CN113057071A - 一种筛选富硒香菇固体菌种的方法以及装置 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种香菇固体菌种筛选方法以及装置，公开了一种筛选富硒香菇固体菌种的方法以及装置，其包括以下步骤：步骤一、选取多种香菇品种于培养基中进行活化培养，得到实验菌丝体；步骤二、每个香菇品种设置两组菌丝体培养基，采用梯度逐增法在同一香菇品种的两组菌丝体培养基中分别添加Na2SeO3和有机硒；步骤二、对各个菌丝体培养基中菌丝体生长情况进行分析比较并得到结果。本发明能够筛选出集硒情况较好的香菇固体菌种和添加外源硒最佳浓度的方法，确保其实际生产中所生产的香菇能够实际达到富硒香菇的所要求的硒元素含量标准，并且通过特定的装置能够实现整个方法的高效进行并且能够有效避免环境污染。
Description
技术领域
本发明涉及一种香菇固体菌种筛选方法，尤其涉及了一种筛选富硒香菇固体菌种的方法。
背景技术
众所周知，硒元素是人体必需元素之一，我国大约74％的地区属于硒缺乏区，绝大多数居民的硒元生摄入量严重不足，导致恶性疾病发生率和死亡率居高不下，并且，近年来癌症的发病率和死亡率有稳定升高的趋势，迫切需要加强相关措施，提高全体居民的健康水平。
富硒香菇，作为一个食用菌新宠，其含有符合国家标准的硒元素，因而能够为提高全体居民的健康水平提高一定的保障，对此，现有技术中着力研发出富硒香菇。然而在研发过程中如何筛选集硒香菇固体菌种，如何确保其实际生产中所生产的香菇能够实际达到富硒香菇的所要求的硒元素含量标准是各个研发机构需要解决的问题。
发明内容
本发明针对现有技术中存在的问题，提供了一种筛选富硒香菇固体菌种的方法。
为了解决上述技术问题，本发明通过下述技术方案得以解决：
一种筛选富硒香菇固体菌种的方法，其包括以下步骤：
步骤一、选取多种香菇品种于同一培养基中进行活化培养，得到实验香菇菌丝体；
步骤二、每个香菇品种设置两组菌丝体培养基，采用梯度逐增法在同一香菇品种的两组菌丝体培养基中分别添加Na2SeO3和有机硒；本实施例中的有机硒可以为市面上现有的硒的有机化合物，即硒与碳、氢、氧、氮等有机元素结合，也可以为天然有机硒，如堇叶碎米荠体内的硒蛋白。
步骤三、对各个菌丝体培养基中菌丝体生长情况，通过接种后同等条件下用游标卡尺测量其长度记录，对各个培养基中菌丝体生长情况进行分析比较并得到结果。
作为优选，步骤一中选取的香菇品种为三种，分别为上海农科院提供菌种“申香215”、“申香1504”，河南向阳食用菌园艺场提供的“向阳2号”。
作为优选，步骤一中香菇品种的培养方法具体为：将4℃冰箱保存的香菇菌，接种到基础斜面培养基上，在23℃恒温培养箱进行活化培养，菌丝生长丰满待用。
作为优选，步骤一中固体斜面基础培养基制作包括去皮土豆200g、葡萄糖20g、琼脂20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g以及水1L，培养基的pH为6.0。
作为优选，步骤二中Na2SeO3和有机硒的添加浓度分别依次为25mg/kg、30mg/kg、45mg/kg、60mg/kg、75mg/kg以及90mg/kg。
作为优选，步骤二中每组菌丝体培养基均包括5个培养基样本，每种浓度设置多个样本，能够有效保证实验的准确性。
一种筛选富硒香菇固体菌种的装置，包括底座，底座包括前端板、后端板以及两个侧端板，前端板和后端板之间设有能够360°转动的试管架，试管架上设有多根并排设置的试管，底座还包括底板，底板与前端板、后端板以及两个侧端板共同构造成接水槽，试管底端伸入接水槽内且试管旋转到管口向下时能够将试管内的液体倒入接水槽内，接水槽的侧壁上设有出水口。
作为优选，试管架包括第一连接板，第一连接板上设有多个供试管穿过的第一通孔，第一连接板的下表面上设有多对第一连接条，每对第一连接条设置于所述第一通孔的两侧，第一连接条的底部连接有用于容置试管底部的第一连接座，第一连接座的横截面呈圆环状且与所述第一通孔相对应，第一连接座的下底面为与试管底部外表面配合的弧面，每对第一连接条之间固定有用于夹紧试管的环形抱箍；所述前端板上设有与试管架对应的转动电机，转动电机的电机轴与试管架连接且用于驱动试管架转动。
作为优选，后端板上且位于接水槽的正上方设有能够沿后端板高度方向上下滑动的加液机构，加液机构包括内部设有加液腔的加液壳体，加液腔内设有上下两端分别伸出加液腔的与试管架相对的多组加液管组件，每组加液管组件上设有多个与相对应的试管架上试管一一对应的加液管，加液壳体的上端面上设有围绕单组加液管设置的环形板，环形板与加液壳体的上端面上形成加液槽，加液槽底面上且位于相邻加液管之间设有与加液腔连通的加液通道；加液壳体的下表面上设有与试管架上试管一一对应的出液管，加液管的下端部伸入出液管内且与出液管下端面齐平，出液管与加液管之间形成出液通道。
作为优选，加液腔内还设有多组与加液管组件对应的出液机构，出液机构包括第二连接板，第二连接板上设有多个供加液管穿过的第二通孔，第二连接板的下表面上设有多对第二连接条，每对第二连接条设置于所述第二通孔的两侧，第二连接条的底部连接有呈圆筒状的第二连接座，第二连接座能够自上而下插入出液通道内且第二连接座的内外表面上分别设有与出液通道形成密封的内密封垫和外密封垫，第二连接座底面抵靠在第一连接板上表面上时，内密封垫与试管上端部的外表面形成密封，第二连接座的内表面与加液管的外表面之间形成过液通道，外密封垫与出液管的内表面形成密封。加液腔内能够存储清洗液，也能够通过外加的方式加入清洗液或清洗水，通过调节出液机构的位置能够实现清洗液是否流出。
作为优选，加液壳体的上表面上设有第一气缸，第一气缸的活塞杆竖直布置且与第二连接板连接；后端板的上端部设有第二气缸，第二气缸用于驱动加液壳体上下运动，加液壳体的侧壁上设有滑块，后端板上设有与滑块配合的滑轨；加液壳体的与滑块相对的一端设有下端插入前端板上端面内的导向杆，导向杆与前端板过盈配合。通过滑轨、滑块以及导向杆的设置能够有效实现加液壳体上下直线运动的稳定性，保证最终上端的出液管、加液管与下部的试管能够相对应，同时加液壳体能够上下运动能够方便试管在试管架上的拿取与放置，避免加液壳体对试管进行干涉。
本发明由于采用了以上技术方案，具有显著的技术效果：
本发明能够筛选出集硒情况较好的香菇固体菌种和添加外源硒最佳浓度的方法，确保其实际生产中所生产的香菇能够实际达到富硒香菇的所要求的硒元素含量标准，并且通过特定的装置能够实现整个方法的高效进行并且能够有效避免环境污染。
附图说明
图1为实施例1中申香215添加不同浓度外源硒后前三天的菌丝生长情况。
图2为实施例1中申香215添加不同浓度外源硒后前七天的菌丝生长情况。
图3为实施例1中申香1504添加不同浓度外源硒后前三天的菌丝生长情况。
图4为实施例1中申香150添加不同浓度外源硒后前七天的菌丝生长情况。
图5为实施例1中向阳2号添加不同浓度外源硒后前三天的菌丝生长情况。
图6为实施例1中向阳2号添加不同浓度外源硒后前七天的菌丝生长情况。
图7是不同菌珠在前三天和前七天的生长速度对比图。
图8是实施例中筛选集硒香菇固体菌种的装置结构示意图。
图9是图8的剖视图。
图10是图8中加液壳体的剖视图。
图11是图11中出液机构的结构示意图。
具体实施方式
下面结合附图与实施例对本发明作进一步详细描述。
实施例1
一种筛选富硒香菇固体菌种的方法，其包括以下步骤：
步骤一、选取多种香菇品种于培养基中进行活化培养，得到实验菌丝体；本实施例中选取四种香菇品种，分别为“申菇215”、“申香1504”、“向阳2号”。
具体培养方法为：将4℃冰箱保存的香菇菌接种到基础斜面培养基上，然后在23℃恒温培养箱进行活化培养，菌丝生长丰满。其中，固体斜面培养基包括去皮土豆200g、葡萄糖20g、琼脂20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g以及水1L，培养基的pH为6.0。
步骤二、每个香菇品种设置两组菌丝体培养基，每组菌丝体培养基均包括5个培养基样本，并且还设置一个对照组样本；采用梯度逐增法在同一香菇品种的两组菌丝体培养基样本中分别添加Na2SeO3和有机硒；其中，Na2SeO3和有机硒的添加浓度分别依次为25mg/kg、30mg/kg、45mg/kg、60mg/kg、75mg/kg以及90mg/kg。对照组中不添加任何外源硒。
步骤三、通过接种后同等条件下用游标卡尺测量其长度记录，对各个菌丝体培养基中菌丝体生长情况进行分析比较并得到结果。
由本实施例图1-图7得到如下结果，其中图1-图6中对于不同菌珠添加不同浓度不同外源硒，一共具有包括对照组在内的13组样本，每组样本中均包括五个样本，其中每组样本中前5个条状图的高度表示5个样本菌丝生长速度，最后一个条状图表示5个样本的菌丝生长速度的平均数。
由图1-图6可以看出不同菌种香菇菌丝阶段在同一条件下集硒能力不同，同一菌种香菇菌在含有60mg/kg亚硒酸钠(Na2SeO3)或有机硒条件下发酵良好。
另外还可以看出同一菌种添加有机硒的样本生长情况普遍优于添加Na2SeO3。菌丝体培养基中硒含量在60-75mg/kg时，最适宜菌丝生长。随着硒添加量的不断增加,对菌丝体生长的抑制力不断加大,培养基中硒含量在60-75mg/kg时菌丝量下降较平缓,当添加到90mg/kg以上时菌丝量明显减少。因而可以得出添加60mg/kg有机硒为能够得到富硒香菇的最佳选择。
图7为“申香215”、“申香1504”、以及“向阳2号”在同一接种天数下的菌珠高度柱状图，由图可以看出“申香215”、“申香1504”、向阳2号在相同生长条件下，向阳二号的集硒情况明显优于“申香215”、“申香1504”。
本发明能够筛选出集硒情况较好的香菇固体菌种以及添加外源硒的最佳浓度，确保后续实际生产中所生产的香菇能够实际达到富硒香菇的所要求的硒元素含量标准。
本实施例中还提供了一种筛选富硒香菇固体菌种的装置，如图8-图11所示，包括底座1，底座1包括前端板101、后端板102以及两个侧端板103，前端板101和后端板102之间设有能够360°转动的试管架2，试管架2上设有多根并排设置的试管3，底座1还包括底板104，底板104与前端板101、后端板102以及两个侧端板103共同构造成接水槽105，试管3底端伸入接水槽105内且试管3旋转到管口向下时能够将试管3内的液体倒入接水槽105内，接水槽105的侧壁上设有出水口106。
本实施例中通过试管架2的设置能够将多个试管3放置在一起，由于本实施例中每组菌丝体培养基均包括5个培养基样本，并且还设置一个对照组样本，因而在本实施例中每个试管架2上设置有6个试管3，由于本实施例中的试管架2能够转动，因而在对香菇菌接种到基础斜面培养基上并进行活化培养时，可以将试管架2转动到倾斜装置，使得试管3处于所需倾斜状态，该倾斜程度可根据实际需要任意设置；当需要加入外源硒时，通过将其转动到开口朝上的竖直状态时能够实现对试管3内外源硒更方便的加入；当实验结束需要对试管3进行清洗时，可以直接通过来回转动试管架2的方式来摇晃试管3，使其内清洗液充分对试管3壁进行清洗，清洗后的液体可以直接通过转动试管3开口向下来导入接水槽105内，整个过程非常方便，能够实现对整个筛选方法的高效进行。
本实施例中试管架2包括第一连接板201，第一连接板201上设有多个供试管3穿过的第一通孔202，第一连接板201的下表面上设有多对第一连接条203，每对第一连接条203设置于所述第一通孔202的两侧，第一连接条203的底部连接有用于容置试管3底部的第一连接座204，第一连接座204的横截面呈圆环状且与所述第一通孔202相对应，第一连接座204的下底面为与试管3底部外表面配合的弧面，每对第一连接条203之间固定有用于夹紧试管3的环形抱箍205。
另外，本实施例中前端板101上设有与试管架2对应的转动电机4，转动电机4的电机轴与试管架2连接且用于驱动试管架2转动。试管3自上而下插入试管架2内，试管架2底部设置能够与试管3底面配合的弧形面，能够保证试管3在试管架2上的稳定放置，同时在试管架2上设置夹紧试管3的环形抱箍205，能够避免试管3在倒置时脱离试管架2，更方便、更灵活的对整个试管架2进行转动。
本实施例中后端板102上且位于接水槽105的正上方设有能够沿后端板102高度方向上下滑动的加液机构5，加液机构5包括内部设有加液腔502的加液壳体501，加液腔502内设有上下两端分别伸出加液腔502的与试管架2相对的多组加液管组件，每组加液管组件上设有多个与相对应的试管架2上试管3一一对应的加液管503，加液壳体501的上端面上设有围绕单组加液管503设置的环形板504，环形板504与加液壳体501的上端面上形成加液槽505，加液槽505底面上且位于相邻加液管503之间设有与加液腔502连通的加液通道；加液壳体501的下表面上设有与试管架2上试管3一一对应的出液管506，加液管503的下端部伸入出液管506内且与出液管506下端面齐平，出液管506与加液管503之间形成出液通道507。
其中，加液腔502内还设有多组与加液管组件对应的出液机构6，出液机构6包括第二连接板601，第二连接板601上设有多个供加液管503穿过的第二通孔602，第二连接板601的下表面上设有多对第二连接条603，每对第二连接条603设置于所述第二通孔602的两侧，第二连接条603的底部连接有呈圆筒状的第二连接座604，第二连接座604能够自上而下插入出液通道507内且第二连接座604的内外表面上分别设有与出液通道507形成密封的内密封垫605和外密封垫606，第二连接座604底面抵靠在第一连接板201上表面上时，内密封垫605与试管3上端部的外表面形成密封，第二连接座604的内表面与加液管503的外表面之间形成过液通道，外密封垫606与出液管506的内表面之间形成密封。
加液壳体501的上表面上设有第一气缸7，第一气缸7的活塞杆竖直布置且与第二连接板601连接；后端板102的上端部设有第二气缸8，第二气缸8用于驱动加液壳体501上下运动，加液壳体501的侧壁上设有滑块，后端板102上设有与滑块配合的滑轨；加液壳体501的与滑块相对的一端设有下端插入前端板101上端面内的导向杆9，导向杆9与前端板101过盈配合。
本实施例中提供的一种筛选富硒香菇固体菌种的装置，其在具体使用过程中可通过转动电机4能够实现对试管3倾斜程度任意角度的调节，且能够实现实验中全部试管3的同时倾斜，并且根据转动电机4的转动齿数能够精确控制所有试管3中斜面培养基的倾斜程度的一致性，有效保证实验数据的准确性。另外，在需要对培养基样本加入外源硒时，能够通过第二气缸8将整个加液壳体501向下移动，并且在导向杆9的作用下能够保证加液壳体501的稳定直线运动，加液壳体501运动到靠近试管架2的位置时，加液管503与试管3一一对应，通过加液管503对试管3进行加液，并且使得同一浓度的外源硒处于同一试管架2，避免试管3之间混淆，保证整个实验的有序进行。
另外，加液装置中设置加液腔502，加液腔502内存储有清洗液，此时，出液机构6中的第二连接座604与出液通道507形成密封；当实验结束后需要对试管3进行清洗时，通过第一气缸7将出液机构6向下移动，直到第二连接座604底面抵靠在第一连接板201上表面上，此时内密封垫605与试管3上端部的外表面形成密封，第二连接座604的内表面与加液管503的外表面之间形成过液通道，外密封垫606与出液管506的内表面形成密封，此时加液腔502内的清洗液能够通过过液通道流入下部的试管3内对试管3内部进行清洗，清洗过程中也可以通过转动电机4实现对试管3内部清洗的晃动来加强清洗程度，当清洗一遍后可以在通过环形槽加热清洗水进行二次清洗，清洗后的废液均能够倒入下部的接水槽105内，最终通过出水口106排出，能够有效避免试管3残留物以及清洗液等废液对环境污染。本实施例中能够实现筛选集硒香菇固体菌种方法中的外源硒加入、菌菇培养、试管3清洗于一体，能够有效提高整个实验的效率。
总之，以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所作的均等变化与修饰，皆应属本发明专利的涵盖范围。
Claims (10)
1.一种筛选富硒香菇固体菌种的方法，其特征在于其包括以下步骤：
步骤一、选取多种香菇菌于培养基中进行活化培养，得到实验香菇菌丝体；
步骤二、每个香菇品种设置两组菌丝体培养基，采用梯度逐增法在同一香菇品种的两组菌丝体培养基中分别添加Na2SeO3和有机硒；
步骤三、对各个菌丝体培养基中菌丝体生长情况，通过接种后同等条件下用游标卡尺测量其长度记录，进行分析比较并得到最后结果。
2.根据权利要求1所述的一种筛选富硒香菇固体菌种的方法，其特征在于：步骤一中选取的香菇品种分别为“申香215”、“申香1504”、“向阳2号”。
3.根据权利要求1所述的一种筛选富硒香菇固体菌种的方法，其特征在于：步骤一中香菇品种的培养方法具体为：将4℃冰箱保存的香菇菌接种到基础斜面培养基上，然后在23℃恒温培养箱进行活化培养，菌丝生长丰满。
4.根据权利要求1-3任意一条所述的一种筛选富硒香菇固体菌种的方法，其特征在于：步骤一中制作固体斜面培养基包括去皮土豆200g、葡萄糖20g、琼脂20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g以及水1L，培养基的pH为6.0。
5.根据权利要求1所述的一种筛选富硒香菇固体菌种的方法，其特征在于：步骤二中在基础培养基中分别添加Na2SeO3和有机硒，浓度依次为25mg/kg、30mg/kg、45mg/kg、60mg/kg、75mg/kg以及90mg/kg。
6.一种筛选富硒香菇固体菌种的装置，包括底座(1)，其特征在于：底座(1)包括前端板(101)、后端板(102)以及两个侧端板(103)，前端板(101)和后端板(102)之间设有能够360°转动的试管架(2)，试管架(2)上设有多根并排设置的试管(3)，底座(1)还包括底板(104)，底板(104)与前端板(101)、后端板(102)以及两个侧端板(103)共同构造成接水槽(105)，试管(3)底端伸入接水槽(105)内且试管(3)旋转到管口向下时能够将试管(3)内的液体倒入接水槽(105)内，接水槽(105)的侧壁上设有出水口(106)。
7.根据权利要求6所述的一种筛选富硒香菇固体菌种的装置，其特征在于：试管架(2)包括第一连接板(201)，第一连接板(201)上设有多个供试管(3)穿过的第一通孔(202)，第一连接板(201)的下表面上设有多对第一连接条(203)，每对第一连接条(203)设置于所述第一通孔(202)的两侧，第一连接条(203)的底部连接有用于容置试管(3)底部的第一连接座(204)，第一连接座(204)的横截面呈圆环状且与所述第一通孔(202)相对应，第一连接座(204)的下底面为与试管(3)底部外表面配合的弧面，每对第一连接条(203)之间固定有用于夹紧试管(3)的环形抱箍(205)；所述前端板(101)上设有与试管架(2)对应的转动电机(4)，转动电机(4)的电机轴与试管架(2)连接且用于驱动试管架(2)转动。
8.根据权利要求7所述的一种筛选富硒香菇固体菌种的装置，其特征在于：后端板(102)上且位于接水槽(105)的正上方设有能够沿后端板(102)高度方向上下滑动的加液机构(5)，加液机构(5)包括内部设有加液腔(502)的加液壳体(501)，加液腔(502)内设有上下两端分别伸出加液腔(502)的与试管架(2)相对的多组加液管组件，每组加液管组件上设有多个与相对应的试管架(2)上试管(3)一一对应的加液管(503)，加液壳体(501)的上端面上设有围绕单组加液管(503)设置的环形板(504)，环形板(504)与加液壳体(501)的上端面上形成加液槽(505)，加液槽(505)底面上且位于相邻加液管(503)之间设有与加液腔(502)连通的加液通道；加液壳体(501)的下表面上设有与试管架(2)上试管(3)一一对应的出液管(506)，加液管(503)的下端部伸入出液管(506)内且与出液管(506)下端面齐平，出液管(506)与加液管(503)之间形成出液通道(507)。
9.根据权利要求8所述的一种筛选富硒香菇固体菌种的装置，其特征在于：加液腔(502)内还设有多组与加液管组件对应的出液机构(6)，出液机构(6)包括第二连接板(601)，第二连接板(601)上设有多个供加液管(503)穿过的第二通孔(602)，第二连接板(601)的下表面上设有多对第二连接条(603)，每对第二连接条(603)设置于所述第二通孔(602)的两侧，第二连接条(603)的底部连接有呈圆筒状的第二连接座(604)，第二连接座(604)能够自上而下插入出液通道(507)内且第二连接座(604)的内外表面上分别设有与出液通道(507)形成密封的内密封垫(605)和外密封垫(606)，第二连接座(604)底面抵靠在第一连接板(201)上表面上时，内密封垫(605)与试管(3)上端部的外表面形成密封，第二连接座(604)的内表面与加液管(503)的外表面之间形成过液通道，外密封垫(606)与出液管(506)的内表面形成密封。
10.根据权利要求9所述的一种筛选富硒香菇固体菌种的装置，其特征在于：加液壳体(501)的上表面上设有第一气缸(7)，第一气缸(7)的活塞杆竖直布置且与第二连接板(601)连接；后端板(102)的上端部设有第二气缸(8)，第二气缸(8)用于驱动加液壳体(501)上下运动，加液壳体(501)的侧壁上设有滑块，后端板(102)上设有与滑块配合的滑轨；加液壳体(501)的与滑块相对的一端设有下端插入前端板(101)上端面内的导向杆(9)，导向杆(9)与前端板(101)过盈配合。
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