CN112999265A

CN112999265A - 一种肉苁蓉有效成分提取富集方法及设备

Info

Publication number: CN112999265A
Application number: CN202110235512.6A
Authority: CN
Inventors: 焦威; 王松涛; 陈一鸣; 向玲; 沈才洪
Original assignee: Chengdu Institute of Biology of CAS; Luzhou Pinchuang Technology Co Ltd
Current assignee: Chengdu Institute of Biology of CAS; Luzhou Pinchuang Technology Co Ltd
Priority date: 2021-03-03
Filing date: 2021-03-03
Publication date: 2021-06-22

Abstract

本发明属于有机化学成分提取领域，具体涉及一种肉苁蓉有效成分提取富集技术。具体技术方案为：一种肉苁蓉有效成分提取富集工艺，使用热回流提取法，采用乙醇溶液为提取媒介，提取三次，每次2h，每次的料液比为1:10～1:14；使用AB‑8型大孔树脂和ADS‑7型大孔树脂进行串联富集。本发明提供了一种适合工业生产的肉苁蓉有效成分提取、富集方法，提取、分离效果好，工艺简单可行，色素含量低，有望用于食品加工领域。

Description

一种肉苁蓉有效成分提取富集方法及设备

技术领域

本发明属于有机化学成分提取领域，具体涉及一种肉苁蓉有效成分提取富集方法及设备。

背景技术

我国拥有悠久的肉苁蓉使用历史，例如《本草经集注》云：“生时似肉，以作羊肉羹，补虚乏极佳，亦可生啖。”《药性论》云：“用苁蓉四两，水煮令烂，薄切细研，精羊肉分为四度，五味，以米煮粥，空心服之。”肉苁蓉具有多种生物活性，可滋阴补阳、保护神经、改善骨质疏松等，属于食药同源的植物。肉苁蓉中的主要有效成分为苯乙醇苷类、糖类等。如果能将有效成分提取、富集、纯化出来，直接利用有效成分，将具有广阔的应用前景。

目前，使用的常规的提取方法提取肉苁蓉的有效成分，存在提取率低等问题。同时，使用大孔树脂对有效成分进行富集时，还存在富集分离效果不佳、色素清除能力弱等问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种肉苁蓉有效成分提取富集方法及设备。

为实现上述发明目的，本发明所采用的技术方案是：一种肉苁蓉有效成分提取富集工艺，包括如下步骤：

(1)使用热回流提取法，采用乙醇溶液为提取媒介，提取三次，每次2h，每次的料液比为1:10～1:14；

(2)使用AB-8型大孔树脂和ADS-7型大孔树脂进行串联富集。

优选的，步骤(1)的热回流提取温度为50～70℃。

优选的，步骤(2)中，AB-8型大孔树脂与待富集物的质量比为1:1。

优选的，步骤(2)中，ADS-7型大孔树脂与待富集物的质量比为4:1。

优选的，所述提取富集工艺通过提取富集系统实现，所述提取富集系统包括提取箱，所述提取箱内、中下部设置可自转的滚筒，所述滚筒内设置容纳肉苁蓉的空间，滚筒筒壁上设置供乙醇溶液进出的第一通孔，所述第一通孔的孔径小于肉苁蓉的最小直径；

步骤(1)在提取箱中进行。

优选的，所述滚筒内侧壁上密布凸起，各凸起间的间隙大于肉苁蓉平均直径的1.2倍，或小于待提取物质平均直径的0.8倍。

优选的，所述滚筒倾斜设置，所述滚筒下方的凸起朝向滚筒上方设置，按滚筒倾斜方向从下向上，各凸起直径和高度逐渐减小，凸起间的间隙逐渐增大，位于滚筒最下方的凸起直径大于肉苁蓉平均直径，间隙小于肉苁蓉平均直径的0.8倍。

优选的，所述提取箱的排液口处设置可弯折的排液管，提取箱通过排液管将浸提液排入浓缩箱；所述浓缩箱包括可进行上下往复直线运动的箱盖，所述箱盖上设置提取液回收口。

优选的，经浓缩箱获得的浓缩物排入富集箱，所述富集箱内设置至少一层大孔树脂过滤层；步骤(2)在富集箱中进行。

相应的，一种药材有效成分提取富集系统，所述提取富集工艺通过提取富集系统实现，所述提取富集系统包括提取箱，所述提取箱内、中下部设置可自转的滚筒，所述滚筒内设置容纳待提取物的空间，滚筒筒壁上设置供提取液进出的第一通孔，所述第一通孔的孔径小于待提取物质的最小直径。

本发明具有以下有益效果：本发明提供了一种适合工业生产的肉苁蓉有效成分提取、富集方法，提取、分离效果好，工艺简单可行，色素含量低，有望用于食品加工领域。本发明还基于该方法提供了一种药材有效成分提取和富集的系统，可有效提高有效成分的提取和富集率，简化操作步骤，并可快速完成提取、富集方法的优化试验。

附图说明

图1为本发明提取箱的结构示意图；

图2为本发明的提取箱和浓缩箱配合的结构示意图；

图3为浓缩箱的俯视图；

图4为本发明的富集箱结构示意图；

图5为标准曲线示意图；

图6为70°酒精热回流回收结果示意图；

图7为52°酒精热回流回收结果示意图；

图8为70°酒精冷浸结果示意图；

图9为52°酒精冷浸结果示意图；

图10为60℃温度试验结果示意图；

图11为70℃温度试验结果示意图；

图12为80℃温度试验结果示意图；

图13为料液比1:6试验结果示意图；

图14为料液比1:8试验结果示意图；

图15为料液比1:10试验结果示意图；

图16为料液比1:12试验结果示意图；

图17为料液比1:14试验结果示意图；

图18为1h试验结果示意图；

图19为1.5h试验结果示意图；

图20为2h试验结果示意图；

图21为70％vol酒精试验结果示意图；

图22为52％vol试验结果示意图。

具体实施方式

在本发明的描述中，需要理解的是，术语“纵向”、“横向”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。

本发明提供了一种肉苁蓉有效成分的提取工艺，具体包括如下步骤：

1、取肉苁蓉药材的肉质茎部分，干燥后粉碎。

2、使用热回流提取法，采用52～70％(v/v)的乙醇溶液为提取媒介，在50～70℃下提取三次，每次2h，每次的料液比(质量比)为1:10～1:14。

3、通过大孔树脂对有效成分进行富集。先使用AB-8型大孔树脂富集，按大孔树脂与药材粉末质量比为1:1上样，50％乙醇洗脱液；后使用ADS-7型大孔树脂进行二次富集，大孔树脂与药材粉末质量比为4:1上样，50％乙醇洗脱。这种方式下可很好保留有效成分并且减少色素。

本发明还提供了一种进行肉苁蓉有效成分提取的系统。药材活性成分的提取常用方法包括冷浸、热浸等，富集过程有时也需要使用多种大孔树脂进行组合。这就导致现有的提取系统无法根据不同的药材进行调整，只能单独进行每一步操作，器材繁多且操作繁琐。而且，也无法在同一系统中进行单因素试验。因此，本发明根据肉苁蓉有效成分的提取试验过程和提取过程，提供了一种可同时进行提取和富集的系统。

如图1～4所示，一种药材有效成分提取富集系统，包括提取箱10，所述提取箱10内、中下部设置可自转的滚筒20，所述滚筒20内设置容纳待提取物质的空间，滚筒20筒壁上设置供提取液进出的第一通孔21，所述第一通孔21的孔径小于待提取物质的最小直径。以待提取物质为肉苁蓉且提取液为乙醇溶液为例。将干燥、粉碎后的肉苁蓉放置于滚筒20中，并通过提取箱10上的进液口11加入所需体积的乙醇溶液。添加完成后，控制滚筒20进行自转，肉苁蓉也随之进行转动，从而充分与乙醇溶液接触、混合，相较于普通的静置醇提，极大提升了活性成分的提取效率。所述提取箱10的箱壁内设置有电热丝(图中未示出)，可根据需要进行加热和控温。

如图1所示，使滚筒20自转的一种实施方式为：滚筒20两端均通过轴与提取箱10内壁连接，滚筒20一端为主动端，该端的轴伸入提取箱10箱壁内部，套接在箱壁内，并与箱壁间隙配合。主动端的轴通过皮带23与电机25的电机轴22连接，另一端为从动端，通过轴和轴承套接在提取箱10对侧壁的固定柱15上。电机轴22为电机25的输出端，在电机25的作用下旋转，再通过皮带23带动滚筒20旋转。所述点击25可放置在提取箱10内部，通过挡板12在提取箱10内隔出防液空间即可。

优选的方案为：所述滚筒20倾斜设置，所述滚筒20下方的凸起24朝向滚筒20上方设置，按滚筒20倾斜方向从下向上，各凸起24直径和高度逐渐减小，凸起24间的间隙逐渐增大，位于滚筒20最下方的凸起直径大于待提取物质平均直径，间隙小于待提取物质平均直径的0.8倍。所述滚筒20内侧壁上密布凸起24，各凸起24间的间隙大于待提取物质平均直径的1.2倍，或小于待提取物质平均直径的0.8倍。肉苁蓉在滚筒20优选装入量为小于滚筒20内体积的2/3，更优选装入量为小于滚筒20内体积的1/2。需要说明的是，图中的凸起24、药材(肉苁蓉)的大小、形状均为示例，并非限定具体比例关系。

滚筒20倾斜设置，且不断进行自转，滚筒20内的肉苁蓉随之进行翻转，并在重力作用下逐渐堆积到滚筒20底部。而凸起24不断挤压肉苁蓉，帮助肉苁蓉翻转、运动，避免其堆积。同时，底部的凸起24更大、更密集，会不断推动底部的肉苁蓉向上运动。从而在自身重力、滚筒20自转和凸起24的作用下，肉苁蓉不断翻转，且不断在滚筒20内来回上下运动，与乙醇溶液充分混合。这种方式下，也可保证药渣全部位于滚筒20内，便于收集处理。

每醇提一段时间后，就可以关闭点击25，打开提取箱10的出口取样测试，从而进行醇提时间的单因素试验。如果直接打开出口，则取样量不便于控制，且容易污染整个浸提液，且后续将浸提液排入下一装置时需要单独引流，非常不方便。所以，优选的方案为：在所述提取箱10的排液口处设置可弯折的排液管13。所述排液管13为不与提取液、待提取物质反应的软管。排液管13上可以设置开关或者阀门，以控制排液(图中未示出开关或阀门)。进一步的，为了避免不使用时污染排液口，所述排液管13还可以收纳在提取箱10上。收纳方式可以选择粘接、绳系、卡扣等，一种实施方式下，收纳方式为：在排液管13靠近管口处的管壁内埋入磁铁，提取箱10对应位置设置与之对应磁极的磁铁。当需要收纳排液管13时，直接弯折排液管13，将排液管13磁吸在提取箱10上即可。提取箱10对应位置的形状、大小与排液管13的管口相对应。

如图2、3所示，当完成提取箱，提取液成为浸提液。提取箱10通过排液管13将浸提液排入带箱盖32的浓缩箱30。所述箱盖32上设置提取液回收口35。提取箱10每完成一次提取，就取样测试，并将对应的浸提液排入浓缩箱30内。直至取样测试浸提液中有效成分低于设定值为止(最后一次浸提液，即有效成分低于设定值的浸提液，不再排入浓缩箱30内)。从而完成浸提次数的单因素试验。排入浓缩箱30内的总浸提液的液面需要低于浓缩箱30的浸提液进液口高度。为了便于观察浓缩箱30内的液面高度，可以在浓缩箱30上设置透明的液面观察窗，观察窗上还可以设置刻度(图中未示出)。

待所有浸提液都排入浓缩箱30内后，关闭浓缩箱30的浸提液进液口，通过打开提取液回收口35，启动浓缩箱30内侧壁内的电热丝(图中未示出)，对提取液进行低温加热浓缩，加热温度根据对应的药材种类进行设置，原则上不高于提取时的温度。加热过程中，乙醇不断挥发并从提取液回收口35溢出，从而完成乙醇的回收。在通常情况下，浓缩箱30的箱盖32与液面间有较大的空间，且随着浓缩的进行，该空间逐渐增加。较多乙醇会停留在该空间内、难以被回收，且浓缩获得的浓缩物(浸膏)也会有一部分粘在浓缩箱30内侧壁上。

因此，优选的方案为：箱盖32可在浓缩箱30内部进行上下往复直线运动，箱盖32紧贴浓缩箱30内部、与浓缩箱30内壁间隙配合。所述箱盖32实现往复运动的一种方式为：箱盖32外部与液压杆31连接，在液压杆31作用下进行往复运动。当然，在实验室制备量小时，也可通过人力实现往复。当需要浓缩时，先通过观察窗观察液面高度，并将箱盖32下降到靠近液面的位置，但不与液面接触。随后开始加热浓缩，随着液面的下降，缓慢随之下降箱盖32。从而最大限度地回收乙醇和收集浓缩物。待浓缩完成后，再从浓缩箱30底部的浓缩物收集口(图中未示出)取出浓缩物即可。另一种操作方式为：将箱盖32下降到靠近液面的位置，但不与液面接触处后，即不再下降箱盖32。这种实施方式下，乙醇回收量会稍有降低，但箱盖32从头到尾都不会与浓缩物接触，降低清理难度。根据后续操作，可以选择获得的浓缩物的含液量，即可选为获得浸膏(含有一定液体)或干粉(尽量烘干，几乎不含液体)。

浓缩箱30的箱壁上，无论是否用箱盖32下降收集，都还留有少量浓缩物。因此，如图2、3所示，为了进一步提高浓缩物的收集率，更有选的方案为：所述箱盖32上连接有通液软管33，通液软管33一端位于浓缩箱30外部，与泵体、液箱等连接，一端深入箱盖32内部，与箱盖32内部的各送液管34连接。图3中，虚线部分表示俯视角度无法看到的、隐藏于箱盖32内部的结构。各送液管34对称设置，并分别延伸至靠近箱壁一侧，伸出箱盖32，设置朝向箱壁方向的第一喷雾喷头37。

这种实施方式下，待回收了乙醇并收集了浓缩物后，关闭各开口，通过通液软管33缓慢进液，并缓慢下降箱盖32，从而收集剩余的浓缩物，获得浓缩物溶液。进一步的，液压杆31连接的液压器为可旋转的液压器，且通液软管33通过旋转结构与箱盖32连接。在下降箱盖32时，同时通过液压器或人工旋转箱盖32，以更好地收集浓缩物。随后重复浓缩操作，加热挥发液体，进一步获得浓缩物。

根据后续操作的不同，可以将经浓缩箱30获得的浓缩物加液(一般加水或乙醇溶液)混合为浓缩液后，通过浓缩液进液口41排入富集箱40，流经大孔树脂过滤层进行富集。也可将浓缩物提前与大孔树脂进行预拌，再放入大孔树脂过滤层，加入洗脱液进行富集。

如图4所示，所述富集箱40内设置至少一层大孔树脂过滤层。优选的方案为，设置至少2层大孔树脂过滤层，分别为第一过滤层51和第二过滤层52。根据需要，2层过滤层中的大孔树脂的种类、体积可以相同，也可以不同。过滤肉苁蓉时，过滤层设置2层，第一过滤层51中大孔树脂种类为AB-8型，第二过滤层52中的大孔树脂种类为ADS-7型。

为便于更换各过滤层中的大孔树脂，及进行拌样，所述浓缩箱30壁上，第一、二过滤层51、52对应位置分别设置第一、二过滤层51、52的第一、二抽拉口54、55。各抽拉口均可关闭、密封，图中未示出密封门。

所述浓缩液进液口41设置在富集箱40顶部，该口通过管道、泵体、阀门与富集箱40内部、上部的第二喷雾喷头连通。所述第二喷雾喷头将浓缩液或洗脱液均匀喷洒到第一过滤层51上。第一过滤层51下部设置第一渗透板42，所述第一渗透板42上设置第二通孔43，所述第二通孔43的孔径小于第一过滤层51内样品的最小直径。浓缩液或洗脱液经第一过滤层51过滤后，汇集在第一过滤层51下部空间，该空间下部在富集箱40上对应设置第一取液口44。当第一过滤层51过滤完成后，可通过第一取液口44进行取样测试。

所述第一过滤层51下设置第二渗透板45，所述第二渗透板45与第一渗透板42间形成收集经第一过滤层51富集后的富集液的空间。所述第二渗透板45上设置第三通孔47。所述第二渗透板45中间可抽拉套接抽拉板46，被抽拉板46分为两层。所述抽拉板46上没有孔洞，与第二渗透板45间隙配合。当抽拉板46位于第二渗透板45间时，富集液无法穿过第三通孔47。一种实施方式下，所述第一渗透板45参照第二渗透板45的方式进行设置(也同样设置抽拉板结构，以控制液体的渗透)。

为了保证富集液通过第三通孔47进入下一层时，能均匀分布在尽可能广泛的空间，所述第三通孔47下方对称设置软性的导液纤维48，所述一个第三通孔47上设置的各导液纤维48的横截面角度为钝角。

当第二喷雾喷头喷出的是浓缩液时，通过第一取液口44完成取样后，关闭第一取液口44，抽出抽拉板46，富集液从第三通孔47滴入第二过滤层52。当第二喷雾喷头喷出的是洗脱液时，通过第一取液口44收集全部富集液，根据需要进行干燥(或不干燥)后与第二过滤层52中的大孔树脂进行拌样，装填完成后，通过第一取液口44灌入洗脱液，再抽出抽拉板46。当然，也可以将再次拌样的大孔树脂重新填入第一过滤层55，再通过第二喷雾喷头进行喷雾操作。

第二过滤层52下方参照第一、二渗透板42、45的方式设置第三渗透板。经需要次数的富集、洗脱后，从富集箱40的出口49处收集最终的富集液即可。

下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。

实施例一：肉苁蓉有效成分提取方法对比

1、干燥、粉碎肉苁蓉药材。称取药材四份，每份3g，分别置于提取箱10内。其中两份采用冷浸法(即不启动提取箱10的加热装置)，加入药材重量12倍的乙醇水溶液，酒精度分别为52％vol和70％vol。其余两份采用热回流法，入药材重量12倍的乙醇水溶液，酒精度分别为52％vol和70％vol，温度60℃，启动滚筒20，每2h停止1次，收集浸提液，再加入等量乙醇水溶液，在对应的相同条件下重复醇提，共计醇提3次。通过排液管13，将每组的所有浸提液均排入浓缩箱30内，将浸提液浓缩成浸膏，分别收集在小瓶子里封好防止发霉。

2、采用HPLC检测，提取和测试的有效成分以苯乙醇苷类(包括松果菊苷)为主，在本实验的色谱条件中目标产物出峰时间在40min以内。首先对样品进行紫外全波段扫描，以确定样品的最大吸收波长。结果显示：样品在315～335nm间有最大吸收峰。色谱条件：C18色谱柱，以0.5％醋酸为流动相A，乙腈为流动相B，流速为1.0mL/min，柱温35℃，检测波长为333nm，进样量：5uL。

绘制标准曲线如图5所示。配制对照品溶液，精密量取对照品溶液5μL、10μL、15μL、20μL进样，按照上述色谱条件进行测定，以松果菊苷进样量为横坐标，测得的峰面积为纵坐标绘制标准曲线，并计算回归方程，所得回归方程为y＝(7E+06)x-393095R²＝0.9948，线性范围0～18μg。

3、精密量取对照品，加入已测得松果菊苷含量的甲醇溶液中，按标准曲线的方法展开测定含量，平均回收率98.36％。70°酒精热回流回收结果如图6所示，52°酒精热回流回收结果如图7所示，70°酒精冷浸结果如图8所示，52°酒精冷浸结果如图9所示。各目标产物对应的峰面积分别为120382、143808、9033、51717，可以很明显的看出热回流提取效果优于冷浸提取效果。影响提取效果的主要因素为提取次数和固液比；如果无限延长时间也可以达到很好的提取效果，温度与时间结合实际生产，热回流提高温度缩短时间性价比优于冷浸效果。

实施例二：肉苁蓉有效成分提取各影响因素的单因素试验

1、使用单因素实验考察提取次数、料液比、酒精度、时间和温度。各组试验中，除变量外，其余不变因素为：药材粉末2g；提取三次，每次1h；温度75℃；料液质量比1:12；酒精度52％vol。

各组变量为：(1)温度：60℃、70℃、80℃；(2)料液比：1:6、1:8、1:10、1:12、1:14；(3)时间(每次)：1h、1.5h、2h；(4)酒精度：70％vol、52％vol。

2、按实施例一的方法进行试验。温度试验结果分别如图10～12所示(依次为：60℃、70℃、80℃)。料液比试验结果分别如图13～17所示(依次为：1:6、1:8、1:10、1:12、1:14)。时间试验结果分别如图18～20所示(依次为：1h、1.5h、2h)。酒精度试验结果分别如图21、22所示(依次为：70％vol、52％vol)。

结果显示：60℃～70℃的提取效果优于70℃～80℃。在80℃时，各组分保留时间发生改变，可能由于温度过高使其中部分物质发生细微改变导致急性发生变化。料液比1:10～1:14范围提取效果较好。当料液比为1:10时，能基本提取完活性成分。提取三次，每次2h时，提取效果最好。不同酒精度对提取效果影响不大，酒精度70％vol略好于酒精度52％vol。

实施例三：肉苁蓉有效成分提取各影响因素的正交试验

按实施例一的方法、表1的方式进行正交试验。

表1正交试验

因素	温度(℃)	时间(h)	料液质量比
				1	70	1	1:10
2	60	1.5	1:12
				3	50	2	1:14

结果如表2所示。表2中的温度、料液比、时间因素列对应的数字为表1中该数字(因素列)对应的值。例如，温度1，指温度为70℃。

表2正交试验结果展示

实施例四：肉苁蓉有效成分富集

1、将各组通过浓缩箱30获得的浸膏分别通过富集箱40内的大孔树脂，进行富集实验。

(1)静态吸附实验：本实验探究ADS-7型大孔树脂的最优条件。以探究ADS-7型大孔树脂的承载量的最优条件为主，观察AB-8型大孔树脂的吸附效果为其次。

将5g浸膏在浓缩箱20内浓缩干燥收集，加入250mL纯水，通过超声混合均匀，配制成20mg/mL的浸膏水溶液，测定水溶液中各组分含量。随后准确称量5份ADS-7型大孔树脂，每份2g，分别置于富集箱40的第一过滤层51、第二过滤层52中。此时，第一、二过滤层51、52为单独的组别。再分别称取混合均匀后的浸膏水溶液50mL、25mL、16.65mL、12.5mL、10mL，以配置各组树脂与药材比分别1:1、2:1、3:1、4:1、5:1。将浸膏水溶液分别通过第二喷雾喷头或第三通孔47均匀喷入对应组的大孔树脂内，关闭各口，密封静置24h。收集各组的富集液，并通过第一、二抽拉口54、55，收集各组树脂，将树脂洗净洗至无色并收集洗涤液，将各组富集液和洗涤树脂的洗涤液混匀、浓缩，获得滤液。再将各组滤液分别溶解在50mL、25mL、16.65mL、12.5mL、10mL的纯水中，测定各组分含量。将结果通过下列公式计算、作图、分析。如果吸附率突然降低则表明在此比例下过载。

A＝(Cq-Ch)/C×100％。A为吸附率；Cq为吸附前溶液中松果菊苷含量；Ch为吸附后溶液中松果菊苷含量。结果如表3所示。

表3结果展示表

实验组(树脂与药材比)	吸附率(％)
		5:1	93
4:1	89
		3:1	82
2:1	68.3
		1:1	51.5

(2)动态吸附实验：按步骤(1)的方法，将AB-8型大孔树脂和ADS-7型大孔树脂净品级用纯水湿法分别装入第一、二过滤层51、52中。AB-8型大孔树脂与浸膏水溶液质量比1:1；ADS-7型大孔树脂与浸膏水溶液质量比4:1，分别使用50％的酒精作为洗脱液，洗脱过滤获得过滤液。反复用纯水冲洗各层的大孔树脂几次。将过滤及冲洗收集到的过滤液浓缩至浸膏，再次与各大孔树脂混合、上样，再分别用纯水反复冲洗各大孔树脂至无色，收集获得的过滤液。除去无法吸附的一些杂质。测试最终收集到的过滤液进行测试，结果如表4所示。表4中，吸附前的数据测试对象为对应的浸膏水溶液。

表4结果展示表

(3)动态解吸实验：吸附好的树脂柱分别用不同梯度的乙醇溶液进行洗脱，由于各组分的极性不同，收集浓缩不同梯度的组分，以达到富集的目的。分别采用40％、50％、60％、70％的乙醇溶液洗脱并对比各组分含量以及颜色。

B＝Cj/(Cq-Ch)×100％。B为解吸率；Cq为吸附前溶液中松果菊苷含量；Ch为吸附后溶液中松果菊苷含量；Cj为解吸后松果菊苷的含量。结果如表5所示。

表5结果展示表

洗脱剂浓度(％)	解析前松果菊苷含量	解析后松果菊苷峰面积	解吸率(％)
				40	356562	322239	90.4
50	328869	317487	96.5
				60	301378	269209	89.3
70	217168	196607	90.5

(4)两种树脂串联：由于一次富集除杂效果不好，所以需要将第一次富集的有效成分进行二次洗脱富集。若两次全部选用AB-8型大孔树脂色素分离情况不佳，若两次全部选用ADS-7型大孔树脂，有效成分富集情况不及AB-8型优秀。因此将两者大孔树脂组合起来，进行串联实验。组合方式及结果如表6、7、8所示。表6的串联实验指：先使用AB-8型大孔树脂进行单次富集，富集率为94％；随后将富集收集的样品再使用ADS-7型大孔树脂二次富集，二次富集的富集率也高达88％。表7、8同样如此：以表7为例，先使用AB-8型大孔树脂进行一次富集，富集率为94％，将富集收集的样品再次通过新的AB-8型大孔树脂二次富集，二次富集的富集率为88％。

表6组合富集试验

串联实验	富集率(％)
		AB-8型大孔树脂	94
ADS-7型大孔树脂	88

表7 AB-8型大孔树脂试验

AB-8型大孔树脂	富集率(％)
		一次富集	94
二次富集	88

表8 ADS-7型大孔树脂试验

ADS-7型大孔树脂	富集率(％)
		一次富集	90
二次富集	81

从表6～8可以看出：若两次全部选用AB-8型大孔树脂，富集效果与串联实验效果相当，富集效果好。但试验发现，AB-8型大孔树脂对色素的分离情况不佳(因专利文件无法提供有色图，故未提供对应图片)。若两次全部选用ADS-7型大孔树脂，有效成分富集情况不及AB-8型优秀，但具有良好的除色效果。因此，选择AB-8型大孔树脂与ADS-7型大孔树脂进行串联富集、纯化。

以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形、变型、修改、替换，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。

Claims

1.一种肉苁蓉有效成分提取富集工艺，其特征在于：包括如下步骤：

(2)使用AB-8型大孔树脂和ADS-7型大孔树脂进行串联富集。

2.根据权利要求1所述的肉苁蓉有效成分提取富集工艺，其特征在于：步骤(1)的热回流提取温度为50～70℃。

3.根据权利要求1所述的肉苁蓉有效成分提取富集工艺，其特征在于：步骤(2)中，AB-8型大孔树脂与待富集物的质量比为1:1。

4.根据权利要求1所述的肉苁蓉有效成分提取富集工艺，其特征在于：步骤(2)中，ADS-7型大孔树脂与待富集物的质量比为4:1。

5.根据权利要求1～4任意一项所述肉苁蓉有效成分提取富集工艺，其特征在于：所述提取富集工艺通过提取富集系统实现，所述提取富集系统包括提取箱(10)，所述提取箱(10)内、中下部设置可自转的滚筒(20)，所述滚筒(20)内设置容纳肉苁蓉的空间，滚筒(20)筒壁上设置供乙醇溶液进出的第一通孔(21)，所述第一通孔(21)的孔径小于肉苁蓉的最小直径；

步骤(1)在提取箱(10)中进行。

6.根据权利要求5所述的肉苁蓉有效成分提取富集工艺，其特征在于：所述滚筒(20)内侧壁上密布凸起(24)，各凸起(24)间的间隙大于肉苁蓉平均直径的1.2倍，或小于待提取物质平均直径的0.8倍。

7.根据权利要求6所述的肉苁蓉有效成分提取富集工艺，其特征在于：所述滚筒(20)倾斜设置，所述滚筒(20)下方的凸起(24)朝向滚筒(20)上方设置，按滚筒(20)倾斜方向从下向上，各凸起(24)直径和高度逐渐减小，凸起(24)间的间隙逐渐增大，位于滚筒(20)最下方的凸起直径大于肉苁蓉平均直径，间隙小于肉苁蓉平均直径的0.8倍。

8.根据权利要求5所述的肉苁蓉有效成分提取富集工艺，其特征在于：所述提取箱(10)的排液口处设置可弯折的排液管(13)，提取箱(10)通过排液管(13)将浸提液排入浓缩箱(30)；所述浓缩箱(30)包括可进行上下往复直线运动的箱盖(32)，所述箱盖(32)上设置提取液回收口(35)。

9.根据权利要求8所述的肉苁蓉有效成分提取富集工艺，其特征在于：经浓缩箱(30)获得的浓缩物排入富集箱(40)，所述富集箱(40)内设置至少一层大孔树脂过滤层；步骤(2)在富集箱(40)中进行。

10.一种药材有效成分提取富集系统，其特征在于：所述提取富集工艺通过提取富集系统实现，所述提取富集系统包括提取箱(10)，所述提取箱(10)内、中下部设置可自转的滚筒(20)，所述滚筒(20)内设置容纳待提取物的空间，滚筒(20)筒壁上设置供提取液进出的第一通孔(21)，所述第一通孔(21)的孔径小于待提取物质的最小直径。