CN113115654B - 一种葡萄双砧木绿枝嫁接方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种葡萄双砧木绿枝嫁接方法，具体按照以下步骤实施：选取两株砧木，对砧木生根处理并移栽至人工温室，两株砧木相距5‑7cm，调节温室内环境，至长出砧木新稍；选取截留葡萄新稍，对葡萄新稍处理后作为接穗；将两株砧木新稍分别向邻侧切割，并将接穗的切口与两个砧木的切口接合，通过薄膜缠紧固定；控制温室温度、湿度，待愈伤组织完全形成后，拆除薄膜，移栽至大田环境；本发明的方法将原有的葡萄栽培技术中使用的“一根接穗一根砧木”改变为“一根接穗两根砧木”。在外观上，呈现出两主干汇拢成一主干的外形；在本质上，相比单砧木可用于增强已有抗性或可用于增添新的抗性。

Description

一种葡萄双砧木绿枝嫁接方法

技术领域

本发明属于葡萄栽培技术领域，具体涉及一种葡萄双砧木绿枝嫁接方法。

背景技术

葡萄由于其果品风味独特，产品附加值高，经济效益好而深受各地政府和种植者的青睐。近年来，我国葡萄种植面积已跃居世界第二位，产量稳居世界第一位。在我国农业种植结构中，葡萄种植面积也仅次于苹果、柑橘、桃、梨之后，成为农民增收致富的重要途径。然而我国地域辽阔、生态环境各异，特别是作为我国葡萄重要优生区的西北新疆、甘肃、宁夏等地区，葡萄树在生长季节通常面临干旱、低温、盐碱等多重逆境胁迫，给该地区葡萄产业的发展造成了严重影响。

嫁接是将一个植株上的枝或芽接到另一植株的枝干或根上，接口愈合，长成一株新的植株。用作嫁接的枝或芽称为接穗或接芽，承受接穗(芽)的部分称为砧木(房玉林等2010)。砧木是果树嫁接苗的基础，亲合性好，寿命长，也容易培植。嫁接要获得成功，必须形成愈伤组织，砧木形成不定根，接穗形成枝蔓，三者缺一不可。

截止目前的研究中，针对中国这种地区的逆境胁迫的问题，许多人采取砧木嫁接的方法，这种方法在一定程度上具有很不错的效果，但是砧木嫁接在葡萄中的应用，只利用了单一砧木。而根据之前的研究，不同品种砧木，通常仅对个别逆境、胁迫具有较强抗性，无法满足我国西北地区多重逆境生产的需要。

双砧木嫁接栽培技术已经在黄瓜、西瓜等一年生草本蔬菜作物上进行了研究，结果表明双砧木嫁接可以使不同砧木之间的优势互补，进而增强植株的根系生长和抗逆能力(杨怀亮等2012)。储昭胜(2011)与赵光华等(2009)研究结果均表明黄瓜双砧木嫁接增产效果比较明显，其采用双砧木双贴法进行黄瓜嫁接具有嫁接苗成活率高、植株矮壮、叶面积大、产量高等优点。陈文明等(2017)采用贴接法进行的双砧木嫁接可显著提高西瓜植株主蔓长度、茎粗，双砧木嫁接西瓜的果实单瓜质量最高，并可提高果实的可溶性糖含量、维生素C含量、番茄红素含量和游离氨基酸总量。双砧木嫁接能够综合单砧木的优势，增强嫁接西瓜生长势，显著增加嫁接西瓜单瓜质量，明显提高果实品质。因此双砧木嫁接在蔬菜作物中具有重要应用价值。然而在葡萄等果树中，双砧木嫁接技术至今仍未见研究报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种葡萄双砧木绿枝嫁接方法，解决现有葡萄嫁接中存在的抗逆性不足以及抗性单一的问题。

本发明采用的技术方案是，一种葡萄双砧木绿枝嫁接方法，具体按照以下步骤实施：

步骤1、砧木苗培育

选取两株砧木，对砧木生根处理并移栽至人工温室，两株砧木相距5-7cm，将一年生枝调整到相对位置，调节温室内环境，至长出砧木新梢；

步骤2、嫁接

选取截留葡萄新梢，对葡萄新梢处理后作为接穗；将两株砧木新梢分别向邻侧切割，选择与砧木新梢粗度接近的接穗，并将接穗的切口与两个砧木的切口接合，通过薄膜缠紧固定；

步骤3、嫁接后管理

控制温室温度、湿度，待愈伤组织完全形成后，移栽至大田环境，当年生长期结束后，至第二年萌芽前拆除薄膜。

本发明的特点还在于：

步骤1具体过程为：使用当年无毒无害且长有骨干根的砧木苗进行砧木培育，单株留芽量为3-4个，在当年4月将长势相似的两砧木根修剪为10-16厘米并用生根粉处理，移栽到温室内培养土中，两砧木相距5-7厘米，将一年生枝调整到相对位置；移栽后浇水一次，维持温度18-28℃，湿度60-75％，在砧木苗上方控制透光量为80-90％，每隔5-7d浇水一次，除草；培养两株砧木至长出新梢，且新稍长度25-35厘米，带有3-4个叶片。

用生根粉处理过程为：将两株砧木根在盛有600mgABT生根粉的泥浆盆中蘸根6-8秒。

温室内培养土包括纯泥炭：园土：蛭石：珍珠岩＝2-3：3-4：1-1.5：1-1.5。

步骤2具体过程为：截取含有两个芽的当年葡萄新稍，直径0.8-1.6厘米，于当年5月中旬采集，去除多余叶片后备用，取出截留剩余半片叶片作为接穗；将要使用的两株砧木新稍去除叶片，在新稍基部向上5-10厘米处用嫁接刀分别斜切两新稍临侧，使两株砧木的切面呈向上的V型，将接穗按砧木切口调整，在对侧从形态学上端至下端斜削成能够插入砧木切口的V字型，插紧贴合后应保证两侧贴合面分别至少有一处韧皮部完整接合，修剪接穗，保留半片叶片，伤口部位用嫁接专用膜从下至上缠紧固定，缠绕长度4-6厘米。

用嫁接刀斜切的具体方向为：切面斜向相邻与新稍生长方向呈25-35度角，长度为1.2-2.2厘米，两个切面形成V字型。

接穗顶部平剪伤口缠薄膜。

步骤3控制温室温度、湿度过程为：嫁接完成后浇水，控制温室内温度为24-26℃，湿度为60-70％。

本发明的有益效果是：

本发明一种葡萄双砧木绿枝嫁接方法，将两株砧木定植好后，待其长出新梢，再用拟作为接穗的葡萄的绿枝进行双砧木嫁接，方便嫁接操作的进行，提高嫁接的成活率。

采用双砧木双贴法的方式对葡萄进行嫁接，取代了目前普遍使用的单砧木的嫁接方式，既可用于增强葡萄植株的单一抗逆性，又可为葡萄植株增添不同的抗逆性，降低生产成本，减少人力消耗，提高植株吸收营养的能力。

附图说明

图1是本发明选用的移栽至人工温室定植示意图；

图2是本发明经培育后的双砧木示意图；

图3是本发明嫁接前去除叶片的两株砧木新稍示意图；

图4是本发明嫁接时斜切后的两株砧木示意图；

图5是本发明双砧木嫁接局部示意图；

图6是本发明嫁接方法嫁接完成示意图。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施方式对本发明进行详细说明。

本发明一种葡萄双砧木绿枝嫁接方法，具体按照以下步骤实施：

步骤1、砧木苗培育

使用当年无毒无害且长有骨干根的砧木苗进行砧木培育，单株留芽量为3-4个，在当年4月将长势相似的两砧木根修剪为16-20厘米，将两株砧木根在盛有600mgABT生根粉的泥浆盆中蘸根6-8秒，移栽到温室内培养土中，温室内培养土包括纯泥炭：园土：蛭石：珍珠岩＝2-3：3-4：1-1.5：1-1.5，两砧木相距5-7厘米，将一年生枝调整到相对位置，如图1所示；移栽后浇水一次，维持温度18-28℃，湿度60-75％，在砧木苗上方控制透光量为80-90％，每隔5-7d浇水一次，除草；培养两株砧木至长出新梢，且新稍长度25-35厘米，带有3-4个叶片，如图2所示；

步骤2、嫁接

截取含有两个芽的当年葡萄新稍，直径0.8-1.6厘米，于当年5月中旬采集，去除多余叶片后备用，取出截留剩余半片叶片作为接穗；将要使用的两株砧木新稍去除叶片，如图3所示，在新稍基部向上5-10厘米处，用嫁接刀分别斜切两新稍临侧，切面斜向相邻与新稍生长方向呈25-35度角，长度为1.2-2.2厘米，两个切面形成V字型，如图4所示，将接穗按砧木切口调整，在对侧从形态学上端至下端斜削成能够插入砧木切口的V字型，插紧贴合后应保证两侧贴合面分别至少有一处韧皮部完整接合，修剪接穗，保留半片叶片，伤口部位用嫁接专用膜从下至上缠紧固定，缠绕长度4-6厘米，如图5所示；接穗顶部平剪伤口缠薄膜。

步骤3、嫁接后管理

嫁接完成后浇水，控制温室内温度为24-26℃，湿度为60-70％，待愈伤组织完全形成后，移栽至大田环境，当年生长期结束后，至第二年萌芽前拆除薄膜，如图6所示。

实施例

1.实验设计

以无毒的5BB和贝达为双砧木按照本发明的栽培方法嫁接当年生夏黑葡萄绿枝，分为三种砧木组合：5BB+5BB、贝达+贝达、5BB+贝达。嫁接苗将进行以下三种实验，每种实验选择嫁接状态良好的三种双砧木植株各10株，同时分别以无毒的5BB和贝达为单砧木按常规单砧木嫁接方式嫁接当年生夏黑葡萄绿枝作为对照，选择嫁接状态良好的两种单砧木植株各10株，即每种胁迫处理实验50株，三种胁迫，共计150株植株。

1.1低温胁迫实验

取不同类型葡萄嫁接苗各10株，将植株放入温度0℃，相对湿度80％的恒温培养箱中培养48h，之后统计冻害指数，取葡萄苗成熟叶片分析相对电导率、H₂O₂和丙二醛含量，嫁接方式对葡萄嫁接苗抗寒性的影响见表1。

1.2盐碱胁迫实验

将中性盐NaCl、Na₂SO₄与碱性盐NaHCO₃按摩尔浓度4:5:5比例，与纯净水混合配成浓度为0.54％的盐溶液。取不同类型葡萄嫁接苗各10株，从第0d开始每隔2d向葡萄苗根系浇300mL盐溶液。在25℃，相对湿度80％的恒温培养箱中培养至第10d后统计盐害指数，取不同类型嫁接苗成熟叶片分析相对电导率、H₂O₂和丙二醛含量，嫁接方式对葡萄嫁接苗抗盐碱性的影响见表2。

1.3低温盐碱共胁迫实验

取不同类型葡萄嫁接苗各10株，从第0d开始每隔2d向葡萄苗根系浇300mL盐溶液。在25℃，相对湿度80％的恒温培养箱中培养至第6d后移至温度0℃，相对湿度80％条件下继续培养48h，之后统计胁迫指数，取不同类型嫁接苗成熟叶片分析相对电导率、H₂O₂和丙二醛含量，嫁接方式对葡萄嫁接苗抗低温与盐碱共胁迫的影响见表3。

2.各数据测定方法

2.1冻害指数

根据伤害程度按照以下5个级进行评价和数量统计：

0级：叶片正常，未受伤害；

1级：仅有少数叶片边缘有轻度的皱缩萎蔫；

2级：半数以下的叶片萎蔫死亡，但主茎未干枯；

3级：半数以上的叶片萎蔫死亡；

根据公式F(％)＝∑(冻害级值×相应冻害级植株数)/(冻害最高级值×调查总株数)×100％

2.2盐害指数

根据伤害程度按照以下5个级进行评价和数量统计：

0级：无盐害症状；

1级：1％-30％叶片的叶尖、叶缘或叶脉失绿；

2级：30％-50％叶片的叶尖、叶缘焦枯；

3级：50％以上叶片的叶尖、叶缘焦枯；

4级：枝叶枯萎、脱落直至植株死亡。

根据公式D(％)＝∑(盐害级值×相应盐害级植株数)/(碱害最高级值×调查总株数)×100％

2.3相对电导率

在叶片上用5mm直径的打孔器打取10个小圆片，然后将小圆片置于装有10mL去离子水的20mL离心管中，抽真空使小圆片完全沉没入液体中，盖好离心管盖，用封口膜封口，室温下于避光处放置24h，次日用电导仪(DDS-307型)测定其电导率，用R1表示。然后将其放置于100℃沸水浴中加热20min，待其冷却至室温后再次测定电导率，用R2表示，R0为去离子水电导率，用下列公式计算相对电导率，表征质膜相对透性。

相对电导率(％)＝(R₁-R₀)/(R₂-R₀)×100％

2.4丙二醛

将0.8g葡萄幼苗叶片置于液氮预冷过的研钵中，加入少量石英砂，置于冰浴上将其研磨成匀浆，之后加入8.0mL预冷的50mmol/L(pH 7.8)的PBS缓冲液(含有2％聚乙烯吡咯烷酮PVP，PVP现用现加)，4℃下10000r·min^-1离心20min，取1mL上清液，加入2mL硫代巴比妥酸，以1mLpH值7.8磷酸缓冲液加2mL硫代巴比妥酸作空白参比，摇匀后于沸水浴中显色15min，取出冷却后在450nm、532nm和600nm波长下分别比色，记录吸光度。

计算丙二醛浓度C_MDA＝6.45×(D₅₃₂-D₆₀₀)-0.56×D₄₅₀

MDA含量[μmol·g^-1FW]＝C_MDA(μmol·L^-1)×提取液体积(mL)/植物组织鲜重(g)

3.实验结果

表1

表2

表3

4.实施例结论

通过上述方式，本发明一种葡萄双砧木绿枝嫁接方法，从葡萄嫁接这一栽培技术本身着手，将原有的葡萄栽培技术中使用的“一根接穗一根砧木”改变为“一根接穗两根砧木”。在外观上，呈现出两主干汇拢成一主干的外形；在本质上，相比单砧木可用于增强已有抗性或可用于增添新的抗性。

Claims (8)

1.一种葡萄双砧木绿枝嫁接方法，其特征在于，具体按照以下步骤实施：

步骤1、砧木苗培育

选取两株砧木，对砧木生根处理并移栽至人工温室，两株砧木相距5-7cm，将一年生枝调整到相对位置，调节温室内环境，至长出砧木新稍；

步骤2、嫁接

选取截留葡萄新梢，对葡萄新梢处理后作为接穗；将两株砧木新梢分别向邻侧切割，选择与砧木新梢粗度接近的接穗，并将接穗的切口与两个砧木的切口接合，通过薄膜缠紧固定；

步骤3、嫁接后管理

控制温室温度、湿度，待愈伤组织完全形成后，移栽至大田环境，当年生长期结束后，至第二年萌芽前拆除薄膜。

2.根据权利要求1所述一种葡萄双砧木绿枝嫁接方法，其特征在于，步骤1具体过程为：使用当年无毒无害且长有骨干根的砧木苗进行砧木培育，单株留芽量为3-4个，在当年4月将长势相似的两砧木根修剪为16-20厘米并用生根粉处理，移栽到温室内培养土中，两砧木相距5-7厘米，将一年生枝调整到相对位置；移栽后浇水一次，维持温度18-28℃，湿度60-75％，在砧木苗上方控制透光量为80-90％，每隔5-7d浇水一次，除草；培养两株砧木至长出新梢，且新稍长度25-35厘米，带有3-4个叶片。

3.根据权利要求2所述一种葡萄双砧木绿枝嫁接方法，其特征在于，所述用生根粉处理过程为：将两株砧木根在盛有600mgABT生根粉的泥浆盆中蘸根6-8秒。

4.根据权利要求2所述一种葡萄双砧木绿枝嫁接方法，其特征在于，所述温室内培养土包括纯泥炭：园土：蛭石：珍珠岩＝2-3：3-4：1-1.5：1-1.5。

5.根据权利要求1所述一种葡萄双砧木绿枝嫁接方法，其特征在于，步骤2具体过程为：截取含有两个芽的当年葡萄新稍，直径0.8-1.6厘米，于当年5月中旬采集，去除多余叶片后备用，取出截留剩余半片叶片作为接穗；将要使用的两株砧木新稍去除叶片，在新稍基部向上5-10厘米处用嫁接刀分别斜切两新稍临侧，使两株砧木的切面呈向上的V型，将接穗按砧木切口调整，在对侧从形态学上端至下端斜削成能够插入砧木切口的V字型，插紧贴合后应保证两侧贴合面分别至少有一处韧皮部完整接合，修剪接穗，保留半片叶片，伤口部位用嫁接专用膜从下至上缠紧固定，缠绕长度4-6厘米。

6.根据权利要求5所述一种葡萄双砧木绿枝嫁接方法，其特征在于，所述用嫁接刀斜切的具体方向为：切面斜向相邻与新稍生长方向呈25-35度角，长度为1.2-2.2厘米，两个切面形成V字型。

7.根据权利要求5所述一种葡萄双砧木绿枝嫁接方法，其特征在于，所述接穗顶部平剪伤口缠薄膜。

8.根据权利要求1所述一种葡萄双砧木绿枝嫁接方法，其特征在于，步骤3所述控制温室温度、湿度过程为：嫁接完成后浇水，控制温室内温度为24-26℃，湿度为60-70％。