CN113009062A - 地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法 - Google Patents

地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法 Download PDF

Info

Publication number
CN113009062A
CN113009062A CN202110196214.0A CN202110196214A CN113009062A CN 113009062 A CN113009062 A CN 113009062A CN 202110196214 A CN202110196214 A CN 202110196214A CN 113009062 A CN113009062 A CN 113009062A
Authority
CN
China
Prior art keywords
solution
rehmannia root
rehmannia
sample
preparing
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202110196214.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113009062B (zh
Inventor
刘国雄
闫小巧
林敏生
伏宝香
苏碧茹
伍秀珠
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangzhou Baiyunshan Zhongyi Pharmaceutical Co ltd
Original Assignee
Guangzhou Baiyunshan Zhongyi Pharmaceutical Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangzhou Baiyunshan Zhongyi Pharmaceutical Co ltd filed Critical Guangzhou Baiyunshan Zhongyi Pharmaceutical Co ltd
Priority to CN202110196214.0A priority Critical patent/CN113009062B/zh
Publication of CN113009062A publication Critical patent/CN113009062A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113009062B publication Critical patent/CN113009062B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/90—Plate chromatography, e.g. thin layer or paper chromatography
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明涉及一种地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法：取待测样品，制备供试品溶液；取水苏糖标准品制备对照品溶液，或/和，取地黄对照药材制备对照药材溶液；吸取供试品溶液以及对照品溶液或/和对照药材溶液，点于薄层板，以乙酸乙酯、乙醇、水、氨水体积比为(1.5～2.5):(4.5～5.5):(3.5～4.5):(0.4～0.6)的混合物为展开剂展开，干燥，喷显色剂显色，检视。本发明不仅能够用于地黄药材的鉴别，还能用于地黄饮片以及用该地黄饮片制备的成药的鉴别，克服了传统薄层层析鉴别存在的使用局限性，可以基于生产流程的推进，应用于药材筛选、饮片制备、成药制备各个环节所得产品的鉴别中。

Description

地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法
技术领域
本发明涉及中药质量控制技术领域，特别是涉及一种地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法。
背景技术
地黄，为玄参科植物地黄(Rehmannia glutinosa Libosch.)的新鲜或干燥块根。秋季采挖，除去芦头、须根及泥沙，鲜用或炮制后用。一般情况下，地黄分为鲜地黄和生地黄。地黄性凉，味甘苦，具有滋阴补肾、养血补血、凉血的功效。凡阴虚血虚肾虚者食之，颇有益处。此外，地黄有强心利尿、解热消炎、促进血液凝固和降低血糖的作用。
传统的鉴别地黄、饮片或者成药的薄层层析方法举例如下：
一种改进的地黄及加工炮制品薄层鉴别方法，该技术方案中，供试品溶液的制备包括：取样品(生地黄、酒炙生地黄、焦生地黄、生地黄炭、熟地黄、熟地黄炭)，加乙醇，超声处理，滤过，滤液蒸干，加水溶解，滤过，滤液通过大孔吸附树脂柱，用水洗脱，弃去水液，再用30％乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，加乙醇使溶解；对照品采用梓醇；薄层层析以氯仿-甲醇(7:3)为展开剂，展开后喷以10％硫酸乙醇液并于105℃下加热显色。
中成药中熟地黄的薄层色谱鉴别，该技术方案应用薄层层析色谱鉴别了10个厂家生产的丸剂、胶囊剂、片剂、冲剂4种剂型11批成药中的熟地黄。采用的吸附剂为硅胶G，展开剂为甲苯-醋酸乙酯(2:2)或苯-醋酸乙酯(2:2)，显色剂为2,4-二硝基苯肼试液或者0.1％蒽酮硫酸溶液。
一种中药组合物的检测方法，所涉熟地黄的鉴别包括：试品溶液制备：称取所述中药组合物，加入纯水溶解，用正丁醇萃取，静置，弃去正丁醇液，向水层加入无水乙醇，振荡，静置，弃去乙醇液，向沉淀加入甲醇，超声处理，滤过，蒸干滤液，冷却至室温，残渣加甲醇溶液使溶解，即得；对照品溶液的制备：另取水苏糖对照品适量，加有机溶剂制成对照品的溶液；鉴别：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液，以乙酸乙酯-甲醇-水-冰醋酸为展开剂展开，喷以硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。
一种六味补血胶囊的质量控制方法，包括如下步骤：取熟地黄对照药材2.5g，剪碎，用粉碎机将其捣碎，加入50％甲醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液挥干，加入甲醇2ml使其溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，分别吸取对照药材溶液10μl，供试品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝16∶1∶2为展开剂，展开，取出，晾干，用0.5％的2，2-二苯基-1-苦肼基无水乙醇溶液浸渍，晾干。
一种对用于养阴清热润肠通便的药物组合物进行质量检测的方法，以及对梓醇、地黄药材、水苏糖进行鉴别；其照如下方法进行地黄药材鉴别试验，呈现与地黄对照药材相同颜色的斑点：取供试品1ml，置25ml容量瓶中，加水稀释至刻度，作为供试品溶液；另取地黄对照药材0.5g，加水25m1，超声处理20分钟，离心，取上清液作为对照药材溶液；照中国药典2015年版四部通则0502的薄层色谱法的规范试验，吸取供试品溶液及对照药材溶液各3μl，分别点于同一用4％磷酸二氢钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以丙酮-乙醇-水(1：1：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％二苯胺丙酮溶液-2％苯胺丙酮溶液-磷酸(5：5：1)，在105℃烘10分钟；比较供试品色谱中在与对照药材色谱相应的位置上的斑点的颜色；其照如下方法进行水苏糖鉴别试验，呈现与水苏糖对照品相同颜色的斑点：取供试品2ml，置50ml的容量瓶中，加水稀释至刻度，作为供试品溶液；另取水苏糖对照品，加水制成每1ml含10mg的溶液作为对照品溶液；照中国药典2015年版四部通则0502的薄层色谱法的规范试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-吡啶-水(4：4：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以显色剂(取二苯胺2g-苯胺2ml-85％磷酸20ml，加丙酮至200ml)使显色，热风加热至斑点显色清晰，置日光下检视；比较供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上的斑点的颜色。
以上传统的地黄成分的薄层层析鉴别存在明显的使用局限性，例如用于鉴别成药的工艺却无法很好地用于饮片鉴别等。基于该情况，在生产实践中，难以根据生产流水线的推进、通过统一的鉴别操作完成从地黄药材到地黄饮片最后至成品药的鉴别。
发明内容
基于此，本发明提供一种薄层鉴别方法，该薄层鉴别方法不仅能够用于地黄药材的鉴别，还能用于地黄饮片以及用该地黄饮片制备的成药的鉴别。
一种地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法，所述鉴别方法包括如下步骤：
取待测样品，制备供试品溶液；
取水苏糖标准品制备对照品溶液，或/和，取地黄对照药材制备对照药材溶液；
吸取所述的供试品溶液以及所述的对照品溶液或/和对照药材溶液，点于薄层板，以乙酸乙酯、乙醇、水、氨水体积比为(1.5～2.5):(4.5～5.5):(3.5～4.5):(0.4～0.6)的混合物为展开剂展开，干燥，喷显色剂显色，检视。
在其中一个实施例中，制备所述供试品溶液的步骤包括：取所述待测样品，加水，超声处理，离心，蒸干所得上清液，所得残渣用有机溶剂提取。
在其中一个实施例中，每1g所述待测样品对应的所述水的用量为7.5ml～30ml。
在其中一个实施例中，所述超声处理的时长为10min～20min。
在其中一个实施例中，所述有机溶剂选用甲醇。
在其中一个实施例中，每1g所述待测样品对应的所述有机溶剂的用量为0.25ml～1ml。
在其中一个实施例中，所述显色剂选用硫酸体积百分含量为8％～12％的硫酸乙醇溶液。
在其中一个实施例中，所述显色的温度为100℃～110℃。
在其中一个实施例中，所述检视在日光下进行或者在紫外线下进行。
在其中一个实施例中，所述展开的环境温度为5℃～28℃。
在其中一个实施例中，所述展开的环境湿度为25％～65％。
在其中一个实施例中，所述薄层板的吸附剂选用硅胶G。
在其中一个实施例中，所述地黄饮片制备的成药为消渴丸。
在其中一个实施例中，所述待测样品为地黄饮片制备的成药时，所述鉴别方法还包括用地黄饮片缺样样品制备缺样对照溶液，并将所得缺样对照溶液与所述的供试品溶液以及所述的对照品溶液或/和对照药材溶液点于同一薄层板进行展开。
在其中一个实施例中，所述制备缺样对照溶液的步骤包括：取所述地黄饮片缺样样品，加水，超声处理，离心，蒸干所得上清液，所得残渣用有机溶剂提取。
在其中一个实施例中，所述制备对照药材溶液的步骤包括：取所述地黄对照药材，加水，超声处理，离心，蒸干所得上清液，所得残渣用有机溶剂提取。
本发明具备如下有益效果：
本发明通过对展开剂配方的改进，形成特定的薄层鉴别工艺，该薄层鉴别工艺，不仅能够用于地黄药材的鉴别，还能用于地黄饮片以及用该地黄饮片制备的成药的鉴别。本发明提供的地黄的薄层鉴别工艺，克服了传统薄层层析鉴别存在的使用局限性，可以基于生产流程的推进，应用于药材筛选、饮片制备、成药制备各个环节所得产品的鉴别中，无需针对不同环节产品的特性设计不同的鉴别工艺。另外，本发明提供的鉴别方法，操作简便，专属性强，重现性好，灵敏度高。
附图说明
图1为实施例1以水苏糖标准品做对照所得地黄药材薄层图谱。
图2为实施例1以地黄对照药材对对照所得地黄饮片薄层图谱。
图3为实施例1比较方案中不同展开剂种类所得地黄薄层图谱。
图4为实施例1比较方案中不同展开剂配比所得地黄薄层图谱。
图5为实施例1地黄薄层鉴别方法耐用性考察。
图6为实施例1地黄薄层鉴别专属性考察。
图7、图8、图9、图10、图11为实施例1地黄药材样品和地黄饮片样品薄层鉴别色谱图。
图12为实施例2消渴丸地黄薄层图谱。
图13为实施例2比较方案所得消渴丸地黄薄层图谱。
图14为实施例2中8批消渴丸地黄薄层图谱。
图15为实施例2地黄常温、低温薄层对比图谱。
图16为实施例2地黄正常湿度、高湿度薄层对比图谱。
图17为实施例2地黄正常湿度、低湿度薄层对比图谱。
图18为实施例2地黄不同厂家预制板薄层对比图谱。
具体实施方式
为了便于理解本发明，下面将对本发明进行更全面的描述。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
本发明实施例提供一种地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法，所述鉴别方法包括如下步骤：
取待测样品，制备供试品溶液；
取水苏糖标准品制备对照品溶液，或/和，取地黄对照药材制备对照药材溶液；
吸取所述的供试品溶液以及所述的对照品溶液或/和对照药材溶液，点于薄层板，以乙酸乙酯、乙醇、水、氨水体积比为(1.5～2.5):(4.5～5.5):(3.5～4.5):(0.4～0.6)的混合物为展开剂展开，干燥，喷显色剂显色，检视。
优选地，制备所述供试品溶液的步骤包括：取所述待测样品，加水，超声处理，离心，蒸干所得上清液，所得残渣用有机溶剂提取。
可以理解的是，本发明实施例不对供试品溶液制备做特别限定，为了获得较好的提取效果确保鉴别质量，可以采用适宜的制备条件，包括但不限于如下优化条件：每1g所述待测样品对应的所述水的用量为7.5ml～30ml，所述超声处理的时长为10min～20min。所述有机溶剂选用甲醇，每1g所述待测样品对应的所述有机溶剂的用量为0.25ml～1ml。
可以理解的是，本发明实施例对对照品溶液的浓度不做特别限定，可以采用任意合适的浓度，包括但不限于0.8mg/ml～1.2mg/ml。
优选地，所述显色剂选用硫酸体积百分含量为8％～12％的硫酸乙醇溶液。
传统的薄层鉴别地黄的技术方案，通常在制备供试品溶液时需要加入乙醇等，步骤复杂，不利于生产一线的快速鉴别，因此，本发明实施例的目的是简化操作步骤。然而，在实践中发现，如果省去乙醇等处理的步骤，会导致后续显色慢、显色耗时显著延长。发明人发现通过将显色剂硫酸乙醇溶液控制在8％～12％，能够有效缩短显色时长。
优选地，所述显色的温度为100℃～110℃。
优选地，所述检视在日光下进行或者在紫外线下进行。
优选地，所述展开的环境温度为5℃～28℃。
优选地，所述展开的环境湿度为25％～65％。
优选地，所述薄层板的吸附剂选用硅胶G，本发明实施例所涉薄层板例如本领域的烟台板、默克板等。
优选地，所述地黄饮片制备的成药为消渴丸。本发明的鉴别方法，适用于消渴丸地黄组分的快速鉴别，填补消渴丸地黄定性鉴别的技术空白，为消渴丸及其原料质量控制提供参考和依据。
优选地，所述待测样品为地黄饮片制备的成药时，所述鉴别方法还包括用地黄饮片缺样样品制备缺样对照溶液，并将所得缺样对照溶液与所述的供试品溶液以及所述的对照品溶液或/和对照药材溶液点于同一薄层板进行展开。
优选地，制备所述缺样对照溶液的步骤包括：取所述地黄饮片缺样样品，加水，超声处理，离心，蒸干所得上清液，所得残渣用有机溶剂提取。
优选地，制备所述对照药材溶液的步骤包括：取所述地黄对照药材，加水，超声处理，离心，蒸干所得上清液，所得残渣用有机溶剂提取。
可以理解的是，本发明实施例的缺样对照溶液和对照药材溶液的制备均可以参考供试液的制备。在制备本发明实施例所需样液时，为了提高效率，可以将地黄药材、地黄饮片以及成药进行粉碎，例如粉碎成粉末，然后再进行提取。
本发明实施例所述的地黄饮片，其炮制工艺：将地黄拣除杂质，大小分开；取净选后的地黄，用切药机切成厚片，厚度≤3cm。
实施例1、地黄药材、地黄饮片的薄层色谱鉴别方法
本实施例提供一种地黄药材和地黄饮片的薄层色谱鉴别方法，包括如下几个部分：
一、地黄药材和地黄饮片的薄层色谱鉴别方法
1、以水苏糖为对照品进行鉴别，鉴别包括如下步骤：
取本品(地黄药材)粉末1g，加水30ml，超声处理15分钟，离心，上清液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
另取水苏糖适量，加甲醇配制成1mg/ml的对照品溶液。
照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取供试品溶液5μl、对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水-氨水(2:5:4:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
结果参见图1，图中1是水苏糖对照品，2是地黄药材。结果显示，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2、以地黄对照药材进行鉴别，鉴别包括如下步骤：
取本品(地黄饮片)粉末1g，加水30ml，超声处理15分钟，离心，上清液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；
另取地黄对照药材1g，同法制成对照药材溶液。
照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述溶液5μl分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水-氨水(2:5:4:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。对于中药企业来讲，该部分以地黄对照药材为对照，相对于水苏糖标准品，易于获取，无需购于第三方公司。
3、比较方案
(1)初步拟定方法，包括如下步骤：
取地黄药材粉末1g，加水15ml，超声处理15分钟，离心，取上清液，加乙醇50ml，混匀，离心，上清液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；
另取水苏糖适量，加甲醇配制成1mg/ml的对照品溶液。
吸取上述溶液适量，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水-氨水(5:5:4:0.3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，在紫外366nm下检视。
结果见图2，图中，1为水苏糖对照品(5ul)；2为水苏糖对照品(10ul)；3为地黄药材(5ul)；4为地黄药材(10ul)。由图可见，在与对照品相应的位置上，药材色谱显相同颜色斑点，但斑点的成点性差。并且，操作繁琐、效率低。
(2)展开剂种类的比较
以乙酸乙酯-乙醇-水-乙酸(5:5:4:0.2)为展开系统，按上述(1)方法点样，展开，显色检视。
结果见图3，图3中左图为日光检视图，右图为紫外366nm检视图，左图和右图中1为水苏糖对照品(10ul)，2为地黄药材(5ul)。结果显示，乙酸替换氨水后，斑点分离效果差，故沿用展开系统乙酸乙酯-乙醇-水-氨水。
(3)展开剂配比的比较
以乙酸乙酯-乙醇-水-氨水(5:5:4:0.2)为基础，对展开剂的不同配比进行了考察，考察展开剂分别为乙酸乙酯-乙醇-水-氨水(8：5：4：0.2)、乙酸乙酯-乙醇-水-氨水(2：5：4：0.2)结果见图4。
图4中，1为水苏糖对照品(10ul)，2为地黄药材(5ul)。结果显示，展开系统为乙酸乙酯-乙醇-水-氨水(2:5:4:0.5)的薄层色谱图谱特征斑点分离效果最佳，成点性好。因此，确定展开系统为乙酸乙酯-乙醇-水-氨水(2:5:4:0.5)。
4、供试品溶液的制备和显色检视方法的优化
该部分相对于“3、比较方案”，将原供试品溶液制备方法“离心……”后的操作去掉，即：取地黄药材粉末1g，加水30ml，超声处理15分钟，离心，上清液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。其余步骤保持不变。结果，显色过程中发现喷以5％硫酸乙醇溶液在105℃加热至斑点清晰所需时间显著延长，超过30分钟。为解决该问题，本发明实施例通过采用提升显色液浓度的方式解决该问题，具体地以喷以10％硫酸乙醇溶液，将显色时间缩短。
通过对比日光和紫外366nm两种检视方法，结果发现，在日光下，特征斑点已清晰可见，在紫外366nm下，斑点清晰度受显色加热时间的影响而不稳定，因此检视方法选择在日光下。
二、方法耐用性考察
参照本实施例第一部分第1条记载的方法，对温度、湿度、不同品牌预制板分别进行了方法耐用性考察，结果显示图5，除了青岛牌预制板之外，其余条件本方法均适用。由于环境相对湿度对薄层板的活性影响较大，寡糖类成分对预制板的活性要求较高，因此建议在相对湿度低于65％的条件下点样。
三、专属性考察
取地黄药材粉末1g，加水30ml，超声处理15分钟，离心，上清液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为地黄药材供试品溶液；
另取地黄饮片粉末1g，同法制成地黄饮片供试品溶液；
另取熟地黄药材剪碎成小块，同法制成熟地黄供试品溶液；
另取地黄对照药材1g，同法制成对照药材溶液；
分别取甘露三糖、棉籽糖、水苏糖适量，加水溶解配制成1mg/ml作为对照品溶液；
分别吸取对照品溶液10μl，对照药材溶液、熟地黄供试品溶液、地黄药材供试品溶液、地黄饮片供试品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水-氨水(2:5:4:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
结果见图6中，1为甘露三糖，2为棉籽糖，3为水苏糖，4为地黄对照药材，5为熟地黄药材，6为地黄药材，7为地黄饮片。
结果显示，在Rf＝0.49、0.57、0.72处，对照品、地黄对照药材、地黄药材、地黄饮片色谱均显相同颜色的特征斑点，熟地黄药材无对应斑点，提示本方法专属性好，能有效鉴别地黄和熟地黄。
四、样品检测
参照本实施例第一部分第1条记载的方法，从产地、药材市场、企业收集了30批地黄药材样品、20批地黄饮片样品，按拟定方法进行测定，均符合标准，结果如下：
表1、地黄药材样品信息表
编号 来源 编号 来源
D1 山西省运城市万荣县北阳村 D16 中一药业批号170701，产地河南
D2 山西省运城市万荣县北阳村 D17 中一药业批号170702，批号河南
D3 山西省运城市万荣县北阳村 D18 山西临汾市襄汾县大邓乡
D4 山西省运城市万荣县里望村 D19 山西临汾市古县古阳镇
D5 山西省运城市万荣县里望村 D20 山西浑源县永安镇
D6 山西省运城市万荣县里望村 D21 山西运城市永济市张营镇
D7 山西省运城市万荣县里望村 D22 山西运城市永济市芮城县大王镇
D8 河南省焦作市武陟县西陶镇 D23 河南焦作市孟州市槐树乡
D9 河南省焦作市武陟县西陶镇 D24 河南焦作市孟州市谷旦镇
D10 河南省焦作市武陟县西陶镇 D25 河南焦作市孟州市南庆镇
D11 河南省焦作市武陟县西陶镇 D26 河南焦作市武陟县大封镇
D12 河南省焦作市武陟县西陶镇 D27 河南焦作市武陟县北郭乡
D13 河南省焦作市武陟县西陶镇 D28 河南焦作市温县
D14 河南省焦作市武陟县北郭乡西余会村 D29 河南焦作市武陟县北郭乡
D15 中一药业批号170741，产地河南 D30 河南焦作市孟州市
表2、地黄饮片样品信息表
编号 来源 编号 来源
DY1 河南焦作大丰镇 DY11 广州市中药饮片厂，批号YPA7I0001
DY2 河南焦作大丰镇 DY12 广州市中药饮片厂，批号YPA7E0001
DY3 河南焦作大丰镇 DY13 岭南中药饮片厂，批号1711001
DY4 河南焦作大丰镇 DY14 河北安国药材市场
DY5 广州清平药材市场 DY15 国药集团冯了性，批号20171101
DY6 广州清平药材市场 DY16 康美药业，批号170516131
DY7 广州清平药材市场 DY17 中一药业，批号180531P14
DY8 广州清平药材市场 DY18 中一药业，批号180531P17
DY9 广州市诚济药业，批号171101 DY19 中一药业，批号180531P19
DY10 岭南中药饮片厂，批号1709001 DY20 中一药业，批号180531P3
结果参见下图7至图11，图7中，6为地黄对照药材，1-5、7-11分别为编号为D1-D10的地黄药材样品。图8中，6为地黄对照药材，1-5、7-11为编号D11-D20地黄药材样品。图9中，6为地黄对照药材，1-5、7-11为D21-D30地黄药材样品。图10中，6为地黄对照药材，1-5、7-11为DY1-DY10地黄饮片样品。图11中，6为地黄对照药材，1-5、7-11为DY11-DY20地黄饮片样品。
实施例2、消渴丸地黄的薄层色谱鉴别方法
本实施例提供一种消渴丸地黄的薄层色谱鉴别方法，包括如下几个部分：
一、消渴丸地黄的薄层色谱鉴别方法
1、该实施例所涉的消渴丸地黄的薄层色谱鉴别方法，具体包括：
取消渴丸粉末4g，加水30ml，超声处理15分钟，离心，上清液蒸干，残渣加甲醇1ml轻摇提取，上清液作为供试品溶液；
另取地黄缺样样品，按供试品溶液的处理方法制成缺样对照溶液；
另取地黄对照药材1g，同法制成对照药材溶液；
照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、缺样对照溶液10μl、对照药材溶液3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水-氨水(2:5:4:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
结果见图12，图中，1为地黄对照药材，2、3、4分别为三批消渴丸，5为缺样对照。根据图示结果，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点,缺样对照相同位置无干扰。
2、比较方案
取消渴丸粉末1.5g，加水15ml，超声处理15分钟，离心，取上清液，加乙醇50ml，混匀，离心，上清液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；
另取水苏糖适量，加甲醇配制成1mg/ml的对照品溶液；
取地黄缺样同法制备成缺样溶液；
另取地黄对照药材同法制备成对照药材溶液；
吸取上述溶液适量，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水-氨水(5:5:4:0.3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，在紫外366nm下检视。
结果见图13，图中，1为水苏糖对照品(5ul)，2为水苏糖对照品(10ul)，3为地黄药材(5ul)，4为地黄药材(10ul)，5为消渴丸(10ul)，6为消渴丸(20ul)，7为缺样对照(10ul)，8为缺样对照(20ul)。由图可见，在与对照品相应的位置上，药材色谱显相同颜色斑点，阴性无干扰，但消渴丸色谱斑点不明显，提示需增大消渴丸供试品溶液浓度；此外，斑点的成点性差，在特征斑点位置背景颜色较深，且供试品溶液制备方法操作繁琐。
二、特征斑点的指认和多批次样品检测
取8批消渴丸粉末，按拟定方法制备成供试品溶液；
另取水苏糖、棉籽糖标准品适量，加甲醇使溶解，分别配制成1mg/ml水苏糖对照品溶液，0.5mg/ml棉籽糖对照品溶液；
吸取供试品溶液10μl、水苏糖、棉籽糖对照品溶液10μl、对照药材溶液3μl分别点于同一硅胶G薄层板上，按拟定方法展开，显色。
结果见图14，图中，1为棉籽糖，2为水苏糖，3为地黄对照药材，4-11为不同批次消渴丸。结果显示，在与水苏糖图谱相应位置(Rf≈0.5)，地黄对照药材和不同批次消渴丸供试品图谱均呈现相同颜色特征斑点。
三、耐用性考察
参照本实施例第一部分第1处记载的鉴别方法：
(1)默克板在室温(19℃、RH 65％)和低温(5℃、RH 65％)条件下展开效果对比，结果见图15，图中，1为地黄对照药材，2、3、4为三批消渴丸，5为缺样对照。结果显示在低温条件下展开效果与常温条件下相差不大，提示本方法均适用于室温与低温。
(2)默克板在正常湿度(19℃、RH 65％)和高湿度(19℃、RH 78％)条件下展开效果对比，结果见图16，图中，1地黄对照药材，2、3、4为三批消渴丸，5缺样对照。结果显示在高湿条件下展开效果不理想，特征斑点分散不清晰，提示本方法不适用于高湿度条件。
(3)默克板在正常湿度(19℃、RH 65％)和低湿度(19℃、RH 32％)条件下展开效果对比，结果见图17，图中，1为地黄对照药材，2、3、4分别为三批消渴丸，5为缺样对照。结果显示在低湿条件下展开效果与常湿条件下相差不大，提示正常湿度与低湿度本方法均适用。
(4)比较不同厂家预制板的展开效果，结果参见图18，图中，1为地黄对照药材，2、3、4分别为三批消渴丸，5为缺样对照。结果显示青岛板展开效果欠佳，烟台板特征斑点清晰，与默克板相差不大，提示本方法适用默克板和烟台板。
耐用性考察小结：本方法耐用性总体较好，但由于寡糖薄层色谱对环境相对湿度比较敏感，因此建议在相对湿度低于65％的条件下点样和展开，另外推荐使用默克和烟台厂家的硅胶G薄层板。
实施例3
本实施例提供一种地黄药材的薄层色谱鉴别方法，包括如下步骤：
取本品(地黄药材)粉末1g，加水7.5ml，超声处理10分钟，离心，上清液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
另取水苏糖适量，加甲醇配制成1mg/ml的对照品溶液。
照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取供试品溶液5μl、对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水-氨水(1.5:5.5:4.5:0.4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以8％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰。
结果显示，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例4
本实施例提供一种地黄药材的薄层色谱鉴别方法，包括如下步骤：
取本品(地黄药材)粉末1g，加水7.5ml，超声处理20分钟，离心，上清液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
另取水苏糖适量，加甲醇配制成1mg/ml的对照品溶液。
照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取供试品溶液5μl、对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水-氨水(2.5:4.5:3.5:0.6)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以12％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰。
结果显示，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (10)

1.一种地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法，其特征在于，所述鉴别方法包括如下步骤：
取待测样品，制备供试品溶液；
取水苏糖标准品制备对照品溶液，或/和，取地黄对照药材制备对照药材溶液；
吸取所述的供试品溶液以及所述的对照品溶液或/和对照药材溶液，点于薄层板，以乙酸乙酯、乙醇、水、氨水体积比为(1.5～2.5):(4.5～5.5):(3.5～4.5):(0.4～0.6)的混合物为展开剂展开，干燥，喷显色剂显色，检视。
2.根据权利要求1所述的地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法，其特征在于，制备所述供试品溶液的步骤包括：取所述待测样品，加水，超声处理，离心，蒸干所得上清液，所得残渣用有机溶剂提取。
3.根据权利要求2所述的地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法，其特征在于，每1g所述待测样品对应的所述水的用量为7.5ml～30ml，或/和，所述超声处理的时长为10min～20min，或/和，所述有机溶剂选用甲醇，或/和，每1g所述待测样品对应的所述有机溶剂的用量为0.25ml～1ml。
4.根据权利要求1所述的地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法，其特征在于，所述显色剂选用硫酸体积百分含量为8％～12％的硫酸乙醇溶液。
5.根据权利要求1至4任一项所述的地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法，其特征在于，所述显色的温度为100℃～110℃，或/和所述检视在日光下进行或者在紫外线下进行。
6.根据权利要求1至4任一项所述的地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法，其特征在于，所述展开的环境温度为5℃～28℃，或/和所述展开的环境湿度为25％～65％。
7.根据权利要求1至4任一项所述的地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法，其特征在于，所述薄层板的吸附剂选用硅胶G。
8.根据权利要求1至4任一项所述的地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法，其特征在于，所述地黄饮片制备的成药为消渴丸。
9.根据权利要求1至4任一项所述的地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法，其特征在于，所述待测样品为地黄饮片制备的成药时，所述鉴别方法还包括用地黄饮片缺样样品制备缺样对照溶液，并将所得缺样对照溶液与所述的供试品溶液以及所述的对照品溶液或/和对照药材溶液点于同一薄层板进行展开。
10.根据权利要求9所述的地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法，其特征在于，制备所述缺样对照溶液的步骤包括：取所述地黄饮片缺样样品，加水，超声处理，离心，蒸干所得上清液，所得残渣用有机溶剂提取；或/和，制备所述对照药材溶液的步骤包括：取所述地黄对照药材，加水，超声处理，离心，蒸干所得上清液，所得残渣用有机溶剂提取。
CN202110196214.0A 2021-02-22 2021-02-22 地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法 Active CN113009062B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110196214.0A CN113009062B (zh) 2021-02-22 2021-02-22 地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110196214.0A CN113009062B (zh) 2021-02-22 2021-02-22 地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113009062A true CN113009062A (zh) 2021-06-22
CN113009062B CN113009062B (zh) 2022-08-16

Family

ID=76405454

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110196214.0A Active CN113009062B (zh) 2021-02-22 2021-02-22 地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113009062B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115266295A (zh) * 2022-07-20 2022-11-01 海南葫芦娃药业集团股份有限公司 一种清肝止淋汤中酒生怀地黄的鉴别方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109709240A (zh) * 2019-01-29 2019-05-03 北京中研同仁堂医药研发有限公司 一种中药组合物的检测方法及其应用

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109709240A (zh) * 2019-01-29 2019-05-03 北京中研同仁堂医药研发有限公司 一种中药组合物的检测方法及其应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
张颖 等: "地黄不同炮制品薄层色谱鉴别方法的建立", 《中国实验方剂学杂志》 *
杨菁 等: "地黄寡糖胶囊的制备及质量标准研究", 《时珍国医国药》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115266295A (zh) * 2022-07-20 2022-11-01 海南葫芦娃药业集团股份有限公司 一种清肝止淋汤中酒生怀地黄的鉴别方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN113009062B (zh) 2022-08-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP4520033B2 (ja) 薬草抽出物の化学的および薬理学的標準化
Du et al. Studies on structures and activities of initial Maillard reaction products by electrospray ionisation mass spectrometry combined with liquid chromatography in processing of red ginseng
CN111521725B (zh) 一种根痛平片的一板多药材多信息快速薄层鉴别方法
CN113009062B (zh) 地黄药材、地黄饮片以及地黄饮片制备的成药的鉴别方法
CN112697949B (zh) 一种保元汤及其类似方提取物及制剂的薄层鉴别方法
CN114689783B (zh) 一种苓桂术甘汤冻干粉快速薄层鉴别方法
CN117169414A (zh) 一种小儿保安制剂的薄层色谱检测方法
CN1981852A (zh) 一种天麻醒脑制剂及其制法和质控方法
CN115951007B (zh) 一种俄色果配方颗粒的薄层色谱检测方法
CN115212240B (zh) 藏药诃子颗粒的制备方法
CN116609475A (zh) 一种益脑胶囊的一板多信息快速薄层鉴别方法
CN112098613A (zh) 破壁饮片的质量检测方法
CN113759016B (zh) 一种薄层色谱的构建方法和同时鉴定金银花和甘草成分的方法及其应用
CN111830187B (zh) 一种小柴胡颗粒成品中多药味的快速薄层鉴别方法
CN114942297A (zh) 用于桃红四物汤薄层鉴别方法的展开剂及薄层鉴别方法
Begum et al. Exploration of Physicochemical, Phytochemical, and HPTLC Analysis of Arputha Mathirai: A Siddha Herbo Mineral Formulation for Poly Cystic Ovarian Syndrome (PCOS)
CN112858529A (zh) 一种大黄三味制剂检测方法
CN101444559A (zh) 清热解毒、利尿通淋的颗粒剂及其制备方法和检测方法
CN113546126B (zh) 一种改进的玉蓝降糖胶囊的检测方法
CN116858982A (zh) 一种展开剂在薄层鉴别方法中的应用以及一种薄层鉴别方法
CN110470783B (zh) 一种双黄降脂颗粒的质量检测方法
CN114924022B (zh) 大黄产品的薄层鉴别方法及其用途
WO2024202751A1 (ja) 食品組成物
CN113514596B (zh) 枸杞子中小极性对照提取物及其制备方法和应用
CN118501327A (zh) 一种小儿康颗粒中槟榔的鉴别方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant