CN113080309B - 一种具有抑菌和抗病毒功能的枯草芽孢杆菌及其应用 - Google Patents
一种具有抑菌和抗病毒功能的枯草芽孢杆菌及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113080309B CN113080309B CN202110456559.5A CN202110456559A CN113080309B CN 113080309 B CN113080309 B CN 113080309B CN 202110456559 A CN202110456559 A CN 202110456559A CN 113080309 B CN113080309 B CN 113080309B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bacillus subtilis
- bacillus
- lactobacillus
- strain
- feed
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 title claims abstract description 79
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 title claims abstract description 76
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 title description 7
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 title description 3
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 29
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims description 13
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 11
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 claims description 11
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 7
- 241000194031 Enterococcus faecium Species 0.000 claims description 6
- 241000194108 Bacillus licheniformis Species 0.000 claims description 5
- 241000194032 Enterococcus faecalis Species 0.000 claims description 4
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 claims description 4
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 claims description 4
- 241000218588 Lactobacillus rhamnosus Species 0.000 claims description 4
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 claims description 4
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 4
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 claims description 4
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 claims description 4
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 4
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 4
- 241000193749 Bacillus coagulans Species 0.000 claims description 3
- 241000194103 Bacillus pumilus Species 0.000 claims description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 3
- 235000013958 Lactobacillus casei Nutrition 0.000 claims description 3
- 229940054340 bacillus coagulans Drugs 0.000 claims description 3
- 229940017800 lactobacillus casei Drugs 0.000 claims description 3
- 241000193744 Bacillus amyloliquefaciens Species 0.000 claims description 2
- 241000193171 Clostridium butyricum Species 0.000 claims description 2
- 229940032049 enterococcus faecalis Drugs 0.000 claims description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 claims 1
- 241001135549 Porcine epidemic diarrhea virus Species 0.000 abstract description 21
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 abstract description 13
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 abstract description 9
- 244000144972 livestock Species 0.000 abstract description 9
- 238000009395 breeding Methods 0.000 abstract description 6
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 abstract description 6
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 6
- 244000144977 poultry Species 0.000 abstract description 6
- 238000012216 screening Methods 0.000 abstract description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 20
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 19
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 14
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 13
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 12
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 11
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 11
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 10
- 210000003501 vero cell Anatomy 0.000 description 10
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 9
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 7
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 7
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 7
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 6
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 5
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 5
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 4
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 4
- 230000006799 invasive growth in response to glucose limitation Effects 0.000 description 4
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 4
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 229940079919 digestives enzyme preparation Drugs 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 2
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 2
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 2
- 241000606125 Bacteroides Species 0.000 description 2
- 241001608472 Bifidobacterium longum Species 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 238000009631 Broth culture Methods 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 description 2
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 description 2
- 241001147746 Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis Species 0.000 description 2
- 241000186840 Lactobacillus fermentum Species 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 241000186429 Propionibacterium Species 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 2
- 235000014897 Streptococcus lactis Nutrition 0.000 description 2
- 244000057717 Streptococcus lactis Species 0.000 description 2
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 2
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 229940009291 bifidobacterium longum Drugs 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 235000021050 feed intake Nutrition 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 2
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-2,4-dioxo-1,3-oxazolidine-3-carboxamide Chemical compound CC1(C)OC(=O)N(C(N)=O)C1=O QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 1
- 240000006439 Aspergillus oryzae Species 0.000 description 1
- 235000002247 Aspergillus oryzae Nutrition 0.000 description 1
- 241000193422 Bacillus lentus Species 0.000 description 1
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 1
- 241000186018 Bifidobacterium adolescentis Species 0.000 description 1
- 241001134770 Bifidobacterium animalis Species 0.000 description 1
- 241000901050 Bifidobacterium animalis subsp. lactis Species 0.000 description 1
- 241000186016 Bifidobacterium bifidum Species 0.000 description 1
- 241000186015 Bifidobacterium longum subsp. infantis Species 0.000 description 1
- 241001468229 Bifidobacterium thermophilum Species 0.000 description 1
- 208000003322 Coinfection Diseases 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000481005 Escherichia coli O1 Species 0.000 description 1
- 241001455504 Escherichia coli O2 Species 0.000 description 1
- 241000059485 Escherichia coli O78 Species 0.000 description 1
- 208000004930 Fatty Liver Diseases 0.000 description 1
- 241000605896 Fibrobacter succinogenes Species 0.000 description 1
- 206010019708 Hepatic steatosis Diseases 0.000 description 1
- 240000001929 Lactobacillus brevis Species 0.000 description 1
- 235000013957 Lactobacillus brevis Nutrition 0.000 description 1
- 244000199885 Lactobacillus bulgaricus Species 0.000 description 1
- 235000013960 Lactobacillus bulgaricus Nutrition 0.000 description 1
- 244000199866 Lactobacillus casei Species 0.000 description 1
- 241001134659 Lactobacillus curvatus Species 0.000 description 1
- 241000186673 Lactobacillus delbrueckii Species 0.000 description 1
- 241000268611 Lactobacillus faecis Species 0.000 description 1
- 240000002605 Lactobacillus helveticus Species 0.000 description 1
- 235000013967 Lactobacillus helveticus Nutrition 0.000 description 1
- 241000186604 Lactobacillus reuteri Species 0.000 description 1
- 241000192130 Leuconostoc mesenteroides Species 0.000 description 1
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 1
- 241000192001 Pediococcus Species 0.000 description 1
- 241000191998 Pediococcus acidilactici Species 0.000 description 1
- 241000191996 Pediococcus pentosaceus Species 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 101710192597 Protein map Proteins 0.000 description 1
- 241000190950 Rhodopseudomonas palustris Species 0.000 description 1
- 241000606008 Ruminobacter amylophilus Species 0.000 description 1
- 241000235342 Saccharomycetes Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241000194046 Streptococcus intermedius Species 0.000 description 1
- 241000194019 Streptococcus mutans Species 0.000 description 1
- 241000193987 Streptococcus sobrinus Species 0.000 description 1
- 241000194020 Streptococcus thermophilus Species 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000003975 animal breeding Methods 0.000 description 1
- 230000036528 appetite Effects 0.000 description 1
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229940118852 bifidobacterium animalis Drugs 0.000 description 1
- 229940002008 bifidobacterium bifidum Drugs 0.000 description 1
- 229940004120 bifidobacterium infantis Drugs 0.000 description 1
- 229940009289 bifidobacterium lactis Drugs 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000010227 cup method (microbiological evaluation) Methods 0.000 description 1
- 235000021051 daily weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 description 1
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 description 1
- 235000013345 egg yolk Nutrition 0.000 description 1
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000000369 enteropathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013401 experimental design Methods 0.000 description 1
- 208000010706 fatty liver disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 230000008642 heat stress Effects 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229940004208 lactobacillus bulgaricus Drugs 0.000 description 1
- 229940012969 lactobacillus fermentum Drugs 0.000 description 1
- 229940054346 lactobacillus helveticus Drugs 0.000 description 1
- 229940001882 lactobacillus reuteri Drugs 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 230000000474 nursing effect Effects 0.000 description 1
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 235000013613 poultry product Nutrition 0.000 description 1
- 238000012257 pre-denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 231100000240 steatosis hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
- A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
- A23K10/18—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/30—Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/163—Sugars; Polysaccharides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/189—Enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
- A23K50/30—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for swines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
- A23K50/60—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for weanlings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/125—Casei
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/169—Plantarum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/175—Rhamnosus
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
- Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish
- Y02A40/818—Alternative feeds for fish, e.g. in aquacultures
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Physiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Birds (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明涉及功能微生物筛选与应用技术领域,具体提供了一种枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),并提供了该菌株在畜禽养殖中的应用。所述枯草芽孢杆菌已于2020年11月16日保藏于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M2020742。该菌株能有效防控常见肠道致病菌和猪流行性腹泻病毒(PEDV),提高饲料利用率,应用前景广泛。
Description
技术领域
本发明涉及功能微生物筛选与应用技术领域,具体涉及一种具有抑菌和抗病毒功能的枯草芽孢杆菌及其应用。
背景技术
目前饲料工业中应用最广、需求量最大的绿色饲料添加剂是生物酶制剂和微生态制剂。微生态制剂又名益生素、促生素、生菌剂以及活菌剂,是从自然界或动物上分离、鉴定或生物组建的有益微生物,经培养、发酵、干燥、加工等特殊工艺制成。微生态制剂能有效促进动物体调节肠道微生态平衡,增强机体免疫功能,并能高效转化饲料,改善生产性能。
由多种益生菌复合配制而成复合微生态制剂具有促进生长、调整正常菌群平衡、提高免疫力、提高饲料转化率等多种功效。1989年美国食品及药品管理局公布了可以用作饲料添加剂的微生物种类,共有如下42种:米曲霉、黑曲霉、凝结芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、嗜淀粉拟杆菌、多毛拟杆菌、栖瘤胃拟杆菌、产琥珀酸拟杆菌、青春双岐杆菌、动物双岐杆菌、两歧双岐杆菌、婴儿双岐杆菌、长双岐杆菌、嗜热双岐杆菌、嗜酸乳杆菌、短乳杆菌、保加利亚乳杆菌、干酪乳杆菌、纤维二糖乳杆菌、弯曲乳杆菌、德氏乳杆菌、发酵乳杆菌、瑞士乳杆菌、乳酸乳杆菌、胚芽乳杆菌、罗氏乳杆菌、肠膜明串珠菌、乳酸片球菌、啤酒片球菌、戊糖片球菌、费氏丙酸杆菌、谢氏丙酸杆菌、酿酒酵母、乳脂链球菌、双醋酸乳链球菌、粪链球菌、中链球菌、乳链球菌、嗜热链球菌。目前,应用于微生态制剂的菌种主要有乳酸杆菌、链球菌、双歧杆菌、酵母菌、某些芽孢杆菌等。
我国开始饲用微生态制剂的研究起步于20世纪70年代。1989年我国农业部公布了可以直接饲喂动物的饲料级微生物添加剂菌种12个,即干酪乳杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、粪链球菌、乳链球菌、枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、乳酸片菌、沼泽红假单孢菌、啤酒酵母、产假丝酵母、曲霉。2001年又公布地衣芽孢杆菌为可直接使用的菌种。2013年公布的《饲料添加剂品种目录(2013)》中涉及动物养殖与饲料的微生物添加剂已增至30余种。
针对饲料微生态制品的研究也有大量公开报道,例如,齐情等观察微生态制剂对绿壳蛋鸡生产性能的作用效果,发现微生态制剂可以提高蛋鸡的产蛋率及蛋清浓度,蛋黄颜色没有明显变化;可以提高蛋鸡对粗纤维的分解能力;能够防治绿壳蛋鸡脂肪肝的发生。陈家祥等在肉鸡日粮中添加地衣芽孢杆菌后,结果发现肉鸡日增重显著提高。戴荣国报道,通过对断奶仔猪饲喂酵母菌、乳酸菌及芽孢杆菌复合微生态制剂,能在不同程度上对料重比、平均日增重及腹泻率有所改善。张红艳等研究报道,液体复合微生态制剂可提高断奶仔猪对饲料的利用率,平均日增重较对照组提高41.12%~51.78%。张双等试验结果说明,日粮中添加微生态制剂(100g/头)对奶牛热应激的预防和调节效果明显。高堂亮等研究微生态制剂对肉牛生长性能和血清生化指标的影响,分别饲喂全混合日粮和微生态制剂,结果表明,与对照组相比,平均日增重、平均日采食量显著提高(P<0.05),料重比显著降低(P<0.05),对血清生化指标没有显著影响(P>0.05)。
随着养殖业规模的扩大,饲料工业得到了迅猛发展。抗生素的滥用引起动物内源性感染或继发二次感染,耐药菌株的产生,畜禽细胞免疫、体液免疫功能的下降,动物肠道菌群失调以及它们在畜禽产品中的残留等等。基于这些原因,很多国家反对将抗生素过量使用,甚至通过立法对愈来愈多的药物品种加以限制。随着人民对食品安全及畜牧产业的重视程度越来越高,微生态制剂势必会为我国畜牧行业带来良好的经济效益及广阔的发展前景。
发明内容
本发明为解决现有技术问题,提供了一种枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),并提供了该菌株在畜禽养殖中的应用。所述枯草芽孢杆菌能有效防控常见肠道致病菌和猪流行性腹泻病毒(PEDV),提高饲料利用率,应用前景广泛。
本发明一方面提供了一株枯草芽孢杆菌DB243(Bacillus subtilis DB243),已于2020年11月16日保藏于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCCNO:M2020742。
本发明另一方面提供了一种微生物制剂,包含上述枯草芽孢杆菌DB243。
所述微生物制剂还包含地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌,凝结芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、丁酸梭菌、屎肠球菌、乳酸菌、粪肠球菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌中的任意一种或多种的组合。
所述微生物制剂为菌粉。
所述微生物制剂中枯草芽孢杆菌DB243的活菌量不低于109CFU/g。
本发明还提供了一种饲料添加剂,包含上述微生物制剂。
所述饲料添加剂还包含酶制剂、中草药、乳化剂、多糖中的任意一种或多种的组合。
本发明还提供了所述饲料添加剂在畜禽养殖中的应用。
本发明所述枯草芽孢杆菌DB243对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌等多种病原菌均具有显著的抑菌效果,尤其是对K88大肠杆菌、O78大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌效果最强,抑菌圈直径达到23mm,效果非常显著。该菌株还能有效抑制猪流行性腹泻病毒的复制,具有较强的抗病毒能力,与对照组相比,接种枯草芽孢杆菌DB243上清液的实验组Vero细胞的CT值提高了93.8%,病毒含量显著低于对照组。
枯草芽孢杆菌DB243对人工胃肠液有很强的耐受性,在人工胃液中1h和2h后的存活率均为100%;在人工肠液中1h和2h后的存活率也均为100%。该菌株能够显著提高饲料利用率,改善仔猪生产性能,并能有效预防仔猪腹泻,提高仔猪的成活率。与对照组相比,饲喂枯草芽孢杆菌DB243菌粉的实验组仔猪的平均日增重提高了22.5%,料肉比降低了15.4%;实验组仔猪的腹泻率和死淘率分别降低了59.9%和76.0%。
本发明提供的枯草芽孢杆菌DB243可单独或与其他微生物、酶制剂、中草药、乳化剂、多糖类进行组合,作为饲料添加剂广泛应用于畜禽养殖,效果显著。
说明书附图
图1为DB243菌株的菌落形态图;
图2 为DB243菌株蛋白质谱峰图。
具体实施方式
下面结合具体实施例进一步阐述本发明。对于实施例中所用到的具体方法或材料,本领域技术人员可以在本发明技术思路的基础上,根据已有的技术进行常规的替换选择,而不仅限于本发明实施例的具体记载。
本发明所选用的设备和试剂可以选自市售任意一种。
实施例1 菌株的分离与筛选
1、样品来源:山东省潍坊市高密养殖场猪的肠道粪便。
2、菌株分离与筛选:
称取1g猪肠道粪便,置于9mL无菌生理盐水中,得到菌悬液;将菌悬液置于80℃水浴锅中,处理10min,取出,迅速冷却;将处理过菌悬液以10倍梯度稀释至合适浓度,取100uL于营养琼脂平板上,涂抹均匀,37℃培养16-24h。挑取营养琼脂平板上已培养好的不同单菌落,进一步划线2次,挑取单菌落进行纯化培养。申请人挑选其中的5株菌,分别命名为A,B,C,D,E。
将5株菌株通过牛津杯法对大肠杆菌(K88、O1、O2、O78)进行平板抑菌试验;将vero细胞传代至96孔细胞培养板中,将5株菌液上清过滤器处理后,与猪流行性腹泻病毒等体积混合后接种至长满单层的细胞培养板中,孵育90分钟后弃去,换维持液继续培养24小时,冻融两次收毒后进行CT值的测定。具体结果见表1。
CT值的含义是每个反应管内的荧光信号到达设定的阈值时所经历的循环数,病毒含量越多,荧光到达域值的循环数越少,即CT值越小,相反病毒含量越低,CT值越大。
表1 不同菌株抑菌圈及猪流行性腹泻病毒CT值测定结果
菌株 | K88 | O1 | O2 | O78 | 猪流行性腹泻病毒CT值 |
A | 17.9mm | 19.6mm | 19.6mm | 20.3mm | 31.6 |
B | 21.6mm | 20.5mm | 19.6mm | 18.5mm | 27.5 |
C | 22.6mm | 21.2mm | 22.3mm | 23.4mm | 32.08 |
D | 17.8mm | 17.3mm | 19.6mm | 18.5mm | 26.3 |
E | 19.6mm | 19.6mm | 17.5mm | 19.6mm | 28.7 |
从表1的结果可以看出,本发明筛选获得的C菌株的抗病毒效果最好,猪流行性腹泻病毒的含量最低(CT值最高);同时,C菌株对大肠杆菌也具有较好的抑菌功效。
申请人将C菌株命名为DB243,并对其作进一步评价。
实施例2 菌株的鉴定
1、菌落形态鉴定
DB243菌株的菌落形态如图1所示:菌落呈微黄色,表面粗糙不透明,无粘液。
、16S rRNA分子鉴定
采用试剂盒提取菌株DB243的DNA。利用引物对其16S rRNA进行扩增。 PCR体系包括:0.7μl 27F,0.7μl 1492R,4μl模板DNA,17.5μl SuperMiX 和12.1μl 水。PCR反应条件设置为:(1)94℃ 5min;(2)94℃预变性30s;(3)55℃ 30s;(4)72℃ 1min;执行步骤(2)至(4)35循环;(5)72℃ 10min。PCR产物经1%的琼脂糖凝胶电泳检测并测序得到该菌株16S rRNA序列。经Blast比对鉴定结果为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。
、MALDI-TOF-MS蛋白质谱鉴定
取少量DB243单菌落以薄膜的形式涂布于靶板上;加1μL质谱样本预处理试剂盒中的裂解液,室温下自然晾干;加1μL质谱样本预处理试剂盒中的基质溶液覆盖样品,室温下自然晾干;将样品靶放入质谱仪进行鉴定。结果如图2所示,经与蛋白质图谱库中标准菌株比对鉴定结果为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。
综上,利用16S rRNA测序、MALDI-TOF-MS蛋白质谱等分子生物学手段对菌株DB243进行鉴定,鉴定结果一致。再结合菌株DB243的菌落形态特征,申请人确定该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),命名为枯草芽孢杆菌DB243(Bacillus subtilis DB243)。
申请人已于2020年11月16日将上述枯草芽孢杆菌DB243(Bacillus subtilisDB243)保藏于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC M2020742。
实施例3枯草芽孢杆菌DB243的抑菌能力
1、抑菌能力评价
将枯草芽孢杆菌DB243先在平板上培养,将培养好的枯草芽孢杆菌DB243取1接种环接种到营养肉汤培养基中,37 ℃,220r/min培养14h,制备成供试菌液,菌量为108~109CFU/ml备用。
2、病原菌的准备
将收集到的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌等病原菌甘油管或斜面接种于营养肉汤培养基中,37℃,220r/min 培养 16~18h后备用。
取无菌平皿,倾注无菌营养琼脂培养基 18~20mL,使其在平皿内均匀摊布,放置水平台面上使凝固,作为底层,将平板倒置平均划分区域并标记待添加物。另取适量无菌半固体营养琼脂培养基(琼脂含量为 1%),放冷至 48~50 ℃,每 50~100mL 培养基加入病原菌菌悬液 1~2mL,在每个平皿中分别加入5mL半固体营养琼脂培养基,使其在底层上均匀摊布,作为菌层。放置在水平台上冷却后,在每 1 平皿中以等距离均匀安置牛津杯 4~6个。每个双层平皿中的牛津杯中分别滴装扩培好的枯草芽孢杆菌DB243菌液0.2mL,37℃培养24h后,测量各抑菌圈直径,枯草芽孢杆菌DB243对6种病原菌的抑菌效果如表2所示。
表2 枯草芽孢杆菌DB243对不同病原菌的抑菌效果
病原菌 | 抑菌圈直径 mm |
大肠杆菌K88 | 23±1.0 |
大肠杆菌O1 | 21±1.0 |
大肠杆菌O2 | 21±1.0 |
大肠杆菌O78 | 23±1.0 |
金黄色葡萄球菌 | 23±1.0 |
沙门氏菌 | 22±1.0 |
从表2的结果可以看出,本发明筛选到的枯草芽孢杆菌DB243对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌等多种病原菌均具有显著的抑菌效果,尤其是对K88大肠杆菌、O78大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌效果最强,抑菌圈直径达到23mm,效果非常显著。
实施例4 枯草芽孢杆菌DB243抗猪流行性腹泻病毒能力的评价
1、供试菌液离心液的制备
将枯草芽孢杆菌DB243取1接种环接种到LB培养基中,37 ℃,220r/min培养48h,镜检成孢率在90%以上,10000r/min离心5分钟,将DB243离心液过0.22μm滤器备用。
2、Vero细胞96孔板的制备
将长势良好的T25瓶的Vero细胞用胰酶消化后,经含10%胎牛血清的DMEM吹散后接种到96孔细胞培养板中,37℃ 5%CO2培养箱中培养24h。
3、枯草芽孢杆菌DB243抗猪流行性腹泻病毒能力的评价
将猪流行性腹泻病毒种毒用PBS稀释成100 TCID50/0.1 mL,与枯草芽孢杆菌DB243离心液等体积混合后,取200μL加入到长满vero细胞的96孔细胞板中,同时设立猪流行性腹泻病毒与无菌水作为病毒对照组,置于37℃ 5%CO2培养箱中孵育90min弃去,用PBS清洗后,换1%胎牛血清的DMEM维持液,置于37℃ 5% CO2培养箱中培养24h。反复冻融两次后,进行收毒,用针对猪流行性腹泻病毒(PEDV)的荧光定量PCR试剂盒进行CT值的测定。
CT值的含义是每个反应管内的荧光信号到达设定的阈值时所经历的循环数,病毒含量越多,荧光到达域值的循环数越少,即CT值越小,相反病毒含量越低,CT值越大。
表3 枯草芽孢杆菌DB243抗猪流行性腹泻病毒能力的评价
组别 | 接种样品 | 接种细胞 | 接种条件 | CT值 |
实验组 | 菌液上清+猪流行性腹泻病毒 | Vero细胞 | 孵育90 min | 32.07 |
对照组 | 无菌水+猪流行性腹泻病毒 | Vero细胞 | 孵育90 min | 16.55 |
从表3的结果可以看出,与对照组相比,接种枯草芽孢杆菌DB243上清液的实验组Vero细胞的CT值提高了93.8%,说明实验组Vero细胞中病毒含量显著低于对照组。从而证实,本发明筛选到的枯草芽孢杆菌DB243能够有效抑制猪流行性腹泻病毒的复制,具有较强的抗病毒能力。
实施例4枯草芽孢杆菌DB243产酶能力评价
1、供试菌液的制备
将枯草芽孢杆菌DB243先在平板上培养,将培养好的枯草芽孢杆菌DB243取1接种环接种到LB培养基中,37 ℃,220r/min培养14h,制备成供试菌液备用。
2、枯草芽孢杆菌 DB243产淀粉酶能力评价
将培养好的枯草芽孢杆菌 DB243的菌液接种到含有淀粉的琼脂培养基上,37℃培养48h,可以看到菌株DB243周围有透明圈产生,透明圈直径为21 mm,枯草芽孢杆菌 DB243可以产生一定的淀粉酶。
3、枯草芽孢杆菌 DB243产蛋白酶能力评价
将培养好的枯草芽孢杆菌 DB243的菌液接种到含有脱脂奶粉的琼脂培养基上,37℃培养48h,可以看到菌株DB243周围有透明圈产生,透明圈直径为22 mm,枯草芽孢杆菌DB243可以产生一定的蛋白酶。
实施例5 枯草芽孢杆菌DB243对人工胃液、肠液的耐受性测试
1、供试菌液的制备
将枯草芽孢杆菌DB243先在平板上培养,将培养好的枯草芽孢杆菌 DB243取1接种环接种到LB培养基中,37 ℃,220r/min培养14h,分装于试管中,做为供试菌液。
2、胃液、肠液耐受性测定
取一个含供试菌试管用盐酸溶液调整pH为2.5,加入胃蛋白酶使其终浓度为1%,模拟人工胃液;取一个含供试菌试管调整pH为7.2,加入胰蛋白酶使其终浓度为1%,模拟人工肠液。37℃震荡培养,分别于1h和2h后取样,10倍比稀释后进行菌落计数,同时设立正常对照组,计算存活率(%)。
结果显示,本发明提供的枯草芽孢杆菌DB234在人工胃液中1h和2h后的存活率均为100%;在人工肠液中1h和2h后的存活率也均为100%。从而表明枯草芽孢杆菌DB243对人工胃肠液有很强的耐受性。
实施例6枯草芽孢杆菌DB243对保育仔猪生长性能及腹泻率的影响
1、试验地点:山东德州养殖场。
2、试验设计:试验选择生长情况正常、公母比例相同、体重接近、食欲良好的30日龄健康断奶仔猪120头,按照每组60头分为实验组与对照组,对照组饲喂基础日粮,实验组在基础日粮的基础上按照2公斤/吨添加枯草芽孢杆菌DB243菌粉(109CFU/g),试验周期为20天,试验开始及结束清晨进行空腹称重,记录开始和期末的采食量,进行日增重、料肉比的计算,统计仔猪换料后仔猪腹泻的数量,计算腹泻率及死淘率。具体结果见表4。
3、试验结果
表4 枯草芽孢杆菌DB243对仔猪生产性能的影响
分组 | 平均日增重(g) | 料肉比 | 腹泻率 | 死淘率 |
对照组 | 492.7 | 1.69 | 8.33% | 6.67% |
实验组 | 603.6 | 1.43 | 3.34% | 1.6% |
从表4的数据可以看出,与对照组相比,饲喂枯草芽孢杆菌DB243菌粉的实验组仔猪的平均日增重提高了22.5%,料肉比降低了15.4%。从而说明枯草芽孢杆菌DB243能够显著提高饲料利用率,改善仔猪的生产性能。
与对照组相比,饲喂枯草芽孢杆菌DB243菌粉的实验组仔猪的腹泻率和死淘率分别降低了59.9%和76.0%。从而说明枯草芽孢杆菌DB243能有效预防仔猪腹泻,提高仔猪的成活率。
综上所述,本发明提供的枯草芽孢杆菌DB243能有效防控大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌等常见肠道致病菌以及猪流行性腹泻病毒(PEDV),同时能够促进消化,提高饲料利用率,进而提高养殖动物的生产性能。
枯草芽孢杆菌DB243可单独或与其他微生物、酶制剂、中草药、乳化剂、多糖类进行组合,作为饲料添加剂广泛应用于畜禽养殖,效果显著。
序列表
<110> 山东蔚蓝生物科技有限公司
山东康地恩生物科技有限公司
<120> 一种具有抑菌和抗病毒功能的枯草芽孢杆菌及其应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1438
<212> DNA
<213> 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)
<400> 1
caatcatctg tcccaccttc ggcggctggc tccataaagg ttacctcacc gacttcgggt 60
gttacaaact ctcgtggtgt gacgggcggt gtgtacaagg cccgggaacg tattcaccgc 120
ggcatgctga tccgcgatta ctagcgattc cagcttcacg cagtcgagtt gcagactgcg 180
atccgaactg agaacagatt tgtgggattg gcttaacctc gcggtttcgc tgccctttgt 240
tctgtccatt gtagcacgtg tgtagcccag gtcataaggg gcatgatgat ttgacgtcat 300
ccccaccttc ctccggtttg tcaccggcag tcaccttaga gtgcccaact gaatgctggc 360
aactaagatc aagggttgcg ctcgttgcgg gacttaaccc aacatctcac gacacgagct 420
gacgacaacc atgcaccacc tgtcactctg cccccgaagg ggacgtccta tctctaggat 480
tgtcagagga tgtcaagacc tggtaaggtt cttcgcgttg cttcgaatta aaccacatgc 540
tccaccgctt gtgcgggccc ccgtcaattc ctttgagttt cagtcttgcg accgtactcc 600
ccaggcggag tgcttaatgc gttagctgca gcactaaggg gcggaaaccc cctaacactt 660
agcactcatc gtttacggcg tggactacca gggtatctaa tcctgttcgc tccccacgct 720
ttcgctcctc agcgtcagtt acagaccaga gagtcgcctt cgccactggt gttcctccac 780
atctctacgc atttcaccgc tacacgtgga attccactct cctcttctgc actcaagttc 840
cccagtttcc aatgaccctc cccggttgag ccgggggctt tcacatcaga cttaagaaac 900
cgcctgcgag ccctttacgc ccaataattc cggacaacgc ttgccaccta cgtattaccg 960
cggctgctgg cacgtagtta gccgtggctt tctggttagg taccgtcaag gtgccgccct 1020
atttgaacgg cacttgttct tccctaacaa cagagcttta cgatccgaaa accttcatca 1080
ctcacgcggc gttgctccgt cagactttcg tccattgcgg aagattccct actgctgcct 1140
cccgtaggag tctgggccgt gtctcagtcc cagtgtggcc gatcaccctc tcaggtcggc 1200
tacgcatcgt cgccttggtg agccgttacc tcaccaacta gctaatgcgc cgcgggtcca 1260
tctgtaagtg gtagccgaag ccacctttta tgtctgaacc atgcggttca gacaaccatc 1320
cggtattagc cccggtttcc cggagttatc ccagtcttac aggcaggtta cccacgtgtt 1380
actcacccgt ccgccgctaa catcagggag caagctccca tctgtccgct cgacttgc 1438
Claims (7)
1.一株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),其特征在于,所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为CCTCC NO:M2020742。
2.一种微生物制剂,其特征在于,所述的微生物制剂包含权利要求1所述的枯草芽孢杆菌。
3.如权利要求2所述的微生物制剂,其特征在于,所述的微生物制剂还包含地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌,凝结芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、丁酸梭菌、屎肠球菌、粪肠球菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌中的任意一种或多种的组合。
4.如权利要求2或3所述的微生物制剂,其特征在于,所述的微生物制剂为菌粉。
5.如权利要求4所述的微生物制剂,其特征在于,所述的微生物制剂中枯草芽孢杆菌的活菌量不低于109CFU/g。
6.一种饲料添加剂,其特征在于,所述的饲料添加剂包含权利要求2-5任一所述的微生物制剂。
7.如权利要求6所述的饲料添加剂,其特征在于,所述的饲料添加剂还包含酶制剂、中草药、乳化剂、多糖中的任意一种或多种的组合。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110456559.5A CN113080309B (zh) | 2021-04-27 | 2021-04-27 | 一种具有抑菌和抗病毒功能的枯草芽孢杆菌及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110456559.5A CN113080309B (zh) | 2021-04-27 | 2021-04-27 | 一种具有抑菌和抗病毒功能的枯草芽孢杆菌及其应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN113080309A CN113080309A (zh) | 2021-07-09 |
CN113080309B true CN113080309B (zh) | 2022-08-09 |
Family
ID=76680122
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202110456559.5A Active CN113080309B (zh) | 2021-04-27 | 2021-04-27 | 一种具有抑菌和抗病毒功能的枯草芽孢杆菌及其应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN113080309B (zh) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN114277061B (zh) * | 2021-09-26 | 2023-10-31 | 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 | 一种发酵辣木叶的制备方法及其在水产养殖中的应用 |
CN114752528B (zh) * | 2022-04-26 | 2023-04-07 | 华中农业大学 | 枯草芽孢杆菌zf-1及其在抑制非洲猪瘟病毒中的应用 |
CN115975870A (zh) * | 2022-11-23 | 2023-04-18 | 佛山科学技术学院 | 一株具有抗猪流行性腹泻病毒功能的屎肠球菌及其应用 |
CN116987612B (zh) * | 2023-03-27 | 2024-03-08 | 吉林农业大学 | 一种耐盐芽孢杆菌sw207及其应用 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101638627A (zh) * | 2009-09-10 | 2010-02-03 | 惠飞 | 一株枯草芽孢杆菌及其在生物饲料添加剂中的应用 |
CN103555640A (zh) * | 2013-11-18 | 2014-02-05 | 山东蔚蓝生物科技有限公司 | 一种枯草芽孢杆菌及其在畜禽养殖中的应用 |
KR20140128870A (ko) * | 2013-04-29 | 2014-11-06 | 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단 | 유해 미생물에 대해 항균 활성을 갖는 바실러스 서브틸리스 rx7 균주 및 이의 용도 |
CN109161509A (zh) * | 2018-10-10 | 2019-01-08 | 中国农业科学院兰州兽医研究所 | 一株能防治牛羊腹泻病的菌株 |
CN112680388A (zh) * | 2021-03-15 | 2021-04-20 | 南京农业大学 | 一株定植于猪鼻腔的枯草芽孢杆菌及其抗病毒活性的应用 |
-
2021
- 2021-04-27 CN CN202110456559.5A patent/CN113080309B/zh active Active
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101638627A (zh) * | 2009-09-10 | 2010-02-03 | 惠飞 | 一株枯草芽孢杆菌及其在生物饲料添加剂中的应用 |
KR20140128870A (ko) * | 2013-04-29 | 2014-11-06 | 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단 | 유해 미생물에 대해 항균 활성을 갖는 바실러스 서브틸리스 rx7 균주 및 이의 용도 |
CN103555640A (zh) * | 2013-11-18 | 2014-02-05 | 山东蔚蓝生物科技有限公司 | 一种枯草芽孢杆菌及其在畜禽养殖中的应用 |
CN109161509A (zh) * | 2018-10-10 | 2019-01-08 | 中国农业科学院兰州兽医研究所 | 一株能防治牛羊腹泻病的菌株 |
CN112680388A (zh) * | 2021-03-15 | 2021-04-20 | 南京农业大学 | 一株定植于猪鼻腔的枯草芽孢杆菌及其抗病毒活性的应用 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Surfactin Inhibits Membrane Fusion during Invasion of Epithelial Cells by Enveloped Viruses;Lvfeng Yuan等;《Journal of Virology》;20181130;第92卷(第21期);第1-19页 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN113080309A (zh) | 2021-07-09 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN113080309B (zh) | 一种具有抑菌和抗病毒功能的枯草芽孢杆菌及其应用 | |
Kosin et al. | Microbial and processing criteria for production of probiotics: a review | |
CN112011481B (zh) | 一株防治畜禽细菌性腹泻的罗伊氏乳杆菌及其应用 | |
CN113170842B (zh) | 一种防治家禽坏死性肠炎的复合微生态制剂及其应用 | |
CN108587957B (zh) | 一株高产复合酶的益生地衣芽孢杆菌的筛选及应用 | |
CN109749957B (zh) | 一种具有水产病原菌拮抗特性的格氏乳杆菌制剂的制备及应用 | |
JP2004523241A (ja) | プロバイオティクスとして有用な新規ラクトバチルス・ロイテリ(Lactobacillusreuteri) | |
CN104673726B (zh) | 一种猪源嗜酸乳杆菌冻干制剂及其应用 | |
CN110591938B (zh) | 一种高抗逆性凝结芽孢杆菌突变株及应用 | |
CN113249259B (zh) | 一种具有抑菌和降低病毒血凝价功能的枯草芽孢杆菌及其应用 | |
CN102686112A (zh) | 制造益生菌制剂的乳酸细菌的新颖菌株和其组合 | |
CN110878266B (zh) | 一株约氏乳杆菌及其用途 | |
CN110564638A (zh) | 一株具有益生特性的罗伊氏乳杆菌及其用途 | |
KR20130113037A (ko) | 신규 바실러스 서브틸리스 | |
CN113215019A (zh) | 一株粪肠球菌及其应用 | |
CN115094012A (zh) | 凝结芽孢杆菌bc-hyc株菌剂的制备方法及应用 | |
CN113151096B (zh) | 一种抗新型呼肠孤病毒的枯草芽孢杆菌及其应用 | |
CN110028560B (zh) | 一种凝结芽孢杆菌产的细菌素及其应用 | |
CN108546663B (zh) | 一种猪源卷曲乳杆菌及其应用 | |
CN113249255A (zh) | 一种防控禽肠炎的枯草芽孢杆菌及其应用 | |
CN117448213A (zh) | 一种抑制产气荚膜梭菌的植物乳杆菌及其后生元和应用 | |
KR100557397B1 (ko) | 유해미생물 억제 활성을 가지는 신규 내산성 락토바실러스 루테리 Probio-054 및 이를 함유하는 생균활성제 | |
CN112226389A (zh) | 一种三黄肉雏鸡肠道益生菌群的定植培养方法及其应用 | |
KR102003822B1 (ko) | 반려동물의 모질을 개선하는 효능을 갖는 유산균과 이를 포함하는 생균제 조성물을 유효성분으로 함유하는 모질 개선을 위한 동물 사료용 첨가제 및 동물 사료 조성물 | |
CN105104712B (zh) | 一种微生物饲料添加剂及其制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |