CN112841317B - 一种适用于高龄产妇喂养的婴幼儿的营养组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供了改善高龄产妇喂养的婴幼儿肠道微生态和学习记忆能力的营养组合物及其在制备婴儿配方奶粉或益生菌产品中的用途，所述营养组合物包含以重量百分比计20％‑35％的唾液酸化低聚糖，50％‑60％的岩藻糖基化的中性低聚糖，5％‑30％的非岩藻糖基化的中性低聚糖，和/或0.5％‑5％的骨桥蛋白(OPN)，所述唾液酸化低聚糖包含唾液酸化‑乳糖‑N‑四糖c(LSTc)或唾液酸化‑乳糖‑N‑四糖b(LSTb)的一种或两种，所述岩藻糖基化的中性低聚糖包含2‑岩藻糖基乳糖(2‑FL)、乳酰‑N‑岩藻五糖I I I(LNFP I I I)或乳酰‑N‑二岩藻六糖I I(LNDFHⅡ)的一种或多种；所述非岩藻糖基化的中性低聚糖包含乳酰‑N‑新四糖(LNnT)。

Description

一种适用于高龄产妇喂养的婴幼儿的营养组合物

技术领域

本发明涉及一种营养组合物。具体地，涉及一种改善高龄产妇喂养的婴幼儿肠道微生态和学习记忆能力的营养组合物。

背景技术

随着社会的发展，人们的婚育观念也发生了改变，女性生育年龄呈现不断推后的趋势。此外，由于国内二胎政策的放开，高龄孕妇的人数不断增加。而女性随着年龄增加，其卵巢功能下降，卵泡质量降低，从而导致生育能力下降并伴随出生缺陷的风险。流行病学研究发现高龄产妇妊娠并发症升高，胎儿染色体异常的发生率升高。此外，研究显示，高龄妊娠与子代早期神经发育、子代精神心理疾病、子代变应性皮炎患病率以及子代糖尿病发病均密切相关。

母乳低聚糖(human milk oligosaccharide，HMO)是母乳中第三大固体成分，具有重要的生理功能，包括抵抗肠道病原菌、调节免疫反应、促进婴儿大脑发育等。由于大多数HMO在胃肠道运输过程中不被消化，从而完整地到达大肠，能够促进婴幼儿早期肠道微生物群的发育和成熟，如促进双歧杆菌的生长和定植。HMO的核心结构包括葡萄糖(Glc)，半乳糖(Gal)，N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)，并进一步修饰岩藻糖基(Fuc)和/或N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac，唾液酸)。根据唾液酸的存在与否，HMO可分为中性和酸性两大类。

骨桥蛋白(OPN)最初发现于骨骼中，人乳中质量浓度也相对较高。骨桥蛋白是高度糖基化和磷酸化的酸性蛋白质，包含一段精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列。骨桥蛋白在免疫激活、创伤修复、血管再生、骨骼重塑过程中具有重要的生理作用。目前，牛乳来源的骨桥蛋白已实现了规模化生产和商业应用，添加骨桥蛋白的婴儿配方乳粉也逐渐成为研究热点。Donovan等将新生恒河猴随机分组喂养观察3个月，发现普通配方粉(骨桥蛋白质量浓度10mg/L)和人乳(骨桥蛋白质量浓度约130mg/L)喂养的恒河猴在转录组上存在差异，这些转录组与生长发育、半乳糖代谢、细胞骨架重塑和免疫应答等密切相关，食用添加骨桥蛋白的配方粉(骨桥蛋白质量浓度125mg/L)可使这种差异降低至1/5以下(参见，例如，陈建行等，“婴儿配方乳粉蛋白质的人乳化研究进展”，中国乳品工业，第44卷，第9期，2016年，第31-37、46页)。

目前，已有部分包含HMO和/或OPN的婴幼儿营养组合物，以及改善高龄产妇生育能力以及减少胎儿流产风险的产品研究。例如，CN110973263A(公开日期：2020年04月10日)公开了一种含人乳低聚糖的婴幼儿营养组合物，属于婴幼儿营养品加工技术领域，其中乳低聚糖的总含量为2.3-30.8g/kg，人乳低聚糖由中性人乳低聚糖和酸性人乳低聚糖组成，中性人乳低聚糖与酸性人乳低聚糖的重量比为60-70：30-40。该婴幼儿营养组合物含有人乳低聚糖更加接近母乳，能好地起到增殖益生菌，改善肠道菌群平衡和增进肠道健康的效果。CN104489101A(公开日期：2015年04月08日)公开了一种富含骨桥蛋白的婴幼儿奶粉，所述奶粉中含有0.02-0.24wt％的骨桥蛋白。这种婴儿配方奶粉可以增强婴儿体质、促进婴儿生长。但是，上述发明专利申请所涉及的营养组合物中低聚糖的种类和含量，以及营养组合物的用途与本发明均不相同。此外，硕士论文“加味丹寿汤对高龄孕鼠生育能力及胚胎染色体异常的防护作用”公开了使用加味丹寿汤灌胃从而升高高龄大鼠妊娠率明显升高，促进孕鼠体重增长，降低胚胎吸收率、胎鼠畸形率及染色体异常率，增加胎鼠体重及身长。

然而，极少有针对高龄产妇喂养的婴幼儿研发的产品。本发明人研究发现，高龄母亲的母乳中部分低聚糖含量显著低于正常年龄的母亲，且高龄母亲母乳喂养的婴幼儿肠道内双歧杆菌数量显著降低。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明的目的在于提供一种含有两种以上低聚糖的营养组合物，从而改善高龄产妇喂养的婴幼儿的肠道微生态，以及增强这些婴幼儿的学习记忆能力。

为了实现本发明的目的，提供了以下技术方案：

在第一个方面中，本发明提供了一种改善高龄产妇喂养的婴幼儿肠道微生态和学习记忆能力的营养组合物，所述营养组合物包含以重量百分比计20％-35％的唾液酸化低聚糖，50％-60％的岩藻糖基化的中性低聚糖，和5％-30％的非岩藻糖基化的中性低聚糖。

在一个实施方式中，所述婴幼儿是指月龄为0-36个月的儿童，优选地为月龄为0-24个月的儿童，更优选地为月龄为0-12个月的儿童。

在一个优选的实施方式中，所述唾液酸化低聚糖包含唾液酸化-乳糖-N-四糖c(LSTc)或唾液酸化-乳糖-N-四糖b(LSTb)的一种或两种，所述岩藻糖基化的中性低聚糖包含以重量百分比计25％-35％的2-岩藻糖基乳糖(2-FL)，任选地，还包含乳酰-N-岩藻五糖III(LNFPIII)或乳酰-N-二岩藻六糖II(LNDFHⅡ)的一种或两种，和所述非岩藻糖基化的中性低聚糖包含以重量百分比计5％-30％的乳酰-N-新四糖(LNnT)。

在另一个更优选的实施方式中，所述营养组合物包含以重量百分比计20％-35％的唾液酸化低聚糖，其中所述唾液酸化-乳糖-N-四糖c(LSTc)占所述营养组合物总重量的20％-35％，和所述唾液酸化-乳糖-N-四糖b(LSTb)占所述营养组合物总重量的0％-15％。

在又一个更优选的实施方式中，所述营养组合物包含以重量百分比计50％-60％的岩藻糖基化的中性低聚糖，其中所述2-岩藻糖基乳糖(2-FL)占所述营养组合物总重量的25％-35％。

在又一个更优选的实施方式中，所述营养组合物包含以重量百分比计5％-30％的非岩藻糖基化的中性低聚糖，其中所述乳酰-N-新四糖(LNnT)占所述营养组合物总重量的5％-30％。

在另一个实施方式中，所述营养组合物的终浓度为10mg/100g-10×10³mg/100g。

在另一个优选的实施方式中，所述营养组合物中还包含骨桥蛋白(OPN)。优选地，所述骨桥蛋白(OPN)与所述低聚糖的重量比是1：20-200。

在另一个更优选的实施方式中，在所述营养组合物中加入50mg/100g骨桥蛋白(OPN)，使所述骨桥蛋白(OPN)的终浓度为65mg/L。

在又一个实施方式中，所述营养组合物为液体、粉末或块状固体。

在第二个方面中，本发明提供了一种上述营养组合物的制备方法，包括以下步骤：按照上述营养组合物中各组分的重量百分比称取各组分，进行混合，从而得到上述营养组合物。

在第三个方面中，本发明提供了上述营养组合物在制备婴儿配方奶粉或益生菌产品中的用途，所述婴儿配方奶粉或益生菌产品具有改善高龄产妇喂养的婴幼儿肠道微生态和学习记忆能力的作用。

应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一赘述。

附图说明

图1：产后第1个月，正常年龄组(20-34岁)和高龄组(≥35岁)母亲的母乳中唾液酸化-乳糖-N-四糖c的含量。

图2：产后第1个月的母亲年龄与喂养婴幼儿肠道双歧杆菌的相关性。

图3：产后第2个月的母亲年龄与喂养婴幼儿肠道双歧杆菌的相关性。

图4：产后第3个月的母亲年龄与喂养婴幼儿肠道双歧杆菌的相关性。

图5：通过体外发酵试验测定的本发明的营养组合物对高龄产妇喂养的婴幼儿肠道微生态的影响。

图6：本发明营养组合物对高龄雌性大鼠子代目标象限滞留时间百分比的影响。

图7：本发明营养组合物对高龄雌性大鼠子代穿越次数的影响。

具体实施方式

本发明人经过长期而深入的研究，通过大量筛选，意外地开发出一种改善高龄产妇喂养的婴幼儿肠道微生态和学习记忆能力的营养组合物，该营养组合物中包含以重量百分比计20％-35％的唾液酸化低聚糖，50％-60％的岩藻糖基化的中性低聚糖，5％-30％的非岩藻糖基化的中性低聚糖，和/或0.5％-5％的骨桥蛋白(OPN)。

实验证明，使用该营养组合物能够显著能够改善高龄产妇喂养的婴幼儿的肠道微环境，调控婴幼儿的肠道菌群，增加双歧杆菌和乳杆菌等有益菌的数量，以及增加肠道屏障功能，还能够改善高龄产妇喂养的婴幼儿的学习记忆能力。此外，在本发明营养组合物中加入少量骨桥蛋白(OPN)能够进一步增强本发明营养组合物增强这些婴幼儿的学习记忆能力的作用。在此基础上完成了本发明。

如本文所用，术语“本发明营养组合物”和“本发明组合物”与“低聚糖营养组合物”或“低聚糖加骨桥蛋白营养组合物”之间根据实际情况可以互换使用，均指本发明第一个方面所述的一种改善高龄产妇喂养的婴幼儿肠道微生态和学习记忆能力的营养组合物。

如本文所用，术语“婴幼儿”是指月龄在0-36个月，优选0-12个月的儿童。

众所周知，婴幼儿处于快速生长发育阶段，其身体及其功能都在不断发展和完善中。饮食不仅极大的影响健康婴幼儿的生长发育，也对其生长发育过程中出现的各种病理或亚健康症状有着积极的预防及干预效果。正如母乳不仅是孩子的粮食，它对婴儿的一生都是有影响的。世界卫生组织建议，婴儿应当在生命最初的六个月内接受纯母乳喂养，以实现最佳的成长和发育。然而由于现代生活方式的变化，母乳喂养率全球仅达38％，这使得开发食物成分接近母乳的婴幼儿营养品或功能接近母乳的营养强化剂成为技术趋势。

肠道菌群在生命早期发挥着重要作用。通常认为，婴儿在出生前，其胃肠道是无菌的，出生后48小时之内开始有菌定殖。新生儿胃肠道内最初的细菌来自于母亲的产道、环境以及母乳。自然分娩比剖腹产的婴幼儿胃肠道微生态更早建立。母乳喂养儿与人工喂养儿最初的胃肠道微生态有所不同。母乳喂养的足月儿微生态以双歧杆菌为主，人工喂养儿肠道菌群多样性增加，伴随有拟杆菌数量的显著上升。

从婴儿期来看，由于环境的影响，最早建立的肠道菌群为大肠杆菌和链球菌。随后定植的为两种非常重要的有益细菌-双歧杆菌和乳酸杆菌，而且双歧杆菌数量迅速上升，成为婴幼儿肠道的优势菌群。这些肠道有益菌对于婴幼儿早期胃肠道免疫系统的发育成熟、营养功能如缓解乳糖不耐受症、加强脂类和蛋白质代谢，以及维生素的合成起重要作用。婴幼儿的肠道有益菌越早建立，越能保护婴儿免受感染性疾病、过敏和各种消化道问题，这对婴幼儿期以及成人后的健康都会产生深远的正面影响。

本发明所提供的营养组合物制备过程简单，按照比例称取各成分，利用食品行业现有的混合工艺即可完成。当存在液体原料时，可通过湿法混合工艺完成。

本发明相对于现有技术，具有以下有益效果：

(1)本发明人首次发现了高龄母亲的母乳中部分低聚糖含量显著低于正常年龄的母亲，且高龄母亲母乳喂养的婴幼儿肠道内双歧杆菌数量显著降低，并在此基础上研发了专门适用于高龄产妇喂养的婴幼儿的营养组合物。

(2)本发明人发现本发明营养组合物能够改善高龄产妇喂养的婴幼儿的肠道微环境，调控婴幼儿的肠道菌群，增加双歧杆菌和乳杆菌等有益菌的数量，并且该营养组合物能够增加肠道屏障功能。

(3)本发明人发现本发明营养组合物还能够改善高龄产妇喂养的婴幼儿的学习记忆能力。

(4)此外，本发明人还发现，在本发明营养组合物中加入少量骨桥蛋白(OPN)能够进一步增强本发明营养组合物增强这些婴幼儿的学习记忆能力的作用。

下面参照具体的实施例对本发明做进一步说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用于解释本发明，并不用于限定本发明的范围。

实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道购买得到的常规产品。下面实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为市售产品。

除非另外说明，否则本发明中涉及的百分比和份数均为重量百分比和重量份数。

实施例1：考察高龄母亲母乳中低聚糖的种类和含量，以及高龄母亲喂养的婴幼儿肠道菌群分布情况

1.研究对象：从妇幼医院收集60位婴儿志愿者。

参加实验的婴儿母亲都将签定知情协议书，并保证在实验期间纯母乳喂养。

2.入组标准：

1)健康、足月儿(胎龄≥37周)、阴道分娩；

2)经过医学上证明是健康婴儿：无症状和无疾病体征；

3)年龄为0-30天。

3.实验方法和实验结果：

通过在婴儿年龄第1个月T1(30d±2d),第2个月T2(60d±2d),第3个月T3(90d±2d)时收集母亲母乳样本并收集婴儿粪便。

分别测定上述三个时期母亲母乳中24种低聚糖含量。结果显示，产后第1、2和3个月，母乳中2-岩藻糖基乳糖(2-FL)、唾液酸化-乳糖-N-四糖c(LSTc)、唾液酸化-乳糖-N-四糖b(LSTb)、乳酰-N-新四糖(LNnT)、乳酰-N-岩藻五糖III(LNFPIII)、乳酰-N-二岩藻六糖II(LNDFHII)6种低聚糖含量均与母亲年龄呈明显负相关(分别见表1、表2和表3)。此外，在产后第1个月，相比于20-34岁的母亲，35岁以上高龄母亲的母乳中唾液酸化-乳糖-N-四糖c含量显著降低(p<0.001，见图1)。

表1：T1阶段母亲年龄与母乳中低聚糖含量的相关性分析

表2：T2阶段母亲年龄与母乳中低聚糖含量的相关性分析

表3：T3阶段母亲年龄与母乳中低聚糖含量的相关性分析

注：*p<0.5，**p<0.05。

此外，分别收集母乳喂养后第1、2、3个月的婴幼儿粪便并进行16s RNA分析肠道菌群。方法如下：

使用DNA快速提取试剂盒按说明书方法步骤提取粪便中的DNA，对样本16S rDNA的V3-V4区进行PCR扩增，用胶回收试剂盒对扩增片段进行纯化回收，在Illumina miseqpe300平台进行高通量测序，采用QIIME2分析平台对扩增子进行分析。

PCR引物：

F：5-AYTGGGYDTAAAGNG-3

R：5-TACNVGGGTATCTAATCC-3

结果显示，母亲年龄与其母乳喂养的婴幼儿肠道内双歧杆菌数量呈负相关(分别见图2、图3和图4)。即随着年龄增加，其喂养的婴幼儿肠道内双歧杆菌数量呈下降趋势。

由此可见，母亲年龄增加，其母乳中多种低聚糖浓度降低，且高龄产妇喂养的婴幼儿肠道内双歧杆菌数量显著降低。

实施例2：通过体外发酵试验考察本发明营养组合物对高龄产妇喂养婴幼儿肠道微生态的影响

体外发酵实验：该系统操作单元由批量发酵罐与粪便气体检测仪组成。发酵罐内含有无碳源基础培养基(YCFΑ)。发酵基础培养基不含碳源分别加入到培养基中。不加碳水化合物的基础培养基(YCFΑ)作为对照。分别使用乳糖、YCFA、低聚糖营养组合物或低聚糖+骨桥蛋白营养组合物作为唯一碳源对高龄母亲喂养的婴幼儿粪便进行发酵。使用YCFA进行发酵的作为空白组，使用乳糖进行发酵的作为乳糖对照组，使用包含唾液酸化-乳糖-N-四糖c、唾液酸化-乳糖-N-四糖b、乳酰-N-新四糖、乳酰-N-岩藻五糖III、乳酰-N-二岩藻六糖II、2-岩藻糖基乳糖6种低聚糖的组合物进行发酵的作为低聚糖组，使用包含唾液酸化-乳糖-N-四糖c、唾液酸化-乳糖-N-四糖b、乳酰-N-新四糖、乳酰-N-岩藻五糖III、乳酰-N-二岩藻六糖II、2-岩藻糖基乳糖6种低聚糖和骨桥蛋白的组合物进行发酵作为低聚糖+骨桥蛋白组。其中低聚糖组和低聚糖+骨桥蛋白组的成分组成情况如下：

低聚糖组：30mg唾液酸化-乳糖-N-四糖c+5mg唾液酸化-乳糖-N-四糖b+50mg 2-岩藻糖基化乳糖+5mg乳酰-N-岩藻五糖III+5mg乳酰-N-二岩藻六糖II+5mg乳酰-N-新四糖，并且该组合物加入到培养基中的终浓度为12.5g/L。

低聚糖+骨桥蛋白组：在上述低聚糖营养组合物中加入骨桥蛋白(OPN)(50mg/100g)，使其终浓度为65mg/L。

37℃条件下发酵48小时，实时监测粪便发酵情况；每隔6小时取样一次，并取样通过16s rRNΑ测序及宏基因组方法测定菌群构成及数量。以0小时发酵样品菌群结构作为实验的基准线用以对比发酵后菌群的变化。

结果显示，针对高龄妈妈哺育的婴幼儿，采用以上6种低聚糖混合营养组合物干预后，与基础培养基(YCFΑ)组相比，可以显著提高粪便中双歧杆菌的丰度(p<0.001，图5A)，并且可以显著降低肠道潜在致病菌不动杆菌(p<0.01，图5B)和克雷伯氏菌的相对丰度(p<0.05，图5C)。此外，低聚糖+骨桥蛋白组的结果与低聚糖组相似，可见在低聚糖营养组合物中加入少量的骨桥蛋白后，对低聚糖带来的菌群调节作用并没有明显影响。

实施例3：考察本发明营养组合物对高龄雌性大鼠子代学习记忆能力的影响

选用清洁级Wistar大鼠。分别取高龄雌鼠(12月龄)和青年雌鼠(3月龄)与随机选择的3月龄雄鼠单独合笼。待雌鼠怀孕后，将雄鼠与雌鼠分笼。雌鼠分娩后，将高龄雌鼠所生育仔鼠标记为高龄组，青年雌鼠所生的仔鼠标记为青年组。仔鼠由母鼠哺乳一周后，随机选取高龄雌鼠生育仔鼠90只，分为高龄组，高龄+低聚糖组，高龄+低聚糖+骨桥蛋白组，每组30只，随机选取青年雌鼠生育仔鼠30只作为青年生育组。第7-21天，四组大鼠在接受正常哺乳的同时进行灌胃，青年生育组和高龄生育组每日灌胃1mL的生理盐水，高龄+低聚糖组每日灌胃含有10mg/mL低聚糖营养组合物的生理盐水1mL，高龄+低聚糖加骨桥蛋白组每日灌胃含有10mg/mL低聚糖+骨桥蛋白营养组合物的生理盐水1mL。实施例3中使用的低聚糖营养组合物与低聚糖+骨桥蛋白营养组合物与实施例2相同。第21天时，将仔鼠离乳并进行雌雄分笼喂养。第21天开始，四组大鼠正常饮食，饲喂普通饲料，同时青年生育组和高龄生育组分别每日灌胃1mL生理盐水，高龄+低聚糖组每日灌胃含有10mg/mL的低聚糖混合物的生理盐水1mL，高龄+低聚糖+骨桥蛋白组灌胃每日含有10mg/mL低聚糖+骨桥蛋白营养组合物的生理盐水1mL。将每窝仔鼠养至2月龄用于做Morris水迷宫实验。

水迷宫装置包括一个纯黑色圆形水池，直径120cm，高60cm；圆柱形平台，直径10cm，高30cm。在水池壁边缘的东、南、西、北四个位置标记入水点，将水池分为四个象限。将逃生平台随机放置在某一象限内，该象限定为目标象限，整个实验期间平台位置保持不变。在水池内注入清水，水面比隐藏逃生平台高1cm。水池内有加热装置将水温保持在24±2℃。水迷宫图像自动采集系统包括在水池上方的摄像头，并连接显示系统，同步记录大鼠的运动轨迹。水迷宫数据采集和分析系统采用的是Smart Junior视频跟踪系统。实验期间水迷宫装置外应有足够的参照物，并且在实验期间始终保持参照物位置不变。整个实验过程分为定位航行实验和空间搜索实验两部分：

定位航行实验(place navigation test,PNT)用于测定大鼠在水迷宫中的学习和记忆能力，实验历时6天。实验开始前一天，将水池内平台拿出，把大鼠放入水中自由游泳1分钟，使大鼠提前适应水迷宫环境。实验正式开始后，把逃生平台随机放置在某一象限内，整个实验期间平台位置始终保持不变。每天实验开始前半小时把大鼠置于水迷宫房间以适应环境。用手拖着大鼠，使大鼠头朝向水池壁依次按照东、南、西、北4个入水点轻轻进入水中，然后实验人员迅速离开水池。倘若大鼠在60s内能寻找到平台，则记录其搜寻并且爬上平台所用的时间，这个时间即为逃避潜伏期(escape latency)。倘若大鼠未能在60s内找到隐藏逃生平台，则由实验人员用手将其牵引到平台上，记录逃避潜伏期为60s。在大鼠登上逃生平台后，让其在平台上停留30s。每只大鼠训练4天，共计训练16次。计算每天各组4个方向的逃避潜伏期。

空间探索实验(spatial probe test,SPT)用于测定大鼠对隐藏逃生平台的空间位置的记忆能力。在隐藏平台获得实验完成后，即第7天撤去平台，随机选取一个入水点将大鼠放入水中，大鼠在水中游泳60s。大鼠在水池中以房间内固定设施为参照物，寻找平台所在位置。测量在60s内大鼠在原逃生平台所在象限，即目标象限(target quadrant)和其他各个象限的游泳时间，计算大鼠在目标象限滞留时间占总时间60s的百分比；大鼠穿越原逃生平台所在位置的次数。

结果显示，在定位航行试验中，相比于青年生育组，高龄生育组大鼠的逃避潜伏时间显著增加。低聚糖营养组合物干预后，逃避潜伏期时间显著缩短，且其逃避潜伏时间与正常年龄组接近(见表4)。高龄+低聚糖+骨桥蛋白组的结果显示，在低聚糖营养组合物中加入少量骨桥蛋白后，其逃避潜伏期时间相较于高龄+低聚糖组更加显著的缩短(见表4)。

表4：定位航行实验逃避潜伏期

注：*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001(与正常年龄组比较)，#p<0.05，##p<0.01，###p<0.001(与高龄组比较)，置信区间为95％(95％CI)。

在空间探索实验中，相比于高龄生育组，高龄+低聚糖组在目标象限滞留时间显著提高(见图6)。相比于高龄生育组，高龄+低聚糖组大鼠穿越原隐藏平台所在位置的次数要显著增多(见图7)。

此外，高龄+低聚糖加骨桥蛋白组的结果显示，在低聚糖营养组合物中加入少量骨桥蛋白后，实验动物的空间探索实验结果得到了更加显著的改善，其滞留时间百分比接近正常年龄组。

综上所述，上述实验结果表明，本发明营养组合物能够改善高龄产妇喂养的婴幼儿的肠道微环境，调控婴幼儿的肠道菌群，增加双歧杆菌和乳杆菌等有益菌的数量，以及增加肠道屏障功能。本发明营养组合物还能够改善高龄产妇喂养的婴幼儿的学习记忆能力。此外，在本发明营养组合物中加入少量骨桥蛋白(OPN)能够进一步增强本发明营养组合物改善高龄产妇喂养婴幼儿的学习记忆能力的作用。

显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

Claims (7)

1.一种辅助改善高龄产妇喂养的婴幼儿肠道微生态和辅助改善学习记忆能力的营养组合物，其特征在于：所述营养组合物包含以重量百分比计20%-35%的唾液酸化低聚糖，所述唾液酸化低聚糖包含唾液酸化-乳糖-N-四糖c（LSTc）和唾液酸化-乳糖-N-四糖b（LSTb），其中所述唾液酸化-乳糖-N-四糖c（LSTc）占所述营养组合物总重量的20%-35%，所述唾液酸化-乳糖-N-四糖b（LSTb）占所述营养组合物总重量的0%-15%；

所述营养组合物包含以重量百分比计50%-60%的岩藻糖基化的中性低聚糖，其中2-岩藻糖基乳糖（2-FL）占所述营养组合物总重量的25%-35%，所述岩藻糖基化的中性低聚糖还包含乳酰-N-岩藻五糖III（LNFPIII）和乳酰-N-二岩藻六糖II（LNDFHⅡ）；以及

所述营养组合物包含以重量百分比计5%-30%的非岩藻糖基化的中性低聚糖，其中乳酰-N-新四糖（LNnT）占所述营养组合物总重量的5%-30%；

其中，所述婴幼儿是指月龄为0-12个月的儿童。

2.根据权利要求1所述的营养组合物，其特征在于：所述营养组合物的终浓度为10 mg/100 g-10×10³ mg/100 g。

3.根据权利要求1所述的营养组合物，其特征在于：所述营养组合物中还包含骨桥蛋白（OPN），所述骨桥蛋白（OPN）与所述低聚糖的重量比是1：20-200。

4.根据权利要求3所述的营养组合物，其特征在于：在所述营养组合物中加入50 mg/100 g骨桥蛋白（OPN），使所述骨桥蛋白（OPN）的终浓度为65 mg/L。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的营养组合物，其特征在于：所述营养组合物为液体、粉末或块状固体。

6.根据权利要求1至4中任一项所述的营养组合物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：按照权利要求1至4中任一项所述的营养组合物中各组分的重量百分比称取各组分，进行混合，从而得到权利要求1至4中任一项所述的营养组合物。

7.根据权利要求1至5中任一项所述的营养组合物在制备婴儿配方奶粉或益生菌产品中的用途，其特征在于：所述婴儿配方奶粉或益生菌产品具有辅助改善高龄产妇喂养的婴幼儿肠道微生态和辅助改善学习记忆能力的作用。

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