CN112913480A - 一种确定药用覆盆子采收期的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种确定药用覆盆子采收时间的方法，涉及植物种植技术领域。本发明以覆盆子颜色作为判定合格药用覆盆子的采收时间指标，判定要得到符合药典标准的覆盆子，确定覆盆子适宜采收期在4月下旬至5月1日左右，果实未变黄之时采收最佳，此时相关农艺性状为覆盆子果实直径为12.49±0.56mm，高14.25±1.19mm，果实重量为1.20±0.14g，此时折干率也相对较高，对种植户来讲，此时采收效益较大，过迟采收药材质量会不合格。本发明的鉴定方法较为简便直观，并且综合了各物质成分含量变化来判断药用覆盆子的质量，对药用覆盆子的增质提效有促进作用。

Description

一种确定药用覆盆子采收期的方法

技术领域

本发明涉及植物种植技术领域，具体涉及一种确定药用覆盆子采收期的方法。

背景技术

覆盆子为蔷薇科悬钩子属植物华东覆盆子(Rubus chingii Hu)的干燥果实，因叶裂如掌也称掌叶覆盆子。具有益肾固精缩尿，养肝明目的功效，用于遗精滑精，遗尿尿频，阳痿早泄，目暗昏花等症。覆盆子为药食两用药材，味甘，略带涩味，富含多糖、糖蛋白、萜类、黄酮、甾醇类、香豆素、生物碱和酚酸等多种活性化合物。现代药理研究表明覆盆子还有抗肿瘤、抗衰老、调节生殖功能、促进细胞免疫机能、减肥之功效。

覆盆子产全国各地，主要分布于江苏、安徽、浙江、江西、福建、广西等华东地区地，所以又称华东覆盆子。据调研发现，近年来多地生产企业覆盆子被爆不合格，其中不合格主要为含量测定项。现代研究证实，采收时间不同，有效成分的含量有较大差异。药材在不适宜的采收会直接影响药材的产量、品质和收获效率，并且颜色变红成熟的覆盆子药用物质成分极低，仅作为水果，不能入药。在实际覆盆子采收过程中农户间采收时间比较随意，不管大小颜色都统一采摘，导致覆盆子质量参差不齐，进而容易产生不合格药材进而影响临床疗效。目前企业收购合格覆盆子价格比统货覆盆子价格要高近30％。因此，寻求一种简单实用的判断药用覆盆子采收时间的方法，指导农民生产采收，同时为覆盆子药材增质提效提供了技术支持。

发明内容

本发明的目的在于提供一种确定药用覆盆子采收期的方法，以覆盆子颜色作为判定合格药用覆盆子的采收时间指标，确定覆盆子适宜采收期在4月下旬至5月1日，果实未变黄之时采收最佳，对种植户来讲，此时采收效益较大。本发明的判定方法简便直观，对药用覆盆子的增质提效有促进作用。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种确定药用覆盆子采收期的方法，具体为：以覆盆子颜色作为判定药用覆盆子的采收期指标，确定药用覆盆子适宜的采收期；所述覆盆子颜色判定标准为：覆盆子果实色度值中L值为49.73～56.01，a值为-3.59～-0.43，b值为24.43～32.19。

本发明中，所述覆盆子适宜的采收期为4月下旬至5月1日。

本发明中，所述覆盆子变黄之前采收为适宜的采收期。

本发明中，所述覆盆子采收时的农艺性状判定标准为：覆盆子果实直径为12.49±0.56mm，高14.25±1.19mm，果实重量为1.20±0.14g。

本发明中，从覆盆子落花坐果开始，直至果实成熟呈红色，定期采收取样，测定覆盆子的外观颜色、农艺性状、有效物质含量及产量。

本发明中，所述采收取样的间隔期为8～12d。

本发明中，所述农艺性状包括果实的直径、高度、重量及折干率的一种或多种。

本发明中，所述有效物质包括覆盆子中总多酚、总黄酮、总多糖、水浸出物、醇浸出物、鞣花酸、山柰酚-3-0-芸香糖苷及椴树苷中的一种或多种。

本发明还提供了一种如上述所述方法在覆盆子药用质量评估中的应用。

本发明通过外观农艺性状能够简便直观地判断药用覆盆子合适采收期，对种植户来讲实用性及适用性良好。本发明确定药用覆盆子较适宜采收期在4月下旬至5月1日，果实未变黄之时采收最佳，此时覆盆子果实色度值中L值为49.73～56.01，a值为-3.59～-0.43，b值为24.43～32.19；相关农艺性状为果实直径为11.93～13.05mm，果实重量为1.06～1.34g，此时折干率也相对较高，在该采收期内采收的覆盆子作为药用，含量符合药典要求，有益于提高其在市场上的竞争力，有助于农民提升经济效益。

附图说明

图1为覆盆子成熟过程中L，a，b动态变化图；

图2为覆盆子成熟过程中样品图；

图3为覆盆子成熟过程中农艺性状动态变化图；

图4为覆盆子成熟过程总多酚、总多糖、总黄酮动态变化图；

图5为覆盆子成熟过程水、醇浸出物动态变化图；

图6为覆盆子成熟过程中鞣花酸动态变化图；

图7为覆盆子成熟过程山柰酚-3-O-芸香糖苷和椴树苷动态变化图；

图8为覆盆子成熟过程中颜色判别图；

图9为覆盆子成熟过程中物质成分聚类分析结果图。

具体实施方式

本发明提供了一种确定药用覆盆子采收期的方法，具体为：以覆盆子颜色作为判定药用覆盆子的采收期指标，确定药用覆盆子适宜的采收期；所述覆盆子颜色判定标准为：覆盆子果实色度值中L值为49.73～56.01，a值为-3.59～-0.43，b值为24.43～32.19。在本发明中，所述L值(0～100)是亮度指标，0表示黑色，100表示白色，L值代表明亮度，是指色彩中深浅、明暗程度。在无彩色中，白色明亮度最高用100表示，黑色最低用0表示；a值(-80～100)是红绿色指标，正值为红，负为绿，0为中性色；a值越大表明果实越红，a值为负表示果实偏青；b值(-80～70)是黄蓝色指标，正值为黄，负为蓝，0为中性色。在本发明中，果实颜色测定采用本领域技术人员所熟知的色差仪。在本发明的具体实施例中，所采用的色差仪型号为汉普光彩(HP-200)。作为一种可实施的方式，在每个采收时间随机筛选20个大小相等的果实做重复，每个果实沿果面赤道1周均匀取3个点，采用色差仪测定数值后取平均值。

在本发明中，所述覆盆子适宜的采收期为4月下旬至5月1日。在本发明中，该时期覆盆子的折干率可达到32.89％左右，表明此阶段覆盆子营养成分丰富，药用价值高。

在本发明中，所述覆盆子变黄之前采收为适宜的采收期。在本发明中，可直接通过颜色直观、简单地判断药用覆盆子的采收时期，对种植户来讲具有较高的实用性。

在本发明中，所述覆盆子采收时的农艺性状判定标准为：覆盆子果实直径为12.49±0.56mm，高14.25±1.19mm，果实重量为1.20±0.14g。在本发明中，覆盆子果实的大小同样能够准确反映适应的采收期，对种植户来讲同样具有良好的适用性。

在本发明中，从覆盆子落花坐果开始，直至果实成熟呈红色，定期采收取样，测定覆盆子的外观颜色、农艺性状、有效物质含量及产量。作为一种可实施的方式，在采集地以覆盆子4月初落花座果期直径约0.5cm时开始采样。

在本发明中，所述采收取样的间隔期为8～12d，更优选地采收取样间隔期为9～11d。

在本发明中，所述农艺性状包括果实的直径、高度、重量及折干率的一种或多种。在本发明中，折干率具体是指生采回来的药材经干燥后的比重。在本发明中，对果实直径的测定采用但不限于卷尺、游标卡尺、直径自动测量仪等测量工具，对果实高度的测定采用但不限于直尺、游标卡尺等测量工具，对果实重量的测定采用但不限于天平、电子称等本领域常用的测量工具。

在本发明中，所述有效物质包括覆盆子中总多酚、总黄酮、总多糖、水浸出物、醇浸出物、鞣花酸、山柰酚-3-0-芸香糖苷及椴树苷中的一种或多种。在本发明中，对覆盆子总多酚的测定包括但不限于采用本领域技术人员所熟知的福林酚紫外分光光度法，酒石酸亚铁法；对总黄酮的测定包括但不限于采用本领域技术人员所熟知的高效液相色谱法、三氯化铝紫外分光光度计法测定、毛细管电泳法；对总多糖的测定包括但不限于本领域技术人员所熟知的苯酚-硫酸法进行测定；对水浸出物的测定参照《中国药典》四部2201浸出物测定法进行测定；对醇浸出物的测定参照水溶性浸出物测定法测定；对鞣花酸、山柰酚-3-0-芸香糖苷和椴树苷的测定方法采用本领域技术人员所熟知的高效液相色谱法。

本发明还提供了一种如上述所述方法在覆盆子药用质量评估中的应用。作为一种可实施的方式，对覆盆子的药用质量评估可通过动态分析覆盆子的质量性状与外观性状之间的相关性得到药用价值较高的药用覆盆子。

下面将结合本发明中的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

确定药用覆盆子采收时间的方法，包括以下步骤：于4月初覆盆子落花坐果期直径0.5cm开始，每8d取样，直至果实成熟呈红色。每次取样后测定覆盆子的外观颜色、农艺性状、折干率、有效物质含量及产量。

实施例2

确定药用覆盆子采收时间的方法，包括以下步骤：于4月初覆盆子落花坐果期直径0.5cm开始，每12d取样，直至果实成熟呈红色。每次取样后测定覆盆子的外观颜色、农艺性状、折干率、有效物质含量及产量。

实施例3

确定药用覆盆子采收时间的方法，包括以下步骤：于4月初覆盆子落花坐果期直径0.5cm开始，每10d取样，直至果实成熟呈红色。每次取样后测定覆盆子的外观颜色、农艺性状、折干率、有效物质含量及产量。

外观颜色测定：每个采收时间的果实用色差仪(HP-200)测定，测量精度0.08。每个采收时间随机筛选20个大小相等的果实做重复，每个果实沿果面赤道1周均匀取3个点，测定数值后取平均值。

结果分析如图1所示：覆盆子果实在成熟期间其L值从58.96逐步下降到36.19，明亮度下降38.62％，呈逐渐降低趋势。

覆盆子果实青果时a值为负值，即果皮显现为绿色，但果实越成熟a值越高，说明成熟过程中果皮青绿色成分逐渐减弱，而红色成分逐渐增加。青果、黄果和红果的a值分别为-2.85、4.81和25.31，差异显著。

覆盆子果实的b值均为正值，说明与蓝色相比，其果实颜色以黄色为主色调。在成熟过程中，覆盆子的b值呈下降趋势，青果、黄果和红果的b值分别为32.79、34.67、17.88。

综上所述，L值和b值相关变化曲线结果基本一致，而代表红色的a值逐步升高，随着采收时间变化，果实逐渐由绿转红。

农艺性状测定：果实直径及高度采用SATA91511高精度数字显示游标卡尺测量，精度为±0.03mm。测量时将尺框向右移动到果实长度及高度位置卡牢，读取显示数字。果实重量用酷贝电子数字称测定，精度为±0.03g。将每个采收时间果实放入托盘，读数。折干率含量测定：取每个采收时间的覆盆子鲜果500g，平铺于托盘放入烘箱，60℃烘干，称重，计算折干率。

结果如图2-3可知：通过动态监测发现覆盆子果实在4月24日左右开始由青转黄，5月4日左右变黄左右，5月14日左右开始由黄转红，随即很快变成红色果实成熟(5月20日)。

折干率变化的先升高，在4月下旬至5月初时，即在青果及黄果时达到最高，达32.89％，随后逐渐降低。从果实直径、高及鲜重上看，都是逐步上升，到果实成熟为最高，直径可达2cm以上，鲜重可达6g以上。

物质含量测定：分别测定各采收时间覆盆子总多酚、总黄酮、总多糖、水浸出物、醇浸出物、鞣花酸、山柰酚-3-0-芸香糖苷及椴树苷含量。

其中，总多酚采用福林酚紫外分光光度计法测定；总黄酮采用三氯化铝紫外分光光度计法测定；总多糖采用硫酸-苯酚紫外分光光度计法测定；水浸出物及醇浸出物采用2015版《中国药典》四部浸出物测定法测定；鞣花酸、山柰酚-3-0-芸香糖苷及椴树苷采用高效液相色谱法测定。

如图4所示，不同采收期覆盆子总黄酮、总多酚含量逐显著降低。总多酚从15.12％到果实成熟时降为2.42％，下降了84.0％；总黄酮由3.07％下降到0.85％，下降比率达72.3％；总多糖含量先降低后升高，再黄果时最低4.63％，随后随着果实成熟变红总多糖含量升高达11.33％。推测为部分物质成分转化为多糖类物质。

如图5所示，醇浸出物及水浸出物变化趋势一致，先降低再升高，在5月4日，黄色时含量最低，此时水浸出物含量从34.60％低至20.75％，下降了40.03％；醇浸出物含量从45.24％低至25.37％，下降了43.92％，果实变黄后在变红的过程中。醇水浸出物的含量逐步升高，水浸出物含量从20.75％升高至48.89％，升高了135.61％；醇浸出物含量从20.75％低至50.70％，升高了144.33％。推测果实由青转红的过程中，物质成分发生了一定的转化。

由图6、图7可以看出不同采收期覆盆子鞣花酸、山柰酚-3-O-芸香糖苷和椴树苷含量显著降低。鞣花酸含量由0.448％下降至0.037％，下降了91.7％。山柰酚-3-O-芸香糖苷含量由0.09％下降至0.023％，下降了74.4％，椴树苷由0.054％下降至0.005％，下降了90.7％。《中国药典》覆盆子项下规定，含鞣花酸不得少于0.20％；含山柰酚-3-O-芸香糖苷不得少于0.03％，椴树苷虽然是鉴别，但是要求薄层色谱中有斑点。因此如果想采收质量合格的覆盆子，可见采收时间至关重要。当果实变黄鞣花酸、山柰酚-3-O-芸香糖苷含量已经不符合药典规定。因此，建议采收期在5月1日以前，果实青或刚刚青转黄为最佳。

综上所述，不同采收期覆盆子物质成分含量除浸出物及多糖含量外，其他均随着时间显著降低含量。较适宜采收期建议为4月下旬至5月1日变黄之前采收，此时折干率也较高，物质成分含量易达药典指标。

采用spss 24.0软件对覆盆子颜色值与各物质成分进行相关性分析，以水浸出物、醇浸出物、总黄酮、总多糖、总多酚、鞣花酸、椴树苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷为自变量，以颜色值L、a、b分别为因变量进行相关性分析，结果见表1。

表1覆盆子颜色与物质成分相关性分析结果

注：*表示显著差异，**表示极显著差异

在相关系数中大于0.8为高度相关关系，0.5～0.8为中度相关关系，0.3～0.5是低度相关性，小于0.3不相关。由表1可见，覆盆子不同采收期其外观颜色L，a，b值与物质成分含量均具有一定相关性。L值与总多酚、山柰酚-3-O-芸香糖苷及椴树苷有显著的正相关性，相关系数值达0.9、0.846和0.865；与总黄酮及鞣花酸、水浸出物含量有中度正相关性，且与水浸出物为负相关，与醇浸出物有低度负相关性；与多糖含量不相关。

a值与总多酚、山柰酚-3-O-芸香糖苷及椴树苷呈显著负相关，相关系数值分别为-0.894、-0.812和-0.933；与总黄酮、水浸出物、鞣花酸呈中度相关性，除水浸出物为正相关外其余为负相关。a值与醇浸出物呈低度正相关，与多糖不相关。

b值与水浸出物呈显著负相关，相关系数值为-0.868；与总多酚、总多糖、醇浸出物、山柰酚-3-O-芸香糖苷含量呈中度相关关系，其中与醇浸出物及总多糖为负相关外，其余均为正相关；与总黄酮、鞣花酸及椴树苷呈低度相关性。

用spss软件进一步对覆盆子成熟过程中外观颜色数据进行判别分析，1-6分别代表覆盆子6个果实不同成熟时间，得到判别分析图8。由图可以看出，覆盆子成熟过程中外观颜色标准有一定区别，大致可分成三类，1～4组为一类(4月4日至4月24日)，该类的覆盆子颜色基本为青果，且有效物质含量较高；黄转红(5月14日)为一类，红果(5月20日)为一类，距离1～4组的距离稍微远。

同时通过6个生长时期的8种物质成分变量进行数据规格化变换，然后进行聚类分析，见图9，结果显示总体6个不同生长时期分2类，成熟期红果一类，1～5为一类，该类中2、3、4距离较近为一小类，1和5为一小类。分析在果实生长中期，其物质成分含量相接近，较稳定；早期和中晚期，含量值不稳定而晚期物质成分含量大部分偏低。该结果与图8颜色判别结果较接近，进一步说明了覆盆子颜色与内在物质成分有一定的相关性。

综合实验结果看，要得到符合药典标准的覆盆子，较适宜采收期在4月下旬至5月1日左右，果实未变黄之时采收最佳，(其色度值L为52.87±3.14，a值为-2.01±1.58，b值为28.31±3.88)。此时相关农艺性状为果实直径在12.49±0.56mm，高14.25±1.19mm，果实重量在1.20±0.14g，此时折干率也相对较高，对种植户来讲，此时采收效益较大，过迟采收药材质量会不合格。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种确定药用覆盆子采收期的方法，其特征在于，以覆盆子颜色作为判定药用覆盆子的采收期指标，确定药用覆盆子适宜的采收期；所述覆盆子颜色判定标准为：覆盆子果实色度值中L值为49.73～56.01，a值为-3.59～-0.43，b值为24.43～32.19。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述覆盆子适宜的采收期为4月下旬至5月1日。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述覆盆子变黄之前采收为适宜的采收期。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述覆盆子采收时的农艺性状判定标准为：覆盆子果实直径为12.49±0.56mm，高14.25±1.19mm，果实重量为1.20±0.14g。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，从覆盆子落花坐果开始，直至果实成熟呈红色，定期采收取样，测定覆盆子的外观颜色、农艺性状、有效物质含量及产量。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述采收取样的间隔期为8～12d。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述农艺性状包括果实的直径、高度、重量及折干率的一种或多种。

8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述有效物质包括覆盆子中总多酚、总黄酮、总多糖、水浸出物、醇浸出物、鞣花酸、山柰酚-3-0-芸香糖苷及椴树苷中的一种或多种。

9.一种如权利要求1～8任意一项所述方法在覆盆子药用质量评估中的应用。

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