CN112834472A - 多重荧光检测的光谱拆分方法、装置、设备、介质及系统 - Google Patents

多重荧光检测的光谱拆分方法、装置、设备、介质及系统 Download PDF

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Abstract

本发明实施例涉及荧光光谱检测技术领域,公开了多重荧光检测的光谱拆分方法、装置、设备、介质及系统。该方法包括:接收采集的每个荧光通道的荧光强度;分解每个荧光通道的荧光强度;选取每种染料在其中一个荧光通道的荧光强度作为每种染料的基准荧光强度,利用基准荧光强度确定每种染料在各荧光通道的荧光强度;根据选取的至少m个荧光通道的荧光强度计算得到每种染料的基准荧光强度;基于每个基准荧光强度确定每个荧光通道中每种染料的荧光强度。实施本发明实施例,以多激发和多发射通道的实测值为基础,可以将不同荧光染料再同时检测时产生的杂合光谱信号,拆分成单个染料的原始光谱;实现多种荧光染料再共同检测时的单荧光信号拆分。

Description

多重荧光检测的光谱拆分方法、装置、设备、介质及系统
技术领域
本发明涉及荧光光谱检测技术领域,具体涉及多重荧光检测的光谱拆分方法、装置、设备、介质及系统。
背景技术
荧光染料是指吸收某一波长的光波后能发射出荧光的物质,其在现代生物学、医学、光学等领域应用广泛。但由于各种荧光染料激发光、发射光的波长会有重叠,加之光学硬件的限制,不同荧光染料之间会有信号干扰。
在一些场景中,需要对单个荧光染料的荧光信号进行检测,对于混合的多染料,如果需要获取单个荧光染料的荧光信号,则需要对混合的多染料进行提纯,然后再通过激发和发射进行检测,过程相对复杂。
发明内容
针对所述缺陷,本发明实施例公开了一种多重荧光检测的光谱拆分方法、设备、介质及系统,用于将不同荧光染料在同时检测时产生的杂合荧光信号,拆分成单个染料的原始荧光信号。
本发明实施例第一方面公开多重荧光检测的光谱拆分方法,所述方法包括:
接收采集的每个荧光通道的荧光强度,所述荧光通道对应于对混合的多染料激发后发射荧光的发射通道;
分解每个荧光通道的荧光强度:
Figure BDA0002884364270000011
其中,Ci为第i个荧光通道的荧光强度,Ci-Dyej为第i个荧光通道中第j种染料的荧光强度;1≤i≤n,1≤j≤m,m≤n,m为染料总数,n为荧光通道总数;
选取每种染料在其中一个荧光通道的荧光强度作为每种染料的基准荧光强度,利用所述基准荧光强度确定每种染料在各荧光通道的荧光强度:
Ci-Dyej=Ci-Dyej%*Ck-Dyej (2)
其中,将第k个荧光通道的第j种染料的荧光强度Ck-Dyej作为第j种染料的基准荧光强度,1≤k≤n,Ci-Dyej%为Ci-Dyej与Ck-Dyej的比例常数,则根据公式(1)和公式(2)可得:
Figure BDA0002884364270000021
任意选取至少m个荧光通道,根据选取的至少m个荧光通道的荧光强度计算得到每种染料的基准荧光强度;
基于每个基准荧光强度以及公式(2)确定每个荧光通道中每种染料的荧光强度。
作为一种可选的实施方式,在本发明实施例第一方面中,对混合的多染料激发的激光光源为多个。
作为一种可选的实施方式,在本发明实施例第一方面中,所述Ci-Dyej%的获取方法,包括:
采用所述激光光源对单个的第j种染料进行激发,获取所有荧光通道的所述第j种染料的荧光强度;
选取第k个荧光通道的第j种染料的荧光强度作为基准荧光强度;
计算第i个荧光通道的第j种染料的荧光强度与所述基准荧光强度的比例,记为Ci-Dyej%。
作为一种可选的实施方式,在本发明实施例第一方面中,根据选取的至少m个荧光通道的荧光强度计算得到每种染料的基准荧光强度,包括:
基于公式(3)以及所述至少m个荧光通道的荧光强度得到多元一次方程组,对所述多元一次方程组进行求解,得到每种染料的基准荧光强度。
本发明实施例第二方面公开一种多重荧光检测的光谱拆分装置,该装置包括:
接收单元,用于接收采集的每个荧光通道的荧光强度,所述荧光通道对应于对混合的多染料激发后发射荧光的发射通道;
分解单元,用于分解每个荧光通道的荧光强度:
Figure BDA0002884364270000031
其中,Ci为第i个荧光通道的荧光强度,Ci-Dyej为第i个荧光通道中第j种染料的荧光强度;1≤i≤n,1≤j≤m,m≤n,m为染料总数,n为荧光通道总数;
选取单元,用于选取每种染料在其中一个荧光通道的荧光强度作为每种染料的基准荧光强度,利用所述基准荧光强度确定每种染料在各荧光通道的荧光强度:
Ci-Dyej=Ci-Dyej%*Ck-Dyej (5)
其中,将第k个荧光通道的第j种染料的荧光强度Ck-Dyej作为第j种染料的基准荧光强度,1≤k≤n,Ci-Dyej%为Ci-Dyej与Ck-Dyej的比例常数,则根据公式(4)和公式(5)可得:
Figure BDA0002884364270000032
第一计算单元,用于任意选取至少m个荧光通道,根据选取的至少m个荧光通道的荧光强度计算得到每种染料的基准荧光强度;
第二计算单元,用于基于每个基准荧光强度以及公式(5)确定每个荧光通道中每种染料的荧光强度。
本发明实施例第三方面公开一种电子设备,包括:存储有可执行程序代码的存储器;与所述存储器耦合的处理器;所述处理器调用所述存储器中存储的所述可执行程序代码,用于执行本发明实施例第一方面公开的一种多重荧光检测的光谱拆分方法。
本发明实施例第四方面公开一种计算机可读存储介质,其存储计算机程序,其中,所述计算机程序使得计算机执行本发明实施例第一方面公开的一种多重荧光检测的光谱拆分方法。
本发明实施例第五方面公开一种多重荧光检测的光谱拆分系统,该系统包括:
激发机构,用于对混合后的多染料进行激发,产生荧光信号,并将所述荧光信号由发射通道发射出去;
转换机构,用于接收每个发射通道的所述荧光信号,并将荧光信号由光信号转换成荧光强度的电信号;
电子设备,用于执行本发明实施例第一方面公开的一种多重荧光检测的光谱拆分方法。
本发明实施例第六方面公开一种计算机程序产品,当所述计算机程序产品在计算机上运行时,使得所述计算机执行本发明实施例第一方面公开的一种多重荧光检测的光谱拆分方法。
本发明实施例第七方面公开一种应用发布平台,所述应用发布平台用于发布计算机程序产品,其中,当所述计算机程序产品在计算机上运行时,使得所述计算机执行本发明实施例第一方面公开的一种多重荧光检测的光谱拆分方法。
与现有技术相比,本发明实施例具有以下有益效果:
本发明以多激发及多发射通道的实测值为基础,通过分解,可以将不同荧光染料再同时检测时产生的杂合光谱信号,拆分成单个染料的原始光谱;实现多种荧光染料再共同检测时的单荧光信号拆分,从而得到每种染料的荧光强度。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案,下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明实施例公开的多重荧光检测的光谱拆分方法的流程示意图;
图2是本发明实施例公开的多重荧光检测的光谱拆分装置的结构示意图;
图3是本发明实施例公开的多重荧光检测的光谱拆分系统的结构示意图;
图4是本发明实施例公开的电子设备的结构示意图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
需要说明的是,本发明的说明书和权利要求书中的术语“第一”、“第二”、“第三”、“第四”等是用于区别不同的对象,而不是用于描述特定顺序。本发明实施例的术语“包括”和“具有”以及他们的任何变形,意图在于覆盖不排他的包含,示例性地,包含了一系列步骤或单元的过程、方法、系统、产品或设备不必限于清楚地列出的那些步骤或单元,而是可包括没有清楚地列出的或对于这些过程、方法、产品或设备固有的其它步骤或单元。
一种多重荧光检测的光谱拆分方法、装置、设备、介质及系统,用于对多荧光染料同时进行荧光检测时,将多荧光染料形成的混合光谱进行拆分,进而得到每一种染料的光谱信息,即得到每一种染料的荧光强度,因此,该名称又可以称为一种多染料混合下的单荧光检测方法、装置、设备、介质及系统。
实施例一
请参阅图1,图1是本发明实施例公开的一种多重荧光检测的光谱拆分方法的流程示意图。其中,本发明实施例所描述的方法的执行主体通过软/硬件搭建而成,可以适用于光谱分析设备、流式细胞仪、多功能微孔板读数仪、荧光显微镜、荧光定量PCR等,当然,也可以使用手机、平板电脑、服务器等具有处理和存储功能的设备。如图1所示,该多重荧光检测的光谱拆分方法包括以下步骤:
110,接收采集的每个荧光通道的荧光强度,所述荧光通道对应于对混合的多染料激发后发射荧光的发射通道。
荧光强度、光谱信号以及荧光信号等均指代染料被激发后由发射通道发射的荧光信息。在一些情况下,为示区分,将荧光强度定义为荧光信息经由光电转换得到的电信号,而光谱信号以及荧光信号定义为激发后由发射通道发射的光信号。
在本发明实施例中,染料均指代荧光染料,为可以通过激发产生荧光的物质,混合染料是指混合的多染料,即不同的荧光染料混合在一起,且知晓混合染料中的各个单一染料的信息,用于后续各荧光通道之间比例的确定。
激发混合染料产生荧光的激发光源可以是一个,也可以是多个,采用多个激发光源时,该多个激发光源的中心波长可以相同,也可以不同。激发光源可以是紫外光,也可以是可见光,这里不做限定。
在本发明较佳的实施例中,可以采用多个不同中心波长的激发光源分别对混合染料进行激发,每个激发光源形成的激发通道对应多个发射通道,发射通道用于将激发形成的荧光信号转换成电信号,例如电压信号,记为荧光强度。荧光通道与发射通道一一对应,用于接收每个发射通道转换得到的荧光强度信息。
作为一种实例,发射通道设置将荧光信号转换成电信号的转换机构可以是窄带滤光片和光敏传感器的结合,每个发射通道上设置的窄带滤光片的通带中心波长不同,光敏传感器可以采用光电二极管、光电倍增管、雪崩二极管等实现。荧光信号经由窄带滤光片后,通过光电倍增管转换为电信号。
上述的激发通道和发射通道也可以采用现有成熟的产品实现,例如多功能微孔板读数仪。
120,分解每个荧光通道的荧光强度。
对于每个荧光通道的荧光强度信息而言,其可以理解为每种染料在该荧光通道的荧光强度的叠加。
因此,对于每个荧光通道的荧光强度,可以分解成:
Figure BDA0002884364270000071
其中,Ci为第i个荧光通道的荧光强度,Ci-Dyej为第i个荧光通道中第j种染料的荧光强度;1≤i≤n,1≤j≤m,m≤n,m为染料总数,n为荧光通道总数。
130,选取每种染料在其中一个荧光通道的荧光强度作为每种染料的基准荧光强度,利用所述基准荧光强度确定每种染料在各荧光通道的荧光强度:
Ci-Dyej=Ci-Dyej%*Ck-Dyej (2)
其中,将第k个荧光通道的第j种染料的荧光强度Ck-Dyej作为第j种染料的基准荧光强度,1≤k≤n,Ci-Dyej%为Ci-Dyej与Ck-Dyej的比例常数,则根据公式(1)和公式(2)可得:
Figure BDA0002884364270000081
对于公式(2)的获取方法,因为每种染料在同一激发光源的激发下,在多个荧光通道中的荧光强度,基本呈一定的比例关系。因此,可以通过对单一染料在激发光源获取的各个荧光通道中的荧光强度的关系,来确定这个比例关系。从这些荧光通道的荧光强度中,任意选取一个通道作为基准荧光强度,其他通道与之的比例关系也就确定。具体操作时,可以单次实验得到这个比例关系,也可以通过多次实验方式获取平均值作为该比例关系。这个比例关系为常数,即比例常数。
在后续对混合染料的荧光检测中,在使用与上述对单一染料进行实验时相同的激发光源以及荧光通道时,在知晓每个单一染料的基础信息例如名称时,则可以知晓各个荧光通道中该单一染料之间的关系,即公式(2)。
示例性地,如果选取第一荧光通道的荧光强度作为基准荧光强度,则对于混合染料中的第1种染料而言,其在各个荧光通道的荧光强度可以表示为:
C1-Dye1=100%*C1-Dye1
C2-Dye1=C2-Dye1%*C1-Dye1
C3-Dye1=C3-Dye1%*C1-Dye1
C4-Dye1=C4-Dye1%*C1-Dye1
C5-Dye1=C5-Dye1%*C1-Dye1
C6-Dye1=C6-Dye1%*C1-Dye1
C7-Dye1=C7-Dye1%*C1-Dye1
…………
Cn-Dye1=Cn-Dye1%*C1-Dye1
其中:C2-Dye1%表示第1种染料在第2荧光通道中的荧光强度C2-Dye1与基准荧光强度C1-Dye1的比例常数。
在试验阶段可以获知混合染料中所有单一染料的基准通道(获取基准荧光强度的荧光通道)以及所有单一染料在其他荧光通道与基准通道的荧光强度比例常数,即可将公式(1)改成公式(3)。上述的基准通道以及每种单一染料的比例常数均存储于存储介质中。
需要说明的是,不同单一染料使用的基准通道(k的值)不同,不过为了便于后续计算,也可以均选取同一荧光通道例如均选取第1荧光通道作为基准荧光通道。
140,任意选取至少m个荧光通道,根据选取的至少m个荧光通道的荧光强度计算得到每种染料的基准荧光强度。
对于公式(3)而言,每个荧光通道的荧光强度(步骤110采集得到)以及比例常数为已知量,则公式(3)中存在m个未知数,在求解释,只要选取m个或以上的方程即可求解该m个未知数。因为n≥m,则可以选取至少m个荧光通道,根据公式(3)以及所述至少m个荧光通道的荧光强度(例如f个荧光通道,m≤f≤n)得到f元一次方程组,对这个f元一次方程组进行求解,即可得到每种染料的基准荧光强度。
150,基于每个基准荧光强度以及公式(2)确定每个荧光通道中每种染料的荧光强度。
当确定了每种染料的基准荧光强度后,则可以确定每种染料在其他荧光通道的荧光强度,从而得到混合染料中各单一染料的荧光强度,可以通过矩阵形式进行表征,例如:
Figure BDA0002884364270000101
通过该矩阵可以得到混合染料中每种染料在每一荧光通道的荧光强度,可以实现对多种荧光染料进行同时检测及分析。
示例性地,在多功能微孔板读数仪,可以任意选取多个激发、发射波长,进行多种荧光染料如GFP、RFP、Cy3、Cy5、A488的多重分析,得到每种荧光染料在每个荧光通道中的荧光强度。在多功能微孔板读数仪中,同时分析荧光物质种类可多达100种以上。
根据每种染料在每一荧光通道的荧光强度,可以应用到现代生物学、医学、光学等领域中。示例性地,在流式细胞仪的多重表面标记物分析,如免疫细胞标志物CD3,CD4,CD8等,以及肿瘤标志物PD-1,PD-L1,Sox10等。对这些细胞进行多重荧光标记,如FITC、Cy3、Cy5、PE、BV420、BV510、BV600等荧光标记的多重同时检测,得到更多的免疫或肿瘤细胞指标。
实施例二
请参阅图2,图2是本发明实施例公开的一种多重荧光检测的光谱拆分装置(又称为:多染料混合的荧光检测装置)的结构示意图。如图2所示,该多重荧光检测的光谱拆分装置,可以包括:
接收单元210,用于接收采集的每个荧光通道的荧光强度,所述荧光通道对应于对混合的多染料激发后发射荧光的发射通道;
分解单元220,用于分解每个荧光通道的荧光强度:
Figure BDA0002884364270000111
其中,Ci为第i个荧光通道的荧光强度,Ci-Dyej为第i个荧光通道中第j种染料的荧光强度;1≤i≤n,1≤j≤m,m≤n,m为染料总数,n为荧光通道总数;
选取单元230,用于选取每种染料在其中一个荧光通道的荧光强度作为每种染料的基准荧光强度,利用所述基准荧光强度确定每种染料在各荧光通道的荧光强度:
Ci-Dyej=Ci-Dyej%*Ck-Dyej (5)
其中,将第k个荧光通道的第j种染料的荧光强度Ck-Dyej作为第j种染料的基准荧光强度,1≤k≤n,Ci-Dyej%为Ci-Dyej与Ck-Dyej的比例常数,则根据公式(4)和公式(5)可得:
Figure BDA0002884364270000112
第一计算单元240,用于任意选取至少m个荧光通道,根据选取的至少m个荧光通道的荧光强度计算得到每种染料的基准荧光强度;
第二计算单元250,用于基于每个基准荧光强度以及公式(5)确定每个荧光通道中每种染料的荧光强度。
实施例三
请参阅图3,图3是本发明实施例公开的一种多重荧光检测的光谱拆分系统(又称为:多染料混合的荧光检测系统)的结构示意图。如图3所示,该多重荧光检测的光谱拆分系统,可以包括:
激发机构310,用于对混合后的多染料进行激发,产生荧光信号,并将所述荧光信号由发射通道发射出去;
转换机构320,用于接收每个发射通道的所述荧光信号,并将荧光信号由光信号转换成荧光强度的电信号;
电子设备330,用于执行实施例一中的多重荧光检测的光谱拆分方法中的部分或全部步骤。
在本发明较佳的实施例中,激发机构310可以采用单个的激发光源,也可以采用多个激发光源。采用多个激发光源时,该多个激发光源的中心波长可以相同,也可以不同。激发光源可以是紫外光,也可以是可见光等。
在本发明较佳的实施例中,转换机构320可以采用窄带滤光片和光敏传感器的组合,每个发射通道上设置的窄带滤光片的通带中心波长不同,光敏传感器可以采用光电二极管实现。荧光信号经由窄带滤光片后,通过光电二极管转换为电信号。
在本发明较佳的实施例中,电子设备330可以是任意具有存储和处理功能的设备或器件,例如可以采用单片机和ROM等的结合,也可以使用手机、平板电脑或者计算机等设备。
多功能微孔板读数仪可以作为多重荧光检测的光谱拆分系统的一种实现方式。在现有的多功能微孔板读数仪中,本身具有激发机构、转换机构和处理机构,因此,使用多功能微孔板读数仪本身具有的激发机构和转换机构,调整多功能微孔板读数仪现有的处理机构,使其能够执行实施例一中的多重荧光检测的光谱拆分方法中的部分或全部步骤即可实现对多种荧光染料进行同时检测及分析。
实施例四
请参阅图4,图4是本发明实施例公开的一种电子设备的结构示意图。如图4所示,该电子设备可以包括:
存储有可执行程序代码的存储器410;
与存储器410耦合的处理器420;
其中,处理器420调用存储器410中存储的可执行程序代码,执行实施例一中的多重荧光检测的光谱拆分方法中的部分或全部步骤。
本发明实施例公开一种计算机可读存储介质,其存储计算机程序,其中,该计算机程序使得计算机执行实施例一中的多重荧光检测的光谱拆分方法中的部分或全部步骤。
本发明实施例还公开一种计算机程序产品,其中,当计算机程序产品在计算机上运行时,使得计算机执行实施例一中的多重荧光检测的光谱拆分方法中的部分或全部步骤。
本发明实施例还公开一种应用发布平台,其中,应用发布平台用于发布计算机程序产品,其中,当计算机程序产品在计算机上运行时,使得计算机执行实施例一中的多重荧光检测的光谱拆分方法中的部分或全部步骤。
在本发明的各种实施例中,应理解,所述各过程的序号的大小并不意味着执行顺序的必然先后,各过程的执行顺序应以其功能和内在逻辑确定,而不应对本发明实施例的实施过程构成任何限定。
所述作为分离部件说明的单元可以是或者也可以不是物理上分开的,作为单元显示的部件可以是或者也可以不是物单元,即可位于一个地方,或者也可以分布到多个网络单元上。可根据实际的需要选择其中的部分或全部单元来实现本实施例方案的目的。
另外,在本发明各实施例中的各功能单元可以集成在一个处理单元中,也可以是各个单元单独物理存在,也可以两个或两个以上单元集成在一个单元中。所述集成的单元既可以采用硬件的形式实现,也可以采用软件功能单元的形式实现。
所述集成的单元若以软件功能单元的形式实现并作为独立的产品销售或使用时,可以存储在一个计算机可获取的存储器中。基于这样的理解,本发明的技术方案本质上或者说对现有技术做出贡献的部分或者该技术方案的全部或者部分,可以以软件产品的形式体现出来,该计算机软件产品存储在一个存储器中,包括若干请求用以使得一台计算机设备(可以为个人计算机、服务器或者网络设备等,具体可以是计算机设备中的处理器)执行本发明的各个实施例所述方法的部分或全部步骤。
在本发明所提供的实施例中,应理解,“与A对应的B”表示B与A相关联,根据A可以确定B。但还应理解,根据A确定B并不意味着仅仅根据A确定B,还可以根据A和/或其他信息确定B。
本领域普通技术人体可以理解所述实施例的各种方法中的部分或全部步骤是可以通过程序来指令相关的硬件来完成,该程序可以存储于一计算机可读存储介质中,存储介质包括只读存储器(Read-Only Memory,ROM)、随机存储器(Random Access Memory,RAM)、可编程只读存储器(Programmable Read-only Memory,PROM)、可擦除可编程只读存储器(Erasable Programmable Read-Only Memory,EPROM)、一次可编程只读存储器(One-time Programmable Read-Only Memory,OTPROM)、电子抹除式可复写只读存储器(Electrically-Erasable Programmable Read-Only Memory,EEPROM)、只读光盘(CompactDisc Read-Only Memory,CD-ROM)或其他光盘存储器、磁盘存储器、磁带存储器、或者能够用于携带或存储数据的计算机可读的任何其他介质。
以上对本发明实施例公开的一种多重荧光检测的光谱拆分方法、装置、设备、介质及系统进行了详细介绍,本文中应用了具体个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述,以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想;同时,对于本领域的一般技术人体,依据本发明的思想,在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处,综上所述,本说明书内容不应理解为对本发明的限制。

Claims (8)

1.一种多重荧光检测的光谱拆分方法,其特征在于,包括:
接收采集的每个荧光通道的荧光强度,所述荧光通道对应于对混合的多染料激发后发射荧光的发射通道;
分解每个荧光通道的荧光强度:
Figure FDA0002884364260000011
其中,Ci为第i个荧光通道的荧光强度,Ci-Dyej为第i个荧光通道中第j种染料的荧光强度;1≤i≤n,1≤j≤m,m≤n,m为染料总数,n为荧光通道总数;
选取每种染料在其中一个荧光通道的荧光强度作为每种染料的基准荧光强度,利用所述基准荧光强度确定每种染料在各荧光通道的荧光强度:
Ci-Dyej=Ci-Dyej%*Ck-Dyej (2)
其中,将第k个荧光通道的第j种染料的荧光强度Ck-Dyej作为第j种染料的基准荧光强度,1≤k≤n,Ci-Dyej%为Ci-Dyej与Ck-Dyej的比例常数,则根据公式(1)和公式(2)可得:
Figure FDA0002884364260000012
任意选取至少m个荧光通道,根据选取的至少m个荧光通道的荧光强度计算得到每种染料的基准荧光强度;
基于每个基准荧光强度以及公式(2)确定每个荧光通道中每种染料的荧光强度。
2.根据权利要求1所述的多重荧光检测的光谱拆分方法,其特征在于,对混合的多染料激发的激光光源为多个。
3.根据权利要求2所述的多重荧光检测的光谱拆分方法,其特征在于,所述Ci-Dyej%的获取方法,包括:
采用所述激光光源对单个的第j种染料进行激发,获取所有荧光通道的所述第j种染料的荧光强度;
选取第k个荧光通道的第j种染料的荧光强度作为基准荧光强度;
计算第i个荧光通道的第j种染料的荧光强度与所述基准荧光强度的比例,记为Ci-Dyej%。
4.根据权利要求1所述的多重荧光检测的光谱拆分方法,其特征在于,根据选取的至少m个荧光通道的荧光强度计算得到每种染料的基准荧光强度,包括:
基于公式(3)以及所述至少m个荧光通道的荧光强度得到多元一次方程组,对所述多元一次方程组进行求解,得到每种染料的基准荧光强度。
5.一种多重荧光检测的光谱拆分装置,其特征在于,包括:
接收单元,用于接收采集的每个荧光通道的荧光强度,所述荧光通道对应于对混合的多染料激发后发射荧光的发射通道;
分解单元,用于分解每个荧光通道的荧光强度:
Figure FDA0002884364260000021
其中,Ci为第i个荧光通道的荧光强度,Ci-Dyej为第i个荧光通道中第j种染料的荧光强度;1≤i≤n,1≤j≤m,m≤n,m为染料总数,n为荧光通道总数;
选取单元,用于选取每种染料在其中一个荧光通道的荧光强度作为每种染料的基准荧光强度,利用所述基准荧光强度确定每种染料在各荧光通道的荧光强度:
Ci-Dyej=Ci-Dyej%*Ck-Dyej (5)
其中,将第k个荧光通道的第j种染料的荧光强度Ck-Dyej作为第j种染料的基准荧光强度,1≤k≤n,Ci-Dyej%为Ci-Dyej与Ck-Dyej的比例常数,则根据公式(4)和公式(5)可得:
Figure FDA0002884364260000031
第一计算单元,用于任意选取至少m个荧光通道,根据选取的至少m个荧光通道的荧光强度计算得到每种染料的基准荧光强度;
第二计算单元,用于基于每个基准荧光强度以及公式(5)确定每个荧光通道中每种染料的荧光强度。
6.一种电子设备,其特征在于,包括:存储有可执行程序代码的存储器;与所述存储器耦合的处理器;所述处理器调用所述存储器中存储的所述可执行程序代码,用于执行权利要求1至4任一项所述的一种多重荧光检测的光谱拆分方法。
7.一种计算机可读存储介质,其特征在于,所述计算机可读存储介质存储计算机程序,其中,所述计算机程序使得计算机执行权利要求1至4任一项所述的一种多重荧光检测的光谱拆分方法。
8.一种多重荧光检测的光谱拆分系统,其特征在于,包括:
激发机构,用于对混合后的多染料进行激发,产生荧光信号,并将所述荧光信号由发射通道发射出去;
转换机构,用于接收每个发射通道的所述荧光信号,并将荧光信号由光信号转换成荧光强度的电信号;
电子设备,用于执行权利要求1-4任一项所述的一种多重荧光检测的光谱拆分方法。
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