CN113138278A

CN113138278A - S100a7蛋白作为标志物在食管鳞癌辅助诊断和预后判断中的应用

Info

Publication number: CN113138278A
Application number: CN202010062050.8A
Authority: CN
Inventors: 赫捷; 孙楠; 卢志亮; 郑苏菲
Original assignee: Cancer Hospital and Institute of CAMS and PUMC
Current assignee: Cancer Hospital and Institute of CAMS and PUMC
Priority date: 2020-01-19
Filing date: 2020-01-19
Publication date: 2021-07-20

Abstract

本发明公开了S100A7蛋白作为标志物在食管鳞癌辅助诊断和预后判断中的应用。实验证明，血清中S100A7蛋白的浓度与食管鳞癌与否密切相关，即血清中S100A7蛋白的浓度可以辅助诊断食管鳞癌；食管鳞癌组织中S100A7表达量与预后密切相关，S100A7的表达量越低，预后越好。本发明具有重要的应用价值。

Description

S100A7蛋白作为标志物在食管鳞癌辅助诊断和预后判断中的应用

技术领域

本发明属于生物医学领域，具体涉及S100A7蛋白作为标志物在食管鳞癌辅助诊断和预后判断中的应用。

背景技术

食管癌(Esophageal Carcinoma，EC)是威胁人类生命和健康的重大疾病，主要有两种病理类型：食管鳞癌(Esophageal Squamous Cell Carcinoma，ESCC)和食管腺癌(Esophageal Adenocarcinoma，EAC)。根据2015年的统计数据显示，我国90％的食管癌为食管鳞状细胞癌。尽管目前对食管癌的诊断和治疗技术都在不断进步，但食管癌发病隐匿，加上缺乏有效的早期诊断标志物及对食管鳞癌分子机制不清楚，大部分患者首诊时就已经发展为中晚期，失去了根治的机会，这也是食管癌疗效差、死亡率高的主要原因之一。因此，早期筛查诊治是食管癌防治的重中之重。目前，食管癌诊断筛查方法主要是食管拉网细胞学检查和纤维内镜检查，但由于这些检查方法有创、费用相对较高、操作过程比较痛苦以及患者配合率低等原因难以进行全面普及。

目前，应用于临床辅助诊断食管鳞癌的标志物有CEA、CYFRA21-1、SCC等。CEA是Gold和Freeman在1965年首先在大肠癌中发现的，它是一种糖蛋白，分子量180KDa，半衰期为3-4天，是胚胎发展过程产生的抗原，出生后显著下降；其特异性不强，可用于肿瘤发展的检测、疗效的判断和预后估计，对于早期诊断并不敏感；食管癌患者虽有升高，但存在较高的假阴性和假阳性，并不适用于诊断中单独使用。CYFRA21-1(或名CYFRA211)是细胞角蛋白的水溶性片段，半衰期约为4天。鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)最早用于诊断鳞癌、宫颈癌、肺癌、头颈部癌，患者血清中鳞状上皮细胞癌抗原增高，其浓度随病情加重而增高；测定鳞状上皮细胞癌抗原可监测这些肿瘤的疗效、复发、转移及评价预后。然而，上述辅助诊断食管鳞癌的标志物诊断效率低下，远远达不到临床诊疗需求。开发新的辅助诊断食管鳞癌的标志物已迫不及待。

S100家族属于钙离子结合蛋白超家族，因能够在100％饱和硫酸铵中溶解而得名。S100家族蛋白具有两个EF-hand结构(EF-hand是一个碱性螺旋-环-螺旋拓扑结构，是Ca²⁺离子与其配体结合位点)，分别位于羧基端和氨基末端，其结构和功能受Ca²⁺结合调节，这使得它们可以作为Ca²⁺传感器，将细胞内Ca²⁺水平的波动转化为细胞应答。S100家族成员根据其发挥功能的部位不同可分为三类：一是胞内型，即只在细胞内发挥作用；细胞内S100家族可通过与多种靶蛋白(包括酶、细胞骨架亚基、受体、转录因子等)的相互作用参与调节细胞生物学过程；二是分泌型-分泌到胞外发挥作用；胞外S100蛋白不仅可通过激活表面受体、G蛋白偶联受体及清道夫受体并以自分泌和旁分泌方式调节细胞功能，还能够进入体循环协调长距离的生物事件；三是既可以在胞内发挥生物学功能又可通过外分泌发挥功能，这种类型可以兼备以上两种的功能。

发明内容

本发明的目的有两个，一是诊断或辅助诊断食管鳞癌，二是预测食管鳞癌患者的预后。

本发明首先保护用于检测S100A7蛋白的物质在制备诊断或辅助诊断食管鳞癌的产品中的应用。

本发明还保护用于检测S100A7蛋白的物质、用于检测SCC的物质和用于检测Crfra211的物质在制备诊断或辅助诊断食管鳞癌的产品中的应用。

上述应用中，所述产品的检测样本可为血清。

上述应用中，所述产品的检测对象可为血清中的S100A7蛋白。

本发明还保护用于检测S100A7蛋白的物质在诊断或辅助诊断食管鳞癌中的应用。

本发明还保护用于检测S100A7蛋白的物质、用于检测SCC的物质和用于检测Crfra211的物质在诊断或辅助诊断食管鳞癌中的应用。

本发明还保护检测S100A7表达量的系统的应用，可为a3)或a4)：

a3)预测食管鳞癌患者预后；

a4)制备用于预测食管鳞癌患者预后的产品。

本发明还保护上述任一所述检测S100A7表达量的系统、食管鳞癌组织分化程度、淋巴结是否转移、食管鳞癌组织TNM分期和年龄的应用，可为a3)或a4)：

a3)预测食管鳞癌患者预后；

a4)制备用于预测食管鳞癌患者预后的产品。

所述检测S100A7表达量的系统可包括检测S100A7表达量的试剂和/或试剂盒。所述检测S100A7表达量的试剂和/或试剂盒可包括能与S100A7蛋白特异结合的物质和/或能与S100A7蛋白的编码基因特异结合的物质。

所述检测S100A7表达量的系统具体可由检测S100A7表达量的试剂和/或试剂盒组成。

所述检测S100A7表达量的试剂和/或试剂盒具体可由能与S100A7蛋白特异结合的物质和/或能与S100A7蛋白的编码基因特异结合的物质组成。

上述任一所述检测S100A7表达量的系统可包括通过免疫组织化学染色方法检测S100A7蛋白的表达量所需的试剂和/或仪器。

上述任一所述检测S100A7表达量的系统具体可由通过免疫组织化学染色方法检测S100A7蛋白的表达量所需的试剂和/或仪器组成。

上述任一所述S100A7表达量可为食管鳞癌组织中S100A7的表达量。

上述任一所述检测S100A7表达量的系统还包括蛋白质表达量数据处理系统。所述蛋白质表达量数据处理系统用于计算待预测食管鳞癌患者的食管鳞癌组织中S100A7的表达量，根据S100A7的表达量预测食管鳞癌患者的预后。S100A7的表达量越低，预后越好。

上述任一所述制备用于预测食管鳞癌患者预后的产品的检测样本可为食管鳞癌组织。

上述任一所述制备用于预测食管鳞癌患者预后的产品的检测对象可为食管鳞癌组织中的S100A7。

本发明还保护S100A7蛋白作为标志物的应用，可为a1)、a2)、a3)或a4)：

a1)诊断或辅助诊断食管鳞癌

a2)制备用于诊断或辅助诊断食管鳞癌的产品；

a3)预测食管鳞癌患者预后；

a4)制备用于预测食管鳞癌患者预后的产品。

本发明还保护产品甲或产品乙。

所述产品甲可包括用于检测S100A7蛋白的物质；产品甲的检测样本可为血清；产品甲的功能可为诊断或辅助诊断食管鳞癌。

所述产品甲具体可由用于检测S100A7蛋白的物质组成。

上述任一所述用于检测S100A7蛋白的物质可为用于检测S100A7蛋白浓度的物质。

上述任一所述用于检测S100A7蛋白的物质包括检测S100A7蛋白的浓度的试剂和/或试剂盒和/或仪器。在本发明的一个实施例中，检测S100A7蛋白的浓度的试剂盒具体可为CircuLex S100A7/Psoriasin ELISA Kit(MBL公司的产品，Cat#CY-8073)。

所述产品甲还可包括记载有判断标准甲的载体；所述判断标准甲为：如果待测者血清中S100A7蛋白的浓度高于对照血清中S100A7蛋白的浓度，则待测者为或疑似为食管鳞癌患者；如果待测者血清中S100A7蛋白的浓度低于对照血清中S100A7蛋白的浓度，则待测者不为或疑似不为食管鳞癌患者；对照血清为非食管鳞癌患者的血清。所述非食管鳞癌患者可为健康人。

所述待测者可为进行食管癌筛查的人群、具有食管癌高危因素的人群、进行食管癌分型的人群、有食管癌影像学证据的人群或具有疑似食管癌临床表现的人群。

所述产品甲具体可由用于检测S100A7蛋白的物质和记载有判断标准甲的载体组成。

所述产品乙可包括上述任一所述检测S100A7表达量的系统；产品乙的检测样本可为食管鳞癌组织和/或食管组织；产品乙的功能可为预测食管鳞癌患者预后。

所述产品乙具体可由上述任一所述检测S100A7表达量的系统组成。

所述产品乙还可包括上述任一所述蛋白质表达量数据处理系统。

所述产品乙具体可由上述任一所述检测S100A7表达量的系统和上述任一所述蛋白质表达量数据处理系统组成。

所述产品乙还可包括记载有判断标准乙和/或判断标准丙的载体；

所述判断标准乙可为：如果食管鳞癌患者的食管鳞癌组织中S100A7蛋白的表达量高于正常食管组织中S100A7蛋白的表达量，则食管鳞癌患者预后不良；如果食管鳞癌患者的食管鳞癌组织中S100A7蛋白的表达量低于正常食管组织中S100A7蛋白的表达量，则食管鳞癌患者预后良好；

所述判断标准丙可为：如果食管鳞癌患者的食管鳞癌组织中S100A7基因的表达量高于正常食管组织中S100A7基因的表达量，则食管鳞癌患者预后不良；如果食管鳞癌患者的食管鳞癌组织中S100A7基因的表达量低于正常食管组织中S100A7基因的表达量，则食管鳞癌患者预后良好。

所述正常食管组织可为食管鳞癌癌旁组织或健康人的食管组织。

所述产品乙具体可由上述任一所述检测S100A7表达量的系统和记载有判断标准乙和/或判断标准丙的载体组成。

所述产品乙具体可由上述任一所述检测S100A7表达量的系统、记载有判断标准乙和/或判断标准丙的载体和上述任一所述蛋白质表达量数据处理系统组成。

上述任一所述食管鳞癌患者的食管鳞癌组织可为食管鳞癌患者手术切除的食管鳞癌组织、其石蜡切片或其冰冻切片。

所述预后良好是指从手术切除食管鳞癌组织时开始，患者生存时间超过3年。

所述预后不良是指从手术切除食管鳞癌组织时开始，患者在3年内死亡。

上文中，食管鳞癌患者均内镜活检或术后病理证实为食管鳞癌。

结合年龄、分化程度、淋巴结转移、TNM分期和S100A7表达量进行预后评分，采用预后评分对食管鳞癌根治术后患者预后进行分析。结果表明，结合S100A7后的预后评分对食管鳞癌术后患者的预后判断更为准确，AUC曲线下面积为0.725。采用血清中S100A7蛋白的浓度可以诊断或辅助诊断食管鳞癌，结果表明，ROC曲线下面积可达到0.771(0.723-0.818，p<0.001)；当阈值设定为0.94ng/mL时，敏感度为59.1％，特异度为89.3％。S100A7、SCC和Crfra211结合可以显著提高对食管鳞癌的诊断效率，ROC曲线下面积为0.872(0.805-0.938，p<0.001)，特异度为89.3％时，敏感度可达70.5％。由此可见，血清中S100A7蛋白的浓度与食管鳞癌与否密切相关，即血清中S100A7蛋白的浓度可以辅助诊断食管鳞癌；食管鳞癌组织中S100A7表达量与预后密切相关，S100A7的表达量越低，预后越好。本发明具有重要的应用价值。

附图说明

图1为S100A7在食管鳞癌组织中的表达量显著增加。

图2为S100A7蛋白为食管鳞癌预后标志物。

图3为病例组和对照组的血清中S100A7蛋白的浓度统计结果。

图4为采用血清中S100A7蛋白的浓度诊断食管鳞癌的ROC曲线。

具体实施方式

以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。

下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。

以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。

下述实施例中的统计学分析均使用Graphad Prism 8.0或SPSS Ver 23.0软件进行分析。计量资料采用student t-test(两组比较)，计数资料资料采用秩和检验，均为双侧检验。如无特殊说明，以p＜0.05认为有显著的统计学意义。

实施例1、S100A7在食管鳞癌组织中的表达量检测及预后分析

一、数据分析

本发明的发明人通过分析TCGA数据库(网址为：https://portal.gdc.cancer.gov/)中食管鳞癌组织和正常食管组织的表达谱数据，发现多个S100家族成员在食管鳞癌组织中高表达(见图1中A)；与正常食管组织相比，食管鳞癌组织中S100A7 mRNA的表达量显著增加(见图1中B)。

二、检测食管鳞癌组织中S100A7 mRNA的表达量

1、取119位临床确诊为食管鳞癌(均为知情同意的志愿者)的食管鳞癌组织和癌旁组织，制备RNA芯片(Li J，et al，LncRNA profile study reveals a three-lncRNAsignature associated with the survival of patients with oesophageal squamouscell carcinoma.Gut.2014Nov；63(11)：1700-10.)。

2、完成步骤1后，检测RNA芯片中各个组织的S100A7 mRNA的表达量，检测方法(参考文献：Li J，et al.LncRNA profile study reveals athree-lncRNA signatureassociated with the survival of patients with oesophageal squamous cellcarcinoma.Gut.2014Nov；63(11):1700-10.)如下：LncRNA表达谱分析使用安捷伦人lncRNA+mRNA阵列V.2.0平台进行；对所有119对配对的肿瘤正常样本的微阵列数据(包含8900个lncRNA和微阵列中的所有mRNA)进行了分位数归一化，并将数据进行log₂对数转换；使用随机森林无监督分类算法估算缺失值；采用t检验比较食管鳞癌和癌旁组织中S100A7mRNA的表达量；其中每个患者的食管鳞癌组织和癌旁组织需成对检测。

检测结果见图1中C(正常对照为癌旁组织)。结果表明，与癌旁组织相比，食管鳞癌组织中S100A7 mRNA的表达量显著增加。

三、检测S100A7蛋白在食管鳞癌组织中的表达量

1、病例的选择

331例食管鳞癌组织和221例正常食管组织的石蜡切片标本取自1999年1月-2001年9月期间和2005年12月-2008年11月期间在国家癌症中心或中国医学科学院肿瘤医院接受外科手术治疗的食管鳞癌患者。所有患者均没有接受过术前的新辅助放疗或者化疗。手术3年内均没有患过其它部位肿瘤或者接受过抗肿瘤治疗。TNM分期按照第七版AJCC食管鳞癌分期系统进行分期。病人的预后信息采取电话随访的方式获得。术中标本离体后立即按操作规范取材，分装于标记好的冻存管中，及时放入液氮速冻，整个过程保证30min内完成，过夜后转移到-80℃超低温冰箱长期保存。所有食管鳞癌组织标本和所有正常食管组织标本均得到术后病理组织切片证实。标本获取及操作过程获得中国医学科学院肿瘤医院伦理委员会批准。标本的提供者均知情同意。

将331例食管鳞癌组织作为病例组。221例正常食管组织作为对照组。

2、检测石蜡切片标本中S100A7蛋白的表达量

(1)脱蜡至水

取步骤1获得的标本，先用二甲苯脱蜡3次、每次15min，再用无水乙醇浸泡2次、每次5min，最后依次用85％乙醇水溶液水化5min、75％乙醇水溶液水化5min和蒸馏水洗涤5min。

(2)抗原修复

取完成步骤(1)的标本，置于盛满柠檬酸抗原修复缓冲液(pH6.0)的修复盒中，置于微波炉内进行抗原修复(具体参数为：中火8min至沸，停火8min保温再转中低火7min，此过程中应防止缓冲液过度蒸发，切勿干片)；自然冷却后将标本置于PBS缓冲液(pH7.4)，在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。

(3)阻断内源性过氧化物酶

将完成步骤(2)的标本置于3％双氧水溶液，室温避光孵育25min；然后将标本置于PBS缓冲液(pH7.4)，在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。

(4)血清封闭

将完成步骤(3)的标本置于组化圈，滴加3％(v/v)BSA水溶液均匀覆盖标本，室温封闭30min。

(5)加一抗

完成步骤(4)后，轻轻甩掉封闭液(即3％(v/v)BSA水溶液)，在标本上滴加S100A7抗体稀释液(用PBS缓冲液(pH7.4)稀释S100A7抗体(Abcam#ab13680)至100倍)，然后平放于湿盒内(湿盒内加少量水防止抗体蒸发)，4℃孵育过夜。

(6)加二抗

完成步骤(5)后，将标本置于PBS缓冲液(pH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min；稍甩干后在圈内滴加与一抗相应种属的二抗(HRP标记)覆盖组织，室温孵育50min。

(7)DAB显色

完成步骤(6)后，将标本置于PBS缓冲液(pH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min；稍甩干后在圈内滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下控制显色时间，阳性为棕黄色，自来水冲洗切片终止显色。

(8)复染细胞核

完成步骤(7)后，将标本苏木素复染3min左右，自来水洗，苏木素分化液分化数秒，自来水冲洗，苏木素返蓝液返蓝，流水冲洗。

(9)脱水封片

完成步骤(8)后，将标本依次用75％乙醇水溶液脱水5min、85％乙醇水溶液脱水5min、无水乙醇脱水3次(每次5min)，将标本从二甲苯拿出来稍晾干，中性树胶封片。

(10)显微镜镜检，图像采集分析。免疫组化结果判读由阳性面积a和阳性强度b的乘积(即ab值)来决定。阳性面积小于30％时，a为1；阳性面积为30％以上且小于60％时，a为2；阳性面积为60％以上时，a为3。完全没有表达时，b为0；弱阳性时，b为1；中等强度时，b为2；强阳性时，b为3。当ab值等于0时，S100A7无表达；当1≤ab值<3时，S100A7弱表达；当3≤ab值<6时，S100A7中等表达，当ab值为6以上时，S100A7强表达。

食管鳞癌组织和正常食管组织中S100A7蛋白的表达量的统计结果见图1中D(正常对照为对照组，食管鳞癌为病例组，-为S100A7无表达，+为S100A7弱表达，++为S100A7中等表达，+++为S100A7强表达)。

食管鳞癌组织和正常食管组织的图像见图1中E。

结果表明，与正常食管组织相比，食管鳞癌组织中S100A7蛋白的表达量显著增加。这一结果与S100A7 mRNA的表达量检测结果完全一致。

四、S100A7是食管鳞癌的独立预后因素

1、为了明确S100A7与食管鳞癌患者的预后等临床病理相关性，获取331例食管鳞癌组织的提供者的人口学资料(如性别、年龄或出生日期)、生活饮食习惯(如吸烟、饮酒)、家族史、临床病理信息和随访信息。

2、根据331例食管鳞癌组织的S100A7蛋白的表达量，分为S100A7高表达组(ab值为6以上时)和S100A7低表达组(ab值小于6)。将高表达组和低表达组中步骤1获得的信息进行统计学分析。

结果表明，S100A7与食管鳞癌的分化程度相关而与年龄、性别、吸烟状态、肿瘤分期等没有显著相关性(表1)。Cox多因素预后分析显示，S100A7蛋白、年龄、淋巴结转移和肿瘤分期是食管鳞癌的独立预后因素(表2)。

表1

表2

3、以生存时间为横坐标，累计生存率为纵坐标，绘制高表达组和低表达组的生存曲线。

生存曲线见图2中A。结果表明，高表达组的预后较差。

4、采用Logistic回归分析，结合年龄、分化程度、淋巴结转移、TNM分期及S100A7表达量得到预后评分，采用预后评分对食管鳞癌根治术后患者预后进行分析。

结果见图2中B。结果表明，结合S100A7后的预后评分对食管鳞癌术后患者的预后判断更为准确，曲线下面积(AUC)为0.725。

实施例2、食管鳞癌患者及健康对照人群血清标本中游离S100A7蛋白检测及诊断分析

一、病例的选择

由2018年5月到2019年6月就诊于中国医学科学院肿瘤医院的234名食管鳞癌患者(依次命名为Tumor_1—Tumor_234)组成病例组。2018年5月到2019年6月到中国医学科学院肿瘤医院防癌科进行体检的127名健康人(依次命名为Normal_1—Normal_127)组成对照组。要求病例组和对照组的性别年龄应相互匹配，无明显分布差异且均无精神疾病，思维清晰，能理解提问并清楚回答问题，愿意配合。234名食管鳞癌患者均满足病例组的纳入标准和排除标准。127名健康人均满足对照组的纳入标准和排除标准。

病例组的纳入标准：(1)样本信息齐全，包括性别、年龄、临床诊断信息等；(2)无其它恶性肿瘤病史，术前亦未进行过放化疗等抗肿瘤治疗；(3)所有患者均内镜活检或者术后病理证实为食管鳞癌。

对照组的纳入标准：来自防癌体检人群，体检结果无重大基础疾病，并且无肿瘤征象。

排除标准：(1)受检者信息不齐全；(2)样本保存条件和期限不符合要求的样本或发生过反复冻融。

二、检测病例组和对照组血清中S100A7蛋白的浓度

1、采用CircuLex S100A7/Psoriasin ELISA Kit(MBL公司的产品，Cat#CY-8073)分别检测234名食管鳞癌患者和127名健康人的血清中S100A7蛋白的浓度。血清从进行生化检测后的外周血中获取。

病例组和对照组的血清中S100A7蛋白的浓度见图3和表3中第2列。结果表明，与对照组相比，病例组中S100A7蛋白的浓度显著增加(p<0.001)。

表3

2、根据血清中S100A7蛋白的表达情况绘制ROC曲线，分析诊断效率。

ROC曲线见图4中A。结果表明，ROC曲线下面积可达到0.771(0.723-0.818，p<0.001)；当阈值设定为0.94ng/mL时，敏感度为59.1％，特异度为89.3％。

3、采用Logistics回归分析，结合血清中S100A7蛋白表达水平与临床现有肿瘤标志物SCC和Crfra211表达情况(中国医学科学院肿瘤医院检验科检测，通过查阅病例获得，Crfra211见表3中第3列，SCC见表3中第4列)，绘制ROC曲线。结果见图4中B和表3中第5-7列。结果表明，S100A7、SCC和Crfra211结合可以显著提高对食管鳞癌的诊断效率，ROC曲线下面积为0.872(0.805-0.938，p<0.001)，特异度为89.3％时，敏感度可达70.5％。

上述结果表明，血清中S100A7蛋白的浓度与食管鳞癌与否密切相关，即血清中S100A7蛋白的浓度可以辅助诊断食管鳞癌。

Claims

1.(Y1)或(Y2)：

(Y1)用于检测S100A7蛋白的物质在制备诊断或辅助诊断食管鳞癌的产品中的应用；

(Y2)用于检测S100A7蛋白的物质、用于检测SCC的物质和用于检测Crfra211的物质在制备诊断或辅助诊断食管鳞癌的产品中的应用。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述产品的检测样本为血清。

3.(X1)或(X2)：

(X1)检测S100A7表达量的系统的应用，为a3)或a4)；

(X2)检测S100A7表达量的系统、食管鳞癌组织分化程度、淋巴结是否转移、食管鳞癌组织TNM分期和年龄的应用，为a3)或a4)；

a3)预测食管鳞癌患者预后；

a4)制备用于预测食管鳞癌患者预后的产品。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于：所述系统包括检测S100A7表达量的试剂和/或试剂盒；所述试剂和/或试剂盒包括能与S100A7蛋白特异结合的物质和/或能与S100A7蛋白的编码基因特异结合的物质。

5.如权利要求3或4所述的应用，其特征在于：所述检测S100A7表达量的系统包括通过免疫组织化学染色方法检测S100A7蛋白的表达量所需的试剂和/或仪器。

6.如权利要求3至5任一所述的应用，其特征在于：所述S100A7表达量为食管鳞癌组织中S100A7的表达量。

7.如权利要求3至6任一所述的应用，其特征在于：所述产品的检测样本为食管鳞癌组织。

8.S100A7蛋白作为标志物的应用，为a1)、a2)、a3)或a4)：

a1)诊断或辅助诊断食管鳞癌

a2)制备用于诊断或辅助诊断食管鳞癌的产品；

a3)预测食管鳞癌患者预后；

a4)制备用于预测食管鳞癌患者预后的产品。

9.产品甲或产品乙；

产品甲包括用于检测S100A7蛋白的物质；产品甲的检测样本为血清；产品甲的功能为诊断或辅助诊断食管鳞癌；

产品乙包括权利要求3-6中所述检测S100A7表达量的系统；产品乙的检测样本为食管鳞癌组织和/或食管组织；产品乙的功能为预测食管鳞癌患者预后。

10.如权利要求9所述的产品甲或产品乙，其特征在于：

所述产品甲还包括记载有判断标准甲的载体；所述判断标准甲为：如果待测者血清中S100A7蛋白的浓度高于对照血清中S100A7蛋白的浓度，则待测者为或疑似为食管鳞癌患者；如果待测者血清中S100A7蛋白的浓度低于对照血清中S100A7蛋白的浓度，则待测者不为或疑似不为食管鳞癌患者；对照血清为非食管鳞癌患者的血清；

所述产品乙还包括记载有判断标准乙和/或判断标准丙的载体；

所述判断标准乙为：如果食管鳞癌患者的食管鳞癌组织中S100A7蛋白的表达量高于正常食管组织中S100A7蛋白的表达量，则食管鳞癌患者预后不良；如果食管鳞癌患者的食管鳞癌组织中S100A7蛋白的表达量低于正常食管组织中S100A7蛋白的表达量，则食管鳞癌患者预后良好；

所述判断标准丙为：如果食管鳞癌患者的食管鳞癌组织中S100A7基因的表达量高于正常食管组织中S100A7基因的表达量，则食管鳞癌患者预后不良；如果食管鳞癌患者的食管鳞癌组织中S100A7基因的表达量低于正常食管组织中S100A7基因的表达量，则食管鳞癌患者预后良好。