CN113230388A - 含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴及制备方法 - Google Patents

含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴及制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开一种含胰岛素负载的苯硼酸基ε‑聚赖氨酸的微针贴及制备方法。微针贴主要由基底和在基底上呈阵列排布的微针针体组成，微针针体与基底的成分为聚合物和负载胰岛素的苯硼酸基ε‑聚赖氨酸。本发明的制备方法简单，原料易得，生物相容性好；不产生胰岛素失活问题，苯硼酸基ε‑聚赖氨酸可完全水解有利于苯硼酸基ε‑聚赖氨酸颗粒在体内的排泄；负载胰岛素的苯硼酸基ε‑聚赖氨酸具有葡萄糖响应性能，可自动调节胰岛素的释放速率及释放剂量；且可采用皮下注射的方式递送胰岛素，含胰岛素负载苯硼酸基ε‑聚赖氨酸的微针贴，其微针可有效刺穿皮肤；含胰岛素负载苯硼酸基ε‑聚赖氨酸的微针贴通过透皮给药的方法递送胰岛素，可免去皮下注射胰岛素的痛苦。

Description

含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴及制备方法
技术领域
本发明属于高分子材料技术领域，具体涉及含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴及制备方法。
背景技术
糖尿病是一种由于胰岛素分泌功能缺失或受损而导致的慢性疾病，以高血糖为主要特征，严重时可进一步诱导心脏、神经、眼、肾等的功能受损。根据国际糖尿病联盟的统计，2019年全球糖尿病患者数量高达4.63亿。随着病情的加重，糖尿病患者对于抗糖尿病药物，特别是外源性胰岛素的依赖逐步提高。目前，皮下注射胰岛素是糖尿病患者补充外源性胰岛素的常用方法。然而，皮下注射所产生的的疼痛感较强，因此对患者造成的负担较大。
胰岛素是目前最常用的糖尿病用药之一，目前的胰岛素制剂均采用皮下注射的方式输入人体。皮下注射胰岛素目前存在两方面问题亟待解决。第一，皮下注射产生的疼痛感较强，而患者每日需皮下注射2～3次胰岛素，因此注射疼痛对患者的负担较大。第二，为将血糖控制在正常水平(100-200mg/dL)，患者需较精确地调节胰岛素用量，胰岛素用量不足则血糖仍处于高血糖水平，用量过多则导致低血糖，均对病情控制不利。
近来，含有胰岛素负载苯硼酸基颗粒的微针贴受到研究人员的广泛关注。其原理为，将含有胰岛素负载苯硼酸基颗粒的微针刺入人体皮肤，胰岛素负载苯硼酸基颗粒从微针内部向皮下组织扩散，并根据实际血糖水平自动释放出适宜剂量的胰岛素，从而起到降血糖效果。由于微针的长度不足以达到皮下神经所在位置，因此并不产生疼痛感。
含有胰岛素负载苯硼酸基颗粒的微针贴可以将血糖水平控制在正常水平，同时免去皮下注射的痛苦。目前报道的含有胰岛素负载苯硼酸基颗粒的微针贴有两类。第一类由Wang等报道，采用的自由基聚合的方法合成苯硼酸基颗粒，该颗粒不可降解，因此长期使用的安全性存在隐患。专利CN109125912A报道了第二类含有胰岛素负载苯硼酸基颗粒的微针贴，基于金纳米簇的改性技术制备了苯硼酸基颗粒，生物相容性较好，但是制备成本高昂。
发明内容
为了解决上述问题，本发明提供一种含胰岛素负载苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴。利用聚合物、水和负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸三个组分制备含胰岛素负载苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴。本发明公开的含胰岛素负载苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴制备方法简单，微针形貌均一，可有效刺穿皮肤；负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒具有葡萄糖响应性能，可自动调节胰岛素的释放速率及释放剂量；负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒采用透皮给药的方式递送胰岛素，可免去皮下注射的痛苦。
本发明所采用的的技术方案如下：
一、一种含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴
本发明的微针贴主要由基底和在基底上呈阵列排布的微针针体组成，所述微针针体与基底的成分主要为聚合物和负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸。
所述的微针针体为四棱锥形，微针针体高度为0.2-1mm，微针针体底面边长为0.05-0.5mm；基底为圆柱体，基底高度为0.01-2mm，基底直径为0.5-5cm；微阵针体在基底上的阵列密度为10-800针/(cm2基底)。
所述的负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸是利用接枝反应将羧基修饰苯硼酸接枝在ε-聚赖氨酸上得到，以质量份数计，所述羧基修饰苯硼酸和ε-聚赖氨酸的质量份数比为：1：(0.1-10)。负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸为颗粒形态。
所述ε-聚赖氨酸的结构式如下：
Figure BDA0003000798160000021
所述苯硼酸基ε-聚赖氨酸的结构式如下：
Figure BDA0003000798160000022
～R为苯硼酸基ε-聚赖氨酸结构式，～R为以下所展示四种基团中的一种或多种，苯硼酸基团接枝率为y/x。
Figure BDA0003000798160000031
二、一种含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴的制备方法
包括以下步骤：
1)将聚合物、水和负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸混匀，得到微针贴的前驱体；
2)将微针贴的前驱体加入到微针阴模，于常温下离心或置于负压环境，然后将微针贴的前驱体干燥；
3)干燥后，将微针贴的前驱体取出，得到含有负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴。
所述步骤1)中，聚合物为透明质酸钠、普鲁兰多糖、聚乙烯吡咯烷酮和聚乙烯醇中的一种或多种；以质量份数计，聚合物为1份，水为2-100份，负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒为0.01-1份。
所述步骤2)中，离心的转速为500-10000rpm，离心的时间为10-120min；置于负压环境的压力为0.0001-0.09MPa，时间为0.5-24h；干燥的压力为0.0001-0.1MPa，时间为4-24h。
所述的负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸采用以下方法制备而成：
1)将羧基修饰苯硼酸和辅料投入溶剂中，在常温下以搅拌速率1-1500rpm进行搅拌1-240min，得到混合物A；
2)将ε-聚赖氨酸投入溶剂中在常温下以与步骤1)相同的搅拌条件进行搅拌，得到混合物B；
3)将混合物A和混合物B混合，在常温下以搅拌速率为1-1500rpm进行搅拌5-3000min，得到混合物C；
4)将混合物C装入透析袋中，并置于水中进行透析，并每隔2-24h换透析水一次，透析完毕后，将透析袋中的混合物冻干，得到产物苯硼酸基ε-聚赖氨酸；
5)将苯硼酸基ε-聚赖氨酸浸泡在胰岛素溶液中于常温下浸泡10-240min，在转速为100-10000rpm下离心1-60min，并去除上清液，收集固体并冻干，获得负载胰岛素的糖敏苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒。
所述步骤1)中，辅料为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基丁二酰亚胺中的一种或多种；羧基修饰苯硼酸包括2-羧基苯硼酸、4-羧基-3-氯苯硼酸、4-羧基-3-氟苯硼酸和4-羧基-2-氯苯硼酸中的一种或多种；以质量份数计，羧基修饰苯硼酸为1份，辅料为0.2-10份，溶剂为10-300份。
所述步骤1)和步骤2)中的溶剂均为水、二甲基亚砜、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、四氢呋喃、二氯甲烷和三氯甲烷中的一种或多种。
所述步骤1)中的羧基修饰苯硼酸和步骤2)中的ε-聚赖氨酸，以质量份数计，羧基修饰苯硼酸为1份，ε-聚赖氨酸为0.1-10份。
所述步骤2)中，以质量份数计，ε-聚赖氨酸为1份，溶剂为1-100份。
所述步骤5)中，以质量份数计，苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒为1份，胰岛素为0.01-1份；
所述步骤5)中的胰岛素溶液的溶剂为水，胰岛素为猪胰岛素和人胰岛素中的一种或多种，胰岛素的质量浓度为0.01-10％。
所述的苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒负载胰岛素后通过皮下注射的方法进行胰岛素递送。
所述步骤1)至步骤3)也可合并为一步，即将羧基修饰苯硼酸、辅料、ε-聚赖氨酸和溶剂混合搅拌，得到混合物C。其中，羧基修饰苯硼酸包括2-羧基苯硼酸、4-羧基-3-氯苯硼酸、4-羧基-3-氟苯硼酸和4-羧基-2-氯苯硼酸中的一种或多种。辅料包括1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基丁二酰亚胺中的一种或多种。溶剂包括水、二甲基亚砜、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、四氢呋喃、二氯甲烷和三氯甲烷中的一种或多种。以质量份数计，羧基修饰苯硼酸为1份，辅料为0.2-10份，ε-聚赖氨酸为0.1-10份，溶剂为10-300份。
三、含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴的应用
含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴在在胰岛素递送中的应用。
本发明将含胰岛素负载苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针刺入皮肤后，微针中的胰岛素负载苯硼酸基ε-聚赖氨酸向皮下组织中扩散，并根据实际血糖水平自动释放出适宜剂量的胰岛素，从而起到降血糖效果，并且24小时内苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒可被完全排泄，安全性更高。具体而言，胰岛素负载苯硼酸基ε-聚赖氨酸中，ε-聚赖氨酸被疏水的苯硼酸修饰，自组装形成苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒，颗粒内部可通过疏水作用负载胰岛素。由于疏水的苯硼酸基团可与葡萄糖结合为亲水的葡萄糖/苯硼酸复合物基团，因此葡萄糖可以诱导苯硼酸基聚合物颗粒的溶解，进而释放出负载的胰岛素。将负载胰岛素的苯硼酸基聚合物颗粒递送进入糖尿病患者体内后，患者血糖浓度越高，负载胰岛素的苯硼酸基聚合物颗粒释放出的胰岛素越多，降血糖效果越显著；血糖浓度降低后，胰岛素释放量也相应降低，未释放胰岛素可储存胰岛素负载苯硼酸基ε-聚赖氨酸直至下一次血糖升高时再释放。
本发明的有益效果：
1.本发明的含胰岛素负载苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴制备工艺简单，原料易得，生物相容性好；微针贴上的微针可有效刺穿皮肤，含胰岛素负载苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴通过透皮给药的方法递送胰岛素，可免去皮下注射胰岛素的痛苦；
2.本发明中的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的合成工艺简单，合成反应仅需要一步，规模化生产成本低；对于负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒使得胰岛素负载工艺温和，不产生胰岛素失活问题；并且苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒可完全水解为赖氨酸和羧基修饰的苯硼酸小分子，有利于苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒在体内的排泄；负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒对葡萄糖浓度具有刺激-响应性能，可依据葡萄糖浓度的变化自动调节所负载药物的释放速率和释放剂量。
3.苯硼酸基ε-聚赖氨酸既可以负载胰岛素后通过皮下注射的方法进行胰岛素递送，也可以将负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒填装在聚合物微针贴中后通过透皮给药的方法进行胰岛素递送，可免去皮下注射胰岛素的痛苦。
总述，本发明的制备方法简单；不产生胰岛素失活问题，苯硼酸基ε-聚赖氨酸可完全水解为赖氨酸和羧基修饰的苯硼酸小分子，有利于苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒在体内的排泄；制备的负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒具有葡萄糖响应性能，可自动调节胰岛素的释放速率及释放剂量；且负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒可采用皮下注射的方式递送胰岛素，含胰岛素负载苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴通过透皮给药的方法递送胰岛素，可免去皮下注射胰岛素的痛苦。
附图说明
图1为实施例1制备的含胰岛素负载苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴电镜图；
图2为实施例1制备的含胰岛素负载苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴的体内降血糖实验图；
图3为实施例5制备的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的核磁氢谱谱图；
图4为实施例8制备的负载胰岛素的糖敏苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒的胰岛素累积释放曲线；
图5为实施例8制备的负载胰岛素的糖敏苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒的胰岛素圆二色谱图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做更详尽的说明，但本发明不局限于此，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明的保护范围之内。本说明书中未作详细描述的内容属于本领域专业技术人员公知的现有技术。
本发明实施例如下：
实施例1：微针贴
将0.1010g普鲁兰多糖、1.0172g水与0.0250g负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒混匀，得到微针贴的前驱体。将前驱体加入微针阴模，3500rpm离心40min，温度为25℃，将前驱体注入微针阴模的针体槽，将前驱体干燥。干燥温度为30℃，压力为0.1MPa，时间为24h。将干燥后得到的微针贴取出，得到含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴。
本实施案例结果如图1-图2所示。图1为含胰岛素负载苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴的电镜图，通过简单的离心工艺获得微针贴，微针形貌均一。采用苏木精-伊红染色法检测含胰岛素负载苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴刺穿新鲜大鼠皮肤的组织切片，可见微针刺入深度达100μm，因此该微针贴的微针可以满足刺破皮肤的要求。
图2为含胰岛素负载苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴的体内降血糖实验图，将该微针贴贴于体重200g的糖尿病SD大鼠皮肤上，大鼠初始血糖约为为5g/L，相对于不给予胰岛素的对照组，4小时内微针贴组可将大鼠血糖水平降低40％。
实施例2：微针贴
将0.0562g透明质酸钠、1.0005g水与0.0251g负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒混匀，得到微针贴的前驱体。将前驱体加入微针阴模，4000rpm离心100min，温度为30℃，将前驱体注入微针阴模的针体槽，将前驱体干燥。干燥温度为25℃，压力为0.1MPa，时间为48h。将干燥后得到的微针贴取出，得到含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴。
实施例3：微针贴
将0.1002g聚乙烯吡咯烷酮1.0005g水与0.0262g负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒混匀，得到微针贴的前驱体。将前驱体加入微针阴模，置于负压环境，压力为0.001MPa，时间为0.5h，温度为25℃，将前驱体注入微针阴模的针体槽，将前驱体干燥。干燥温度为25℃，压力为0.1MPa，时间为48h。将干燥后得到的微针贴取出，得到含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴。
实施例4：微针贴
将0.0501g聚乙烯吡咯烷酮、0.0502g聚乙烯醇、1.0022g水与0.0245g负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒混匀，得到微针贴的前驱体。将前驱体加入微针阴模，置于负压环境，压力为0.002MPa，时间为1h，温度为22℃，将前驱体注入微针阴模的针体槽，将前驱体干燥。干燥温度为25℃，压力为0.1MPa，时间为48h。将干燥后得到的微针贴取出，得到含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴。
实施例5：苯硼酸基ε-聚赖氨酸
将1.0780g 4-羧基-3-氟苯硼酸、1.1245g 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和0.6739g N-羟基丁二酰亚胺投入100mL二甲基亚砜中搅拌，得到混合物A，搅拌速率为400rpm，搅拌时间为90min，搅拌的温度为常温。将1.0001gε-聚赖氨酸投入10mL水中搅拌，搅拌速率为400rpm，搅拌时间为10min，搅拌的温度为常温，得到混合物B。将混合物A和混合物B混合搅拌，搅拌速率为500rpm，搅拌时间为2000min，搅拌的温度为30℃，得到混合物C。将混合物C装入透析袋，透析袋截留分子量为1000Da，装有混合物C的透析袋置于水中透析，每隔一段时间将透析水换为新鲜水，每次换水时间间隔为6h，换水次数为9次。透析完毕后，将透析袋中的混合物冻干，得到产物苯硼酸基ε-聚赖氨酸。
本实施案例结果如图3所示，图3为苯硼酸基ε-聚赖氨酸的核磁氢谱谱图。经计算，苯硼酸基团接枝率为65％。苯硼酸基ε-聚赖氨酸的合成工艺简单，合成反应仅需要一步，规模化生产成本低。
实施例6：苯硼酸基ε-聚赖氨酸
将1.3345g 2-羧基苯硼酸和1.5087g 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐投入50mL水和150mL N，N-二甲基甲酰胺中，得到混合物A，搅拌速率为0rpm，搅拌时间为0min，搅拌的温度为常温。将1.2010gε-聚赖氨酸投入10mL水和2mL N，N-二甲基甲酰胺中搅拌，搅拌速率为400rpm，搅拌时间为5min，搅拌的温度为常温得到混合物B。将混合物A和混合物B混合搅拌，搅拌速率为300rpm，搅拌时间为300min，搅拌的温度为常温，得到混合物C。将混合物C装入透析袋，透析袋截留分子量为3500Da，装有混合物C的透析袋置于水中透析，每隔一段时间将透析水换为新鲜水，每次换水时间间隔为8h，换水次数为12次。透析完毕后，将透析袋中的混合物冻干，得到产物苯硼酸基ε-聚赖氨酸。
实施例7：苯硼酸基ε-聚赖氨酸
将1.0001g 4-羧基-3-氯苯硼酸、0.9122g 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和0.7397g N-羟基丁二酰亚胺投入50mL水和150mL N，N-二甲基乙酰胺中，得到混合物A，搅拌速率为200rpm，搅拌的时间为60min，搅拌的温度为常温。将1.0212gε-聚赖氨酸投入15mL水和1mL N，N-二甲基乙酰胺中搅拌，搅拌速率为200rpm，搅拌的时间为15min，搅拌的温度为常温，得到混合物B。将混合物A和混合物B混合搅拌，搅拌速率为200rpm，搅拌的时间为1200min，搅拌的温度为常温，得到混合物C。将混合物C装入透析袋，透析袋截留分子量为500Da，装有混合物C的透析袋置于水中透析，每隔一段时间将透析水换为新鲜水，每次换水时间间隔为6h，换水次数为8次。透析完毕后，将透析袋中的混合物冻干，得到产物苯硼酸基ε-聚赖氨酸。
实施例8：含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸
将10.0mg实施例5所得产物苯硼酸基ε-聚赖氨酸浸泡在1mL 0.128％人胰岛素水溶液中，浸泡时间为60min，浸泡的温度为常温，搅拌速率为250rpm。然后离心，离心转速为3000rpm，离心时间为20min。去除上清液，收集固体并冻干，获得负载胰岛素的糖敏苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒，胰岛素负载量为0.102(mg胰岛素)/(mg负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒)。
本实施案例结果如图4-图5所示。图4为负载胰岛素的糖敏苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒的胰岛素累积释放曲线图，采用4g/L的葡萄糖浓度模拟高血糖水平，采用1g/L的葡萄糖浓度模拟正常血糖水平，采用0g/L的葡萄糖浓度作为参照。葡萄糖浓度越高，胰岛素的释放越多。图5为负载胰岛素的糖敏苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒的胰岛素圆二色谱图，结果显示负载于糖敏苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒上的胰岛素与天然胰岛素的二级结构无差异，说明糖敏苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒的胰岛素负载工艺温和，不产生胰岛素失活问题。将0.55mg负载胰岛素的糖敏苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒注射进入体重200g的糖尿病SD大鼠体内，0.5小时内即可将5g/L的高血糖水平降至0.5-2g/L的正常血糖水平，之后正常血糖水平可维持超过9小时。将1mg糖敏苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒注射进入体重200g的糖尿病SD大鼠体内，24小时内即可被完全排泄，这说明本发明的含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴的生物相容性较好，安全性更高。

Claims (10)

1.一种含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴，其特征在于：所述的微针贴主要由基底和在基底上呈阵列排布的微针针体组成，所述微针针体与基底的成分主要为聚合物和负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸。
2.根据权利要求1所述的含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴，其特征在于：所述的微针针体为四棱锥形，微针针体高度为0.2-1mm，微针针体底面边长为0.05-0.5mm；基底为圆柱体，基底高度为0.01-2mm，基底直径为0.5-5cm；微阵针体在基底上的阵列密度为10-800针/(cm2基底)。
3.根据权利要求1所述的含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴，其特征在于：
所述的负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸是利用接枝反应将羧基修饰苯硼酸接枝在ε-聚赖氨酸上得到。
4.应用于权利要求1所述的含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
1)将聚合物、水和负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸混匀，得到微针贴的前驱体；
2)将微针贴的前驱体加入到微针阴模，于常温下离心或置于负压环境，然后将微针贴的前驱体干燥；
3)干燥后，将微针贴的前驱体取出，得到含有负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴。
5.根据权利要求4所述的含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴的制备方法，其特征在于：所述步骤1)中，聚合物为透明质酸钠、普鲁兰多糖、聚乙烯吡咯烷酮和聚乙烯醇中的一种或多种；以质量份数计，聚合物为1份，水为2-100份，负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒为0.01-1份。
6.根据权利要求4所述的含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴的制备方法，其特征在于：所述步骤2)中，离心的转速为500-10000rpm，离心的时间为10-120min；置于负压环境的压力为0.0001-0.09MPa，时间为0.5-24h；干燥的压力为0.0001-0.1MPa，时间为4-24h。
7.根据权利要求4所述的含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴的制备方法，其特征在于：
所述的负载胰岛素的苯硼酸基ε-聚赖氨酸采用以下方法制备而成：
1)将羧基修饰苯硼酸和辅料投入溶剂中，在常温下以搅拌速率1-1500rpm进行搅拌1-240min，得到混合物A；
2)将ε-聚赖氨酸投入溶剂中在常温下以与步骤1)相同的搅拌条件进行搅拌，得到混合物B；
3)将混合物A和混合物B混合，在常温下以搅拌速率为1-1500rpm进行搅拌5-3000min，得到混合物C；
4)将混合物C装入透析袋中，并置于水中进行透析，并每隔2-24h换透析水一次，透析完毕后，将透析袋中的混合物冻干，得到产物苯硼酸基ε-聚赖氨酸；
5)将苯硼酸基ε-聚赖氨酸浸泡在胰岛素溶液中于常温下浸泡10-240min，在转速为100-10000rpm下离心1-60min，并去除上清液，收集固体并冻干，获得负载胰岛素的糖敏苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒。
8.根据权利要求7所述的含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴的制备方法，其特征在于：
所述步骤1)中，辅料为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基丁二酰亚胺中的一种或多种；羧基修饰苯硼酸包括2-羧基苯硼酸、4-羧基-3-氯苯硼酸、4-羧基-3-氟苯硼酸和4-羧基-2-氯苯硼酸中的一种或多种；以质量份数计，羧基修饰苯硼酸为1份，辅料为0.2-10份，溶剂为10-300份。
9.根据权利要求7所述的含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴的制备方法，其特征在于：
所述步骤5)中，以质量份数计，苯硼酸基ε-聚赖氨酸颗粒为1份，胰岛素为0.01-1份；胰岛素溶液的溶剂为水，胰岛素为猪胰岛素和人胰岛素中的一种或多种，胰岛素的质量浓度为0.01-10％。
10.一种权利要求1所述的含胰岛素负载的苯硼酸基ε-聚赖氨酸的微针贴的应用，其特征在于：在胰岛素递送中的应用。
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