CN114916433B - 一种优质抗病杂交青花菜的育种方法 - Google Patents

Abstract

本发明所述一种优质抗病杂交青花菜的育种方法，包括如下步骤：步骤一、亲本的选择：母本选择遗传性状稳定的细胞质雄性不育系青花菜，父本选择青花菜自交不亲和系或自交系；步骤二、人工杂交：对同一株细胞质雄性不育系母本在苗期嫁接父本，待植株嫁接成活后，于嫁接口处标记，嫁接父本是自交系的待谢花后再剪除嫁接口以上的花枝；步骤三、杂交管理并采集：杂交期间进行管理，并在杂交后采集杂交种子；步骤四、筛选优良品种。本发明采用同一株细胞质雄性不育系母本在苗期嫁接父本，不同组合嫁接的单株标记清楚后混合移栽大田，在花期单株套袋隔离，在盛花期吹风机微风自植株顶向下送风辅助授粉，能够有效错开花期集中，缓解开花期叠加劳动力紧张。

Description

一种优质抗病杂交青花菜的育种方法

技术领域

本发明涉及植物栽培技术领域，具体涉及一种优质抗病杂交青花菜的育种方法。

背景技术

青花菜属十字花科芸薹属甘蓝种的一个变种，一二年生草本植物，学名Brassicaoleracea L.var.italica planch，由甘蓝演化而来，原产地中海地区。青花菜以主茎顶端形成绿色肥大花球，表面小花蕾明显，以采集花蕾的嫩茎供食用，因其富含维生素A、B、C、E,蛋白质,花青素,矿物质等多种营养成份，维生素C较多，比大白菜、番茄、芹菜都高，肉质脆嫩,风味香甜,营养丰富，口感绝佳，被《时代周刊》杂志推荐为十大健康食品中排名第四。自八十年代初，我国开始引进了一些国外青花菜品种，直至九十年代，青花菜种植面积快速增长，但国内青花菜育种远远落后于甘蓝等其它十字花科种类。目前生产上应用的如优秀、耐寒优秀、绿雄90等青花菜品种90％以上依赖进口，亟需培育具有自主知识产权的优良品种。由于青花菜有较强的杂种优势，生产上的优良品种均为一代杂交品种，目前生产杂交一代主要有两种途径，即利用稳定的自交不亲和系或自交系和细胞质雄性不育系配制杂交种，选育时间长，而且在试配杂交组合时，耗费大量人力，花期叠加，因此如何提高杂交育种效率，提前制定实施切实可行的杂交育种方法，加快新品种的选育至关重要。

发明内容

发明目的：本发明目的在于针对现有技术的不足，提供一种优质抗病杂交青花菜的育种方法，能够大大提高育种效率，在制定切实可行的杂交育种方案后，加快了新品种的选育。

技术方案：本发明所述一种优质抗病杂交青花菜的育种方法，包括如下步骤:

步骤一、亲本的选择：母本选择遗传性状稳定的细胞质雄性不育系青花菜，父本选择青花菜自交不亲和系或自交系；所述父本与母本熟期相差范围在0～30天内，以便可以花期调节；

步骤二、人工杂交：对同一株细胞质雄性不育系母本在苗期嫁接父本，待植株嫁接成活后，于嫁接口处标记，嫁接父本是自交系的待谢花后再剪除嫁接口以上的花枝，确保杂交种子纯度；

步骤三、杂交管理并采集：杂交期间进行管理，并在杂交后采集杂交种子；

步骤四、筛选优良品种：将步骤三得到的杂交种子适时播种，经品比试验和田间多次重复、鉴定、筛选得到优良的杂交品种。

进一步地，步骤一中母本表现为雌蕊功能正常，无异源胞质的不良影响，有较好的经济性状，不育性稳定彻底，不育株率和不育度均达100％，具有较高的产量配合力。

进一步地，步骤一中父本选择优质抗病抗逆性强的青花菜优良自交不亲和系，要求蕾期自交不亲和指数≥9.0,花期自交亲和指数≤0.5。

进一步地，在步骤二中，于嫁接前需做嫁接前准备工作，具体包括：

步骤1、育苗前准备，搭建大棚，选择地势干燥，平坦、排水好的地方搭建大棚，避雨、高温遮荫覆盖防虫网；基质选用蔬菜育苗专用基质；市场上出售的丹麦品氏基质，基质有机物总量≥25，氮、磷、钾总含量≥2，总孔隙度为50-70％，富含微量元素，养分全面，还富含其它活性促根物质。pH6.0-7.0，缓冲性能好。50孔穴盘育苗；

步骤2、播种，9月初同期播种，母本以A01，A02......标记，母本每株系播种40粒；与父本以B01，B02......标记，父本每株系播种15粒；在所述穴盘内填满营养土并压实，每穴播一粒处理后的种子，父本母本各株系播种后标记清楚，再用营养土覆盖，表面刮平即可，放入预先准备好的育苗床，浇足水，表面铺膜，以利保湿；

步骤3、苗期管理，齐苗后，及时揭除膜，晴天让小苗充分见光，中午气温高于30℃时盖遮阳网；不论晴天与阴天均保持基质湿润程度而定，以基质表面微黄色，基质手捏少许出水即可；齐苗后要控制水分；棚内保持通风，保持基质湿润，适当通风降低棚内湿度；

步骤4、整地施肥，田间整地施肥，大田施腐熟鸡粪2500kg/667㎡，N：P：K＝15：15：15的三元复合肥50kg/667㎡，结合耙耕施下，与土壤混合均匀，起畦时做成浅沟平畦，连沟做成1.3m平畦，畦沟深15cm，畦沟宽30cm，并搭建大棚；

步骤5、嫁接前准备，10月初，植株长到5叶1心时准备嫁接，在组培室内进行,嫁接所需物品提前在室内用1500LX的紫外线光消毒1-2小时备用，所需物品包括周转箱、刀片、生胶带、待嫁接的父母本植株等。

进一步地，在步骤二中，嫁接方法具体的为：父本以B01开始从4叶处平切后，用刀片削成约0.5CM长的楔形作接穗并标记清楚后作接穂，共切取10株接穗，并标记清楚；

再以母本以A01、A02、....A10植株各取1株共10株，分别从4叶处平切，再从中心纵切0.5CM后与父本B01的接穗插入后，用生胶带缚紧，并标记清楚；

方法同上，依次分别完成B02、B03、B04...B30各取10株与A01、A02...A10各取1株共10株分别嫁接，并标记清楚；多余的苗正常管理备用；

嫁接好后放入预备好的室内培养，一周内检查成活率，并作记录，未成活的杂交株可以重新嫁接1次；

待嫁接口以上新增3～4片叶片时，将嫁接苗定植在一个避雨棚内，株行距50cm×50cm，浇定根水。

进一步地，步骤三中杂交管理并采集具体的为：

步骤A、摘心，在嫁接口以上，当父本的主茎长到7片叶时摘心，以促进嫁接口以上的父本侧枝萌发2-3枝从而形成侧花球，也促进嫁接口以下的母本侧枝萌发2-3枝从而形成侧花球，并及时涂抹石硫合剂，以促进伤口愈合，及时防治病虫害。

步骤B、割球，结合松土进行浅培土，促进植株生长。第二年开春气温在10℃以上时覆膜避雨栽培，四周不设围裙。晴天中午用利刀在侧花球割球，一般嫁接口以上留3枝，嫁接口以下留3枝，保证花球松散,切口处涂摸400倍石硫合剂，并及时去除外叶、老叶，防治病虫害。

步骤C、花期管理，抽薹后，插一根竹杆，随着抽薹的增高，先后2～3次绑缚防倒伏，单株用网袋隔离，网袋的尺寸可以选择60目，长70厘米，直径50厘米；抽薹末期到开花初期先后进行摘心、摘花，调控花期，在盛花期吹风机微风自植株顶向下送风1次，隔3天再送风1次，辅助授粉，以促进花期嫁接口以上父本花枝自然授粉嫁接口以下母本花枝以促进其杂交授粉；谢花后，脱掉网袋并及时摘除次生花，以促进杂交种子籽粒饱满。

步骤D、病虫害防治，用苏云金杆菌(Bt)防治菜青虫1次；用10％吡虫啉可湿性粉剂防治蚜虫2次；用75％百菌清可湿性粉剂600倍液，用75％菌核灵可湿性粉剂500倍液防治霜霉病、菌核病各1次；

步骤E、种子采收，当单株种荚2/3变黄、种粒变黄褐色时单独采收，并标记清楚,并及时晾晒、脱粒、晒种，当种子含水量达7％以下时入库保存。

有益效果：与现有技术相比，本发明的优点在于：

(1)本发明采用同一株细胞质雄性不育系母本在苗期嫁接父本(自交不亲和系/自交系)，不同组合嫁接的单株标记清楚后混合移栽大田，在花期单株套袋隔离，在盛花期吹风机微风自植株顶向下送风辅助授粉，促进母本柱头结实，能够有效错开花期集中，缓解开花期叠加劳动力紧张；

(2)本发明可以提前制定杂交组合试配计划，在大量试配新组合或小面积制种后，优化了杂交育种方法，加速育种进程，提高了杂交种子产量和质量。

(3)传统的杂交育种方法在父母本花期相遇时，根据计划，先采集父本花粉，再在母本花枝上剥蕾涂花粉，而且数量有限，一般1个杂交组合2-3个枝条，每个枝条5-6朵花，先后包括取花粉，洗洁工具，隔离，标记等后续工作约20-30分钟/次，后续如果结实不好再检查重做仍需时间，本发明嫁接株定植标记后，父母本花期调节好后，花期几乎都在自然授粉，微风辅助授粉只需1-2分钟，而且结实更好，速度快，效率高，即使不微风辅助授粉，同一株自然条件下也能正常杂交结实，而且杂交的种子数量多，传统的杂交育种结实较好的一般在70％，而且2-3枝条，每枝5-6朵花种子数量一般在50-60粒左右，而本方法整株的枝条均可杂交，其种子数量将是常规的数倍。

附图说明

图1为实施例1的育种方法流程图；

图2为实施例2的育种方法流程图。

具体实施方式

下面通过附图对本发明技术方案进行详细说明，但是本发明的保护范围不局限于所述实施例。

实施例1

一种优质抗病杂交青花菜的育种方法，包括如下步骤:

步骤一、亲本的选择：母本选择遗传性状稳定的细胞质雄性不育系青花菜，父本选择青花菜自交不亲和系；所述父本与母本熟期相差范围在0～30天内，以便可以花期调节；

步骤一中母本表现为雌蕊功能正常，无异源胞质的不良影响，有较好的经济性状，不育性稳定彻底，不育株率和不育度均达100％，具有较高的产量配合力。

步骤一中父本选择优质抗病抗逆性强的青花菜优良自交不亲和系，要求蕾期自交不亲和指数≥9.0,花期自交亲和指数≤0.5。

步骤二、人工杂交：对同一株细胞质雄性不育系母本在苗期嫁接父本，待植株嫁接成活后，于嫁接口处标记，若嫁接父本是自交系的，待谢花后再剪除嫁接口以上的花枝，确保杂交种子纯度。

在步骤二中，于嫁接前需做嫁接前准备工作，具体包括：

步骤1、育苗前准备，搭建大棚，选择地势干燥，平坦、排水好的地方搭建大棚，避雨、高温遮荫覆盖防虫网；基质选用蔬菜育苗专用基质；市场上出售的丹麦品氏基质，基质有机物总量≥25，氮、磷、钾总含量≥2，总孔隙度为50-70％，富含微量元素，养分全面，还富含其它活性促根物质。pH6.0-7.0，缓冲性能好。50孔穴盘育苗；

步骤2、播种，9月初同期播种，母本以A01，A02......标记，母本每株系播种40粒；与父本以B01，B02......标记，父本每株系播种15粒；在所述穴盘内填满营养土并压实，每穴播一粒处理后的种子，父本母本各株系播种后标记清楚，再用营养土覆盖，表面刮平即可，放入预先准备好的育苗床，浇足水，表面铺膜，以利保湿；

步骤3、苗期管理，齐苗后，及时揭除膜，晴天让小苗充分见光，中午气温高于30℃时盖遮阳网；不论晴天与阴天均保持基质湿润程度而定，以基质表面微黄色，基质手捏少许出水即可；齐苗后要控制水分；棚内保持通风，保持基质湿润，适当通风降低棚内湿度；

步骤4、整地施肥，田间整地施肥，大田施腐熟鸡粪2500kg/667㎡，N：P：K＝15：15：15的三元复合肥50kg/667㎡，结合耙耕施下，与土壤混合均匀，起畦时做成浅沟平畦，连沟做成1.3m平畦，畦沟深15cm，畦沟宽30cm，并搭建大棚；

步骤5、嫁接前准备，10月初，植株长到5叶1心时准备嫁接，在组培室内进行,嫁接所需物品提前在室内用1500LX的紫外线光消毒1-2小时备用，所需物品包括周转箱、刀片、生胶带、待嫁接的父母本植株等。

在步骤二中，嫁接方法具体的为：父本以B01开始从4叶处平切后，用刀片削成约0.5CM长的楔形作接穗并标记清楚后作接穂，共切取10株接穗，并标记清楚；

再以母本以A01、A02、....A10植株各取1株共10株，分别从4叶处平切，再从中心纵切0.5CM后与父本B01的接穗插入后，用生胶带缚紧，并标记清楚；

方法同上，依次分别完成B02、B03、B04...B30各取10株与A01、A02...A10各取1株共10株分别嫁接，并标记清楚；多余的苗正常管理备用；

嫁接好后放入预备好的室内培养，一周内检查成活率，并作记录，未成活的杂交株可以重新嫁接1次；

待嫁接口以上新增3～4片叶片时，将嫁接苗定植在一个避雨棚内，株行距50cm×50cm，浇定根水。

步骤三、杂交管理并采集：杂交期间进行管理，并在杂交后采集杂交种子；

步骤三中杂交管理并采集具体的为：

步骤A、摘心，在嫁接口以上，当父本的主茎长到7片叶时摘心，以促进嫁接口以上的父本侧枝萌发2-3枝从而形成侧花球，也促进嫁接口以下的母本侧枝萌发2-3枝从而形成侧花球，并及时涂抹石硫合剂，以促进伤口愈合，及时防治病虫害。

步骤B、割球，结合松土进行浅培土，促进植株生长。第二年开春气温在10℃以上时覆膜避雨栽培，四周不设围裙。晴天中午用利刀在侧花球割球，一般嫁接口以上留3枝，嫁接口以下留3枝，保证花球松散,切口处涂摸400倍石硫合剂，并及时去除外叶、老叶，防治病虫害。

步骤C、花期管理，抽薹后，插一根竹杆，随着抽薹的增高，先后2～3次绑缚防倒伏，单株用网袋隔离，网袋的尺寸可以选择60目，长70厘米，直径50厘米；抽薹末期到开花初期先后进行摘心、摘花，调控花期，在盛花期吹风机微风自植株顶向下送风1次，隔3天再送风1次，辅助授粉，以促进花期嫁接口以上父本花枝自然授粉嫁接口以下母本花枝以促进其杂交授粉；谢花后，脱掉网袋并及时摘除次生花，以促进杂交种子籽粒饱满。

步骤D、病虫害防治，用苏云金杆菌(Bt)防治菜青虫1次；用10％吡虫啉可湿性粉剂防治蚜虫2次；用75％百菌清可湿性粉剂600倍液，用75％菌核灵可湿性粉剂500倍液防治霜霉病、菌核病各1次；

步骤E、种子采收，当单株种荚2/3变黄、种粒变黄褐色时单独采收，并标记清楚,并及时晾晒、脱粒、晒种，当种子含水量达7％以下时入库保存。

步骤四、筛选优良品种：将步骤三得到的杂交种子适时播种，经品比试验和田间多次重复、鉴定、筛选得到优良的杂交品种。

利用本实施例方法，不同年份嫁接苗的情况详见表1-3，

表1不同年份嫁接情况

表2同株母本嫁接父本单株杂交较常规杂交比较表

表3同株系母本嫁接父本小区杂交制种较常规父母本1：1定植杂交产量比较表

从上述表1中可以看出同一株父母本嫁接成活率在96％以上，杂交种纯度在99％以上，成活率高，杂交种子纯度高。

从表2中可以看出利用本发明的方法，同一株父母本杂交授粉时间较常规杂交授粉时间短很多，约1/10的时间，而且杂交种子数量多，约3倍以上。

从表3中可以看出利用本发明的方法，同株系母本嫁接父本小区制种产量相同面积下较常规父母本1：1定植杂交小区制种产量高2倍以上。

实施例2

一种优质抗病杂交青花菜的育种方法，与实施例1的区别在于：

母本选择CMS12-8不育系，花球紧，蕾粒细，颜色绿，单球重0.4kg，抗病、抗逆性强、品质好，雌蕊功能正常，无异源胞质的不良影响，有较好的经济性状综合性状优良、遗传性状稳定的细胞质雄性不育系，不育性稳定彻底，不育株率和不育度均达100％，具有较高的产量配合力。

父本选择10-2-5-7-1自交不亲和系，花球紧，蕾粒细，颜色绿等综合性状优良，抗病、抗逆性强、品质好的优良株系，具有较高的产量配合力，自交不亲和指数≥为9.0,自交亲和指数为≤0.5。单球重0.5kg。

经过上述亲本杂交，得到瑞青70，瑞青70是以CMS12-8不育系为母本在同一株苗期嫁接父本10-2-5-7-1(自交不亲和系)杂交，经过田间多次重复、鉴定、筛选得到优良的杂交新组合瑞青70，可以根据需要在市场上购买到，因此本发明切实可行。

瑞青70品种特征特性：

瑞青70为晚熟品种，植株生长势较旺盛，株型半直立，株高和开展度较大，侧分枝较多；叶色深绿，腊粉中，叶长椭圆型；花球浅绿色，低温下不紫，紧实，形状半圆，横径14厘米左右，纵径15厘米左右，蕾粒中细均匀，无球夹叶；主茎不易空心。定植后70天左右收获,单球重0.75kg左右，主侧花球兼收，亩产2500kg左右。抗病性强，耐连续阴雨性强，耐低温性中、耐热性中，花球品质脆嫩。适宜江苏省及类似生态条件地区秋季露地栽培。

如上所述，尽管参照特定的优选实施例已经表示和表述了本发明，但其不得解释为对本发明自身的限制。在不脱离所附权利要求定义的本发明的精神和范围前提下，可对其在形式上和细节上作出各种变化。

Claims (3)

1.一种抗病杂交青花菜的育种方法，其特征在于包括如下步骤:

步骤一、亲本的选择：母本选择遗传性状稳定的细胞质雄性不育系青花菜，父本选择青花菜自交不亲和系；所述父本与母本熟期相差范围在0~30天内，以便花期调节；

步骤二、人工杂交：对同一株细胞质雄性不育系母本在苗期嫁接父本，待植株嫁接成活后，于嫁接口处标记；

步骤三、杂交管理并采集：杂交期间进行管理，并在杂交后采集杂交种子；

步骤四、筛选优良品种：将步骤三得到的杂交种子适时播种，经品比试验和田间多次重复、鉴定、筛选得到优良的杂交品种；

所述步骤一中父本选择优质抗病抗逆性强的青花菜优良自交不亲和系，要求蕾期自交不亲和指数≥9.0, 花期自交亲和指数≤0.5；

在步骤二中，嫁接方法具体的为：父本以B01开始从4叶处平切后，用刀片削成0.5CM长的楔形作接穗并标记清楚后作接穂，共切取10株接穗，并标记清楚；

再以母本以A01、A02....A10植株各取1株共10株，分别从4叶处平切，再从中心纵切0.5CM后与父本B01的接穗插入后，用生胶带缚紧，并标记清楚；

方法同上，依次分别完成B02、B03、B04...B30各取10株与A01、A02...A10各取1株共10株分别嫁接，并标记清楚；多余的苗正常管理备用；

嫁接好后放入预备好的室内培养，一周内检查成活率，并作记录，未成活的杂交株重新嫁接1次；

待嫁接口以上新增3～4片叶片时，将嫁接苗定植在一个避雨棚内，株行距50cm×50cm，浇定根水。

2.根据权利要求1所述的一种抗病杂交青花菜的育种方法，其特征在于：在步骤二中，于嫁接前需做嫁接前准备工作，具体包括：

步骤1、育苗前准备，搭建大棚，选择地势干燥，平坦、排水好的地方搭建大棚，避雨、高温遮荫覆盖防虫网；基质选用蔬菜育苗专用基质；50孔穴盘育苗；

步骤2、播种，9月初同期播种，母本以A01，A02......标记，母本每株系播种40粒；与父本以B01，B02......标记，父本每株系播种15粒；在所述穴盘内填满营养土并压实，每穴播一粒处理后的种子，父本母本各株系播种后标记清楚，再用营养土覆盖，表面刮平即可，放入预先准备好的育苗床，浇足水，表面铺膜，以利保湿；

步骤3、苗期管理，齐苗后，及时揭除膜，晴天让小苗充分见光，中午气温高于30℃时盖遮阳网；不论晴天与阴天均保持基质湿润程度而定；齐苗后要控制水分；棚内保持通风，保持基质湿润，适当通风降低棚内湿度；

步骤4、整地施肥，田间整地施肥，大田施腐熟鸡粪2500kg/667㎡，N：P：K=15：15：15的三元复合肥50kg/667㎡，结合耙耕施下，与土壤混合均匀，起畦时做成浅沟平畦，连沟做成1.3m平畦，畦沟深15cm，畦沟宽30cm，并搭建大棚；

步骤5、嫁接前准备，10月初，植株长到5叶1心时准备嫁接，在组培室内进行,嫁接所需物品提前在室内用1500LX的紫外线光消毒1-2小时备用。

3.根据权利要求1所述的一种抗病杂交青花菜的育种方法，其特征在于：步骤三中杂交管理并采集具体的为：

步骤A、摘心，在嫁接口以上，当父本的主茎长到7片叶时摘心，并及时涂抹石硫合剂；

步骤B、割球，来年开春，当气温在10℃以上时覆膜避雨栽培，晴天中午用利刀进行侧花球割球，割球的深度以花球抽枝松散即可,嫁接口以上留3个松散的侧花球，嫁接口以下留3个松散的侧花球，割球后的切口处涂摸400倍石硫合剂，并及时去除外叶、老叶，防治病虫害；

步骤C、花期管理，抽薹后，插一根竹杆，随着抽薹的增高，先后2～3次绑缚防倒伏，单株用网袋隔离；抽薹末期到开花初期先后进行摘心、摘花，调控花期，在盛花期吹风机微风自植株顶向下送风1次，隔3天再送风1次，辅助授粉，以促进花期嫁接口以上父本花枝自然授粉嫁接口以下母本花枝以促进其杂交授粉；谢花后，脱掉网袋并及时摘除次生花，以促进杂交种子籽粒饱满；

步骤D、病虫害防治，用苏云金杆菌防治菜青虫1次；用10%吡虫啉可湿性粉剂防治蚜虫2次；用75%百菌清可湿性粉剂600倍液，用75%菌核灵可湿性粉剂500倍液防治霜霉病、菌核病各1次；

步骤E、种子采收，当单株种荚2/3变黄、种粒变黄褐色时单独采收，并标记清楚,并及时晾晒、脱粒、晒种，当种子含水量达7％以下时入库保存。