CN113230330B - 一种沉香叶茶多酚的提取方法 - Google Patents

一种沉香叶茶多酚的提取方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种沉香叶茶多酚的提取方法，包括：(1)将沉香叶采用溶液熏蒸处理；(2)沉香叶加入40～50％乙醇溶液，水浴加热浸提后，一级常压微波助提；加入70～80％乙醇溶液，二级低压下微波提取；加入50～55％乙醇溶液，三级低压微波提取，得滤液3；合并滤液，得沉香叶茶多酚粗提液；(3)将沉香叶茶多酚粗提液加入活性白土和活性炭，磁力搅拌，离心，减压浓缩，得沉香叶茶多酚浓缩液；(4)将沉香叶茶多酚浓缩液，采用串接的大孔吸附树脂柱吸附，用60～80％乙醇水溶液超声洗脱，收集乙醇洗脱液；(5)减压浓缩，干燥，得沉香叶茶多酚成品，本发明实现了沉香叶茶多酚的快速提取，且有效提高沉香叶茶多酚的得率和纯度。

Description

一种沉香叶茶多酚的提取方法
技术领域
本发明涉及天然植物成分提取技术领域，特别涉及一种沉香叶茶多酚的提取方法。
背景技术
沉香为瑞香科植物白木香含树脂的木材，分布于广东、海南、广西、福建等低海山地、丘陵等地区，其具有行气止痛，温中止呕，纳气平喘之功效，是我国特有而珍贵的药用植物，国家二级重点保护野生植物，已被载入《中国植物红皮书》。
而沉香叶为白木香的非药用部位，随着沉香的人工种植面积不断增大，其产量增大，为提高沉香叶资源的利用率，现将沉香叶与传统制茶工艺结合制成味道独特的茶饮品种，具有养身保健功效，同时，近年来，随着少学者对沉香叶的化学成分不断深入研究，经现代药理学实验研究表明，沉香叶中含有黄酮、多酚、多糖、氨基酸类成分，具有镇痛、抗菌、抗炎、平喘、抗氧化、降血糖等功效。而现有对于沉香叶有效成分的提取技术的研究较少。茶多酚是多羟基酚类化合物，具有较好的抗氧化能力和清除自由基的能力，茶多酚是沉香叶中具有抗氧化功效的有效成分，经实验结果表明，沉香茶叶水提物的抗氧化能力与绿茶、红茶相当或优于，但目前对沉香叶茶多酚提取往往存在提取得率低，产品纯度低，含有杂质较多，提取效率低，且易受提取条件的影响易导致茶多酚氧化或降解等不足，因此，提出一种高得率高纯度的沉香叶茶多酚的快速提取方法，对提高沉香叶提取物在抗氧化剂中应用的具有重要意义。
发明内容
鉴于此，本发明提出一种沉香叶茶多酚的提取方法，通过采用了醋酸熏蒸、负压微波助提、吸附浓缩和树脂纯化组合，实现了沉香叶茶多酚的快速提取，且有效提高沉香叶茶多酚的得率和纯度。
本发明的技术方案是这样实现的：
本发明提供一种沉香叶茶多酚的提取方法，包括如下步骤：
步骤1：熏蒸处理：将沉香叶采用质量浓度为0.5～1％的溶液进行熏蒸处理；
步骤2：负压微波助提：将熏蒸处理后沉香叶，加入质量浓度为40～50％的乙醇溶液，于水浴锅中加热浸提3～5min后，进行一级常压微波助提80～100s，冷却，过滤，得滤液1；将沉香叶加入质量浓度为70～80％的乙醇溶液，进行二级低压下微波提取50～60s，过滤，得滤液2；将沉香叶加入质量浓度为50～55％的乙醇溶液，进行三级低压微波提取20～30s，过滤，得滤液3；合并滤液，得到沉香叶茶多酚粗提液；
步骤3：吸附浓缩：将沉香叶茶多酚粗提液加入活性白土和活性炭，磁力搅拌3～5min，离心，取上清液，减压浓缩，得到沉香叶茶多酚浓缩液；
步骤4：纯化：将沉香叶茶多酚浓缩液，采用串接的大孔吸附树脂柱进行吸附，用质量浓度60～80％乙醇水溶液超声洗脱至乙醇洗脱液无色，收集乙醇洗脱液；
步骤5：减压浓缩至恒重，真空冷冻干燥，得到沉香叶茶多酚成品。
更优选的，所述水浴加热浸提温度为30～35℃。
进一步说明，步骤2中，一级微波助提的料液比为1:(20～30)g/ml；微波功率为150～200w。
进一步说明，步骤2中，二级微波助提的料液比为1:(10～15)g/ml；微波功率为250～300w，压力为15～25kpa。
进一步说明，步骤2中，三级微波助提的料液比为1:(25～30)g/ml；微波功率为400～500W，压力为1～3kpa。
进一步说明，步骤3中，所述活性白土、活性炭与沉香叶茶多酚粗提液的料液比为：(8～10)g:(15～20)g:1000ml。
进一步说明，步骤3中，所述磁力搅拌速度为600～800r/min，并以3000～3500r/min离心3～5min。
进一步说明，步骤3中，所述减压浓缩温度为60～65℃，压力为-0.15～-0.05MPa，浓缩至固含量为10～15％。
进一步说明，步骤4中，所述大孔吸附树脂为ADS-17、HP-20、HPD-100、XDA-6、XDA-8中的任意三种组合，超声功率为40～50w。
进一步说明，步骤5中，所述真空干燥温度为-35℃。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明通过采用负压微波助提、吸附浓缩和树脂纯化组合，既实现了沉香叶茶多酚的快速提取，同时，有利于减少茶多酚氧化或降解，有效提高了沉香叶茶多酚的得率和纯度，降低杂质。
(1)本发明对沉香叶采用溶液熏蒸处理，可起到杀菌消毒和减少茶多酚提取过程中的氧化降解反应。
(2)采用负压微波助提，将低温水浴浸提联合一级常压微波提取，两级负压微波助提，不仅加快茶多酚的提取，而且有效减少茶多酚的氧化降解，提高浸出效率和浸出量。
(3)通过采用低量活性白土、活性炭的吸附浓缩处理，充分去除大分子色素、果胶等杂质，操作简单且成本低，并减少沉香叶茶多酚的损失。
(4)对沉香叶茶多酚浓缩液，进一步采用了串接的大孔吸附树脂柱进行吸附纯化结合乙醇超声洗脱，进一步提高沉香叶茶多酚的得率和纯度。
具体实施方式
为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。
本发明实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
本发明实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1：一种沉香叶茶多酚的提取方法，包括如下步骤：
步骤1：将沉香叶采用质量浓度为0.5％的溶液进行熏蒸处理；
步骤2：将熏蒸处理后沉香叶，按照料液比为1:20g/ml，加入质量浓度为50％的乙醇溶液，于30℃水浴锅中加热浸提5min后，进行一级常压微波助提100s，微波功率为150w，冷却，过滤，得滤液1；将沉香叶按照料液比为1:10g/ml加入质量浓度为80％的乙醇溶液，进行二级低压下微波提取60s，微波功率为250w，压力为15kpa，过滤，得滤液2；将沉香叶按照料液比为1:25g/ml加入质量浓度为55％的乙醇溶液，进行三级低压微波提取30s，微波功率为400W，压力为1kpa，过滤，得滤液3；合并滤液，得到沉香叶茶多酚粗提液；
步骤3：每1000ml沉香叶茶多酚粗提液中，加入8g活性白土和15g活性炭，以600r/min磁力搅拌5min，以3000r/min离心5min，取上清液，于60℃，压力为-0.15MPa，减压浓缩至固含量为10％，得到沉香叶茶多酚浓缩液；
步骤4：将沉香叶茶多酚浓缩液，采用等体积串接的ADS-17、HP-20和XDA-6大孔吸附树脂柱进行吸附，用质量浓度60％乙醇水溶液将串接的树脂柱超声洗脱至乙醇洗脱液无色，超声功率40w，收集乙醇洗脱液；
步骤5：减压浓缩至恒重，-35℃真空冷冻干燥，得到沉香叶茶多酚成品。
实施例2：一种沉香叶茶多酚的提取方法，包括如下步骤：
步骤1：将沉香叶采用质量浓度为1％的溶液进行熏蒸处理；
步骤2：将熏蒸处理后沉香叶，按照料液比为1:30g/ml，加入质量浓度为40％的乙醇溶液，于35℃水浴锅中加热浸提3min后，进行一级常压微波助提80s，微波功率为200w，冷却，过滤，得滤液1；将沉香叶按照料液比为1:15g/ml加入质量浓度为70％的乙醇溶液，进行二级低压下微波提取50s，微波功率为300w，压力为25kpa，过滤，得滤液2；将沉香叶按照料液比为1:30g/ml加入质量浓度为50％的乙醇溶液，进行三级低压微波提取20s，微波功率为500W，压力为3kpa，过滤，得滤液3；合并滤液，得到沉香叶茶多酚粗提液；
步骤3：每1000ml沉香叶茶多酚粗提液中，加入10g活性白土和20g活性炭，以800r/min磁力搅拌3min，以3500r/min离心3min，取上清液，于65℃，压力为-0.05MPa，减压浓缩至固含量为15％，得到沉香叶茶多酚浓缩液；
步骤4：将沉香叶茶多酚浓缩液，采用等体积串接的ADS-17、HP-100和XDA-8大孔吸附树脂柱进行吸附，用质量浓度80％乙醇水溶液将串接的树脂柱超声洗脱至乙醇洗脱液无色，超声功率50w，收集乙醇洗脱液；
步骤5：减压浓缩至恒重，-35℃真空冷冻干燥，得到沉香叶茶多酚成品。
实施例3：一种沉香叶茶多酚的提取方法，包括如下步骤：
步骤1：将沉香叶采用质量浓度为0.8％的溶液进行熏蒸处理；
步骤2：将熏蒸处理后沉香叶，按照料液比为1:25g/ml，加入质量浓度为45％的乙醇溶液，于32℃水浴锅中加热浸提4min后，进行一级常压微波助提90s，微波功率为150w，冷却，过滤，得滤液1；将沉香叶按照料液比为1:13g/ml加入质量浓度为75％的乙醇溶液，进行二级低压下微波提取60s，微波功率为250w，压力为20kpa，过滤，得滤液2；将沉香叶按照料液比为1:28g/ml加入质量浓度为50％的乙醇溶液，进行三级低压微波提取30s，微波功率为450W，压力为2kpa，过滤，得滤液3；合并滤液，得到沉香叶茶多酚粗提液；
步骤3：每1000ml沉香叶茶多酚粗提液中，加入9g活性白土和18g活性炭，以700r/min磁力搅拌4min，以3200r/min离心4min，取上清液，于63℃，压力为-0.10MPa，减压浓缩至固含量为12％，得到沉香叶茶多酚浓缩液；
步骤4：将沉香叶茶多酚浓缩液，采用等体积串接的ADS-17、HP-20和XDA-8大孔吸附树脂柱进行吸附，用质量浓度70％乙醇水溶液将串接的树脂柱超声洗脱至乙醇洗脱液无色，超声功率45w，收集乙醇洗脱液；
步骤5：减压浓缩至恒重，-35℃真空冷冻干燥，得到沉香叶茶多酚成品。
实施例4：本实施例与实施例3的区别在于:步骤2中，二级微波助提的微波功率为400w，压力为50kpa；三级微波助提的微波功率为550w，压力为6kpa。
对比例1：本对比例与实施例3的区别在于：步骤2中，将熏蒸处理后沉香叶，按照料液比为1:25g/ml，加入质量浓度为45％的乙醇溶液，于水32℃浴锅中加热浸提4min后，在常压下，依次进行一级微波助提，得滤液1；二级微波提取，得滤液2；进行三级微波提取，得滤液3；其中，各级微波助提的料液比、微波功率，处理时间，乙醇溶液的质量浓度，均与实施例3相同，合并滤液，得到沉香叶茶多酚粗提液。
对比例2：本对比例与实施例3的区别在于：步骤2中，将熏蒸处理后沉香叶，按照料液比为1:25g/ml，加入质量浓度为45％的乙醇溶液，于水32℃浴锅中加热浸提4min后，进行常压微波助提180s，微波功率为150w，冷却，过滤，得到沉香叶茶多酚粗提液。
对比例3：本对比例与实施例3的区别在于：步骤2中，将熏蒸处理后沉香叶，按照料液比为1:25g/ml，加入质量浓度为45％的乙醇溶液，于32℃水浴锅中加热浸提4min后，进行一级常压微波助提90s，微波功率为150w，冷却，过滤，得滤液1；将沉香叶按照料液比为1:13g/ml加入同质量浓度的乙醇溶液，进行二级低压下微波提取60s，微波功率为300w，压力为20kpa，过滤，得滤液2；将沉香叶按照料液比为1:28g/ml加入同质量浓度的乙醇溶液，进行三级低压微波提取30s，微波功率为500W，压力为2kpa，过滤，得滤液3；合并滤液，得到沉香叶茶多酚粗提液。
对比例4：本对比例与实施例3的区别在于：步骤1中，未对沉香叶进行熏蒸处理。
对比例5：本对比例与实施例3的区别在于：步骤4中，采用单一的ADS-17大孔吸附树脂柱进行吸附，用质量浓度60～80％乙醇水溶液超声洗脱至乙醇洗脱液无色，超声功率45w，收集乙醇洗脱液。
依据上述实施例1～4和对比例1～5的沉香叶茶多酚的提取方法，分别取等量沉香叶，测定沉香叶茶多酚产品的提取得率，提取率％＝提取物干物质质量m1/沉香叶干物质的质量m0*100％；并对所制得的沉香叶茶多酚产品进行等量取样，采用酒石酸亚铁法测定沉香叶茶多酚产品的茶多酚浓度，以及对沉香叶茶多酚产品进行抗氧化性能测定，采用邓幸运等沉香叶不同提取部位的体外抗氧化作用研究中的对DPPH自由基和ABTS+自由基清除能力的测定方法，测定以95％为溶剂，质量浓度为10mg/L的沉香叶茶多酚产品的DPPH自由基和ABTS+自由基的清除能力，其结果如下表：
Figure BDA0003091973900000061
由上表可知，本发明制得的沉香叶茶多酚产品的提取得率高且纯度高，同时能够保持较高DPPH自由基和ABTS+自由基清除能力。其中，以实施例3对沉香叶茶多酚的提取效果最佳。
由实施例3与实施例4相比可知，实施例4改变负压微波助提条件，提取得率相对降低。对比例1～3中，沉香叶茶多酚产品的提取得率显著降低，并且对比例1中的茶多酚浓度明显下降，表明本发明采用负压微波助提，将低温水浴浸提联合一级常压微波提取，两级负压微波助提，不仅加快茶多酚的提取，而且有效减少茶多酚的氧化降解，提高浸出效率和浸出量，提高茶多酚的提取纯度。对比例4中未对沉香叶进行熏蒸处理，与实施例3相比，其沉香叶茶多酚产品提取得率和茶多酚浓度下降，其DPPH自由基和ABTS+自由基清除能力降低，表明本发明对沉香叶采用溶液熏蒸处理，可起到杀菌消毒和减少茶多酚提取过程中的氧化降解反应，有利于沉香叶茶多酚的得率和纯度的提高。对比例5的茶多酚浓度明显降低，其DPPH自由基和ABTS+自由基清除能力明显下降，表明对沉香叶茶多酚浓缩液，进一步采用了串接的大孔吸附树脂柱进行吸附纯化结合乙醇超声洗脱，可进一步提高沉香叶茶多酚的得率和纯度。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种沉香叶茶多酚的提取方法，其特征在于：包括如下步骤：
步骤1：熏蒸处理：将沉香叶采用质量浓度为0.5～1％的醋酸溶液进行熏蒸处理；
步骤2：负压微波助提：将熏蒸处理后沉香叶，加入质量浓度为40～50％的乙醇溶液，于水浴锅中加热浸提3～5min后，进行一级常压微波助提80～100s，冷却，过滤，得滤液1；将沉香叶加入质量浓度为70～80％的乙醇溶液，进行二级低压下微波提取50～60s，压力为15～25kpa，过滤，得滤液2；将沉香叶加入质量浓度为50～55％的乙醇溶液，进行三级低压微波提取20～30s，压力为1～3kpa，过滤，得滤液3；合并滤液，得到沉香叶茶多酚粗提液；
步骤3：吸附浓缩：将沉香叶茶多酚粗提液加入活性白土和活性炭，磁力搅拌3～5min，离心，取上清液，减压浓缩，得到沉香叶茶多酚浓缩液；
步骤4：纯化：将沉香叶茶多酚浓缩液，采用串接的大孔吸附树脂柱进行吸附，用质量浓度60～80％乙醇水溶液超声洗脱至乙醇洗脱液无色，收集乙醇洗脱液；所述大孔吸附树脂为ADS-17、HP-20、HPD-100、XDA-6、XDA-8中的任意三种组合；
步骤5：减压浓缩至恒重，真空冷冻干燥，得到沉香叶茶多酚成品。
2.根据权利要求1所述的一种沉香叶茶多酚的提取方法，其特征在于：所述水浴加热浸提温度为30～35℃。
3.根据权利要求1所述的一种沉香叶茶多酚的提取方法，其特征在于：步骤2中，一级微波助提的料液比为1:(20～30)g/ml；微波功率为150～200w。
4.根据权利要求1所述的一种沉香叶茶多酚的提取方法，其特征在于：步骤2中，二级微波助提的料液比为1:(10～15)g/ml；微波功率为250～300w。
5.根据权利要求1所述的一种沉香叶茶多酚的提取方法，其特征在于：步骤2中，三级微波助提的料液比为1:(25～30)g/ml；微波功率为400～500W。
6.根据权利要求1所述的一种沉香叶茶多酚的提取方法，其特征在于：步骤3中，所述活性白土、活性炭与沉香叶茶多酚粗提液的料液比为：(8～10)g:(15～20)g:1000ml。
7.根据权利要求1所述的一种沉香叶茶多酚的提取方法，其特征在于：步骤3中，所述磁力搅拌速度为600～800r/min，并以3000～3500r/min离心3～5min。
8.根据权利要求1所述的一种沉香叶茶多酚的提取方法，其特征在于：步骤3中，所述减压浓缩温度为60～65℃，压力为-0.15～-0.05MPa，浓缩至固含量为10～15％。
9.根据权利要求1所述的一种沉香叶茶多酚的提取方法，其特征在于：步骤4中，超声功率为40～50w。
10.根据权利要求1所述的一种沉香叶茶多酚的提取方法，其特征在于：步骤5中，所述真空干燥温度为-35℃。
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