CN112870151B

CN112870151B - 一种含聚谷氨酸钠的皮肤屏障修复组合物及其应用

Info

Publication number: CN112870151B
Application number: CN202110171085.XA
Authority: CN
Inventors: 陈建刚; 万涛; 蔡冬波; 李鑫; 陈守文; 刘高升
Original assignee: Wuhan Junan Biological Technology Co ltd
Current assignee: Wuhan Junan Biological Technology Co ltd
Priority date: 2021-02-08
Filing date: 2021-02-08
Publication date: 2022-10-18
Anticipated expiration: 2041-02-08
Also published as: CN112870151A

Abstract

本发明属于化妆品领域，具体涉及一种含聚谷氨酸钠的皮肤屏障修复组合物及其应用，由聚谷氨酸钠、地衣芽孢杆菌WX‑02谷氨酸发酵产物滤液、神经酰胺脂质体组成。本发明配方从微生态屏障修复、皮脂修复和角质层屏障修复三个方面协同修复皮肤屏障，帮助皮肤重新建立结构完整的三层屏障，促使屏障受损肌肤重回健康状态，提高保湿效果，肌肤光滑有弹性，皮肤含水量至少提高了50%，水份损失至少降低了12%，皮肤弹性至少提高了15%，受试者使用后皮肤指标保湿、光滑、紧致有弹性、光泽四项分值分别至少提高了57%、27%、33%、34%。该组合物可以添加到水、精华、乳液、膏霜等常用的化妆品剂型中并稳定存在，有很好的实用价值。

Description

一种含聚谷氨酸钠的皮肤屏障修复组合物及其应用

技术领域

本发明属于化妆品领域，具体涉及一种含聚谷氨酸钠的皮肤屏障修复组合物及其应用。

背景技术

随着近来全球气候改变，环境污染严重，各种外界污染对人体的皮肤造成了损害，日益紧张的工作和快节奏的生活，更加剧了皮肤屏障的受损，造成水份流失过快，外部有害物质侵入皮肤，造成皮肤粗糙、松弛、敏感、老化等问题。

皮肤的天然屏障是指角质层屏障和皮肤表面附有的皮脂膜，由此共同形成了一道物理屏障。角质层屏障是角质层细胞之间的脂质和水份组成的“砖墙结构”。皮脂膜参与皮肤表面弱酸性pH的形成，同时阻止皮肤水份散失。

正常的皮肤屏障除了物理屏障之外，还有不容忽视的微生物生理屏障。皮肤表面微生物菌群可分为暂驻菌和常驻菌。常驻菌和皮肤是友好共生关系，具有占位保护作用，犹如在皮肤表面形成生物膜，作为屏障阻挡外源性暂驻菌的入侵。暂驻菌和常驻菌相互依赖制约，形成了独特的微生态屏障。目前市面上基本都是修复物理屏障，很少涉及微生态屏障的修复，而对于屏障受损的问题皮肤，不仅要促进物理屏障的修复同时还要考虑微生态屏障。此外，哪些微生物的协同作用才能更好的发挥微生态的屏障作用目前尚不清楚，也未有人研究涉足。

发明内容

为了解决这种皮肤屏障受损问题，本发明是提供一种皮肤屏障修复组合物，，包括地衣芽孢杆菌WX-02谷氨酸发酵产物滤液、聚谷氨酸钠和神经酰胺脂质体。

本发明的另一个目的在于提供皮肤屏障修复组合物在制备成护肤品中的应用。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种皮肤屏障修复组合物，由下述组分按质量百分比组成：地衣芽孢杆菌WX-02谷氨酸发酵产物滤液40-98％，聚谷氨酸钠1-30％，神经酰胺脂质体1-30％。

所述的地衣芽孢杆菌WX-02的保藏编号为CCTCC NO：M208065，已在申请号为200810055068.4的申请中公开。

以上所述的组分中，优选的，所述的地衣芽孢杆菌WX-02谷氨酸发酵产物滤液的制备方法包括：

以1-5％的接种量将地衣芽孢杆菌WX-02种子液接于发酵培养基中，培养温度30-37℃，发酵时间40h；发酵结束后，将发酵液放出，使用离心机过滤除菌，再使用超滤膜除去发酵液中的盐和其他小分子杂质，再转入真空环境40℃加热，进一步去除水分浓缩体积，并保留大部分功效成分，体积浓缩后加入防腐剂，即得；所述的发酵培养基为：50-70g/L葡萄糖， 10-30g/L谷氨酸钠，5-10g/L柠檬酸钠，3-8g/LNH₄Cl,0.5-1g/L K₂HPO₄，0.5-1g/LMgSO₄·7H₂O， 0.5-1g/L ZnSO₄·7H₂O，0.5-1g/L CaCl₂·H₂O，pH 7.20-7.50；

所述聚谷氨酸钠的平均分子量为700k-1200kDa。

一种皮肤屏障修复组合物在制备成护肤品种的应用；包括制备成乳液、精华液、膏霜等，

以上所述的应用中，优选的，所述组合物在护肤品中的占比为1％～20％(质量百分比)；

当制备成精华液时，各组分在精华液中的质量份数为：甘油1-5、丁二醇1-5、黄原胶 0.1-1，对羟基苯乙酮0.1-1，己二醇0.1-1、皮肤屏障修复组合物1-20、加水至100。

以上所述的精华液，精华液中的基质包括溶剂、增稠剂、防腐剂，还可以包括香精。所述溶剂选自但不限于丙二醇、甘油、丁二醇中的一种或多种。所述防腐剂选自但不限于苯氧乙醇、对羟基苯乙酮、氯苯甘醚中的一种或多种。所述的增稠剂选自但不限于黄原胶、卡波姆、丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物中的一种或多种。

与现有技术相比，本发明具有以下优点：

本发明提供一种皮肤屏障修复组合物，通过聚谷氨酸钠、神经酰胺脂质体和地衣芽孢杆菌WX-02杆菌谷氨酸发酵产物滤液的协同增效作用，利用外补充内刺激的机理，达到修复多重屏障，促进皮肤长效修复的效果，克服了单一组分修复皮肤屏障的不足，能在8小时将皮肤水份含量至少提高50％，经皮水份流失至少减少12％，皮肤弹性至少提高15％，具有长效修复效果。受试者使用后皮肤指标保湿、光滑、紧致有弹性、光泽四项分值分别至少提高了57％、27％、33％、34％。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步说明，但本发明不受下述实施例的限制。本发明所述的技术方案，如未特别说明，均为本领域的常规方案；所述试剂或材料，如未特别说明，均来源于商业渠道。

本发明实施例所用的神经酰胺脂质体购自韩国NFC公司；聚谷氨酸钠购自武汉骏安生物科技公司，其平均分子量为700k-1200kDa。其余购自商业渠道的上述试剂，也能完成本发明。

本发明实施例所用的地衣芽孢杆菌WX-02谷氨酸发酵产物滤液的制备方法包括：

将活化的地衣芽孢杆菌WX-02(CCTCC NO：M208065)接于种子培养基37℃培养10h；以3％的接种量将种子液接于发酵培养基中，培养温度37℃，发酵时间40h；发酵结束后，将发酵液放出，使用离心机过滤除菌，再使用相对分子量为5000D的超滤膜除去发酵液中的盐和其他小分子杂质，再转入真空环境40℃加热，进一步去除水分浓缩体积，并保留大部分功效成分，体积浓缩至原体积五分之一时加入防腐剂(4g/L对羟基苯乙酮和4g/L 1,2-己二醇)，获得地衣芽孢杆菌WX-02谷氨酸发酵滤液；

所述的种子培养基的配方是：5g/L酵母提取物、10g/L胰蛋白胨、10g/L氯化钠(pH7.20)；

所述的发酵培养基为：70g/L葡萄糖，30g/L谷氨酸钠，10g/L柠檬酸钠，8g/LNH₄Cl,1g/L K₂HPO₄，1g/LMgSO₄·7H₂O，1g/L ZnSO₄·7H₂O，1g/L CaCl₂·H₂O(pH 7.20)

实施例1：

一种含聚谷氨酸钠的皮肤屏障修复组合物的精华液，包括下述重量份的组分：

实验组1：

皮肤屏障修复组合物10，丁二醇3，甘油2，黄原胶0.5，对羟基苯乙酮0.5，己二醇0.5，加水至100；

所述的皮肤屏障修复组合物由下述组分按重量份组成：地衣芽孢杆菌WX-02谷氨酸发酵产物滤液40，聚谷氨酸钠30，神经酰胺脂质体30。

制备方法：

1、称取黄原胶用丁二醇、甘油充分分散，得混合物a；

2、在混合物a中加入适量水，边搅拌边加入皮肤屏障修复组合物，最后加入对羟基苯乙酮，己二醇搅拌至混合均匀。

实验组2：

所述的皮肤屏障修复组合物由下述组分按重量份组成：地衣芽孢杆菌WX-02谷氨酸发酵产物滤液98，聚谷氨酸钠1，神经酰胺脂质体1。

制备方法同实验组1。

实验组3：

所述的皮肤屏障修复组合物由下述组分按重量份组成：地衣芽孢杆菌WX-02谷氨酸发酵产物滤液70，聚谷氨酸钠15，神经酰胺脂质体15。

制备方法同实验组1。

实验组4：

皮肤屏障修复组合物1，丁二醇3，甘油2，黄原胶0.5，对羟基苯乙酮0.5，己二醇0.5，加水至100；

实验组5：

皮肤屏障修复组合物20，丁二醇3，甘油2，黄原胶0.5，对羟基苯乙酮0.5，己二醇0.5，加水至100；

实验组6：

皮肤屏障修复组合物10，丁二醇1，甘油1，黄原胶0.1，对羟基苯乙酮0.1，己二醇0.1，加水至100；

所述的皮肤屏障修复组合物同实验组1；

实验组7：

皮肤屏障修复组合物10，丁二醇5，甘油5，黄原胶1，对羟基苯乙酮1，己二醇1，加水至 100；

所述的皮肤屏障修复组合物同实验组1；

实施例2：

一种含聚谷氨酸钠的皮肤屏障修复组合物的精华液对照组：

对照组1：本对照组中，皮肤屏障修复组合物为皮肤屏障修复组合物1，其中的地衣芽孢杆菌WX-02谷氨酸发酵产物滤液替换为枯草芽胞杆菌168(NZ_CP010052.1)谷氨酸发酵滤液；其余组分和含量同实施例1的实验组1，即：皮肤屏障修复组合物1 10，丁二醇3，甘油2，黄原胶0.5，对羟基苯乙酮0.5，己二醇0.5，加水至100；所述的枯草芽胞杆菌168 (NZ_CP010052.1)谷氨酸发酵滤液的发酵参数和条件同地衣芽孢杆菌WX-02谷氨酸发酵产物滤液。

对照组2：在本对照组中，皮肤屏障修复组合物为皮肤屏障修复组合物2，由下述组分按重量份组成：地衣芽孢杆菌WX-02谷氨酸发酵产物滤液80，神经酰胺脂质体20；其余组分和含量同实施例1的实验组1。

对照组3：在本对照组中，皮肤屏障修复组合物为皮肤屏障修复组合物3，由下述组分按重量份组成：聚谷氨酸钠30，神经酰胺脂质体30，水40；其余组分和含量同实施例1的实验组1。

对照组4：在本对照组中，皮肤屏障修复组合物为皮肤屏障修复组合物4，由下述组分按重量份组成：地衣芽孢杆菌WX-02谷氨酸发酵产物滤液80，聚谷氨酸钠20；其余组分和含量同实施例1的实验组1。

对照组5：在本对照组中，不含皮肤屏障修复组合物，由下述组分按重量份组成：丁二醇3，甘油2，黄原胶0.5，对羟基苯乙酮0.5，己二醇0.5，加水至100。

实施例3：

一种含聚谷氨酸钠的皮肤屏障修复组合物的精华液及其对照组的效果：

1、功效仪器评估：测试仪器：德国CK公司的皮肤弹性测试仪Cutometer DualMPA580，皮肤水份含量测试探头Corneometer CM 825，皮肤水份流失测试探头TewameterTM300；测试环境条件：所有测试都是在密闭空间，温度控制在20-22℃，湿度控制在40％-60％的条件下进行

2、测试步骤

选择30名年龄在25-40岁的受试者，受试者双手前臂内侧在使用测试样品前2-3天应保证没有使用任何化妆品。受试者双手前臂内侧应做好试验区域标记，试验区域面积为3cm×3cm，同一手臂可同时标记多个区域，每个试验区域之间间隔至少1cm。实验组和对照组涂抹在试验区应随机分布于左右手臂标记区域，确保所有测试样品的试验区域位置在统计学上达到平衡。测试样品按1mg的用量进行单次涂布，将试样均匀涂布于试验区内。受试者在测试期间每日早晚在试验区域使用测试样品，使用后将测试样品保存于家用冰箱。在每次仪器测试前受试者需要统一清洁双手前臂内侧，清洁方法为用干的面巾纸擦拭干净，然后在符合标准的房间内静坐20min，不能喝水和饮料，前臂暴露，呈测试状态放置，保持放松。测试时间为使用前，使用后8小时，第二周和第四周。

2.1皮肤屏障修复测试

使用Corneometer CM 825对受试者双手前臂内侧试验区水分含量进行测试，每个试验区各测试3次MMV值取平均值，MMV值代表皮肤角质层水分含量，MMV值越高，表明皮肤角质层水份含量越高。最后统计30受试者实验组和对照组的MMV值平均值。

使用Tewameter TM300对受试者双手前臂内侧试验区进行经皮水分流失率测试，每个试验区各测试3次TEWL值取平均值，TEWL值代表经皮水份流失率，数值越低，表明皮肤角质层水份流失率越低。最后统计30受试者实验组和对照组的TEWL值平均值。。

表1不同样品的皮肤水份含量(MMV值)

	使用前	8小时	2周	4周
					实验组1	34.66	58.11	53.30	53.61
实验组2	34.97	54.79	51.74	52.41
					实验组3	34.37	56.32	53.74	51.83
实验组4	33.33	51.98	49.06	47.41
					实验组5	34.56	59.15	52.98	53.01
实验组6	33.77	50.69	47.45	48.12
					实验组7	33.97	51.49	49.28	50.32
对照组1	32.62	50.35	46.23	46.72
					对照组2	32.97	46.19	44.81	44.25
对照组3	32.57	46.60	43.16	43.83
					对照组4	32.30	47.66	44.40	42.98
对照组5	32.49	39.64	39.13	36.36

表2不同样品的经皮水份流失(TEWL值)

	使用前	8小时	2周	4周
					实验组1	8.24	6.54	6.41	5.99
实验组2	8.33	6.34	6.15	6.25
					实验组3	8.18	6.68	6.25	6.17
实验组4	8.11	7.07	6.88	6.58
					实验组5	8.26	6.48	6.39	6.05
实验组6	8.15	6.84	6.65	6.53
					实验组7	8.13	6.76	6.59	6.48
对照组1	8.15	7.33	7.12	6.87
					对照组2	8.18	7.59	7.35	7.16
对照组3	7.98	7.33	7.14	6.81
					对照组4	7.87	7.38	7.28	7.04
对照组5	8.37	8.13	7.75	7.78

结果显示：受试者在使用实验组样品时，皮肤水份无论是短期还是长期都有明显提升，经皮水份流失率也呈下降趋势。其中8小时后，实验组样品皮肤水份含量至少提升了50％，经皮水份流失率最少降低了12％。相比于对照组，实验组中的皮肤水份含量平均提高了6.92％ (P<0.01)，经皮水份流失率也降低了11.69％(P<0.01)。表明皮肤屏障功能得到修复，皮肤保湿功能得到提高。

2.2皮肤弹性测试

使用Cutometer Dual MPA580对受试者双手前臂内侧试验区进行皮肤弹性测试，每个试验区各测试3次R2值取平均值，R2值代表皮肤弹性，越接近1越好。最后统计30受试者实施例1-3和对比例1-4的R2值平均值。

表3不同样品的皮肤弹性(R2值)

	使用前	8小时	2周	4周
					实验组1	0.74	0.90	0.86	0.89
实验组2	0.76	0.88	0.85	0.89
					实验组3	0.75	0.89	0.87	0.90
实验组4	0.75	0.87	0.84	0.85
					实验组5	0.75	0.91	0.87	0.89
实验组6	0.75	0.87	0.84	0.86
					实验组7	0.76	0.89	0.85	0.87
对照组1	0.76	0.86	0.83	0.84
					对照组2	0.76	0.84	0.82	0.83
对照组3	0.75	0.83	0.81	0.82
					对照组4	0.77	0.82	0.80	0.83
对照组5	0.74	0.76	0.76	0.75

结果显示：皮肤弹性数值增加代表皮肤弹性变好，受试者在使用实验组样品，皮肤弹性无论是短期还是长期都有明显提升。其中8小时后皮肤弹性最少提高了15％。相比于对照组，其皮肤弹性提高了9.36％(P<0.01)。

2.3功效感官评估

选择70名年龄在25-40岁的脸部皮肤屏障受损的受试者，受试者脸部在使用测试样品前2-3天应保证没有使用任何化妆品。受试者随机分为10组，每组受试者10人，受试组1-7依次给予实施例1-3和对比例1-4，受试者在测试期间每日早晚在脸部使用测试样品，使用后将测试样品保存于家用冰箱。

受试者对皮肤各种主观指标(保湿、光滑、紧致有弹性、光泽)进行评分，每个指标通过0-10分等级评分。受试者分别在使用前、使用后第2周、第4周进行评估打分。最后统计受试者实验组和对比组的评估分值平均值。

表4不同样品的消费者感官评估

结果显示：感官评估的结果与仪器测试的结果趋势相同，实验组中皮肤的屏障修复有明显提升，至少提高了57％、27％、33％、34％，其相比于对照组提高了17％(P<0.01)、14％ (P<0.01)、19％(P<0.01)和17％(P<0.01)。表明本发明的皮肤屏障修复组合物对于修复皮肤屏障，促进皮肤保湿，提高皮肤光滑弹性有明显的作用。

Claims

1.一种皮肤屏障修复组合物，由下述组分按质量百分比组成：地衣芽孢杆菌WX-02谷氨酸发酵产物滤液40-98%，聚谷氨酸钠1-30%，神经酰胺脂质体1-30%；

所述的聚谷氨酸钠的平均分子量为700k-1200kDa；

所述的地衣芽孢杆菌WX-02谷氨酸发酵产物滤液的制备方法，包括：以1-5%的接种量将地衣芽孢杆菌WX-02种子液接于发酵培养基中，培养温度30-37℃，发酵时间40 h；发酵结束后，将发酵液放出，使用离心机过滤除菌，再使用相对分子量为5000D的超滤膜除去发酵液中的盐和其他小分子杂质，再转入真空环境40℃加热，进一步去除水分浓缩体积，并保留大部分功效成分，体积浓缩后加入防腐剂，即得；所述的发酵培养基为：50-70g/L葡萄糖，10-30g/L谷氨酸钠，5-10g/L柠檬酸钠，3-8g/LNH₄Cl, 0.5-1g/L K₂HPO₄，0.5-1g/LMgSO₄·7H₂O，0.5-1g/L ZnSO₄·7H₂O，0.5-1g/L CaCl₂·H₂O，pH 7.20-7.50。

2.权利要求1所述的组合物在制备护肤品中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，所述组合物在护肤品中的质量百分比的占比为1%~20%。

4.一种皮肤屏障修复精华液，各组分在精华液中的质量份数为：甘油 1-5、丁二醇1-5、黄原胶0.1-1，对羟基苯乙酮0.1-1，己二醇0.1-1、权利要求1所述的组合物1-20、加水至100。