CN112956607A - 一种用于锦鲤养殖的饲料添加剂及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种用于锦鲤养殖的饲料添加剂，以重量百分比计，所述饲料添加剂中包含维生素E 5‑10％、黑芝麻20‑30％、何首乌20‑30％、酪氨酸5‑10％、碳酸氢钠5‑10％、硅藻土20‑30％、虾青素5‑10％和食盐5‑10％。本发明还提供了其制备方法及应用。本发明提供的饲料添加剂能够提升锦鲤黑色色泽、质地。

Description

一种用于锦鲤养殖的饲料添加剂及其制备方法和应用
技术领域：
本发明涉及水产养殖技术领域，具体涉及涉及饲料添加剂技术领域，尤其 涉及一种提升锦鲤黑色色泽质地的饲料添加剂及其制备方法和应用。
背景技术：
锦鲤(Cyprinus carpio haematopterus)在生物学上属于鲤科(Cyprinidae)， 全世界共有鲤科鱼类210属3700种以上。锦鲤体格健美、色彩艳丽、花纹多变、 泳姿雄然，具极高的观赏和饲养价值，是风靡当今世界的一种高档观赏鱼，有“水 中活宝石”、“会游泳的艺术品”的美称。锦鲤养殖业在我国兴起是二十多年的事， 目前我国的锦鲤养殖业已初具规模，在广东、福建、北京、天津、上海、江苏、 山东、湖北乃至东北地区都获得快速发展，但是由于我国对锦鲤的研究起步较 晚，投入少，亲鱼和种苗都受日本的限制，造成很多国产锦鲤的品质不高，达 不到鲜明、艳丽、斑纹清晰、边缘整齐、光彩夺目的水平,可观赏性低，从而严 重制约了我国锦鲤产业的发展。因此，亟需研究一种能够很好的增强锦鲤黑色 体色的饲料添加剂，提高锦鲤品质(色泽、质地)、降低锦鲤的淘汰率，可以 获得良好的经济效益。
发明内容：
本发明的目的就是针对上述对于锦鲤养殖技术的需求，而提供一种提升锦 鲤黑色色泽、质地的饲料添加剂及其制备方法，从而提高锦鲤的体色表现和质 地，降低锦鲤的淘汰率的饲料添加剂及其制备方法。
本发明提供了一种用于锦鲤养殖的饲料添加剂，以重量百分比计，所述饲 料添加剂中包含维生素E 5-10％、黑芝麻20-30％、何首乌20-30％、酪氨酸5-10％、 碳酸氢钠5-10％、硅藻土20-30％、虾青素5-10％和食盐5-10％。
在根据本发明的一个实施方案中，以重量百分比计，所述饲料添加剂含有 维生素E 5％、黑芝麻20％、何首乌20％、酪氨酸5％、碳酸氢钠10％、硅藻土20％、 虾青素10％和食盐10％。
本发明还提供了上述饲料添加剂的制备方法，包括：
a)按照重量百分比称取各种原料；
b)将所述原料中的中草药原料粉碎过200目筛网，其他原料粉碎过80目 筛；
c)将粉碎后的原料依次投入混合机内，混合均匀；
d)混合均匀后包装；优选为真空包装。
本发明还提供了上述的饲料添加剂在锦鲤养殖中的应用。
在根据本发明的一个实施方案中，所述饲料添加剂的添加量为饲料质量的 0.5-1.0％。
本发明的有益效果是：
本发明提供的饲料添加剂能够有效提升锦鲤黑色色泽、质地的饲料添加剂 能够改善锦鲤体内黑色素的生成，提高锦鲤皮肤中黑色素的沉积，获得厚重的 墨质并表现出油润的色泽，获得较高的观赏价值。
具体实施方式：
下面结合本发明的较佳实施例进行详细阐述，以使本发明的优点和特征能 更易被本领域人员理解，从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。
实施例1
一种提升锦鲤黑色色泽、质地的饲料添加剂，其中添加剂的各种原料及重 量百分比为：维生素E 5％、黑芝麻20％、何首乌20％、酪氨酸5％、碳酸氢钠 10％、硅藻土20％、虾青素10％、食盐10％，上述原料的重量百分比之和为100％。
上述添加剂的制备方法为：
a按照重量百分比称取各种原料；
b将各种中草药原料粉碎过200目筛网，其他原料粉碎至80目；
c、将各种原料依次投入混合机内，混合均匀；
d、混合均匀后进行真空包装。
其中酪氨酸是一种芳香族氨基酸，亦是20种用来合成蛋白质的蛋白氨基酸 之一，它属于非必需氨基酸。酪氨酸酶单酚酶功能的催化底物，是最终形成优 黑素和褐黑素的主要原料。在人的表皮基层细胞间，分布着黑色素细胞，它含 有的酪氨酶可以将酪氨酸氧化成多糖，中间再经过一系列的代谢过程，最后便 可生成黑色素。
其中黑芝麻、何首乌为常见中草药原料，购买自中药店，质量有保障；何 首乌和黑芝麻均有激活蘑菇酪氨酸酶和促进黑素生成的作用，增色效果显著。 能显著增强B16黑素瘤细胞中的黑色素生成，对细胞增殖、黑素生成和酪氨酸 酶活性均有不同程度的激活作用，并可促进黑素生成相关基因的转录。何首乌 的有效成分二苯乙烯苷可通过激活有丝分裂原活化蛋白激酶p38MAPK和转录 因子MITF，上调酪氨酸酶基因的表达，增加酪氨酸酶的活性，从而促进B16黑 素瘤细胞中黑素的生成。黑芝麻中具有显著增色作用的有效成分是芝麻素，芝 麻素可通过激活有丝分裂原活化蛋白激酶p38 MAPK和cAMP依赖的蛋白激酶 A(PKA)信号通路来上调酪氨酸酶和MITF基因的表达，从而促进B16黑素 瘤细胞中黑素的生成。
其中虾青素：是一种类胡萝卜素，也是类胡萝卜素合成的最终产物，呈深 粉红色。虾青素具有最强的抗氧化性，有效清除细胞内的氧自由基，增强细胞 再生能力。自然界中虾青素是由藻类、细菌和浮游植物产生的，一些水生物种， 包括虾、蟹在内的甲壳类动物通过食用这些藻类和浮游生物，然后把这种色素 储存在壳中，使外表呈现红色。
其中食盐：能够增加摄食，具有固色作用。
实施例2:
一种提升锦鲤黑色色泽、质地的饲料添加剂，其中添加剂的各种原料及重 量百分比为：维生素E 5％、黑芝麻20％、何首乌20％、酪氨酸5％、碳酸氢钠 10％、硅藻土25％、虾青素10％、食盐5％上述原料的重量百分比之和为100％。
上述添加剂的制备方法为：
a)按照重量百分比称取各种原料；
b)将各种中草药原料粉碎过200目筛网，其他原料粉碎至80目；
c)将各种原料依次投入混合机内，混合均匀；
d)混合均匀后进行真空包装。
实施例3：
一种提升锦鲤黑色色泽、质地的饲料添加剂，其中添加剂的各种原料及重 量百分比为：维生素E 5％、黑芝麻20％、何首乌20％、酪氨酸5％、碳酸氢钠 10％、硅藻土30％、虾青素5％、食盐5％。上述原料的重量百分比之和为100％。
上述添加剂的制备方法为：
a按照重量百分比称取各种原料；
b将各种中草药原料粉碎过200目筛网，其他原料粉碎至80目；
c、将各种原料依次投入混合机内，混合均匀；
d、混合均匀后进行真空包装。
实施例4在饲料中添加上述实施例的饲料添加剂的养殖实验
试验锦鲤购于山东济南市章丘水产养殖场，为同一批鱼苗孵化挑选后的昭 和锦鲤。经一周暂养、驯化后，选择体格健壮、规格整齐的锦鲤840尾，初始 平均体重为50.75±0.34g，随机分为7组，每组设4个重复，每个重复30尾。 实验周期是8周。各组间锦鲤初始体重无显著差异。试验鱼养殖在相同的土质 池塘，池塘水体符合水产养殖用水质标准。
试验设计：试验共设7个处理组：对照组(未添加添加剂的普通锦鲤饲料)、 试验组1，2采用添加了实施例1(添加剂)的配方的添加剂，且添加的重量百分比 分别为0.5％和1.0％。试验组3,4采用添加了实施例2(添加剂)的配方的添加剂， 且添加的重量百分比分别为0.5％和1.0％，试验组5,6采用添加了实施例3(添加 剂)的配方的添加剂，且添加的重量百分比分别为0.5％和1.0％。分别以进口鱼 粉、豆粕、螺旋藻、发酵豆粕、面粉等为主要原料，所有原料经1.2mm筛孔的 锤片式粉碎机粉碎，再经过超微粉碎机粉碎到98％过0.18mm筛网，然后辅以预 混料、磷酸二氢钙、氯化胆碱等，充分混合均匀，调质温度为95℃，通过膨化 机制成直径2mm、4.0mm的颗粒，自然风晾干，4℃冰箱中保存。养殖8周后， 取样测定相关指标，所有数据采用统计软件SPSS16.0进行并分析处理。试验日 粮组成及营养水平见表1。
表1.普通锦鲤饲料与添加提高锦鲤背部肌肉厚度添加剂的饲料的配方组成。
Figure BDA0002875335100000041
Figure BDA0002875335100000051
表2.饲料中添加提升锦鲤黑色色泽、质地的饲料添加剂对锦鲤黑色素细胞 和色泽的影响(平均值±标准误，n＝4)
Figure BDA0002875335100000052
Figure BDA0002875335100000061
注：同行不同字母表示差异显著(P<0.05)
注：“+++”表示色素细胞致密，“++”表示较密集，“+”表示少量色素 细胞，“一”表示没有这种色素细胞
亮度是指发光体(反光体)表面发光强弱的物理量，它是颜色的一种性质，颜 色明亮程度越高，显示色泽越好。
黄度：锦鲤体色评价时，白质部分越白越好，如果白质部分偏黄，或者有 杂色，则锦鲤的品质将会受到影响，因此黄度值越低越好。
实施例5检测在饲料中添加了饲料添加剂后对锦鲤酪氨酸酶活性和酪氨酸 酶基因tyr表达的影响(平均值±标准误，n＝4)
分别称取各组鱼背部同一位置皮肤组织(60mg)，加1mL磷酸盐缓冲溶 液，匀浆后将匀浆液置于4℃、10000r·min-1离心10min，取上清液后置于4℃ 冰箱中待测。酪氨酸酶活性采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附进行测定(莱尔 生物，中国)，具体操作按试剂盒说明进行。
分别称取各组鱼背部同一位置皮肤肌肉组织150-200g，用滤纸吸干水，置 于RNAStore保存液中备用。样品总RNA按照TRIzol法进行提取，使用核 酸蛋白检测仪(OD 260∶OD280)(Eppendorf，德国)测定RNA浓度，并用1％ 琼脂糖检测RNA质量。荧光定量步骤按照PrimeScript TM Real-time PCR试剂 盒(TaKaRa，日本)说明进行，于CFX96 TM Real-timeSystem(Bio-Rad，美国) 仪器上操作。根据Gen-Bank中tyr及β-actin相关序列设计定量引物(表3)。
表3实时荧光定量PCR引物
Figure BDA0002875335100000062
表4.饲料中添加提升锦鲤黑色色泽、质地的饲料添加剂对锦鲤酪氨酸酶活 性和酪氨酸酶基因tyr表达的影响(平均值±标准误，n＝4)
Figure BDA0002875335100000071
注：同行不同字母表示差异显著(P<0.05)
如表4所示，黑素皮质素1受体(mc1r)基因产物与α-促黑色素细胞激 素(α-MSH)结合，启动腺苷酸循环(cAMP)，促进酪氨酸酶(tyr)基因表达， 使酪氨酸(Tyr)在酪氨酸酶的催化下形成多巴醌(dopaquinone)。当细胞中的 Tyr含量较高时，多巴醌在酪氨酸酶相关蛋白1基因(tyrp1)和相关蛋白2 基因(tyrp2，或称多巴素异构酶基因，dct)产物的作用下，合成真黑色素； 当细胞中的Tyr含量较低时，多巴醌将与半胱氨酸作用，合成褐黑色素。在饲料中添加本发明的添加剂后促进了真黑色素的合成，提升了锦鲤的黑色质地。
实施例6硅藻土对锦鲤色泽的影响
试验锦鲤购于山东济南市章丘水产养殖场，为同一批鱼苗孵化挑选后的昭 和锦鲤。经一周暂养、驯化后，选择体格健壮、规格整齐的锦鲤480尾，初始 平均体重为52.36±0.56g，随机分为4组，每组设4个重复，每个重复30尾。 实验周期是8周。各组间锦鲤初始体重无显著差异。试验鱼养殖在相同的土质 池塘，池塘水体符合水产养殖用水质标准。
试验设计：试验共设4个处理组：对照组(未添加硅藻土的普通锦鲤饲料)、 试验组1，2，3组分别添加了0.2％、0.5％和1％的硅藻土。分别以进口鱼粉、 豆粕、螺旋藻、发酵豆粕、面粉等为主要原料，所有原料经1.2mm筛孔的锤片 式粉碎机粉碎，再经过超微粉碎机粉碎到98％过0.18mm筛网，然后辅以预混料、 磷酸二氢钙、氯化胆碱等，充分混合均匀，调质温度为95℃，通过膨化机制成 直径2mm、4.0mm的颗粒，自然风晾干，4℃冰箱中保存。养殖8周后，取样测 定相关指标，所有数据采用统计软件SPSS16.0进行并分析处理。试验日粮组成 及营养水平见表5。
表5.普通锦鲤饲料与添加硅藻土锦鲤饲料的配方组成。
原料 对照组 0.2％组 0.5％组 1％组
面粉 21.7 21.2 21.2 20.7
进口鱼粉 25 25 25 25
大豆浓缩蛋白 5 5 5 5
豆粕 20 20 20 20
螺旋藻 8 8 8 8
发酵豆粕 10 10 10 10
鱼油 2 2 2 2
啤酒酵母 5 5 5 5
锦鲤预混料 1 1 1 1
氯化胆碱 0.3 0.3 0.3 0.3
磷酸二氢钙 2 2 2 2
硅藻土 0 0.2 0.5 1
合计 100 100 100 100
粗蛋白 44.6 44.5 44.4 44.4
粗脂肪 7.23 7.21 7.21 7.20
粗灰分 10.1 10.2 10.2 10.3
粗纤维 1.50 1.51 1.50 1.51
钙 1.46 1.47 1.48 1.48
总磷 1.51 1.51 1.52 1.53
表6.饲料中添加硅藻土对锦鲤黑色素细胞的影响(平均值±标准误，n＝4)
Figure BDA0002875335100000081
Figure BDA0002875335100000091
注：“+++”表示色素细胞致密，“++”表示较密集，“+”表示少量色素 细胞，“-”表示没有这种色素细胞
结果如表6所示，硅藻土对锦鲤体表色号有明显影响，推测其原因在于硅 藻土中的各种元素，与虾青素二酯和多种具有吸光性的蛋白质结合时，它就可 以显现出绿色，黄色，蓝色，和褐色等，从而让锦鲤体现出各种优美的色彩。
硅藻土含有多种矿物元素，可以提供锦鲤体表色素呈色的需要，同时硅藻 土中富含的硅元素，可以提升锦鲤墨质的厚度和色泽。
综合以上各试验结果，添加剂可以显著提升昭和锦鲤的黑色素细胞致密程 度、色泽度和皮肤质地，提高锦鲤的观赏价值和经济价值，提升养殖户的生产 效益。此外，对于其他黑色体色的观赏鱼具有相同的效果，可以在其他鱼种上 进行使用，表明本发明的饲料添加剂具有通用性。
经过8周的饲养，生长结果表明，饲料中添加提升锦鲤黑色色泽、质地的 饲料添加剂的各个试验组的昭和锦鲤鱼体的黑色素致密程度显著高于对照组， 但各添加组之间差异不显著；试验组昭和锦鲤的色泽度、白色质地显著高于对 照组，添加量越多，效果越好。
上述发明内容及具体实施方式意在证明本发明所提供技术方案的实际应 用，不应解释为对本发明保护范围的限定。本领域技术人员在本发明的精神和 原理内，当可作各种修改、等同替换、或改进。本发明的保护范围以所附权利 要求书为准。

Claims (6)

1.一种用于锦鲤养殖的饲料添加剂，其特征在于，以重量百分比计，所述饲料添加剂中包含维生素E 5-10％、黑芝麻20-30％、何首乌20-30％、酪氨酸5-10％、碳酸氢钠5-10％、硅藻土20-30％、虾青素5-10％和食盐5-10％。
2.如权利要求1所述的饲料添加剂，其特征在于，以重量百分比计，所述饲料添加剂含有维生素E 5％、黑芝麻20％、何首乌20％、酪氨酸5％、碳酸氢钠10％、硅藻土20％、虾青素10％和食盐10％。
3.如权利要求1或2所述的饲料添加剂的制备方法，其特征在于，包括：
a)按照重量百分比称取各种原料；
b)将所述原料中的中草药原料粉碎过200目筛网，其他原料粉碎过80目筛；
c)将粉碎后的原料依次投入混合机内，混合均匀；
d)混合均匀后包装；优选为真空包装。
4.如权利要求1或2所述的饲料添加剂在锦鲤养殖中的应用。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述饲料添加剂的添加量为饲料质量的0.5-1.0％。
6.一种用于养殖锦鲤的饲料，其特征在于，包含如权利要求1或2所述的饲料添加剂。
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