CN113135823A - 一种辛伐他汀半抗原、人工抗原和抗体及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种辛伐他汀半抗原、人工抗原和抗体及其应用。具体提供了一种辛伐他汀半抗原，其结构式如式(Ⅰ)所示。本发明通过合成制备的辛伐他汀半抗原、人工抗原，从而制备得到一种辛伐他汀多克隆抗体，该抗体对辛伐他汀的检测具有灵敏度高、特异性强的优点。本发明还利用该辛伐他汀抗体建立了一种辛伐他汀胶体金免疫层析试纸条的检测方法，该方法具有特异性强、灵敏度高、检测时间短、成本低等优点，适用于现场大批量样品的快速筛选，能够实现快速检测保健食品中辛伐他汀的目的，在保健食品中非法添加辛伐他汀药物的安全监测中具有广泛的应用价值。

Description

一种辛伐他汀半抗原、人工抗原和抗体及其应用
技术领域
本发明属于食品药品安全检测领域，更具体地，涉及一种辛伐他汀半抗原、人工抗原和抗体及其应用。
背景技术
辛伐他汀(Simvastatin)是一种降血脂的药物，因其具有亲脂性，可以通过被动扩散穿越血脑屏障，起到降低心血管疾病发病率的作用。近年来，随着心血管疾病的发病率升高，市场降血脂类药物需求增大，一些不法商家因受利益驱动，利用群众对保健食品的信赖，往保健食品中非法添加辛伐他汀。据相关研究表明，在临床上过量使用辛伐他汀会对患者造成一定的副作用，如便秘、晕眩、头痛、呕吐、腹泻、皮疹、脱发和贫血等。在保健食品中添加药物的做法不仅违反我国《食品安全法》，还会对人体健康带来巨大的危害。因此十分有必要加强保健品中非法添加辛伐他汀药物的监测。
为了规范辅助降血酯类保健食品的检测，国家市场监督管理总局于2017年发布了《保健食品中75种非法添加化学药物的检测》食品补充检验方法。据相关文献报道，辛伐他汀的检测方法主要有液相质谱联用(LC-MS/MS)和超高效液相-质谱联用(UPLC-MS)这两种方法。这些方法结果可靠，准确度高，抗干扰能力强，但仪器设备昂贵，样品前处理复杂，需要专业人员操作，难以满足现场大批量样本筛选。免疫分析方法是基于抗原和抗体之间的特异性识别、可逆性结合为原理的分析技术。因其具有特异性强、灵敏度高、操作相对简单、检测速度快、成本低廉、特别适用于现场大批量样品的筛选等诸多优点而备受瞩目。
目前辛伐他汀还没有应用免疫学方法检测的报道，因此建立一种高效快速、特异性强的免疫学方法检测辛伐他汀是十分必要的。高效快速的免疫学方法的关键在于获得灵敏度高、特异性强的抗体，而抗体的性能又取决于半抗原的结构。因此，设计一种有效的辛伐他汀半抗原显得尤为重要。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术中缺乏一种免疫检测辛伐他汀的方法，提供一种可应用于快速检测辛伐他汀的半抗原、人工抗原，以及灵敏度高、特异性强的人工抗体；利用该人工抗原和人工抗体建立的胶体金免疫层析方法，可以实现对保健食品中辛伐他汀的快速检测，为保健食品中的非法药物检测提供良好的技术支撑。
本发明的第一个目的在于提供一种辛伐他汀半抗原。
本发明的第二个目的在于提供所述辛伐他汀半抗原在制备辛伐他汀人工抗原中的应用。
本发明的第三个目的在于提供一种辛伐他汀人工抗原。
本发明的第四个目的在于提供一种辛伐他汀人工抗原组合物。
本发明的第五个目的在于提供所述半抗原、所述人工抗原和/或所述人工抗原组合物在制备辛伐他汀人工抗体中的应用。
本发明的第六个目的在于提供一种辛伐他汀抗体。
本发明的第七个目的在于提供所述半抗原、所述人工抗原、所述人工抗原组合物、和/或所述抗体，在检测辛伐他汀和/或制备辛伐他汀检测试剂盒中的应用。
本发明的第八个目的在于提供一种非诊断目的免疫检测辛伐他汀的方法。
本发明的第九个目的在于提供一种检测辛伐他汀的免疫层析试纸条。
为了实现上述目的，本发明是通过以下技术方案予以实现的：
本发明设计合成一种辛伐他汀半抗原，其结构式如式(Ⅰ)所示：
Figure BDA0003042158120000021
优选地，所述辛伐他汀半抗原的制备方法为：将辛伐他汀溶解于甲醇溶液中，加入氢氧化钾溶液，加热回流反应，薄层层析硅胶板确认产物；反应产物经旋干后，加入乙酸乙酯和饱和食盐水萃取，酯层用无水硫酸钠干燥，最后浓缩后即得到辛伐他汀半抗原。
因此本发明要求保护以下内容：
所述辛伐他汀半抗原在制备辛伐他汀人工抗原中的应用。
一种辛伐他汀人工抗原，由所述辛伐他汀半抗原与载体蛋白偶联所得，其结构式如式(Ⅱ)所示：
Figure BDA0003042158120000031
优选地，所述载体蛋白为乳铁蛋白、鸡卵清蛋白、牛血清蛋白或钥孔血蓝蛋白中的一种。
更优选地，所述载体蛋白为乳铁蛋白或鸡卵清蛋白。
一种辛伐他汀人工抗原组合物，包括辛伐他汀免疫原和辛伐他汀包被原，所述辛伐他汀免疫原由权利要求1所述半抗原与乳铁蛋白偶联所得，其结构式如式(Ⅲ)所示；所述辛伐他汀包被原由权利要求1所述半抗原与鸡卵清蛋白偶联所得，其结构式如式(Ⅳ)所示；
Figure BDA0003042158120000032
以上所述半抗原、所述人工抗原和/或所述人工抗原组合物在制备辛伐他汀人工抗体中的应用，也应属于本发明的保护范围之内。
本发明还要求保护一种辛伐他汀抗体，由所述的辛伐他汀免疫原制备得到。
优选地，所述抗体为多克隆抗体。
优选地，辛伐他汀多克隆抗体是通过将所述辛伐他汀免疫原与免疫佐剂乳化后免疫动物，分离血清、纯化后得到。
更优选地，所述辛伐他汀免疫原为结构式如式(Ⅲ)所示。
Figure BDA0003042158120000041
所述半抗原、所述人工抗原、所述人工抗原组合物、和/或所述抗体，在检测辛伐他汀和/或制备辛伐他汀检测试剂盒中的应用，也应属于本发明的保护范围之内。
本发明还要求保护一种非诊断目的免疫检测辛伐他汀的方法，利用所述的辛伐他汀包被原和所述辛伐他汀抗体进行检测。
本发明还要求保护一种检测辛伐他汀的免疫层析试纸条，利用所述半抗原、所述人工抗原、所述人工抗原组合物、和/或所述抗体制备得到。
优选地，所述胶体金免疫层析试纸条包括PVC底板、样品垫、结合垫、反应膜、吸水垫。
优选地，所述结合垫结合有标记所述辛伐他汀抗体的金标记抗体。
更优选地，所述抗体为多克隆抗体。
更优选地，所述金标记抗体为抗体浓度为10mg/mL的胶体金溶液。
更优选地，所述反应膜为NC膜。
优选地，所述NC膜上设置有检测线和质控线，所述检测线结合有结构式如式(Ⅳ)所示的辛伐他汀包被原，所述质控线结合有羊抗兔IgG。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明通过合成制备的辛伐他汀半抗原、人工抗原，从而制备得到一种辛伐他汀多克隆抗体，该抗体对辛伐他汀的检测具有灵敏度高、特异性强的优点，其半抑制浓度为3.67μg/kg，定量检测范围为0.32～85.6μg/kg，检测限为0.17μg/kg，对洛伐他汀的交叉反应率低于1％，为建立辛伐他汀的免疫检测方法提供了核心试剂。此外，本发明利用该辛伐他汀抗体建立了一种辛伐他汀胶体金免疫层析试纸条的检测方法，该方法具有特异性强、灵敏度高、检测时间短、成本低等优点，可视检测线为35μg/kg，适用于现场大批量样品的快速筛选，能够实现快速检测保健食品中辛伐他汀的目的，在保健食品中非法添加辛伐他汀药物的安全监测中具有广泛的应用价值。
附图说明
图1为辛伐他汀半抗原SVT合成过程示意图。
图2为半抗原、人工抗原、抗体、ELISA制备流程图。
图3为辛伐他汀人工抗原紫外扫描鉴定图。
图4为辛伐他汀抗体间接竞争ELISA标准曲线。
图5为辛伐他汀胶体金免疫层析试纸条的结构示意图。
图6为辛伐他汀胶体金免疫层析试纸条的检测结果示意图。
其中：A为阴性样品检测结果，B为弱阳性样品检测结果，C为阳性样品检测结果，D和E为试纸条无效结果。
图7为辛伐他汀胶体金试纸条中加标样品的分析结果。
具体实施方式
下面结合说明书附图和具体实施例对本发明作出进一步地详细阐述，所述实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。
实施例1辛伐他汀半抗原(SVT)的合成与鉴定
一、实验方法
1、辛伐他汀半抗原(SVT)的合成方法
将418.5mg辛伐他汀溶解于10mL甲醇溶液中，然后将900mg氢氧化钾溶解于10mL水溶液中，再将氢氧化钾溶液加入上述溶液中，70℃下加热搅拌5h，通过TLC(薄层层析硅胶板)监控反应过程并最后确认产物，其展开剂为甲醇：乙酸乙酯＝1：5。反应产物经旋干后，加入适量的乙酸乙酯和饱和食盐水萃取三次，向乙酸乙酯层添加200mg无水硫酸钠进行干燥，最后浓缩后得到辛伐他汀半抗原SVT，其合成过程如图1所示。
2、目标产物鉴定
先用辛伐他汀的标准品进行核磁鉴定，再将上述步骤1的目标产物过硅胶柱纯化纯化后，溶解于氘代二甲基亚砜中，进行核磁氢谱鉴定和质谱鉴定。
二、实验结果
目标产物的核磁共振氢谱结果如下：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ5.95(t,J＝10.2Hz,2H),5.77(ddt,J＝10.6,8.0,4.0Hz,2H),5.49(dt,J＝10.1,3.0Hz,2H),5.25–5.15(m,3H),4.68(s,1H),4.47(dq,J＝8.8,4.2Hz,2H),4.13–4.07(m,1H),4.06–3.93(m,3H),3.51–3.44(m,J＝3.8Hz,1H),2.62(dd,J＝17.3,4.5Hz,1H),2.43–2.35(m,4H),2.34(d,J＝4.8Hz,3H),2.31(q,J＝11.6,9.1Hz,2H),2.28–2.17(m,2H),2.00–1.89(m,5H),1.88–1.74(m,3H),1.74–1.66(m,1H),1.60(ddt,J＝23.9,19.9,7.9Hz,3H),1.54–1.35(m,8H),1.35–1.28(m,2H),1.25(dd,J＝14.0,5.8Hz,3H),1.18(t,J＝7.1Hz,4H),1.12–0.99(m,19H),0.83(dd,J＝7.0,5.3Hz,6H),0.77(td,J＝7.5,1.4Hz,6H).
质谱结果如下：MS:C25H38O5：418.5，ESI-[M-H]：437.3。
两者结果皆表明衍生位点正确，制备得到的目标产物为辛伐他汀半抗原(SVT)，其结构式如式(Ⅰ)所示：
Figure BDA0003042158120000061
所述辛伐他汀半抗原采用系统命名法为：
(3S，5R)-7-((1R，2R，6S，8R，8aS)-8-((2,2-二甲基丁酰基)氧基)-2,6-二甲基-1,2,6,7,8，8a-六氢萘-1-基)-3,5-二羟基庚酸；即(3S,5R)-7-((1R,2R,6S,8R,8aS)-8-((2,2-dimethylbutanoyl)oxy)-2,6-dimethyl-1,2,6,7,8,8a-hexahydronaphthalen-1-yl)-3,5-dihydroxyheptanoic acid。
实施例2辛伐他汀人工抗原的合成与鉴定
一、实验方法
1、辛伐他汀人工抗原SVT-LF的合成
以实施例1制备的辛伐他汀半抗原SVT作为半抗原，通过活泼酯法偶联乳铁蛋白(LF)获得，制备路线如图2所示，其结构式如式(Ⅲ)所示：
Figure BDA0003042158120000071
(1)依次称取8mg的辛伐他汀半抗原，3mg的NHS和4mg的EDC溶解于200μL的DMF中，室温搅拌4h，充分活化；
(2)称取10mg的乳铁蛋白(LF)加入到2mL的PBS缓冲溶液中(0.1M，pH＝7.4)；
(3)将步骤(1)所得的溶液缓慢逐滴滴加到步骤(2)所得溶液中，搅拌7h，用0.1MPBS(pH＝7.4)缓冲溶液透析两天，每天换液4次，透析结束后得到辛伐他汀完全抗原(SVT-LF)；
其中PBS缓冲溶液的配方为：Na2HPO4·12H2O 2.90g，NaCl 8.50g，KCl 0.20g，KH2PO4 0.20g，加蒸馏水定容至1000mL。
2、辛伐他汀人工抗原SVT-OVA的合成
制备方法同以上，仅是将鸡卵清蛋白(OVA)替换乳铁蛋白(LF)作为载体蛋白，得到辛伐他汀人工抗原SVT-OVA，制备路线如图2所示，其结构式如(Ⅳ)所示：
Figure BDA0003042158120000072
3、人工抗原的鉴定
取LF、OVA、SVT-LF、SVT-OVA和半抗原(SVT)进行紫外(200～400nm)扫描鉴定。
二、实验结果
结果如图3所示，比较偶联前后各物质的最大吸收波长。SVT-LF的吸收曲线与LF的曲线具有较大的差别，最大吸收波长发生了明显偏移；LF在275nm处具有特征吸收峰，SVT-LF在285nm处有特征吸收峰，故辛伐他汀人工抗原SVT-LF的紫外吸收曲线是LF和半抗原(SVT)的累加吸收特征。SVT-OVA的特征吸收峰亦是如此，说明了辛伐他汀人工抗原偶联成功。
实施例3辛伐他汀多克隆抗体的制备
一、实验方法
采用实施例2辛伐他汀人工抗原的制备方法制备辛伐他汀人工抗原SVT-BSA(血清蛋白)、SVT-KLH(钥孔血蓝蛋白)，并与实施例2中的人工抗原SVT-LF作为免疫原分别免疫动物，以考察偶联不同载体蛋白的免疫原所制备的抗体的效果：
1、挑选6只(雌雄各半)成年健康的新西兰大白兔进行背部多点免疫(3种人工抗原雌雄各免疫一只)，每只兔子免疫人工抗原的剂量为500μg，初次免疫时将人工抗原按体积比1:1与弗式完全佐剂乳化，免疫新西兰大白兔。之后将人工抗原按体积比1:1与弗式不完全佐剂乳化，每隔三周进行一次加强免疫，共加强免疫四次；
2、第三次免疫后间隔7天兔耳缘静脉取血，离心取上清，icELISA检测抗体的性能。
二、实验结果
免疫偶联不同载体蛋白的免疫原，分别获得不同性能的兔血清抗体。结果如表1所示，以实施例2的乳铁蛋白为载体蛋白时，免疫原免疫得到的兔血清性能最佳，所以最后选择以SVT-LF为免疫原，其效价为128k，抑制率为80％。抑制率的计算公式为：
Figure BDA0003042158120000081
表1不同种免疫原效价抑制的比较
Figure BDA0003042158120000082
实施例4辛伐他汀多克隆抗体的ELISA检测方法
一、实验方法
辛伐他汀多克隆抗体的ELISA检测方法如下：
1、将实施例2中的辛伐他汀人工抗原SVT-OVA作为包被原，用包被液稀释至1μg/mL的浓度，包被于96孔酶标板，每孔加入100μL，37℃孵育12h，弃去包被液，用PBST洗涤2次；
2、每孔加入120μL封闭液(1％鱼皮胶原蛋白)，37℃封闭3h，弃去封闭液，拍板甩干，置于37℃烘箱1h备用；
3、用PBST将实施例2中SVT-LF免疫兔子获得的血清稀释1000倍，并将辛伐他汀药物稀释至100、33.33、11.11、3.703、1.23、0.411、0.137、0.045、0.0152、0.005、0.00166ng/mL；
4、加50μL辛伐他汀药物稀释液(三组平行)，每孔再加50μL稀释后的血清，在37℃水浴锅中孵育40min，用PBST洗涤5次；
5、加入羊抗兔二抗IgG-HRP(用PBS 5000倍稀释)，37℃孵育30min，用PBST洗涤5次，拍板甩干；
6、加入100μL TMB显色液37℃孵育10min；
7、加入50μL10％H2SO4终止反应，并在紫外波长450nm处读取OD值；
将上述辛伐他汀药物换成洛伐他汀，并以同样的稀释倍数进行上述试验，建立标曲获得IC50，测定该抗体对辛伐他汀其他结构类似物的交叉反应率。
二、实验结果
辛伐他汀抗体间接竞争ELISA标准曲线如图4所示，辛伐他汀抗体对辛伐他汀的半抑制浓度(IC50)为3.67μg/kg，定量检测线性范围(IC20～IC80)0.32～85.6μg/kg，最低检测限为0.17μg/kg，且对洛伐他汀的交叉反应率低于1％。说明本发明制备的辛伐他汀多克隆抗体对辛伐他汀的检测灵敏度高、特异性强。
实施例5一种辛伐他汀胶体金免疫层析试纸条的研制及判断方法
一、实验方法
1、金标抗体和金标结合物垫的制备
(1)胶体金标记的辛伐他汀多克隆抗体的制备
采用柠檬酸三钠还原氯金酸的方法，制备平均粒径在40nm的胶体金悬浮液：在加热回流条件下，把200mL过膜超纯水加热至沸腾，再把8mL 1％的氯金酸溶液迅速倒入，待它再次沸腾，迅速加入9.25mL 1％的柠檬酸三钠；当反应溶液颜色变成葡萄酒红色时继续加热搅拌10min，冷却至室温后，用超纯水补足200mL液体体积，将液体转移至锥形瓶封口膜封口，放置4℃冰箱保存；
取1mL胶体金溶液置于1.5mL离心管，添加15μL 0.2M的K2CO3溶液调节pH至9.6，加入1μL实施例3中以SVT-LF为免疫原制备得到的辛伐他汀多克隆抗体原液，静置偶联15min，随后加入20μL 20％BSA溶液室温下静置封闭15min；高速冷冻离心机4℃10000rpm离心15min，弃去上层清夜。最后用200μL胶体金复溶液(含0.5％BSA、1％蔗糖、0.5％PVP、0.01mol/L硼酸钠和0.05％叠氮化钠)重悬，超声分散均匀，放置4℃冰箱保存备用。
(2)金标结合物垫的制备
用XYZ-3000三维喷膜仪把金标记抗体溶液以0.8μL/cm的浓度均匀喷涂在玻璃纤维棉上，将玻璃纤维放置烘箱45℃干燥120min，自封袋中避光保存。
2、偶联抗原和羊抗兔包被硝酸纤维素膜
用XYZ-3000三维喷膜仪把0.15mg/mL实施例2中的辛伐他汀包被抗原(SVT-OVA)以0.8μL/cm的浓度喷涂在纤维素膜的偏下侧，作为检测线，把0.01mg/mL的羊抗兔IgG以0.8μL/cm的浓度喷涂在硝酸纤维素膜的偏上侧，作为质控线，两线之间的距离为8mm。
3、试纸条的组装
如图5所示，把硝酸纤维素膜粘贴在衬板中间部位上，吸水垫粘贴在硝酸纤维素上侧和其重叠2mm，金标结合物垫粘贴在硝酸纤维素膜下方重叠2mm，样品垫粘贴在金标结合物垫下方重叠2mm，组装好的试纸板用斩切机切成4mm宽的试纸条，即可用于检测。
4、试纸条的检测方法及结果判断
试纸条的结果判断示意图如图6所示。当胶体金试纸条插入含待测样品溶液滴的微孔后，待测溶液通过虹吸作用带动待测物及金标结合物垫中的金标抗体一起向硝酸纤维素膜扩散，并最终渗入吸水垫端。在扩散过程中，如果样品中含有辛伐他汀时，金标抗体首先与待测物质结合，进而占据了金标抗体上的抗原结合点，阻止了金标抗体与纤维素膜检测线上包被抗原的结合，使检测线不显色或者显色很弱即表示检测结果为阳性或者弱阳性(图6A、图6B)。如果样品中没有辛伐他汀时，金标抗体在上移过程中，检测线为一条清晰红线即表示检测样品阴性(图6C)。同样，多余的金标抗体也与纤维素膜上的质控线上羊抗兔IgG结合，显现红色；当质控线不显色的时候，说明试纸条无效(图6D)。
实施例6辛伐他汀胶体金免疫层析试纸条对样品的检测
一、实验方法
1、对保健食品中辛伐他汀样品的检测
(1)检测样品液的制备
辛伐他汀样品溶液的预处理：称取5g胶囊样品，去囊衣研磨粉碎后移入50mL离心管中，加入20mL80％甲醇水，涡旋震荡1min，超声提取3min，室温下4000rpm离心5min，取1mL上清液用工作缓冲液(PBS)稀释5倍数后测定溶液中辛伐他汀含量。
(2)检测及结果判断
向经LC-MS/MS确证为阴性样本的胶囊中添加辛伐他汀标准药物，使待测样品的药物浓度分别达0、7、14、21、28、35μg/kg，经样品预处理，用实施例5胶体金试纸条对样品进行检测，通过肉眼定性判断，确定cut-off值。
2、稳定性试验
将制备好的胶体金试纸条放入铝铂袋中，装入适量的干燥剂，密封真空包装，并在37℃、25℃、4℃条件下保存3个月，分别在0、1、3个月对胶体金试纸条进行测定。
二、实验结果
保健食品中辛伐他汀样品的检测结果如图7所示，辛伐他汀检测试纸条的cut-off值为35μg/kg，实验结果表明，该方法具有检测速度快、直观、操作方便等优点。
稳定性试验结果显示，试纸条经3个月保存后灵敏度基本不变，检测结果前后一致，说明了制备的胶体金试纸条对温度的抗干扰能力强，试纸条稳定性好。
最后应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，对于本领域的普通技术人员来说，在上述说明及思路的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动，这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种辛伐他汀半抗原，其特征在于，其结构式如式(Ⅰ)所示：
Figure FDA0003042158110000011
2.权利要求1所述辛伐他汀半抗原在制备辛伐他汀人工抗原中的应用。
3.一种辛伐他汀人工抗原，其特征在于，由权利要求1所述辛伐他汀半抗原与载体蛋白偶联所得，其结构式如式(Ⅱ)所示：
Figure FDA0003042158110000012
4.根据权利要求3所述辛伐他汀人工抗原，其特征在于，所述载体蛋白为乳铁蛋白、鸡卵清蛋白、牛血清蛋白或钥孔血蓝蛋白中的一种。
5.一种辛伐他汀人工抗原组合物，其特征在于，包括辛伐他汀免疫原和辛伐他汀包被原，所述辛伐他汀免疫原由权利要求1所述半抗原与乳铁蛋白偶联所得，其结构式如式(Ⅲ)所示；所述辛伐他汀包被原由权利要求1所述半抗原与鸡卵清蛋白偶联所得，其结构式如式(Ⅳ)所示；
Figure FDA0003042158110000021
6.权利要求1所述半抗原、权利要求3所述人工抗原和/或权利要求5所述人工抗原组合物在制备辛伐他汀人工抗体中的应用。
7.一种辛伐他汀抗体，其特征在于，由权利要求5中所述的辛伐他汀免疫原制备得到。
8.权利要求1所述半抗原、权利要求3所述人工抗原、权利要求5所述人工抗原组合物、和/或权利要求7所述抗体，在检测辛伐他汀和/或制备辛伐他汀检测试剂盒中的应用。
9.一种非诊断目的免疫检测辛伐他汀的方法，其特征在于，利用权利要求5中所述的辛伐他汀包被原和权利要求7所述辛伐他汀抗体进行检测。
10.一种检测辛伐他汀的免疫层析试纸条，其特征在于，利用权利要求1所述半抗原、权利要求3所述人工抗原、权利要求5所述人工抗原组合物、和/或权利要求7所述抗体制备得到。
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