CN113151366B - 一种稀碱协同乙醇预处理提高杨木发酵效率的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种稀碱协同乙醇预处理提高杨木发酵效率的方法。本发明首先将杨木粉碎,再与氢氧化钠‑乙醇水溶液混合,在190~220℃下反应10~35min后,向分离得到的滤渣中加入纤维素酶、酵母菌活化液、营养液,进行糖化发酵。本发明采用低浓度氢氧化钠水溶液协同乙醇对杨木进行预处理,有效去除了木质素,提高了纤维素酶的可及性,有效提高杨木发酵效率,乙醇得率高达72.83%。
Description
技术领域
本发明属于乙醇制备技术领域。更具体地,涉及一种稀碱协同乙醇预处理提高杨木发酵效率的方法。
背景技术
随着化石燃料资源日趋枯竭,环境污染日益严重,利用再生能源为石化产品的替代品变得愈加重要,而燃料乙醇是生物质液体能源物质的主要形式,也是化石燃料最可能的替代品。与传统能源相比,燃料乙醇由于是清洁能源和可再生能源,备受青睐。木质纤维素作为成本低廉、来源广泛的可生产乙醇的原料,已然成为当今生产乙醇的优选之一,其生产乙醇的过程主要包括预处理、糖化、发酵等,且预处理能通过去除与纤维素紧密相连的木质素来提高纤维素酶的可及性,提高纤维素生产乙醇的效率,因此高效、便捷的预处理技术是木质纤维素原料产乙醇的关键所在。
现有常用的预处理技术包括酸处理、碱处理、酸催化有机溶剂处理、氧化处理等,如Mohammad Saber Bay等公开了一种用碱对杨木进行预处理的方法,但该预处理方法使用的氢氧化钠浓度较高(质量浓度为8%),对设备腐蚀较严重,而最终乙醇得率仅在43%左右(Mohammad Saber Bay,Keikhosro Karimi,Mohsen Nasr Esfahany,RajeevKumar.Structural modification of pine and poplar wood by alkali pretreatmentto improve ethanol production[J].Industrial Crops&Products,2020,152.)。因此,亟需寻找一种在低浓度碱条件下,还能有效提高杨木发酵效率的预处理方法。
发明内容
本发明针对上述杨木预处理方法的不足,提供一种稀碱协同乙醇预处理提高杨木发酵效率的方法。
本发明上述目的通过以下技术方案实现:
一种稀碱协同乙醇预处理提高杨木发酵效率的方法,包括如下步骤:
S1.预处理:将杨木粉碎,再与氢氧化钠-乙醇水溶液混合,在190~220℃下反应10~35min后,分离得到滤渣;
S2.发酵:向步骤S1所述滤渣中加入纤维素酶、酵母菌活化液、营养液得到发酵液,进行糖化发酵。
本发明将杨木发酵的预处理温度特定设置为190~220℃,是因为在本发明的方法下,温度过低则不能有效破坏杨木的致密结构,而温度过高则对设备的要求更加严苛,不具有普适性。
此外,本发明将预处理时间特定设置为10~35min,是因为在本发明的方法下,时间过短会导致无法预处理完全,时间过长对预处理的剧烈程度没有显著影响,因此,设置10~35min的时长,可高效地完成预处理过程。
优选地,步骤S1所述氢氧化钠-乙醇水溶液中乙醇的浓度为30%~80%(v/v)。
进一步优选地,步骤S1所述氢氧化钠-乙醇水溶液中氢氧化钠的浓度为0.5%~1.0%(w/v)。
本发明采用的是低浓度的氢氧化钠,对设备腐蚀性较小,但仍能有效提高杨木发酵效率。
进一步优选地,步骤S1所述杨木的绝干质量与所述氢氧化钠-乙醇水溶液的体积之比为1g:8~15mL。
最优选地,步骤S1所述杨木的绝干质量和所述氢氧化钠-乙醇水溶液的体积之比为1g:10mL,见实施例1。
优选地,步骤S2所述纤维素酶的用量与步骤S1所述滤渣的绝干质量之比为10~30FPU:1g。
纤维素酶过低时不利于杨木的发酵过程,使得发酵不完全;而纤维素酶过高则会带来过高的成本,不适合工业化应用。
最优选地,步骤S2所述纤维素酶的用量与步骤S1所述滤渣的绝干质量之比为15FPU:1g,见实施例1。
优选地,步骤S2所述发酵液中酵母菌的浓度为1~5g/L。
进一步优选地,所述酵母菌包括酿酒酵母菌。
优选地,步骤S2所述糖化发酵的温度为30~38℃,时间为48~144h,转速为100~200rpm。
最优选地,步骤S2所述糖化发酵的温度为34℃,时间为72h,转速为130rpm,见实施例1。
优选地,步骤S1所述分离为真空抽滤分离或离心分离。
优选地,步骤S2所述营养液包括质量体积比为1~3g:0.5~1.5g:0.5~1.5g:0.1~0.5g:1L的酵母提取物、NH4Cl、KH2PO4、MgSO4和水。
最优选地,步骤S2所述营养液包括质量体积比为2g:1g:1g:0.3g:1L的酵母提取物、NH4Cl、KH2PO4、MgSO4和水。
优选地,步骤S2所述营养液的体积与步骤S1所述滤渣的绝干质量之比为9~10mL:1g。
优选地,步骤S1所述粉碎是将杨木粉碎至20~60目。
本发明采用低浓度氢氧化钠水溶液协同乙醇对杨木进行预处理,有效去除了木质素,提高了纤维素酶的可及性,有效提高杨木发酵效率,提高乙醇产量,因此,上述方法在提高杨木发酵效率方面的应用也在本发明请求保护的范围内。
本发明具有以下有益效果:
本发明采用低浓度氢氧化钠水溶液协同乙醇对杨木进行预处理,有效去除了木质素,提高了纤维素酶的可及性,有效提高杨木发酵效率,乙醇得率高达72.83%。
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步说明本发明,但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明,本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
除非特别说明,以下实施例所用试剂和材料均为市购。
本发明采用的杨木来自工厂废料,再经风干处理得到,测得其组分含量:纤维素45.56%,半纤维素14.98%,木素22.86%;本发明的纤维素酶购自诺维信公司;酿酒酵母菌购自安琪酵母股份有限公司。
酿酒酵母菌活化液:称取2g葡萄糖、2g蛋白胨和1g酵母膏溶于100mL去离子水中,接入6.6g酿酒酵母粉,在摇床上分两步进行活化:①在36℃下以150rpm的转速震荡10min;②在34℃下以150rpm的转速震荡1h。
营养液:包括质量体积比为2g:1g:1g:0.3g:1L的酵母提取物、NH4Cl、KH2PO4、MgSO4和水。
本发明利用高效液相色谱法分析得到发酵液中的乙醇浓度,再根据以下公式计算乙醇得率:式中Y表示乙醇得率(%);C表示发酵液中乙醇浓度(g/L);V表示发酵液体积(L);M表示粉碎后杨木中纤维素的质量(g)。
实施例1一种稀碱协同乙醇预处理提高杨木发酵效率的方法
一、实验方法
S1.预处理:将风干处理后的杨木粉碎至20~60目,再取其中15g置于装有热电偶的密闭反应器中,与150mL氢氧化钠-乙醇水溶液混合,在195℃下密闭反应30min后立即用冷凝水使反应降至室温,进行真空抽滤得到滤液和滤渣,将滤渣烘干、备用;
S2.产乙醇:取绝干质量为10g的步骤S1所述滤渣和95mL营养液,置于250mL锥形瓶中,用H2SO4调pH至4.8,放入高压灭菌锅中121℃灭菌20min,再在超净工作台上加入150FPU纤维素酶和5mL酿酒酵母菌活化液,在摇床上以34℃、130rpm摇晃、糖化发酵72h;
其中,步骤S1所述氢氧化钠-乙醇水溶液中氢氧化钠的浓度为1.0%(w/v),乙醇的浓度为70%(v/v)。
二、实验结果
计算得到乙醇得率为72.83%。
实施例2一种稀碱协同乙醇预处理提高杨木发酵效率的方法
一、实验方法
S1.预处理:将风干处理后的杨木粉碎至20~60目,再取其中15g置于装有热电偶的密闭反应器中,与120mL氢氧化钠-乙醇水溶液混合,在190℃下密闭反应35min后立即用冷凝水使反应降至室温,进行真空抽滤得到滤液和滤渣,将滤渣烘干、备用;
S2.产乙醇:取绝干质量为10g的步骤S1所述滤渣和90mL营养液,置于250mL锥形瓶中,用H2SO4调pH至4.8,放入高压灭菌锅中121℃灭菌20min,再在超净工作台上加入300FPU纤维素酶和5mL酿酒酵母菌活化液,在摇床上以38℃、200rpm摇晃、糖化发酵48h;
其中,步骤S1所述氢氧化钠-乙醇水溶液中氢氧化钠的浓度为0.8%(w/v),乙醇的浓度为50%(v/v)。
二、实验结果
计算得到乙醇得率为63.22%。
实施例3一种稀碱协同乙醇预处理提高杨木发酵效率的方法
一、实验方法
S1.预处理:将风干处理后的杨木粉碎至20~60目,再取其中15g置于装有热电偶的密闭反应器中,与225mL氢氧化钠-乙醇水溶液混合,在200℃下密闭反应25min后立即用冷凝水使反应降至室温,进行真空抽滤得到滤液和滤渣,将滤渣烘干、备用;
S2.产乙醇:取绝干质量为10g的步骤S1所述滤渣和100mL营养液,置于250mL锥形瓶中,用H2SO4调pH至4.8,放入高压灭菌锅中121℃灭菌20min,再在超净工作台上加入100FPU纤维素酶和5mL酿酒酵母菌活化液,在摇床上以30℃、100rpm摇晃、糖化发酵144h;
其中,步骤S1所述氢氧化钠-乙醇水溶液中氢氧化钠的浓度为0.5%(w/v),乙醇的浓度为70%(v/v)。
二、实验结果
计算得到乙醇得率为46.24%。
实施例4
一、实验方法
同实施例1的实验方法,区别在于,步骤S1所述预处理的温度为220℃。
二、实验结果
计算得到乙醇得率为55.19%。
实施例5
一、实验方法
同实施例1的实验方法,区别在于,步骤S1所述氢氧化钠-乙醇水溶液中乙醇的浓度为30%(v/v)。
二、实验结果
计算得到乙醇得率为62.15%。
实施例6
一、实验方法
同实施例1的实验方法,区别在于,步骤S1所述氢氧化钠-乙醇水溶液中乙醇的浓度为80%(v/v)。
二、实验结果
计算得到乙醇得率为57.01%。
实施例7
一、实验方法
同实施例1的实验方法,区别在于,步骤S1所述反应的时间为10min。
二、实验结果
计算得到乙醇得率为63.18%。
对比例1
一、实验方法
同实施例1的实验方法,区别在于,用150mL氢氧化钠水溶液替代150mL氢氧化钠-乙醇水溶液。
二、实验结果
计算得到乙醇得率为61.05%。
对比例2
一、实验方法
同实施例1的实验方法,区别在于,用150mL乙醇水溶液替代150mL氢氧化钠-乙醇水溶液。
二、实验结果
计算得到乙醇得率为22.67%。
对比例3
一、实验方法
同实施例1的实验方法,区别在于,步骤S1所述氢氧化钠-乙醇水溶液中氢氧化钠的浓度为0.1%(w/v)。
二、实验结果
计算得到乙醇得率为27.48%。
对比例4
一、实验方法
同实施例1的实验方法,区别在于,步骤S1所述氢氧化钠-乙醇水溶液中氢氧化钠的浓度为0.3%(w/v)。
二、实验结果
计算得到乙醇得率为34.83%。
对比例5
一、实验方法
同实施例1的实验方法,区别在于,步骤S1所述预处理的温度为180℃。
二、实验结果
计算得到乙醇得率为41.04%。
从实施例1~3可以看出,采用本发明的预处理方法,可以有效去除木质素,从而提高杨木发酵的效率;而与现有技术(Mohammad Saber Bay,Keikhosro Karimi,Mohsen NasrEsfahany,Rajeev Kumar.Structural modification of pine and poplar wood byalkali pretreatment to improve ethanol production[J].Industrial Crops&Products,2020,152.)(乙醇得率43%左右)相比可知,本发明在低浓度碱的条件下,乙醇得率仍能与现有技术的水平相当(实施例3),甚至超过了现有技术的水平(如实施例1~2和实施例4~7),证明本发明采用低浓度氢氧化钠水溶液协同乙醇对杨木进行预处理的方法可有效去除木质素,提高纤维素酶的可及性,进一步有效提高杨木发酵效率,提高乙醇产量。
对比实施例1和对比例1~2发现,实施例1的乙醇得率显著高于对比例1~2的乙醇得率,可见,本发明采用氢氧化钠-乙醇水溶液对杨木进行预处理,其对杨木发酵效率的提升作用显著优于同样体积的纯氢氧化钠水溶液和同样体积的纯乙醇水溶液,表明本发明在减少碱用量的条件下,仍能有效提高杨木发酵的效率。
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (4)
1.一种稀碱协同乙醇预处理提高杨木发酵效率的方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1. 预处理:将杨木粉碎,再与氢氧化钠-乙醇水溶液混合,在190~220℃下反应10~35min后,分离得到滤渣;
S2. 发酵:向步骤S1所述滤渣中加入纤维素酶、酵母菌活化液、营养液得到发酵液,进行糖化发酵;
其中,步骤S1所述氢氧化钠-乙醇水溶液中氢氧化钠的浓度为0.8%~1.0%(w/v);步骤S1所述杨木的绝干质量和所述氢氧化钠-乙醇水溶液的体积之比为1g:8~15mL;步骤S1所述氢氧化钠-乙醇水溶液中乙醇的浓度为30%~80%(v/v);步骤S2所述糖化发酵的温度为30~38℃,时间为48~72h,转速为100~200rpm;步骤S2所述纤维素酶的用量与步骤S1所述滤渣的绝干质量之比为15~30 FPU:1g;步骤S2所述发酵液中酵母菌的浓度为1~5 g/L。
2.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述酵母菌包括酿酒酵母菌。
3.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤S1所述分离为真空抽滤分离或离心分离。
4.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤S2所述营养液包括质量体积比为1~3g:0.5~1.5g:0.5~1.5g:0.1~0.5g:1L的酵母提取物、NH4Cl、KH2PO4、MgSO4和水。
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PB01 | Publication | ||
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GR01 | Patent grant | ||
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