CN113072541B

CN113072541B - 一种靶向药物blu-667的制备方法

Info

Publication number: CN113072541B
Application number: CN202110360527.5A
Authority: CN
Inventors: 刘亚东; 王金兵; 宁尚恩; 周键; 张景深; 陈强强
Original assignee: Shandong Sihuan Pharmaceutical Co ltd
Current assignee: Shandong Sihuan Pharmaceutical Co ltd
Priority date: 2021-04-02
Filing date: 2021-04-02
Publication date: 2022-07-08
Anticipated expiration: 2041-04-02
Also published as: CN113072541A

Abstract

本发明公开了一种靶向药物BLU‑667的制备方法。本发明首先将2‑氯‑4‑甲基‑6‑氨基嘧啶的氨基进行BOC保护，得到的中间体1与碘代物在有机锌和钯催化剂催化下碳碳偶联得到中间体2，然后脱BOC保护、重氮化反应及水解将氨基转化为羟基得到中间体3，再经光延反应及脱BOC得到中间体4，最后经酰胺缩合得到BLU‑667。本发明减少了合成步骤，减少了有害化合物的使用，降低了生产成本，优化了生产操作，提高了收率。

Description

一种靶向药物BLU-667的制备方法

技术领域

本发明属于药物化学领域，具体涉及一种靶向药物BLU-667的制备方法。

背景技术

BLU-667(pralsetinib，普雷西替尼)是由Blueprint Medicines Corporation公司开发的一种高效且选择性的口服抑制剂，其靶向致癌RET-融合，抗性突变。该药物的临床前期和早期临床验证也已发表在Cancer Discovery上。根据MD Anderson发布的新闻稿，BLU-667被选中进行调查是因为它对RET的选择性比其他激酶测试的选择性高100倍！并已被证明可有效阻止与多种激酶治疗抵抗有关的基因突变。在2020年5月29日ASCO大会上公布的I/II ARROW(NCT03037385)期临床试验的更新数据中，显示了BLU667有可能成为治疗RET改变的甲状腺癌患者的疗法，在一线和复发性治疗中均具有持久的疗效。截至2019年11月18日数据发表时，普雷西替尼在NSCLC患者中的总体缓解率(ORR)为61％，95％的患者观察到肿瘤缩小，其中14％的患者达到完全缓解。对于RET突变型甲状腺髓样癌(MTC)患者，以前接受过卡博替尼或凡德他尼治疗的患者，客观缓解率(ORR)为60％，约98％的患者肿瘤缩小。而未接受过治疗的MTC患者客观缓解率ORR为74％，并且100％的患者达到了肿瘤缩小。

BLU-667，分子式：C₂₇H₃₂FN₉O₂；分子量：533.6，CAS号:2097132-94-8，其结构式如下：

目前BLU-667的合成路线主要有专利CN108473468A报道的两条合成路线。

路线1：该路线以2,4-二氯-6-甲基嘧啶为原料，甲硫基取代，碳碳偶联，氧化，磺酰基取代，氯化，缩合，最后水解和酰胺偶合反应得到BLU-667。合成路线如下所示。

路线2：以4-氯-2,6-甲基嘧啶为原料，经碳碳偶联，缩合，水解和酰胺偶合反应得到BLU-667。合成路线如下所示。

其中路线1反应路线较长，总收率小于10％，而且使用了剧毒的三氯氧磷，环境不友好；路线2第一步收率只有2％左右，收率也低。

发明内容

针对上述合成路线的不足，本发明提供了一种靶向药物BLU-667的新制备方法。该方法将2-氯-4-甲基-6-氨基嘧啶的氨基进行BOC保护，得到的中间体1与碘代物在有机锌和钯催化剂催化下碳碳偶联得到中间体2，然后脱BOC保护、重氮化反应及水解将氨基转化为羟基得到中间体3，再经光延反应及脱BOC得到中间体4，最后经酰胺缩合得到BLU-667。本发明减少了合成步骤，减少了有害化合物的使用，降低了生产成本，优化了生产操作。

本发明的合成路线是：一种靶向药物BLU-667的制备方法，其特征是，包括以下步骤：

1)将2-氯-4-甲基-6-氨基嘧啶(化合物Ⅰ)的氨基进行BOC保护，得到中间体1；

2)中间体1在有机锌和钯催化剂催化下，与4-碘-1-甲氧基环己烷羧酸甲酯(化合物Ⅱ)进行碳碳偶联得到中间体2；

3)中间体2经酸性条件下脱BOC保护，与亚硝酸钠重氮化反应及重氮盐水解得到中间体3；

4)中间体3和1-BOC-3-氨基-5-甲基吡唑(化合物Ⅲ)进行光延反应，然后脱除BOC，得到中间体4；

5)中间体4与化合物Ⅳ((S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-甲基)吡啶-3-甲基)乙胺)经酰胺缩合得到BLU-667。

其合成路线如下所示：

进一步的，所述步骤1)在碱性试剂作用下反应，碱性试剂为吡啶、三乙胺、DIPEA(N,N-二异丙基乙胺)等有机碱中的至少一种。2-氯-4-甲基-6-氨基嘧啶、BOC酸酐和碱的摩尔比为1:1～3:1～4。采用的溶剂为二氯甲烷、甲苯、四氯化碳中的至少一种。反应温度为0～50℃。反应时间1～15h。

进一步的，所述步骤2)中有机锌优选为Rieke锌(二乙基锌)，中间体1与化合物Ⅱ的摩尔比为1:1～2，化合物Ⅱ与Rieke锌的摩尔比为1:1～1.05，钯催化剂选用PdCl₂(dppf)，其用量为中间体1重量的5％～10％，反应温度50～100℃。反应时间1～5h。反应溶剂为DMF(N,N-二甲基甲酰胺)，DMAC(N,N-二甲基乙酰胺)中的至少一种。

进一步的，所述步骤3)为三步一锅法反应：

第一步：酸性条件脱BOC，酸性溶剂为盐酸、三氟乙酸中的一种。中间体2与酸的摩尔比为1:1～10。反应温度为0～60℃。反应时间1～6h。反应溶剂为甲醇、二氯甲烷、四氢呋喃、乙酸乙酯中的至少一种。

第二步：重氮化反应；控制反应体系pH值﹤2。中间体2与亚硝酸钠的摩尔比为1:1～2。反应温度为-10～0℃。反应时间1～3h。反应溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇中的至少一种。

第三步：重氮盐水解，在铜盐催化下下进行，铜盐催化剂为氧化铜、氯化铜、一水乙酸铜中的至少一种。反应温度为30～100℃。反应时间3～10h；中间体2与铜盐催化剂的摩尔比为1:0.01-0.1。

进一步的，所述步骤4)中光延反应在三苯基膦和偶氮试剂作用下进行，其中偶氮试剂为偶氮二甲酸二异丙酯(DIAD)或者偶氮二碳酸二乙酯(DEAD)。中间体3与化合物Ⅲ的摩尔比为1：1～2。中间体3与三苯基膦、偶氮试剂的摩尔比为1：1～2：1～2。溶剂为四氢呋喃、二氯甲烷、甲苯中的至少一种。反应温度为0℃～30℃，所述反应时间为2h～6h。酸性条件脱BOC，酸性溶剂为盐酸、三氟乙酸中的一种。中间体3与酸的摩尔比为1:1～10。反应温度为0～60℃。反应时间1～6h。反应溶剂为甲醇、二氯甲烷、四氢呋喃、乙酸乙酯中的至少一种。

进一步的，所述步骤5)在缚酸剂和酰胺缩合剂作用下进行反应，所用的缚酸剂为三乙胺、DIPEA(N,N-二异丙基乙胺)中的一种，所用酰胺缩合剂为PyBPO(六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷)、HATU(2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯)中的一种，中间体4与化合物Ⅳ的摩尔比为1:1～2，中间体4与酰胺缩合剂的摩尔比为1:1～2，中间体4与缚酸剂的摩尔比为1:1～2，反应温度0～30℃，反应时间1～10h。反应溶剂为DMF(N,N-二甲基甲酰胺)，DMAC(N,N-二甲基乙酰胺)中的至少一种。

本发明的合成反应具体包括以下步骤：

1)中间体1的制备

将2-氯-4-甲基-6-氨基嘧啶溶于二氯甲烷，加入三乙胺，开启搅拌，然后将BOC酸酐溶于二氯甲烷中，将BOC酸酐的二氯甲烷溶液滴加入反应体系中，10～30℃搅拌反应5～15h；反应完毕后加入水，搅拌，分液，有机相干燥，减压浓缩干得中间体1；

2)中间体2的制备

在氮气保护下，将化合物Ⅱ溶于DMF中，快速加入Rieke锌-THF悬浊液，室温下搅拌，然后加入步骤1)中得到的中间体1的DMF溶液，再加入PdCl₂(dppf)，上述混合液升温至50～100℃反应1～3小时；冷却至室温，加入乙酸乙酯稀释，硅藻土助滤，滤液水洗，饱和盐水洗，干燥后浓缩至干，得黄色固体中间体2；

3)中间体3的制备

将步骤2)得到的中间体2溶于二氯甲烷，滴加盐酸进行反应，HPLC检测中间体2﹤0.5％；反应完毕后，静置分液，分去有机相，保留水相，水相中加入乙醇，降温-10～0℃，滴加亚硝酸钠溶液，滴毕反应时间1～3h；反应完毕，加入氯化铜，升温50～90℃反应3～10h，反应完减压浓缩去除乙醇，加入二氯甲烷萃取；合并有机相，饱和盐水洗涤，干燥，浓缩得到中间体3；

4)中间体4的制备

将中间体3、三苯基膦、化合物Ⅲ加入四氢呋喃中，滴加DIAD，滴完后0℃～30℃反应2h～6h；反应完毕后加入酸调pH值2-3，用二氯甲烷萃取去掉杂质，保留水相，水相调至碱性，过滤，滤饼用水洗至中性，干燥得中间体4；

5)BLU-667的制备

将中间体4和化合物Ⅳ溶于DMF中，搅拌均匀后，加入PyBPO和DIPEA在0～30℃反应1～10h；反应完毕后，加入水和乙酸乙酯，充分搅拌，静置分液，有机相用饱和盐水洗涤，干燥，浓缩，过硅胶层析柱(洗脱液二氯甲烷：甲醇＝20:1-2)，得到BLU-667。

本发明的有益效果是：提出了一种新的BLU-667的制备方法，减少了合成步骤，提高总收率≥28％，原研收率原料也较易得。摒弃了使用剧毒的三氯氧磷，反应条件更温和。

附图说明

图1为本发明实施例5得到的BLU667得HPLC图谱；

具体实施方式

实施例1：中间体1的制备

将14.36g(0.1mol)2-氯-4-甲基-6-氨基嘧啶溶于500ml二氯甲烷，加入三乙胺20.24g(0.2mol)，开启搅拌，降温至5℃，然后将BOC酸酐43.65g(0.2mol)溶于200ml二氯甲烷中，将BOC酸酐的二氯甲烷溶液滴加入反应体系中，滴完后，升温至20℃，搅拌10h。HPLC检测2-氯-4-甲基-6-氨基嘧啶﹤0.5％，加入200ml水，搅拌0.5h，分液，有机相无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干得21.55g固体，摩尔收率88.4％。

实施例2：中间体2的制备

在氮气保护下，将化合物Ⅱ29.24g(0.098mol)溶于250ml DMF中，快速加入Rieke锌-THF悬浊液(7.85g二乙基锌混于THF中配制成50mg/ml的悬浊液)，室温下搅拌15分钟，然后加入步骤1)中得到的21.55g中间体1(0.088mol)的DMF溶液，再加入PdCl₂(dppf)3.70g(0.005mol)，上述混合液升温至80～90℃，反应1.5h。冷却至室温，加入300ml乙酸乙酯稀释，硅藻土助滤，滤液水洗2次，饱和盐水洗1次，无水硫酸钠干燥后浓缩至干，得黄色固体32.25g(含量91％)，摩尔收率87.5％。

实施例3：中间体3的制备

将步骤2)得到的中间体2为32.25g(0.077mol)溶于300ml二氯甲烷，滴加54.14g35％浓盐酸(0.5mol)，保持内温小于20℃，滴完后保温反应5h，HPLC检测中间体2﹤0.5％。反应完毕后，静置分液，分去有机相，保留水相，水相中加入300ml乙醇，降温至-10℃，滴加20％亚硝酸钠溶液34.5g(0.1mol)，保持内温﹤0℃，滴完后，保温搅拌1h。反应完毕，加入氯化铜1g，升温至70℃，保温反应6h，减压浓缩去除乙醇，加入二氯甲烷300ml×2萃取2次。合并有机相，饱和盐水洗涤一次，无水硫酸钠干燥，浓缩得到18.23g中间体3，按100％纯度计，收率84.4％。

实施例4：中间体4的制备

将18.23g中间体3(0.065mol)、三苯基膦25.59g(0.098mol)、化合物Ⅲ15.39g(0.078mol)加入到200ml四氢呋喃中，20℃，滴加DIAD 19.73g(0.098mol)，滴完后反应4h，加入5％盐酸250g，调pH值2-3，搅拌1h，用320ml二氯甲烷萃取去掉杂质，保留水相，水相用20％氢氧化钠水溶液调至碱性，过滤，滤饼用水洗至中性，干燥得18.93g中间体4，摩尔收率81％。

实施例5：BLU667的制备

25℃下，将18.93g(0.053mol)中间体4，16.37g(0.079mol)化合物Ⅳ溶于200mlDMF中，搅拌均匀后，将PyBPO 41.11g(0.079mol)，DIPEA 10.21g(0.079mol)加入到反应液中，保温反应5h，HPLC检测反应完毕后，加入200ml水和200ml乙酸乙酯，搅拌0.5h，静置分液，有机相用饱和盐水洗涤一次，无水硫酸钠干燥，过滤浓缩干。剩余物快速过硅胶层析柱(洗脱液为二氯甲烷：甲醇＝20:1-2)，得到的溶液浓缩至干，得到白色固体14.89g，纯度99.24％(如图1所示)，摩尔收率53％。

Claims

1.一种靶向药物BLU-667的制备方法，其特征是，包括以下步骤：

1)将2-氯-4-甲基-6-氨基嘧啶的氨基进行BOC保护，得到中间体1；

2)中间体1在有机锌和钯催化剂催化下，与4-碘-1-甲氧基环己烷羧酸甲酯进行碳碳偶联得到中间体2；

4)中间体3和1-BOC-3-氨基-5-甲基吡唑在三苯基膦和偶氮试剂作用下进行光延反应，然后脱除BOC，得到中间体4；所述偶氮试剂为偶氮二甲酸二异丙酯或者偶氮二碳酸二乙酯；采用的溶剂为四氢呋喃、二氯甲烷、甲苯中的至少一种；反应温度为0℃～30℃，反应时间为2h～6h；

5)中间体4与化合物Ⅳ经酰胺缩合得到BLU-667；

其中，

化合物Ⅳ为(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-甲基)吡啶-3-甲基)乙胺；

中间体1、2、3和4分别为：

所述步骤3)为三步一锅法反应，具体为：

第一步：酸性条件脱BOC，酸性条件下采用的酸为盐酸、三氟乙酸中的一种；反应温度为0～60℃，反应时间1～6h；反应溶剂为甲醇、二氯甲烷、四氢呋喃、乙酸乙酯中的至少一种；

第二步：重氮化反应：控制反应体系pH值﹤2；反应温度为-10～0℃，反应时间1～3h；反应溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇中的至少一种；

第三步：重氮盐水解反应，在铜盐催化下进行，铜盐催化剂为氧化铜、氯化铜、一水乙酸铜中的至少一种；反应温度为30～100℃，反应时间3～10h。

2.如权利要求1所述的一种靶向药物BLU-667的制备方法，其特征是，所述步骤1)在碱性试剂作用下反应，碱性试剂为吡啶、三乙胺、N,N-二异丙基乙胺中的至少一种；采用的溶剂为二氯甲烷、甲苯、四氯化碳中的至少一种；所述步骤1)反应温度为0～50℃；反应时间1～15h。

3.如权利要求1所述的一种靶向药物BLU-667的制备方法，其特征是，所述步骤2)的有机锌为Rieke锌；所述钯催化剂为PdCl₂(dppf)；采用的反应溶剂为N,N-二甲基甲酰胺DMF、N,N-二甲基乙酰胺中的至少一种；所述步骤2)反应温度50～100℃，反应时间1～5h。

4.如权利要求1所述的一种靶向药物BLU-667的制备方法，其特征是，所述步骤4)酸性条件脱BOC，酸性溶剂为盐酸、三氟乙酸中的一种；反应温度为0～60℃，反应时间1～6h；所采用的反应溶剂为甲醇、二氯甲烷、四氢呋喃、乙酸乙酯中的至少一种。

5.如权利要求1所述的一种靶向药物BLU-667的制备方法，其特征是，所述步骤5)在缚酸剂和酰胺缩合剂作用下进行酰胺缩合反应，所用的缚酸剂为三乙胺、N,N-二异丙基乙胺中的一种，所用酰胺缩合剂为PyBOP、HATU中的一种。

6.如权利要求1所述的一种靶向药物BLU-667的制备方法，其特征是，所述步骤5)的反应温度为0～30℃，反应时间1～10h。

7.如权利要求1-6中任一项所述的一种靶向药物BLU-667的制备方法，其特征是，具体包括以下步骤：

1)中间体1的制备

将2-氯-4-甲基-6-氨基嘧啶溶于二氯甲烷，加入三乙胺，开启搅拌；然后将BOC酸酐溶于二氯甲烷中滴加入反应体系中，10～30℃搅拌反应5～15h；反应完毕后加入水，搅拌，分液，有机相干燥，减压浓缩干得中间体1；

2)中间体2的制备

在氮气保护下，将4-碘-1-甲氧基环己烷羧酸甲酯溶于DMF中，快速加入Rieke锌-THF悬浊液，室温下搅拌，然后加入步骤1)中得到的中间体1的DMF溶液，再加入PdCl₂(dppf)，混合液升温至50～100℃反应1～3小时；冷却至室温，加入乙酸乙酯稀释，硅藻土助滤，滤液水洗，饱和盐水洗，干燥后浓缩至干，得黄色固体中间体2；

3)中间体3的制备

4)中间体4的制备

将中间体3、三苯基膦、1-BOC-3-氨基-5-甲基吡唑加入四氢呋喃中，滴加偶氮二甲酸二异丙酯，滴完后0℃～30℃反应2h～6h；反应完毕后加入酸调pH值2-3，用二氯甲烷萃取去掉杂质，保留水相，水相调至碱性，过滤，滤饼用水洗至中性，干燥得中间体4；

5)BLU-667的制备

将中间体4和化合物Ⅳ溶于溶剂DMF中，搅拌均匀后，加入PyBOP和DIPEA在0～30℃反应1～10h；反应完毕后，加入水和乙酸乙酯，充分搅拌，静置分液，有机相用饱和盐水洗涤，干燥，浓缩，过硅胶层析柱，得到BLU-667。

8.如权利要求7所述的一种靶向药物BLU-667的制备方法，其特征是，洗脱硅胶层析柱的洗脱液为按体积比二氯甲烷：甲醇＝20:1-2。