CN113025523A - 一株墨西哥假黄单胞菌及其在促进杂交构树繁育中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一株墨西哥假黄单胞菌及其在促进杂交构繁育中的应用，所述的墨西哥假黄单胞菌(Pseudoxanthomonas mexicana)HTZ4于2021年1月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.21617，具有固氮的效果，可以作为微生物氮肥施用于杂交构树的生长，能够有效促进杂交构树腋芽嫩枝扦插苗根生长的发育；也对茄链格孢菌、腐皮镰孢菌有抑制作用，能够作为微生物抑菌剂使用，可以有效提高杂交构树腋芽嫩枝扦插的生根速率和生根率，增加杂交构树扦插繁殖的存活率，降低组培苗繁育的成本，对杂交构树的种植推广具有重大意义。

Description

一株墨西哥假黄单胞菌及其在促进杂交构树繁育中的应用

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一株墨西哥假黄单胞菌及其在促进杂交构繁育中的应用。

背景技术

构树学名为Broussonetia papyrifera，属于桑科构树属，多年生落叶乔木。在我国分布广泛，应用历史悠久，具有非常好的开发利用前景。目前，它的主要经济价值集中在以下3个方面：一是利用树叶作为饲料代替粮食作物饲养家畜，“以树代粮”成为缓解饲料原料危机和确保食品安全的新途径；二是开发树皮和枝干作为高档造纸原料；三是采伐植株作为药材。杂交构树是中国科学院植物研究所通过野生构树资源收集，以核心种质为父本，同属灌木植物小构树为母本，通过现代育种技术与常规技术相结合进行种间杂交并通过太空搭载诱变筛选出的具有优良性状的新品种。与野生构树相比具有明显的杂交优势，不仅具有适应性强，耐干旱、耐盐碱、耐瘠薄、抗污染和病虫害等特点，而且具有生长速度快，产量大，营养价值高等优点。杂交构树在种植当年可砍伐，且次年萌生，可年收割多次。作蛋白质饲料使用，丰产期每公顷鲜重产量最多可高达150t，茎叶粗蛋白含量为19.2％，优于紫花苜蓿，钙、磷、锌、铁、锰、铜等微量元素，以及氨基酸和黄酮类等功能活性物质含量丰富，是家畜家禽优质的木本粗饲料来源。已在内蒙古、河南、贵州、山东、山西等20多个省(市) 进行了大面积的的推广种植，产业规模逐年增大。

杂交构树种子人工播种的发芽率低，仅4％，且后代会发生性状分离，无法保证母本的优良性状，目前杂交构树的繁育普遍采用组织培养及营养钵育苗方法，在组织培养的生根环节容易出现生根不良，根脆弱易断裂，根部产生的愈伤组织在炼苗驯化阶段易造成烂苗，造成组培苗生产周期长、后期驯化难、苗木纤弱、培育成本高，严重制约了杂交构树组培规模化生产的发展，阻碍杂交构树的大面积推广。扦插也是杂交构树繁育的常规手段，具有操作简单，历时周期短，且能保存母树的优良特性，对缓解设备要求较低，但扦插繁殖也具有明显弊端，生根速度慢，木质化程度、土壤基质类型以及激素浓度均会影响插条生根，使得生根率不高，扦插成活率不高，后期生长不良，难以满足当前大面积栽培及推广的需要。

假黄单胞菌(Pseudoxanthomonas)属黄单胞菌科(Xanthomonadaceae)丙型变形菌纲 (Gammaproteobacteria)。假黄单胞菌为革兰氏阴性菌，直杆状，不产芽孢，无菌柄。使用极生鞭毛进行弯曲运动或游动，在自然界中广泛存在。菌落在固体培养基上呈黄色、淡黄或浅褐色；专性需氧，具有以氧为最终电子受体的严格呼吸系统，最适生长温度为20-35℃。目前的报道中，假黄单胞菌被用于降解石油和多环芳烃，从而在环境治理中使用，例如专利(CN102250794B)公开了一种日本假黄单胞菌和微生物菌剂，所述的微生物菌剂对石油烃具有很强的降解能力，可以广泛地应用于降解石油烃以及对石油污染的修复；专利CN103087955B公开了一种降解烟碱类杀虫剂吡虫啉的假黄单胞菌CGMCC6648；其降解吡虫啉的主要途径为羟基化吡虫啉生成5-羟基吡虫啉；专利CN109294951A公开了一株假黄单胞菌GDMCC No.60454，利用该微生物制备的微生物制剂能够提高有机废物高温好氧堆肥的发酵温度，缩短堆肥发酵周期，提高堆肥发酵质量和效率。但是，目前并没有研究将假黄单胞菌应用在杂交构树的繁育方面，也没有任何研究发现假黄单胞菌对杂交构树的繁育具有促进作用。

发明内容

发明人在研究过程中意外的发现，假黄单胞菌对杂交构树的繁育，尤其是扦插生根具有显著的促进作用，具体技术方案如下：

本发明的第一目的是公开一株墨西哥假黄单胞菌(Pseudoxanthomonasmexicana)HTZ4，于2021年1月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为 CGMCC No.21617。

本发明的第二目的是提供所述的墨西哥假黄单胞菌(Pseudoxanthomonasmexicana)HTZ4 制备的扦插促生根营养剂。

本发明的第三目的是提供所述的墨西哥假黄单胞菌(Pseudoxanthomonasmexicana)HTZ4 在制备防治植物性病原菌的微生物抑菌剂中的应用。

优选地，所述的微生物抑菌剂可以直接或者添加在泥土中制备成粉末形式、溶液形式、悬浮剂形式、片剂形式或颗粒形式的基质。

优选地，所述的微生物抑菌剂可以抑制马铃薯早疫病和杂交构树根腐病。

本发明的第四目的是提供所述的墨西哥假黄单胞菌(Pseudoxanthomonasmexicana)HTZ4 在促进植物繁育中的应用。

优选地，所述的植物为杂交构树。

本发明的第五目的是提供所述的墨西哥假黄单胞菌(Pseudoxanthomonasmexicana)HTZ4 在促进植物扦插生根中的应用。

本发明的第六目的是提供所述的墨西哥假黄单胞菌(Pseudoxanthomonasmexicana)HTZ4 在促进植物固氮中的应用。

本发明的有益效果是：①本发明意外的从杂交构树根际土壤中分离纯化出了一株具有促生、固氮、生防修复等功能的墨西哥假黄单胞菌HTZ4；②所述的墨西哥假黄单胞菌HTZ4 的固氮酶活性为130.41nmol(C₂H₄)·h^-1·mL^-1，具有固氮的效果，可以作为微生物氮肥施用于杂交构树的生长；③所述的墨西哥假黄单胞菌HTZ4分泌吲哚乙酸(IAA)的能力强，达 44.62μg·mL^-1，能够有效促进杂交构树腋芽嫩枝扦插苗根生长的发育；④所述的额墨西哥假黄单胞菌对茄链格孢菌、腐皮镰孢菌有抑制作用，抑菌率分别为50.0％、42.85％，能够作为微生物抑菌剂使用。所述的墨西哥假黄单胞菌HTZ4是一株集促生、固氮、生防修复的多效菌株，可以有效提高杂交构树腋芽嫩枝扦插的生根速率和生根率，增加杂交构树扦插繁殖的存活率，降低组培苗繁育的成本，对杂交构树的种植推广具有重大意义。

附图说明

图1为本发明的假黄单胞菌HTZ4菌落照片

图2为本发明的假黄单胞菌HTZ4拮抗病原微生物的效果

具体实施方式

下面结合具体实施实例对本发明进行详细说明。以下实施实例有助于此领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所使用的Ashby培养基、LB液体培养基及其他试剂为现有产品。

下述实施例中所用的腐皮镰孢菌Fusarium solan GSICC60605、圆褐固氮菌Azotobacter chroococcum GSICC30117，公众可从中国工业微生物菌种保藏管理中心甘肃分中心获得该菌株，以重复本申请的实验。

下述实施例中所用的茄链格孢Alternaria solani ACCC37717，公众可从中国农业微生物菌种保藏管理中心获得该菌株，以重复本申请的实验。

以下实施例所述的“耐盐性试验”是用含不同浓度氯化钠的培养基检测微生物对盐耐受性的试验。

以下实施例所述的“糖发酵试验”是测验微生物具有不同的利用各种碳源的能力，其原理在于不同微生物具有不同的酶系。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源，但是它们在分解糖类物质的能力上有很大差异。有些细菌能分解某种糖产生有机酸(如乳酸、醋酸、丙酸等) 和气体(如氢气、甲烷、二氧化碳等)，有些细菌只产酸不产气。

以下实施例所述的“淀粉水解试验”是淀粉这种多糖水解成单糖的试验。微生物对大分子的淀粉不能直接利用，必须靠产生的胞外酶将大分子物质分解才能被微生物吸收利用。胞外酶主要为水解酶，通过水解酶的作用将分子量大的物质降解为较小的化合物，使其能被运输至细胞内。例如淀粉酶水解淀粉为小分子的糊精、双糖和单糖。淀粉遇到碘液变蓝。

以下实施例所述的“柠檬酸盐利用试验”是有的细菌如产气杆菌，能利用柠檬酸钠为碳源，因此能在柠檬酸盐培养基上生长，并分解柠檬酸盐后产生碳酸盐，使培养基变为碱性。此时培养基中的溴麝香草酚蓝指示剂由绿色变为深蓝色。不能利用柠檬酸盐为碳源的细菌，在该培养基上不生长，培养基不变色。

以下实施例所述的“接触酶反应”是指通过计算一个含有接触酶的纸盘，在盛有H2O2 的试管中根据漂浮时间来估计菌数。接触酶与H2O2发生反应放出氧气，样品接触酶阳性细菌含量越高，放出的氧气越多，纸盘上浮的时间越短；反之，纸盘上浮的时间就越长。接触酶多数腐败微生物是嗜冷性细菌，多数嗜冷细菌接触酶呈阳性，所以可以用接触酶反应来测定食品中的嗜冷性细菌。

以下实施例所述的“乙炔还原法”是指用气相色谱仪测定固气酶将乙炔还原为乙烯的量，用以估算固氮酶活性或氮量。固氮酶不仅能催化N₂还原成NH₃，还能催化乙炔还原为乙烯。乙炔和N₂对固氮酶的亲和力相似，它们的还原过程平行相关。通过气相层析可将乙炔和乙烯分离，并可灵敏、快速地进行定量测定，由此而间接地推算生物的固氮酶活性。反应式N₂+6H ⁺+6e^-→2NH₃，3C₂H₂+6H⁺+6e^-→3C₂H₄表明，还原3克分子乙炔相当于还原1克分子氮，故可由此而推算固氮量。1968年哈戴(R.W.F.Harday)等首先应用乙炔还原法测定生物固氮酶活性，并由此推算实验室和田间的生物固氮量。固氮酶活性定量计算方法有外标法，面积归一法、内标法和外加纯样法等。按对不同固氮体系固氮酶活性的测定又分为：①整体植株测定法，将待测植株移到密闭装置中培养1天后，注入乙炔，定时取样测定还原为乙烯的量。此法可测定叶片和根部的固氮酶活性。②离体根系或根瘤测定法，从土中取根系片段或根瘤，离体培育一定时间后注入乙炔测定其固氮酶活性。③原位测定，将金属圆筒插入植株周围土中，并用塑料袋将整个植株密封，注入乙炔，定期测定乙烯产生量。此法常用以测定水稻根际联合固氮酶活性。

实施例1菌株分离

称取土样10g(采自甘肃省天水市)装入三角瓶，加入100mL无菌水，静置20min后，28℃，转速200r·min^-1，振荡30min形成混悬液。吸取5mL混悬液加入到100mLAshby液体培养基中，28℃，转速180r·min^-1富集培养72h后，采用常规梯度稀释法，制成10^-4、10^-5、 10^-6、10^-7稀释梯度的菌悬液后，吸取0.1mL菌悬液在阿须贝氏平板培养基上进行凃布，每个梯度重复3次，置于恒温28℃，培养5d～7d。重复上述分离操作3次。待分离的菌落长出后用平板划线法继续在Ashby培养基平板上纯化菌株。得到一个菌落直径0.5～1mm，菌落颜色为淡黄色，菌落半透明，表面凸起，有粘性，边缘整齐，后期流动性强的菌株，具体形态如图1所示，将其命名为HTZ4，并分离纯化进行菌株的鉴定。

实施例2菌株鉴定

从以下三方面对分离纯化得到的菌株进行鉴定。

1.形态学鉴定

将实施例1分离得到的HTZ4进行单菌落培养并观察菌落，主要包括菌落的生长速度、大小、颜色、透明度、表面状态(是否平坦、凸起、褶皱或凹陷等)和边缘状态(是否整齐、不规则或放射状等)及后期生长状态。通过生物染色剂染色后进行显微镜镜检。

结果表明，分离纯化后得到的菌株HTZ4菌落：菌落直径0.5～1mm，菌落颜色为淡黄色，菌落半透明，表面凸起，有粘性，边缘整齐，后期流动性强。镜检结果为革兰氏阴性，短杆状，无芽孢。

2.16s rDNA序列同源性分离

常规方法培养上述步骤分离纯化得到的菌株HTZ4，提取菌株的总DNA作为基因扩增模板，以细菌16s rDNA通用引物：

27F：5-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3

1492R：5-CTACGGCTACCTTGTTACGA-3在PCR扩增仪上进行PCR反应。反应完成后，取2μl PCR产物进行1％琼脂糖凝胶电泳检测，确认PCR扩增片段。PCR产物用AxyPrep DNA凝胶回收试剂盒回收，具体操作按试剂盒说明书进行。取各个菌种纯化后的PCR产物，使用测序仪ABI3730-XL进行DNA测序。与NCBI GenBank中的已知序列进行同源性比较后，判定细菌种类，将细菌划分到属或种。

PCR基因扩增得到菌株HTZ4的16s rDNA基因序列如SEQ ID No.1所示，测定序列后与 NCBI数据库中已公开的16s rDNA序列进行在线同源性比较，结果显示HTZ4与墨西哥假黄单胞菌(Pseudoxanthomonas mexicana)的同源性最高，达到97.87％。

3.生理生化特征分析

所述菌株HTZ4的生理生化特征测定结果如下：

生长温度：4℃不生长，28℃生长，37℃生长；

耐盐性实验：0.5％NaCl生长，3％NaCl生长，5～10％NaCl不生长；

糖发酵实验：葡萄糖阳性，D-木糖阴性，甘露醇阳性，乳糖阳性，纤维素阴性，L-阿拉伯糖阴性；

水解淀粉实验：阳性；

利用柠檬酸盐：阴性；

水解酪蛋白：阳性；

接触酶反应：阳性；

脂肪酶反应：阳性。

综上，HTZ4可在含0.5％-3％NaCl的培养基上生长，具有耐盐特性，能够利用葡萄糖、 D-木糖、乳糖、纤维素、L-阿拉伯糖；也能够利用柠檬酸盐；亦能够水解酪蛋白；并产过氧化氢酶。

鉴于上述形态、16s rDNA序列同源性分析、生理生化特征分析结果，将实施例1中分离纯化得到的菌株HTZ4鉴定为细菌域墨西哥假黄单胞菌(Pseudoxanthomonasmexicana)。所述的墨西哥假黄单胞菌(Pseudoxanthomonas mexicana)HTZ4已于2021年01月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.21617。

实施例3墨西哥假黄单胞菌HTZ4对促进杂交构树腋芽嫩枝扦插苗生根效果测试。

试验采用温室营养钵法，地点设在甘肃省科学院生物研究所中试试验基地温室大棚，将草炭土、珍珠岩、蛭石按照5:2:2的比例混合，灭菌处理后装营养钵。在保障杂交构树种质特性和利用组培苗生长发育优势的前提下，采集田间一年生组培苗上长度约15cm，生长健壮、发育正常、无病虫害、半木质化的带腋芽的杂交构树嫩枝，将大叶剔除，在嫩枝基部蘸上黄泥浆，插入已打好孔的营养钵基质中，掩埋嫩枝基部，确保基质和腋芽充分接触，栽完后用本发明提供的菌株菌悬液灌根，浇透，以每株浇灌液体体积200毫升为标准。搭建小拱棚，使温度控制在32℃、湿度90％。10d后观察出根情况，统计生根率和平均根长、根数。同时再浇灌1次菌悬液，20d时再浇灌1次，30d观察幼苗的生长情况，统计株高、叶片数，平均根数、生根率、根径(根基部直径)。

黄泥浆的配制：先将黄土用筛子(20-40目)筛选去除杂物，称取60～80g市售生根育苗剂(微量元素≥10％)与1.5～2.0kg黄泥调和成泥浆使用。

菌悬液制备：将菌株接种到LB液体培养基中，30℃、180r·min^-1振荡培养48h。将菌液离心，无菌水洗涤菌体3次，调节菌悬液浓度至10⁸CFU·mL^-1。

以浇灌相同体积同时分离得到的另外两株假黄单胞菌HTZ5和假黄单胞菌ZY9的菌悬液，1株也能分泌吲哚乙酸的根癌农杆菌HTZ1的菌悬液、无菌LB液体培养基、无菌水为对照组，重复上述杂交构树带腋芽的嫩枝扦插苗生根试验操作。结果如下表：

表1不同组别的生根及生长情况

ab表示p<0.05，具有显著性差异

结果表明，本发明公开的墨西哥假黄单胞菌HTZ4在初期能够显著促进杂交构树腋芽侧枝生根，其生根率、根长与根数显著高于假黄单胞菌HTZ5、假黄单胞菌ZY9、根癌农杆菌HTZ1、无菌LB液体培养基及无菌水处理过的扦插苗，能够缩短生根时间，后期生长中，墨西哥假黄单胞菌HTZ4处理过的扦插苗叶片数、根数和根径均显著高于假黄单胞菌HTZ5、假黄单胞菌ZY9、根癌农杆菌HTZ1、无菌LB液体培养基及无菌水对照组，能够有效促进杂交构树组培扦插苗的生长发育。

实施例4墨西哥假黄单胞菌菌HTZ4的分泌吲哚乙酸的活性测试

对实施例1分离纯化得到的墨西哥假黄单胞菌HTZ4进行分泌吲哚乙酸(IAA)能力的测定，具体方法如下所述：

定性测定：将分离纯化后的墨西哥假黄单胞菌HTZ4接种于含有L-色氨酸(100mg·L^-1) 的LB液体培养基，30℃，180r·min^-1摇床培养1d。取50μL菌悬液滴于白色陶瓷板上，同时加50μL Salkowski比色液(50mL 35％HClO₄+1mL 0.5M FeCl₃)。将加入50μL 50mg·L^-1吲哚乙酸的比色液作为阳性对照。白色陶瓷板于室温避光放置30min后观察，颜色变红者表示能够分泌吲哚乙酸。

定量测定：测定上述菌悬液的OD600_nm值，将菌悬液在4℃，10000r·min^-1离心10min，取上清液加入等体积Salkowski比色液，避光静置30min，测定其OD_530nm的值。计算菌浓度 OD_600nm值为1时，单位体积发酵液中吲哚乙酸的含量。标准曲线的绘制采用分析纯的吲哚乙酸梯度稀释制备。

结果显示，对墨西哥假黄单胞菌HTZ4的分泌IAA能力的定性测定中，将分泌吲哚乙酸能力表示为，能力越强，颜色越深，能力由弱到强表现为不变色、浅红色、粉红色、红色，墨西哥假黄单胞菌HTZ4的显色反应表现为红色。定量测试得出假黄单胞菌HTZ4菌悬液中 IAA的分泌量为44.62μg·mL^-1，说明墨西哥假黄单胞菌HTZ4具有分泌吲哚乙酸的能力，可以促进植物的生长发育。

实施例5墨西哥假黄单胞菌HTZ4的固氮酶活性测试

对实施例1分离纯化得到的墨西哥假黄单胞菌HTZ4进行固氮酶活性测试，采用乙炔还原法，具体方法如下所述：取一环墨西哥假黄单胞菌HTZ4接种于盛有5ml半固体Ashby培养基的血清瓶中，28℃下培养48h。在无菌台中将血清瓶瓶盖换成橡胶塞，并用无菌注射器抽出1mL气体，然后注入1mL乙炔，密封，再在28℃下培养36h。用无菌注射器从血清瓶中抽取混合气体0.2ml注入气相色谱仪，测定乙烯生成量，根据以下公式计算固氮酶活性。

N＝hxCV/(24.9hst)。

其中N为产生乙烯的浓度nmol(C₂H₄)·h^-1·mL^-1即固氮酶活性，hx为样品乙烯峰面积值， C为标准乙烯浓度(nmol·ml^-1)，V为培养容器体积(mL)，24.9为常数，hs为标准乙烯峰面积值，t为样品培养时间(h)。以固氮培养基培养对照圆褐固氮菌，以同样的方法测定其固氮酶活性作为参照。以上实验均设三组重复。

结果显示，墨西哥假黄单胞菌HTZ4的固氮酶活性为130.41nmol(C₂H₄)·h^-1·mL^-1，而圆褐固氮菌的固氮酶活性为124.60nmol(C₂H₄)·h^-1·mL^-1，说明墨西哥假黄单胞菌HTZ4具有较高固氮的活性。

实施例6墨西哥假黄单胞菌HTZ4对茄链格孢菌、腐皮镰孢菌的抑制作用测试

采用滤纸条法测定墨西哥假黄单胞菌HTZ4对茄链格孢菌、腐皮镰孢菌的抑制作用测试。用LB液体培养基培养假黄单胞菌HTZ4，待菌液浓度达到OD₆₀₀＝1时，取菌液备用。分别在 PDA培养基平板中央接种直径为7mm的茄链格孢菌、腐皮镰孢菌菌丝块，分别进行如下三种处理：

a对照：无处理；

b无菌水滤纸条对照：距菌丝块两侧1.5cm位置放置用无菌水浸湿的滤纸条；

c拮抗试验：距菌丝块两侧1.5cm位置放置浸湿固氮菌待测菌液的滤纸条，28℃培养7d，观察抑菌效果。

待无菌水滤纸条对照铺满整个平板时，垂直滤纸条方向测量对照与处理的菌落直径，计算抑制率。

抑制率＝(无菌水滤纸条对照菌落直径-处理c菌落直径)/无菌水滤纸条对照菌落直径×100％。

实验结果如图2所示，墨西哥假黄单胞菌HTZ4对茄链格孢菌、腐皮镰孢菌有较好的抑制作用，抑制率分别为50.0％、42.85％，可以作为微生物抑菌剂使用。

综上所述，本发明从杂交构树根际土壤中分离纯化出了一株墨西哥假黄单胞菌HTZ4；所述的墨西哥假黄单胞菌HTZ4的固氮酶活性为130.41nmol(C₂H₄)·h^-1·mL^-1，具有固氮的效果，可以作为微生物氮肥施用于杂交构树的生长；所述的墨西哥假黄单胞菌HTZ4分泌吲哚乙酸 (IAA)的能力强，达44.62μg·mL^-1，能够有效促进杂交构树腋芽嫩枝扦插苗根生长的发育；所述的额墨西哥假黄单胞菌对茄链格孢菌、腐皮镰孢菌有抑制作用，抑菌率分别达到50.0％、 42.85％，能够作为微生物抑菌剂使用。所述的墨西哥假黄单胞菌HTZ4是一株集促生、固氮、生防修复的多效菌株，可以有效提高杂交构树腋芽嫩枝扦插的生根速率和生根率，增加杂交构树扦插繁殖的存活率，降低组培苗繁育的成本，对杂交构树的种植推广具有重大意义。

序列表

<110> 甘肃省科学院生物研究所

<120> 一株墨西哥假黄单胞菌及其在促进杂交构树繁育中的应用

<160> 1

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 1554

<212> DNA

<213> 墨西哥假黄单胞菌(Pseudoxanthomonas mexicana)

<400> 1

ggttaccttg ttacgacttc accccagtca tcggccacac cgtggcaagc gccctcccga 60

aggttaagct acctgcttct ggtgcaacaa actcccatgg tgtgacgggc ggtgtgtaca 120

aggcccggga acgtattcac cgcagcaatg ctgatctgcg attactagcg attccgactt 180

catggagtcg agttgcagac tccaatccgg actgagatta ggtttctggg attggctcac 240

cctcgcggga ttgcagccct ctgtcctaac cattgtagta cgtgtgtagc cctggtcgta 300

agggccatga tgacttgacg tcatccccac cttcctccgg tttgtcaccg gcggtctcct 360

tagagttccc accgttacgt gctggcaact aaggacaagg gttgcgctcg ttgcgggact 420

taacccaaca tctcacgaca cgagctgacg acagccatgc agcacctgtc tcacggttcc 480

cgaaggcacc aatccatctc tggaaagttc cgtggatgtc aagaccaggt aaggttcttc 540

gcgttgcatc gaattaaacc acatactcca ccgcttgtgc gggcccccgt caattccttt 600

gagtttcagt cttgcgaccg tactccccag gcggcgaact taacgcgtta gcttcgatac 660

tgggtgccaa gttgcaccca acatccagtt cgcatcgttt agggcgtgga ctaccagggt 720

atctaatcct gtttgctccc cacgctttcg tgcctcagtg tcagtgttgg cccaggatgc 780

cgccttcgcc acagatgttc cttccgatct ctacgcattt cactgctaca ccggaaattc 840

cgcatccctc taccacactc tagtgatcca gtatccactg caattcccag gttgagccca 900

gggctttcac aacggactta aaccaccacc tacgcacgct ttacgcccag taattccgag 960

taacgcttgc acccttcgta ttaccgcggc tgctggcacg aagttagccg gtgcttattc 1020

tttgggtacc gtcatcccta ccgggtatta accgacagga tttctttccc aacaaaaggg 1080

ctttacaacc cgaaggcctt cttcacccac gcggtatggc tggatcaggc ttgcgcccat 1140

tgtccaatat tccccactgc tgcctcccgt aggagtctgg accgtgtctc agttccagtg 1200

tggctgatca tcctctcaga ccagctacgg atcgtcgcct tggtgggcct ttaccccacc 1260

aactagctaa tccgacatcg gctcatccaa tcgcgtaagg tcttgcgatc ccctactttc 1320

acccgaaggt cgtatgcggt attagcgtaa gtttccctac gttatccccc acgacagggt 1380

agattccgat gtattcctca cccgtccgcc actcgccacc caaggagcaa gctcctctgt 1440

gctgccgttc aacttgcatg tgttaggcct accgccagcg ttcactctga gccatgatca 1500

aactctagtc gtggttacct tgttacgact tatcctgagc caggatcaaa ctct 1554

Claims (9)

1.一株墨西哥假黄单胞菌(Pseudoxanthomonas mexicana)HTZ4，其特征在于，所述的墨西哥假黄单胞菌(Pseudoxanthomonas mexicana)HTZ4于2021年1月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.21617。

2.一种如权利要求1所述的墨西哥假黄单胞菌(Pseudoxanthomonas mexicana)HTZ4制备的扦插促生根营养剂。

3.如权利要求1所述的墨西哥假黄单胞菌(Pseudoxanthomonas mexicana)HTZ4在制备防治植物性病原菌的微生物抑菌剂中的应用。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的微生物抑菌剂可以直接或者添加在泥土中制备成粉末形式、溶液形式、悬浮剂形式、片剂形式或颗粒形式的基质。

5.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的微生物抑菌剂可以抑制马铃薯早疫病和杂交构树根腐病。

6.如权利要求1所述的墨西哥假黄单胞菌(Pseudoxanthomonas mexicana)HTZ4在促进植物繁育中的应用。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的植物为杂交构树。

8.如权利要求1所述的墨西哥假黄单胞菌(Pseudoxanthomonas mexicana)HTZ4在促进植物扦插生根中的应用。

9.如权利要求1所述的墨西哥假黄单胞菌(Pseudoxanthomonas mexicana)HTZ4在促进植物固氮中的应用。

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