CN113227344A - 含有可降解载体的容器 - Google Patents

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娜塔莎·安娜·博戈西恩
纳塔利·费克特
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Abstract

本公开涉及包含含氟聚合物并含有可降解载体的容器(例如，以袋的形式)，所述可降解载体包含生物制剂捕获部分，涉及包含此类容器的细胞分离系统，以及涉及使用此类容器培养生物制剂的方法。在一个实施例中，本公开提供一种具有外表面和内表面的容器，所述内表面包含含氟聚合物，并且在所述容器中含有可降解载体；其中所述载体包含多个生物制剂捕获部分。

Description

含有可降解载体的容器
相关专利申请的交叉引用
本申请要求2018年12月31日提交的美国临时专利申请号62/786913的优先权权益，其全文据此以引用方式并入本文。
技术领域
本公开大体上涉及含有可降解载体的容器(诸如袋)。更特别地，本公开涉及包含含氟聚合物并含有可降解载体的容器(诸如袋)，所述可降解载体包含生物制剂捕获部分，涉及包含此类袋的细胞分离系统，以及涉及使用此类袋培养生物制剂的方法。
背景技术
细胞培养和细胞分离是许多应用中的重要过程。例如，用于治疗性应用(例如免疫疗法、再生医学等)的某些细胞通常在体外分离和培养。例如，诸如祖细胞和间充质干细胞的细胞、以及单核细胞和其他免疫细胞以相对低的浓度存在于血液中，且因此通常从血液中分离并进行体外培养。同样，神经元细胞、心肌细胞、上皮细胞和其他用于再生医学(如骨修复、皮肤修复、胰岛再生等)的细胞也可在体外培养。
含氟聚合物袋通常用于细胞培养。此类袋通常便宜、一次性、便携且易于使用。通常，细胞和补料培养基在培养袋内混合。随着营养物质的消耗和细胞废物的积累，必须去除并补充补料培养基。因为细胞可保持悬浮在袋内，所以可将所需细胞与耗尽的培养基一起去除。
一种常规的细胞分离过程涉及将所需细胞选择性地锚定到固体支持物上。例如，在细胞介导的免疫中起核心作用的T细胞可通过细胞表面上T细胞受体(TCR)的存在与其他淋巴细胞区分开来。具有能够结合T细胞受体的附接的蛋白质的固体支持物将选择性地捕获细胞培养物内的T细胞，而不需要的细胞保持悬浮。然而，释放捕获的细胞，例如，通过裂解锚定蛋白质，可能不合期望地改变分离的细胞。
因此，仍然需要有助于改善所需细胞的保留的细胞培养物和分离制品。
发明内容
一方面，本公开提供了一种具有外表面和内表面的容器(例如，以袋的形式)，内表面包含含氟聚合物，并且在容器中含有可降解载体；其中载体包含多个生物制剂捕获部分。
在另一方面，本公开提供了一种用于培养生物制剂的方法，所述方法包括：提供如本文所述的容器，所述容器含有生物制剂；在容器中含有的第一水性介质中将生物制剂和载体混合；从容器中去除第一水性介质；向容器中加入第二水性介质；以及降解载体。
鉴于本文的公开内容，本公开的其他方面对于本领域的普通技术人员将是显而易见的。
附图说明
图1为根据本公开的一个实施例的袋的示意性俯视图(顶部)和剖视图(底部)。
图2为根据本公开的某些实施例的袋的示意性俯视图。
图3为根据本公开的一个实施例的袋的示意性剖视图。
图4为根据本公开的一个实施例的袋的示意性剖视图。
具体实施方式
本公开涉及具有内表面且含有可降解载体的容器(例如袋)，所述内表面包含含氟聚合物，所述可降解载体包含生物制剂捕获部分。本公开表明，所需细胞可被捕获并从容器内的悬浮液被物理地分离，并且可通过对载体进行降解在不有害地影响细胞功能情况下进一步被重悬。
本公开的容器能以多种形式提供。一种特别方便的形式是袋，例如由如本文所述的一片或多片含氟聚合物材料形成的袋。本领域普通技术人员将熟悉袋结构，诸如用于细胞培养的袋结构，并且将能够基于本文的描述调整常规袋结构以用于本公开所述的袋和方法。当然，本领域普通技术人员将理解，能以多种其他形式提供本公开的容器，例如烧瓶、管、平皿。
因此，本公开的一个方面是一种容器，例如以具有外表面和内表面的袋的形式，内表面包含含氟聚合物。此类袋的某一实施例在图1的示意性俯视图(顶部)和剖视图(底部)中示出。图1的袋100包括袋壁110，所述袋壁具有外表面112和内表面114；并且进一步包括孔口130和140，所述孔口位于袋的相对端部，用于向袋中添加培养基或从袋去除培养基(例如，分别为补料培养基或废弃培养基)。本领域普通技术人员将理解，孔口的数量和位置没有特别限制，并且可以例如为了便于使用或制造而相应地进行定位。袋100可以是将两个含有含氟聚合物的片材(例如，在其内表面上具有一层氟化乙烯丙烯片材的两个片材)在它们的边缘处粘合在一起(例如，通过激光焊接、电晕放电、辐射、加热或熔融层压、蚀刻、等离子体处理、润湿、粘合剂或其组合)以形成隔室120的产物。孔口130和140可以是可密封的以提供密封的隔室120。
容器壁在其组成上可能是均匀的，或者可替代地可包括两个或更多个不同的域(例如，两层或更多层)。例如，将两个含氟聚合物片材粘合在一起，然后涂覆粘合的片材可以提供与内表面114在组成上不同的外表面112。类似地，将两个多层片材粘合在一起可以提供与内表面114在组成上不同的外表面112。多层片材可以由含氟聚合物材料和非氟化聚合物材料两者制成；在此类情况下，可以在一个或多个多层片材的内表面处提供含氟聚合物层。容器的厚度、隔室的容积以及容器和/或隔室的形状没有受到特别限制，并且可以为了便于使用或制造和/或适合特定应用而被选择。例如，容器壁的厚度可以在0.0003英寸到0.2英寸的范围内，而隔室的容积可以在100mL到100L的范围内。
图2示出了适用于本公开的袋和方法的培养袋的构型的几个示例性实施例。袋200a仅具有单个孔口230a，提供通向隔室220a的入口。袋200b处于所谓的“蛇形”构造，其中可以提供通过系统的更长的路径长度；孔口230b和240b通过由蛇形隔室220b形成的蛇形路径来连接，该蛇形隔室通过形成袋的片材的适当焊接而形成。并且袋200c具有非矩形形状，在孔口230c和240c之间具有对应的非矩形隔室220c。
容器的一个或多个壁可以是多孔的，并且可以例如对细胞培养物中产生和消耗的气体(例如O2、CO2)可渗透但对液体(例如水)不可渗透。这可以允许气体跨过容器壁与大气被动交换，以允许袋中细胞的呼吸。
本公开的容器理想地被形成，使得容器内基本上没有流体污染。因此，期望容器的内表面由不会将有机物浸出到流体中的材料形成。例如，在如本文另外描述的某些实施例中，容器壁的内表面由具有小于0.1mg/cm2(例如，小于0.05mg/cm2，或小于0.05mg/cm2)的水中总有机碳(TOC)含量的聚合物(例如含氟聚合物，诸如氟化乙烯丙烯)形成。此类容器例如在美国专利申请公开号2016/0178490和2016/0178491中描述，其各自据此通过引用整体并入本文；基于本文的描述，本领域普通技术人员可以将此类容器改造成用于本公开的容器和方法中。值得注意的是，本公开的容器不需要在其内表面处具有反应性官能团，尽管在一些情况下，诸如当可降解载体是可降解涂层时，反应性官能团可用于将可降解载体共价地附接到容器的内表面，如下所述。
该容器含有可降解载体，并且该载体包含多个生物制剂捕获部分。如本文所用，生物制剂捕获部分是生物制剂可以选择性地与之缔合的材料。生物制剂和相应的捕获部分之间的缔合足以将生物制剂保留在载体上(例如，在整个离心或过滤过程中)，并且可以是共价的或非共价的。在如本文另外描述的某些实施例中，生物制剂捕获部分包含一种或多种适配体。在某些此类实施例中，一种或多种适配体选自肽、多肽、寡核苷酸和多核苷酸(即，DNA和RNA)。例如，在本文另外描述的某些实施例中，生物制剂捕获部分包含选自随机、合成生成的序列库的寡核苷酸适配体。
在如本文另外描述的某些实施例中，生物制剂捕获部分包含具有至少两个位点的DNA适配体，生物制剂可选择性地缔合至该位点。例如，在某些此类实施例中，对于生物制剂有选择性的核苷酸子序列的至少5个、或至少10个、或至少25个、或至少50个、或至少75个、或至少100个实例存在于DNA适配体序列中。
在如本文另外描述的某些实施例中，生物制剂捕获部分包含附接到多肽的多个适配体(例如，寡核苷酸适配体)。例如，在如本文另外描述的某些实施例中，生物制剂捕获部分包含附接到抗生物素蛋白的多个生物素化的适配体。在某些此类实施例中，生物素化的适配体包含寡核苷酸或多肽。在某些此类实施例中，生物制剂捕获部分包含至少10个、或至少25个、或至少50个、或至少75个、或至少100个、或至少200个、或至少300个、或至少400个、或至少500个、或至少600个、或至少700个、或至少800个、或至少900个、或至少1000个适配体(例如，与抗生物素蛋白附接的生物素化的适配体)。在某些此类实施例中，生物制剂捕获部分包含10至1000、或10至900、或10至800、或10至700、或10至600、或10至500、或10至400、或10至300、或10至200、或25至1000、或50至1000、或100至1000、或200至1000、或300至1000、或400至1000、或500至1000、或600至1000、或700至1000、或800至1000、或10至400、或100至500、或200至600、或300至700、或400至800、或500至900、或600至1000范围内的多个适配体(例如，附接到抗生物素蛋白的生物素化的适配体)。
在如本文另外描述的某些实施例中，生物制剂选自无机物种和有机小分子。例如，在某些此类实施例中，生物制剂是金属离子。在其他此类实施例中，生物制剂是维生素、激素或肽。在如本文另外描述的某些实施例中，生物制剂是大分子，诸如例如蛋白质、酶或核酸(即，DNA或RNA)。在本文另外描述的某些实施例中，生物制剂是复杂的生物学系统，诸如例如细胞器(例如，核、核糖体、线粒体、液泡、粗面内质网、光滑内质网、高尔基体、溶酶体、中心体、囊泡、膜)或细胞片段。在如本文另外描述的某些实施例中，生物制剂是细菌或细胞群。
在如本文另外描述的某些实施例中，生物制剂是细胞(例如，正常细胞或发生病变的细胞)。例如，在如本文另外描述的某些实施例中，细胞是血细胞、干细胞或免疫细胞。在某些此类实施例中，细胞是白细胞。在某些此类实施例中，细胞是单核细胞。在某些此类实施例中，细胞是干细胞，诸如例如间充质干细胞或祖细胞。在如本文另外描述的某些实施例中，细胞是T细胞(例如，调节性T细胞)、内皮祖细胞或自然杀伤细胞。本领域普通技术人员将理解，在某些实施例中，生物制剂可以是能够被捕获以保留在细胞培养物中的符合需要的生物制剂(即，正向选择)，并且可替代地，在其他实施例中，可以是能够被捕获以从细胞培养物中去除的不合需要的生物制剂(即，负向选择)。
例如，在如本文另外描述的某些实施例中，生物制剂捕获部分包含一种或多种适配体，所述适配体可选择性地与内皮祖细胞的CD31标志物缔合。在另一实例中，在如本文另外描述的某些实施例中，生物制剂捕获部分包含一种或多种适配体，所述适配体可以选择性地与T调节性细胞的一种或多种标志物(例如，CD4、CD25、CD27)缔合。在又一实例中，在如本文另外描述的某些实施例中，生物制剂捕获部分包含一种或多种适配体，所述适配体可以选择性地与间充质干细胞的一种或多种标志物(例如，CD73、CD90、CD105)缔合。在某些此类实施例中，生物制剂捕获部分包含附接至多肽的多个适配体(例如，寡核苷酸适配体)。
如本文所用，可降解载体是具有处于未降解状态的表面的材料，生物制剂捕获部分可以(例如，通过共价接头)附接到该表面。载体可在例如水性介质的存在下保持在未降解状态至少达足以培养或分离生物制剂的一段时间，或者甚至可以无限期地保持。载体可被降解成片段或可被部分或完全溶解，并在降解状态下可与生物制剂分离。
在本文另外描述的某些实施例中，生物制剂捕获部分与可降解载体的表面的官能团共价连接。例如，可降解载体的表面可以用羧基、羟基、醛基、羰基、胺基、亚胺基、酰胺基、酯基、酸酐基、硫醇基、二硫化物、苯酚、胍、硫醚、吲哚、咪唑或重氮基团来官能化。本领域普通技术人员将理解，这些“官能团”被识别为与生物制剂捕获部分共价连接的基团；例如，“胺”官能团可以附接到带有羧基的生物制剂捕获部分，与生物制剂捕获部分形成甲酰胺键。
在某些此类实施例中，生物制剂捕获部分包含附接至蛋白质的多个适配体(例如，寡核苷酸适配体)，该蛋白质通过肽键附接至可降解载体表面的羧基。在其他此类实施例中，生物制剂捕获部分包含通过亚胺键附接至可降解载体表面的醛基的胺封端的适配体(例如，DNA适配体)。
尽管每单位的可降解载体表面的生物制剂捕获部分的数量(即捕获部分密度)没有受到特别限制，但本领域普通技术人员将理解，捕获部分密度通常可以大于每单位的可降解载体表面可被捕获的生物制剂(例如，细胞)的数量(即所捕获制剂的密度)。因此，在某些实施例中，可降解载体的捕获部分密度大于可降解载体的所捕获制剂的密度。
在如本文另外描述的某些实施例中，可降解载体包含多个可降解微载体(例如，聚合物微载体)，所述微载体具有生物制剂捕获部分可附接到的表面。例如，图3的袋300包括包围隔室320的袋壁310(具有外表面312和内表面314)、含有多个可降解微载体350的隔室320。在某些实施例中，微载体的平均尺寸在0.5μm至1000μm、或0.5μm至900μm、或0.5μm至800μm、或0.5μm至700μm、或0.5μm至600μm、或0.5μm至500μm、或0.5μm至400μm、或0.5μm至300μm、或0.5μm至250μm、或1μm至1000μm、或5μm至1000μm、或10μm至1000μm、或25μm至1000μm、或50μm至1000μm、或100μm至1000μm、或200μm至1000μm、或300μm至1000μm、或400μm至1000μm、或500μm至1000μm、或10μm至750μm、或10μm至500μm、或20μm至400μm、或50μm至300μm的范围内。
在如本文另外描述的某些实施例中，可降解载体包括邻近容器的内表面的至少一部分(例如，至少大部分甚至全部)布置的可降解涂层(例如，聚合物涂层)。在某些此类实施例中，可降解涂层共价附着到容器的内表面。例如，图4的袋400包括包围密封的隔室420的袋壁410(具有外表面412和内表面414)、含有邻近(例如，共价附接到)内表面414布置的可降解涂层460的密封的隔室420。在某些此类实施例中，可降解涂层的厚度在10nm(例如，约单层)至10mm、或10nm至1mm、或10nm至500μm、或10nm至100μm、或10nm至1μm、或1μm至10mm、或100μm至10mm、或500μm至10mm、或1mm至10mm的范围内。在某些此类实施例中，可降解涂层共价连接至容器内表面的官能团(例如，包含内表面的含氟聚合物的官能团)。在某些实施例中，官能团是羧基、羟基、醛基、羰基、胺基、亚胺基、酰胺基、酯基、酸酐基、硫醇基、二硫化物、苯酚、胍、硫醚、吲哚、咪唑或重氮基团。
在如本文另外描述的某些实施例中，可降解载体包含可裂解聚合物。例如，在某些此类实施例中，可降解载体包含酶可裂解的聚合物，诸如例如多糖。在某些此类实施例中，多糖是淀粉(例如，被α-淀粉酶裂解)。在其他此类实施例中，多糖是多聚半乳糖醛酸(例如，被果胶酶裂解)。在另一实例中，在某些此类实施例中，可降解载体包含可水解聚合物，诸如例如聚(乳酸-乙醇酸共聚物)(PLGA)、聚乳酸(PLA)或聚己内酯。在某些此类实施例中，聚合物水解在pH低于6或在pH高于8时被加速。在某些此类实施例中，聚合物水解在水解催化剂诸如例如胺的存在下被加速。
在如本文另外描述的某些实施例中，可降解载体包含交联的聚合物，所述交联的聚合物例如具有的交联数量足以提供可在水性介质中可保持未降解状态的载体。在某些此类实施例中，可降解载体包含酶可裂解的聚合物(例如，多糖)，所述酶可裂解的聚合物具有的许多交联(例如甘油二醚交联)足以提供可在具有低于酶的临界水平的水性介质中保持未降解状态的载体。在其他此类实施例中，可降解载体包含可水解的聚合物(例如，PLGA、PLA或聚己内酯)，所述可水解的聚合物具有的许多交联足以提供可在具有低于临界水平的水解催化剂的水性介质中或在具有pH超出临界范围的水性介质中保持未降解状态的载体。在另一实例中，在如本文另外描述的某些实施例中，可降解载体包含另外的可溶性聚合物的不溶性交联网络。例如，在某些此类实施例中，包含硫醚交联聚合物网络的可降解载体(例如，水凝胶)可在具有低于临界水平的谷胱甘肽的水性介质中保持未降解。
在某些实施例中，可降解载体的交联聚合物包含阻止聚合物(例如多糖)的酶裂解的交联剂。例如，在某些此类实施例中，包含Ca2+-交联多糖(例如，多聚半乳糖醛酸)的可降解载体在具有低于临界水平的Ca2+-螯合剂(例如，EDTA)的水性介质中可以保持未降解，即，即使培养基包括超过临界水平的裂解酶(例如，果胶酶)，该可降解载体也可保持未降解。
在如本文中另外描述的某些实施例中，在经历辐照时(例如，用具有小于450nm或小于420nm的波长的辐射)，可降解载体是可降解的或可降解载体的降解加速。在如本文另外描述的某些实施例中，在暴露于升高的温度(例如，高于37℃，或高于40℃)时可降解载体是可降解的或可降解载体的降解加速。
在如本文另外描述的某些实施例中，容器的内表面包含选自以下项的含氟聚合物：聚四氟乙烯(PTFE)、全氟烷氧基(PFA)、乙烯四氟乙烯(ETFE)、聚偏二氟乙烯(PVDF)、聚三氟氯乙烯(PCTFE)、乙烯三氟氯乙烯(ECTFE)、氟化乙烯丙烯(FEP)、乙烯氟化乙烯丙烯(EFEP)、全氟聚醚(PFPE)、改性聚四氟乙烯(TFM)、聚氟乙烯(PVF)或其任何混合物。例如，在如本文另外描述的某些实施例中，容器的内表面包含氟化乙烯丙烯。在如本文另外描述的某些实施例中，容器的内表面基本上由含氟聚合物(例如，氟化乙烯丙烯)组成，或者是含氟聚合物。在如本文另外描述的某些实施例中，包含袋的内表面的材料具有至少0.0003英寸、至少0.0004英寸、至少0.0005英寸、至少0.0006英寸、至少0.001英寸或至少0.10英寸的厚度。例如，在某些此类实施例中，容器的内表面处的材料具有0.0003英寸至0.2英寸、或0.0003英寸至0.1英寸、或0.0005英寸至0.08英寸、或0.001英寸至0.07英寸、或0.001英寸至0.05英寸、或0.001英寸至0.03英寸、或0.001英寸至0.018英寸、或0.001英寸至0.016英寸、或0.001英寸至0.014英寸、或0.001英寸至0.012英寸的范围内的厚度。
在如本文中另外描述的某些实施例中，构成容器壁的材料是多层材料，在其内表面具有一层含氟聚合物，并且在其外表面具有一层另一聚合物材料(含氟聚合物的或其他)。在如本文另外描述的某些实施例中，容器的外表面处的材料具有至少0.0005英寸、或至少0.001英寸、或至少0.005英寸、或至少0.0075英寸、或至少0.01英寸、或至少0.02英寸、或至少0.03英寸、或至少0.04英寸、或至少0.05英寸、或至少0.06英寸、或至少0.07英寸、或至少0.08英寸、或至少0.09英寸、或至少0.1英寸、或至少0.11英寸的厚度。例如，在某些此类实施例中，容器的外表面处的材料具有0.0005英寸至0.2英寸、或0.005英寸至0.18英寸、或0.01英寸至0.16英寸、或0.01英寸至0.14英寸、或0.01英寸至0.12英寸、或0.06英寸至0.13英寸、或0.09英寸至0.126英寸范围内的厚度。
在某些实施例中，可降解载体包含多个微载体并且容器的内表面进一步包含多个如本文所述的生物制剂捕获部分。在本文另外描述的某些实施例中，附着到容器的内表面的生物制剂捕获部分与可降解载体的生物制剂捕获部分相同。在其他实施例中，附着到容器的内表面的生物制剂捕获部分对生物制剂具有选择性，而不是对可降解载体的生物制剂捕获部分具有选择性的制剂具有选择性。有利地，本发明人已经确定此类容器可以提高生物制剂捕获效率，或者可以促进两种不同生物制剂的分离和分开。
在如本文另外描述的某些实施例中，容器的外表面包括除含氟聚合物之外的材料。例如，在某些此类实施例中，容器的外表面的材料包括热塑性聚合物、热塑性弹性体、硅、橡胶或其任意组合。可替代地，在如本文另外描述的某些实施例中，容器的外表面可包含含氟聚合物，诸如例如内表面的含氟聚合物。在某些此类实施例中，内表面和外表面(即容器壁)的材料基本上由含氟聚合物(例如，氟化乙烯丙烯)组成，或者是含氟聚合物。
在如本文另外描述的某些实施例中，容器包括生物制剂。在某些此类实施例中，生物制剂通过生物制剂捕获部分附接至载体。例如，在某些此类实施例中，生物制剂是通过结合至可降解微载体或可降解涂层的表面的适配体与载体缔合的细胞。在某些实施例中，容器的内表面包含多个生物制剂捕获部分，其至少一部分附着到生物制剂。例如，在某些此类实施例中，生物制剂是细胞，并且可以与结合到可降解微载体表面的适配体缔合，或与结合到容器内表面的适配体缔合。在某些此类实施例中，可降解微载体的生物制剂捕获部分与容器内表面处的生物制剂捕获部分相同。
在如本文另外描述的某些实施例中，容器进一步包括水性介质。水性介质可以是例如包含生物制剂和一种或多种脱靶剂的细胞培养基。如本文所用，脱靶剂是除生物制剂以外的材料(即，被生物制剂捕获部分可捕获的)，包括例如除生物制剂以外的细胞、细胞片段、蛋白质、维生素、激素、肽、和金属离子。
在如本文另外描述的某些实施例中，容器包括脱靶剂(例如，除生物制剂之外的细胞)，并且不超过20％的脱靶剂粘附至可降解载体或容器的内表面。例如，在某些此类实施例中，小于17.5％、或小于15％、或小于12.5％、或小于10％、或小于7.5％、或小于5％、或小于4％、或小于3％、或小于2％、或小于1％的脱靶剂粘附到可降解载体或容器的内表面。
本公开的另一方面是包括如本文另外描述的容器的细胞分离系统。例如，在如本文另外描述的某些实施例中，细胞分离系统包括如本文另外描述的含有水性介质的容器，以及构造成将水性介质和载体混合的摇杆。在另一实例中，在如本文另外描述的某些实施例中，细胞分离系统包括如本文另外描述的含有水性介质的容器，以及构造成将载体(例如，包含多个可降解微载体)与水性介质分离的离心机。在又一实例中，在如本文另外描述的某些实施例中，细胞分离系统包括如本文另外描述的含有水性介质的容器，以及在与容器的出口流体连通的过滤器，该过滤器构造成将载体(例如，包含多个可降解微载体)与水性介质分离。在某些实施例中，细胞分离系统的容器中的水性介质包括脱靶剂，诸如例如除生物制剂之外的细胞。
有利地，本发明人已经确定本文描述的载体的降解可以将捕获的(例如，和分离的)生物制剂释放到水性介质(例如，待储存或进一步培养)中，而不会有害地影响细胞功能。理想地，内表面的含氟聚合物可以防止生物制剂以外的材料(即，脱靶制剂)的粘附，从而提高在容器中分离的生物制剂的纯度。
因此，本公开的另一方面是一种培养生物制剂的方法，该方法包括提供如本文另外描述的含有生物制剂的容器，并且在容器中含有的第一水性介质中将生物制剂和载体混合。该方法进一步包括从容器中去除第一水性介质、向容器中加入第二水性介质以及降解载体。
在如本文另外描述的某些实施例中，容器含有包括生物制剂的血液样品(例如，全血样品)。例如，在某些此类实施例中，容器含有血样并且生物制剂是单核细胞。在某些实施例中，容器进一步包括一种或多种脱靶剂。例如，在某些此类实施例中，容器含有样品(例如全血样品)，所述样品包括生物制剂(例如单核细胞、干细胞、T细胞、内皮祖细胞或自然杀伤细胞)以及一种或多种脱靶剂(例如，除生物制剂之外的细胞)。
在如本文另外描述的某些实施例中，第一水性介质是细胞培养基。在某些此类实施例中，生物制剂是细胞，并且生物制剂在容器中培养(即，制剂在第一水性介质中生长或扩展)。当然，包含水性介质(例如，在容器中含有的全血样品中所包括的)的一种或多种脱靶剂也可在第一水性介质中扩展。在如本文另外描述的某些实施例中，生物制剂和载体在摇杆上混合。将该混合执行一段时间足以使生物制剂捕获部分和生物制剂缔合。在如本文另外描述的某些实施例中，生物制剂是细胞，并将该混合执行一段时间且在足以使生物制剂扩展的温度执行。在某些实施例中，该混合在摇杆上执行。
在如本文另外描述的某些实施例中，载体包含多个可降解微载体，并且去除第一水性介质包括使载体沉降并从容器中倾析第一水性介质。例如，在某些此类实施例中，去除第一水性介质包括用离心机沉降微载体并从容器中倾析第一水性介质。在如本文另外描述的某些实施例中，第一水性介质通过构造成保留微载体的过滤器从容器中去除。例如，在某些此类实施例中，通过具有孔径小于处于未降解状态的可降解微载体的过滤器从容器中去除第一水性介质。
在其他实施例中，载体包括邻近容器的内表面布置的可降解涂层，并且去除第一水性介质包括从容器中倾析第一水性介质(即，不沉降或过滤)。
当然，本领域普通技术人员将理解，可以将少量的第一水性介质保留在容器中。
在去除第一水性介质之后，本文另外描述的容器可含有细胞(包括例如生物制剂)和任选的一种或多种脱靶剂。理想地，保留在容器中的大部分细胞可包含附着到可降解载体和任选地通过生物制剂捕获部分附接到容器的内表面的生物制剂。例如，在如本文另外描述的某些实施例中，生物制剂是细胞，并且去除第一水性介质后，容器中至少80％、或至少82.5％、或至少85％、或至少87.5％、或至少90％、或至少92.5％、或至少95％、或至少97.5％、或至少98％、或约98.5％、或至少99％的细胞是生物制剂。
在如本文另外描述的某些实施例中，降解载体包括使载体经历pH，该PH不同于第一水性介质的pH。例如，在如本文另外描述的某些实施例中，降解载体包括使载体经历低于6或高于8的pH。在某些此类实施例中，加入容器的第二水性介质具有低于6或高于8的pH。在其他此类实施例中，将第二水性介质添加至容器之后调节第二水性介质的pH。在如本文另外描述的某些实施例中，降解载体包括使载体与水解催化剂(例如，胺类催化剂)接触。在某些此类实施例中，添加到容器中的第二水性介质含有水解催化剂。在其他此类实施例中，添加第二水性介质之后将水解催化剂添加到容器中。在某些实施例中，第二水性介质的pH能够或甚至加速由水解催化剂催化的水解反应。在如本文另外描述的某些实施例中，降解载体包括使载体与酶接触、或使酶与螯合剂接触。在某些此类实施例中，添加到容器中的第二水性介质含有酶。在其他此类实施例中，添加第二水性介质之后将酶添加到容器中。在如本文另外描述的某些实施例中，降解载体包括使载体经历升高的温度(例如，高于37℃或高于40℃的温度)。在如本文另外描述的某些实施例中，降解载体包括对载体进行辐照(例如，用具有小于450nm或小于420nm的波长的辐射)。
有利地，本发明人已经确定降解(例如，片段化、部分溶解或溶解)载体可以将捕获的生物制剂与载体分离，而不会有害地影响生物制剂。在如本文另外描述的某些实施例中，该方法进一步包括在第二水性介质(即，包括经降解的载体)中培养生物制剂。在某些此类实施例中，第二水性介质是细胞培养基。在如本文另外描述的某些实施例中，该方法进一步包括去除经降解的载体，例如通过将生物制剂沉降和去除第二水性介质，以及将第三水性介质添加到容器中。在某些此类实施例中，第三水性介质是细胞培养基或细胞储存介质。
下文列出的枚举实施例中提供了本公开的附加方面，这些方面能以任意数量或以技术上或逻辑上不矛盾的任意方式来组合。
实施例1.具有外表面和内表面的容器(例如，以袋的形式)，所述内表面包含含氟聚合物，并且在所述容器中含有可降解载体；
其中所述载体包含多个生物制剂捕获部分。
实施例2.根据实施例1所述的容器，其中可降解载体包含多个可降解微载体，每个微载体包含多个生物制剂捕获部分。
实施例3.根据实施例2所述的容器，其中微载体的平均直径在约0.5μm至约1000μm(例如，约5μm至约750μm、或约10μm至约500μm、或约25μm至约300μm)的范围内。
实施例4.根据实施例2或3所述的容器，其中容器的内表面包含多个生物制剂捕获部分。
实施例5.根据实施例1所述的容器，其中可降解载体包含可降解涂层，所述可降解涂层邻近容器的内表面的至少一部分(例如，至少大部分)被布置。
实施例6.根据实施例1-5中任一项所述的容器，其中所述生物制剂捕获部分包含一种或多种适配体。
实施例7.根据实施例1-6中任一项所述的容器，其中所述生物制剂为细胞。
实施例8.根据实施例7所述的容器，其中所述细胞为血细胞或免疫细胞。
实施例9.根据实施例7所述的容器，其中所述细胞为单核细胞、干细胞或祖细胞(例如，间充质干细胞)、T细胞(例如，调节性T细胞)、内皮祖细胞或自然杀伤细胞。
实施例10.根据实施例1-9中任一项所述的容器，其中所述可降解载体包含聚合物。
实施例11.根据实施例10所述的容器，其中可降解载体包括多糖(例如淀粉或多聚半乳糖醛酸)。
实施例12.根据实施例10所述的容器，其中所述可降解载体包含选自聚(乳酸-乙醇酸共聚物)(PLGA)、聚乳酸(PLA)和聚己内酯的一种或多种聚合物。
实施例13.根据实施例10-12中任一项所述的容器，其中所述聚合物是交联的(例如，硫醚交联、Ca2+交联或甘油二醚交联)。
实施例14.根据实施例1-13中任一项所述的容器，其中所述载体在pH低于6或在pH高于8时在水中可降解。
实施例15.根据实施例1-13中任一项所述的容器，其中所述载体与水解催化剂(例如，胺类催化剂)接触时在水中可降解。
实施例16.根据实施例1-13中任一项所述的容器，其中所述载体与酶、或酶和螯合剂接触时在水中可降解。
实施例17.根据实施例16所述的容器，其中所述酶为淀粉酶或果胶酶。
实施例18.根据实施例1-13中任一项所述的容器，其中所述载体在暴露于升高的温度(例如，高于37℃或高于40℃的温度)时在水中可降解。
实施例19.根据实施例1-13中任一项所述的容器，其中所述载体在经历辐照时(例如，用具有小于450nm或小于420nm的波长的辐射)在水中可降解。
实施例20.根据实施例1-19中任一项所述的容器，其中所述含氟聚合物为聚四氟乙烯(PTFE)、全氟烷氧基(PFA)、乙烯四氟乙烯(ETFE)、聚偏二氟乙烯(PVDF)、聚三氟氯乙烯(PCTFE)、乙烯三氟氯乙烯(ECTFE)、氟化乙烯丙烯(FEP)、乙烯氟化乙烯丙烯(EFEP)、全氟聚醚(PFPE)、改性聚四氟乙烯(TFM)、聚氟乙烯(PVF)或它们的任何混合物。
实施例21.根据实施例1-19中任一项所述的容器，其中所述含氟聚合物为氟化乙烯丙烯(FEP)。
实施例22.根据实施例1-21中任一项所述的容器，其中所述可降解载体附接于生物制剂，所述生物制剂通过所述生物制剂捕获部分附接于所述载体。
实施例23.根据实施例1-22中任一项所述的容器，所述容器含有水性介质。
实施例24.根据实施例23所述的容器，所述容器含有脱靶剂。
实施例25.根据实施例24所述的容器，其中所述脱靶剂是除所述生物制剂之外的细胞。
实施例26.根据实施例24或25所述的容器，其中小于20％(例如，小于15％、小于10％、小于5％或小于1％)的脱靶剂粘附到载体或容器的内表面。
实施例27.一种细胞分离系统，所述细胞分离系统包括根据实施例23-25中任一项所述的容器以及构造成将载体和水性介质混合的摇杆。
实施例28.一种细胞分离系统，所述细胞分离系统包括根据实施例23-25中任一项所述的容器以及构造成将载体与水性介质分离的离心机。
实施例29.一种细胞分离系统，所述细胞分离系统包括根据实施例23-25中任一项所述的容器以及与容器的出口处于流体连通的过滤器，所述过滤器被构造为将载体与水性介质分离。
实施例30.一种用于培养生物制剂的方法，所述方法包括：
提供根据实施例1-21中任一项所述的容器，所述容器含有生物制剂；
在所述容器中含有的第一水性介质中将所述生物制剂和所述载体混合；
从所述容器中去除所述第一水性介质；
向所述容器中加入第二水性介质；以及
降解所述载体。
实施例31.根据实施例30所述的方法，其中载体包含多个可降解微载体，并且其中去除第一水性介质包括用离心机沉降微载体并从容器中倾析第一水性介质。
实施例32.根据实施例30所述的方法，其中所述载体包含多个可降解微载体，并且其中通过构造为保留微载体的过滤器从容器中去除第一水性介质。
实施例33.根据实施例30所述的方法，其中所述载体包括邻近所述容器的所述内表面布置的可降解涂层，并且其中去除所述第一水性介质包括从所述容器倾析所述第一水性介质。
实施例34.根据实施例30-34中任一项所述的方法，其中
所述生物制剂为细胞；并且
去除第一水性介质后，容器中至少80％(例如，至少85％、或至少90％、或至少95％、或至少98％、或至少99％)的细胞为生物制剂。
实施例35.根据实施例30-34中任一项所述的方法，其中降解载体包括使载体经历低于6或约8的pH。
实施例36.根据实施例30-34中任一项所述的方法，其中降解载体包括使载体与水解催化剂(例如，胺类催化剂)接触。
实施例37.根据实施例30-34中任一项所述的方法，其中降解载体包括使载体与酶以及任选的与螯合剂接触。
实施例38.根据实施例30-34中任一项所述的方法，其中降解所述载体包括将所述载体暴露于升高的温度(例如，高于37℃或高于40℃的温度)。
实施例39.根据实施例30-34中任一项所述的方法，其中降解载体包括对载体进行辐照(例如，用小于450nm或小于420nm的波长的辐射)。
实施例40.根据实施例30-39中任一项所述的方法，所述方法进一步包括从容器中去除经降解的载体。
实施例41.根据实施例1-40中任一项所述的容器或方法，其中所述容器是以袋的形式。
本文所述的细节仅以举例方式示出，并且仅用于例示性地讨论本发明的优选实施例，其目的在于提供据信为本发明的各种实施例的原理和概念方面的最有用并且最容易理解的描述。就这一点而言，并未试图以超出对本发明的基本理解所必需的程度示出本发明的结构细节，其中结合附图和/或实例进行的描述使得如何在实践中实施本发明的多种形式对于本领域的技术人员而言显而易见。因此，在描述本发明所公开的工艺和设备之前，应当理解，本文所述的方面不限于特定的实施例、装置或构造，并因此当然可以变化。还应当理解，本文所用的术语仅出于描述特定方面的目的，并且除非本文中特别定义，否则并非旨在进行限制。
除非本文另外指明或与上下文明显相冲突，否则描述本发明的上下文中(尤其是在以下权利要求的上下文中)的术语“一”和“一个”和“所述”及类似的指代物应被理解为涵盖单数和复数两者。本文中数值范围的表述仅仅旨在用作单独提及落入该范围内的每个单独值的缩略方法。除非本文另外指明，否则将每个单独的值结合到本说明书中，如同在本文中单独列举的那样。范围可在本文中表示为从“约”一个特定值、和/或至“约”另一个特定值。当表达此类范围时，另一方面包括从一个特定值和/或至另一个特定值。类似地，在利用先行词“约”将值表示为近似值时，应当理解，该特定值形成另一方面。还应当理解，每个范围的端点在相对于另一个端点和独立于另一个端点方面都是显著的。
除非本文另外指明或以其他方式与上下文明显相冲突，否则本文所述的所有方法均可按任何合适的步骤顺序执行。本文所提供的任何及所有实例或示例性语言(例如，“诸如”)仅仅旨在是为了更好地示出本发明，并且除非另外要求，否则对本发明的范围不构成限制。本说明书中的语言不应理解为指示任何非要求保护的元素是实践本发明所必不可少的。
除非上下文明确要求，否则在整个说明书和权利要求书中，字词“包括”和“包含”等应被理解为具有包含性的含义，而不应被理解为具有排他性或穷举性的含义；也就是说，在“包括但不限于”的意义上使用。使用单数或复数的字词也分别包括复数和单数。此外，在本专利申请中使用的字词“本文”、“上文”、“下文”以及类似意义的字词应当是指整个专利申请，而不是指本专利申请的任何特定部分。
如本领域的普通技术人员将理解的，本文所公开的每个实施例可包括其中具体所述的要素、步骤、成分或部件，基本上由所述要素、步骤、成分或部件组成，或由所述要素、步骤、成分或部件组成。如本文所用，过渡术语“包括”或“包含”意指包括但不限于并且允许甚至大量包括未指定的要素、步骤、成分或部件。过渡短语“由……组成”不包括未指定的任何要素、步骤、成分或部件。过渡短语“基本上由……组成”将实施例的范围限制为指定的要素、步骤、成分或部件以及对实施例无实质性影响的那些要素、步骤、成分或部件。
除非另外指明，否则说明书和权利要求书中所用的表示成分的量、诸如分子量的特性、反应条件等等的所有数字在所有情况下均应理解为被术语“约”修饰。因此，除非指明是相反情况，否则说明书和所附权利要求中提出的数值参数是可能根据通过本发明寻求获得的所需特性而改变的近似值。至少，而且并非试图将等同原则的适用范围限制在权利要求书的范围内，每个数值参数至少应该根据所报告有效数字的数量，通过应用普通舍入技术来解释。为了更清楚起见，当术语“约”与指定的数值或范围结合使用时，具有本领域的技术人员合理地赋予其的含义，即表示比指定的值或范围略多或略少的值或范围，具有本领域中典型的精度。
虽然在本发明的广泛范围内所示的数字范围和参数为近似值，但具体实施例中所示的数值会尽可能准确地报告。但是，任何数值固有地含有某些必然产生自它们各自测量值范围内的标准偏差的误差。
本文所公开的发明的替代要素或实施例的分组不应理解为限制性的。每个组成员可以单独引用和受权利要求书保护或与组中的其他成员或其中发现的其他要素以任何组合方式引用和受权利要求书保护。预期组的一个或更多个组员可以由于方便和/或专利性的原因包含在组中或从组中删除。当任何此类添加或删除发生时，说明书被视为包含修改的组，从而实现对所附权利要求书中使用的所有Markush形式的组的书面说明。
本文描述了本发明的一些实施例，包括本发明人已知的实施本发明的最佳模式。当然，这些所述的实施例的变型形式对于本领域的普通技术人员将变得显而易见。本发明人期望技术人员在适当的情况下使用此类变型形式，并且本发明人打算以不同于本文具体描述的方式实践本发明。因此，本发明包括适用法律允许的随附权利要求书中所述主题的所有修改和等同形式。此外，除非另外指明或以其他方式与上下文明显相冲突，否则本发明涵盖上述元素在其所有可能变型形式中的任意组合。
在整个说明书中，对专利和印刷出版物进行了大量引用。每篇引用的参考文献和印刷出版物全文分别以引用方式并入本文中。
此外，应当理解，本文所公开的发明的实施例是对本发明原理的例示性说明。可以采用的其他修改处于本发明的范围内。因此，以举例方式但并非限制性地，可根据本文的教导来利用本发明的替代构造。因此，本发明不限于所显示和描述的内容。

Claims (23)

1.具有外表面和内表面的容器(例如，以袋的形式)，所述内表面包含含氟聚合物，并且在所述容器中含有可降解载体；
其中所述载体包含多个生物制剂捕获部分。
2.根据权利要求1所述的容器，其中所述可降解载体包含具有在约0.5μm至约1000μm范围内的平均直径的多个可降解微载体，每个微载体包含多个生物制剂捕获部分。
3.根据权利要求2所述的容器，其中所述容器的所述内表面包含多个生物制剂捕获部分。
4.根据权利要求1所述的容器，其中所述可降解载体包含可降解涂层，所述可降解涂层邻近所述容器的所述内表面的至少大部分被布置。
5.根据权利要求1所述的容器，其中所述生物制剂捕获部分包含一种或多种适配体。
6.根据权利要求1所述的容器，其中所述生物制剂为细胞。
7.根据权利要求1所述的容器，其中所述细胞为血细胞或免疫细胞，例如单核细胞、干细胞或祖细胞(例如间充质干细胞)、T细胞(例如调节性T细胞)、内皮祖细胞或自然杀伤细胞。
8.根据权利要求1所述的容器，其中所述可降解载体包含多糖(例如淀粉或多聚半乳糖醛酸)。
9.根据权利要求1所述的容器，其中所述可降解载体包含选自聚(乳酸-乙醇酸共聚物)(PLGA)、聚乳酸(PLA)和聚己内酯的一种或多种聚合物。
10.根据权利要求1所述的容器，其中所述载体在pH低于6或在pH高于8时在水中可降解。
11.根据权利要求1所述的容器，其中所述载体与水解催化剂(例如，胺类催化剂)接触时在水中可降解。
12.根据权利要求1所述的容器，其中所述载体与酶、或酶和螯合剂接触时在水中可降解。
13.根据权利要求1所述的容器，其中所述载体在暴露于高于40℃的温度时在水中可降解。
14.根据权利要求1所述的容器，其中所述载体在经历辐照时(例如，用具有小于450nm或小于420nm的波长的辐射)在水中可降解。
15.根据权利要求1所述的容器，其中所述含氟聚合物为聚四氟乙烯(PTFE)、全氟烷氧基(PFA)、乙烯四氟乙烯(ETFE)、聚偏二氟乙烯(PVDF)、聚三氟氯乙烯(PCTFE)、乙烯三氟氯乙烯(ECTFE)、氟化乙烯丙烯(FEP)、乙烯氟化乙烯丙烯(EFEP)、全氟聚醚(PFPE)、改性聚四氟乙烯(TFM)、聚氟乙烯(PVF)或它们的任何混合物。
16.根据权利要求1所述的容器，其中所述可降解载体附接于生物制剂，所述生物制剂通过所述生物制剂捕获部分附接于所述载体。
17.根据权利要求1所述的容器，所述容器含有脱靶剂，例如除所述生物制剂之外的细胞，其中少于20％的所述脱靶剂粘附到所述载体或所述容器的所述内表面。
18.一种细胞分离系统，所述细胞分离系统包含：根据权利要求1所述的容器，所述容器含有水性介质；以及以下项中的一者或多者：摇杆，所述摇杆被构造为将所述载体与所述水性介质混合；离心机，所述离心机被构造为将所述载体与所述水性介质分离；以及过滤器，所述过滤器与所述容器的出口处于流体连通，所述过滤器被构造为将所述载体与所述水性介质分离。
19.一种用于培养生物制剂的方法，所述方法包括：
提供根据权利要求1所述的容器，所述容器含有所述生物制剂；
在所述容器中含有的第一水性介质中将所述生物制剂和所述载体混合；
从所述容器中去除所述第一水性介质；
向所述容器中加入第二水性介质；以及
降解所述载体。
20.根据权利要求19所述的方法，其中所述载体包含多个可降解微载体，并且其中去除所述第一水性介质包括：用离心机使所述微载体沉降并从所述容器倾析所述第一水性介质；或通过构造为保留所述微载体的过滤器从所述容器去除所述第一水性介质。
21.根据权利要求19所述的方法，其中所述载体包括邻近所述容器的所述内表面布置的可降解涂层，并且其中去除所述第一水性介质包括从所述容器倾析所述第一水性介质。
22.根据权利要求19所述的方法，其中
所述生物制剂为细胞；并且
去除所述第一水性介质后，所述容器中至少80％的所述细胞为所述生物制剂。
23.根据权利要求19所述的方法，其中降解所述载体包括：使所述载体经历低于6或约8的pH；使所述载体与水解催化剂(例如胺类催化剂)接触；降解所述载体包括使所述载体与酶以及任选地与螯合剂接触；将所述载体暴露于升高的温度(例如，高于37℃或高于40℃的温度)；或对所述载体进行辐照(例如，用具有小于450nm或小于420nm的波长的辐射)。
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Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020142453A1 (en) * 2018-12-31 2020-07-09 Saint-Gobain Performance Plastics Corporation Containers containing degradable carriers
KR20220119479A (ko) * 2019-12-30 2022-08-29 생-고뱅 퍼포먼스 플라스틱스 코포레이션 세포 형질 도입을 위한 컨테이너 및 방법

Citations (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050054101A1 (en) * 2003-07-17 2005-03-10 Global Cell Solutions Llc Automated cell culture system and process
CN1813059A (zh) * 2003-05-02 2006-08-02 西格玛-奥尔德利希公司 固相细胞裂解和捕获平台
WO2006119054A2 (en) * 2005-04-29 2006-11-09 E. I. Du Pont De Nemours And Company Multi-step process for the manufacture of therapeutic protein
US20060254963A1 (en) * 2002-12-25 2006-11-16 Toshiyuki Kanamori Cell separation and collection apparatus and separation and collection method
US20090061010A1 (en) * 2007-03-30 2009-03-05 Massachusetts Institute Of Technology Cancer cell targeting using nanoparticles
JP2009159890A (ja) * 2008-01-07 2009-07-23 Fukuoka Prefecture 培養バッグ及び細胞培養方法
US20100317112A1 (en) * 2007-04-27 2010-12-16 Hyunjin Yang Scaffolds increased specific gravity for cell culture and method for manufacturing thereof
US20130295585A1 (en) * 2009-11-09 2013-11-07 University Of Washington Through Its Center For Commercialization Stimuli-responsive polymer diagnostic assay comprising magnetic nanoparticles and capture conjugates
WO2014127314A1 (en) * 2013-02-15 2014-08-21 Phynexus, Inc. Devices and methods for purification of biological cells
US20140287512A1 (en) * 2011-05-16 2014-09-25 Ge Healthcare Bio-Science Ab Method of cultivating cells on microcarriers in a bag
US20160153999A1 (en) * 2013-07-18 2016-06-02 The General Hospital Corporation Selective capture and release of rare mammalian cells using photodegradable hydrogels in a microfluidic platform
US20160178490A1 (en) * 2014-12-22 2016-06-23 Saint-Gobain Performance Plastics Corporation Capture system of cells and methods
US20160178491A1 (en) * 2014-12-22 2016-06-23 Saint-Gobain Performance Plastics Corporation Capture system of cells and methods
CN107109337A (zh) * 2014-12-22 2017-08-29 美国圣戈班性能塑料公司 T型细胞培养双袋组件
WO2017169259A1 (ja) * 2016-03-28 2017-10-05 ソニー株式会社 細胞培養容器、細胞培養システム、細胞培養キット及び細胞培養方法
CN108289797A (zh) * 2015-10-13 2018-07-17 哈佛学院院长及董事 用于制备和使用凝胶微球的系统和方法
US20200108391A1 (en) * 2017-04-14 2020-04-09 University Of Twente Device and Method For The Continuous Trapping of Circulating Tumor Cells
US20200209233A1 (en) * 2018-12-31 2020-07-02 Saint-Gobain Performance Plastics Corporation Containers Containing Degradable Carriers

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005536225A (ja) * 2002-08-27 2005-12-02 フェーリゲン アーゲー 拡張可能な表面領域を有する細胞培養用バイオリアクター
US20070269891A9 (en) * 2003-01-13 2007-11-22 Yasunobu Tanaka Solid surface with immobilized degradable cationic polymer for transfecting eukaryotic cells
WO2011017050A1 (en) * 2009-07-28 2011-02-10 Corning Incorporated Synthetic microcarriers for culturing cells

Patent Citations (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060254963A1 (en) * 2002-12-25 2006-11-16 Toshiyuki Kanamori Cell separation and collection apparatus and separation and collection method
CN1813059A (zh) * 2003-05-02 2006-08-02 西格玛-奥尔德利希公司 固相细胞裂解和捕获平台
US20050054101A1 (en) * 2003-07-17 2005-03-10 Global Cell Solutions Llc Automated cell culture system and process
WO2006119054A2 (en) * 2005-04-29 2006-11-09 E. I. Du Pont De Nemours And Company Multi-step process for the manufacture of therapeutic protein
US20090061010A1 (en) * 2007-03-30 2009-03-05 Massachusetts Institute Of Technology Cancer cell targeting using nanoparticles
US20100317112A1 (en) * 2007-04-27 2010-12-16 Hyunjin Yang Scaffolds increased specific gravity for cell culture and method for manufacturing thereof
JP2009159890A (ja) * 2008-01-07 2009-07-23 Fukuoka Prefecture 培養バッグ及び細胞培養方法
US20130295585A1 (en) * 2009-11-09 2013-11-07 University Of Washington Through Its Center For Commercialization Stimuli-responsive polymer diagnostic assay comprising magnetic nanoparticles and capture conjugates
US20140287512A1 (en) * 2011-05-16 2014-09-25 Ge Healthcare Bio-Science Ab Method of cultivating cells on microcarriers in a bag
WO2014127314A1 (en) * 2013-02-15 2014-08-21 Phynexus, Inc. Devices and methods for purification of biological cells
US20160153999A1 (en) * 2013-07-18 2016-06-02 The General Hospital Corporation Selective capture and release of rare mammalian cells using photodegradable hydrogels in a microfluidic platform
US20160178490A1 (en) * 2014-12-22 2016-06-23 Saint-Gobain Performance Plastics Corporation Capture system of cells and methods
US20160178491A1 (en) * 2014-12-22 2016-06-23 Saint-Gobain Performance Plastics Corporation Capture system of cells and methods
CN107109337A (zh) * 2014-12-22 2017-08-29 美国圣戈班性能塑料公司 T型细胞培养双袋组件
CN107208018A (zh) * 2014-12-22 2017-09-26 美国圣戈班性能塑料公司 细胞捕获系统和方法
CN108289797A (zh) * 2015-10-13 2018-07-17 哈佛学院院长及董事 用于制备和使用凝胶微球的系统和方法
WO2017169259A1 (ja) * 2016-03-28 2017-10-05 ソニー株式会社 細胞培養容器、細胞培養システム、細胞培養キット及び細胞培養方法
US20200108391A1 (en) * 2017-04-14 2020-04-09 University Of Twente Device and Method For The Continuous Trapping of Circulating Tumor Cells
US20200209233A1 (en) * 2018-12-31 2020-07-02 Saint-Gobain Performance Plastics Corporation Containers Containing Degradable Carriers

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
俞耀庭: "《药用高分子材料学》", 中国医药科技出版社, pages: 182 - 51 *

Also Published As

Publication number Publication date
JP2023093517A (ja) 2023-07-04
KR102615834B1 (ko) 2023-12-21
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US20200209233A1 (en) 2020-07-02
EP3906294A1 (en) 2021-11-10
WO2020142453A1 (en) 2020-07-09
EP3906294A4 (en) 2022-11-02
KR20210097835A (ko) 2021-08-09

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