CN112869140A - 一种蒲公英发酵液凝胶棒及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种蒲公英发酵液凝胶棒及其制备方法，蒲公英发酵液凝胶棒的制备方法包括以下步骤：蒲公英新鲜叶片加水和抗坏血酸，研磨获得蒲公英匀浆液；将枯草芽孢杆菌的菌种保藏液加入至灭菌培养基中，震荡培养、离心收集得到菌饼；将菌饼、蔗糖和蒲公英匀浆液混合，静态培养得到蒲公英发酵液，向灭菌后的蒲公英发酵液中添加魔芋粉、卡拉胶粉和果胶粉，煮沸罐装入长条形制胶容器中冷却得到蒲公英发酵液凝胶棒。该发明利用枯草芽孢杆菌的发酵产酸作用，促进水环境下蒲公英药效成分的高效释放，方法操作简单方便、成本低、时间短、效果好，采用该方法制备得到的发酵产品富含蒲公英药效成分，且制成蒲公英发酵液凝胶棒以后，更具使用方便性和携带性。
Description
技术领域
本发明涉及食品生物技术，尤其涉及一种蒲公英发酵液凝胶棒及其制备方法。
背景技术
蒲公英是一种多年生的草本植物，属菊科，又称为婆婆丁，蒲公草，是我国传统的药食两用的中药植物。蒲公英有苦味，属寒性，可以用来清热解毒，消肿散结。蒲公英化学成分复杂，含有多种活性物质，比如绿原酸、咖啡酸、芦丁、木犀草素、山奈酚等，具有不同的药理功效。其中，绿原酸具有降糖、降脂、抗菌、抗病毒、抗白血病作用；咖啡酸具有抗氧化、升白细胞、升血小板、抗氧化、抗肿瘤作用；芦丁具有维生素P样作用和抗炎作用；木犀草素具有抗炎、抗肿瘤、免疫调节作用；山奈酚具有抗癌、抗感染、防治糖尿病的作用。蒲公英的匀浆水溶液含有上述活性成分，但含量较低，而且味苦、带有一定的草味和涩味，不适宜饮用。
发明内容
本发明的目的在于，针对上述问题，提出一种蒲公英发酵液凝胶棒的制备方法，该方法利用枯草芽孢杆菌的发酵产酸作用，促进水环境下蒲公英药效成分的高效释放，操作简单方便、成本低、时间短、效果好，采用该方法制备得到的发酵产品富含蒲公英药效成分，而且制成蒲公英发酵液凝胶棒以后，更具使用方便性和携带性。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种蒲公英发酵液凝胶棒的制备方法，包括以下步骤：
步骤1取蒲公英的新鲜叶片加水，其中蒲公英(kg):水(L)＝1:5-1:15，再按照2-10mg/L的浓度加入抗坏血酸，混合均匀后，通过胶体磨研磨，获得蒲公英匀浆液；
步骤2培养发酵菌：将保藏编号为CCTCCM2020746的枯草芽孢杆菌的菌种保藏液加入至灭菌胰蛋白大豆培养基(TSB)中，所述枯草芽孢杆菌的菌种保藏液与灭菌胰蛋白大豆培养基的体积比为1:20-1:100；混合均匀后震荡培养得到过夜培养菌液；
步骤3将过夜培养菌液离心，弃去上清液，收集得到菌饼；
步骤4将菌饼加入到蒲公英匀浆液中，所述菌饼与蒲公英匀浆液的用量比为每100mL菌液收集所得菌饼加入到1-10L蒲公英匀浆液中，再加入4％wt-10％wt的蔗糖，混合均匀，得到初始发酵液；
步骤5将初始发酵液静态培养得到蒲公英发酵液；
步骤6将蒲公英发酵液过滤，弃去残渣，得到蒲公英发酵清液，将蒲公英发酵清液在95-100℃下灭菌处理1-5min，得到灭菌蒲公英发酵液；
步骤7向每升灭菌蒲公英发酵液中添加魔芋粉、卡拉胶粉和果胶粉，搅拌溶解，混合均匀，煮沸1-5min后，降温至50-60℃，罐装入长条形制胶容器中，封装，冷却至室温后，得到蒲公英发酵液凝胶棒。
进一步的，步骤1所述蒲公英(kg):水(L)＝1:8-1:12(质量:体积)，所述抗坏血酸的加入浓度为5-6mg/L。
进一步的，步骤2所述枯草芽孢杆菌的菌种保藏液与灭菌胰蛋白大豆培养基的体积比为1:40-1:60。
进一步地，步骤2震荡培养是在30-40℃，190-220转/min，震荡培养12-24h；优选的步骤2震荡培养是在36-38℃、200-210转/min，震荡培养14-16h。
进一步地，步骤3离心速度为2000-4000转/min，离心时间为10-20min。
进一步的，步骤4所述菌饼与蒲公英匀浆液的用量比为每100mL菌液收集所得菌饼加入到4-8L蒲公英匀浆液中；所述蔗糖加入量为6-8％wt。
进一步的，步骤5静态培养是在30-40℃，静态培养12-24h，优选的步骤5所述静态培养是在35-38℃，静态培养14-16h。
进一步的，步骤6中95-100℃下灭菌处理2-4min。
进一步的，步骤7向每升灭菌蒲公英发酵液中添加1-4g魔芋粉、3-10g卡拉胶粉、1-4g果胶粉；优选的步骤7向每升灭菌蒲公英发酵液中添加2-3g魔芋粉、5-8g卡拉胶粉、2-3g果胶粉，搅拌溶解，混合均匀，煮沸2-3min后，降温至54-56℃，罐装。
本发明的另一个目的还公开了一种蒲公英发酵液凝胶棒，采用上述方法制备而成。
本发明以蒲公英叶片匀浆液为发酵底物，以枯草芽孢杆菌为发酵菌种，经恒温厌氧发酵后，得到富含蒲公英药效成分的发酵液凝胶棒。具体地，本发明与现有技术相比较具有以下优点：
1)本发明以蒲公英叶片匀浆液为发酵底物，蒲公英含有多种药效活性成分，包括绿原酸、咖啡酸、芦丁、木犀草素、山奈酚等，具有抗癌抑癌、抗菌消炎、降脂防糖尿病等功效。
2)本发明通过大量筛选食品发酵菌株，从中获得一株能够显著的、同时提高上述五种活性成分的发酵菌株，该菌株是枯草芽孢杆菌，菌种保藏号为CCTCCM2020746。本发明蒲公英发酵液与蒲公英叶片匀浆液相比，绿原酸和咖啡酸含量比原液提高了130％-160％，芦丁含量比原液提高了16％，木犀草素和山奈酚含量比原液提高了60％-90％。
3)本发明的蒲公英材料为新鲜蒲公英叶片，非干燥后的蒲公英叶片，减少了干燥过程中蒲公英药效成分的损失，而且发酵产品更具蒲公英植物芳香，抗坏血酸的添加有效保护了药效成分不受氧化降解；发酵环境中，不添加氮源，避免了因氨氮、亚硝氮、硝氮等物质的产生，而降低发酵产品品质；发酵底物以蔗糖为主，主要通过植物乳酸杆菌代谢产乳酸、醋酸等有机酸的作用，增加蒲公英植物细胞的破碎和水解，提高绿原酸、咖啡酸、芦丁、木犀草素、山奈酚等药效成分的释放效率。发酵方法操作简单方便、成本低、时间短、效果好，与其他长期发酵方法相比，具有显著的竞争优势。
4)本发明发酵液凝胶棒，降低了蒲公英原液的草味、涩味，而具有一定的酸味，产生酸甜适中的口感。即北美发明所得的发酵液具有蒲公英特有的香气，味道微苦、偏酸甜，作为食品食用，具有较好的体验感。
综上，本发明所获得的发酵产品具有较高的蒲公英活性成分含量和较好的饮用体验，具有较好的应用价值和市场前景。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明进一步说明：
实施例1
本实施例公开了一种蒲公英发酵饮品及其凝胶棒的制备方法，具体地，包括以下步骤：
步骤(1)取蒲公英的新鲜叶片，洗净，按照蒲公英:水＝1:10(质量kg:体积L)的比例，加入纯净水，按照5mg/L的浓度加入抗坏血酸，混合均匀后，通过胶体磨研磨，获得蒲公英匀浆液；
步骤(2)培养发酵菌：取保藏编号为CCTCCM2020746的枯草芽孢杆菌的菌种保藏液4mL，加入灭过菌的200mL胰蛋白大豆培养基(TSB)中，混合均匀后放入摇床，在37℃、200rpm的条件下，震荡培养16h，得到过夜培养菌液；
步骤(3)将步骤(2)所得过夜培养菌液，以2000转/min的转速离心20min，弃去上清液，收集得到菌饼；
步骤(4)将步骤(3)中所得菌饼全部加入到5L步骤(1)所制备的蒲公英匀浆液中，混合均匀，再加入6％(质量体积比)的蔗糖，混合均匀，得到初始发酵液；
步骤(5)将步骤(4)所得初始发酵液，在37℃的条件下，静态培养14h，得到蒲公英发酵液；
步骤(6)将步骤(5)所得发酵液过滤，弃去残渣，得到发酵清液，并将清液在100℃条件下灭菌处理3min，得到灭菌后的蒲公英发酵液，此为蒲公英发酵饮品；
步骤(7)向步骤(6)所得的灭菌发酵液中，每升添加3g魔芋粉、8g卡拉胶粉、3g果胶粉，搅拌溶解，混合均匀，煮沸3min后，降温至55℃，罐装入长条形制胶容器中，封装，冷却至室温后，得到蒲公英发酵液凝胶棒。
本实施例所得发酵液中各产物浓度为，绿原酸5.9mg/L，咖啡酸11.4mg/L，芦丁15.6mg/L，木犀草素4.5mg/L，山奈酚11.8mg/L，以上药效成分的含量比蒲公英原液分别提高了164％、131％、17％、61％和95％。
实施例2
本实施例公开了一种蒲公英发酵饮品及其凝胶棒的制备方法，具体地，包括以下步骤：
步骤(1)取蒲公英的新鲜叶片，洗净，按照蒲公英:水＝1:5(质量kg:体积L)的比例，加入纯净水，按照2mg/L的浓度加入抗坏血酸，混合均匀后，通过胶体磨研磨，获得蒲公英匀浆液；
步骤(2)培养发酵菌：取保藏编号为CCTCCM2020746的枯草芽孢杆菌的菌种保藏液1mL，加入灭过菌的100mL胰蛋白大豆培养基(TSB)中，混合均匀后放入摇床，在30℃、190rpm的条件下，震荡培养12h，得到过夜培养菌液；
步骤(3)将步骤(2)所得过夜培养菌液，以3000转/min的转速离心15min，弃去上清液，收集得到菌饼；
步骤(4)将步骤(3)中所得菌饼全部加入到1L步骤(1)所制备的蒲公英匀浆液中，混合均匀，再加入4％(质量体积比)的蔗糖，混合均匀，得到初始发酵液；
步骤(5)将步骤(4)所得初始发酵液，在30℃的条件下，静态培养12h，得到蒲公英发酵液；
步骤(6)将步骤(5)所得发酵液过滤，弃去残渣，得到发酵清液，并将清液在100℃条件下灭菌处理1min，得到灭菌后的蒲公英发酵液，此为蒲公英发酵饮品；
步骤(7)向步骤(6)所得的灭菌发酵液中，每升添加1g魔芋粉、3g卡拉胶粉、1g果胶粉，搅拌溶解，混合均匀，煮沸1min后，降温至50℃，罐装入长条形制胶容器中，封装，冷却至室温后，得到蒲公英发酵液凝胶棒。
本实施例所得发酵液中各产物浓度为，绿原酸2.8mg/L，咖啡酸5.6mg/L，芦丁12.3mg/L，木犀草素2.7mg/L，山奈酚7.9mg/L，以上药效成分的含量比蒲公英原液分别提高了101％、107％、15％、58％和82％。
实施例3
本实施例公开了一种蒲公英发酵饮品及其凝胶棒的制备方法，具体地，包括以下步骤：
步骤(1)取蒲公英的新鲜叶片，洗净，按照蒲公英:水＝1:15(质量kg:体积L)的比例，加入纯净水，按照10mg/L的浓度加入抗坏血酸，混合均匀后，通过胶体磨研磨，获得蒲公英匀浆液；
步骤(2)培养发酵菌：取保藏编号为CCTCCM2020746的枯草芽孢杆菌的菌种保藏液5mL，加入灭过菌的100mL胰蛋白大豆培养基(TSB)中，混合均匀后放入摇床，在40℃、220rpm的条件下，震荡培养24h，得到过夜培养菌液；
步骤(3)将步骤(2)所得过夜培养菌液，以4000转/min的转速离心10min，弃去上清液，收集得到菌饼；
步骤(4)将步骤(3)中所得菌饼全部加入到10L步骤(1)所制备的蒲公英匀浆液中，混合均匀，再加入10％(质量体积比)的蔗糖，混合均匀，得到初始发酵液；
步骤(5)将步骤(4)所得初始发酵液，在40℃的条件下，静态培养24h，得到蒲公英发酵液；
步骤(6)将步骤(5)所得发酵液过滤，弃去残渣，得到发酵清液，并将清液在95℃条件下灭菌处理5min，得到灭菌后的蒲公英发酵液，此为蒲公英发酵饮品；
步骤(7)向步骤(6)所得的灭菌发酵液中，每升添加1g魔芋粉、3g卡拉胶粉、1g果胶粉，搅拌溶解，混合均匀，煮沸1min后，降温至50℃，罐装入长条形制胶容器中，封装，冷却至室温后，得到蒲公英发酵液凝胶棒。
本实施例所得发酵液中各产物浓度为，绿原酸1.5mg/L，咖啡酸5.5mg/L，芦丁9.9mg/L，木犀草素2.4mg/L，山奈酚6.8mg/L，以上药效成分的含量比蒲公英原液分别提高了82％、98％、13％、41％和77％。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
序列表
<110> 盘锦鼎信百草园有限公司
盘锦鼎信大厨房有限公司
<120> 一种蒲公英发酵液凝胶棒及其制备方法
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1453
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 1
actctgtcac ttcggcggct ggctcctaaa aggttacctc accgacttcg ggtgttacaa 60
actctcgtgg tgtgacgggc ggtgtgtaca aggcccggga acgtattcac cgcggcatgc 120
tgatccgcga ttactagcga ttccagcttc acgcagtcga gttgcagact gcgatccgaa 180
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atcaagggtt gcgctcgttg cgggacttaa cccaacatct cacgacacga gctgacgaca 420
accatgcacc acctgtcact ctgcccccga aggggacgtc ctatctctag gattgtcaga 480
ggatgtcaag acctggtaag gttcttcgcg ttgcttcgaa ttaaaccaca tgctccaccg 540
cttgtgcggg cccccgtcaa ttcctttgag tttcagtctt gcgaccgtac tccccaggcg 600
gagtgcttaa tgcgttagct gcagcactaa ggggcggaaa ccccctaaca cttagcactc 660
atcgtttacg gcgtggacta ccagggtatc taatcctgtt cgctccccac gctttcgctc 720
ctcagcgtca gttacagacc agagagtcgc cttcgccact ggtgttcctc cacatctcta 780
cgcatttcac cgctacacgt ggaattccac tctcctcttc tgcactcaag ttccccagtt 840
tccaatgacc ctccccggtt gagccggggg ctttcacatc agacttaaga aaccgcctgc 900
gagcccttta cgcccaataa ttccggacaa cgcttgccac ctacgtatta ccgcggctgc 960
tggcacgtag ttagccgtgg ctttctggtt aggtaccgtc aaggtaccgc cctattcgaa 1020
cggtacttgt tcttccctaa caacagagct ttacgatccg aaaaccttca tcactcacgc 1080
ggcgttgctc cgtcagactt tcgtccattg cggaagattc cctactgctg cctcccgtag 1140
gagtctgggc cgtgtctcag tcccagtgtg gccgatcacc ctctcaggtc ggctacgcat 1200
cgtcgccttg gtgagccgtt acctcaccaa ctagctaatg cgccgcgggt ccatctgtaa 1260
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agccccggtt tcccggagtt atcccagtct tacaggcagg ttacccacgt gttactcacc 1380
cgtccgccgc taacatcagg gagcaagctc ccatctgtcc gctcgacttg catgtattag 1440
cacccgcaac tgt 1453
Claims (10)
1.一种蒲公英发酵液凝胶棒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1取蒲公英的新鲜叶片加水，其中蒲公英(kg):水(L)＝1:5-1:15，再按照2-10mg/L的浓度加入抗坏血酸，混合均匀后，通过胶体磨研磨，获得蒲公英匀浆液；
步骤2培养发酵菌：将保藏编号为CCTCCM2020746的枯草芽孢杆菌的菌种保藏液加入至灭菌胰蛋白大豆培养基中，所述枯草芽孢杆菌的菌种保藏液与灭菌胰蛋白大豆培养基的体积比为1：20-1:100；混合均匀后震荡培养得到过夜培养菌液；
步骤3将过夜培养菌液离心，弃去上清液，收集得到菌饼；
步骤4将菌饼加入到蒲公英匀浆液中，所述菌饼与蒲公英匀浆液的用量比为每100mL菌液收集所得菌饼加入到1-10L蒲公英匀浆液中，再加入4％wt-10％wt的蔗糖，混合均匀，得到初始发酵液；
步骤5将初始发酵液静态培养得到蒲公英发酵液；
步骤6将蒲公英发酵液过滤，弃去残渣，得到蒲公英发酵清液，将蒲公英发酵清液在95-100℃下灭菌处理1-5min，得到灭菌蒲公英发酵液；
步骤7向每升灭菌蒲公英发酵液中添加魔芋粉、卡拉胶粉和果胶粉，搅拌溶解，混合均匀，煮沸1-5min后，降温至50-60℃，罐装入长条形制胶容器中，封装，冷却至室温后，得到蒲公英发酵液凝胶棒。
2.根据权利要求1所述蒲公英发酵液凝胶棒的制备方法，其特征在于，步骤1所述蒲公英:水＝1:8-1:12，所述抗坏血酸的加入浓度为5-6mg/L。
3.根据权利要求1所述蒲公英发酵液凝胶棒的制备方法，其特征在于，步骤2所述枯草芽孢杆菌的菌种保藏液与灭菌胰蛋白大豆培养基的体积比为1:40-1:60。
4.根据权利要求1所述蒲公英发酵液凝胶棒的制备方法，其特征在于，步骤2中震荡培养是在30-40℃，190-220转/min，震荡培养12-24h。
5.根据权利要求1所述蒲公英发酵液凝胶棒的制备方法，其特征在于，步骤3离心速度为2000-4000转/min，离心时间为10-20min。
6.根据权利要求1所述蒲公英发酵液凝胶棒的制备方法，其特征在于，步骤4所述菌饼与蒲公英匀浆液的用量比为每100mL菌液收集所得菌饼加入到4-8L蒲公英匀浆液中；所述蔗糖加入量为6-8％wt。
7.根据权利要求1所述蒲公英发酵液凝胶棒的制备方法，其特征在于，步骤5静态培养是在30-40℃，静态培养12-24h。
8.根据权利要求1所述蒲公英发酵液凝胶棒的制备方法，其特征在于，步骤6中95-100℃下灭菌处理2-4min。
9.根据权利要求1所述蒲公英发酵液凝胶棒的制备方法，其特征在于，步骤7向每升灭菌蒲公英发酵液中添加1-4g魔芋粉、3-10g卡拉胶粉、1-4g果胶粉。
10.一种蒲公英发酵液凝胶棒，其特征在于，采用权利要求1-9任意一项所述方法制备而成。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210601 |
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