请公开的范围中，所用术语“瘤内给药”是指将液体药物(例如注射剂)通过器械注入瘤内，例如经导管动脉灌注、经导管瘤内灌注、瘤内注射、等等。在本申请公开的范围中，所用术语“注射乳剂”是指使用时为乳浊液形态的注射剂。在本申请公开的范围中，所用术语“注射剂”是指合乎药管当局要求的供注入体内的药物，其在注入体内时通常具有液体(例如溶液、乳浊液、悬浊液、等等)形态，但在用前可以有不同剂型(例如包含浓溶液及其稀释液的浓缩注射剂、包含无菌粉末及其液化剂的粉针注射剂、包含油溶液和水溶液的乳剂注射剂、包含液相组分和微粒组分的混悬剂注射剂、等等)。所用术语“乳剂”或“乳浊液”是指包含亲油-亲水两相、且其中之一以液滴形式分散于另一之中的二相混合液体。所用术语“水性乳剂”是指亲水相与亲油相的重量比为大于1的乳剂。
在本申请公开的范围中，除非另有说明，术语“浓度”是指指定组分在一个给定组合物中的重量百分比浓度(w/w)。在本申请公开的范围中，术语“制剂浓度”是指指定组分在药物所有组分充分混合的形态中的浓度，例如当药剂为药物浓缩液时制剂浓度是指指定组分在用药前完全稀释的形态中的浓度。在本申请公开的范围中，术语“给药浓度”是指指定组分在药物的给药形态(例如以进入针管的注射液)中的浓度。在本申请公开的范围中，术语“靶区初浓度”是指药物进入靶区时指定组分在含药介质(例如含药血液)中的浓度。即使常规用药和局部用药的制剂浓度相同，它们的给药浓度也很可能不同。常规用药主要是因为药剂学(例如商业因素)、而非药理学的原因，其制剂浓度远远高于其血药浓度设计，因而临床上经常优选为稀释后给药(给药浓度小于制剂浓度)。而局部用药则因为药理上的原因，其给药浓度往往就是制剂浓度。此外，即使常规用药和局部用药的给药浓度相同，它们的靶区初浓度也必然大不相同。常规用药分布在血液中，再经历复杂的物理、化学、生物过程(例如不同药物组分在血液中的稀释、不同吸附、在某些器官中的不同滞留甚至代谢、等等)后进入靶区，其靶区初浓度(血药浓度)以经远远(千倍以上)低于其给药浓度。而局部用药的给药浓度(例如注射针孔或灌注管出口的浓度)实际上就是靶区初浓度。在本申请所公开的范围中，除非另有说明，所述组分的浓度均为其在本发明的药物组合物中的浓度，既是其制剂浓度，也是其给药浓度，还是其靶区初浓度。例如，在所有实施例中，给药浓度即为该靶区初浓度，还是其制剂浓度。
按照本发明申请以下所研究的药理，本发明的药物组合物中的亚甲蓝类活体染料在乳化中的作用必须大于或等于某个浓度阈值。在一个实施方案中，在其中所述乳剂或药物组合物中所述亚甲蓝类活体染料浓度(w/w)为>0.20％、≥0.30％。在一个实施方案中，在其中所述乳剂或药物组合物中所述亚甲蓝类活体染料浓度(w/w)为0.35-1.5％、优选为0.40-1.0％。
在一个实施方案中，在所述乳剂或药物组合物中，所述油脂的浓度(w/w)为≤30％、≤25％、优选为1-25％。在一个实施方案中，在所述乳剂或药物组合物中，所述油脂的浓度(w/w)为≤15％、为1-15％、优选为1-10％或1-5％。
在一个实施方案中，所述油脂优选为选自注射用油及其衍生物，其中所述注射用油优选为选自以下之一种或多种：油酸乙脂、中链(C6-10)脂肪酸甘油脂、肉豆菀酸异丙脂、大豆油、茶油、橄榄油、蓖麻油、花生油、棉籽油、玉米油、亚麻籽油、罂粟籽油、芝麻油。在一个实施方案中，所述油脂包括碘化油。在一个实施方案中，所述碘化油中的碘含量为30-50％(w/w)。在一个实施方案中，所述碘化油包括超液化碘油。
在一个实施方案中，所述油脂为所述水性乳剂或所述药物组合物的液体载体。
在本申请公开的范围中，所用术语“液体载体”是指液态载体。在本申请公开的范围中，所用术语“载体”是指本身没有明显的化学药理作用、但能够将药物活性成分在不明显降低其活性的条件下输送到体内确定部位的物质，载体通常还可以具有以下之一种或多种作用：(1)缓释以增加药物活性成分的作用时间(例如缓释载体)；(2)提高药物活性成分的选择性(例如靶向载体)；(3)降低活性成分的毒性；(4)克服药剂构型中所遇到的困难问题(例如助分散载体)；(5)物理作用例如栓塞作用(例如栓塞载体)。
在一个实施方案中，所述亚甲蓝类活体染料优选为选自以下化合物及其衍生物之一种或多种：亚甲蓝、专利蓝、异硫蓝。
在一个实施方案中，所述药物组合物还包含一种或多种抗肿瘤药。在一个实施方案中，所述抗肿瘤药选自非常规抗肿瘤药或/和常规抗肿瘤药。在一个实施方案中，所述抗肿瘤药选自非常规抗肿瘤药。在一个实施方案中，所述非常规抗肿瘤药的浓度(w/w)为大于0.25％、优选为0.35-40％。在一个实施方案中，所述抗肿瘤药选自常规抗肿瘤药。在一个实施方案中，所述常规抗肿瘤药的浓度(w/w)为大于0.05％、0.05-15％、优选为0.5-10％。在一个实施方案中，所述抗肿瘤药包括非常规抗肿瘤药和常规抗肿瘤药，以及在所述药物组合物中：所述非常规抗肿瘤药的浓度(w/w)为大于0.25％、优选为0.35-40％；所述常规抗肿瘤药的浓度(w/w)为大于0.05％、0.05-15％、优选为0.5-10％。
在本申请公开的范围中，所用术语“常规抗肿瘤药”是指在细胞实验中显示出肿瘤细胞抑制作用、在动物实验中通过吸收作用也显示出可以靶向肿瘤细胞从而如所预期地产生抑瘤作用的化合物，例如被药政当局(例如FDA)批准用作针对特定实体肿瘤的常规化疗药物。在本申请公开的范围中，所用术语“非常规抗肿瘤药”是指局部有效的常规无效药物，该局部有效通常要求在特定条件下给药(例如以一定的靶区初浓度瘤内给药)。所用术语“常规无效药物”区别于术语“常规抗肿瘤药”，是指常规抗肿瘤药之外的药物，具体而言，是指在细胞实验中显示或不显示出肿瘤细胞抑制作用、但在动物实验中通过吸收作用并不显示出可以靶向肿瘤细胞从而如所预期地产生抑瘤作用的化合物。
在一个实施方案中，所述抗肿瘤药包括非常规抗肿瘤药，且其中所述非常规抗肿瘤药选自以下组之一种或多种：氨基酸营养素，其在药物组合物中的浓度(w/w)为5-50％；强碱，其在药物组合物中的浓度为≥0.5％、或0.5-6％、优选为0.5-1.5％或1.5-6％；弱碱，其在药物组合物中的浓度(w/w)为3.5-50％；强酸，其在药物组合物中的浓度为≥0.5％、或0.5-3％、优选为0.5-1.5％或1.5-3％；弱酸，其在药物组合物中的浓度(w/w)为0.5-50％。
在本申请公开的范围中，所用术语“氨基酸类营养药物”是指药学上可以接受的具有营养保健效应的氨基酸类化合物，优选为选自中国、美国或欧洲官方药典或指南所载的单方或复方氨基酸类营养药中的氨基酸类化合物。在一个实施方案中，所述氨基酸类营养药物选自药典所载可用作营养药的氨基酸类化合物、优选为选自以下氨基酸及其衍生物之一种或多种：精氨酸、丙氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、脯氨酸、丝氨酸。在一个实施方案中，所述氨基酸类营养药物优选为选自以下之一种或多种：精氨酸、谷氨酸盐酸盐、甘氨酸、组氨酸、赖氨酸盐酸盐、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、丝氨酸、丙氨酰-谷氨酰胺。在一个实施方案中，所述氨基酸类营养药物优选为包括精氨酸。在一个实施方案中，所述氨基酸类营养药物优选为包括精氨酸和丝氨酸。在一个实施方案中，在所述组合物所述氨基酸类营养药物浓度优选为≥10％、为10-50％。在一个实施方案中，在所述组合物所述氨基酸类营养药物浓度优选为≥10％、10-35％，更优选为14-35％或20-35％。
在一个实施方案中，所述非常规抗肿瘤药包括一种或多种强碱，且在所述药物组合物中所述强碱浓度为≥0.8％，为0.8-4％，优选为0.8-1.5％(当所述强碱不与弱酸或/和弱碱合用时)或1.5-4％(当所述强碱与弱酸或/和弱碱合用时)。在一个实施方案中，所述强碱为选自以下之一种或多种：氢氧化纳、氢氧化钾、氢氧化钙。在一个实施方案中，所述强碱包括氢氧化钠。
在一个实施方案中，所述非常规抗肿瘤药包括一种或多种弱碱，且所述弱碱的浓度为≥3.0％或≥5％，为3.0-35％或5-35％。在一个实施方案中，所述弱碱优选为选自以下组之一种或多种：多元弱酸无机盐、有机弱酸碱金属盐、含氮弱碱。在一个实施方案中，所述多元弱酸无机盐选自以下之一种或多种：磷酸钠、碳酸钠、碳酸钾、硼砂、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、碳酸氢钙、氢硫酸钠，且所述多元弱酸无机盐的浓度为≥3.0％或≥5％，为3.0-15％或5-10％。在一个实施方案中，所述多元弱酸无机盐优选为碳酸氢钠。在一个实施方案中，所述有机弱酸碱金属盐选自以下之一种或多种：邻苯二甲酸氢钾、乙酸钠、丙酸钠、丁酸钠、丙二酸钠、乳酸钠、柠檬酸钠、枸橼酸钠、苹果酸钠、十二烷基硫酸钠，且所述有机弱酸碱金属盐的浓度为≥5.0％，为5.0-15％或5-20％。在一个实施方案中，所述有机弱酸碱金属盐优选为乙酸钠。在一个实施方案中，所述含氮弱碱选自以下之一种或多种：氨水、氯化氨、2-氨基乙醇、氨丁三醇、三乙醇胺、三羟甲基氨基甲烷、2-氨基乙醇、氨丁三醇、三乙醇胺、葡甲胺、葡乙胺，且所述含氮弱碱的浓度为≥5.0％，为5.0-35％或15-50％。在一个实施方案中，所述非常规抗肿瘤药包括3±1％氢氧化钠和7±2％碳酸氢钠。
在一个实施方案中，所述非常规抗肿瘤药包括选自强酸之一种或多种，且其中所述强酸的浓度为≥0.8％，为0.8-5％，优选为0.8-1.5％(当所述强酸不与弱酸或/和弱碱合用时)或1.0-5.0％(当所述强酸与弱酸或/和弱碱合用时)。在一个实施方案中，所述强酸优选为选自以下之一种或多种：盐酸、硫酸、硝酸。在一个实施方案中，所述强酸优选为盐酸。
在一个实施方案中，所述非常规抗肿瘤药包括一种或多种弱酸，且所述弱酸的浓度为≥3.0％或≥5％，或为3.0-20％。在一个实施方案中，所述弱酸为选自以下具有0-3个羟基的C1-10脂族羧酸之一种或多种：乙酸、羟基乙酸、丙酸、丙二酸、丁酸、丁二酸、乳酸(2-羟基丙酸)、柠檬酸(2-羟基-1，2，3-丙三羧酸)、苹果酸(2-羟基丁二酸)、酒石酸、草酸、葡萄糖酸。在一个实施方案中，所述弱酸优选为乙酸。在一个实施方案中，所述非常规抗肿瘤药包括1.5±1％盐酸和8±3％乙酸。
在一个实施方案中，所述抗肿瘤药包括所述常规抗肿瘤药和所述氨基酸类营养药物。在一个实施方案中，所述抗肿瘤药包括所述常规抗肿瘤药和选自以下之一种或多种：所述强碱、所述弱碱、所述所述强酸、所述弱酸。在一个实施方案中，所述抗肿瘤药包括所述常规抗肿瘤药、所述氨基酸类营养药物、和选自以下之一种或多种：所述强碱、所述弱碱、所述所述强酸、所述弱酸。
在一个实施方案中，所述常规抗肿瘤药选自以下组之一种或多种：破坏DNA结构和功能的药物、嵌入DNA中干扰转录RNA的药物、干扰DNA合成的药物、影响蛋白质合成的药物。在一个实施方案中，所述常规抗肿瘤药为选自以下组之一种或多种：尿嘧啶衍生物类、环磷酰胺类、吉西他滨类、表柔比星类、抗肿瘤抗生素类、替尼泊苷、金属铂络合物、紫杉烷类。在一个实施方案中，所述常规抗肿瘤药优选为选自以下药物及其类似衍生物一种或多种：盐酸多柔比星、吉西他宾、顺铂、5-氟尿嘧啶、阿糖胞普、卡铂、丝裂霉素、卡托泊普、环磷酰胺、阿霉素、卡莫司汀、喜树碱、紫杉醇、长春新碱、榄香烯、多西他赛、福莫司汀。
在一个实施方案中，所述常规抗肿瘤药为选自水溶性常规抗肿瘤药。在一个实施方案中，所述常规抗肿瘤药为选自油溶性常规抗肿瘤药。在一个实施方案中，所述常规抗肿瘤药为选自水溶性常规抗肿瘤药和油溶性常规抗肿瘤药的组合。在一个实施方案中，所述水溶性常规抗肿瘤药包括以下组之一种或多种：盐酸多柔比星、吉西他宾、顺铂、5-氟尿嘧啶、阿糖胞普、卡铂、丝裂霉素、卡托泊普、环磷酰胺。在一个实施方案中，所述油溶性常规抗肿瘤药包括以下组之一种或多种：阿霉素、卡莫司汀、喜树碱、紫杉醇、长春新碱、榄香烯、多西他赛、福莫司汀。
在一个实施方案中，所述药物组合物还包括任选存在的其它组分。在一个实施方案中，所述其它组分包括以下之一种或多种：乙醇、1，2一丙二醇、甘油。在一个实施方案中，所述其它组分还包括其它载体，例如颗粒载体。
根据本发明的制备方法，本发明的水性乳剂的制备包括以下步骤：1)制备包含所述亚甲蓝类活体染料和任选存在的水可溶的其他组分的的水溶液；2)制备包含所述油脂和任选存在的所述油脂可溶的其他组分的油溶液；3)将步骤1)中制备的水溶液与步骤2)中制备的油溶液充分混合。
根据本发明的制备方法，本发明的药物组合物的制备至少包含以下步骤：1)制备包含所述亚甲蓝类活体染料、所述抗肿瘤药(假如选择水溶性抗肿瘤药)和任选存在的所述水可溶的其他组分的水溶液；2)制备包含所述油脂、所述抗肿瘤药(假如选择油溶性抗肿瘤药)和任选存在的所述油脂可溶的其他组分的油溶液；3)、将1)制备的水溶液与2)制备的油溶液充分混合为可注射乳剂。
根据本申请公开的一个实施方案，本发明的药物组合物之注射用粉针剂可通过包括以下步骤的方法制备：将上述药物组合物制备中的水溶液降温至10-25℃再进行冷冻干燥及压塞、轧盖，制备为除菌干粉；制备包含根据制剂或给药浓度所需量的所述任选存在的其他组分的无菌水性溶媒；和制备包含根据制剂或给药浓度所需量的所述油脂和任选存在的其他组分的无菌油溶液。所述除菌干粉优选为除菌冻干干粉，其制备方法包括：1)制备包含或不包含亚甲蓝类活体染料但包含任选存在的其他组分的水溶液；2)除菌过滤和分装；3)冷冻干燥；4)压塞、轧盖。所述冷冻干燥的工艺条件例如包括：预冻条件为在预冻温度-45℃保持4小时；升华干燥条件为升温速率为0.1℃/分钟、且升至-15℃时至少保持10小时；解吸附干燥条件为30℃保持6小时。使用时，将注射用粉针剂的无菌干粉复溶于包含或不包含亚甲蓝类活体染料的无菌水性溶媒中形成复溶液体药物，再与无菌油溶液充分混合获得乳剂。使用时，该乳剂可直接或稀释后用作瘤内给药液体药物。
在本申请公开中，所述乳剂或者药物组合物可用于通过瘤内给药来显影或/和治疗实体肿瘤。
在本申请公开的范围内，术语“肿瘤”是指由于细胞或变异的细胞异常增殖形成的肿块，其包括实体肿瘤。术语“实体肿瘤”是指具有瘤体的肿瘤，其可以是由于任何病理(恶性和非恶性)和处于任何阶段的肿瘤，包括例如按照肿瘤细胞类型进行分类的以下组：上皮细胞肿瘤、肉瘤、淋巴瘤、生殖细胞肿瘤、胚细胞瘤；以及包括按照肿瘤细胞集中区所在的器官或组织来命名的肿瘤，包括例如按照以下器官或组织来命名的肿瘤：皮肤、骨、肌肉、乳腺、肾、肝、肺、胆囊、胰腺、脑、食道、膀肌、大肠、小肠、脾、胃、前列腺、翠丸、卵巢或子宫。
具体而言，所述恶性肿瘤包括例如乳腺癌、胰腺癌、甲状腺癌、鼻咽癌、前列腺癌、肝癌、肺癌、肠癌、口腔癌、食道癌、胃癌、喉癌、睾丸癌、阴道癌、子宫癌、卵巢癌等。
所述非恶性肿瘤包括例如乳腺瘤、胰腺瘤、甲状腺瘤、前列腺瘤、肝瘤、肺瘤、肠瘤、口腔瘤、食道瘤、胃瘤、鼻咽瘤、喉瘤、睾丸瘤、阴道瘤、子宫瘤、输卵管瘤、卵巢瘤等。
本申请公开的所述药物组合物是一种治疗用药物组合物，当其用于显影或/和治疗实体肿瘤时，还可与其它介入疗法、全身化疗、免疫疗法、光动力疗法、声动力疗法、手术干预或此类疗法的组合相组合施用，以进一步提高疗效。在一个实施方案中，所述方法包括在瘤内用药所述药物组合物之前、期间或之后还任选进行一种或多种其它治疗，例如化疗、免疫疗法、放射疗法、手术、物理消融。
在根据本申请公开的显影或/和治疗实体肿瘤的应用和方法中，所述一种包含油脂、水、以及亚甲蓝类活体染料的可瘤内给药的药物组合物以它们在本申请公开的所述药物组合物的浓度或量比给药。该浓度或量比给药能够提供更好的乳化、也使得治疗产生更为有效的效果。
在本申请公开的另一个方面中，其提供一种用于治疗疾病、尤其是实体肿瘤的装置，其包括容器A和容器B，其中所述容器A容纳可注射水溶液，其中所述水溶液包含根据制剂或给药浓度所需量的亚甲蓝类活体染料和任选存在的其他水溶性组分；以及所述容器B容纳可注射油溶液，其中所述油溶液包含根据制剂或给药浓度所需量的油脂和任选存在的其他亲脂性组分；其中所述水溶液与所述油溶液的配比使得在由此形成的乳剂中，所述油脂的浓度为<50重量％，以及所述亚甲蓝类活体染料与所述油脂的重量比为>1/75或(1-75)/75、优选为≧1/37.5或(1-37.5)/37.5。本公开中对各术语的限定和描述也适用于此装置。
基于在下文中更详细描述的研究，尽管具体机理尚待进一步研究，本发明的药物组合物显示出在乳化方面的较好性能、从而使得利用包含本发明的药物组合物的药物进行治疗产生更为有效的效果。
实施例
通过以下具体实施例对本发明作进一步的说明，但不作为对本发明的限制。在以下实施例中，所有的试验动物均依照相关法规及行业自律进行。如无特殊说明，所有试验均按常规方法进行。
以下具体实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。以下实施例中所用的部分试剂列于表1。
表1
Figure BDA0002378650680000071
Figure BDA0002378650680000081
以下实施例中所用的实验动物均为通过专业实验动物公司购入，均为SPF(Specific Pathogen Free，无特定病原体)级动物。以小鼠为例，共有3种：BALB/c小鼠、裸小鼠、C57BL/6小鼠，其中裸小鼠为裸基因(nu)导入BALB/c小鼠获得的突变系(BALB/c–nu)小鼠。小鼠均为6-8周龄健康雌性、体重17.5-20.5g。
在以下实施例中，除非另有说明，皮下移植瘤动物试验均依据药管当局颁发的试验指南、按常规的实体瘤细胞皮下接种方法进行。除非另有说明，实体瘤长至所需体积(例如小鼠荷瘤30-500mm3)则为建模成功，然后采用PEMS 3.2软件(四川大学华西公共卫生学院编制)随机分为若干个实验组，每组6只动物。试验观察、测量和分析的项目，包括一般状态、体重、摄食量、动物移植物抗宿主病、实体瘤体积、瘤重、生存时间等。
肿瘤体积计算公式如下：
肿瘤体积(V)＝l/2×a×b2，其中a表示肿瘤长，b表示肿瘤宽。
肿瘤生长抑制率(本发明中简记为抑瘤率)计算公式如下：
抑瘤率Y(％)＝(CW-TW)/CW×100％，其中TW为研究组的平均瘤重；CW为阴性对照组的平均瘤重。
在以下实施例中，实验结果(例如瘤重)采用均数±标准差(x±s)表示，两个实验动物组与组均数之间的差别采用统计学软件SPSS 13.0或SPSS 19.0软件进行显著性检验来比较，检验选用统计量t来进行，检验水准α＝0.05，P<0.05表示差异有统计学意义，否则无统计学意义。
实施例1：水基乳剂的制备
按照上述本发明的水基乳剂的制备方法，可以配制出本发明众多不同的水基乳剂。本实施例制备的部分本发明的水基乳剂的组成列于表2。
表2
序号 油脂 亚甲蓝类活体染料 水性溶剂
1 5％碘化油 1％亚甲蓝 94％水
2 1％碘化油/4％油酸乙酯 1％亚甲蓝 94％水
3 1％碘化油/4％蓖麻油 1％亚甲蓝 94％水
以下列出本发明的水基乳剂的制备试验的几个例子。
例如按所需浓度量取药物组合物中的亚甲蓝类活体染料(例如1g亚甲蓝)、油脂(例如5g超液化碘油)、94ml水。然后，先将亚甲蓝类活体染料与水充分混合为水溶液，再将该水溶液和油脂分别分装为所需量(例如水溶液9g/瓶、碘化油1g/瓶)储存备用。在使用时，将亚甲蓝类活体染料水溶液与油脂按所需量比(例如9：1)充分混合，该混合物(例如表2中的制备物1)即可用作显影或/和栓塞注射剂。表2中的制备物2和3也可按该方法制备。
实施例2：包含常规抗肿瘤药物的水基乳剂组合物的制备
按照上述本发明的包含常规抗肿瘤药物的药物组合物的制备方法，可以配制出本发明众多不同的包含抗肿瘤药物的水基乳剂组合物。本实施例制备的部分本发明的水基乳剂组合物的组成列于表3。
表3
Figure BDA0002378650680000091
Figure BDA0002378650680000101
以下列出本发明的包含常规抗肿瘤药物的水基乳剂的制备试验的几个例子。
例如按所需浓度量取药物组合物中的亚甲蓝类活体染料(例如1g亚甲蓝)、油脂(例如2.5g碘化油、7.5g油酸乙酯)、水(例如73.5ml)、以及非水溶性常规抗肿瘤药物和其它成分(例如0.5g多西他赛、10g乙醇、5g丙二醇)。然后，先将亲脂性成分(例如多西他赛)溶于乙醇/丙二醇中并加入油酸乙酯和碘化油形成油溶液，再将亚甲蓝类活体染料、亲水性成分和水充分混合为水溶液，再将该水溶液和油溶液分别分装为所需量(例如水溶液7.45g/瓶、油溶液2.55g/瓶)储存备用。在使用时，将水溶液与油溶液按所需量比(例如7.45：2.55)充分混合，该混合物(例如表3中的制备物1)即可用作瘤内给药注射剂。表3中的制备物2、3也可按该方法制备。
例如按所需浓度量取药物组合物中的亚甲蓝类活体染料(例如1g亚甲蓝)、油脂(例如5g超液化碘化油)、水(例如93ml)、以及水溶性常规抗肿瘤药物和其它成分(例如1g5-氟尿嘧啶)。然后，先将亚甲蓝类活体染料、水溶性成分(例如5-氟尿嘧啶)与水充分混合为水溶液，再将该水溶液和油脂分别分装为所需量(例如水溶液9.5g/瓶、碘化油0.5g/瓶)储存备用。在使用时，将含水溶液与油脂按所需量比(例如9.5：0.5)充分混合，该混合物(例如表3中的制备物4)即可用作瘤内给药注射剂。表3中的制备物5和6也可按该方法制备。
例如按所需浓度量取药物组合物中的亚甲蓝类活体染料(例如1g亚甲蓝)、油脂(例如5g超液化碘化油)、水(例如76.5ml)、以及非常规抗肿瘤药物和其它成分(例如20g精氨酸)。然后，先将亚甲蓝类活体染料、水溶性成分(例如精氨酸)与水充分混合为水溶液，再将该水溶液和油脂分别分装为所需量(例如水溶液9.5g/瓶、碘化油0.5g/瓶)储存备用。在使用时，将含水溶液与油脂按所需量比(例如9.5：0.5)充分混合，该混合物(例如表3中的制备物7)即可用作瘤内给药注射剂。表3中的制备物8-14也可按该方法制备。
如将上述各制备中分装好(例如9-9.5g/瓶)的水溶液降温至10-25℃再进行冷冻干燥及压塞、轧盖，制备为除菌干粉备用。使用时将此除菌干粉在约相应量注射用水(例如7.5-8ml/瓶)中溶解(如有困难可加温至60℃溶解)、再将相应量的油脂或油溶液加入其中混匀即用。
实施例3：亚甲蓝类活体染料在油-水乳化中的作用研究
在一个实验中，乳剂样品及其组成如下表所示，其制备方法如下：首先，按样品1-4所需浓度分别量取变化重量蒸馏水(样品1为4ml，样品2为9ml，样品3和4分别为8.9ml)并加入4个烧杯中，再置之于磁力搅拌器搅拌(转速600rpm/min)，再按样品1-4所需浓度分别量取和加入变化重量亚甲蓝类活体染料(样品1和2为0g，样品3和4分别为0.1g)制备水溶液，然后按样品1-4所需浓度分别量取变化重量超液化碘油(样品1为6g，样品2、3和4分别为1g)分别加入4个烧杯。继续搅拌5分钟后分别用4×6根(每组6根)1ml注射器从烧杯中抽入1ml液体，注射器在竖立静止状态下观察各自出现分层的时间。表4给出各样品的分层时间。
表4
样品号 油脂浓度 水浓度 亚甲蓝类活体染料及其浓度 分层时间(min)
1 60％ 40％ 0 均为>60.0
2 10％ 90％ 0 均为<0.5
3 10％ 89％ 1％亚甲蓝 42±5
4 10％ 89％ 1％专利蓝 40±3
脂肪和水溶液混合形成的乳浊液在静止条件下会出现油相和水相的分层。分层的快慢是衡量乳化质量及其稳定性的重要指标。在上表中，样品2和样品1的分层时间差异有统计学意义(P<0.05)。按照现有技术的教导，超液化碘油仅在一个较高的浓度才能够和水较好乳化，这似乎与该结果一致。
然而，尽管它们有相同的脂肪浓度(10％)，样品3、4和样品2的分层时间差异均有统计学意义(分别为P<0.05)，而样品3和样品4的分层时间差异无统计学意义(P>0.05)，且该分层时间反映的水基乳剂稳定性可以满足临床给药需要。利用专利蓝或异硫蓝替代亚甲蓝，在上述乳剂中的应用也可以获得类似结果。
根据上述研究及更多的类似研究，亚甲蓝类活体染料可以提高水-油乳剂的稳定性，或/和降低制备该乳剂稳定所需的脂肪浓度(至少可以降低为<50％、优选为≤30％)。于是，亚甲蓝类活体染料可以和低浓度脂肪一起形成本发明的水性乳剂。
实施例4：水基乳剂中的亚甲蓝类活体染料/油脂量比研究
在一个实验中，乳剂样品及其组成如下表所示，其制备方法如下：首先，按样品1-6所需浓度分别量取变化重量蒸馏水(分别为8.5ml、8.4ml、8.3ml、8.1ml、7.7ml、6.9ml)并加入6个烧杯中，再置之于磁力搅拌器搅拌(转速600rpm/min)，再按样品1-6所需量比分别量取和加入变化重量亚甲蓝类活体染料(分别为亚甲蓝0g、0.1g、0.2g、0.4g、0.8g、1.6g)制备水溶液，然后分别量取1.5g超液化碘油加入6个烧杯。继续搅拌5分钟后分别用6×6根(每组6根)1ml注射器从烧杯中抽入1ml液体，注射器在竖立静止状态下观察各自出现分层的时间。表5给出各样品的分层时间。
表5
Figure BDA0002378650680000121
在上表中，样品1、2、3几乎瞬时即出现分层，但样品4-6分别与样品1的分层时间差异有统计学意义(均为P<0.05)，且该水性乳剂的分层时间随亚甲蓝类活体染料/油脂量比的增加而增加。
根据上述研究及更多的类似研究，亚甲蓝类活体染料作为本发明的水性乳剂中的必要成分，其条件为：亚甲蓝类活体染料/油脂量比(w/w)为>1/75或(1-75)/75、优选为≧1/37.5或(1-37.5)/37.5。
实施例5：包含抗肿瘤药物的药物组合物乳剂研究
乳剂样品及其组成如下表所示，其制备方法如下：首先，按样品1-12所需浓度分别量取变化重量蒸馏水(样品1为8.9ml，样品2、5为8.7ml，样品3、6为8.8ml，样品4为8.99ml，样品7为7.9ml，样品8为7.8ml，样品9、10为6.9ml，样品11为7.9ml，样品12为6.8ml)并加入12个烧杯中，再分别置于磁力搅拌器搅拌(转速600rpm/min)，再将等量亚甲蓝类活体染料(样品1-12均为0.1g亚甲蓝)分别加入杯中溶解，再按样品1-12所需浓度分别量取和加入抗肿瘤药物(样品1为0g，样品2、5为0.2ml，样品3、6为0.1g，样品4为0.01g，样品7为1g，样品8为1.1g，样品9、10为2g，样品11为1g，样品12为2.1g)制备水溶液，然后将等量超液化碘油(样品1-12均为1g)分别加入12个烧杯。继续搅拌5分钟后分别用12×6根(每组6根)1ml注射器从烧杯中抽入1ml液体，注射器在竖立静止状态下观察各自出现分层的时间。表6给出各样品的分层时间。
表6
Figure BDA0002378650680000122
Figure BDA0002378650680000131
在上表中，加入上述抗肿瘤药物的样品均显示出和样品1分层时间一致，既使加入较大量常规抗肿瘤药物(样品7-12)的组亦是如此。利用专利蓝或异硫蓝替代亚甲蓝，在上述乳剂中的应用也可以获得类似结果。
根据上述研究及更多的类似研究，在前述亚甲蓝类活体染料/油脂量比范围内，有效注射浓度的抗肿瘤药物(常规抗肿瘤药物或/和非常规抗肿瘤药物)的加入仍然能形成稳定的可注射水基乳剂。以下通过荷瘤动物实验对本发明的包含抗肿瘤药物的稳定的水性乳剂的活性进行进一步研究。
在一个试验中，试验动物为BALB/c小鼠，建模细胞为乳腺癌4T1细胞，以1×106个细胞/只在动物右侧腋部皮下进行移植瘤建模。成功建模的试验动物(瘤体平均体积326mm3)随机分为1个阴性对照组(0)和5个药物研究组(1-5)。阴性对照物为生理盐水，研究药物如下表所示。在此，水溶液均为按常规的水溶液配制方法(5-氟尿嘧啶或亚甲蓝在水中溶解)配置而成，乳剂均为按实施例2的制备方法(水溶液与超液化碘油混合乳化)配置而成。各实验组均以瘤内注射为瘤内给药方式。各组均每3日用药一次，一共3次，注射量150μl/只。用药结束后3日，对动物进行安乐死，解剖后测定瘤重，并从阴性对照组计算抑瘤率，结果示于表7。
表7
Figure BDA0002378650680000132
通常认为，瘤内用药的乳剂中的油脂也是一种缓释或/和栓塞载体，而缓释或/和栓塞有利于药效的提高。然而，在上表中，高油脂浓度的组5与溶液组1相比，两组间瘤重差异有统计学意义(p<0.05)且抑瘤率较低。此外，高油脂浓度限制了水溶性抗肿瘤药在乳剂中的浓度。而抗肿瘤药浓度较高的组(组4与3比较)显示出较高的抑瘤率，且两组间瘤重差异有统计学意义(p<0.05)。在5-氟尿嘧啶浓度相同的组3与5之间，瘤重差异有统计学意义(p<0.05)且组5的抑瘤率较低。
以上研究及更多的类似研究显示，在本发明的包含抗肿瘤药物的组合物中，所述油脂的浓度(w/w)优选为≤30％，≤25％，更优选为1-25％、1-10％或1-5％。以下实验在该优选条件下进行了更多研究。
在以下各实验中，成功建模的荷人癌细胞裸鼠均随机分为1个阴性对照组和6个研究组(A、B、C、D、E、F组)。所对应的阴性对照物为生理盐水，A、B、C、D、E、F组所用的研究药物分别为：0.9％亚甲蓝/1％5-氟尿嘧啶水溶液、0.9％亚甲蓝/1％5-氟尿嘧啶/5％超液化碘油/93.1％水乳剂、0.9％亚甲蓝/5％精氨酸/5％甘氨酸水溶液、0.9％亚甲蓝/5％精氨酸/5％甘氨酸/5％超液化碘油/84.1％水乳剂、0.9％亚甲蓝/7％碳酸氢钠/3％氢氧化钠水溶液、0.9％亚甲蓝/7％碳酸氢钠/3％氢氧化钠/5％超液化碘油/84.1％水乳剂。其中：水溶液均为按常规的水溶液配制方法(固态或/和液态抗肿瘤药物在水中溶解)配置而成，乳剂均为按实施例2的制备方法(水溶液与超液化碘油混合乳化)配置而成。各组均瘤内注射，每3日用药一次，一共3次，每次150μl/只。在用药结束后3日，对动物进行安乐死，解剖后测定瘤重，并从各实验的阴性对照组计算抑瘤率。
1)、在胰腺肿瘤治疗中的应用
在本研究试验中，成功建模的荷人胰腺癌细胞(PANC-1)裸鼠(瘤体平均体积319mm3)随机分为一个阴性对照组和6个研究组(A、B、C、D、E、F组)。A、B、C、D、E、F组的抑瘤率分别为：85.7％、81.2％、91.6％、86.3％、81.5％、76.3％，均合乎通常认为的有效抗肿瘤标准(抑瘤率≥40％)。
2)、在肺肿瘤治疗中的应用
在本研究试验中，成功建模的荷人肺癌细胞(A549)裸鼠(瘤体平均体积286mm3)随机分为一个阴性对照组和6个研究组(A、B、C、D、E、F组)。A、B、C、D、E、F组的抑瘤率分别为：76.8％、72.8％、84.6％、81.1％、73.4％、68.5％，均合乎通常认为的有效抗肿瘤标准(抑瘤率≥40％)。
3)、在甲状腺肿瘤治疗中的应用
在本研究试验中，成功建模的荷人甲状腺癌细胞(SW579)裸鼠(瘤体平均体积262mm3)随机分为一个阴性对照组和6个研究组(A、B、C、D、E、F组)。A、B、C、D、E、F组的抑瘤率分别为：84.1％、81.6％、89.7％、85.1％、81.2％、75.7％，均合乎通常认为的有效抗肿瘤标准(抑瘤率≥40％)。
4)、在前列腺肿瘤治疗中的应用
在本研究试验中，成功建模的荷人前列腺癌细胞(LNCaP/AR)裸鼠(瘤体平均体积254mm3)随机分为一个阴性对照组和6个研究组(A、B、C、D、E、F组)。A、B、C、D、E、F组的抑瘤率分别为：81.3％、74.8％、93.4％、90.1％、83.9％、76.1％，均合乎通常认为的有效抗肿瘤标准(抑瘤率≥40％)。
5)、在肝肿瘤治疗中的应用
在本研究试验中，成功建模的荷人肝癌细胞(HepG2)裸鼠(瘤体平均体积307mm3)随机分为一个阴性对照组和6个研究组(A、B、C、D、E、F组)。A、B、C、D、E、F组的抑瘤率分别为：91.3％、83.4％、95.2％、91.6％、82.7％、74.2％，均合乎通常认为的有效抗肿瘤标准(抑瘤率≥40％)。
6)、在头颈肿瘤治疗中的应用
在本研究试验中，成功建模的荷人头颈癌细胞(Fμda)裸鼠(瘤体平均体积294mm3)随机分为一个阴性对照组和6个研究组(A、B、C、D、E、F组)。A、B、C、D、E、F组的抑瘤率分别为：82.1％、78.2％、93.2％、90.8％、77.9％、70.4％，均合乎通常认为的有效抗肿瘤标准(抑瘤率≥40％)。
7)、在乳腺肿瘤治疗中的应用
在本研究试验中，成功建模的荷人鼻咽癌细胞(CNE1)裸鼠(瘤体平均体积316mm3)随机分为一个阴性对照组和6个研究组(A、B、C、D、E、F组)。A、B、C、D、E、F组的抑瘤率分别为：86.3％、81.9％、94.6％、89.7％、80.6％、72.8％，均合乎通常认为的有效抗肿瘤标准(抑瘤率≥40％)。
8)、在胃肿瘤治疗中的应用
在本研究试验中，成功建模的荷人胃癌细胞(BGC823)裸鼠(瘤体平均体积283mm3)随机分为一个阴性对照组和6个研究组(A、B、C、D、E、F组)。A、B、C、D、E、F组的抑瘤率分别为：79.6％、76.8％、87.4％、80.7％、75.2％、69.1％，均合乎通常认为的有效抗肿瘤标准(抑瘤率≥40％)。
9)、在卵巢肿瘤治疗中的应用
在本研究试验中，成功建模的荷人卵巢癌细胞(PA1)裸鼠(瘤体平均体积247mm3)随机分为一个阴性对照组和6个研究组(A、B、C、D、E、F组)。A、B、C、D、E、F组的抑瘤率分别为：80.7％、74.1％、88.6％、82.3％、76.5％、72.4％，均合乎通常认为的有效抗肿瘤标准(抑瘤率≥40％)。
利用实施例2方法制备的一些其它本发明的组合物，在上述各肿瘤治疗中的应用也可以获得类似结果。
本申请公开涉及以下项目：
1、一种稳定的水基乳剂，其包含亚甲蓝类活体染料和油脂，并且在该乳剂中，所述油脂的浓度为<50重量％，以及所述亚甲蓝类活体染料与所述油脂的重量比为>1/75或(1-75)/75、优选为≧1/37.5或(1-37.5)/37.5。
2、根据项目1的乳剂，其中在所述乳剂中，所述亚甲蓝类活体染料的浓度(w/w)为>0.20％、≥0.30％、为0.35-1.5％、优选为0.40-1.0％。
3、根据项目1的乳剂，其中在所述乳剂中，所述油脂的浓度(w/w)为≤30％、≤25％、优选为1-25％。
4、根据项目1-3之一的乳剂，其中所述油脂选自注射用油及其衍生物，其中所述注射用油为选自以下之一种或多种：油酸乙脂、中链(C6-10)脂肪酸甘油脂、肉豆菀酸异丙脂、大豆油、茶油、橄榄油、蓖麻油、花生油、棉籽油、玉米油、亚麻籽油、罂粟籽油、芝麻油。
5、根据项目4的乳剂，其中所述油脂包括碘化油。
6、根据项目1-5的乳剂，其中所述亚甲蓝类活体染料为选自以下化合物及其衍生物之一种或多种：亚甲蓝、专利蓝、异硫蓝。
7、根据项目1-6之一的水基乳剂在制备用于治疗实体肿瘤的药物组合物中的应用。
8、根据项目7的应用，其中所述药物组合物还任选地包含一种或多种抗肿瘤药。
9、一种用于治疗实体肿瘤的药物组合物，其包含根据项目1-6之一的水基乳剂。
10、根据项目9的药物组合物，其还包含一种或多种抗肿瘤药。
11、一种治疗实体肿瘤的方法，其包括向有此需要的个体瘤内给药有效治疗量的根据项目1-6之一的乳剂或者根据项目9或10的药物组合物。
12、根据项目2-11之一的应用、药物组合物或方法，其中在所述药物组合物中，所述油脂的浓度(w/w)为≤15％、为1-15％、优选为1-10％或1-5％。
13、根据项目8或10的应用或药物组合物，其中所述抗肿瘤药包括选自非常规抗肿瘤药或/和常规抗肿瘤药之一种或多种。
14、根据项目13的应用或药物组合物，其中在所述药物组合物中，如果存在，所述非常规抗肿瘤药的浓度(w/w)为大于0.25％、优选为0.35-40％；如果存在，所述常规抗肿瘤药的浓度(w/w)为大于0.05％、0.05-15％、优选为0.05-10％。
15、根据项目13的应用或药物组合物，其中所述常规抗肿瘤药包括选自以下组之一种或多种：破坏DNA结构和功能的药物、嵌入DNA中干扰转录RNA的药物、干扰DNA合成的药物、影响蛋白质合成的药物。
16、根据项目13的应用或药物组合物，其中所述非常规抗肿瘤药包括选自以下组之一种或多种：氨基酸营养素，其在药物组合物中的浓度(w/w)为5-50％；强碱，其在药物组合物中的浓度为≥0.5％、或0.5-6％、优选为0.5-1.5％或1.5-6％；弱碱，其在药物组合物中的浓度(w/w)为3.5-50％；强酸，其在药物组合物中的浓度为≥0.5％、或0.5-3％、优选为0.5-1.5％或1.5-3％；弱酸，其在药物组合物中的浓度(w/w)为0.5-50％。
17、根据项目13-16之一的应用或药物组合物，其中所述抗肿瘤药包括所述常规抗肿瘤药和所述氨基酸营养素。
18、根据项目13-16之一的应用或药物组合物，其中所述抗肿瘤药包括所述常规抗肿瘤药和选自以下之一种或多种的非常规抗肿瘤药：所述强碱、所述弱碱、所述所述强酸、所述弱酸。
19、根据项目16或17的应用或药物组合物，其中所述氨基酸营养素为选自以下化合物及其衍生物之一种或多种：精氨酸、丙氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、脯氨酸、丝氨酸，且在所述药物组合物中所述氨基酸营养素的浓度(w/w)为≥5％、或5-50％。
20、根据项目16-19之一的应用或药物组合物，其中所述氨基酸营养素包括精氨酸，且在所述药物组合物中所述精氨酸的浓度(w/w)为≥5％、或5-50％。
21、根据项目16或18的应用或药物组合物，其中所述強碱为氢氧化钠。
22、根据项目16或18的应用或药物组合物，其中所述弱碱为选自以下之一种或多种：磷酸钠、碳酸钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、碳酸氢钠、邻苯二甲酸氢钾、乙酸钠、丙酸钠、丁酸钠、丙二酸钠、乳酸钠、柠檬酸钠、枸橼酸钠、苹果酸钠、十二烷基硫酸钠。
23、根据项目16或18的应用或药物组合物，其中所述強酸为盐酸。
24、根据项目16或18的应用或药物组合物，其中所述弱酸为选自以下之一种或多种：乙酸、丙酸、丁酸、丙二酸、乳酸、柠檬酸、枸橼酸、苹果酸。
25、根据项目13-17之一的应用或药物组合物，其中所述常规抗肿瘤药为选自以下组之一种或多种：尿嘧啶衍生物类、环磷酰胺类、吉西他滨类、表柔比星类、抗肿瘤抗生素类、替尼泊苷、金属铂络合物、紫杉烷类。
26、根据项目24的应用或药物组合物，其中所述常规抗肿瘤药为选自以下药物及其类似衍生物一种或多种：盐酸多柔比星、吉西他宾、顺铂、5-氟尿嘧啶、阿糖胞普、卡铂、丝裂霉素、卡托泊普、环磷酰胺、阿霉素、卡莫司汀、喜树碱、紫杉醇、长春新碱、榄香烯、多西他赛、福莫司汀。
27、根据项目2-25之一的应用、药物组合物或方法，其中所述药物组合物还任选包括选自以下之一种或多种的其他成分：乙醇、1，2一丙二醇、甘油。
28、根据项目1-26的药物组合物、应用或方法，其中所述肿瘤包括恶性肿瘤和非恶性肿瘤。
29、根据项目27的应用、药物组合物或方法，其中所述恶性肿瘤包括乳腺癌、胰腺癌、甲状腺癌、鼻咽癌、前列腺癌、肝癌、肺癌、肠癌、口腔癌、食道癌、胃癌、喉癌、睾丸癌、阴道癌、子宫癌、卵巢癌。
30、根据项目3-28之一的应用、药物组合物或方法，其中所述方法包括在瘤内用药所述药物组合物之前、期间或之后还任选进行一种或多种其它治疗，例如化疗、免疫疗法、放射疗法、手术、物理消融、碘化油栓塞。
31、一种制备根据项目1-6之一的水基乳剂的方法，其包括以下步骤：1)制备包含亚甲蓝类活体染料和任选存在的其他水溶性组分的水溶液；2)制备包含油脂和任选存在的其他亲脂性组分的油溶液；以及3)将步骤1)中制备的水溶液与步骤2)中制备的油溶液充分混合。
32、一种根据项目9或10的药物组合物的制备方法，其包括以下步骤：1)制备包含所述亚甲蓝类活体染料和水可溶的其他组分的水溶液；2)制备包含所述油脂和油脂可溶的其他组分的油溶液；3)将步骤1)中制备的水溶液与步骤2)中制备的油溶液充分混合。
33、一种用于治疗实体肿瘤的装置，其包括容器A和容器B，其中所述容器A容纳可注射水溶液，其中所述水溶液包含根据制剂或给药浓度所需量的亚甲蓝类活体染料和任选存在的其他水溶性组分；以及所述容器B容纳可注射油溶液，其中所述油溶液包含根据制剂或给药浓度所需量的油脂和任选存在的其他亲脂性组分；其中所述水溶液与所述油溶液的配比使得在由此形成的乳剂中，所述油脂的浓度为<50重量％，以及所述亚甲蓝类活体染料与所述油脂的重量比为>1/75或(1-75)/75、优选为≧1/37.5或(1-37.5)/37.5。
34、根据项目5的乳剂，其是作为显影剂。
35、一种显影剂，其为包含亚甲蓝类活体染料和碘化油的水基乳剂，并且在该乳剂中，所述碘化油的浓度为<50重量％，以及所述亚甲蓝类活体染料与所述碘化油的重量比为>1/75或(1-75)/75、优选为≧1/37.5或(1-37.5)/37.5。
除本文中描述的那些外，根据前述描述，本发明的多种修改对本领域技术人员而言会是显而易见的。这样的修改也意图落入所附权利要求书的范围内。本申请中所引用的各参考文献(包括所有专利、专利申请、期刊文章、书籍及任何其它公开)均以其整体援引加入本文。

Claims (10)

1.一种稳定的水基乳剂，其包含亚甲蓝类活体染料和油脂，并且在该乳剂中，所述油脂的浓度为<50重量％，以及所述亚甲蓝类活体染料与所述油脂的重量比为>1/75或(1-75)/75、优选为≧1/37.5或(1-37.5)/37.5。
2.根据权利要求1的乳剂，其中在所述乳剂中，所述亚甲蓝类活体染料的浓度(w/w)为>0.20％、≥0.30％、为0.35-1.5％、优选为0.40-1.0％。
3.根据权利要求1的乳剂，其中在所述乳剂中，所述油脂的浓度(w/w)为≤30％、≤25％、优选为1-25％。
4.根据权利要求1-3之一的乳剂，其中所述油脂选自注射用油及其衍生物，其中所述注射用油为选自以下之一种或多种：油酸乙脂、中链(C6-10)脂肪酸甘油脂、肉豆菀酸异丙脂、大豆油、茶油、橄榄油、蓖麻油、花生油、棉籽油、玉米油、亚麻籽油、罂粟籽油、芝麻油。
5.根据权利要求1-3的乳剂，其中所述亚甲蓝类活体染料为选自以下化合物及其衍生物之一种或多种：亚甲蓝、专利蓝、异硫蓝。
6.根据权利要求1-5之一的水基乳剂在制备用于治疗实体肿瘤的药物组合物中的应用。
7.一种用于治疗实体肿瘤的药物组合物，其包含根据权利要求1-5之一的水基乳剂。
8.根据权利要求7的药物组合物，其还包含一种或多种抗肿瘤药。
9.一种用于治疗实体肿瘤的装置，其包括容器A和容器B，其中所述容器A容纳可注射水溶液，其中所述水溶液包含根据制剂或给药浓度所需量的亚甲蓝类活体染料和任选存在的其他水溶性组分；以及所述容器B容纳可注射油溶液，其中所述油溶液包含根据制剂或给药浓度所需量的油脂和任选存在的其他亲脂性组分；其中所述水溶液与所述油溶液的配比使得在由此形成的乳剂中，所述油脂的浓度为<50重量％，以及所述亚甲蓝类活体染料与所述油脂的重量比为>1/75或(1-75)/75、优选为≧1/37.5或(1-37.5)/37.5。
10.一种显影剂，其为包含亚甲蓝类活体染料和碘化油的水基乳剂，并且在该乳剂中，所述碘化油的浓度为<50重量％，以及所述亚甲蓝类活体染料与所述碘化油的重量比为>1/75或(1-75)/75、优选为≧1/37.5或(1-37.5)/37.5。
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