CN113122472B - 一株能够保护肠道通透性的普通拟杆菌及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一株能够保护肠道通透性的普通拟杆菌及其应用，属于微生物技术领域。本发明提供的普通拟杆菌CCFM1152已于2020年11月9日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No.61279。本发明提供的普通拟杆菌CCFM1152可以有效保护由于DSS诱导的体重下降、结肠长度变短、降低肠道通透性，修复结肠黏膜损伤。因此，普通拟杆菌CCFM1152在制备保护肠道通透性的食品和微生态制剂方向具有广泛的应用前景。

Description

一株能够保护肠道通透性的普通拟杆菌及其应用
技术领域
本发明涉及一株能够保护肠道通透性的普通拟杆菌及其应用，属于微生物技术领域。
背景技术
溃疡性结肠炎(UC)是一种典型的慢性复发性特发性肠道炎症，可引发结肠黏膜炎症、直肠出血和腹泻等。溃疡性结肠炎往往伴随着肠黏膜炎症和肠上皮屏障功能紊乱，其主要病理表现是肠黏膜通透性增加。研究发现，与正常组织相比，溃疡性结肠炎的肠组织中紧密连接结构和功能发生改变，肠黏膜通透性增加。而肠黏膜通透性会导致细菌、脂质多糖和内毒素等大分子物质透过损伤的肠黏膜进入组织而诱导或加剧炎症等。因此，保护肠道通透性进而改善肠道屏障恢复肠粘膜损伤是预防或者缓解结肠炎的有效途径。过往的研究已经表明益生菌在保护肠道健康，降低肠道通透性方面的巨大潜力。例如专利CN107412272A提供了一株植物乳杆菌Sc52，可以缓解由LPS刺激引起的肠道通透性增加。专利CN105795111A提供了一种包含唾液乳杆菌和鼠李糖乳杆菌微生态饲料添加剂，也能降低肠道的通透性。
拟杆菌是下一代益生菌的候选细菌之一，由于其对人类健康的潜在益处，已受到一定的关注。已有研究表明，某些拟杆菌可以调节机体代谢，抑制病原菌定居，减轻肠道炎症等。其中，普通拟杆菌是一种与肠道炎症密切相关的拟杆菌种。例如，一份报告显示，克罗恩病或溃疡性结肠炎患者肠道菌群中普通拟杆菌的丰度高于健康的人类肠道菌群。Frick等人的另一项研究表明，普通拟杆菌mpk通过抑制白介素-8(IL-8)的产生，可以预防小鼠DSS和小肠结肠炎耶尔森菌诱导的急性结肠炎。此外，Steimle等人的研究强调普通拟杆菌缓解肠道炎症的潜在作用。他们发现，普通拟杆菌表面的脂多糖可以通过肠固有层CD11c+细胞的MD-2/TLR4受体复合物轴诱导一种特殊的内毒素耐受，从而帮助重建肠道免疫稳态。鉴于普通拟杆菌在溃疡性结肠炎干预特性上的独特优势，筛选更多具有有益潜力的益生型普通拟杆菌值得研究。尽管一些专利(如CN111269852A)已经表明了普通拟杆菌具有改善调节肠道炎症的显著功效。但是到目前为止，还没有普通拟杆菌可以保护肠道通透性的专利报道。
发明内容
[技术问题]
目前关于普通拟杆菌对肠道中保护肠道通透性的研究及应用仍处于空白状态，需筛选一株能够保护肠道通透性的普通拟杆菌(Bacteroides vulgatus)。
[技术方案]
为了解决上述问题，本发明提供了一种普通拟杆菌(Bacteroides vulgatus)CCFM1152，该菌株已于2020年11月9日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省微生物研究所，保藏编号为GDMCC No.61279。
本发明还提供了含有上述普通拟杆菌CCFM1152的微生物制剂。
在本发明的一种实施方式中，所述微生物制剂中，所述普通拟杆菌CCFM1152的活菌数不低于1×106CFU/mL或1×106CFU/g。
本发明还提供了一种保护小鼠肠道通透性的产品，所述产品中含有上述普通拟杆菌CCFM1152或上述微生物制剂。
在本发明的一种实施方式中，所述产品中，上述普通拟杆菌CCFM1152的活菌数不低于1×106CFU/mL或1×106CFU/g。
在本发明的一种实施方式中，所述产品包括药物。
在本发明的一种实施方式中，所述药品含有上述普通拟杆菌CCFM1152、药物载体和/或药用辅料。
本发明的一种实施方式中，所述药物载体包含微囊、微球、纳米粒和/或脂质体。
本发明的一种实施方式中，所述药用辅料包含填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂和/或矫味剂。
在本发明的一种实施方式中，所述填充剂为淀粉、蔗糖、乳糖、硫酸钙和/或微晶纤维素。
在本发明的一种实施方式中，所述粘合剂为纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和/或聚乙烯吡咯烷酮。
在本发明的一种实施方式中，所述润湿剂为水、乙醇、淀粉和/或糖浆。
在本发明的一种实施方式中，所述崩解剂为羧甲基淀粉钠、羧丙纤维素、交联羧甲基纤维素、琼脂、碳酸钙和/或碳酸氢钠。
在本发明的一种实施方式中，所述润滑剂为滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、微粉硅胶和/或聚乙二醇。
在本发明的一种实施方式中，所述矫味剂为单糖浆、蔗糖、卵磷脂、橙皮糖浆、樱桃糖浆、柠檬、茴香、薄荷油、海藻酸钠、阿拉伯胶、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、柠檬酸、酒石酸和/或碳酸氢钠。
本发明的一种实施方式中，所述药品的剂型为粉剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂或口服液。
本发明还提供了上述普通拟杆菌CCFM1152或上述微生物制剂在制备改善肠道健康的药物中的应用。
本发明的有益效果：
本发明的普通拟杆菌CCFM1152可显著将因葡聚糖硫酸钠(DSS)感染而造成的小鼠体重下降、结肠长度变短、结肠组织病理损伤以及肠道通透性增加恢复至接近正常小鼠水平。因此，本发明所述具有保护肠道通透性的普通拟杆菌株在食品和微生态制剂方向具有广泛的应用前景。
生物材料保藏
本发明提供了一种普通拟杆菌(Bacteroides vulgatus)CCFM1152，该菌株已于2020年11月9日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No.61279，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省微生物研究所。
附图说明
图1：普通拟杆菌对结肠炎小鼠体重的影响(与DSS组对比，***表示P<0.001，**表示P<0.01，*表示P<0.05)。
图2：普通拟杆菌对结肠炎小鼠结肠长度的影响(与DSS组对比，***表示P<0.001，**表示P<0.01，*表示P<0.05)。
图3：普通拟杆菌对肠道通透性的影响(与DSS组对比，***表示P<0.001，**表示P<0.01，*表示P<0.05)。
图4：小鼠结肠组织形态学观察(与DSS组对比，***表示P<0.001，**表示P<0.01，*表示P<0.05)。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明的优选实施例进行详细的描述。
下述实施例中涉及的脑心浸液购自青岛海博生物技术有限公司。
下述实施例中涉及的培养基如下：
拟杆菌特异性筛选培养基：43.1g布氏培养基粉末均匀溶于1L水后，加入0.01‰的氯化血红素及0.01‰的维生素K1，121℃灭菌15min。待降温至50℃时，加0.1‰的卡那霉素、0.0075‰的万古霉素及5％的绵羊血后，混匀倒入无菌的培养皿中。
BHI液体培养基：脑心浸液中加入半胱氨酸盐酸盐1g/L、氯化血红素0.01g/L和维生素K1 0.002g/L，pH为7.0。
BHI固体培养基：脑心浸液中加入半胱氨酸盐酸盐1g/L、氯化血红素0.01g/L和维生素K1 0.002g/L、琼脂20g/L，pH为7.0。
下述实施例中涉及的普通拟杆菌菌悬液的制备方法如下：
将普通拟杆菌划线于BHI固体培养基上，37℃条件下培养48h，得到单菌落；挑取单菌落接种于BHI液体培养基中，37℃条件下培养18h进行活化，连续活化两代，得到活化液；将活化液按2％(v/v)的接种量接种于BHI液体培养基中，37℃条件下培养18h，得到菌液；将菌液经8000g离心10min，得到普通拟杆菌菌体；将普通拟杆菌菌体经生理盐水洗涤后重悬于浓度为200g/L的甘油溶液(含1g/L半胱氨酸盐酸盐)中至菌浓度为1×1010CFU/mL，得到菌悬液，将菌悬液于-80℃下保存待用。
实施例1：普通拟杆菌CCFM1152的分离筛选
1、样品采集
采集天津市河东区蝶桥公寓一位50岁中年男子粪便样本，样本置于装有30％甘油的大便管中，保存于装有冰袋的保温盒中，带回实验室后迅速置于-80℃冰箱待分离筛选。
2、乳酸菌的分离纯化
(1)稀释涂布：取0.5g左右的保存于30％甘油的内容物在无菌环境下加入装有4.5mL生理盐水的10mL离心管中，得到10-1稀释液，重复上述稀释步骤，依次得到10-2、10-3、10-4、10-5、10-6稀释液；
(2)涂布培养：分别吸取100μL上述10-4、10-5、10-6三个梯度稀释液于人体肠道中分离筛选拟杆菌特异性筛选培养基上，用涂布棒涂布均匀，至37℃厌氧条件下培养48h，得到稀释涂布平板；
(3)一级纯化培养：取菌落数在30～300区间的稀释涂布平板，每个样本随机挑选10个乳白色或白色，表面光滑，边缘整齐，大小不一的单菌落在BHI固体培养基上划线，放至37℃厌氧条件下培养48h，得到单菌落；
(4)二级纯化培养：取步骤(3)划线平板上单菌落分别接种于BHI液体培养基中，至37℃厌氧条件下培养20h，得到二级纯化培养液。
3、菌种保藏与鉴定
(1)菌种保藏：
将步骤2(4)获得的二级纯化培养液混匀，分别取菌体(37℃厌氧培养16-20h)至2mL干净的菌种保藏管，平行5份，其中4份加入750μL菌液和750μL 60％甘油重悬，静止30分钟后放入-80℃冰箱；1份加入1mL菌液用于菌种鉴定，6000r/min离心3min，弃上清得菌体。
(2)菌种鉴定：
步骤3(1)用于菌种鉴定的保藏管中加入1mL无菌水吹打洗菌体后，10000r/min离心1min，弃上清得菌体，加入500μL无菌水重悬，作为菌液模板；
其中，16S rDNA PCR的体系和引物分别见表1和表2；
16S rDNA PCR的条件：第一步：94℃，5min第二步：94℃，30s第三步：55℃，30s，第四步：72℃，2min，第五步：72℃，10min，第二到四步进行30个循环。
表1细菌菌种鉴定25μL 16S rDNA PCR反应体系
Figure GDA0003623890590000051
表2引物名称
Figure GDA0003623890590000052
PCR产物经核酸电泳分析确认后，送华大基因测序；将测序返回的27F和1492R拼接序列上传到NCBI的BLAST(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST)进行种属确认；比对结果发现编号为CCFM1152菌株为普通拟杆菌株(Bacteroides vulgatus)，其16S rDNA扩增序列如SEQ ID NO.1所示。
实施例2：普通拟杆菌CCFM1152对小鼠肠道荧光素标记葡聚糖(FITC)的作用
1、普通拟杆菌CCFM1152灌胃液的制备
将实施例1步骤2获得的普通拟杆菌CCFM1152划线于BHI固体培养基中，37℃厌氧条件下培养48h，得到单菌落；挑取BHI固体培养基上的单菌落接种于BHI液体培养基中，37℃厌氧条件下富集培养18～20h进行活化，连续活化两代，得到活化培养物；将活化培养物按2％～5％(v/v)的接种量接种于BHI液体培养基中，37℃厌氧条件下富集培养18～20h得到菌液，经8000g离心10min得到菌泥，用无菌生理盐水洗涤3次后收集菌泥，将收集得到的上述菌泥用无菌30％甘油溶液重悬得到普通拟杆菌CCFM1152悬浮液，用作工作发酵剂，放置于-20％保藏。实验之前取普通拟杆菌CCFM1152悬浮液离心，用0.85％无菌生理盐水(不含半胱氨酸盐酸盐)洗涤重悬，得到普通拟杆菌CCFM1152灌胃液(1×1010CFU/mL)。参照同样的方法获得同批次筛选到的普通拟杆菌CCFM1152、FSDLZ51K1和FSDTA11B14灌胃液。空白组和造模组每天灌胃与普通拟杆菌实验组同等剂量的无菌生理盐水(不含半胱氨酸盐酸盐)。
2、实验动物
SPF级8周龄雄性BALB/C小鼠，购于上海斯莱克有限公司；饲养于25±2℃、相对湿50±5％、12h光照12h黑暗的标准化实验室中，适应性喂养一周后开始实验。
3、实验方法
取6-8周龄健康雌性C57小鼠60只，随机分为6组，每组10只，6组分别为：DSS组、正常组和普通拟杆菌CCFM1152、CCFM1152、FSDLZ51K1或FSDTA11B14干预组。
整个实验周期为10天，正常组饮用无菌水作为安慰剂，DSS组自由饮用含30g/LDSS的水并且按照100μL的剂量每天灌胃无菌生理盐水(不含半胱氨酸盐酸盐)，其他四组干预组自由饮用含30g/L DSS的水，并且每天灌胃步骤1获得的灌胃液，灌胃剂量均为100μL/只C57小鼠。
从实验第一天起记录每只小鼠的体重以及血便和腹泻情况；第7天收集小鼠粪便置于2mL离心管中，置-80℃冰箱存放。
实验结束后，所有小鼠禁食不禁水24h后，将配置好的125mg/mL异硫氰酸荧光素葡聚糖(FITC-dextran)给每只小鼠灌胃(剂量：600mg/kg)，1h后收集血清(2400g，15min)，用血清中FITC-dextran的含量来表征肠道通透性；随后处死小鼠；取部分小鼠结肠组织置于4％多聚甲醛溶液中用于组织切片观察，剩下的结肠分段置于2mL离心管中置于-80℃冰箱。
4、小鼠体重和结肠长度变化
DSS诱导小鼠结肠炎会导致小鼠体重下降和结肠缩短，因此，体重和结肠长度是评价结肠炎小鼠炎症严重程度的重要指标。
体重变化如图1所示，与正常组比较，DSS组小鼠体重显著下降，说明溃疡性结肠炎模型构造成功；与DSS组相比，四株普通拟杆菌均显著增加了小鼠体重。其中普通拟杆菌CCFM1152和CCFM153干预组小鼠的体重降低比例分别为DSS组的51.55％和64.65％。
图2是结肠长度变化，正常组小鼠的结肠长度最长，其他组小鼠的结肠长度都有不同程度的下降；与DSS组相比，普通拟杆菌CCFM1152组和普通拟杆菌CCFM153组小鼠的结肠长度明显提高，分别提高了1.22和1.19倍。
图3是肠道通透性指标，用酶标仪检测FITC-dextran的含量(吸光度490nm)，FITC-dextran含量下降说明肠道通透性降低。普通拟杆菌CCFM1152组和普通拟杆菌CCFM153组小鼠FITC-dextran含量仅是DSS组的60.87％和64.47％，与正常组相差较小，说明普通拟杆菌CCFM1152和CCFM153能有效降低肠道通透性，恢复肠道粘膜损伤。
5、小鼠结肠组织切片观察
取HE染色的结肠组织切片，在光学显微镜下观察组织形态变化。结肠组织切片观察结果如图2所示，正常组小鼠结肠粘膜上皮细胞完整，隐窝正常，腺体排列整齐有序，且无溃疡存在；与正常组相比，DSS组小鼠则出现了严重的结肠损伤和急性结肠炎症状，伴随溃疡，隐窝破坏，以及严重的炎性；给小鼠灌胃普通拟杆菌CCFM1152后可以显著改善这些状态，与正常组结肠组织形态接近。
图4是结肠组织病理评分，具体评价标准主要参考2020年发表的一篇论文(https://doi.org/10.1007/s00394-020-02200-9)。结果表明与DSS组相比，只有普通拟杆菌CCFM1152组可以显著降低DSS引起的病理评分，其余三组普通拟杆菌组小鼠的病理评分指数显著上升。
以上实验结果表明，普通拟杆菌CCFM1152能够很好地保护结肠粘膜的完整性，减少炎症对结肠的损伤。
实施例3：普通拟杆菌CCFM1152的应用
普通拟杆菌CCFM1152可用于制备牛乳，牛乳的具体制备过程如下：
(1)将实施例1获得的普通拟杆菌CCFM1152的二级纯化培养液以3％(v/v)的接种量接种到培养基中，在温度37℃下培养18h，得到菌液；将菌液离心，得到菌泥；将菌泥用pH7.2的磷酸盐缓冲液清洗3次后用保护剂重悬至浓度为1×1010CFU/mL，得到悬浮液；将悬浮液在温度37℃下预培养60min后冻干，得到菌剂；
其中，培养基的制备方法为：脑心浸液中加入半胱氨酸盐酸盐1g/L、氯化血红素0.01g/L和维生素K1 0.002g/L，pH为7.0；
保护剂的成分包含：100g/L脱脂奶粉、30mL/L甘油、100g/L麦芽糊精、150g/L海藻糖和10g/L L-谷氨酸钠；
(2)将脱脂奶在95℃热杀菌20min后冷却至4℃，得到原料；在原料中添加步骤(1)制得的菌剂至浓度为不低于1×106CFU/mL，得到牛乳(牛乳需在4℃下冷藏保存)。
实施例4：普通拟杆菌CCFM1152的应用
普通拟杆菌CCFM1152可用于制备豆奶，豆奶的具体制备过程如下：
(1)将实施例1获得的普通拟杆菌CCFM1152的二级纯化培养液以3％(v/v)的接种量接种到培养基中，在温度37℃下培养18h，得到菌液；将菌液离心，得到菌泥；将菌泥用pH7.2的磷酸盐缓冲液清洗3次后用保护剂重悬至浓度为1×1010CFU/mL，得到悬浮液；将悬浮液在温度37℃下预培养60min后冻干，得到菌剂；
其中，培养基的制备方法为：脑心浸液中加入半胱氨酸盐酸盐1g/L、氯化血红素0.01g/L和维生素K1 0.002g/L，pH为7.0；
保护剂的成分包含：100g/L脱脂奶粉、30mL/L甘油、100g/L麦芽糊精、150g/L海藻糖和10g/L L-谷氨酸钠；
(2)将大豆在温度80℃下浸泡2h后去除大豆皮，得到去皮大豆；将去皮大豆沥去浸泡水后加沸水磨浆，得到豆浆；将豆浆在高于80℃的温度条件下保温12min，得到熟豆浆；将熟豆浆用150目筛网过滤后离心分离，得到粗豆奶；将粗豆奶加热到温度140～150℃后迅速导入真空冷却室进行抽真空，使得粗豆奶中的异味物质随着水蒸汽迅速排出，得到熟豆奶；将熟豆奶降温至约37℃后在熟豆奶中添加步骤(1)制得的菌剂至浓度为不低于1×106CFU/mL，得到豆奶(豆奶需在4℃下冷藏保存)。
实施例5：普通拟杆菌CCFM1152的应用
普通拟杆菌CCFM1152可用于制备蔬菜饮料，蔬菜饮料的具体制备过程如下：
(1)将实施例1获得的普通拟杆菌CCFM1152的二级纯化培养液以3％(v/v)的接种量接种到培养基中，在温度37℃下培养18h，得到菌液；将菌液离心，得到菌泥；将菌泥用pH7.2的磷酸盐缓冲液清洗3次后用保护剂重悬至浓度为1×1010CFU/mL，得到悬浮液；将悬浮液在温度37℃下预培养60min后冻干，得到菌剂；
其中，培养基的制备方法为：脑心浸液中加入半胱氨酸盐酸盐1g/L、氯化血红素0.01g/L和维生素K1 0.002g/L，pH为7.0；
保护剂的成分包含：100g/L脱脂奶粉、30mL/L甘油、100g/L麦芽糊精、150g/L海藻糖和10g/L L-谷氨酸钠；
(2)将新鲜蔬菜洗净后榨汁，得到蔬菜汁；将蔬菜汁在温度140℃下高温热杀菌2秒，得到杀菌后的蔬菜汁；将杀菌后的蔬菜汁降温至约37℃后在杀菌后的蔬菜汁中添加步骤(1)制得的菌剂至浓度为不低于1×106CFU/mL，得到蔬菜饮料(蔬菜饮料需在4℃下冷藏保存)。
实施例6：普通拟杆菌CCFM1152的应用
普通拟杆菌CCFM1152可用于制备胶囊制品，胶囊制品的具体制备过程如下：
(1)将实施例1获得的普通拟杆菌CCFM1152的二级纯化培养液以3％(v/v)的接种量接种到培养基中，在温度37℃下培养18h，得到菌液；将菌液离心，得到菌泥；将菌泥用pH7.2的磷酸盐缓冲液清洗2次后用脱脂乳重悬至浓度为2×1010CFU/mL，得到悬浮液；
(2)将步骤(1)制得的悬浮液添加至浓度为3％的海藻酸钠溶液中至浓度为2×109CFU/mL后，充分搅拌，使得普通拟杆菌CCFM1152的细胞均匀地分散于海藻酸钠溶液中，得到混合液；将混合液挤压到浓度为2％的氯化钙溶液中形成胶粒；待形成的胶粒静止固化30min后，过滤收集胶粒；将收集得到的胶粒进行冷冻干燥48h，得到粉剂；将粉剂装入到药用胶囊中，得到胶囊制品。
实施例7：普通拟杆菌CCFM1152的应用
普通拟杆菌CCFM1152可用于制备发酵乳，发酵乳的具体制备过程如下：
(1)将实施例1获得的普通拟杆菌CCFM1152的二级纯化培养液以3％(v/v)的接种量接种到培养基中，在温度37℃下培养18h，得到菌液；将菌液离心，得到菌泥；将菌泥用pH7.2的磷酸盐缓冲液清洗3次后用保护剂重悬至浓度为1×1010CFU/mL，得到悬浮液；将悬浮液在温度37℃下预培养60min后冻干，得到冻干粉；
其中，培养基的制备方法为：脑心浸液中加入半胱氨酸盐酸盐1g/L、氯化血红素0.01g/L和维生素K1 0.002g/L，pH为7.0；
保护剂的成分包含：100g/L脱脂奶粉、30mL/L甘油、100g/L麦芽糊精、150g/L海藻糖和10g/L L-谷氨酸钠；
(2)将冻干粉与商业干粉发酵剂保加利亚乳杆菌和商业干粉发酵剂嗜热链球菌按照质量比1:1:1的比例混合，得到发酵剂；
(3)将糖添加至鲜奶中至浓度为5％，得到混合液；将混合液在65℃、20MPa的条件下进行均质后在95℃下保温杀菌5min，得到发酵原料；将发酵原料降温至35℃后以0.03％(v/v)的接种量将步骤(2)制得的发酵剂接种至发酵原料中，于35℃下保温发酵16h，得到发酵乳；将发酵乳于42℃的条件下凝乳后，在4℃下冷藏24h进行后熟，得到发酵乳成品。
实施例8：普通拟杆菌CCFM1152的应用
普通拟杆菌CCFM1152可用于制备片剂，片剂的具体制备过程如下：
(1)将实施例1获得的普通拟杆菌CCFM1152的二级纯化培养液以3％(v/v)的接种量接种到培养基中，在温度37℃下培养18h，得到菌液；将菌液离心，得到菌泥；将菌泥用pH7.2的磷酸盐缓冲液清洗3次后用保护剂重悬至浓度为1×1010CFU/mL，得到悬浮液；将悬浮液在温度37℃下预培养60min后冻干，得到菌粉；
其中，培养基的制备方法为：脑心浸液中加入半胱氨酸盐酸盐1g/L、氯化血红素0.01g/L和维生素K1 0.002g/L，pH为7.0；
保护剂的成分包含：100g/L脱脂奶粉、30mL/L甘油、100g/L麦芽糊精、150g/L海藻糖和10g/L L-谷氨酸钠；
(2)称取步骤(1)制得的菌粉25.7重量份、淀粉55.0重量份、纤维素衍生物4.5重量份、羧甲基淀粉钠12.0重量份、滑石粉0.8重量份、蔗糖1.0重量份与水1.0重量份，得到原材料；将原材料混合，得到湿颗粒；将湿颗粒用中南制药机械厂的压片机进行压片后使用青州市益康中药机械有限公司的小型药物干燥机进行干燥，得到片剂。
虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。
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<110> 江南大学
<120> 一株能够保护肠道通透性的普通拟杆菌及其应用
<130> BAA210327A
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<170> PatentIn version 3.3
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ggaacgtatt caccgcgccg tggctgatgc gcgattacta gcgaatccag cttcgtggag 120
tcgggttgca gactccagtc cgaactgaga gaggtttttg ggattggcat ccactcgcgt 180
ggtagcggcc ctctgtaccc cccattgtaa cacgtgtgta gccccggacg taagggccgt 240
gctgatttga cgtcatcccc accttcctca catcttacga tggcagtctt gtcagagtcc 300
tcagcggaac ctgttagtaa ctgacaacaa gggttgcgct cgttatggca cttaagccga 360
cacctcacgg cacgagctga cgacaaccat gcagcacctt cacagatgcc ttgcggctta 420
cggctttcac cgtaattcat ctgcaattta agcccgggta aggttcctcg cgtatcatcg 480
aattaaacca catgttcctc cgcttgtgcg ggcccccgtc aattcctttg agtttcaccg 540
ttgccggcgt actccccagg tggaatactt aacgctttcg cttggccgct tgcagtatat 600
cgcaaacagc gagtattcat cgtttaccgt gtggactacc agggtatcta atcctgtttg 660
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agttcttcgt gatatctaag catttcaccg ctacaccacg aattccgcct gcctcaactg 780
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Claims (1)

1.普通拟杆菌(Bacteroides vulgatus)CCFM1152在制备改善溃疡性结肠炎的药物中的应用；
所述普通拟杆菌CCFM1152已于2020年11月9日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No.61279。
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