CN112897705A - 一种多层氧化石墨烯改性微生物载体的制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种多层氧化石墨烯改性微生物载体的制备方法和应用。该方法利用硅烷偶联剂对聚氨酯载体进行表面功能改性，通过在载体表面接枝多层氧化石墨烯，增大载体的比表面积和表面结构，加快了微生物表面附着过程，从而提高载体的生物负载能力；并且，通过氧化石墨烯为聚氨酯载体引入亲水性功能基团，提高改性后的聚氨酯生物载体的亲水性，从而增强载体的生物亲和性。同时，本发明提供的多层氧化石墨烯改性微生物载体的制备方法具有工艺简单、成本低、改性载体的热稳定性强等特点，其制备的改性微生物载体将有利于解决生物固定化过程中挂膜时间长的问题，在生物反应污水处理系统中具有很好的应用前景。

Description

一种多层氧化石墨烯改性微生物载体的制备方法和应用

技术领域

本发明涉及污水处理领域，其主要涉及一种多层氧化石墨烯改性微生物载体的制备方法和应用。

背景技术

伴随着污废水排放量的不断增大，使得水环境问题得到了越来越多的关注。最常用的污水生物处理方法主要有活性污泥法和生物膜法。其中，生物膜法是利用载体表面作为介质，将游离状态的微生物细胞定位于载体表面范围内形成以微生物为主的生物膜，使其保持活性并可反复利用，具有的污泥排放量小、抗冲击能力强及动力消耗低等显著优势。

微生物载体是污水生物膜处理工艺的关键因素，对生物反应的处理效果有至关重要的作用，其细胞亲和性与和载体接触的细胞行为特别是细胞在载体表面的粘附有着紧密的关系，且微生物载体的投加费用在生物反应处理系统的投资中占据比较大的比重。

然而，现有技术中，常用的微生物载体，如聚氨酯载体，其表面的疏水性将直接降低微生物在其表面的粘附速度和粘附量。因此，微生物载体本身的性质直接决定了污水的处理效果以及处理系统运行管理稳定性等一系列问题。

发明内容

为解决上述问题，基于硅烷偶联剂分子结构中包含的三个活性较高的可水解的乙氧基端基，本发明提供了一种多层氧化石墨烯改性微生物载体和应用，该载体，是通过硅烷偶联剂将多个二维结构的氧化石墨烯接枝到聚氨酯载体上，形成的空间多层氧化石墨烯的新型多层氧化石墨烯改性微生物载体。该载体具有制备方法简单方便、性能可靠等优点；同时，在提高聚氨酯载体的亲水性、生物亲和性、热稳定性等方面具有优势，可以达到强化生物膜功能、提高污水处理效率的目的。具体内容如下：

第一方面，本发明实施例提供了一种多层氧化石墨烯改性微生物载体的制备方法，所述方法包括：

步骤1，通过紫外灯对第一后处理的聚氨酯载体，进行照射，得到第一中间产物；

步骤2，配置6wt％的硅烷偶联剂乙醇溶液，超声震荡10min，使溶液充分分散；

步骤3，通过高锰酸钾和过氧化氢，对石墨粉进行氧化，得到氧化石墨烯；

步骤4，将所述第一中间产物放入所述硅烷偶联剂乙醇溶液中并完全浸没，置于置于40℃的反应温度下搅拌反应12h；反应结束后用去离子水洗涤，干燥，得到第二中间产物；

步骤5，用NaOH配置pH＝8.5的乙醇溶液，并向所述乙醇溶液中加入所述氧化石墨烯，置于超声波清洗器中震荡30min，分散均匀，得到氧化石墨烯分散液；

步骤6，将所述第二中间产物置于所述氧化石墨烯分散液中，置于恒温磁力搅拌器上反应，并对反应结束后所得的固体产物进行超声清洗、干燥，得到多层氧化石墨烯改性微生物载体。

可选地，在所述步骤1中，所述第一后处理包括：

将聚氨酯海绵放入超声波清洗器中震荡洗涤，再用去离子水清洗，得到洁净的聚氨酯载体；

将洁净的聚氨酯载体置于烘箱中干燥，得到洁净、干燥的聚氨酯载体。

可选地，所述震荡洗涤的时间为30-40min。

可选地，所述照射的时间为30-60min。

可选地，通过所述照射，所述聚氨酯中的酰胺键断裂，羧酸基团形成，得到所述第一中间产物。

可选地，所述步骤3，包括：

将9:1硫酸/磷酸混合溶液与石墨粉进行混合，得到第一混合溶液；

将所述第一混合溶液置于冰水浴中，并向所述第一混合溶液中加入高锰酸钾，搅拌，得到第二混合溶液；

将所述第二混合溶液置于50℃条件下，搅拌反应12h，得到第一反应体系；

向所述第一反应体系中加入冰水并置于冰水浴中冷却；

向冷却后的第一反应体系中加入过氧化氢溶液，直至第一反应体系的混合液变为亮黄色，得到第二反应体系；

对所述第二反应体系进行第二后处理，得到氧化石墨烯。

可选地，所述石墨粉与所述高锰酸钾的质量比为1:6；

所述第一反应体系与所述冰的体积比为1:1；

所述过氧化氢溶液的质量分数浓度为0.5％；

所述第二后处理包括：对所述第二反应体系进行高速离心，得到沉淀物，再依次用去离子水、10％盐酸、无水乙醇对所述沉淀物进行离心洗涤，接着在50℃条件下对洗涤后的沉淀物进行真空干燥。

可选地，在所述步骤5中，所述氧化石墨烯的乙醇分散液的溶度为0.2-1.0mg/mL。

可选地，在所述步骤6中，所述反应的反应温度60℃，反应时间为24h；

所述干燥的温度为40℃；

所述超声清洗的清洗剂包括去离子水。

第二方面，本发明实施例提供了一种多层氧化石墨烯改性微生物载体的应用，将上述第一方面所述多层氧化石墨烯改性微生物载体应用于污水处理中；或

将上述第一方面所述多层氧化石墨烯改性微生物载体应用于微生物固化中。

本发明提供了一种多层氧化石墨烯改性微生物载体的制备方法和应用。该方法包括：通过紫外灯对第一后处理的聚氨酯载体，进行照射，得到第一中间产物；配置6wt％的硅烷偶联剂乙醇溶液，超声震荡10min，使溶液充分分散；通过高锰酸钾和过氧化氢，对石墨粉进行氧化，得到氧化石墨烯；将所述第一中间产物放入所述硅烷偶联剂乙醇溶液中并完全浸没，置于置于40℃的反应温度下搅拌反应12h；反应结束后用去离子水洗涤，干燥，得到第二中间产物；用NaOH配置pH＝8.5的乙醇溶液，并向乙醇溶液中加入所述氧化石墨烯，置于超声波清洗器中震荡30min，分散均匀，得到氧化石墨烯分散液；将所述第二中间产物置于氧化石墨烯分散液中，置于恒温磁力搅拌器上反应，并对反应结束后所得的固体产物进行超声清洗、干燥，得到多层氧化石墨烯改性微生物载体。与现有技术相比，本发明提供的制备方法具有以下有益效果：

1、硅烷偶联剂分子结构中，包含三个活性较高的可水解的乙氧基端基，从而通过硅烷偶联剂，可以实现在聚氨酯载体上同时接枝多个石墨烯片层，达到对聚氨酯载体吸附功能的较大化提升；同时，这些乙氧基端基在水乳化过程中会水解生成硅羟基，成膜干燥过程中硅羟基之间迅速缩合，形成网状结构，而这一网状结构可以大幅度提高聚氨酯热稳定性，从而得到热稳定性较高的微生物载体。

2、本发明所提供的制备方法中，利用硅烷偶联剂，在聚氨酯载体的表面接枝氧化石墨烯，以得到新型结构的多层氧化石墨烯改性微生物载体，相较于聚氨酯载体，多层氧化石墨烯改性微生物载体的比表面积和表面结构均大幅增加，可有效提高对污水中微生物的粘附量，达到高效净化污水的目的，并且，多层氧化石墨烯改性微生物载体表面存在大量的亲水基团，其在污水处理过程中与生物膜细胞具有良好的生物相容性，从而提高了多层氧化石墨烯改性微生物载体的挂膜速度和挂膜量。因此，通过本发明提供的制备方法，制得的多层氧化石墨烯改性微生物载体，在相对少量的投放量情况下，仍可达到良好的净化效果，实现了减少微生物载体投加费用的目的，具有经济性。

3、通过本发明提供的方法，将二维的氧化石墨烯在硅烷偶联剂的交联作用下，形成共价结合形成的多层氧化石墨烯接枝到聚氨酯载体表面。多层氧化石墨烯与单层氧化石墨烯相似，表面含有大量的活性基团，如羟基(-OH)、环氧基[-C(O)C-]、羰基(-C＝O)、羧基(-COOH)等，但分散性相对于单层氧化石墨烯具有非常明显的优势，避免了氧化石墨烯的高比表面积和范德华力相互作用下使其倾向于严重聚集的局限性，大大增强载体表面积，为微生物在生物膜形成过程中提供大量的附着点。

综上所述，本发明提供的制备方法，具有改性方法操作简单，条件温和，改性后的聚氨酯载体亲水性、生物亲和性及热稳定性显著增强，有助于加速微生物在载体表面的附着过程，易于载体表面生物膜快速形成，提高生物反应污水处理工艺的系统处理效率和稳定性。

附图说明

图1示出了本发明实施例中的一种多层氧化石墨烯改性微生物载体制备方法的方法流程图；

图2示出了本发明实施例中的一种多层氧化石墨烯改性微生物载体的主要制备反应过程图；

图3示出了未改性的聚氨酯载体的SEM图；

图4示出了本实施1中制备的三维空间化多层氧化石墨烯改性微生物载体的SEM图；

图5示出了未改性的聚氨酯载体进行挂膜培养试验的SEM图；

图6示出了对本实施1制备的多层氧化石墨烯改性微生物载体进行挂膜培养试验后的SEM图。

具体实施方式

提供下述实施例是为了更好地进一步理解本发明，并不局限于所述最佳实施方式，不对本发明的内容和保护范围构成限制，任何人在本发明的启示下或是将本发明与其他现有技术的特征进行组合而得出的任何与本发明相同或相近似的产品，均落在本发明的保护范围之内。

实施例中未注明具体实验步骤或条件者，按照本领域内的文献所描述的常规实验步骤的操作或条件即可进行。所用试剂以及其他仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规试剂产品。

氧化石墨烯作为一种单原子层碳薄片，具有大的比表面积、良好的水分散能力和生物相容性，且表面含有大量可修饰的有氧活性官能团，如羧基、羰基、羟基、和环氧基等，使其化学性质活泼，易于修饰。

本发明利用硅烷偶联剂γ-氨丙基三乙氧基硅烷，接枝氧化石墨烯达到对聚氨酯进行表面功能化改性：一方面，氧化石墨烯具有丰富的羟基、羧基、羰基和环氧基团等活性含氧基团，因此，对改性载体引入亲水性基团，可以大大增强聚氨酯改性生物载体的生物亲和性；另一方面，氧化石墨烯具有较大的比表面积及表面皱褶形貌，有助于改善载体表面的结构特征，提高载体表面粗糙度，增加微生物细胞在载体表面附着的作用点，从而实现增强填料生物亲和性的改性。

第一方面，本发明提供了一种多层氧化石墨烯改性微生物载体的制备方法，如图1所示，该方法具体包括如下步骤：

步骤1(S11)，通过紫外灯对第一后处理的聚氨酯载体，进行照射，得到第一中间产物。

本实施例中，第一后处理的聚氨酯载体具有洁净、干燥的特点。具体实施时，将洁净、干燥的聚氨酯载体平铺于紫外灯下方照射30～60min，在紫外灯的照射过程中，聚氨酯中的酰胺键断裂，羧酸基团形成，得到第一中间产物。

可选地，在本实施例的步骤1中，该第一后处理包括：

将聚氨酯海绵放入超声波清洗器中震荡洗涤30～40min，再用去离子水清洗，得到洁净的聚氨酯载体；将洁净的聚氨酯载体置于烘箱中干燥，得到洁净、干燥的聚氨酯载体。

步骤2(S12)，配置6wt％的硅烷偶联剂乙醇溶液，超声震荡10min，使溶液充分分散。

具体实施时，将硅烷偶联剂KH550(γ-氨丙基三乙氧基硅烷，APTES)加入到乙醇溶液中，超声震荡10min，使溶液充分分散，得到6wt％的硅烷偶联剂乙醇溶液。

步骤3(S13)，通过高锰酸钾和过氧化氢，对石墨粉进行氧化，得到氧化石墨烯。

具体实施时，将石墨粉加入到9:1硫酸/磷酸混合溶液中搅拌均匀，得到第一混合溶液，并将第一混合溶液置于冰水浴中；然后在搅拌状态下，向第一混合溶液缓慢加入高锰酸钾，搅拌达到混合均匀，再在50℃温度条件下磁力搅拌反应12h，反应结束后得到第一反应体系；向第一反应体系中加入冰水并置于冰水浴中冷却；向冷却后的第一反应体系中加入过氧化氢溶液直至混合液(即第一反应体系)变为亮黄色，得到第二反应体系；对第二反应体系进行高速离心，然后取剩余沉淀物，依次用去离子水、10％盐酸、无水乙醇离心洗涤该沉淀物，并将洗涤后的沉淀置于真空干燥箱内干燥，即得氧化石墨烯。其中，干燥所需的温度可为50℃。

可选地，该步骤3中，石墨粉与高锰酸钾的质量比可为1:6；第一反应体系与加入的冰水的体积比可为1:1；过氧化氢溶液的质量分数浓度可为0.5％。

步骤4(S14)，将所述第一中间产物放入所述硅烷偶联剂乙醇溶液中并完全浸没，置于置于40℃的反应温度下搅拌反应12h；反应结束后用去离子水洗涤，干燥，得到第二中间产物。

具体实施时，将步骤1中得到的紫外辐照过的第一中间产物，放置于步骤2配制的硅烷偶联剂乙醇溶液中，并完全浸没，置于恒温磁力搅拌器上反应，反应温度为40℃，反应时间12h。反应结束后用去离子水洗涤，干燥，得到第二中间产物。

步骤5(S15)，用NaOH配置pH＝8.5的乙醇溶液，并向所述乙醇溶液中加入所述氧化石墨烯，置于超声波清洗器中震荡30min，分散均匀，得到氧化石墨烯分散液。

具体实施时，用NaOH配置pH＝8.5的乙醇溶液，并向该乙醇溶液中加入步骤3制得的氧化石墨烯，置于超声波清洗器中震荡30min，分散均匀，得到氧化石墨烯分散液。

可选地，该步骤4中，氧化石墨烯分散液的溶度为0.2～1.0mg/mL。

步骤6(S16)，将所述第二中间产物置于所述氧化石墨烯分散液中，置于恒温磁力搅拌器上反应，并对反应结束后所得的固体产物进行超声清洗、干燥，得到多层氧化石墨烯改性微生物载体。

具体实施时，将步骤4得到的第二中间产物置于步骤5的石墨烯分散液中，置于恒温磁力搅拌器上反应，反应温度为60℃，反应时间为24h。反应结束后，将固体产物利用超声清洗、40℃烘箱中干燥，产物即为生物亲和性强的基于硅烷表面功能改性的多层氧化石墨烯改性微生物载体。

通过本发明实施例提供的制备方法，利用硅烷偶联剂对聚氨酯载体进行表面功能改性，通过在载体表面接枝氧化石墨烯，增大载体的比表面积和表面结构，加快了微生物表面附着过程，从而提高载体的生物负载能力；并且，通过氧化石墨烯为聚氨酯载体引入亲水性功能基团，提高改性后的聚氨酯生物载体的亲水性，从而增强载体的生物亲和性。同时，本发明提供的多层氧化石墨烯改性微生物载体的制备方法具有工艺简单、成本低、改性载体的热稳定性强等特点，其制备的多层氧化石墨烯改性微生物载体将有利于解决生物固定化过程中挂膜时间长的问题，在生物反应污水处理系统中具有很好的应用前景。

为使本领域技术人员更好地理解本发明，以下通过多个具体的实施例来说明本发明提供的多层氧化石墨烯改性微生物载体的制备方法。

实施例1(多层氧化石墨烯改性微生物载体的制备)

(1)将聚氨酯载体切割成直径约1cm的球体，放入超声波清洗器中震荡洗涤30min后，用去离子水清洗，置于烘箱中干燥，得到洁净的聚氨酯载体；

(2)将洁净、干燥的聚氨酯载体平铺于紫外灯下方照射60min，聚氨酯中的酰胺键断裂，形成羧酸基团，得到第一中间产物；

(3)配置6wt％的硅烷偶联剂KH550(γ-氨丙基三乙氧基硅烷，APTES)的乙醇溶液，超声震荡10min，使溶液充分分散；

(4)制备氧化石墨烯：将1.5g石墨粉加入到9:1硫酸/磷酸混合溶液200mL中搅拌均匀并置于冰水浴中；缓慢加入9.0g高锰酸钾，搅拌达到混合均匀，50℃条件下磁力搅拌反应12h；反应结束后向混合溶液中加入冰水并置于冰水浴中冷却；加入质量分数浓度为0.5％过氧化氢溶液直至混合液变为亮黄色；混合液高速离心后取剩余沉淀物，依次用去离子水、10％盐酸、无水乙醇离心洗涤，该沉淀在50℃下真空干燥箱内干燥，所得即氧化石墨烯；

(5)取紫外辐照过的聚氨酯泡沫，放配置的APTES的乙醇溶液中完全浸没，置于恒温磁力搅拌器上反应，40℃，反应12h。反应结束后用去离子水洗涤，干燥；

(6)用NaOH配置pH＝8.5的乙醇溶液。加入氧化石墨烯，置于超声波清洗器中震荡30min，分散均匀，成0.5mg/mL的氧化石墨烯的乙醇分散液；

(7)将步骤5得到的产物置于步骤6的分散液中，置于恒温磁力搅拌器上，60℃，反应24h。反应结束后，将固体产物利用超声清洗、40℃烘箱中干燥，产物即为生物亲和性强的改性聚氨酯载体。

图3示出了未改性的聚氨酯载体的SEM图，图4示出了本实施1中制备的多层氧化石墨烯改性微生物载体的SEM图。如图3和图4所示，未改性载体的表面比较光滑，与未改性的聚氨酯载体对照相比，本实施1中制备的多层氧化石墨烯改性微生物载体表面有分散性的、呈现多向性的(石墨烯)结构。这主要是由于借助了硅烷偶联剂APTES的桥联作用将多层氧化石墨烯接枝到紫外辐照改性的聚氨酯表面，制备出新型生物改性载体材料，克服了单层氧化石墨烯高比表面积和范德华力相互作用导致的严重聚集现象。

实施例2(微生物固定化)

利用实施例1制得的氧化石墨烯改性聚氨酯载体，进行生物挂膜试验。生物固定化载体先用营养液浸湿，置于500mL玻璃三角瓶中，瓶中加入200m L的营养液。接种北京大学拥有自主知识产权的高效微生物制剂，按4g/L投加。置于恒温振荡器中培养，温度设为30℃。

在培养到第21天时，图5示出了未改性的聚氨酯载体进行挂膜培养试验的SEM图，图6示出了对本实施1制备的多层氧化石墨烯改性微生物载体进行挂膜培养试验后的SEM图。如图5和6所示，与未改性的聚氨酯载体对照相比，在培养到第21天时，改性载体表面的挂膜量明显比未改性载体的多、生物膜发育快，并且，由图5和图6可知，未改性填料表面有独立的球菌粘附在填料表面，且球菌附近有类似EPS(extracellular polymericsubstances，胞外多聚物)结构存在；基于氧化石墨烯改性的聚氨酯载体表面观察到有丰富的、堆积在一起的微生物的团簇体，且在生物膜结构中有类似石墨烯褶皱的突起。提取挂膜培养过程末期即第21天的填料球表面附着的微生物的DNA，对总细菌16S rDNA丰度进行定量分析，未改性载体为1.22×10¹⁰copies/g carrier，改性填料上16S rDNA的丰度为2.28×10¹⁰copies/g carrier，是未改性载体的1.87倍。选用相似水平为97％的OTU数据进行Venn统计作图分析，结果为有154种细菌是两种载体表面共有的，此外未改性载体表面特有的细菌有59种，改性载体表面特有的细菌有52种。改性载体能够提高生物负载量，加速挂膜速度。

其中，“copies/g carrier”是单位，表示：每克填料上的微生物基因丰度的拷贝数。

需要指出的是，本申请的各个实施例中的步骤和方法，不仅限于对应的实施例中，各个实施例的操作细节以及注意事项，互相都是相应的。

本发明实施例第二方面提供了一种多层氧化石墨烯改性微生物载体的应用，将上述第一方面所述多层氧化石墨烯改性微生物载体应用于污水处理中；或

将上述第一方面所述多层氧化石墨烯改性微生物载体应用于微生物固化中。

对于方法实施例，为了简单描述，故将其都表述为一系列的动作组合，但是本领域技术人员应该知悉，本发明并不受所描述的动作顺序的限制，因为依据本发明，某些步骤可以采用其他顺序或者同时进行。其次，本领域技术人员也应该知悉，说明书中所描述的实施例均属于优选实施例，所涉及的动作和部件并不一定是本发明所必须的。

以上对本发明所提供的多层氧化石墨烯改性微生物载体的制备方法和应用进行了详细介绍，本文中应用了具体个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想；同时，对于本领域的一般技术人员，依据本发明的思想，在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处，综上所述，本说明书内容不应理解为对本发明的限制。

Claims (10)

1.一种多层氧化石墨烯改性微生物载体的制备方法，其特征在于，所述方法包括：

步骤1，通过紫外灯对第一后处理的聚氨酯载体，进行照射，得到第一中间产物；

步骤2，配置6wt％的硅烷偶联剂乙醇溶液，超声震荡10min，使溶液充分分散；

步骤3，通过高锰酸钾和过氧化氢，对石墨粉进行氧化，得到氧化石墨烯；

步骤4，将所述第一中间产物放入所述硅烷偶联剂乙醇溶液中并完全浸没，置于置于40℃的反应温度下搅拌反应12h；反应结束后用去离子水洗涤，干燥，得到第二中间产物；

步骤5，用NaOH配置pH＝8.5的乙醇溶液，并向所述乙醇溶液中加入所述氧化石墨烯，置于超声波清洗器中震荡30min，分散均匀，得到氧化石墨烯分散液；

步骤6，将所述第二中间产物置于所述氧化石墨烯分散液中，置于恒温磁力搅拌器上反应，并对反应结束后所得的固体产物进行超声清洗、干燥，得到多层氧化石墨烯改性微生物载体。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，在所述步骤1中，所述第一后处理包括：

将聚氨酯海绵放入超声波清洗器中震荡洗涤，再用去离子水清洗，得到洁净的聚氨酯载体；

将洁净的聚氨酯载体置于烘箱中干燥，得到洁净、干燥的聚氨酯载体。

3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述震荡洗涤的时间为30～40min。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，在所述步骤1中，所述照射的时间为30～60min。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，在所述步骤1中，通过所述照射，所述聚氨酯中的酰胺键断裂，羧酸基团形成，得到所述第一中间产物。

6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤3，包括：

将9:1硫酸/磷酸混合溶液与石墨粉进行混合，得到第一混合溶液；

将所述第一混合溶液置于冰水浴中，并向所述第一混合溶液中加入高锰酸钾，搅拌，得到第二混合溶液；

将所述第二混合溶液置于50℃条件下，搅拌反应12h，得到第一反应体系；

向所述第一反应体系中加入冰水并置于冰水浴中冷却；

向冷却后的第一反应体系中加入过氧化氢溶液，直至第一反应体系的混合液变为亮黄色，得到第二反应体系；

对所述第二反应体系进行第二后处理，得到氧化石墨烯。

7.根据权利要求6所述方法，其特征在于，所述石墨粉与所述高锰酸钾的质量比为1:6；

所述第一反应体系与所述冰的体积比为1:1；

所述过氧化氢溶液的质量分数浓度为0.5％；

所述第二后处理包括：对所述第二反应体系进行高速离心，得到沉淀物，再依次用去离子水、10％盐酸、无水乙醇对所述沉淀物进行离心洗涤，接着在50℃条件下对洗涤后的沉淀物进行真空干燥。

8.根据权利要求1所述方法，其特征在于，在所述步骤5中，所述氧化石墨烯的乙醇分散液的溶度为0.2～1.0mg/mL。

9.根据权利要求1所述方法，其特征在于，在所述步骤6中，所述反应的反应温度60℃，反应时间为24h；

所述干燥的温度为40℃；

所述超声清洗的清洗剂包括去离子水。

10.一种多层氧化石墨烯改性微生物载体的应用，其特征在于，将上述权利要求1～9中任意一项所述多层氧化石墨烯改性微生物载体应用于污水处理中；或

将上述权利要求1～9中任意一项所述多层氧化石墨烯改性微生物载体应用于微生物固化中。

Images