CN112997877A - 一种雌雄同株大麻重组自交系群体的构建方法 - Google Patents
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Abstract
一种雌雄同株大麻重组自交系群体的构建方法,该技术方案包括群体构建温室大棚的选择、整地施肥、种子浸种、播种时间、苗期管理、除草和肥水管理、隔离、授粉、种子收获、晾晒及保存等步骤,从F2到F7选择表现优异单株自交,保证获得完整的综合性状表现良好的单株。本方法可获得聚合多个优良性状、亲和性高的育种材料,更好地利用杂种优势开展后续品种选育和基因挖掘定位等系列研究。本发明方法操作简单,保证了雌雄同株大麻重组自交系群体的完整性和优异性。
Description
技术领域
本发明属于作物遗传育种技术领域,具体涉及一种雌雄同株大麻重组自交系群体的构建方法。
背景技术
大麻(Cannabis sativa L.),大麻科(Cannabinaceae)大麻属(Cannabis)一年生草本植物,是一种古老的韧皮纤维作物,起源于中亚地区,中国作为起源地之一,栽培历史悠久,应用范围广泛,分布在黑龙江、甘肃、安徽、河北、内蒙古、辽宁、吉林、河南等地区。近年来,大麻产业在国内外发展迅猛,已成为世界公认的综合利用价值极高的经济作物。由于大麻全身是宝,大麻种子、纤维、秆芯、花叶及根的应用领域非常广泛,从食品、保健品、化妆品到纺织品、建筑材料、军需材料、汽车及航天材料,再到生物制药等全方面、多用途的综合利用。随着人们对大麻应用价值的不断认识,大麻产业的发展受到人们的高度重视,所以研究人员通过不断的改进大麻育种和栽培技术已获得具有更高产量潜力的大麻品种。
数量性状的遗传研究对作物育种的理论、方法和策略至关重要。现研究人员已经在改良大麻农艺性状,提高产量方面有所研究,但由于大麻大部分农艺性状易受基因以及环境条件的影响,因此,需要更好地应用育种技术挖掘大麻资源重要性状的遗传基础,从而为培育稳产高产的大麻品种提供理论基础。所以,研究获得聚合多个优良性状、亲和性高的育种材料对大麻育种体系的完善具有重要意义,而大麻重组自交系群体的构建是开展后续品种选育和基因挖掘定位等系列研究的一种有效方法。
发明内容
本发明旨在完善大麻育种体系,以解决我国大麻优良种质资源匮乏等系列问题,提供一种雌雄同株大麻重组自交系群体的构建方法。
为实现上述目的,本发明采用的技术方案如下:
一种雌雄同株大麻重组自交系群体的构建方法,所述方法包括如下步骤:
步骤一:温室大棚的选择:选择砂质土壤的温室,且土壤耕层厚度为25~30cm、土质疏松肥沃、排水灌溉方便的地块,土壤pH值为5.8~7.5最为适宜,前茬休耕或是大豆、玉米、小麦等作物,不选择向日葵、瓜或菜茬口;选择顶高为2.5m以上的钢管构架的棚顶,顶部覆盖塑料膜以保温防雨且安装通风装置;
步骤二:整地施肥:翻耕,深度18~20cm,土壤达到破碎细腻平整,底土紧实,表土疏松,翻耕的同时进行施肥,施肥深度8~10cm,基肥比例为每亩地选用N-P2O5-K2O复合肥40kg与腐熟有机肥500kg混合;土壤利用多菌灵或百菌清进行消毒以消灭土壤中的真菌、细菌及病虫害,然后起垄,垄宽为65cm,高为20cm;
步骤三:种子浸种、播种:温室播种时间选择7月中旬或12月中旬,播种前将种子置于4℃下春化处理3d,挑选成熟、饱满、有光泽的大麻种子,75%的乙醇表面消毒后,于室温条件下用清水浸种16~20h,选择发芽的种子进行播种,播种深度3~4cm,株距5~6cm,覆土后平整垄台,铺设滴灌软管,浇透水;
步骤四:苗期管理:75%的种子出苗后,10~15d后间苗,苗高15~20cm时定苗,幼苗生长期间昼夜温度控制在25~30℃和15~20℃,保证温室通风顺畅;
步骤五:除草、肥水管理:生育期进行中耕除草2~3次,植株进入快速生长期后,选择1:120的尿素和1:800的磷酸二氢钾进行叶面喷施;水分管理方面,快速生长期每10~15d滴灌一次,维持土壤水分含量在土壤田间持水量的70%~80%,开花期则应适当控制土壤水分含量在土壤田间持水量的60%~70%;
步骤六:隔离、授粉:制备30×30cm2的无纺布隔离罩,在大麻现蕾期选择表现优异的单株套隔离罩,确保单株自交;花期时进行大麻授粉,时间为每天上午9~11时,抖动隔离罩,确保授粉完全,连续授粉15~20d;生长过程中若有分枝长出隔离罩,应及时剪除;
步骤七:种子收获、晾晒:授粉后25~30d进行种子采收,打开隔离罩,整株收割于尼龙种子袋中,标号标签,封口后吊于温室铁杆上晾晒,直至叶片脱落,呈干燥状态;
步骤八:种子保存:单株脱粒后的种子,装入信封中,种子含水量控制在5.8~8.0%之间,置于0~10℃冰箱中保存。
本发明相对于现有技术的有益效果为:本方法可获得聚合多个优良性状、亲和性高的育种材料,更好地利用杂种优势开展后续品种选育和基因挖掘定位等系列研究。本发明方法操作简单,保证了雌雄同株大麻重组自交系群体的完整性和优异性。
附图说明
图1为大麻播种后覆膜示意图;
图2为大麻幼苗示意图;
图3为大麻植株套隔离罩示意图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明的技术方案作进一步的说明,但并不局限于此,凡是对本发明技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的精神和范围,均应涵盖在本发明的保护范围中。
具体实施方式一:本实施方式记载的是一种雌雄同株大麻重组自交系群体的构建方法,所述方法包括如下步骤:
步骤一:温室大棚的选择:选择砂质土壤的温室,且土壤耕层厚度为25~30cm、土质疏松肥沃、排水灌溉方便的地块,土壤pH值为5.8~7.5最为适宜,前茬休耕或是大豆、玉米、小麦等作物,不选择向日葵、瓜或菜茬口;选择顶高为2.5m以上的钢管构架的棚顶,顶部覆盖塑料膜以保温防雨且安装通风装置;前茬种植作物很大程度上影响大麻种子的出苗率,例如,前茬作物为大豆时,种子出苗率在90%以上,而前茬作物为白菜时,种子出苗率在40%以下;
步骤二:整地施肥:翻耕,深度18~20cm,土壤达到破碎细腻平整,底土紧实,表土疏松,翻耕的同时进行施肥,施肥深度8~10cm,基肥比例为每亩地(666.7m2)选用N-P2O5-K2O复合肥40kg与腐熟有机肥500kg混合;土壤利用多菌灵或百菌清进行消毒以消灭土壤中的真菌、细菌及病虫害,然后起垄,垄宽为65cm,高为20cm;
步骤二中:选择3种不同配比水平的N-P2O5-K2O复合肥,分别为19:7:14、18:15:15和15:15:15,并分析其对快速生长期株高和叶面积的影响,如下:
表1不同配比水平的N-P2O5-K2O复合肥对快速生长期株高和叶面积的影响表
N-P<sub>2</sub>O<sub>5</sub>-K<sub>2</sub>O | 株高(cm) | 叶面积(cm<sup>2</sup>) |
19:7:14 | 90.33±4.51a | 53.08±1.52a |
18:15:15 | 85.00±5.00a | 50.72±2.12a |
15:15:15 | 75.67±4.04b | 45.64±1.30b |
注:三次重复平均值±标准差;同列标有不同小写字母者表示差异显著(P<0.05)
步骤三:种子浸种、播种:温室播种时间选择7月中旬或12月中旬,播种前将种子置于4℃下春化处理3d,挑选成熟、饱满、有光泽的大麻种子,75%的乙醇表面消毒后,于室温条件下用清水浸种16~20h,选择发芽的种子进行播种,播种深度3~4cm,株距5~6cm,覆土后平整垄台,铺设滴灌软管,浇透水;播种深度对大麻种子出苗率的影响,如下:
表2播种深度对大麻种子出苗率的影响表
注:三次重复平均值±标准差;同列标有不同小写字母者表示差异显著(P<0.05)
12月中旬播种时,在播种覆土后平整垄台,铺设滴灌软管,浇透水并覆上塑料薄膜以保证出苗的适宜温度;
步骤四:苗期管理:75%的种子出苗后,10~15d后间苗,苗高15~20cm时定苗,幼苗生长期间昼夜温度控制在25~30℃和15~20℃,保证温室通风顺畅;种子出苗后,先间苗后定苗,2对真叶时进行间苗,4对真叶时进行定苗,并在幼苗生长期间控制好昼夜温度,以防止幼苗徒长出现倒伏现象;
步骤五:除草、肥水管理:生育期进行中耕除草2~3次,植株进入快速生长期后,选择1:120的尿素和1:800的磷酸二氢钾进行叶面喷施;水分管理方面,快速生长期每10~15d滴灌一次,维持土壤水分含量在土壤田间持水量的70%~80%,开花期则应适当控制土壤水分含量在土壤田间持水量的60%~70%,以利于纤维成熟;水分管理方面,要求每天测定土壤水分含量,根据其含量进行滴灌补水;若水分管理不当,可能会产生虫害,主要是蚜虫,可以采用粘板悬挂在棚内行间进行诱杀;
步骤六:隔离、授粉:制备30×30cm2的无纺布隔离罩,在大麻现蕾期选择表现优异的单株套隔离罩,确保单株自交;花期时进行大麻授粉,时间为每天上午9~11时,抖动隔离罩,确保授粉完全,连续授粉15~20d;生长过程中若有分枝长出隔离罩,应及时剪除;大麻现蕾期选择表现优异单株套照隔离的同时,插一根长1.0~1.5m的竹竿或木棍,并将植株固定在其上,防止植株倒伏;
步骤七:种子收获、晾晒:授粉后25~30d进行种子采收,打开隔离罩,整株收割于尼龙种子袋中,标号标签,封口后吊于温室铁杆上晾晒,直至叶片脱落,呈干燥状态;雌雄同株大麻种子收获时,要求80%的种子饱满且硬实;单株收获时,可以将较粗的茎杆和叶片剪除,以保证种子晾晒完全;
步骤八:种子保存:单株脱粒后的种子,装入信封中,种子含水量控制在5.8~8.0%之间,置于0~10℃冰箱中保存,可以保证大麻种子发芽率在90~95%之间。
具体实施方式二:具体实施方式一所述的一种雌雄同株大麻重组自交系群体的构建方法,步骤一中,所述土壤的有机质含量为20~30g/kg。
具体实施方式三:具体实施方式一所述的一种雌雄同株大麻重组自交系群体的构建方法,步骤二中,所述腐熟有机肥为牛粪或鸡粪。
具体实施方式四:具体实施方式一所述的一种雌雄同株大麻重组自交系群体的构建方法,步骤六中,所述隔离罩为无纺布隔离罩,规格是80g/m2。
Claims (4)
1.一种雌雄同株大麻重组自交系群体的构建方法,其特征在于:所述方法包括如下步骤:
步骤一:温室大棚的选择:选择砂质土壤的温室,且土壤耕层厚度为25~30cm、土质疏松肥沃、排水灌溉方便的地块,土壤pH值为5.8~7.5最为适宜,前茬休耕或是大豆、玉米、小麦等作物,不选择向日葵、瓜或菜茬口;选择顶高为2.5m以上的钢管构架的棚顶,顶部覆盖塑料膜以保温防雨且安装通风装置;
步骤二:整地施肥:翻耕,深度18~20cm,土壤达到破碎细腻平整,底土紧实,表土疏松,翻耕的同时进行施肥,施肥深度8~10cm,基肥比例为每亩地选用N-P2O5-K2O复合肥40kg与腐熟有机肥500kg混合;土壤利用多菌灵或百菌清进行消毒以消灭土壤中的真菌、细菌及病虫害,然后起垄,垄宽为65cm,高为20cm;
步骤三:种子浸种、播种:温室播种时间选择7月中旬或12月中旬,播种前将种子置于4℃下春化处理3d,挑选成熟、饱满、有光泽的大麻种子,75%的乙醇表面消毒后,于室温条件下用清水浸种16~20h,选择发芽的种子进行播种,播种深度3~4cm,株距5~6cm,覆土后平整垄台,铺设滴灌软管,浇透水;
步骤四:苗期管理:75%的种子出苗后,10~15d后间苗,苗高15~20cm时定苗,幼苗生长期间昼夜温度控制在25~30℃和15~20℃,保证温室通风顺畅;
步骤五:除草、肥水管理:生育期进行中耕除草2~3次,植株进入快速生长期后,选择1:120的尿素和1:800的磷酸二氢钾进行叶面喷施;水分管理方面,快速生长期每10~15d滴灌一次,维持土壤水分含量在土壤田间持水量的70%~80%,开花期则应适当控制土壤水分含量在土壤田间持水量的60%~70%;
步骤六:隔离、授粉:制备30×30cm2的无纺布隔离罩,在大麻现蕾期选择表现优异的单株套隔离罩,确保单株自交;花期时进行大麻授粉,时间为每天上午9~11时,抖动隔离罩,确保授粉完全,连续授粉15~20d;生长过程中若有分枝长出隔离罩,应及时剪除;
步骤七:种子收获、晾晒:授粉后25~30d进行种子采收,打开隔离罩,整株收割于尼龙种子袋中,标号标签,封口后吊于温室铁杆上晾晒,直至叶片脱落,呈干燥状态;
步骤八:种子保存:单株脱粒后的种子,装入信封中,种子含水量控制在5.8~8.0%之间,置于0~10℃冰箱中保存。
2.根据权利要求1所述的一种雌雄同株大麻重组自交系群体的构建方法,其特征在于:步骤一中,所述土壤的有机质含量为20~30g/kg。
3.根据权利要求1所述的一种雌雄同株大麻重组自交系群体的构建方法,其特征在于:步骤二中,所述腐熟有机肥为牛粪或鸡粪。
4.根据权利要求1所述的一种雌雄同株大麻重组自交系群体的构建方法,其特征在于:步骤六中,所述隔离罩为无纺布隔离罩,规格是80g/m2。
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