CN113219174A - 一种新型冠状病毒s抗原检测试剂盒及其使用方法 - Google Patents
一种新型冠状病毒s抗原检测试剂盒及其使用方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113219174A CN113219174A CN202110398131.XA CN202110398131A CN113219174A CN 113219174 A CN113219174 A CN 113219174A CN 202110398131 A CN202110398131 A CN 202110398131A CN 113219174 A CN113219174 A CN 113219174A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- detection
- colloidal gold
- novel coronavirus
- antigen
- sample
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 171
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 title claims abstract description 83
- 101710137302 Surface antigen S Proteins 0.000 title claims abstract description 42
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 92
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 70
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 28
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 17
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 claims abstract description 17
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 34
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 32
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 32
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 32
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 claims description 30
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 claims description 26
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 claims description 26
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 claims description 25
- 238000013096 assay test Methods 0.000 claims description 18
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 claims description 16
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 claims description 16
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims description 16
- 241000283707 Capra Species 0.000 claims description 15
- 101001028244 Onchocerca volvulus Fatty-acid and retinol-binding protein 1 Proteins 0.000 claims description 11
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 claims description 11
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 claims description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 claims description 6
- 238000000576 coating method Methods 0.000 claims description 6
- 238000011160 research Methods 0.000 claims description 6
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 claims description 5
- 208000025721 COVID-19 Diseases 0.000 claims description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims description 5
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 5
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 claims description 5
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 claims description 5
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims description 5
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims description 5
- 239000011888 foil Substances 0.000 claims description 5
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 5
- 230000003053 immunization Effects 0.000 claims description 5
- 238000003317 immunochromatography Methods 0.000 claims description 5
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims description 5
- 238000002372 labelling Methods 0.000 claims description 5
- 210000003519 mature b lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 5
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 claims description 5
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 claims description 4
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 3
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 claims description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 22
- 238000003556 assay Methods 0.000 abstract description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 abstract description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 abstract 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 77
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 16
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 15
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 13
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 11
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 11
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 10
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 9
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 9
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 7
- 239000007863 gel particle Substances 0.000 description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 4
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 102100031673 Corneodesmosin Human genes 0.000 description 2
- 101710139375 Corneodesmosin Proteins 0.000 description 2
- 108700002099 Coronavirus Nucleocapsid Proteins Proteins 0.000 description 2
- 101710141454 Nucleoprotein Proteins 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 101000929928 Homo sapiens Angiotensin-converting enzyme 2 Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000011152 fibreglass Substances 0.000 description 1
- 102000048657 human ACE2 Human genes 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000011330 nucleic acid test Methods 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- 238000005464 sample preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/577—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor involving monoclonal antibodies binding reaction mechanisms characterised by the use of monoclonal antibodies; monoclonal antibodies per se are classified with their corresponding antigens
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
- G01N33/54346—Nanoparticles
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/558—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using diffusion or migration of antigen or antibody
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
- G01N33/585—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with a particulate label, e.g. coloured latex
- G01N33/587—Nanoparticles
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/005—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from viruses
- G01N2333/08—RNA viruses
- G01N2333/165—Coronaviridae, e.g. avian infectious bronchitis virus
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2469/00—Immunoassays for the detection of microorganisms
- G01N2469/10—Detection of antigens from microorganism in sample from host
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Virology (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
本发明公开了一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒及其使用方法。由胶体金免疫层析检测试纸条和检测夹组成，检测夹由表面张力减弱装置和检测结果观察组件可拆卸的连接；检测夹为空心结构，检测试纸条可拆卸的放置在检测夹内。灵敏度高、特异性好、使用便捷，采样简单方便，检测速度快(15～20分钟)；不需要特殊人员或设备辅助，检测成本低，可实时监测感染状态；特别适用于大规模自我检测，可以促进新型冠状病毒筛查效率。所用胶体金颗粒小、假阳性极低；格栅型平台区用于唾液样本表面张力的减弱，能够快速准确的与胶体金颗粒标记得单抗结合形成复合物，实现后续检测目的。
Description
技术领域
本发明涉及临床医学检技术领域，具体涉及一种新型冠状病毒S 抗原检测试剂盒及其使用方法。
背景技术
新型冠状病毒检测目前有三种，分别为：核酸检测、抗体检测、抗原检测。三种检测方法的窗口期有所区别，核酸/抗体/抗原检测各有侧重，不能相互替代，应用多种方法联合检测，可有效缩短检测窗口期，提高阳性检出率，为各种可能的风险人群提供双重保障。现有新型冠状病毒病原体检测过度依赖核酸检测，且抗体/抗原检测试剂灵敏度和特异性还有限，因此，继续研究另一种检测方法与之互补，建立快速的新型冠状病毒S抗原的方法也迫在眉睫。另外，由于唾液及其他环境样本粘度大难以流入小孔，传统检测试剂盒无法做到唾液直接检测。
胶体金免疫层析试纸条将胶体金免疫层析和单克隆抗体结合起来，既具有快速简便、准确直观等优点，同时也具有的良好特异性和敏感性。是目前应用最广泛的一种用于临床快速诊断的方法。
发明内容
基于上述技术问题，本发明采用“双抗夹心法”，使用两种抗原特异性抗体去识别和结合一个靶点抗原的不同表位的检测原理。目的是提供一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒及其使用方法。
本发明保护的一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，该检测试剂盒由胶体金免疫层析检测试纸条1和检测夹2组成，所述检测夹2由表面张力减弱装置21和检测结果观察组件22可拆卸的连接；所述胶体金免疫层析检测试纸条1包括PVC胶板11以及依次相互搭接粘贴在PVC胶板11上的样品垫12、胶体金垫13、包被抗体固相硝酸纤维素膜14和吸水垫15；所述检测夹2为空心结构，所述胶体金免疫层析检测试纸条1可拆卸的放置在检测夹2内，且所述胶体金免疫层析检测试纸条1上的包被抗体固相硝酸纤维素膜14正好对准检测结果观察组件22的观察窗口23处；所述样品垫12的上方为表面张力减弱装置21；所述检测试剂盒还包括与检测结果观察组件22配套使用的套管3。
进一步的，所述胶体金免疫层析检测试纸条1宽度为2.5～3.5mm；长度为75～85mm。
进一步的，所述胶体金垫13为单克隆抗体S003用胶体金颗粒标记后形成的复合物涂覆在玻璃纤维素膜上形成，其中，胶体金颗粒为粒径的5nm的橘红色。
进一步的，所述包被抗体固相硝酸纤维素膜14内包被有检测线 16和质控线17，其中，所述检测线16由单克隆抗体S001包被于硝酸纤维素膜上作为检测线16；所述质控线17用羊抗鼠HRP-IgG二抗包被于硝酸纤维素膜作为质控线17。
优化的，所述试剂盒中采用的单克隆抗体对S001和S003由中国科学院西北高原生物研究所研发并生产，具体使用重组新型冠状病毒 S1蛋白为免疫原，通过免疫balb/C小鼠，分离融合阳性脾成熟B细胞，使用小鼠腹水法制得。
进一步的，所述样品垫12为吸滤纸、滤油纸或玻璃纤维膜；所述吸水垫15为吸水纸。
进一步的，所述表面张力减弱装置21为格栅型平台区，所述格栅型平台区与观察窗口23处于同一水平面；所述检测结果观察组件 22的端部为圆柱形密封结构。
进一步的，所述观察窗口23为长60～88mm，宽30～50mm的长方形凹槽，凹槽的下边缘设有用于衬托胶体金免疫层析检测试纸条1 的横向托板24。
进一步的，上述检测试剂盒被包装在放入铝箔袋中封口；上述检测试剂盒检测包含新型冠状病毒Covid-19抗原的唾液或者环境样本或新型冠状病毒变异株抗原的唾液或者环境样本。
本发明还保护的一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒的使用方法，具体包括如下步骤：
表面张力减弱装置21直接伸进口腔取唾液样本，环境样本可以通过其他方式采集，采集后的唾液或者环境样本通过格栅型平台区的格栅条流到样品垫12上；若样品中含有新型冠病毒S抗原时，抗原与金标单克隆抗体S003结合形成复合物，导致胶体金颗粒在检测线聚集，出现肉眼可见的条带，复合物继续通过毛细血管作用流动与羊抗鼠IgG结合，在质控线17聚集，出现质控线；若样本中没有新型冠病毒S抗原的话，检测线16不会聚集胶体金颗粒，而质控线17 的羊抗鼠IgG依然可与标记的单抗形成复合物引起胶体金颗粒聚集，出现红色条带。
相比于现有的技术，本发明具有如下有益效果：
本发明一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，灵敏度为40pg/mL，高深圳市锦瑞生物科技有限公司的N抗原试剂盒55pg/mL的灵敏度，特异性好，使用便捷，采样简单方便，检测速度快(15～25分钟)；不需要特殊人员或设备辅助、检测成本低及可实时监测感染状态；特别适用于大规模自我检测，可以促进新型冠状病毒筛查效率。对英国新型冠状病毒变异株的灵敏度可达到10pg/mL；英国新型冠状病毒 RBD区变异，对试剂盒的功能没有影响。试剂盒对真病毒敏感。试剂盒对新型冠状活病毒敏感，阳性样本检测为阳性的最低病毒滴度约为500～1000copies/mL。其中，具体装置中所用的胶体金溶液是自主研发的5nm橘红色胶体金，具有颗粒小、假阳性极低的优点。格栅型平台区，用于样本表面张力的减弱，能够快速，准确的与胶体金颗粒标记得单抗S003结合形成复合物，实现后续检测目的。
附图说明
图1为本发明试剂盒的结构示意图；
图2为本发明剂盒的正面结构示意图；
图3为本发明试剂盒的反面结构示意图；
图4为本发明试剂盒的胶体金免疫层析检测试纸条的侧面结构示意图；
图5为本发明试剂盒的胶体金免疫层析检测试纸条的俯视结构示意图；
图6为本发明试剂盒的灵敏度测试结果；
图7为用本发明试剂盒测试英国新型冠状病毒变异株的测试结果；
图8为用本发明试剂盒测试新型冠状病毒疫苗稀释50倍后的检测结果；
图9为用本发明试剂盒测试新型冠状病毒灭活疫苗稀释2500倍后的检测能力。
图中，1、胶体金免疫层析检测试纸条；2、检测夹；3、套管； 11、PVC胶板；12、样品垫；13、胶体金垫；14、抗体固相硝酸纤维素膜；15、吸水垫；16、检测线；17、质控线；21、表面张力减弱装置；22、检测结果观察组件；23、观察窗口；24、横向托板。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，该检测试剂盒由胶体金免疫层析检测试纸条1和检测夹2组成，检测夹2由表面张力减弱装置 21和检测结果观察组件22可拆卸的连接；胶体金免疫层析检测试纸条1包括PVC胶板11以及依次相互搭接粘贴在PVC胶板11上的样品垫12、胶体金垫13、包被抗体固相硝酸纤维素膜14和吸水垫15；检测夹2为空心结构，胶体金免疫层析检测试纸条1可拆卸的放置在检测夹2内，且胶体金免疫层析检测试纸条1上的包被抗体固相硝酸纤维素膜14正好对准检测结果观察组件22的观察窗口23处；样品垫12的上方为表面张力减弱装置21；检测试剂盒还包括与检测结果观察组件22配套使用的套管3。
优选的，胶体金免疫层析检测试纸条1宽度为2.5mm；长度为 75mm。
优选的，胶体金垫13为单克隆抗体S003用胶体金颗粒标记后形成的复合物涂覆在玻璃纤维素膜上形成，其中，胶体金颗粒为粒径的 5nm的橘红色。
优选的，包被抗体固相硝酸纤维素膜14内包被有检测线16和质控线17，其中，检测线16由单克隆抗体S001包被于硝酸纤维素膜上作为检测线16；质控线17用羊抗鼠HRP-IgG二抗包被于硝酸纤维素膜作为质控线17。
优选的，试剂盒中采用的单克隆抗体对S001和S003由中国科学院西北高原生物研究所研发并生产，具体使用重组新型冠状病毒S1 蛋白为免疫原，通过免疫balb/C小鼠，分离融合阳性脾成熟B细胞，使用小鼠腹水法制得。
优选的，样品垫12为吸滤纸；吸水垫15为吸水纸。
优选的，表面张力减弱装置21为格栅型平台区，格栅型平台区与观察窗口23处于同一水平面；检测结果观察组件22的端部为圆柱形密封结构。
优选的，观察窗口23为长60mm，宽30mm的长方形凹槽，凹槽的下边缘设有用于衬托胶体金免疫层析检测试纸条1的横向托板 24。
优选的，上述检测试剂盒被包装在放入铝箔袋中封口；上述检测试剂盒检测包含新型冠状病毒Covid-19抗原的唾液样本或新型冠状病毒变异株抗原的唾液样本。
一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒的使用方法，具体包括如下步骤：
表面张力减弱装置21直接伸进口腔取唾液样本，环境样本可以通过其他方式采集，采集后的唾液或者环境样本通过格栅型平台区的格栅条流到样品垫12上；若样本中含有新型冠状病毒S抗原时，抗原与金标单克隆抗体S003结合形成复合物，导致胶体金颗粒在检测线聚集，出现肉眼可见的条带，复合物继续通过毛细血管作用流动与羊抗鼠IgG结合，在质控线17聚集，出现质控线；若样本中没有新型冠状病毒S抗原的话，检测线16不会聚集胶体金颗粒，而质控线 17的羊抗鼠IgG依然可与标记的单抗形成复合物引起胶体金颗粒聚集，出现红色条带。
结果，胶体金免疫层析检测试纸条1岀现两条线，即检测线16 和质控线17，说明检测的样本为强阳性；若试纸条只出现一条线即质控线17，说明检测的样本为阴性样本；但是无论检测什么样本，都会有质控线17的出现，只有这样，试纸条才具有可行性，否则说明试纸条无效，需找岀原因，重新制备。
实施例2
一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，该检测试剂盒由胶体金免疫层析检测试纸条1和检测夹2组成，检测夹2由表面张力减弱装置 21和检测结果观察组件22可拆卸的连接；胶体金免疫层析检测试纸条1包括PVC胶板11以及依次相互搭接粘贴在PVC胶板11上的样品垫12、胶体金垫13、包被抗体固相硝酸纤维素膜14和吸水垫15；检测夹2为空心结构，胶体金免疫层析检测试纸条1可拆卸的放置在检测夹2内，且胶体金免疫层析检测试纸条1上的包被抗体固相硝酸纤维素膜14正好对准检测结果观察组件22的观察窗口23处；样品垫12的上方为表面张力减弱装置21；检测试剂盒还包括与检测结果观察组件22配套使用的套管3。
优选的，胶体金免疫层析检测试纸条1宽度为3.5mm；长度为 85mm。
优选的，胶体金垫13为单克隆抗体S003用胶体金颗粒标记后形成的复合物涂覆在玻璃纤维素膜上形成，其中，胶体金颗粒为粒径的 5nm的橘红色。
优选的，包被抗体固相硝酸纤维素膜14内包被有检测线16和质控线17，其中，检测线16由单克隆抗体S001包被于硝酸纤维素膜上作为检测线16；质控线17用羊抗鼠HRP-IgG二抗包被于硝酸纤维素膜作为质控线17。
优选的，试剂盒中采用的单克隆抗体对S001和S003由中国科学院西北高原生物研究所研发并生产，具体使用重组新型冠状病毒S1 蛋白为免疫原，通过免疫balb/C小鼠，分离融合阳性脾成熟B细胞，使用小鼠腹水法制得。
优选的，样品垫12为玻璃纤维膜；吸水垫15为吸水纸。
优选的，表面张力减弱装置21为格栅型平台区，格栅型平台区与观察窗口23处于同一水平面；检测结果观察组件22的端部为圆柱形密封结构。
优选的，观察窗口23为长88mm，宽50mm的长方形凹槽，凹槽的下边缘设有用于衬托胶体金免疫层析检测试纸条1的横向托板 24。
优选的，上述检测试剂盒被包装在放入铝箔袋中封口；上述检测试剂盒检测包含新型冠状病毒Covid-19抗原的唾液样本或新型冠状病毒变异株抗原的唾液样本。
一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒的使用方法，具体包括如下步骤：
表面张力减弱装置21直接伸进口腔取唾液样本，采集后的唾液或样本通过格栅型平台区的格栅条流到样品垫12上；若样本中含有新型冠状病毒S抗原时，抗原与金标单克隆抗体S003结合形成复合物，导致胶体金颗粒在检测线聚集，出现肉眼可见的条带，复合物继续通过毛细血管作用流动与羊抗鼠IgG结合，在质控线17聚集，出现质控线；若样本中没有新型冠状病毒S抗原的话，检测线16不会聚集胶体金颗粒，而质控线17的羊抗鼠IgG依然可与标记的单抗形成复合物引起胶体金颗粒聚集，出现红色条带。
结果，胶体金免疫层析检测试纸条1岀现两条线，即检测线16 和质控线17，说明检测的样本为强阳性；若试纸条只出现一条线即质控线17，说明检测的样本为阴性样本；但是无论检测什么样本，都会有质控线17的出现，只有这样，试纸条才具有可行性，否则说明试纸条无效，需找岀原因，重新制备。
实施例3
一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，该检测试剂盒由胶体金免疫层析检测试纸条1和检测夹2组成，检测夹2由表面张力减弱装置 21和检测结果观察组件22可拆卸的连接；胶体金免疫层析检测试纸条1包括PVC胶板11以及依次相互搭接粘贴在PVC胶板11上的样品垫12、胶体金垫13、包被抗体固相硝酸纤维素膜14和吸水垫15；检测夹2为空心结构，胶体金免疫层析检测试纸条1可拆卸的放置在检测夹2内，且胶体金免疫层析检测试纸条1上的包被抗体固相硝酸纤维素膜14正好对准检测结果观察组件22的观察窗口23处；样品垫12的上方为表面张力减弱装置21；检测试剂盒还包括与检测结果观察组件22配套使用的套管3。
优选的，胶体金免疫层析检测试纸条1宽度为3mm；长度为 80mm。
优选的，胶体金垫13为单克隆抗体S003用胶体金颗粒标记后形成的复合物涂覆在玻璃纤维素膜上形成，其中，胶体金颗粒为粒径的 5nm的橘红色。
优选的，包被抗体固相硝酸纤维素膜14内包被有检测线16和质控线17，其中，检测线16由单克隆抗体S001包被于硝酸纤维素膜上作为检测线16；质控线17用羊抗鼠HRP-IgG二抗包被于硝酸纤维素膜作为质控线17。
优选的，试剂盒中采用的单克隆抗体对S001和S003由中国科学院西北高原生物研究所研发并生产，具体使用重组新型冠状病毒S1 蛋白为免疫原，通过免疫balb/C小鼠，分离融合阳性脾成熟B细胞，使用小鼠腹水法制得。
优选的，样品垫12为滤油纸；吸水垫15为吸水纸。
优选的，表面张力减弱装置21为格栅型平台区，格栅型平台区与观察窗口23处于同一水平面；检测结果观察组件22的端部为圆柱形密封结构。
优选的，观察窗口23为长80mm，宽40mm的长方形凹槽，凹槽的下边缘设有用于衬托胶体金免疫层析检测试纸条1的横向托板 24。
优选的，上述检测试剂盒被包装在放入铝箔袋中封口；上述检测试剂盒检测包含新型冠状病毒Covid-19抗原的环境样本或新型冠状病毒变异株抗原的环境样本。
一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒的使用方法，具体包括如下步骤：
环境样本通过其他方式采集，采集后的环境样本通过格栅型平台区的格栅条流到样品垫12上；若样本中含有新型冠状病毒S抗原时，抗原与金标单克隆抗体S003结合形成复合物，导致胶体金颗粒在检测线聚集，出现肉眼可见的条带，复合物继续通过毛细血管作用流动与羊抗鼠IgG结合，在质控线17聚集，出现质控线；若样本中没有新型冠状病毒S抗原的话，检测线16不会聚集胶体金颗粒，而质控线17的羊抗鼠IgG依然可与标记的单抗形成复合物引起胶体金颗粒聚集，出现红色条带。
结果，胶体金免疫层析检测试纸条1岀现两条线，即检测线16 和质控线17，说明检测的样本为强阳性；若试纸条只出现一条线即质控线17，说明检测的样本为阴性样本；但是无论检测什么样本，都会有质控线17的出现，只有这样，试纸条才具有可行性，否则说明试纸条无效，需找岀原因，重新制备。
实施例4
本发明试剂盒胶体金免疫层析试纸条的鉴定
(1)特异性试验
对制备好的胶体金免疫层析试纸条进行特异性检测，结果见表1。试剂盒与新型冠状病毒重组N蛋白无交叉反应，判定为阴性，表明该胶体金试纸条的特异性良好。
表1 特异性试验
(2)敏感试验
用Tris和PBS缓冲液稀释待检的新型冠状病毒S抗原，分别用制备好的胶体金免疫层析试纸条进行检测，结果见附图6。从200pg/mL至1000pg/mL，检测线相差不大，从40pg/mL开始逐渐变淡，到1pg/mL以后几乎看不见了。由此可得出，本试验的胶体金试纸条具有良好的敏感性。
如表2所示，新型冠状病毒S抗原检测试剂盒对S1蛋白RBD 区域重组蛋白表现出很强的灵敏性，10ng/mL浓度抗原及可以达到 10000RU以上的信号值，最低分辨率可以达到0.1ng/mL，属于非常灵敏的S抗原检测试剂盒。
表2 敏感性试验
深圳市锦瑞生物科技有限公司可以制造新型冠状病毒N抗原胶体金检测试剂盒，并通过了人体实验，显示出98.3％的准确性。根据深圳市锦瑞生物科技有限公司工程师介绍，他们的试剂盒使用重组N 蛋白试剂盒测试，灵敏度大约在55pg/mL。使用这种灵敏度的试剂盒即可以有效测定新型冠状病毒病人咽拭子上的新型冠状病毒N抗原，并且信号强度非常有利于判读。本发明S抗原试剂盒灵敏度为 40pg/mL，高于深圳市锦瑞生物科技有限公司的N抗原试剂盒，应该会在临床测试中显示出更好的效果。
实施例5
本发明试剂盒环境样本新型冠状病毒S抗原测试
(1)实验目的
使用青海省疾病预防控制中心存留的新型冠状病毒活病毒咽拭子，使用抗原释放剂稀释5倍，使用稀释后的新型冠状活病毒测试试剂盒灵敏度
(2)实验材料
活新型冠状病毒，抗原释放剂。
(3)检测方法
1)样本制备方法
取200μL阳性环境咽拭子储存液，加入800μL抗原暴露剂，充分混匀后制得待测样本液。
2)检测方法
将试剂条平放于桌面上，使用移液枪向试剂盒样品口中滴入 200μL待测样本液，静置20min后读取结果，每个样本重复5次。
(4)实验结果
1)阳性样本的核酸检测结果
该试剂盒的阳性判定阈值为38，也就是说2号和3号样本的CT 值勉强达到阳性的标准。该试剂盒的检测限为500copies/mL，也就是说环境2号和3号样本的病毒滴度为500至1000copies/mL之间。而1号和4号样本的病毒滴度约分别为8000copies/mL和4000 copies/mL。均属于病毒滴度极低的样本。根据青海省疾病预防控制中心核酸检测相关负责人介绍，上述4个样本的核酸检测重复性已出现问题，重复样本偶尔阴性偶尔阳性，核酸检测CT值时而高时而低，表明上述4个样本的病毒滴度太低，已不能满足重复样本之间的均一，已经逼近核酸检测灵敏度的极限。
表3 本实验所用4例阳性样本的核酸检测结果
| 样本名称 | C<sub>T</sub>值 |
| 环境样本1 | N33.88 |
| 环境样本2 | N37.22 |
| 环境样本3 | N37.106 |
| 环境样本4 | N35.08 |
2)本发明抗原检测试剂盒检测结果
①S蛋白定量
为了能够半定量地评价试剂盒性能，我们分别使用0pg/mL、 10pg/mL、50pg/mL、100pg/mL、200pg/mL和1000pg/mL重组S1蛋白测试试剂盒，在保证C线稳定的前提下，在6个不同的试剂盒上，留下了从无到有，从浅至深的6条T线，以上述6条T线为标尺线，通过对比可以得到待测样本大致的浓度。
由于在此实验中，预先使用抗原暴露剂进行阴性对照实验，重复 5次，均只显示C线而不显示T线，阴性对照重复性非常好。
②样本测定
如表2所示，所有重复实验表现出很好的均一性，所有重复实验 T线深浅均一，并且重复组使用的试剂盒为从74只试剂盒中随机选出，表示该试剂盒的量产工艺已经成熟，产品性能均一性佳。
表4 阳性样本的测试结果(单位：pg/mL)
| 样本名称 | 重复1 | 重复2 | 重复3 | 重复4 | 重复5 |
| 环境样本1 | 50-100 | 50-100 | 50-100 | 50-100 | 50-100 |
| 环境样本2 | 10-50 | 10-50 | 10-50 | 10-50 | 10-50 |
| 环境样本3 | 10-50 | 10-50 | 10-50 | 10-50 | 10-50 |
| 环境样本4 | 50-100 | 50-100 | 50-100 | 50-100 | 50-100 |
所有阳性样本测试组均显示阳性结果，与核酸检测结果完全吻合，表示该试剂盒的检测结果准确度佳。上述4个样本的病毒滴度已经逼近核酸检测的检测限，但是在S蛋白抗原检测试剂盒上，依然显示出稳定的阳性条带，表明该试剂盒的灵敏度与核酸检测非常接近，阳性样本检测为阳性的最低病毒滴度约为500～1000copies/mL。
(5)实验结论
本发明环境样本新型冠状病毒S抗原检测试剂盒对新型冠状活病毒敏感。阳性样本检测为阳性的最低病毒滴度约为500～1000 copies/mL。
实施例6
本发明试剂盒用于测试英国新型冠状病毒变异株抗原
(1)实验方法
1)实验材料
英国变异株S1蛋白(配成1000pg/mL、200pg/mL、100pg/mL、 50pg/mL和10pg/mL)，本发明检测试剂盒，PBS缓冲液。
2)检测方法
①分别配制1000pg/mL、200pg/mL、100pg/mL、50pg/mL和 10pg/mL浓度的英国变异株S1蛋白样品液；
②取6只试剂条，分别使用移液器分别滴入1000pg/mL、200pg/mL、100pg/mL、50pg/mL和10pg/mL浓度的英国变异株S1蛋白样品液，并同时检测空白组。
③每只试剂条加样后需要静置15min后观察结果，在试剂条上用 marker笔标记滴加的样本号后，同时拍照记录。
(2)实验结果
如附图7所示，使用1000pg/mL、200pg/mL、100pg/mL、50pg/mL 和10pg/mL浓度的英国变异株S1蛋白样品液，对试剂盒灵敏度进行测试，结果表明，试剂盒出现明显的阳性信号，对英国变异株的灵敏度可以达到10pg/mL。
从附图7可以看出，英国新型冠状病毒氨基酸N501Y变异后，与人类ACE2受体亲和力增强，毒力变强。但是没想到的是，变异之后反而试剂盒的测试灵敏性增强，由变异之前的40pg/mL升至 10pg/mL。我们可以做一个大胆的假设，编译之后的英国新型冠状病毒与受体的结合能力增强，同时与抗体的结合能力也增强。
(3)实验结论
英国新型冠状病毒RBD区变异，对试剂盒的功能没有影响。
实施例7
(1)实验方法
1)实验材料
新型冠状病毒灭活疫苗(剩余约10μL)，本发明检测试剂盒， PBS缓冲液。
2)检测方法
①收集注射后剩余vaccine溶液1.0毫升；
②取2只试剂条，分别使用移液器滴入vaccine原溶液150μL，如果试剂条出现阳性(2条线)则继续第三步测试，如果为阴性，则中止实验。
③取vaccine溶液10μL，加490μL去离子水稀释，获得稀释50 倍的vaccine(A)溶液，取2只试剂条，分别使用移液器滴入vaccine (A)溶液150μL，如果试剂条出现阳性(2条线)则继续第三步测试，如果为阴性，则中止实验。
④取vaccine(A)溶液10μL，加490μL去离子水稀释，获得稀释2500倍的vaccine(B)溶液，取2只试剂条，分别使用移液器滴入vaccine(B)溶液150μL，如果试剂条出现阳性(2条线)则继续第三步测试，如果为阴性，则中止实验。
⑤继续试验，直至中止实验。
⑥每只试剂条加样后需要静置15min后观察结果，在试剂条上用 marker笔标记滴加的样品号后，同时拍照记录。
(2)实验结果
如附图8所示，使用新型冠状病毒灭活疫苗50倍稀释的测试样品，对试剂盒灵敏度进行测试，结果表明，试剂盒出现明显的阳性信号，新型冠状病毒灭活疫苗稀释50倍后对本试剂盒来说依然属于高浓度样本。
由于新型冠状病毒灭活疫苗稀释50倍后信号太强，于是我们接着稀释50倍，得到稀释2500倍的真病毒样本液，继续对试剂盒进行测试，结果如附图9显示，新型冠状病毒灭活疫苗稀释2500倍后，试剂盒仍然显示较强信号，表明本试剂盒对新型冠状病毒真病毒依然较灵敏。
(3)实验结论
试剂盒对新型冠状病毒灭活疫苗具有较好的灵敏度，表明试剂盒对真病毒敏感。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (10)
1.一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，其特征在于，该检测试剂盒由胶体金免疫层析检测试纸条(1)和检测夹(2)组成，所述检测夹(2)由表面张力减弱装置(21)和检测结果观察组件(22)可拆卸的连接；所述胶体金免疫层析检测试纸条(1)包括PVC胶板(11)以及依次相互搭接粘贴在PVC胶板(11)上的样品垫(12)、胶体金垫(13)、包被抗体固相硝酸纤维素膜(14)和吸水垫(15)；所述检测夹(2)为空心结构，所述胶体金免疫层析检测试纸条(1)可拆卸的放置在检测夹(2)内，且所述胶体金免疫层析检测试纸条(1)上的包被抗体固相硝酸纤维素膜(14)正好对准检测结果观察组件(22)的观察窗口(23)处；所述样品垫(12)的上方为表面张力减弱装置(21)；所述检测试剂盒还包括与检测结果观察组件(22)配套使用的套管(3)。
2.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，其特征在于，所述胶体金免疫层析检测试纸条(1)宽度为2.5～3.5mm；长度为75～85mm。
3.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，其特征在于，所述胶体金垫(13)为单克隆抗体S003用胶体金颗粒标记后形成的复合物涂覆在玻璃纤维素膜上形成，其中，胶体金颗粒为粒径的5nm的橘红色。
4.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，其特征在于，所述包被抗体固相硝酸纤维素膜(14)内包被有检测线(16)和质控线(17)，其中，所述检测线(16)由单克隆抗体S001包被于硝酸纤维素膜上作为检测线(16)；所述质控线(17)用羊抗鼠HRP-IgG二抗包被于硝酸纤维素膜作为质控线(17)。
5.根据权利要求4所述的一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中采用的单克隆抗体对S001和S003由中国科学院西北高原生物研究所研发并生产，具体使用重组新型冠状病毒S1蛋白为免疫原，通过免疫balb/C小鼠，分离融合阳性脾成熟B细胞，使用小鼠腹水法制得。
6.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，其特征在于，所述样品垫(12)为吸滤纸、滤油纸或玻璃纤维膜；所述吸水垫(15)为吸水纸。
7.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，其特征在于，所述表面张力减弱装置(21)为格栅型平台区，所述格栅型平台区与观察窗口(23)处于同一水平面；所述检测结果观察组件(22)的端部为圆柱形密封结构。
8.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，其特征在于，所述观察窗口(23)为长60～88mm，宽30～50mm的长方形凹槽，凹槽的下边缘设有用于衬托胶体金免疫层析检测试纸条(1)的横向托板(24)。
9.根据权利要求1-8任意一项所述的一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，其特征在于，上述检测试剂盒被包装在放入铝箔袋中封口；上述检测试剂盒检测包含新型冠状病毒Covid-19抗原的唾液或者环境样本或新型冠状病毒变异株抗原的唾液或者环境样本。
10.根据权利要求9所述的一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒的使用方法，其特征在于，具体包括如下步骤：
表面张力减弱装置(21)直接伸进口腔取唾液样本，环境样本可以通过其他方式采集，采集后的唾液或者环境样本通过格栅型平台区的格栅条流到样品垫(12)上；若样品中含有新型冠病毒S抗原时，抗原与金标单克隆抗体S003结合形成复合物，导致胶体金颗粒在检测线聚集，出现肉眼可见的条带，复合物继续通过毛细血管作用流动与羊抗鼠IgG结合，在质控线(17)聚集，出现质控线；若样本中没有新型冠病毒S抗原的话，检测线(16)不会聚集胶体金颗粒，而质控线(17)的羊抗鼠IgG依然可与标记的单抗形成复合物引起胶体金颗粒聚集，出现红色条带。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110398131.XA CN113219174A (zh) | 2021-04-14 | 2021-04-14 | 一种新型冠状病毒s抗原检测试剂盒及其使用方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110398131.XA CN113219174A (zh) | 2021-04-14 | 2021-04-14 | 一种新型冠状病毒s抗原检测试剂盒及其使用方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113219174A true CN113219174A (zh) | 2021-08-06 |
Family
ID=77087111
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110398131.XA Pending CN113219174A (zh) | 2021-04-14 | 2021-04-14 | 一种新型冠状病毒s抗原检测试剂盒及其使用方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113219174A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116047064A (zh) * | 2021-10-28 | 2023-05-02 | 济南百博生物技术股份有限公司 | 自测的手持式新型冠状病毒抗原检测卡及试剂盒 |
Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004109289A1 (en) * | 2003-06-10 | 2004-12-16 | Agency For Science, Technology And Research | Method of diagnosing sars corona virus infection |
| US20090226928A1 (en) * | 2005-10-25 | 2009-09-10 | Feier Liao | Method and kit for detecting an analyte in a sample |
| CN107850594A (zh) * | 2015-08-06 | 2018-03-27 | Lia诊断公司 | 水分散性测定 |
| US20190200110A1 (en) * | 2016-09-01 | 2019-06-27 | Panasonic Intellectual Property Management Co., Lt | Speaker device and moving body device with same mounted thereon |
| CN111398589A (zh) * | 2020-02-13 | 2020-07-10 | 北京华科泰生物技术股份有限公司 | 一种快速检测新型冠状病毒n蛋白的免疫层析试剂盒及其制备方法和应用 |
| CN211148670U (zh) * | 2020-01-29 | 2020-07-31 | 兰州雅华生物技术有限公司 | 一种新型冠状病毒2019-nCoV抗原快速检测试剂盒 |
| WO2021007249A1 (en) * | 2019-07-08 | 2021-01-14 | Armitstead Annie Pitts | Paper lateral flow immunoassay |
| CN112611863A (zh) * | 2020-10-25 | 2021-04-06 | 武汉金鉴生物技术有限公司 | 一种用于检测2019新型冠状病毒的胶体碲试纸及制备方法 |
| CN214895342U (zh) * | 2021-04-14 | 2021-11-26 | 中国科学院西北高原生物研究所 | 一种新型冠状病毒s抗原检测试剂盒 |
-
2021
- 2021-04-14 CN CN202110398131.XA patent/CN113219174A/zh active Pending
Patent Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004109289A1 (en) * | 2003-06-10 | 2004-12-16 | Agency For Science, Technology And Research | Method of diagnosing sars corona virus infection |
| US20090226928A1 (en) * | 2005-10-25 | 2009-09-10 | Feier Liao | Method and kit for detecting an analyte in a sample |
| CN107850594A (zh) * | 2015-08-06 | 2018-03-27 | Lia诊断公司 | 水分散性测定 |
| US20190200110A1 (en) * | 2016-09-01 | 2019-06-27 | Panasonic Intellectual Property Management Co., Lt | Speaker device and moving body device with same mounted thereon |
| WO2021007249A1 (en) * | 2019-07-08 | 2021-01-14 | Armitstead Annie Pitts | Paper lateral flow immunoassay |
| CN211148670U (zh) * | 2020-01-29 | 2020-07-31 | 兰州雅华生物技术有限公司 | 一种新型冠状病毒2019-nCoV抗原快速检测试剂盒 |
| CN111398589A (zh) * | 2020-02-13 | 2020-07-10 | 北京华科泰生物技术股份有限公司 | 一种快速检测新型冠状病毒n蛋白的免疫层析试剂盒及其制备方法和应用 |
| CN112611863A (zh) * | 2020-10-25 | 2021-04-06 | 武汉金鉴生物技术有限公司 | 一种用于检测2019新型冠状病毒的胶体碲试纸及制备方法 |
| CN214895342U (zh) * | 2021-04-14 | 2021-11-26 | 中国科学院西北高原生物研究所 | 一种新型冠状病毒s抗原检测试剂盒 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| EKATERINI S. GOUDOURIS: "Laboratory diagnosis of COVID-19", vol. 97, pages 188 - 192 * |
| HUA LI 等: "A new and rapid approach for detecting COVID-19 based on S1 protein fragments", vol. 10 * |
| 李焕杰 等: "新型冠状病毒IgM-IgG抗体检测试剂盒的制备及对15例患者临床应用初试", vol. 58, no. 10 * |
| 王淑燕 等: "新冠病毒SARS-CoV-2检测方法研究进展", vol. 39, no. 5 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116047064A (zh) * | 2021-10-28 | 2023-05-02 | 济南百博生物技术股份有限公司 | 自测的手持式新型冠状病毒抗原检测卡及试剂盒 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111024954A (zh) | 联合检测covid-19抗原和抗体的胶体金免疫层析装置及其使用法 | |
| CN111551712B (zh) | 一种新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试纸条、试剂盒及其制备方法 | |
| WO2022206401A1 (zh) | 一种高灵敏SARS-CoV-2中和抗体的检测方法、检测试剂盒 | |
| KR20200037846A (ko) | 개선된 분석물 검출을 위한 분석 방법 | |
| CN113533721B (zh) | 甲型/乙型流感病毒抗原胶体金法检测试纸条及其制备方法 | |
| CN111239400A (zh) | 检测covid-19的胶体金免疫层析装置及其使用方法 | |
| CN111398593A (zh) | 一种快速联合检测卡及其制备方法和应用 | |
| CN108398565A (zh) | 用于检测犬c-反应蛋白的免疫荧光层析检测卡与制备方法 | |
| CN109856406B (zh) | 一种犬细小病毒抗体荧光检测试纸条及其制备方法和应用 | |
| WO2022099921A1 (zh) | 一种新型免疫层析检测装置 | |
| WO2022053072A1 (zh) | 荧光层析定量检测幽门螺杆菌抗体试剂卡及检测方法 | |
| CN106226518A (zh) | 犬瘟热病毒胶体金免疫层析检测试纸条及其制备方法 | |
| CN113567666A (zh) | 一种荧光微球标记的免疫层析法新型冠状病毒检测试纸条及其制备方法和应用 | |
| CN111426839A (zh) | 用于2019新型冠状病毒的检测试纸及制备工艺 | |
| CN214895342U (zh) | 一种新型冠状病毒s抗原检测试剂盒 | |
| CN105181964B (zh) | 水貂阿留申病毒抗体胶体金检测试纸条及其制备方法 | |
| CN113219174A (zh) | 一种新型冠状病毒s抗原检测试剂盒及其使用方法 | |
| CN114460287A (zh) | 一种中和抗体的检测方法和试剂盒 | |
| KR20210080410A (ko) | 변별적인 아이소타입 검출을 위한 측방 유동 분석 | |
| Shao | Accurate interpretation of SARS-CoV-2 antigen detection by immunochromatography | |
| CN106771193B (zh) | 一种单纯疱疹病毒II型IgM抗体的免疫层析检测试剂盒 | |
| CN213398575U (zh) | 新型冠状病毒IgM/IgG快速检测的试纸条和试剂盒 | |
| CN212008620U (zh) | 基于纳米酶的新型冠状病毒抗原和抗体的检测卡 | |
| KR20210067690A (ko) | 오리 간염 바이러스 및 오리 장염 바이러스의 고감도 시분할형광을 이용한 동시 검사방법 | |
| CN112946281B (zh) | 一种非洲猪瘟病毒快速检测试纸条及其检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210806 |