CN112890196A - 一种灵芝黄精胶囊及其制备方法 - Google Patents

一种灵芝黄精胶囊及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种灵芝黄精胶囊及其制备方法，原料按照重量份数计包括灵芝提取物35‑45份，黄精提取物70‑80份，当归提取物20‑30份，蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物170‑180份，淀粉28‑36份，改性魔芋葡甘露低聚糖粉10‑18份，崩解剂5‑10份；本发明提供的灵芝黄精胶囊在原料药提取过程中，利用分子印迹吸附技术吸附多糖和腺苷，能够提高灵芝黄精胶囊中粗多糖和腺苷的含量，提升产品品质，此外，本发明在辅料处理中通过对魔芋葡甘露低聚糖、滑石粉改性能够加快药物的崩解速度，提高药物吸收率，进一步提升药效。

Description

一种灵芝黄精胶囊及其制备方法
技术领域
本发明属于保健食品技术领域，更具体地，涉及一种灵芝黄精胶囊及其制备方法。
背景技术
蝙蝠蛾拟青霉菌粉、灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物中的主要活性成分多糖和腺苷成分能够达到增强免疫力、缓解体力疲劳等保健功能。但现有药物中的灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物和蝙蝠蛾拟青霉菌提取物中腺苷和多糖的提取率不高，质量偏低，达不到增强免疫、缓解体力疲劳等保健功能，且药物配方中崩解剂溶解在水中时粘度大、滑石粉具有疏水性，造成药物的崩解速度慢，从而影响药物的吸收和药效发挥。
综上所述，如何设计一种灵芝黄精胶囊制备方法，能够提高其中的多糖和腺苷含量，提高药物在体内的崩解速度是目前急需解决的问题。
发明内容
本发明的目的在于为了解决上述技术问题，而提供一种灵芝黄精胶囊及其制备方法，不仅能够提高灵芝黄精胶囊中粗多糖和腺苷的含量，同时还能提高药物的崩解速度，提升产品增强免疫力、缓解体力疲劳的药效。
本发明通过以下技术方案来实现上述目的：
一种灵芝黄精胶囊，包括：按照重量份数计包括灵芝提取物35-45份，黄精提取物70-80份，当归提取物20-30份，蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物170-180份，淀粉28-36份，改性魔芋葡甘露低聚糖粉10-18份，崩解剂5-10份。
其中，灵芝黄精胶囊具体制备工艺为：
（1）将上述原料过100目筛，并按配比称重备用；
（2）将灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物、混合10-20min，混合均匀，得混合粉1；
（3）将混合粉1和蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物混合20-40min，混合均匀，得混合粉2；
（4）将改性魔芋葡甘露低聚糖粉、崩解剂、淀粉混合均匀，得混合粉3；
（5）再将混合粉2与混合粉3混合10-20分钟，混合均匀，得总混物料；
（6）将上述总混物料在30万级洁净车间进行胶囊填充，0.35g/粒，得填充胶囊；再进行抛光，得灵芝黄精胶囊。
其中，灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物及蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物的制备方法为：
（1）多糖腺苷提取液的制备：
将灵芝、黄精、当归、蝙蝠蛾拟青霉菌粉分别干燥、粉碎，在温度为90-100℃的10倍质量蒸馏水中浸泡30分钟以上，冷却至常温，加入0.8-1.2%纤维素酶，酶解1h以上，90℃水浴1h，加入乙醇沉淀1-2h，6000-8000r/min 离心15-30min，抽滤除去沉淀物，分别得到灵芝、黄精、当归、蝙蝠蛾拟青霉菌粉多糖腺苷提取液。
（2）多糖、腺苷混合模板分子制备：
取步骤(1)中的提取液，分别用超滤膜UF-5（截留分子量为5000）对提取液分离，料液温度为30-35 ℃，操作压力为0.1-0.18 Mpa，运行超过30min后，残留液备用，得滤液1。残留液用膜孔径为0.2-0.4μm陶瓷膜分离，设置温度70-80℃，压力为 0.2-0.3Mpa，得滤液2，合并滤液1和滤液2浓缩干燥分别得到灵芝、黄精、当归、蝙蝠蛾拟青霉菌粉的多糖、腺苷混合模板分子。
（3）聚丙烯酰胺微球制备：
1)将分散剂失水山梨醇单油酸酯和环己烷，混合均匀作为油相；将单体丙烯酰胺和交联剂N，N-亚甲基双丙烯酰胺溶解在去离子水中作为水相；
2)将过硫酸钾和聚乙烯醇溶解在去离子水中作为引发剂溶液 ；
3)在50℃恒温水浴，缓慢将一半水相加入油相中，滴加一半引发剂溶液，搅拌均匀，反应30min后加入剩余一半水相和引发剂，混合均匀，用磷酸盐缓冲液调节PH为6-8，超声15-30min；
4)通入氮气30min-40min除去氧气，升温 至60 ℃ ， 反应 6-10h ，降低水浴温度至30-40℃，继续加热1h后，冰水冷却，用无水乙醇水洗3-5次，再用蒸馏水洗2-4次，抽滤收集固体物质干燥即聚丙烯酰胺微球。
失水山梨醇单油酸酯：环 己 烷：丙烯酰胺：N，N-亚甲基双丙烯酰胺：去离子水：过硫酸钾：聚乙烯醇=4：40 ：7:0.15:15:0.148：0.245。
（4）多糖腺苷MIP微球制备：
1)将低共溶剂30份、交联剂1.3份 和甲基丙烯酸34份、聚氧乙烯 ( 23)十二烷基酯28份和步骤（3）中的聚丙烯酰胺微球200份 混合均匀，用磷酸盐缓冲液调节PH为8-9，继续再加入低共溶剂30份和步骤（2）中的多糖、腺苷混合模板分子600份，引发剂4.2份 超声20 min 混合均匀，将低共溶剂40份加入溶液中，用磁力搅拌子搅拌20min，再超声处理 20min混合均匀。
2)用氮气除去溶液反应器中的氧气，除氧过程中保持真空，将除氧后的溶液在50℃油浴30min，再升温至60℃加热30min，反应完成后用冷水冷却至室温。
3)将冷却后的溶液真空抽滤，过滤后的固体用3倍量洗脱剂超声洗脱3次，再用饱和食盐水洗2次，再用甲醇洗脱1次，除去未反应的单体和模板分子。收集反应后的白色固体，浓缩干燥即多糖腺苷MIP微球。
其中交联剂为海藻酸钠，低共溶剂为甘油：乙二醇=1:2，引发剂为偶氮二异丁酸二甲酯，洗脱剂为体积比为8∶2 -2.5的甲醇-乙酸。
（4）多糖、腺苷吸附方法
按体积重量比为10:1称取多糖腺苷粗提取液和多糖腺苷MIP微球，混合均匀，超声15min，用磁力搅拌子搅拌30min搅拌均匀，振荡反应15h，抽滤，滤出的固体用甲醇-乙酸(8∶2-2.5) 超声洗脱3-5次，重复吸附洗脱程序3-5次，最后用 0.45 μm 水相滤膜过滤，滤液浓缩干燥分别得到灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物、蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物。
其中，改性魔芋葡甘露低聚糖粉的制备为取魔芋葡甘露低聚糖10份加入5倍重量的去离子水，30℃水浴加热30min，另取醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯1-1.5份溶解在乙醇：水=1:1中，将醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯溶液搅拌加入魔芋葡甘露低聚糖溶液中，50℃恒温水浴中30min，用稀醋酸调节PH为6继续升温至90-100℃水浴，水浴20 min。水浴过程中不断搅拌，冷却至常温后，5000-6000r/min离心，取上清液，置于真空中用液氮冷冻干燥得改性魔芋葡甘露低聚糖粉。
其中，崩解剂的制备为按3-3.5:4.5-5.5：8-10的比例称取硬脂酸镁、多库酯钠、滑石粉研磨均匀，加入10倍的65%乙醇溶解；滑石粉干燥后过100目筛，分3次搅拌加入上述溶液中，用恒温磁力搅拌器搅拌15-30min搅拌均匀，冰醋酸调节PH为4，在80-90℃高温水浴100min，冷却至室温后超声30min，蒸馏除去乙醇，浓缩干燥得崩解剂。
本发明的有益效果在于：
（1）本发明在原料提取过程中通过分子印迹技术提高了药物中多糖和腺苷有效成分的含量。
（2）本发明在制备分子印迹微球过程中，通过优化聚丙烯酰胺微球制备工艺，提高聚丙烯酰胺微球性能质量，从而提高了吸附效率。
（3）本发明在制备分子印迹微球过程中，将致孔剂替换成绿色无毒性的低共熔溶剂，提高了药物的环保和安全。
（4）本发明在制备分子印迹微球过程中，通过添加聚氧乙烯 ( 23)十二烷基酯共聚增加聚合过程的稳定性，提高分子印迹微球的性能质量和吸附效率。
（5）本发明在辅料的处理过程中，通过醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯对魔芋葡甘露低聚糖改性，降低了药物溶于水时吸水产生的粘度，促进了药物崩解。
（6）本发明通过在滑石粉中加入多库酯钠和硬脂酸镁超声处理改善了滑石粉疏水的性质，进一步加快药物的崩解速度，提升产品药效。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：
一种灵芝黄精胶囊，包括：按照重量份数计包括灵芝提取物40份，黄精提取物75份，当归提取物25份，蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物175份，淀粉32份，改性魔芋葡甘露低聚糖粉14份，崩解剂8份。
其中，灵芝黄精胶囊具体制备工艺为：
（1）将上述原料过100目筛，并按配比称重备用；
（2）将灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物、混合15min，混合均匀，得混合粉1；
（3）将混合粉1和蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物混合30min，混合均匀，得混合粉2；
（4）将改性魔芋葡甘露低聚糖粉、崩解剂、淀粉混合均匀，得混合粉3；
（5）再将混合粉2与混合粉3混合15分钟，混合均匀，得总混物料；
（6）将上述总混物料在30万级洁净车间进行胶囊填充，0.35g/粒，得填充胶囊；再进行抛光，得灵芝黄精胶囊。
其中，灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物及蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物的制备方法为：
（1）多糖腺苷提取液的制备：
将灵芝、黄精、当归、蝙蝠蛾拟青霉菌粉分别干燥、粉碎，在温度为95℃的10倍质量蒸馏水中浸泡30分钟以上，冷却至常温，加入1%纤维素酶，酶解1h以上，90℃水浴1h，加入乙醇沉淀1.5h，7000r/min 离心20min，抽滤除去沉淀物，分别得到灵芝、黄精、当归、蝙蝠蛾拟青霉菌粉多糖腺苷提取液。
（2）多糖、腺苷混合模板分子制备：
取步骤(1)中的提取液，分别用超滤膜UF-5对提取液分离，料液温度为32 ℃，操作压力为0.15 Mpa，运行超过30min后，残留液备用，得滤液1。残留液用膜孔径为0.3μm陶瓷膜分离，设置温度75℃，压力为 0.25Mpa，得滤液2，合并滤液1和滤液2浓缩干燥分别得到灵芝、黄精、当归、蝙蝠蛾拟青霉菌粉的多糖、腺苷混合模板分子。
（3）聚丙烯酰胺微球制备：
1)将分散剂失水山梨醇单油酸酯和环己烷，混合均匀作为油相；将单体丙烯酰胺和交联剂N，N-亚甲基双丙烯酰胺溶解在去离子水中作为水相；
2)将过硫酸钾和聚乙烯醇溶解在去离子水中作为引发剂溶液 ；
3)在50℃恒温水浴，缓慢将一半水相加入油相中，滴加一半引发剂溶液，搅拌均匀，反应30min后加入剩余一半水相和引发剂，混合均匀，用磷酸盐缓冲液调节PH为7，超声20min；
4)通入氮气35min除去氧气，升温 至60 ℃ ， 反应 8h ，降低水浴温度至35℃，继续加热1h后，冰水冷却，用无水乙醇水洗4次，再用蒸馏水洗3次，抽滤收集固体物质干燥即聚丙烯酰胺微球。
失水山梨醇单油酸酯：环 己 烷：丙烯酰胺：N，N-亚甲基双丙烯酰胺：去离子水：过硫酸钾：聚乙烯醇=4：40 ：7:0.15:15:0.148：0.245。
（4）多糖腺苷MIP微球制备：
1)将低共溶剂30份、交联剂1.3份 和甲基丙烯酸34份、聚氧乙烯 ( 23)十二烷基酯28份和步骤（3）中的聚丙烯酰胺微球200份 混合均匀，用磷酸盐缓冲液调节PH为8.5，继续再加入低共溶剂30份和步骤（2）中的多糖、腺苷混合模板分子600份，引发剂4.2份 超声20 min 混合均匀，将低共溶剂40份加入溶液中，用磁力搅拌子搅拌20min，再超声处理 20min混合均匀。
2)用氮气除去溶液反应器中的氧气，除氧过程中保持真空，将除氧后的溶液在50℃油浴30min，再升温至60℃加热30min，反应完成后用冷水冷却至室温。
3)将冷却后的溶液真空抽滤，过滤后的固体用3倍量洗脱剂超声洗脱3次，再用饱和食盐水洗2次，再用甲醇洗脱1次，除去未反应的单体和模板分子。收集反应后的白色固体，浓缩干燥即多糖腺苷MIP微球。
其中交联剂为海藻酸钠，低共溶剂为甘油：乙二醇=1:2，引发剂为偶氮二异丁酸二甲酯，洗脱剂为体积比为8∶2.3的甲醇-乙酸。
（4）多糖、腺苷吸附方法
按体积重量比为10:1称取多糖腺苷粗提取液和多糖腺苷MIP微球，混合均匀，超声15min，用磁力搅拌子搅拌30min搅拌均匀，振荡反应15h，抽滤，滤出的固体用甲醇-乙酸(8∶2.3) 超声洗脱4次，重复吸附洗脱程序4次，最后用 0.45 μm 水相滤膜过滤，滤液浓缩干燥分别得到灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物、蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物。
其中，改性魔芋葡甘露低聚糖粉的制备为取魔芋葡甘露低聚糖10份加入5倍重量的去离子水，30℃水浴加热30min，另取醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯1.25份溶解在乙醇：水=1:1中，将醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯溶液搅拌加入魔芋葡甘露低聚糖溶液中，50℃恒温水浴中30min，用稀醋酸调节PH为6继续升温至95℃水浴，水浴20 min。水浴过程中不断搅拌，冷却至常温后，5500r/min离心，取上清液，置于真空中用液氮冷冻干燥得改性魔芋葡甘露低聚糖粉。
其中，崩解剂的制备为按3.3:5：9的比例称取硬脂酸镁、多库酯钠、滑石粉研磨均匀，加入10倍的65%乙醇溶解；滑石粉干燥后过100目筛，分3次搅拌加入上述溶液中，用恒温磁力搅拌器搅拌20min搅拌均匀，冰醋酸调节PH为4，在85℃高温水浴100min，冷却至室温后超声30min，蒸馏除去乙醇，浓缩干燥得崩解剂。
实施例2：
一种灵芝黄精胶囊，包括：按照重量份数计包括灵芝提取物35份，黄精提取物80份，当归提取物30份，蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物170份，淀粉36份，改性魔芋葡甘露低聚糖粉10份，崩解剂10份。
其中，灵芝黄精胶囊具体制备工艺为：
（1）将上述原料过100目筛，并按配比称重备用；
（2）将灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物、混合10min，混合均匀，得混合粉1；
（3）将混合粉1和蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物混合40min，混合均匀，得混合粉2；
（4）将改性魔芋葡甘露低聚糖粉、崩解剂、淀粉混合均匀，得混合粉3；
（5）再将混合粉2与混合粉3混合20分钟，混合均匀，得总混物料；
（6）将上述总混物料在30万级洁净车间进行胶囊填充，0.35g/粒，得填充胶囊；再进行抛光，得灵芝黄精胶囊。
其中，灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物及蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物的制备方法为：
（1）多糖腺苷提取液的制备：
将灵芝、黄精、当归、蝙蝠蛾拟青霉菌粉分别干燥、粉碎，在温度为100℃的10倍质量蒸馏水中浸泡30分钟以上，冷却至常温，加入0.8%纤维素酶，酶解1h以上，90℃水浴1h，加入乙醇沉淀2h，6000r/min 离心30min，抽滤除去沉淀物，分别得到灵芝、黄精、当归、蝙蝠蛾拟青霉菌粉多糖腺苷提取液。
（2）多糖、腺苷混合模板分子制备：
取步骤(1)中的提取液，分别用超滤膜UF-5（截留分子量为5000）对提取液分离，料液温度为30 ℃，操作压力为0.18 Mpa，运行超过30min后，残留液备用，得滤液1。残留液用膜孔径为0.2μm陶瓷膜分离，设置温度70℃，压力为 0.2Mpa，得滤液2，合并滤液1和滤液2浓缩干燥分别得到灵芝、黄精、当归、蝙蝠蛾拟青霉菌粉的多糖、腺苷混合模板分子。
（3）聚丙烯酰胺微球制备：
1)将分散剂失水山梨醇单油酸酯和环己烷，混合均匀作为油相；将单体丙烯酰胺和交联剂N，N-亚甲基双丙烯酰胺溶解在去离子水中作为水相；
2)将过硫酸钾和聚乙烯醇溶解在去离子水中作为引发剂溶液 ；
3)在50℃恒温水浴，缓慢将一半水相加入油相中，滴加一半引发剂溶液，搅拌均匀，反应30min后加入剩余一半水相和引发剂，混合均匀，用磷酸盐缓冲液调节PH为8，超声15min；
4)通入氮气30min除去氧气，升温 至60 ℃ ， 反应10h ，降低水浴温度至40℃，继续加热1h后，冰水冷却，用无水乙醇水洗3次，再用蒸馏水洗2次，抽滤收集固体物质干燥即聚丙烯酰胺微球。
失水山梨醇单油酸酯：环 己 烷：丙烯酰胺：N，N-亚甲基双丙烯酰胺：去离子水：过硫酸钾：聚乙烯醇=4：40 ：7:0.15:15:0.148：0.245。
（4）多糖腺苷MIP微球制备：
1)将低共溶剂30份、交联剂1.3份 和甲基丙烯酸34份、聚氧乙烯 ( 23)十二烷基酯28份和步骤（3）中的聚丙烯酰胺微球200份 混合均匀，用磷酸盐缓冲液调节PH为8，继续再加入低共溶剂30份和步骤（2）中的多糖、腺苷混合模板分子600份，引发剂4.2份 超声20min 混合均匀，将低共溶剂40份加入溶液中，用磁力搅拌子搅拌20min，再超声处理 20 min混合均匀。
2)用氮气除去溶液反应器中的氧气，除氧过程中保持真空，将除氧后的溶液在50℃油浴30min，再升温至60℃加热30min，反应完成后用冷水冷却至室温。
3)将冷却后的溶液真空抽滤，过滤后的固体用3倍量洗脱剂超声洗脱3次，再用饱和食盐水洗2次，再用甲醇洗脱1次，除去未反应的单体和模板分子。收集反应后的白色固体，浓缩干燥即多糖腺苷MIP微球。
其中交联剂为海藻酸钠，低共溶剂为甘油：乙二醇=1:2，引发剂为偶氮二异丁酸二甲酯，洗脱剂为体积比为8∶2 的甲醇-乙酸。
（4）多糖、腺苷吸附方法
按体积重量比为10:1称取多糖腺苷粗提取液和多糖腺苷MIP微球，混合均匀，超声15min，用磁力搅拌子搅拌30min搅拌均匀，振荡反应15h，抽滤，滤出的固体用甲醇-乙酸(8∶2.5) 超声洗脱3次，重复吸附洗脱程序5次，最后用 0.45 μm 水相滤膜过滤，滤液浓缩干燥分别得到灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物、蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物。
其中，改性魔芋葡甘露低聚糖粉的制备为取魔芋葡甘露低聚糖10份加入5倍重量的去离子水，30℃水浴加热30min，另取醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯1份溶解在乙醇：水=1:1中，将醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯溶液搅拌加入魔芋葡甘露低聚糖溶液中，50℃恒温水浴中30min，用稀醋酸调节PH为6继续升温至90℃水浴，水浴20 min。水浴过程中不断搅拌，冷却至常温后，6000r/min离心，取上清液，置于真空中用液氮冷冻干燥得改性魔芋葡甘露低聚糖粉。
其中，崩解剂的制备为按3.5:4.5：10的比例称取硬脂酸镁、多库酯钠、滑石粉研磨均匀，加入10倍的65%乙醇溶解；滑石粉干燥后过100目筛，分3次搅拌加入上述溶液中，用恒温磁力搅拌器搅拌15min搅拌均匀，冰醋酸调节PH为4，在80℃高温水浴100min，冷却至室温后超声30min，蒸馏除去乙醇，浓缩干燥得崩解剂。
实施例3：
按照重量份数计包括灵芝提取物45份，黄精提取物70份，当归提取物20份，蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物180份，淀粉28份，改性魔芋葡甘露低聚糖粉18份，崩解剂5份。
其中，灵芝黄精胶囊具体制备工艺为：
（1）将上述原料过100目筛，并按配比称重备用；
（2）将灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物、混合20min，混合均匀，得混合粉1；
（3）将混合粉1和蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物混合20min，混合均匀，得混合粉2；
（4）将改性魔芋葡甘露低聚糖粉、崩解剂、淀粉混合均匀，得混合粉3；
（5）再将混合粉2与混合粉3混合10分钟，混合均匀，得总混物料；
（6）将上述总混物料在30万级洁净车间进行胶囊填充，0.35g/粒，得填充胶囊；再进行抛光，得灵芝黄精胶囊。
其中，灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物及蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物的制备方法为：
（1）多糖腺苷提取液的制备：
将灵芝、黄精、当归、蝙蝠蛾拟青霉菌粉分别干燥、粉碎，在温度为90℃的10倍质量蒸馏水中浸泡30分钟以上，冷却至常温，加入1.2%纤维素酶，酶解1h以上，90℃水浴1h，加入乙醇沉淀1h，8000r/min 离心15min，抽滤除去沉淀物，分别得到灵芝、黄精、当归、蝙蝠蛾拟青霉菌粉多糖腺苷提取液。
（2）多糖、腺苷混合模板分子制备：
取步骤(1)中的提取液，分别用超滤膜UF-5（截留分子量为5000）对提取液分离，料液温度为35 ℃，操作压力为0.1 Mpa，运行超过30min后，残留液备用，得滤液1。残留液用膜孔径为0.4μm陶瓷膜分离，设置温度80℃，压力为0.3Mpa，得滤液2，合并滤液1和滤液2浓缩干燥分别得到灵芝、黄精、当归、蝙蝠蛾拟青霉菌粉的多糖、腺苷混合模板分子。
（3）聚丙烯酰胺微球制备：
1)将分散剂失水山梨醇单油酸酯和环己烷，混合均匀作为油相；将单体丙烯酰胺和交联剂N，N-亚甲基双丙烯酰胺溶解在去离子水中作为水相；
2)将过硫酸钾和聚乙烯醇溶解在去离子水中作为引发剂溶液 ；
3)在50℃恒温水浴，缓慢将一半水相加入油相中，滴加一半引发剂溶液，搅拌均匀，反应30min后加入剩余一半水相和引发剂，混合均匀，用磷酸盐缓冲液调节PH为6，超声30min；
4)通入氮气40min除去氧气，升温 至60 ℃ ， 反应 6h ，降低水浴温度至30℃，继续加热1h后，冰水冷却，用无水乙醇水洗5次，再用蒸馏水洗4次，抽滤收集固体物质干燥即聚丙烯酰胺微球。
失水山梨醇单油酸酯：环 己 烷：丙烯酰胺：N，N-亚甲基双丙烯酰胺：去离子水：过硫酸钾：聚乙烯醇=4：40 ：7:0.15:15:0.148：0.245。
（4）多糖腺苷MIP微球制备：
1)将低共溶剂30份、交联剂1.3份 和甲基丙烯酸34份、聚氧乙烯 ( 23)十二烷基酯28份和步骤（3）中的聚丙烯酰胺微球200份 混合均匀，用磷酸盐缓冲液调节PH为9，继续再加入低共溶剂30份和步骤（2）中的多糖、腺苷混合模板分子600份，引发剂4.2份 超声20min 混合均匀，将低共溶剂40份加入溶液中，用磁力搅拌子搅拌20min，再超声处理 20 min混合均匀。
2)用氮气除去溶液反应器中的氧气，除氧过程中保持真空，将除氧后的溶液在50℃油浴30min，再升温至60℃加热30min，反应完成后用冷水冷却至室温。
3)将冷却后的溶液真空抽滤，过滤后的固体用3倍量洗脱剂超声洗脱3次，再用饱和食盐水洗2次，再用甲醇洗脱1次，除去未反应的单体和模板分子。收集反应后的白色固体，浓缩干燥即多糖腺苷MIP微球。
其中交联剂为海藻酸钠，低共溶剂为甘油：乙二醇=1:2，引发剂为偶氮二异丁酸二甲酯，洗脱剂为体积比为8∶2.5的甲醇-乙酸。
（4）多糖、腺苷吸附方法
按体积重量比为10:1称取多糖腺苷粗提取液和多糖腺苷MIP微球，混合均匀，超声15min，用磁力搅拌子搅拌30min搅拌均匀，振荡反应15h，抽滤，滤出的固体用甲醇-乙酸(8∶2) 超声洗脱5次，重复吸附洗脱程序3次，最后用 0.45 μm 水相滤膜过滤，滤液浓缩干燥分别得到灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物、蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物。
其中，改性魔芋葡甘露低聚糖粉的制备为取魔芋葡甘露低聚糖10份加入5倍重量的去离子水，30℃水浴加热30min，另取醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯1.5份溶解在乙醇：水=1:1中，将醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯溶液搅拌加入魔芋葡甘露低聚糖溶液中，50℃恒温水浴中30min，用稀醋酸调节PH为6继续升温至100℃水浴，水浴20 min。水浴过程中不断搅拌，冷却至常温后，5000r/min离心，取上清液，置于真空中用液氮冷冻干燥得改性魔芋葡甘露低聚糖粉。
其中，崩解剂的制备为按3:5.5：8的比例称取硬脂酸镁、多库酯钠、滑石粉研磨均匀，加入10倍的65%乙醇溶解；滑石粉干燥后过100目筛，分3次搅拌加入上述溶液中，用恒温磁力搅拌器搅拌30min搅拌均匀，冰醋酸调节PH为4，在90℃高温水浴100min，冷却至室温后超声30min，蒸馏除去乙醇，浓缩干燥得崩解剂。
对比例1:
本对比例提供了一种灵芝黄精胶囊，包括：按照重量份数计包括灵芝提取物40份，黄精提取物75份，当归提取物25份，蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物175份，淀粉32份，改性魔芋葡甘露低聚糖粉8份，崩解剂8份。
其余同实施例1。
对比例2：
本对比例提供了一种灵芝黄精胶囊，包括：按照重量份数计包括灵芝提取物40份，黄精提取物75份，当归提取物25份，蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物175份，淀粉32份，改性魔芋葡甘露低聚糖粉20份，崩解剂8份。
其余同实施例1。
对比例3：
本对比例提供了一种灵芝黄精胶囊，包括：按照重量份数计包括灵芝提取物40份，黄精提取物75份，当归提取物25份，蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物175份，淀粉32份，魔芋葡甘露低聚糖粉14份，崩解剂8份。
其余同实施例1。
对比例4：
本对比例提供了一种灵芝黄精胶囊，包括：按照重量份数计包括灵芝提取物40份，黄精提取物75份，当归提取物25份，蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物175份，淀粉32份，改性魔芋葡甘露低聚糖粉14份，崩解剂4份。
其余同实施例1。
对比例5：
本对比例提供了一种灵芝黄精胶囊，包括：按照重量份数计包括灵芝提取物40份，黄精提取物75份，当归提取物25份，蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物175份，淀粉32份，改性魔芋葡甘露低聚糖粉14份，崩解剂11份。
其余同实施例1。
对比例6：
本对比例中崩解剂为按重量比为3.5:5.5：8的硬脂酸镁、多库酯钠、滑石粉直接混合添加。
其余同实施例1.
对比例7：
本对比例中将聚丙烯酰胺微球的制备方法替换成一般的制备工艺：
将6.4 g的山梨醇酐单油酸酯和1.6 g的聚氧乙烯辛基苯酚醚加入 50 g的白油中，搅拌均匀至完全分散呈黄色透明。将8.0 g的丙烯酰胺，1.1 g的2-丙烯酰胺-2-甲基丙磺酸和0.2 g的N，N'-亚 甲基双丙烯酰胺加入 30 g水中，搅拌至完全溶解后调节pH至中性，加入过硫酸铵的水溶液。将上述溶液混合，通氮气搅拌30 min，将亚硫酸氢钠溶液滴加到溶液中，升至一定温度反应一定时间，然后冷却至室温用无水乙醇反复洗涤三次，恒重烘干，然后研磨为白色粉末，即为聚丙烯酰胺微球.
其余同实施例1.
对比例8：
本对比例中在多糖腺苷MIP微球制备时将聚氧乙烯 ( 23)十二烷基酯的含量替换成24份。
其余同实施例1.
对比例9：
本对比例中在多糖腺苷MIP微球制备时将聚氧乙烯 ( 23)十二烷基酯的含量替换成32份。
其余同实施例1.
对比例10：
本对比例中在多糖腺苷MIP微球制备时不添加聚氧乙烯 ( 23)十二烷基酯。
其余同实施例1.
对比例11：
本对比例中在多糖腺苷MIP微球制备时将低共溶剂换成二甲亚砜。
其余同实施例1.
对比例12：
本对比例中灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物及蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物的制备方法为：
（1）将灵芝、黄精、当归、蝙蝠蛾拟青霉菌粉分别干燥、粉碎，在温度为95℃的10倍质量蒸馏水中浸泡30分钟以上，冷却至常温，加入1%纤维素酶，酶解1h以上，90℃水浴1h，加入乙醇沉淀1.5h，7000r/min 离心20min，抽滤除去沉淀物，分别得到灵芝、黄精、当归、蝙蝠蛾拟青霉菌粉的多糖、腺苷提取液，将提取液浓缩干燥为粉末，即为灵芝、黄精、当归、蝙蝠蛾拟青霉菌粉的多糖、腺苷混合模板分子。
（2）聚丙烯酰胺微球制备：
1)将分散剂失水山梨醇单油酸酯和环己烷，混合均匀作为油相；将单体丙烯酰胺和交联剂N，N-亚甲基双丙烯酰胺溶解在去离子水中作为水相；
2)将过硫酸钾和聚乙烯醇溶解在去离子水中作为引发剂溶液 ；
3)在50℃恒温水浴，缓慢将一半水相加入油相中，滴加一半引发剂溶液，搅拌均匀，反应30min后加入剩余一半水相和引发剂，混合均匀，用磷酸盐缓冲液调节PH为7，超声20min；
4)通入氮气35min除去氧气，升温 至60 ℃ ， 反应 8h ，降低水浴温度至35℃，继续加热1h后，冰水冷却，用无水乙醇水洗4次，再用蒸馏水洗3次，抽滤收集固体物质干燥即聚丙烯酰胺微球。
失水山梨醇单油酸酯：环 己 烷：丙烯酰胺：N，N-亚甲基双丙烯酰胺：去离子水：过硫酸钾：聚乙烯醇=4：40 ：7:0.15:15:0.148：0.245。
（3）多糖腺苷MIP微球制备：
1)将低共溶剂30份、交联剂1.3份 和甲基丙烯酸34份、聚氧乙烯 ( 23)十二烷基酯28份和步骤（3）中的聚丙烯酰胺微球200份 混合均匀，用磷酸盐缓冲液调节PH为8.5，继续再加入低共溶剂30份和步骤（1）中的多糖、腺苷混合模板分子600份，引发剂4.2份 超声20 min 混合均匀，将低共溶剂40份加入溶液中，用磁力搅拌子搅拌20min，再超声处理 20min混合均匀。
2)用氮气除去溶液反应器中的氧气，除氧过程中保持真空，将除氧后的溶液在50℃油浴30min，再升温至60℃加热30min，反应完成后用冷水冷却至室温。
3)将冷却后的溶液真空抽滤，过滤后的固体用3倍量洗脱剂超声洗脱3次，再用饱和食盐水洗2次，再用甲醇洗脱1次，除去未反应的单体和模板分子。收集反应后的白色固体，浓缩干燥即多糖腺苷MIP微球。
其中交联剂为海藻酸钠，低共溶剂为甘油：乙二醇=1:2，引发剂为偶氮二异丁酸二甲酯，洗脱剂为体积比为8∶2.3的甲醇-乙酸。
（4）多糖、腺苷吸附方法
按体积重量比为10:1分别称取步骤（1）中多糖腺苷粗提取液和多糖腺苷MIP微球，混合均匀，超声15min，用磁力搅拌子搅拌30min搅拌均匀，振荡反应15h，抽滤，滤出的固体用甲醇-乙酸(8∶ 2.3) 超声洗脱4次，重复吸附洗脱程序4次，最后用 0.45 μm 水相滤膜过滤，滤液浓缩干燥分别得到灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物、蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物。
其余同实施例1.
对比例13：
本对比例中灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物及蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物的制备方法为：将灵芝、黄精、当归、蝙蝠蛾拟青霉菌粉分别干燥、粉碎，在温度为95℃的10倍质量蒸馏水中浸泡30分钟以上，冷却至常温，加入1%纤维素酶，酶解1h以上，90℃水浴1h，加入乙醇沉淀1.5h，7000r/min 离心20min，抽滤除去沉淀物，将滤液浓缩干燥为粉末，分别得到灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物及蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物。
其余同实施例1.
对比例14：
本对比例中在多糖腺苷MIP微球制备中，低共溶剂的含量为35份。
其余同实施例1.
对比例15：
本对比例中在多糖腺苷MIP微球制备中，低共溶剂的含量为45份。
其余同实施例1.
对比例16：
本对比例中聚丙烯酰胺微球制备方法为：
1)将分散剂失水山梨醇单油酸酯和环己烷，混合均匀作为油相；将单体丙烯酰胺和交联剂N，N-亚甲基双丙烯酰胺溶解在去离子水中作为水相；
2)将过硫酸钾和聚乙烯醇溶解在去离子水中作为引发剂溶液 ；
3)在50℃恒温水浴，将水相、引发剂溶液加入油相中，搅拌混合均匀，用磷酸盐缓冲液调节PH为7；
4)通入氮气35min除去氧气，60 ℃水浴8h ，用无水乙醇水洗4次，再用蒸馏水洗3次，抽滤收集固体物质干燥即聚丙烯酰胺微球。
失水山梨醇单油酸酯：环 己 烷：丙烯酰胺：N，N-亚甲基双丙烯酰胺：去离子水：过硫酸钾：聚乙烯醇=4：40 ：7:0.15:15:0.148：0.245。
其余同实施例1.
对比例17：
本对比例中一种灵芝黄精胶囊，包括：按照重量份数计包括灵芝提取物40份，黄精提取物75份，当归提取物25份，蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物175份，淀粉32份，质量比为10:1的魔芋葡甘露低聚糖粉和醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯混合物14份，崩解剂8份。
其中，灵芝黄精胶囊具体制备工艺为：
（1）将上述原料过100目筛，并按配比称重备用；
（2）将灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物、混合15min，混合均匀，得混合粉1；
（3）将混合粉1和蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物混合30min，混合均匀，得混合粉2；
（4）将魔芋葡甘露低聚糖粉和醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯混合物、崩解剂、淀粉混合均匀，得混合粉3；
（5）再将混合粉2与混合粉3混合15分钟，混合均匀，得总混物料；
（6）将上述总混物料在30万级洁净车间进行胶囊填充，0.35g/粒，得填充胶囊；再进行抛光，得灵芝黄精胶囊。
其余同实施例1..
对比例18：
本对比例中将崩解剂替换成滑石粉为9份。
其余同实施例1.
对比例19：
本对比例中崩解剂的制备方法为按3.3：9的比例称取硬脂酸镁、滑石粉研磨均匀，加入10倍的65%乙醇溶解；滑石粉干燥后过100目筛，分3次搅拌加入上述溶液中，用恒温磁力搅拌器搅拌20min搅拌均匀，冰醋酸调节PH为4，在85℃高温水浴100min，冷却至室温后超声30min，蒸馏除去乙醇，浓缩干燥得崩解剂。
其余同实施例1.
对比例20：
本对比例中崩解剂的制备为按5：9的比例称取多库酯钠、滑石粉研磨均匀，加入10倍的65%乙醇溶解；滑石粉干燥后过100目筛，分3次搅拌加入上述溶液中，用恒温磁力搅拌器搅拌20min搅拌均匀，冰醋酸调节PH为4，在85℃高温水浴100min，冷却至室温后超声30min，蒸馏除去乙醇，浓缩干燥得崩解剂。
其余同实施例1.
对比例21：
本对比例中崩解剂的制备为按4：4：9的比例称取硬脂酸镁、多库酯钠、滑石粉研磨均匀，加入10倍的65%乙醇溶解；滑石粉干燥后过100目筛，分3次搅拌加入上述溶液中，用恒温磁力搅拌器搅拌20min搅拌均匀，冰醋酸调节PH为4，在85℃高温水浴100min，冷却至室温后超声30min，蒸馏除去乙醇，浓缩干燥得崩解剂。
其余同实施例1.
对比例22：
本对比例中崩解剂的制备为按4：4：9的比例称取硬脂酸镁、多库酯钠、滑石粉研磨均匀，加入10倍的65%乙醇溶解；滑石粉干燥后过100目筛，分3次搅拌加入上述溶液中，用恒温磁力搅拌器搅拌20min搅拌均匀，冰醋酸调节PH为4，在85℃高温水浴100min，冷却至室温后超声30min，蒸馏除去乙醇，浓缩干燥得崩解剂。
其余同实施例1.
对比例23：
本对比例中崩解剂的制备为按:2:6：9的比例称取硬脂酸镁、多库酯钠、滑石粉研磨均匀，加入10倍的65%乙醇溶解；滑石粉干燥后过100目筛，分3次搅拌加入上述溶液中，用恒温磁力搅拌器搅拌20min搅拌均匀，冰醋酸调节PH为4，在85℃高温水浴100min，冷却至室温后超声30min，蒸馏除去乙醇，浓缩干燥得崩解剂。
其余同实施例1.
按《保健食品功效成分检测方法》中“多糖的检测方法”规定的方法测定灵芝黄精胶囊中多糖含量，按《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）“保健食品中腺苷的测定”规定的方法测定灵芝黄精胶囊中腺苷含量，结果如表1:
表1
Figure 495938DEST_PATH_IMAGE001
由表1结果可知，与对比例7-16相比，采用本发明实施例1-3制备的灵芝黄精胶囊，能够明显提高灵芝黄精胶囊中多糖和腺苷的含量和品质。
一、按《中华人民共和国药典》一部规定的方法测定灵芝黄精胶囊的崩解时限，结果如表2：
表2
Figure 849296DEST_PATH_IMAGE002
由表3结果可知，与对比例1-6、17-22相比，采用本发明实施例1-3制备的灵芝黄精胶囊，能够明显提高灵芝黄精胶囊的崩解速度。

Claims (7)

1.一种灵芝黄精胶囊，其特征在于：原料按照重量份数计包括灵芝提取物35-45份，黄精提取物70-80份，当归提取物20-30份，蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物170-180份，淀粉28-36份，改性魔芋葡甘露低聚糖粉10-18份，崩解剂5-10份。
2.根据权利要求1所述的一种灵芝黄精胶囊，其特征在于：
所述灵芝黄精胶囊的制备工艺为：
（1）将原料过100目筛，并按配比称重备用；
（2）将灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物、混合10-20min，混合均匀，得混合粉1；
（3）将混合粉1和蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物混合20-40min，混合均匀，得混合粉2；
（4）将改性魔芋葡甘露低聚糖粉、崩解剂、淀粉混合均匀，得混合粉3；
（5）再将混合粉2与混合粉3混合10-20分钟，混合均匀，得总混物料；
（6）将上述总混物料在30万级洁净车间进行胶囊填充，0.35g/粒，得填充胶囊；再进行抛光，得灵芝黄精胶囊。
3.根据权利要求1所述的一种灵芝黄精胶囊，其特征在于：所述灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物及蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物的制备方法为：
（1）多糖腺苷提取液的制备：
将灵芝、黄精、当归、蝙蝠蛾拟青霉菌粉分别干燥、粉碎，在温度为90-100℃的10倍质量蒸馏水中浸泡30分钟以上，冷却至常温，加入0.8-1.2%纤维素酶，酶解1h以上，90℃水浴1h，加入乙醇沉淀1-2h，6000-8000r/min 离心15-30min，抽滤除去沉淀物，分别得到灵芝、黄精、当归、蝙蝠蛾拟青霉菌粉多糖腺苷提取液；
多糖、腺苷混合模板分子制备：
取步骤(1)中的提取液，分别用超滤膜UF-5对提取液分离，料液温度为30-35 ℃，操作压力为0.1-0.18 Mpa，运行超过30min后，残留液备用，得滤液1；残留液用膜孔径为0.2-0.4μm陶瓷膜分离，设置温度70-80℃，压力为 0.2-0.3Mpa，得滤液2，合并滤液1和滤液2浓缩干燥分别得到灵芝、黄精、当归、蝙蝠蛾拟青霉菌粉的多糖、腺苷混合模板分子；
（3）聚丙烯酰胺微球制备：
1)将分散剂失水山梨醇单油酸酯和环己烷，混合均匀作为油相；将单体丙烯酰胺和交联剂N，N-亚甲基双丙烯酰胺溶解在去离子水中作为水相；
2)将过硫酸钾和聚乙烯醇溶解在去离子水中作为引发剂溶液 ；
3)在50℃恒温水浴，缓慢将一半水相加入油相中，滴加一半引发剂溶液，搅拌均匀，反应30min后加入剩余一半水相和引发剂，混合均匀，用磷酸盐缓冲液调节PH为6-8，超声15-30min；
4)通入氮气30min-40min除去氧气，升温 至60 ℃ ， 反应 6-10h ，降低水浴温度至30-40℃，继续加热1h后，冰水冷却，用无水乙醇水洗3-5次，再用蒸馏水洗2-4次，抽滤收集固体物质干燥即聚丙烯酰胺微球；
（4）多糖腺苷MIP微球制备：
1)将低共溶剂30份、交联剂1.3份 和甲基丙烯酸34份、聚氧乙烯 ( 23)十二烷基酯28份和步骤（3）中的聚丙烯酰胺微球200份 混合均匀，用磷酸盐缓冲液调节PH为8-9，继续再加入低共溶剂30份和步骤（2）中的多糖、腺苷混合模板分子600份，引发剂4.2份 超声20min 混合均匀，将低共溶剂40份加入溶液中，用磁力搅拌子搅拌20min，再超声处理 20 min混合均匀；
2)用氮气除去溶液反应器中的氧气，除氧过程中保持真空，将除氧后的溶液在50℃油浴30min，再升温至60℃加热30min，反应完成后用冷水冷却至室温；
3)将冷却后的溶液真空抽滤，过滤后的固体用3倍量洗脱剂超声洗脱3次，再用饱和食盐水洗2次，再用甲醇洗脱1次，除去未反应的单体和模板分子；收集反应后的白色固体，浓缩干燥即多糖腺苷MIP微球；
（5）多糖、腺苷提取
按体积重量比为10:1称取多糖腺苷粗提取液和多糖腺苷MIP微球，混合均匀，超声15min，用磁力搅拌子搅拌30min搅拌均匀，振荡反应15h，抽滤，滤出的固体用体积比为8∶2-2.5的甲醇-乙酸超声洗脱3-5次，重复吸附洗脱程序3-5次，最后用 0.45 μm 水相滤膜过滤，滤液浓缩干燥分别得到灵芝提取物、黄精提取物、当归提取物、蝙蝠蛾拟青霉菌粉提取物。
4.根据权利要求3所述的一种灵芝黄精胶囊，其特征在于：所述聚丙烯酰胺微球制备中失水山梨醇单油酸酯、环己烷、丙烯酰胺、N，N-亚甲基双丙烯酰胺、去离子水、过硫酸钾、聚乙烯醇按体积比为4：40 ：7：0.15：15：0.148：0.245。
5.根据权利要求3所述的一种灵芝黄精胶囊，其特征在于：所述多糖腺苷MIP微球制备中交联剂为海藻酸钠，低共溶剂为甘油：乙二醇=1：2，引发剂为偶氮二异丁酸二甲酯，洗脱剂为体积比为8∶2 -2.5的甲醇-乙酸。
6.根据权利要求1所述的一种灵芝黄精胶囊，其特征在于：所述改性魔芋葡甘露低聚糖粉的制备：
取魔芋葡甘露低聚糖10份加入5倍重量的去离子水，30℃水浴加热30min，另取醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯1-1.5份溶解在乙醇：水=1:1中，将醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯溶液搅拌加入魔芋葡甘露低聚糖溶液中，50℃恒温水浴中30min，用稀醋酸调节PH为6继续升温至90-100℃水浴，水浴20 min；水浴过程中不断搅拌，冷却至常温后，5000-6000r/min离心，取上清液，置于真空中用液氮冷冻干燥得改性魔芋葡甘露低聚糖粉。
7.根据权利要求1所述的一种灵芝黄精胶囊，其特征在于：所述崩解剂的制备：
按3-3.5：4.5-5.5：8-10的比例称取硬脂酸镁、多库酯钠、滑石粉研磨均匀，加入10倍的65%乙醇溶解；滑石粉干燥后过100目筛，分3次搅拌加入上述溶液中，用恒温磁力搅拌器搅拌15-30min搅拌均匀，冰醋酸调节PH为4，在80-90℃高温水浴100min，冷却至室温后超声30min，蒸馏除去乙醇，浓缩干燥得崩解剂。
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