CN113133515A - 一种在食材中降减农残的植物酵素果蔬洗涤液发酵工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及生物发酵、食品安全技术领域，具体涉及一种可降减农残的植物酵素果蔬洗涤液的发酵工艺，本发明的技术方案是按照以下途径实现，它由新鲜的水果、蔬菜、植物的根茎叶等天然植物原材料、糖、福缘地植物酵素菌种、植物活性剂按照一定的比例加入到发酵容器中，历经三年、六次自然发酵制成。具有无化学残留、降减农药残留、抑制有害菌、延长果蔬保质期、复原食材本来味道的优点。
Description
技术领域
本发明涉及生物发酵、食品安全技术领域，具体涉及一种可降减农残的植物酵素果蔬洗涤液的发酵工艺。
背景技术
酵素，起源于我国，兴盛于国外。
酵素，是我们中国传统的产品，是传统的食品发酵技术。早在2500年前我国就有酵素 产品的生产，1969年，日本的千田一郎是世界上第一个把酵素用于工业的科学家。如今，酵 素生产在日本、泰国已经发展成相当成熟的产业。
在国际上，对于植物酵素在农用、饲用、日用、环保、养生保健等领域中的的重视程度 一直是居高不下。各类植物酵素产业、植物酵素产品层出不穷，植物酵素已经形成了成熟的 产业链，2012年全球酵素市场达到1128亿美元规模。新华社《参考消息》网2019年6月16日报道，日美研究团队发现，从年轻老鼠体内提取血液中一种因年龄增大而会减少的酵素， 注射到年长老鼠体内，可以使年长老鼠身体活动水平提高，并延长寿命。日美研究团队的这 一发现可能有助于找到延长生命、提高健康水平的抗衰老方法。2015年公司参与了中国生物 发酵协会植物酵素团体标准、行业标准的制定，2018年《植物酵素行业标准》已由工信部颁 布实施，2019年植物酵素生产已被国家列入《产业结构调整指导目录(2019年本)。
随着人类对酵素的发现与重视，酵素相关的产业得到迅速的发展，近年来，酵素风靡日 本、韩国以及欧美发达国家，也逐渐走入中国，与发达国家相比，由于国内酵素行业仍处于 成长期，市场潜力仍未被发掘出来，因此市场规模十分有限，酵素洗涤产品更是基本处于空 白状态。
我国传统的洗涤类产品的工作原理是利用化学类物质将污垢从附着物(衣物、皮肤、果蔬、厨具等)表面分离开，用水冲走。其中的主要成分十二烷基苯磺酸钠具有微毒性。在对环境造成污染的同时也极大地损害了人们的身心健康。近几年来国家相继出台各项政策用于环境治理，生态改善，同时加大力度对环境污染源头进行治理。但现在国内在生产源头上就能做到防止污染的企业并不多。
酵素行业属于新兴行业，产品质量残差不齐，鱼目混珠现象严重，损害了酵素产品在消费者中的口碑。部分现有产品发酵工艺原始、不规范，产品品质不稳定。本产品研发历时七年，引进国际顶级酵素菌种，并添加本土菌种。发酵周期历时三年，进行六次自然发酵轮次。本方法发酵出的植物酵素果蔬洗涤液，在拥有良好去污性的同时，可以有效抑菌(见附图1- 图4)、有效地将农药化肥残留降解90％以上(见附图5-图7)、有效提高蔬果保鲜期(见附图8-图10)。
发明内容
本发明为一种切实可行的植物酵素果蔬洗涤液的发酵工艺，以天然植物为发酵原料，利用植物酵素发酵技术，发酵过程不添加香精、防腐剂、十二烷基苯磺酸钠等化学成分，对生态环境不仅无二次污染而且还可净化环境污染。
本发明通过植物酵素的生物降解作用，有效地将水果、蔬菜等“入口”的各种食材中的农药、抗生素残留和有害菌体，分解为易溶于水的化合物，具有杀灭细菌、分解异味、增鲜提质、复原食材本色等功效，从生活的源头把控食材安全。经检测：将含有农残(乐果、马拉硫磷)的蔬菜水果，用果蔬洗涤保鲜液稀释浸泡20分钟以上，去除率能达到90％以上，填补了国内空白。
本发明的技术方案是这样实现的：将天然植物原材料、糖、福缘地植物酵素菌种、植物活性剂按照一定的比例加入到发酵容器中，历经三年、六次自然发酵制成。
所述天然植物原材料为新鲜的水果、蔬菜、植物的根茎叶。
所述糖为红糖、白砂糖或冰糖。
所述植物酵素菌种为本公司历经六年经过数百次的生物提纯、排列组合、自然发酵培育而成的。
所述植物活性剂为具有清洁效果的植物提取活性剂。
所述发酵容器前五次发酵采用塑胶容器，因为在发酵过程中会产生气体，塑胶容器可膨胀变大，保证发酵过程的安全。第六次发酵采用不锈钢容器。
植物酵素果蔬洗涤液的生物发酵工艺流程(见附图11)、步骤如下：
(1)将天然植物原材料、糖、福缘地植物酵素菌种按照(0.8-3)∶(0.5-1.2)∶10的比例，进行为期8个月的自然发酵；
(2)根据首轮发酵的植物酵素发酵液的发酵情况按照：植物酵素初级发酵液、糖、植物活性剂、福缘地植物酵素菌种，10∶(0.5-1.2)∶1∶10的比例，进行为期8个月的自然发酵；
(3)根据二次发酵的植物酵素发酵液的发酵情况按照：植物酵素二次发酵液、糖、福缘地菌种，10∶(0.5-1)∶10的比例，进行为期8个月的自然发酵；
(4)根据三次发酵的植物酵素发酵液的发酵情况按照：植物酵素三次发酵液、糖、植物活性剂、福缘地菌种，10∶(0.5-0.8)∶1∶10的比例，进行为期6个月的自然发酵；
(5)根据四次发酵的植物酵素发酵液的发酵情况按照：植物酵素四次发酵液、糖、福缘地菌种，10∶(0.5-1)∶10的比例，进行为期6个月的自然发酵；
(6)根据五次发酵的植物酵素发酵液的发酵情况按照：植物酵素五次发酵液、植物活性剂 (70-150)∶10的比例，进行48小时的自然发酵，制成植物酵素果蔬洗涤液。
附图说明
一、图1、图2、图3、图4为被本发明抑菌活性实验图：附图1为金黄葡萄球杆菌抑菌实验检测图；附图2为短小芽孢杆菌抑菌实验检测图；附图3为大肠杆菌抑菌实验检测图；附图4为沙门氏菌抑菌实验检测图。
1、实验仪器
恒温振荡器 江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司
电热恒温培养箱 常州市化普达教学仪器有限公司
洁净工作台 苏净集团苏州安泰空气技术有限公司
立式压力蒸汽灭菌器 上海申安医疗器械厂
Cascada超纯水系统 德国Pall Corporation
2、实验试剂与材料
无水乙醇(分析纯，莱阳市康德化学有限公司)，超纯水，LB营养琼脂(HB0129，青岛高科园海博生物技术有限公司)，LB肉汤(CM158，北京陆桥技术有限责任公司)
供试细菌：大肠杆菌(CVCC1570/CMCC44102)，短小芽孢杆菌(CVCC781/CVCC709)，金黄色葡萄球菌(CVCC1882)，沙门氏菌(salmonella)，均由青岛农业大学仿生试验中心提供。
3、实验步骤
(1)培养基的制备
细菌液体培养基：精确称取LB肉汤25.0g于锥形瓶中，加入1.L蒸馏水，加热煮沸使其完全溶解，分装到50mL锥形瓶中，每瓶20mL，121℃高压灭菌1h，备用。
细菌固体培养基：精确称取LB营养琼脂40.0g于锥形瓶中，加入1L蒸馏水，加热煮沸使其全溶解，分装到150mL锥形瓶中，每瓶60mL，121℃高压灭菌1h，备用。
(2)试验菌悬液的培养
在无菌操作台内，酒精灯下焰无菌区，用灭菌移液枪移取100uL大肠杆菌、短小芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌试验菌株原液于装有20mL液体培养基的锥形瓶中。用棉塞密封后，放入气浴恒温振荡器中，于37℃条件下活化，其中金黄色葡萄微球菌活化16h，其他细菌活化8h，备用。
(3)含药滤纸片的制备
用打孔器制备直径为6mm的滤纸片若干，121℃高压灭菌1h，备用。做抑菌试验时，用灭菌镊子取已灭菌的滤纸片在已灭菌的培养皿中摆放好，用移液枪每次移取10μL药液于滤纸片上，静置片刻使溶剂挥发，重复加药液两次，便可将含药滤纸片按实验要求贴放在含菌平板上，并用浸有等量灭菌后的蒸馏水滤纸片作为对照。
(4)抑菌活性的测定
无菌条件下，将60℃左右的LB营养琼脂培养基分别倒入灭菌培养皿中，缓慢摇匀，放置在超净工作台内，待其凝固。在酒精灯下焰无菌区，用灭菌移液枪分别移取活化好的大肠杆菌、短小芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌菌液各100uL滴加在凝固好的培养基中央，用灭菌涂布器涂匀。用记号笔标注明细。然后取含药滤纸片三片，对照滤纸片一片，呈四边形贴于培养皿琼脂表面。将处理好的培养皿置于37℃培养箱中培养24h，其中金黄色葡萄球菌需要培养48h，观察并测量抑菌圈直径。
4、实验结果
洗手液对细菌的抑菌效果
注：“+++”表示高灵敏(φ抑菌圈≥15mm)；“++”表示灵敏(10≤φ抑菌圈≤14mm)；“+”表示灵敏度较低(φ抑菌圈≤10mm)；“-”表示不敏感。
图1为用本发明抑制有害菌——金黄葡萄球杆菌实验检测图，中中左上角为对照组，其余三个为平行实验组。
图2为用本发明抑制有害菌——短小芽孢杆菌实验检测图，图中左上角为对照组，其余三个为平行实验组。
图3为用本发明抑制有害菌——大肠杆菌实验检测图，图中左上角为对照组，其余三个为平行实验组。
图4为用本发明抑制有害菌——沙门氏菌实验检测图，图中左上角为对照组，其余三个为平行实验组。
二、图5、图6、图7为本发明降减农残检测实验图：附图5为植物酵素果蔬洗涤液产品 外包装图；附图6实验使用的蔬菜图；附图7为实验过程对照图。
1、实验仪器
恒温振荡器 江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司
农残检测仪 烟台市京蓬仪器科研有限公司
洁净工作台 苏净集团苏州安泰空气技术有限公司
Cascada超纯水系统 德国Pall Corporation
2、实验试剂与材料
无水乙醇(分析纯，莱阳市康德化学有限公司)，超纯水，福缘地植物酵素洗涤液，福缘地酵素蔬菜。
3、实验步骤
(1)将喷涂了农药的白菜叶切成小方块，然后称出三个样品，每样品1g。0号样品是作对照实验用的，不做任何处理；A号是做库存果蔬保鲜剂实验的，B号是做抽样果蔬保鲜剂实验的。
(2)三个样品中各加入40ml水，浸泡2分钟，然后往A、B样品中分别加对应果蔬保鲜剂1ml，搅拌浸泡5分钟后，倒出，清水漂洗2次。
(3)三个样品中各加入10ml的缓冲液，浸泡10分钟。
(4)从每个样品中，吸取2.5ml的浸泡液分别于三个比色皿中，依次加入50ul的酶试剂和显色剂，摇匀，用手保温10分钟。
(5)时间到后，快速加入检测底物50ul，摇匀，依次检测。
4、实验结果
图5为实验使用植物酵素洗涤保鲜液
图6为实验使用的蔬菜
图7为实验过程图片
三、图8、图9、图10为本发明保鲜效果实验图：附图8为保鲜试验过程第一天对照图； 附图9为保鲜试验过程第二天对照图；附图10为保鲜试验过程第三天对照图。
1、实验仪器
恒温振荡器 江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司
洁净工作台 苏净集团苏州安泰空气技术有限公司
Cascada超纯水系统 德国Pall Corporation
2、实验试剂与材料
福缘地酵素蔬菜，超纯水，福缘地植物酵素洗涤液。
3、实验步骤
将7株植物分别放入不同产品不同浓度的7个样品中培养，分时间记录培养情况。
4、实验结果
四、图11是本发明的生物发酵工艺流程图；
具体实施方式
一种在食材中降减农残的植物酵素果蔬洗涤液的发酵工艺，包括以下步骤：
(1)将天然植物原材料、糖、福缘地植物酵素菌种按照(0.8-3)∶(0.5-1.2)∶10的比例，进行为期8个月的自然发酵；
(2)根据首轮发酵的植物酵素发酵液的发酵情况按照：植物酵素初级发酵液、糖、植物活性剂、福缘地植物酵素菌种，10∶(0.5-1.2)∶1∶10的比例，进行为期8个月的自然发酵；
(3)根据二次发酵的植物酵素发酵液的发酵情况按照：植物酵素二次发酵液、糖、福缘地菌种，10∶(0.5-1)∶10的比例，进行为期8个月的自然发酵；
(4)根据三次发酵的植物酵素发酵液的发酵情况按照：植物酵素三次发酵液、糖、植物活性剂、福缘地菌种，10∶(0.5-0.8)∶1∶10的比例，进行为期6个月的自然发酵；
(5)根据四次发酵的植物酵素发酵液的发酵情况按照：植物酵素四次发酵液、糖、福缘地菌种，10∶(0.5-1)∶10的比例，进行为期6个月的自然发酵；
(6)根据五次发酵的植物酵素发酵液的发酵情况按照：植物酵素五次发酵液、植物活性剂 (70-150)∶10的比例，进行48小时的自然发酵，制成植物酵素果蔬洗涤液。
Claims (5)
1.一种在食材中降减农残的植物酵素果蔬洗涤液的发酵工艺，其特征在于天然植物为原料、利用植物酵素发酵技术研发而成，不含香精、防腐剂、十二烷基苯磺酸钠等有害化学成分。
2.如权利要求1所述的一种在食材中降减农残的植物酵素果蔬洗涤液的发酵工艺，其特征在于通过植物酵素的生物降解作用，有效地将水果、蔬菜、肉产品、水产品等“入口”的各种食材中的农药、抗生素残留和有害菌体，分解为易溶于水的化合物，具有杀灭细菌、去除大肠杆菌、分解异味、降解农残、抗生素等功效，去除率达95％以上。
3.如权利要求1所述的一种在食材中降减农残的植物酵素果蔬洗涤液的发酵工艺，其特征在于通过植物酵素的生物降解作用，杀灭细菌、增鲜提质、复原食材本色等，延长食材保质期，从生活的源头把控食材安全。
4.如权利要求1所述的一种在食材中降减农残的植物酵素果蔬洗涤液的发酵工艺，其特征为高倍浓缩配方，低泡易清洗，节水降耗。
5.如权利要求1所述的一种在食材中降减农残的植物酵素果蔬洗涤液的发酵工艺，其特征在于对生态环境不仅无二次污染而且还净化环境。
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