CN113179945A - 一种丰产抗倒抗病小麦新品种的育种方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种丰产抗倒抗病小麦新品种的育种方法，该方法以矮秆大穗茎秆坚硬的抗倒小麦中间材料为母本，以抗病品种扬麦18为父本杂交一次，回交一次，再温室加代，加代过程中诱发白粉病，对抗白粉病的单株进行选择，然后结合穗粒数和穗基部结实粒数增效位点QGns‑YY‑5B/QGbs‑YY‑5B进行分子标记选择，中选株系在大田种植成株行，高世代对其白粉病和赤霉病进行人工诱发选择，并加以综合农艺性状、茎秆韧性抗倒性和抗病性的选择。本发明方法育成的小麦新品种稳定遗传了扬麦18的赤霉病和白粉病抗性，又增添了非轮回亲本茎秆韧性好，抗倒性好的优良性状，平均产量显著超过扬麦18。

Description

一种丰产抗倒抗病小麦新品种的育种方法
技术领域
本发明属于农作物育种方法技术领域，涉及一种丰产抗倒抗病小麦新品种的育种方法。
背景技术
我国长江中下游稻茬麦区是小麦赤霉病的常发区和重发区，一方面该区域在小麦扬花期(4月～5月)的气候条件包括温度湿度最适宜赤霉病发病，另一方面赤霉病菌会在稻桩上越夏越冬，导致种植区域长期存在赤霉病侵染源。2012—2015年，江苏省年均赤霉病发生面积约120万hm2。赤霉病的侵染时期主要是小麦开花期，赤霉菌侵染小花后迅速在穗部扩展，在小麦籽粒灌浆成熟过程中不断繁殖，进而积累各种毒素，例如脱氧雪腐镰孢菌烯醇(deoxynivalenol，DON)、雪腐镰孢菌烯醇(nivalenol，NIV)和玉米赤霉烯酮(zearalenol，ZEN)，严重影响小麦产量，并对人畜健康造成巨大伤害，成为粮食安全的主要威胁。小麦白粉病是由禾本科布氏白粉菌引起，主要为害叶片，严重时叶鞘、茎秆、穗部均会受到侵染。近年来，随着气候变化和种植方式的改变，小麦白粉病在长江中下游区域为害也越来越严重，发病适温15～20℃，相对湿度大于70％有可能造成病害流行。小麦生产上赤霉病和白粉病发病重容易导致被害植株生长发育受到严重影响，使产量大大降低。选育和种植抗病品种是应对赤霉病和白粉病危害最经济、安全的途径。
扬麦18系江苏里下河地区农业科学研究所育成的抗赤霉病兼抗白粉病的优质弱筋小麦品种，该品种于2008年通过安徽省审定(皖麦2008001)，2011年通过浙江省审定(浙审麦2011001)。扬麦18突出的优点表现在综合抗病性好，赤霉病和白粉病抗性好于大面积推广品种扬麦158、扬麦16、宁麦13和扬麦20，经中国农业科学院植保所抗性鉴定：赤霉病达中抗赤霉病水平；中抗白粉病。两年区试平均亩产430公斤；2006～2007年度生产试验亩产425公斤。全生育期209～214天，株高81～82.1厘米，亩穗数为25.9～30万，穗粒数36.4～46粒，千粒重40克左右。
扬麦18最大的缺点是茎秆弹性或韧性较差，株型松散，易倒伏，影响其丰产性。小麦倒伏是影响小麦产量和品质的重要因素之一，倒伏后还会导致各种病害加重，小麦抽穗前倒伏，一般减产30％～40％，灌浆期倒伏减产10％～30％。防止小麦倒伏最经济有效的措施就是选择种植抗倒性强的品种。因此，需要在保持扬麦18赤霉病和白粉病抗性的同时，对其茎秆质量、株型等农艺性状进行改良，以提高丰产性。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺陷，提供一种丰产抗倒抗病小麦新品种的育种方法，该方法利用矮秆大穗茎秆韧性好的抗倒小麦中间材料作母本，在温室与抗病品种扬麦18分别杂交一次再回交一次得到BC1F1，温室加代，选择抗性好的单株挂牌标记收自交种子得到BC1F3，温室种植BC1F3代选出抗白粉病好的单株并对穗粒数和穗基部结实粒数增效位点QGns-YY-5B/QGbs-YY-5B进行分子标记选择得到BC1F4，BC1F4代在大田种植，对穗粒数和穗基部结实粒数增效位点QGns-YY-5B/QGbs-YY-5B进行分子标记选择，考察中选株行农艺性状和茎秆韧性、抗倒性、自然发病情况下的赤霉病和白粉病抗性，选择与对照相比综合农艺性状优良、抗倒性好、综合抗病性好的得到BC1F5株系，种成鉴定圃，全面考察中选株系综合农艺性状、茎秆韧性、抗倒性、抗病性、产量、千粒重等，以达到改良扬麦18的株高、株型，提高其丰产性等的育种目的。通过该育种方法培育的小麦新品种保留扬麦18对赤霉病和白粉病抗性好的同时，株型更加紧凑，茎秆韧性好，抗倒性更好，提高了丰产性和适应性。
为了达到上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种丰产抗倒抗病小麦新品种的育种方法，该方法包括以下步骤：
1)以矮秆大穗茎秆坚硬的抗倒小麦中间材料为母本，以抗病品种扬麦18为父本，在温室配制杂交组合，获得杂交F1；
2)在温室种植F1和扬麦18，将F1与扬麦18回交，收获杂交种得到BC1F1；
3)在温室继续种植BC1F1，单株自交得到BC1F2；
4)在温室继续种植BC1F2、苏麦3号和扬麦18，以苏麦3号为感病对照，诱发白粉病，以扬麦18为抗白粉病对照，选择抗性好的单株挂牌标记收自交种子得到BC1F3；温室继续种植BC1F3并挂牌标记出抗白粉病好的单株后利用分子标记检测挂牌标记单株的穗粒数和穗基部结实粒数增效位点QGns-YY-5B/QGbs-YY-5B基因型，选择阳性基因型的单株收自交种子得到BC1F4；
5)将BC1F4按照株行在大田种植，以扬麦20(长江中下游小麦品种区域试验的对照品种)作为农艺性状对照，分三期种植(每一期2行区，行长2m，行距20cm，株距4.2cm)，前两个播期筛选综合农艺性状优良的株系，最后一期为晚播，利于赤霉病和白粉病发病，设扬麦18和安农8455为赤霉病抗和感的对照，扬麦18和苏麦3号为白粉病抗和感的对照，在走道种植高感白粉病品种苏麦3号诱发白粉病，最后一期的小麦抽穗时撒施赤霉病病麦粒，诱发赤霉病，利于筛选抗赤霉病和抗白粉病的株系；在最后一期每行随机选择10个单株的混合叶片提取DNA，利用分子标记检测穗粒数和穗基部结实粒数增效位点QGns-YY-5B/QGbs-YY-5B基因型，选择阳性基因型的株行挂牌标记。在三期中挑选分子标记检测呈阳性、综合农艺性状优良、茎秆韧性抗倒性好、抗病性好于或者与抗性对照相当、性状表型较一致的株行统一在第二期挂牌标记，然后按照中选株行混合收获脱粒，测定籽粒产量和千粒重，从中选择产量高、千粒重高的株系成BC1F5；
6)在大田将中选BC1F5株系种植成鉴定圃，一次重复(10行区，小区长4m，宽2m，机械条播，基本苗15万/亩)。全面考察株系的综合农艺性状、茎秆韧性抗倒性和抗病性，进行产量鉴定，选择综合农艺性状好、茎秆韧性好抗倒性好、抗病性好于或者与抗性对照相当、产量高、千粒重高的品系进入下一轮产量试验；
作为一种优选技术方案，步骤5)～6)中所述综合农艺性状优良的标准为：株高75～85厘米、成熟期早于对照品种扬麦20、每亩有效穗数多于30万(每行定苗后查有效穗数转化为每亩)、每穗穗粒数多于40。
作为一种优选技术方案，步骤5)～6)中所述选择产量高、千粒重高的株系为：选择亩产高于480公斤，比对照增产4％及以上、千粒重高于40克的株系。
作为一种优选技术方案，步骤4)～5)中利用分子标记检测穗粒数和穗基部结实粒数增效位点QGns-YY-5B/QGbs-YY-5B基因型的方法为：设计特异性引物组采用PCR扩增的方法检测穗粒数和穗基部结实粒数增效位点QGns-YY-5B/QGbs-YY-5B对应连锁标记Xgpw4483，用于检测QGns-YY-5B/QGbs-YY-5B位点的连锁标记的特异性引物组的序列见表1，根据已有参考文献(胡文静，高德荣，陆成彬等，小麦穗部性状和株高的QTL定位及T6VS.6AL易位效应分析，麦类作物学报，2019，39(5)：505-512)，穗粒数QGns-YY-5B和穗基部结实粒数QGbs-YY-5B增效位点是同一位点，连锁标记相同，均是Xgpw4483。
表1连锁标记引物序列信息
Figure BDA0003013450400000031
采用PCR扩增的方法检测穗粒数和穗基部结实粒数增效位点QGns-YY-5B/QGbs-YY-5B对应连锁标记Xgpw4483，所述PCR扩增的方法为：所述PCR扩增的体系为10μL，包含30ng/μL小麦基因组DNA 1.0μL、10×PCR buffer 1.0μL、10Mm dNTP 0.2μL、10Mm MgCl21.0μL、5U Taq聚合酶0.2μL、5μM的上游引物0.4μL、5μM的下游引物0.4μL和无菌去离子水5.8μL；所述PCR扩增程序为：94℃预变性8min；94℃变性30s，55℃退火40s，延伸30s，36个循环；72℃延伸10分钟；4℃保存。
采用Xgpw4483引物在8％非变性聚丙乙烯酰胺凝胶电泳液中检测本研究步骤4)～5)中所涉及材料，其中Xgpw4483目标基因型与扬麦18相同视为阳性。
作为一种优选技术方案，步骤5)～6)中所述茎秆韧性抗倒性的考察方法为：用手扒拉或者按压穗子，穗子能够快速恢复直立状态，视为茎秆韧性强抗倒性好。
在具体操作过程中：利用茎秆韧性好、抗倒、矮秆大穗的种质材料为供体亲本，与扬麦18杂交，将供体亲本的茎秆韧性好的优良性状导入扬麦18品种中，杂交F1再与扬麦18回交1次，获得BC1F1，收BC1F1单株自交的种子BC1F2，温室加代，加代过程中以扬麦18为抗白粉病对照、苏麦3号为感白粉病对照并且诱发白粉病，连续进行抗白粉病接种鉴定筛选抗白粉病单株，BC1F3代挂牌标记出抗白粉病好的单株后利用分子标记检测挂牌标记单株的穗粒数和穗基部结实粒数增效位点QGns-YY-5B/QGbs-YY-5B基因型，选择阳性基因型的单株收自交种子得到BC1F4；中选的BC1F4在大田按照株行种植考察其综合农艺性状，分三期种植，前两期重点考察综合农艺性状，最后一期着重考察赤霉病和白粉病，设扬麦18和安农8455为赤霉病抗和感的对照，扬麦18和苏麦3号为白粉病抗和感的对照，田间种植苏麦3号诱发白粉病，小麦抽穗期撒施赤霉病病麦粒，诱发赤霉病，利用分子标记筛选穗粒数和穗基部结实粒数增效位点QGns-YY-5B/QGbs-YY-5B阳性基因型，选择分子标记检测呈阳性、综合农艺性状优良、茎秆韧性抗倒性和抗病性好的株行，下一年种成鉴定圃，全面鉴定田间综合农艺性状、茎秆韧性抗倒性、抗病性和产量。育成的品种(系)不仅保持了扬麦18综合抗病性好的特点，而且克服了扬麦18茎秆弱、弹性差、抗倒能力弱的弱点，在产量潜力上明显超过扬麦18，解决了高产与抗病、抗倒三者难以结合的技术难题。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
扬麦18的综合抗病性好，适宜种植在长江中下游稻茬麦区，但是其茎秆质量差易倒伏严重影响其丰产性，本发明在温室利用茎秆韧性好、抗倒、矮秆大穗的种质材料为供体亲本，与扬麦18采用1次杂交，导入茎秆韧性好的优良性状，利用F1单株与扬麦18回交一次得到BC1F1，自交得到BC1F2，温室加代，加代过程中诱发白粉病，对抗白粉病的单株进行选择，BC1F3开始结合穗粒数和穗基部结实粒数增效位点QGns-YY-5B/QGbs-YY-5B进行分子标记选择，BC1F4在大田种植成株行，对其白粉病和赤霉病进行人工诱发选择，并加以综合农艺性状、茎秆韧性抗倒性和抗病性的选择。扬麦18作为轮回亲本，使后代遗传背景具有稳定的抗病性，减少了低世代和高世代田间赤霉病和白粉病大规模鉴定的工作量，缩短育种进程，分子标记的应用使后代可以保持穗粒数和穗基部结实粒数多等优点，本发明方法育成的扬Z1566稳定遗传了扬麦18的赤霉病和白粉病抗性，又增添了非轮回亲本茎秆韧性好，抗倒性好的优良性状，平均产量显著超过扬麦18。
附图说明
图1为一种丰产抗倒抗病小麦新品种的育种方法流程图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明的技术方案作进一步详细地说明。
实施例1一种丰产抗倒抗病小麦新品种的育种方法
1)2015年1月初在温室种植矮秆大穗茎秆韧性好的抗倒小麦中间材料元友-2和抗赤霉病小麦品种扬麦18，4月以元友-2为母本，以扬麦18为父本，配制杂交组合，5月底获得杂交F1；
所述的矮秆大穗抗倒小麦中间材料为元友-2，是中国农科院李立会老师课题组在执行973项目时提供的矮杆大穗、茎秆硬的一个中间材料，现藏种在中国农科院作物科学研究所，全国统一编号是ZM017976，据查其来源于湖南省农科院作科所，系名是湘0963，系谱是元F2-1/友谊麦(中国作物种质信息网，http://www.cgris.net/#)。
2)2015年8月底在温室种植F1和扬麦18，11月将F1与扬麦18回交，12月获得BC1F1；
3)2016年1月初在温室种植BC1F1，5月底收BC1F1单株的自交种子得到BC1F2；
4)2016年8月底在温室种植BC1F2、苏麦3号和扬麦18，以扬麦18为抗白粉病对照、苏麦3号为感白粉病对照，诱发鉴定白粉病，10月鉴定其白粉病抗性，12月选择抗性好的BC1F2单株挂牌标记收自交种子得到BC1F3；收自交种子；
5)2017年1月初在温室种植BC1F3、苏麦3号和扬麦18，为以苏麦3号为感白粉病对照，诱发鉴定白粉病，扬麦18为抗白粉病对照，4月鉴定其白粉病抗性，5月底选择抗性好的单株挂牌标记，6月初利用分子标记检测挂牌标记单株的穗粒数和穗基部结实粒数增效位点QGns-YY-5B/QGbs-YY-5B基因型，选择阳性基因型的单株收自交种子得到BC1F4；
6)2017年10月中旬开始将BC1F4按照株行在大田种植，每一期2行区，行长2m，行距20cm，株距4.2cm，将扬麦20(长江中下游小麦品种区域试验的对照品种)作为农艺性状对照，分三期种植，分别是10月25日(早播)、11月10日(适播)和11月25日(晚播)。在最后一期中每行随机选择10个单株的混合叶片提取DNA，利用分子标记检测穗粒数和穗基部结实粒数增效位点QGns-YY-5B/QGbs-YY-5B基因型，选择阳性基因型的株行挂牌标记。前两个播期筛选株高75～85厘米、生育期短(成熟期比对照扬麦20早)、每亩有效穗数多于30万(每行定苗后查有效穗数转化为每亩)、每穗穗粒数多于40的株系，11月25日为晚播，利于赤霉病和白粉病发病，设扬麦18和安农8455为赤霉病抗和感的对照，扬麦18和苏麦3号为白粉病抗和感的对照，12月5日在走道种植高感白粉病品种苏麦3号诱发白粉病，11月25日播期的小麦抽穗时撒施赤霉病病麦粒，诱发赤霉病，利于筛选抗赤霉病和抗白粉病的株系。在三期中挑选出分子标记检测呈阳性、株高75～85厘米、成熟期早于对照品种扬麦20、每亩有效穗数多于30万(每行定苗后查有效穗数转化为每亩)、每穗穗粒数多于40，茎秆韧性抗倒性好(考察方法为用手扒拉或者按压穗子，穗子能够快速恢复直立状态，视为茎秆韧性强抗倒性好)，抗病性好于或者与扬麦18相当、单株间性状表型较一致的统一在第二期挂牌，并分别按中选株行混合收获脱粒、测定籽粒产量和千粒重，从中选择亩产高于480公斤，比对照增产4％及以上，千粒重高于40克的成BC1F5株系。
7)2018年10月将中选BC1F5株系在大田种植成鉴定圃，一次重复，10行区，小区长4m，宽2m，机械条播，基本苗15万/亩。以扬麦20为对照，全面考察株系综合农艺性状、茎秆韧性抗倒性和抗病性，2012年6月底收获，鉴定产量，选出株高75～85厘米、成熟期早于对照品种扬麦20、每亩有效穗数多于30万、每穗穗粒数多于40，茎秆韧性抗倒性好，抗病性好于或者与扬麦18相当，亩产高于480公斤，比对照增产4％及以上，千粒重高于40克的中选品系扬Z1566。
9)2019年10月进入品比试验，由于茎秆韧性好，2020年6月初测产扬州点的平均亩产510.12公斤，同年同点扬麦20的平均亩产是465.32公斤，扬Z1566比对照扬麦20增产9.63％(达极显著水平)，同年同点扬麦18的平均亩产是457.81公斤，扬Z1566比扬麦18增产11.43％，扬Z1566不仅保持了扬麦18抗赤霉病兼抗白粉病的特点，而且在产量潜力上明显超过扬麦18甚至长江中下游区试对照品种扬麦20。扬Z1566品种突出优点：全生育期203～204天，与对照扬麦20相当。株高76.0～77.0厘米，株型较紧凑，抗倒性好。穗层整齐，熟相好。每亩有效穗31.5～32.0万，每穗42.0～44.5粒，千粒重42.0～43.5克。赤霉病接种鉴定结果显示扬Z1566赤霉病平均病小穗率27.17％，平均严重度2.31，达中抗赤霉病水平，同年同点扬麦20的赤霉病平均病小穗率34.93％，平均严重度3.19，达中感水平，扬麦18的赤霉病平均病小穗率25.63％，平均严重度2.15；白粉病接种鉴定结果显示扬Z1566免疫白粉病，同年同点扬麦20的白粉病达到中感，扬麦18达到中抗～免疫(见表2)。
表2扬Z1566与扬麦20和扬麦18同年同点的产量表现、抗倒性、部分农艺性状和抗病性比较
Figure BDA0003013450400000071
实施例2：分子标记辅助选择穗粒数和穗基部结实粒数增效位点QGns-YY-5B/QGbs-YY-5B基因型方法的建立：
用分子标记Xgpw4483引物组分别检测实施例1中步骤5和步骤6的材料；
1、用CTAB法(参考文献：Stacey J,Isaac PG.Isolation of DNA fromplants.Methods Mol.Biol.1994,28:9–15)提取步骤5的F3单株，步骤6的F4株行苗期株行的混合叶片基因组DNA，经稀释得到DNA浓度为约30ng/μL的模板溶液。
2、根据已有参考文献(胡文静，高德荣，陆成彬等，小麦穗部性状和株高的QTL定位及T6VS.6AL易位效应分析，麦类作物学报，2019，39(5)：505-512)，穗粒数QGns-YY-5B和穗基部结实粒数QGbs-YY-5B增效位点是同一位点，连锁标记相同，均是Xgpw4483。以实施例1中步骤5、步骤6提取的基因组DNA为模板，采用实施例1所述用于检测穗粒数和穗基部结实粒数增效位点QGns-YY-5B/QGbs-YY-5B标记Xgpw4483进行PCR扩增，得到扩增产物。
本研究所用的鉴定穗粒数和穗基部结实粒数增效位点QGns-YY-5B/QGbs-YY-5B基因型的引物序列如表1所示。采用PCR扩增的方法检测穗粒数和穗基部结实粒数增效位点QGns-YY-5B/QGbs-YY-5B对应连锁标记Xgpw4483，所述PCR扩增的方法为：所述PCR扩增的体系为10μL，包含30ng/μL小麦基因组DNA 1.0μL、10×PCR buffer 1.0μL、10Mm dNTP 0.2μL、10Mm MgCl2 1.0μL、5U Taq聚合酶0.2μL、5μM的上游引物0.4μL、5μM的下游引物0.4μL和无菌去离子水5.8μL；所述PCR扩增程序为：94℃预变性8min；94℃变性30s，55℃退火40s，延伸30s，36个循环；72℃延伸10分钟；4℃保存。
采用Xgpw4483引物在8％非变性聚丙乙烯酰胺凝胶电泳液中检测实施例1中步骤5和6所涉及材料，其中Xgpw4483目标基因型与扬麦18相同视为阳性。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，本发明的保护范围不限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，可显而易见地得到的技术方案的简单变化或等效替换均落入本发明的保护范围内。

Claims (6)

1.一种丰产抗倒抗病小麦新品种的育种方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
1)以矮秆大穗茎秆坚硬的抗倒小麦中间材料为母本，以抗病品种扬麦18为父本，在温室配制杂交组合，获得杂交F1；
2)在温室种植F1和扬麦18，将F1与扬麦18回交，收获杂交种得到BC1F1；
3)在温室继续种植BC1F1，单株自交得到BC1F2；
4)在温室继续种植BC1F2、苏麦3号和扬麦18，以苏麦3号为感病对照，诱发白粉病，以扬麦18为抗白粉病对照，选择抗性好的单株挂牌标记收自交种子得到BC1F3；温室继续种植BC1F3并挂牌标记出抗白粉病好的单株后利用分子标记检测挂牌标记单株的穗粒数和穗基部结实粒数增效位点QGns-YY-5B/QGbs-YY-5B基因型，选择阳性基因型的单株收自交种子得到BC1F4；
5)将BC1F4按照株行在大田种植，以扬麦20作为农艺性状对照，分三期种植，前两个播期用于筛选综合农艺性状优良的株系，最后一期为晚播，利于赤霉病和白粉病发病，设扬麦18和安农8455为赤霉病抗和感的对照，扬麦18和苏麦3号为白粉病抗和感的对照，在走道种植高感白粉病品种苏麦3号诱发白粉病，最后一期的小麦抽穗时撒施赤霉病病麦粒，诱发赤霉病，利于筛选抗赤霉病和抗白粉病的株系；在最后一期每行随机选择10个单株的混合叶片提取DNA，利用分子标记检测穗粒数和穗基部结实粒数增效位点QGns-YY-5B/QGbs-YY-5B基因型，选择阳性基因型的株行挂牌标记；在三期中挑选分子标记检测呈阳性、综合农艺性状优良、茎秆韧性抗倒性好、抗病性好于或者与抗性对照相当、性状表型较一致的株行统一在第二期挂牌标记，然后按照中选株行混合收获脱粒，测定籽粒产量和千粒重，从中选择产量高、千粒重高的株系成BC1F5；
6)在大田将中选BC1F5株系种植成鉴定圃，一次重复，全面考察株系的综合农艺性状、茎秆韧性抗倒性和抗病性，进行产量鉴定，选择综合农艺性状好优良、茎秆韧性好抗倒性好、抗病性好于或者与抗性对照相当、产量高、千粒重高的品系进入下一轮产量试验。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤5)～6)中所述综合农艺性状优良的标准为：株高75～85厘米、成熟期早于对照品种扬麦20、每亩有效穗数多于30万、每穗穗粒数多于40。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤5)～6)中所述选择产量高、千粒重高的株系为：选择亩产高于480公斤，比对照增产4％及以上、千粒重高于40克的株系。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)～5)中利用分子标记检测穗粒数和穗基部结实粒数增效位点QGns-YY-5B/QGbs-YY-5B基因型的方法为：利用特异性引物组采用PCR扩增的方法检测穗粒数和穗基部结实粒数增效位点QGns-YY-5B/QGbs-YY-5B对应连锁标记Xgpw4483，所述特异性引物组的序列为：
Xgpw4483-F：GCCGTGGTAGACAACTCTCTG
Xgpw4483-R：CGCATCTGTTGGATGGTTC。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的体系为10μL，包含30ng/μL小麦基因组DNA 1.0μL、10×PCR buffer 1.0μL、10Mm dNTP 0.2μL、10Mm MgCl2 1.0μL、5UTaq聚合酶0.2μL、5μM的上游引物0.4μL、5μM的下游引物0.4μL和无菌去离子水5.8μL；所述PCR扩增程序为：94℃预变性8min；94℃变性30s，55℃退火40s，延伸30s，36个循环；72℃延伸10分钟；4℃保存。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤5)～6)中所述茎秆韧性抗倒性的考察方法为：用手扒拉或者按压穗子，穗子能够快速恢复直立状态，视为茎秆韧性强抗倒性好。
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