CN113143941A

CN113143941A - 西红花苷ⅰ在制备治疗轻症免疫性心肌炎药物中的应用

Info

Publication number: CN113143941A
Application number: CN202110451562.8A
Authority: CN
Inventors: 葛均波; 程蕾蕾; 陈佳慧; 张卉; 王妍; 林瑾仪; 吴薇; 李静; 王春晖; 沈毅辉
Original assignee: Zhongshan Hospital Fudan University
Current assignee: Reyoung Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2021-04-26
Filing date: 2021-04-26
Publication date: 2021-07-23
Anticipated expiration: 2041-04-26
Also published as: CN113143941B

Abstract

本发明公开了西红花苷Ⅰ在制备治疗轻症免疫性心肌炎药物中的应用，属于生物医药技术领域。该治疗轻症免疫性心肌炎药物以西红花苷Ⅰ为活性成分，其有效剂量为0.1–50mg/kg/天，剂型可以为片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、针剂或缓释剂。本发明首次提出并验证中药成分西红花苷Ⅰ在改善PD‑1抑制剂诱导的轻症免疫性心肌炎的可行性，西红花苷Ⅰ是一种中成药，易溶于水，具有耐光、耐热、耐金属离子和耐化学品等特点稳定且安全性高，其用于制备治疗轻症免疫性心肌炎药物毒副作用少，具有抗炎和抗肿瘤药理活性，用于临床治疗由ICIs引起的轻症免疫性心肌炎，可以有效改善心肌炎性表现及心肌损伤。

Description

西红花苷Ⅰ在制备治疗轻症免疫性心肌炎药物中的应用

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及西红花苷Ⅰ在制备治疗轻症免疫性心肌炎药物中的应用。

背景技术

免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICIs)是近年来肿瘤免疫疗法的一种新的治疗选择，其通过激活免疫系统将表达肿瘤抗原的肿瘤细胞杀死，达到抗肿瘤的目的。然而，由于免疫检查点在自身免疫耐受中也发挥着重要的作用，因此ICIs激活免疫系统会引起广泛的自身免疫反应，称为免疫相关不良反应(immune-related adverseeffects，irAEs)，其中ICIs引起的心脏毒性虽然十分罕见，但却是最致命的irAEs之一。现有的临床研究数据提示，由ICIs引起的免疫性心肌炎发病率从0.09％到1.14％不等，这可能归于现阶段对肿瘤患者心脏不良事件的管理报告制度尚不成熟。鉴于当前针对免疫性心肌炎发生率的统计大多并未考虑到同时合并放疗、靶向治疗以及放疗等情况，因此，该比例或许远低于真实数据。

在现阶段，免疫性心肌炎的诊断依然是世界范围内的难点。ICIs引起的免疫性心肌炎临床表现往往为非特异性的，其严重程度也从无症状的心肌损伤标志物升高、疲劳、全身不适的亚临床症状到胸痛、呼吸困难、多器官衰竭、心源性休克和心脏骤停不等。因而，针对早期ICIs心脏不良反应的甄别与及时治疗至关重要，否则将会导致病情进展、迁延、乃至恶化。

当前，我们观察到由ICIs引起的亚临床急性心肌炎的发病率逐渐升高。根据免疫检查点抑制剂相关心肌炎监测与管理中国专家共识(2020版)中ICIs相关心肌炎的分级标准，将G1日常活动无症状(或其他原因可以解释的症状)，仅有心脏损伤标志物异常或心电图异常定义为轻症免疫性心肌炎，这部分患者很容易被临床忽视。总体而言，对于ICIs引起的免疫性心肌炎治疗方案因人而异，主要的一线治疗药物为高剂量类固醇，根据2020年免疫检查点抑制剂相关心肌炎监测与管理中国专家共识，糖皮质激素应作为ICIs相关心肌炎治疗的首选及核心方案，早期、足量的糖皮质激素有助于改善心肌炎预后。然而，对于仅表现为无症状的心肌损伤标志物的升高等轻症免疫性心肌炎患者，除一般心脏营养支持治疗外，推荐激素治疗，但糖皮质激素治疗的获益与风险尚不明确，尚没有特异性改善免疫性心肌炎的药物，这些患者大多不愿意接受小剂量激素治疗从而丧失最佳控制时机。

西红花苷(crocin)，又称为西红花素、藏红花素，是西红花的主要活性成分之一，具有中枢降压、防治动脉粥样硬化、抗血栓、抗血小板聚集、抗心肌缺血以及抗炎和治疗软组织损伤、利胆保肝、抗肿瘤等药理作用，其主要由西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ、西红花苷Ⅲ、西红花苷Ⅳ和西红花苷Ⅴ等组成，目前已用于心血管系统疾病治疗的西红花总苷片主要成分为西红花苷Ⅰ，适用于冠心病心绞痛患者。然而，其在免疫性心肌炎中的作用尚未有报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种西红花苷Ⅰ在制备治疗轻症免疫性心肌炎药物中的应用，其中西红花苷Ⅰ的分子式为C₄₄H₆₄O₂₄，分子量为976.9646，结构式如下所示：

本发明的一些实施例，所述治疗轻症免疫性心肌炎药物以西红花苷Ⅰ为活性成分，其有效剂量为0.1–50mg/kg/天。

本发明的一些实施例，所述治疗轻症免疫性心肌炎药物中西红花苷Ⅰ的有效剂量为20–50mg/kg/天。

本发明的一些实施例，所述治疗轻症免疫性心肌炎药物的剂型选自片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、针剂或缓释剂。

与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

1、本发明首次提出并验证中药成分西红花苷Ⅰ在改善PD-1抑制剂诱导的轻症免疫性心肌炎的可行性，其应用于临床治疗由ICIs引起的轻症免疫性心肌炎，可以有效改善临床症状，减轻心肌炎性表现及心肌损伤，为该类患者提供新的治疗选择。

2、西红花苷Ⅰ是一种中成药，易溶于水，比较稳定，具有耐光、耐热、耐金属离子和耐化学品等特点，安全性高，药物毒副作用少，对BALB/c小鼠按西红花苷Ⅰ的剂量为0.1–50mg/kg连续灌胃14天未出现死亡及药物毒性反应；同时其还具有抗炎和抗肿瘤药理活性，50mg/kg剂量的西红花苷Ⅰ就能明显降低轻症免疫性心肌炎心脏损伤，容易被肿瘤患者接受。

参考以下详细说明更易于理解本申请的上述以及其他特征、方面和优点。

附图说明

通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述，本发明的其它特征、目的和优点将会变得更显著：

图1是实施例1中各组小鼠的心重/体重比，其中，对照组(control)、模型组(PD-1inhibitor)、小剂量西红花苷Ⅰ(20mg/kg)治疗组(PD-1inhibitor+20crocin)和大剂量西红花苷Ⅰ(50mg/kg)治疗组(PD-1inhibitor+50crocin)。

图2是实施例1中各组小鼠的左室射血分数(LVEF)水平。

图3是实施例1中各组小鼠的左室短轴缩短率(LVFS)水平。

图4是实施例1中各组小鼠的心功能水平变化。

图5是实施例1中各组小鼠的收缩期左室前壁厚度(LVAW；s)水平。

图6是实施例1中各组小鼠的舒张期左室后壁厚度(LVAW；d)水平。

图7是实施例1中各组小鼠的肌酸激酶(CK)水平。

图8是实施例1中各组小鼠的肌酸激酶MB亚型(CK-MB)水平。

图9是实施例1中各组小鼠的乳酸脱氢酶-1(LDH-1)水平。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例的附图，对本发明实施例的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于所描述的本发明的实施例，本领域普通技术人员在无需创造性劳动的前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

除非另作定义，此处使用的技术术语或者科学术语应当为本发明所属领域内具有一般技能的人士所理解的通常意义。本发明专利申请说明书以及权利要求书中使用的“第一”、“第二”以及类似的词语并不表示任何顺序、数量或者重要性，而只是用来区分不同的组成部分。同样，“一个”或者“一”等类似词语也不表示数量限制，而是表示存在至少一个。

以下实施例中使用的西红花苷Ⅰ分子式为C₄₄H₆₄O₂₄，分子量为976.9646，结构式如下所示：

由瑞阳制药股份有限公司提供，其他原料或产品如未经说明均市售可得。

实施例1动物实验

实验方法：32只雄性6周龄BALB/c小鼠共分为4组，每组8只：对照组(control)、模型组(PD-1inhibitor)、小剂量西红花苷Ⅰ(20mg/kg)治疗组(PD-1inhibitor+20crocin)和大剂量西红花苷Ⅰ(50mg/kg)治疗组(PD-1inhibitor+50crocin)。除对照组外，其余各组分别利用(TnI+PD-1inhibitor)诱导ICI相关心肌炎模型，并在实验第8天起，每天予以西红花苷Ⅰ治疗，持续14天。所有小鼠均于实验第21天，测量心脏超声后处死，留取血清和组织以备后用。

测试表征：采用Vevo2100超高分辨率小动物彩色多普勒超声实时影像系统检测小鼠左心室收缩功能(主要指标：收缩期左室前壁厚度(left ventricular anterior wall,LVAW；s)、舒张期左室后壁厚度(LVAW；d)、收缩期左室后壁厚度(left ventricularposterior wall,LVPW；s)、舒张期左室后壁厚度(LVPW；d)、左室射血分数(leftventricular ejection fraction,LVEF)、左室短轴缩短率(left ventricularfractional shortening,LVFS)。采用ELISA法检测外周血血浆中心肌酶谱水平：肌酸激酶(CK)、肌酸激酶MB亚型(CK-MB)、乳酸脱氢酶–1(LDH-1)。

统计分析：所有数据均表示为平均值±平均值的标准误(SEM)。多组间分析采用单因素方差分析(ANOVA)，使用Graphpad Prism 8.0软件进行Turkey法检验统计分析，*p＜0.05被设定为具有统计学差异。

实验结果：采用PD-1抑制剂成功诱导轻症免疫性心肌炎小鼠，表现为小鼠左室前壁增厚，心肌损伤标志物(CK、CK-MB、LDH-1)增高，小鼠EF值水平下降，但与对照组相比无显著性差异，具体如下：

(1)各组小鼠的心重/体重比如图1所示，组间无统计学差异，西红花苷Ⅰ治疗组小鼠未出现药物不良反应，提示西红花苷Ⅰ作为制备治疗轻症免疫性心肌炎药物的安全性良好。

(2)各组小鼠的心功能水平变化如图2–4所示，PD-1抑制剂诱导后引起轻症免疫性心肌炎，小鼠EF、FS水平下降，但无显著性差异，西红花苷Ⅰ(50mg/kg)预防性治疗后，略有上升，提示西红花苷Ⅰ可能可以改善PD-1抑制剂诱导的轻症免疫性心肌炎心功能改变。

(3)各组小鼠的心脏左室前壁厚度变化如图4–6所示，PD-1抑制剂诱导后引起小鼠收缩末期和舒张末期左室前壁增厚，差异具有统计学意义。西红花苷Ⅰ(50mg/kg)预防性治疗后，可显著改善小鼠收缩末期和舒张末期左室前壁厚度，提示西红花苷Ⅰ可有效改善PD-1抑制剂诱导的免疫性心肌炎心肌结构改变。

(4)各组小鼠的心肌酶谱水平变化如图7–9所示，PD-1抑制剂诱导后引起小鼠血浆CK、CK-MB、LDH-1水平显著性升高，西红花苷Ⅰ(50mg/kg)预防性治疗后可显著降低小鼠心肌酶谱水平，提示西红花苷Ⅰ可有效改善PD-1抑制剂诱导的免疫性心肌炎心肌损伤。

实施例2临床试验

临床中，已在伴有心肌肌钙蛋白T(cTnT)升高的轻症免疫性心肌炎患者中积累单药使用西红花苷治疗的经验，患者从确诊轻症免疫性心肌炎开始，服用剂量为西红花总苷48mg/次，每日3次，至心肌标志物恢复正常。试验发现单药治疗患者组的肌钙蛋白恢复至正常所需时间，较未服用激素及西红花总苷组患者明显缩短，证明西红花苷Ⅰ可以明显降低患者轻症免疫性心肌炎心脏损伤，具有抗炎和抗肿瘤药理活性。此外，西红花苷Ⅰ是一种中成药，易溶于水，比较稳定，具有耐光、耐热、耐金属离子和耐化学品等特点，安全性高，药物毒副作用少，容易被肿瘤患者接受。

以上所述为本发明的较佳实施例而已，但本发明不应该局限于该实施例所公开的内容。所以凡是不脱离本发明所公开的精神下完成的等效或修改，都落入本发明保护的范围。

Claims

1.西红花苷Ⅰ在制备治疗轻症免疫性心肌炎药物中的应用，西红花苷Ⅰ的分子式为C₄₄H₆₄O₂₄，分子量为976.9646，结构式如下所示：

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述治疗轻症免疫性心肌炎药物以西红花苷Ⅰ为活性成分，其有效剂量为0.1–50mg/kg/天。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述治疗轻症免疫性心肌炎药物中西红花苷Ⅰ的有效剂量为20–50mg/kg/天。

4.根据权利要求1至3任一项所述的应用，其特征在于，所述治疗轻症免疫性心肌炎药物的剂型选自片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、针剂或缓释剂。