CN113171445A - 一种预防和治疗HPV病毒感染的修饰β-乳球蛋白及生物制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明属于医药技术领域,具体公开了一种预防和治疗HPV病毒感染的修饰β‑乳球蛋白,同时还公开了包含该修饰β‑乳球蛋白的生物制剂。本发明修饰β‑乳球蛋白为活性酸酐修饰的β‑乳球蛋白,修饰方法为:向β‑乳球蛋白水溶液中分批次加入活性酸酐饱和溶液,每次加入活性酸酐饱和溶液后混合反应,然后调节pH值;酸酐化的β‑乳球蛋白液用磷酸盐缓冲液透析,得到修饰β‑乳球蛋白。本发明制成的修饰β‑乳球蛋白可以用于预防及治疗HPV感染引起的宫颈病变、生殖道疣以及治疗后的复发,有效预防宫颈癌的发生,通过实验证明该修饰乳球蛋白对HPV细胞有显著的抑制作用。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域,特别是涉及一种预防和治疗HPV病毒感染的修饰β-乳球蛋白,同时还涉及包含该修饰β-乳球蛋白的生物制剂。
背景技术
HPV病毒是人乳头瘤病毒的缩写,HPV病毒能引起人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖。HPV病毒感染表现为寻常疣、生殖器疣(尖锐湿疣)等症状。随着性病中尖锐湿疣的发病率急速上升和宫颈癌、肛门癌等的增多,HPV病毒感染越来越引起人们的关注。
皮肤型的HPV人群感染率非常普遍,如常见的寻常疣、趾疣、扁平疣等。比较引起注意的是高危型的HPV感染和外生殖器的低危型HPV感染造成的生殖器疣和宫颈癌,据统计在全球的性病中,HPV感染引起的生殖器疣占15-20%。这类的疾病给人类造成了极大的痛苦。目前在临床治疗时,缺乏有效的治疗药物。因此,研究预防和治疗HPV病毒感染的药物成为目前药物研究的一个重要方向,也具有重要的意义。
发明内容
本发明主要解决的技术问题是提供一种预防和治疗HPV病毒感染的修饰β-乳球蛋白,同时还提供了一种包含修饰β-乳球蛋白的生物制剂。
为解决上述技术问题,本发明采用的一个技术方案是:一种预防和治疗HPV病毒感染的修饰β-乳球蛋白,所述修饰β-乳球蛋白为活性酸酐修饰的β-乳球蛋白,修饰方法包括以下步骤:向β-乳球蛋白水溶液中分批次加入活性酸酐饱和溶液,每次加入活性酸酐饱和溶液后经反应、然后调节pH值至5~9;酸酐化的β-乳球蛋白液用磷酸盐缓冲液透析3~5次,得到修饰β-乳球蛋白。
作为一种优选的实施方式,所述活性酸酐为3-羟基-邻苯二甲酸酐,所述活性酸酐饱和溶液为3-羟基-邻苯二甲酸酐的二甲基亚砜饱和溶液。
作为一种优选的实施方式,向β-乳球蛋白水溶液中分3~8批次加入3-羟基-邻苯二甲酸酐的二甲基亚砜饱和溶液。
作为一种优选的实施方式,调节pH值所用碱任选自NaOH、Ca(OH)2、KOH、Na3PO4、氢氧化铵,三乙醇胺和乙二胺。
作为一种优选的实施方式,酸酐化的β-乳球蛋白液采用磷酸盐缓冲液为透析液,优选透析3次,第一次透析2小时,第二次透析3小时,第三次透析12小时。
优选地,所述β-乳球蛋白水溶液中蛋白终浓度为20mg/mL。
优选地,向β-乳球蛋白水溶液中每批次加入3-羟基-邻苯二甲酸酐的二甲基亚砜饱和溶液318μL。
所述修饰β-乳球蛋白可以进一步制成药学上可接受的生物制剂。剂型可以为凝胶制剂、膏霜剂、喷雾剂等。
优选地,在制成的生物制剂中,修饰β-乳球蛋白的质量百分比浓度含量为0.01~0.05%。
进一步的,本发明提供了一种包含所述修饰β-乳球蛋白的生物制剂,包括以下质量浓度的组分:
修饰β-乳球蛋白 0.01~0.05%
甘油 3~10%
三氯生 0.1~0.3%
绿茶提取物 1~2%
无水乙醇 3~10%
卡波姆 0.1~1%。
本发明制成的修饰β-乳球蛋白,修饰生物蛋白表面的负电荷(阴离子)与病毒蛋白颗粒上的正电荷(阳离子)相互络合阻断病毒与宿主细胞的结合,同时导致病毒蛋白构象变化而失活。可以用于预防及治疗HPV感染引起的宫颈病变、生殖道疣以及治疗后的复发,有效预防宫颈癌的发生,通过实验证明该修饰乳球蛋白对HPV细胞有抑制作用。
附图说明
图1是本发明敷料1与Hela细胞的浓度(g/ml)-抑制率(%)折线图;
图2是本发明敷料2与Hela细胞的浓度(g/ml)-抑制率(%)折线图;
图3是本发明敷料1与CaSki细胞的浓度(g/ml)-抑制率(%)折线图;
图4是本发明敷料2与CaSki细胞的浓度(g/ml)-抑制率(%)折线图。
图5是本发明实施例8中皮内注射点部位图。
具体实施方式
下面对本发明的技术方案进行详细说明。
本发明提供的预防和治疗HPV病毒感染的修饰β-乳球蛋白,为活性酸酐修饰的β-乳球蛋白,修饰方法包括以下步骤:向β-乳球蛋白水溶液中分批次加入活性酸酐饱和溶液,每次加入活性酸酐饱和溶液后先震荡混合反应,然后调节pH值至5~9;酸酐化的β-乳球蛋白液用磷酸盐缓冲液透析3次,得到修饰β-乳球蛋白。具体地,先将β-乳球蛋白溶于水中,得到β-乳球蛋白水溶液;将3-羟基-邻苯二甲酸酐溶于二甲基亚砜(DMSO)溶液中(饱和浓度1.19M),得到3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液;分3-8次将3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液加入β-乳球蛋白水溶液中,每次加入3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液后先振摇混合反应12分钟,之后再加入碱调pH值至5-9。与3-羟基-邻苯二甲酸酐反应后的β-乳球蛋白液装入透析袋进行透析,透析3次,第一次2小时,第二次3小时,第3次12小时。透析后蛋白液即为修饰β-乳球蛋白,冷藏待用。
调节pH值所用碱任选自NaOH、Ca(OH)2、KOH、Na3PO4、氢氧化铵,三乙醇胺和乙二胺。
实施例1
本实施例修饰β-乳球蛋白的制备过程为:
(1)称取250mg的β-乳球蛋白,溶解于12.5ml水中,得到β-乳球蛋白水溶液,β-乳球蛋白水溶液中蛋白终浓度为20mg/mL;
(2)将3-羟基-邻苯二甲酸酐溶于二甲基亚砜(DMSO)溶液中,得到3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液,饱和浓度1.19M;
(3)向β-乳球蛋白水溶液中分五次加入3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液:
向β-乳球蛋白水溶液中第1次加3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液318ul,滴加时缓慢加入,之后反应12分钟,然后用饱和磷酸钠水溶液调pH值至8.5;
之后向β-乳球蛋白水溶液中第2次加3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液318ul调至pH值为6.0,之后反应12分钟,然后用饱和磷酸钠水溶液调pH值至8.5;
向β-乳球蛋白水溶液中第3次加3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液318ul调至pH值为6.0,之后反应12分钟,然后用饱和磷酸钠水溶液调pH值至8.5;
向β-乳球蛋白水溶液中第4次加3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液318ul调至pH值为6.0,之后反应12分钟,然后用饱和磷酸钠水溶液调pH值至8.5;
向β-乳球蛋白水溶液中第5次加3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液318ul调至pH值为6.0,之后反应12分钟,然后用饱和磷酸钠水溶液调pH值至8.5;
(4)将5次与3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液反应后的蛋白液装入透析袋置于磷酸盐缓冲液中进行透析,第一次旋转2小时,换透析液,第二次旋转3小时,换透析液,第三次透析过夜12小时。三次透析后的蛋白液即为修饰β-乳球蛋白,冷藏待用。
实施例2
本实施例修饰β-乳球蛋白的制备过程为:
(1)称取250mg的β-乳球蛋白,溶解于12.5ml水中,得到β-乳球蛋白水溶液,β-乳球蛋白水溶液中蛋白终浓度为20mg/mL;
(2)将3-羟基-邻苯二甲酸酐溶于二甲基亚砜(DMSO)溶液中,得到3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液,饱和浓度1.19M;
(3)向β-乳球蛋白水溶液中分三次加入3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液:
向β-乳球蛋白水溶液中第1次加3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液318ul,滴加时缓慢加入,之后反应12分钟,然后用饱和NaOH水溶液调pH值至8.0;
之后向β-乳球蛋白水溶液中第2次加3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液318ul调至pH值为6.0,之后反应12分钟,然后用饱和NaOH水溶液调pH值至8.0;
向β-乳球蛋白水溶液中第3次加3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液318ul调至pH值为6.0,之后反应12分钟,然后用饱和NaOH水溶液调pH值至8.0;
(4)将3次与3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液反应后的蛋白液装入透析袋置于磷酸盐缓冲液中进行透析,第一次旋转2小时,换透析液,第二次旋转3小时,换透析液,第三次透析过夜12小时。三次透析后的蛋白液即为修饰β-乳球蛋白,冷藏待用。
实施例3
本实施例修饰β-乳球蛋白的制备过程为:
(1)称取250mg的β-乳球蛋白,溶解于12.5ml水中,得到β-乳球蛋白水溶液,β-乳球蛋白水溶液中蛋白终浓度为20mg/mL;
(2)将3-羟基-邻苯二甲酸酐溶于二甲基亚砜(DMSO)溶液中,得到3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液,饱和浓度1.19M;
(3)向β-乳球蛋白水溶液中分三次加入3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液:
向β-乳球蛋白水溶液中第1次加3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液318ul,滴加时缓慢加入,之后反应12分钟,然后用饱和KOH水溶液调pH值至9.0;
之后向β-乳球蛋白水溶液中第2次加3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液318ul调至pH值为6.0,之后反应12分钟,然后用饱和KOH水溶液调pH值至9.0;
向β-乳球蛋白水溶液中第3次加3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液318ul调至pH值为6.0,之后反应12分钟,然后用饱和KOH水溶液调pH值至9.0;
(4)将3次与3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液反应后的蛋白液装入透析袋置于磷酸盐缓冲液中进行透析,第一次旋转2小时,换透析液,第二次旋转3小时,换透析液,第三次透析过夜12小时。三次透析后的蛋白液即为修饰β-乳球蛋白,冷藏待用。
实施例4
本实施例修饰β-乳球蛋白的制备过程为:
(1)称取250mg的β-乳球蛋白,溶解于12.5ml水中,得到β-乳球蛋白水溶液,β-乳球蛋白水溶液中蛋白终浓度为20mg/mL;
(2)将3-羟基-邻苯二甲酸酐溶于二甲基亚砜(DMSO)溶液中,得到3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液,饱和浓度1.19M;
(3)向β-乳球蛋白水溶液中分四次加入3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液:
向β-乳球蛋白水溶液中第1次加3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液318ul,滴加时缓慢加入,之后反应12分钟,然后用饱和氢氧化铵水溶液调pH值至7.5;
之后向β-乳球蛋白水溶液中第2次加3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液318ul调至pH值为6.0,之后反应12分钟,然后用饱和氢氧化铵水溶液调pH值至7.5;
向β-乳球蛋白水溶液中第3次加3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液318ul调至pH值为6.0,之后反应12分钟,然后用饱和氢氧化铵水溶液调pH值至7.5;
向β-乳球蛋白水溶液中第4次加3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液318ul调至pH值为6.0,之后反应12分钟,然后用饱和氢氧化铵水溶液调pH值至7.5;
(4)将4次与3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液反应后的蛋白液装入透析袋置于磷酸盐缓冲液中进行透析,第一次旋转2小时,换透析液,第二次旋转3小时,换透析液,第三次透析过夜12小时。三次透析后的蛋白液即为修饰β-乳球蛋白,冷藏待用。
实施例5
本实施例修饰β-乳球蛋白的制备过程为:
(1)称取250mg的β-乳球蛋白,溶解于12.5ml水中,得到β-乳球蛋白水溶液,β-乳球蛋白水溶液中蛋白终浓度为20mg/mL;
(2)将3-羟基-邻苯二甲酸酐溶于二甲基亚砜(DMSO)溶液中,得到3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液,饱和浓度1.19M;
(3)向β-乳球蛋白水溶液中分六次加入3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液:
向β-乳球蛋白水溶液中第1次加3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液318ul,滴加时缓慢加入,之后反应12分钟,然后用饱和氢氧化钙水溶液调pH值至7.0;
之后向β-乳球蛋白水溶液中第2次加3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液318ul调至pH值为6.0,之后反应12分钟,然后用饱和氢氧化钙水溶液调pH值至7.0;
向β-乳球蛋白水溶液中第3次加3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液318ul调至pH值为6.0,之后反应12分钟,然后用饱和氢氧化钙水溶液调pH值至7.0;
向β-乳球蛋白水溶液中第4次加3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液318ul调至pH值为6.0,之后反应12分钟,然后用饱和氢氧化钙水溶液调pH值至7.0;
向β-乳球蛋白水溶液中第5次加3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液318ul调至pH值为6.0,之后反应12分钟,然后用饱和氢氧化钙水溶液调pH值至7.0;
向β-乳球蛋白水溶液中第6次加3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液318ul调至pH值为6.0,之后反应12分钟,然后用饱和氢氧化钙水溶液调pH值至7.0;
(4)将6次与3-羟基-邻苯二甲酸酐饱和溶液反应后的蛋白液装入透析袋置于磷酸盐缓冲液中进行透析,第一次旋转2小时,换透析液,第二次旋转3小时,换透析液,第三次透析过夜12小时。三次透析后的蛋白液即为修饰β-乳球蛋白,冷藏待用。
以上实施例中,透析使用的磷酸盐缓冲液的配制过程为:取磷酸二氢钠10.8g、磷酸氢二钠32.22g、氯化钠157.95g,加水定容至18000ml。
以上实施例制备的修饰β-乳球蛋白可以进一步制成用于预防和治疗HPV病毒感染的生物制剂。在制成的生物制剂中,修饰β-乳球蛋白的质量百分比浓度含量为0.01~0.05%。
例如制成的一种敷料,包括以下质量浓度的组分:
修饰β-乳球蛋白 0.01~0.05%
甘油 3~10%
三氯生 0.1~0.3%
绿茶提取物 1~2%
无水乙醇 3~10%
卡波姆 0.1~1%。
在本发明中具体制备了两种敷料,分别如下。
敷料1 该敷料,包括以下质量浓度的组分:
修饰β-乳球蛋白 0.01%
甘油 3%
三氯生 0.1%
绿茶提取物 1%
无水乙醇 5%
卡波姆 0.3%。
修饰β-乳球蛋白采用实施例5方法制得。
以制备1千克该敷料为例,先称取含修饰β-乳球蛋白0.1g的溶液、甘油30g、三氯生1g、绿茶提取物10g、无水乙醇50g、卡波姆3g;将修饰β-乳球蛋白、卡波姆、水混合,得到A;之后甘油、三氯生、无水乙醇混合,得到B;将A和B混合,绿茶提取物加20ml水溶解后加入A和B的混合物中,加水至1千克,搅拌均匀,制得敷料。
敷料2 该敷料,包括以下质量浓度的组分:
修饰β-乳球蛋白 0.01%
甘油 10%
三氯生 0.3%
绿茶提取物 2%
无水乙醇 10%
卡波姆 0.6%。
修饰β-乳球蛋白采用实施例5方法制得。
以制备1千克该敷料为例,先称取含修饰β-乳球蛋白0.1g的溶液、甘油100g、三氯生3g、绿茶提取物20g、无水乙醇100g、卡波姆6g;将修饰β-乳球蛋白、卡波姆、水混合,得到A;之后甘油、三氯生、无水乙醇混合,得到B;将A和B混合,绿茶提取物加40ml水溶解后加入A和B的混合物中,加水至1千克,搅拌均匀,制得敷料。
实施例6
本发明还针对敷料1和敷料2对人宫颈癌细胞的抑制作用进行了效果研究。具体实验过程如下。
一、实验目的
探讨敷料1和敷料2对两种体外培养人宫颈癌细胞(Hela细胞和CaSki细胞)的抑制作用。
二、实验方法
敷料1(或敷料2)各浓度分别作用于体外培养的人宫颈癌细胞(Hela和CaSki细胞)24h、48h、72h后,采用MTT法,测量各组吸光度,计算敷料1(或敷料2)各浓度对2种人宫颈癌细胞的细胞生长抑制率。采用Probit回归法计算半数抑制浓度(IC50值)。
三、实验过程
(一)供试品信息
1、敷料1
药品名称:抗人乳头瘤病毒功能性敷料;
理化性质/生物特性:棕褐色凝胶;无臭或稍有特异气味;
规格:3g/支;
来源:海南众康悦医疗器械有限公司;
2、敷料2
药品名称:抗人乳头瘤病毒功能性敷料;
理化性质/生物特性:棕褐色凝胶;无臭或稍有特异气味;
规格:3g/支
来源:海南众康悦医疗器械有限公司。
(二)实验用材料
1、实验仪器
压力蒸汽灭菌器(DSX-280KB24);
自动细胞计数仪(IC1000);
电子天平(JY2003);
二氧化碳培养箱(CLM-170B-8-NF);
台式低速离心机(L500);
倒置生物显微镜(AE31);
数显冷冻水浴恒温振荡器(SHA-2);
全自动酶标仪(ELx800)。
2、实验试剂
胎牛血清(货号:10099-141,批号:1912660C),生产厂家为Gibco公司;
1640培养基(货号:SH30809.01,批号:AC12557263),生产厂家为Hyclone公司;
DMEM高糖培养基(货号:12100-500,批号:20180717),胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%,货号:T1300),青链霉素混合液(100×,货号:P1400),均购置于Solarbio公司;
MTT(货号:M2128-1G,批号:MKBZ5197V),生产厂家为sigma-aldrich公司;
异丙醇(分析纯)购置于国药集团化学试剂有限公司;
D-Hanks液,自配;
DMEM高糖细胞培养液(50ml)配置:5ml胎牛血清,0.5ml青链霉素混合液,然后加入DMEM高糖培养基至50ml,混匀后即得;
1640细胞培养液(50ml)配置:5ml胎牛血清,0.5ml青链霉素混合液,然后加入1640培养基至50ml,混匀后即得。
3、细胞株
人宫颈癌细胞(Hela细胞),中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心提供,适用的培养基为含10%胎牛血清的DMEM高糖细胞培养液。
人宫颈癌细胞(CaSki细胞),中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心提供,适用的培养基为含10%胎牛血清的1640细胞培养液。
(三)实验步骤
1、供试液配制
取敷料1(或敷料2)3g,加入3ml的DMEM高糖细胞培养液,浓度为1g/ml,用移液器上下抽打混匀,超声震荡混匀10min后,4000rpm离心10min,取上清液用于试验。将上述上清液用细胞培养液分别稀释成0.001、0.01、0.1、1g/ml。
取敷料1(或敷料2)3g,加入3ml的1640细胞培养液,浓度为1g/ml,用移液器上下抽打混匀,超声震荡混匀10min后,4000rpm离心10min,取上清液用于试验。将上述上清液用细胞培养液分别稀释成0.00625、0.0125、0.025、0.05、0.1、0.2g/ml。
2、具体实验
(1)MTT试验
细胞悬液制备:将近80%汇合的细胞用0.25%胰蛋白酶消化2~5min后,用含10%胎牛血清培养液终止消化后,1000rpm离心5min,弃上清,用D-Hanks液按上述方法洗涤1次,弃去洗涤液,加入含DMEM高糖培养液或1640细胞培养液,吹打完全,自动细胞计数仪下计数,将细胞悬液稀释至1×105个/ml,待用。
取96孔细胞培养板,在96孔板试验区外围每孔加入0.1ml无细胞的含10%胎牛血清培养液,剩余中间每孔接种0.1ml上述制备好的细胞悬液。置CO2培养箱培养24h(37℃,5%CO2)。
24h后,弃去加入细胞孔的原培养液,分别加入空白细胞培养液、配制好的各个浓度的供试液,每孔100μl,每个组均设6个复孔。置CO2培养箱继续培养24h或48h或72h。在上述不同时间点培养结束后,取出培养板,显微镜下观察形态学改变,然后弃去测试孔培养液,每孔加入50μl的1mg/mL的MTT溶液,37℃孵育2h后弃去所有孔内液体,加入0.1ml异丙醇,置振荡器上振荡10min,在酶标仪490nm波长下测定吸光度,按下式计算细胞生长抑制率。实验均重复3次。
细胞生长抑制率(%)=(空白组OD-实验组OD)/空白组OD×100%。
(2)统计学实验
采用SPSS 13.0统计软件分析。定量资料用均数±标准差表示,组间差异性分析采用ANOVA单因素方差分析,两两组间比较采用LSD检验法或Tamhane's T2检验法,检验水准α=0.05。半数抑制浓度(IC50值)的计算采用概率单位回归法(即Probit回归),统计分析时对剂量变量以10或2为底数的转换。
四、实验结果
(一)两种抗人乳头瘤病毒功能性敷料对Hela细胞的抑制作用
培养结束后,显微镜下观察2种抗人乳头瘤病毒功能性敷料各剂量组对Hela细胞的抑制作用,2种抗人乳头瘤病毒功能性敷料各剂量组对Hela细胞生长抑制率结果见表1。敷料1与Hela细胞的浓度-抑制率折线图见图1所示,敷料2与Hela细胞的浓度-抑制率折线图见图2所示。
表1
注:各处理时间点剂量组间方差分析,p均<0.01;各处理时间点不同剂量组间比较,差异均具有统计学差异,p<0.05。
(二)两种抗人乳头瘤病毒功能性敷料对CaSki细胞的抑制作用
培养结束后,显微镜下观察2种抗人乳头瘤病毒功能性敷料各剂量组对CaSki细胞的抑制作用,2种抗人乳头瘤病毒功能性敷料各剂量组对CaSki细胞生长抑制率结果见表2。敷料1与CaSki细胞的浓度-抑制率折线图见图3所示,敷料2与CaSki细胞的浓度-抑制率折线图见图4所示。
表2
注:各处理时间点剂量组间方差分析,p均<0.01;**表示与0.00625g/ml剂量组比较p<0.01;a或aa表示与0.0125g/ml剂量组比较p<0.05或p<0.01;b或bb表示与0.025g/ml剂量组比较p<0.05或p<0.01;c或cc表示与0.05g/ml剂量组比较p<0.05或p<0.01。
以上实验结果表明,本发明提供的抗人乳头瘤病毒功能性敷料分别在作用24h、48h、72h后,对2种体外培养人宫颈癌细胞(Hela细胞和CaSki细胞)均有显著的抑制作用。
实施例7
本实施例对敷料的细胞毒性进行了研究。试验过程具体如下。
一、实验目的
通过体外细胞毒性试验,对试验样品引起细胞毒性的风险进行评价。
二、实验方法
将试验液加入到被琼脂培养基覆盖的单层细胞上,置于二氧化碳培养箱37℃培养24h后观察结果。
三、实验过程
(一)供试品信息
1、采用上述敷料1进行试验;
药品名称:抗人乳头瘤病毒功能性敷料;
理化性质/生物特性:棕褐色凝胶;无臭或稍有特异气味;
规格:3g/支;
来源:海南众康悦医疗器械有限公司;
培养基:DMEM培养基粉末(生产厂家:Gibco公司);
血清:胎牛血清(生产厂家:Gibco公司);
浸提介质:含10%胎牛血清的MEM培养液;
试验样品制备:取敷料1,按0.2g:1ml的浸提比例,37℃下浸提24h;将得到的浸提液稀释8倍得12.5%的供试液;用直径为5mm的滤纸浸透试液用于试验;
空白对照液:同批浸提介质,37℃放置24h,作为空白对照液;
阴性对照:取高密度聚乙烯,用超纯水洗净晾干,紫外线照射过夜;按0.2g/ml的比例加入同批浸提介质37℃下浸提24h;用直径为5mm的滤纸浸透试液用于试验;
阳性对照:取0.4ml苯酚加入到7.6ml细胞培养液中,即得5%苯酚;用直径为5mm的滤纸浸透试液用于试验;
细胞株:小鼠成纤维细胞(L-929),由中科院上海生命科学研究院细胞资源中心提供。
(二)实验步骤
1、将已培养48h~72h生长旺盛的细胞用消化液消化后加入细胞培养基,吹打混匀计数后将细胞悬液配制成密度2.5×105个/ml,接种于直径90mm培养皿,每皿10ml,共4皿;置CO2培养箱培养24h(37℃,5%CO2);显微镜下观察细胞形态;
2、弃去原培养液,加10ml新制备的1×琼脂生长培养基;待琼脂培养基在室温下凝固(约30min)后,加入10ml中性红活体染料并在暗处保存30min;吸除多余的中性红溶液;
每皿中各加入一个浸提介质、一个阴性对照、一个阳性对照、一个供试样品;每个样本间保持20mm以上的距离;将培养皿置CO2培养箱继续培养24h;
3、培养结束后,显微镜下观察细胞试验材料和对照材料的周围褪色区域,根据表3中的琼脂扩散试验细胞毒性反应分级标准判定每一个试验材料的结果,最终的反应结果是4个平行样试验反应的中值。
表3
四、实验结果
试验结果如下表4所示。
表4
由表4结果可知,12.5%供试液组细胞毒性分级为2级,按标准判定,12.5%供试液组细胞毒性反应程度为轻度细胞毒性。
实施例8
本实施例对敷料的皮肤致敏性进行了研究。
一、实验目的
采用豚鼠最大剂量试验,对试验样品在试验条件下使豚鼠产生皮肤致敏反应的潜能做出评定。
二、实验方法
将浸提液按比例配制后,在豚鼠背部去毛部位按要求皮内注射,0.1ml/注射点,进行皮内诱导,皮内诱导后7d(±1d)将试验样品浸提液及对照液的贴敷片贴敷在皮内诱导部位,贴敷48h后去除,局部诱导阶段后14d(±1d)豚鼠腹部去毛,将浸提液及对照液的贴敷片贴敷在去毛部位,24h后去除,分别于去除贴敷后24h和48h观察豚鼠激发部位的皮肤红斑和水肿反应,进行描述并分级。
三、实验过程
(一)供试品信息
1、采用上述敷料1进行试验;
药品名称:抗人乳头瘤病毒功能性敷料;
理化性质/生物特性:棕褐色凝胶;无臭或稍有特异气味;
规格:3g/支;
来源:海南众康悦医疗器械有限公司;
0.9%氯化钠注射液,来源:江西科伦药业有限公司,规格:540ml:4.5g;
棉籽油,来源:商河县昌源油脂有限公司;
试验样品制备:
极性溶剂浸提液制备:取试验样品,加0.9%氯化钠注射液,在37℃浸提72h(浸提比例:0.2g:1ml);
非极性溶剂浸提液制备:取试验样品,加棉籽油,在37℃浸提72h(浸提比例:0.2g:1ml);
空白对照液制备:不加试验样品,同上法制备相应溶剂对照液;
试验动物:
等级、种系:豚鼠;
动物来源:长沙市天勤生物技术有限公司;
数量:30只;
性别:雄性:
体重:300~500g;
标记方法:苦味酸标记法;
检疫期:3天,检疫合格后使用;
饲养管理:
饲养房间:普通级动物房;温、湿度:温度18~29℃,相对湿度40%~70%;光照:昼夜明暗交替时间:10h/14h;
饲料:豚鼠生长繁殖饲料,北京科澳协力饲料有限公司;给料方法:自由摄食;
饮水:清洁生活用水,动物专用水瓶供给,自由饮水。
(二)实验步骤
1、取健康、初成年白化豚鼠,体重在300~500g,按体重随机分为试验样品组每种浸提液各10只,阴性对照组各5只,试验前彻底除去试验部位被毛。
2、皮内诱导
在每只动物的肩胛骨内侧部位成对皮内注射0.1ml,注射物如下:
部位A:注射弗氏完全佐剂与选定溶剂以50:50(体积比)比例混合的稳定性乳化剂;
部位B:注射试验样品,对照组注射相应组别的对照品;
部位C:试验样品以50:50(体积比)比例与弗氏完全佐剂和溶剂(50%)配制成稳定性乳化剂混合物,对照组注射对照品与弗氏完全佐剂制成的乳化剂。
皮内注射点部位图见图5所示。
其中1是头部,2是0.1ml皮内注射点,3是去毛的肩胛骨内侧部位,4是尾部。
3、局部诱导阶段
皮内诱导后7d(±1d),将浸提液及对照液,采用面积为8cm2的敷贴片在试验样品中浸透,局部贴敷于每只动物的肩胛骨内侧部位,覆盖诱导注射点;用封闭式包扎带固定贴敷片,并于48h后除去包扎带和敷贴片。
4、激发阶段
局部诱导阶段后14d(±1d),除去动物腹部毛发,按部位C中选定的浓度,将敷贴片浸提局部贴敷于动物去毛部位,用包扎带固定敷贴片,封闭式固定24h后除去包扎带和敷贴片。
5、动物观察
除去贴敷片后24h和48h观察试验组和对照组豚鼠激发部位皮肤反应情况,按Magnusson和Kligman分级表进行评价,具体见表5。
表5
四、实验结果
经临床观察,试验观察期间豚鼠无明显异常。
试验样品组和对照组动物激发部位皮肤在激发后24h和48h观察,均未见明显红斑和水肿反应,按Magnusson和Kligman分级标准均为0级,结果具体见表6所示。
表6
在本试验条件下,试验样品极性浸提液和非极性浸提液组动物激发部位皮肤均未见红斑和水肿,按Magnusson和Kligman分级标准均为0级,以上结果表明试验样品对豚鼠皮肤无致敏反应。
实施例9
本实施例对敷料的阴道刺激性进行了研究。
一、实验目的
对试验样品在试验条件下产生阴道组织刺激反应的潜在性做出评定。
二、实验方法
将实验兔置于固定器中,暴露给药部位,通过导管将试验样品浸提液及对照液按1ml/只阴道给药,每天给药1次,连续给药5天,第6天无痛处死实验兔,取试样接触部位的黏膜及周围组织,每块组织取其两端和中央三部分,进行常规制片及病理组织学观察,对其进行阴道组织反映组织学评分及刺激反应程度的评价。
三、实验过程
(一)供试品信息
1、采用上述敷料1进行试验;
药品名称:抗人乳头瘤病毒功能性敷料;
理化性质/生物特性:棕褐色凝胶;无臭或稍有特异气味;
规格:3g/支;
来源:海南众康悦医疗器械有限公司;
0.9%氯化钠注射液,来源:江西科伦药业有限公司,规格:540ml:4.5g;
试验样品制备:取敷料1,直接使用;
取0.9%氯化钠注射液,直接使用。
试验动物:等级、种系:普通级新西兰兔;
动物来源:长沙市天勤生物技术有限公司;
数量:6只;
性别:雌性:
体重:不低于2kg;
标记方法:苦味酸标记法;
检疫期:3天,检疫合格后使用;
饲养管理:饲养房间:普通级动物房;温、湿度:温度16~26℃,相对湿度40%~70%;光照:昼夜明暗交替时间:10h/14h;
饲料:兔生长繁殖饲料,北京科澳协力饲料有限公司;给料方法:自由摄食;
饮水:清洁生活用水,动物专用水瓶供给,自由饮水。
(二)实验步骤
1、各试液分别取3只实验兔,将一短软管(6cm)和注射器连接,注射器与导管注满后能使动物接受1ml的试验液;将实验兔置于固定器,提起尾巴,暴露出阴道口,将事先用对照液润滑的导管轻轻插入阴道,用注射液注入1ml的试验样品,抽出导管;对照组方法相同;连续给予5天,每次间隔24h。
2、动物观察
初次接触后24h和每次试验操作前观察阴道口和会阴溢液、红斑和水肿状况;
末次接触后24h,无痛处死实验兔,完整切下阴道后纵向切开,检查上皮组织层的刺激、损伤及坏死情况,然后将切下的阴道组织放入4%的甲醛溶液固定后进行组织学评价,每块组织取其两端和中央三部分,比较供试液组和对照液组间的区别;对于给药期间出现过度溢液、红斑和水肿或难以给药的动物,应无痛处死后做组织学检查。
评价方法如下。
按下表7对阴道组织进行组织学评分。
表7
评价和统计:
刺激指数=试验组平均记分-对照组平均记分。
之后按照表8标准判断样品的反应程度。
表8
四、实验结果
(一)肉眼观察
试验动物在试验观察期无明显异常,其中实验兔肉眼观察结果见表9。
表9
(二)组织学观察
0.9%氯化钠浸提液和对照液病理观察平均记分分别为5和4,刺激指数的平均记分为1,刺激指数平均记分小于4。实验兔阴道组织肉眼及组织学观察记录结果具体见表10。
表10
由以上结果可知,在本试验条件下,试验样品组阴道刺激指数为1,按标准判定,试验样品阴道刺激反应程度为极轻阴道刺激性。
虽然,上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验,对本发明作了详尽的描述,但在本发明基础上,可以对之作一些修改或改进,这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此,在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进,均属于本发明要求保护的范围。
Claims (10)
1.一种预防和治疗HPV病毒感染的修饰β-乳球蛋白,其特征在于,所述修饰β-乳球蛋白为活性酸酐修饰的β-乳球蛋白,修饰方法包括以下步骤:向β-乳球蛋白水溶液中分批次加入活性酸酐饱和溶液,每次加入活性酸酐饱和溶液后经反应、然后调节pH值至5~9;酸酐化的β-乳球蛋白液用磷酸盐缓冲液透析3~5次,得到修饰β-乳球蛋白。
2.根据权利要求1所述的预防和治疗HPV病毒感染的修饰β-乳球蛋白,其特征在于,所述活性酸酐为3-羟基-邻苯二甲酸酐,所述活性酸酐饱和溶液为3-羟基-邻苯二甲酸酐的二甲基亚砜饱和溶液。
3.根据权利要求2所述的预防和治疗HPV病毒感染的修饰β-乳球蛋白,其特征在于,向β-乳球蛋白水溶液中分3~8批次加入3-羟基-邻苯二甲酸酐的二甲基亚砜饱和溶液。
4.根据权利要求1-3任一所述的预防和治疗HPV病毒感染的修饰β-乳球蛋白,其特征在于,调节pH值所用碱任选自NaOH、Ca(OH)2、KOH、Na3PO4、氢氧化铵,三乙醇胺和乙二胺。
5.根据权利要求1所述的预防和治疗HPV病毒感染的修饰β-乳球蛋白,其特征在于,酸酐化的β-乳球蛋白液采用磷酸盐缓冲液为透析液,优选透析3次,第一次透析2小时,第二次透析3小时,第三次透析12小时。
6.根据权利要求3所述的预防和治疗HPV病毒感染的修饰β-乳球蛋白,其特征在于,所述β-乳球蛋白水溶液中蛋白终浓度为20mg/mL。
7.根据权利要求6所述的预防和治疗HPV病毒感染的修饰β-乳球蛋白,其特征在于,向β-乳球蛋白水溶液中每批次加入3-羟基-邻苯二甲酸酐的二甲基亚砜饱和溶液318μL。
8.一种包含权利要求1~7任一项所述的预防和治疗HPV病毒感染的修饰β-乳球蛋白的生物制剂。
9.根据权利要求8所述的生物制剂,其特征在于,修饰β-乳球蛋白的质量百分比浓度含量为0.01~0.05%。
10.根据权利要求9所述的生物制剂,其特征在于,包括以下质量浓度的组分:
修饰β-乳球蛋白 0.01~0.05%
甘油 3~10%
三氯生 0.1~0.3%
绿茶提取物 1~2%
无水乙醇 3~10%
卡波姆 0.1~1%。
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Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102631666A (zh) * | 2012-03-14 | 2012-08-15 | 杨霞 | 一种预防和控制人乳头瘤病毒感染的生物制剂的制备方法 |
CN102908611A (zh) * | 2012-10-26 | 2013-02-06 | 太原锦波生物医药科技有限公司 | 一种预防和控制人乳头瘤病毒感染的生物蛋白敷料及隐形膜 |
CN105031626A (zh) * | 2015-08-27 | 2015-11-11 | 南京拉克森生物医药科技有限公司 | 一种电荷修饰乳铁蛋白的制备方法 |
CN105031625A (zh) * | 2015-08-27 | 2015-11-11 | 南京拉克森生物医药科技有限公司 | 一种电荷修饰的乳铁蛋白与卡拉胶组合药物及其制备方法 |
CN108623668A (zh) * | 2017-11-29 | 2018-10-09 | 吉林大学 | 一种新型重组蜂毒多肽及其制备方法和应用 |
CN108785656A (zh) * | 2017-10-10 | 2018-11-13 | 迈迪速能医学技术(天津)有限公司 | 一种降低宫颈癌发病风险的药物制剂及其制备方法 |
CN110498852A (zh) * | 2018-05-16 | 2019-11-26 | 江苏正大天创生物工程有限公司 | 一种预防和治疗人乳头瘤病毒感染的生物活性蛋白的制备方法 |
CN111012896A (zh) * | 2019-12-23 | 2020-04-17 | 长春市罡恒电子有限责任公司 | 一种预防和控制人乳头瘤病毒感染的功能敷料及制备方法 |
CN112316152A (zh) * | 2020-11-04 | 2021-02-05 | 山西锦波生物医药股份有限公司 | 经酸酐修饰的蛋白质抑制冠状病毒的方法 |
-
2021
- 2021-04-30 CN CN202110480860.XA patent/CN113171445A/zh active Pending
Patent Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102631666A (zh) * | 2012-03-14 | 2012-08-15 | 杨霞 | 一种预防和控制人乳头瘤病毒感染的生物制剂的制备方法 |
CN102908611A (zh) * | 2012-10-26 | 2013-02-06 | 太原锦波生物医药科技有限公司 | 一种预防和控制人乳头瘤病毒感染的生物蛋白敷料及隐形膜 |
CN105031626A (zh) * | 2015-08-27 | 2015-11-11 | 南京拉克森生物医药科技有限公司 | 一种电荷修饰乳铁蛋白的制备方法 |
CN105031625A (zh) * | 2015-08-27 | 2015-11-11 | 南京拉克森生物医药科技有限公司 | 一种电荷修饰的乳铁蛋白与卡拉胶组合药物及其制备方法 |
CN108785656A (zh) * | 2017-10-10 | 2018-11-13 | 迈迪速能医学技术(天津)有限公司 | 一种降低宫颈癌发病风险的药物制剂及其制备方法 |
CN108623668A (zh) * | 2017-11-29 | 2018-10-09 | 吉林大学 | 一种新型重组蜂毒多肽及其制备方法和应用 |
CN110498852A (zh) * | 2018-05-16 | 2019-11-26 | 江苏正大天创生物工程有限公司 | 一种预防和治疗人乳头瘤病毒感染的生物活性蛋白的制备方法 |
CN111012896A (zh) * | 2019-12-23 | 2020-04-17 | 长春市罡恒电子有限责任公司 | 一种预防和控制人乳头瘤病毒感染的功能敷料及制备方法 |
CN112316152A (zh) * | 2020-11-04 | 2021-02-05 | 山西锦波生物医药股份有限公司 | 经酸酐修饰的蛋白质抑制冠状病毒的方法 |
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