CN112826977B - 一种液体敷料、皮肤外用组合物及其制备方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明具体涉及一种液体敷料、皮肤外用组合物及其制备方法及应用。敏感肌肤发病的首要因素在于皮肤屏障功能受损，导致皮肤在外界刺激的作用下出现炎症反应。本发明提供了一种液体敷料，可充当临时的皮肤替代物，形成保护屏障减轻敏感肌肤的皮肤受损程度。所述液体敷料通过混合菌株发酵制备，制备工艺简单，高效。本发明提供的液体敷料可应用于皮肤修复药物或日常产品进行应用，具有广阔的开发前景。
Description
技术领域
本发明属于皮肤修复制剂技术领域，具体涉及一种液体敷料，包含所述液体敷料的皮肤外用组合物，所述液体敷料的制备方法及在皮肤修复药物及日化产品中的应用。
背景技术
公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
据调查，敏感肌肤人群占全部人群的30％～40％，敏感性皮肤并不是一种疾病，而是一种皮肤亚健康状态。敏感性皮肤分为两大类型：原发性和继发性。原发性例如遗传因素，表皮较薄，因为表皮的没有血管，所以真皮血管就裸露出来。在受热、日光照射、空气污染等外界刺激下，毛细血管扩张严重。继发性是指很多皮肤病会并发敏感，如炎症性皮肤疾病(痤疮、日光性皮炎)、药物(激素、维甲酸、水杨酸)、不恰当护肤和美白祛斑(换肤综合征)、微创及有创性皮肤治疗(激光术后)等，患者自觉刺痛感、灼热感，对普通化妆品不能耐受。
回归敏感肌肤的发病机制，在各种原因的影响下，不论是药物的、激光的，哪怕是遗传的，首当其冲是皮肤屏障功能受损。屏障的含义：对外抵抗外界日光微生物抗炎物质，对内锁住水分，使皮肤不易干燥。而屏障受损以后，外界的刺激极易导致皮肤发红，同时保水的能力丧失导致干燥脱屑，真皮浅层的血管就会扩张，血管神经高反应性，这类人一紧张，血管就扩张，随之出现红斑丘疹，加上神经信号的传导，形成一些炎症反应，出现瘙痒等。
为了减少对敏感性皮肤的刺激，保持皮肤湿度可以有效的减少外界的刺激，目前公认的保湿成分包括透明质酸、β-葡聚糖等。天然多糖成分的化学合成较为困难，目前主要从动物植物中提取、分离获得。发明人认为，提供简便、安全的多糖提取工艺，拓展关于β-葡聚糖等有益成分的应用形式，具有广阔的应用空间和经济价值。
发明内容
针对上述研究背景，本发明首先提供了一种可用作临时皮肤替代物的液体敷料，主要由β-葡聚糖及纤维素丝组成。进一步的，本发明还提供了一种基于微生物发酵方式制备所述液体敷料的工艺，通过发酵纯化即可获得所述液体敷料，制备工艺简便也不会引入有害物质，应用于工业生产具有重要意义。
基于上述技术效果，本发明具体提供以下技术方案：
本发明首先提供一种液体敷料，所述液体敷料中包括β-葡聚糖及纤维素丝。该液体敷料通过纤维丝的交织效果能够形成一种天然的物理屏障对皮肤进行保护。纤维素丝具有“类离子导入”的效果深入皱纹与皮丘的深处，实现深度补水，使皮肤保持湿润，减轻敏感肌肤出现的脱屑、红肿、瘙痒等症状，逐渐修复受损的皮肤，尤其是对继发性的敏感肌肤效果较好。
其次，本发明还提供一种包含上述液体敷料的皮肤外用组合物，所述液体敷料在提供屏障保护和补水效果的前提下，配合常用的皮肤修复、美白、抗炎等活性成分都有望收获良好的护理乃至治疗效果。
本发明第三方面，提供一种基于混合菌株发酵制备上述液体敷料的方法，整体的制备过程中，不引入化学试剂并且处理工艺简便高效。
最后，本发明还提供第一方面所述液体敷料、第二方面所述皮肤外用组合物在制备皮肤修复药物和日化产品中的应用。
以上一个或多个技术方案的有益效果是：
1、本发明提供的液体敷料，组成简单，而保湿和修护作用良好，β-葡聚糖及纤维素丝均为天然多糖成分，添加至药物、日用品中安全性良好，具有广阔的开发应用前景。
2、本发明提供的液体敷料，通过混合菌株发酵进行制备，制备工艺简便、绿色、安全性高，有利于工业扩大化生产。
附图说明
构成本发明的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。
图1为生物纤维素丝形成的过程示意图；
图2为实施例1中所述液体敷料的实物照片
图3为实施例3中液体敷料使用前后皮肤VISIA检测结果的对比图；
其中，左图为使用前的照片，右图为使用液体敷料后的照片。
图4为实施例4中乳腺癌患者使用液体敷料前后皮肤状况对比图；
其中，左图为使用前状态照片，中图为使用9天后的状态照片，右图为使用14天后的状态照片。
图5为实施例5中不同菌株混合后发酵效果对比图。
图6为实施例6中所述生物反应器结构示意图；
其中，100—反应器主体，101—进料口，102—加料口，103—进气口，104—出气口，105—蒸汽阀门，106—蒸汽过滤器，107—蒸汽发生器，108—空气阀门，109—空气过滤器，110—空气总阀门，111—空气储罐，112—空气压缩机，113—夹套进水口，114—夹套出水口，115—压力表，116—单向，117—中心管，118—桨叶，119—桨叶臂，120—气体分布器，121—通孔，122—反应器夹套，123—放料口。
具体实施方式
应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本发明提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本发明的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。
正如背景技术所介绍的，针对敏感肌肤皮肤问题的改善，本发明提出了一种可以形成皮肤保护屏障，提高补水效果的液体敷料，并且提供了一种基于微生物发酵方法制备所述液体敷料的工艺。
本发明第一方面，提供一种液体敷料，所述液体敷料中包括β-葡聚糖及纤维素丝。
优选的，所述β-葡聚糖是一种通过微生物发酵产生的多糖，具有较强的生理活性，一个方面可通过抑制细胞活素的活性，降低人体的炎症反应和致炎症细胞因子TNF-α的水平，通过抑制组织核因子NF-KB和NF-IL-6的活性，发挥对细胞的保护作用。另一方面β-葡聚糖还可以激活巨噬细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、成纤维细胞、角化细胞和淋巴细胞等，而皮肤修复都需要这些细胞的参与、增殖和分化。
本发明中所述β-葡聚糖结构如下式Ⅰ所示：
优选的，所述纤维素丝，是通过微生物发酵而形成的，它是由10-15个葡萄糖分子通过糖苷键组成葡聚糖链，多条葡聚糖链逐渐形成亚纤维。亚纤维聚合形成纤维束，并且在组装成纤维束过程中产生扭转，逐步形成纤维素丝。
在本发明中所述的β-葡聚糖和纤维素丝等都是通过混合菌发酵形成的，在最终的产品中纤维素丝的含量在0.02-0.1％之间，β-葡聚糖的含量在0.01-0.25％之间。
一些具体的实施方案中，所述液体敷料中还包括石蜡油、卡波姆、甘油中的一种。
本发明第二方面，提供一种皮肤外用组合物，所述组合物中包括第一方面所述液体敷料。
优选的，所述组合物中，还包括皮肤修复成分、美白成分、抗炎成分、表面活性剂。
优选的，所述组合物中，还包括必须的辅料，进一步的，所述药物组合物为一种凝胶剂、膏剂、乳剂、散剂、洗剂、醑剂、酊剂、油剂、涂膜制剂或贴剂。
本发明第三方面，提供第一方面所述液体敷料的制备方法，所述制备方法通过菌株发酵混合菌株获得，所述混合菌株包括产纤维素丝的巴氏醋杆菌、木醋杆菌、葡糖醋杆菌、八叠球菌、农杆菌中的一种和产β-葡聚糖的粘变形杆菌、放射性土壤杆菌、白色念球菌、酵母菌、明串珠菌中的一种。
优选的，所述产纤维素丝的为巴氏醋杆菌、木醋杆菌、葡糖醋杆菌中的一种。
优选的，所述产β-葡聚糖的菌为粘变形杆菌、明串珠菌中的一种。
进一步的，所述混合菌株为巴氏醋杆菌与粘变形杆菌的混合，或木醋杆菌与粘变形杆菌的混合，或葡糖醋杆菌与明串珠菌的组合，或木醋杆菌与明串珠菌的组合。
上述技术方案的一种具体方式中，采用木醋杆菌与明串珠菌进行混合发酵，所述木醋杆菌为木醋杆菌(Gluconacetobacterxylinus)ATCC23767，所述明串珠菌为柠檬明串珠菌(Leuconostoc citreum)N21，保藏编号为CGMCC No.15015。
优选的，所述混合菌株的发酵液中，碳源为葡萄糖、蔗糖、果糖、糖蜜中的一种或几种的混合；所述氮源为蛋白胨、氨水、铵盐、硝酸盐、尿素中的一种或几种的混合；所述无机盐为硫酸盐、磷酸盐、氯化物中的一种或几种的混合。
进一步的，所述发酵液成分及质量分数如下：葡萄糖0.3～0.5％，果糖3～5％，蛋白胨2～4％，硝酸钾0.1～0.2％，磷酸钠0.15～0.25％及氯化钾0.2～0.4％。
一种具体的实施方式中，所述混合菌株的发酵液配方如下：葡萄糖0.4％，果糖4％，蛋白胨3％，硝酸钾0.15％，磷酸钠0.2％，氯化钾0.3％，pH值为8.5。
又一种具体的实施方式中，所述混合菌株的发酵液配方如下：葡萄糖0.5％，果糖3％，蛋白胨4％，硝酸钾0.18％，磷酸钠0.18％，氯化钾0.35％，pH值为8.5。
优选的，所述混合菌株发酵方式如下：在15～20℃发酵12～18h，这期间保持发酵液溶氧8～12mg/L，然后流加3～7％蔗糖继续发酵18～22h，流加量为90～110mL/h。
优选的，所述混合菌株于生物反应器中进行发酵，所述生物反应器中具有搅拌装置，所述搅拌装置包括向反应器主体内部延伸的搅拌装置及分布于反应器主体外部的通气管路；
所述搅拌装置为位于反应器主体中心的中心管，在中心管外侧环绕若干桨叶，所述桨叶具有空腔，与中心管腔体连通，桨叶的一侧分布有通孔，所述反应器主体内部通过通孔与通气管路连通。
优选的，所述桨叶向反应器主体顶部方向延伸，与中心管的夹角为45-60度。
优选的，在中心管的延伸方向上，所述桨叶的分布为互生结构。所述“互生结构”可通过类比互生叶序进行理解，所述互生指在茎枝的每个节上只生一片叶子，各叶交互而生，它们常沿茎枝作螺旋状排列，如桑、樟等的叶序。本发明中所述“互生结构”是指中心管延伸方向的每个节点上只设置一个桨叶，桨叶之间错落分布，并且沿中心管呈螺旋状排列。
优选的，所述中心管的横切面方向上，所述桨叶夹角为120度。即，俯视所述反应器主体时，能够看到的桨叶数量为三个。
优选的，所述中心管的端部和/或桨叶的端部具有气体分布器；进一步的，所述气体分布器为喷嘴式气体分布器。
本发明针对上述液体敷料发酵的问题，提供了一种相适宜的发酵装置，重点对所述发酵装置中的搅拌及通气装置进行了结构改善，桨叶的互生结构保证了气体能够均匀分布于反应器的液体中，而桨叶的通孔分布在同侧，则可以通过气体的推动作用形成气流搅拌作用。有效克服了传统机械搅拌方式对微生物胞体、特别是对纤维素丝的破坏作用。
优选的，所述发酵装置中还具有发酵罐体、空气通入装置或蒸汽通入装置。所述装置的设置可依据本领域常规方案进行设置。
优选的，所述制备方法中，还包括后处理，所述后处理包括以下步骤：将发酵完成的发酵液进行瞬时高温处理，待发酵液降温至30-40℃，调节pH值8.0左右，加入蛋白酶处理5-10min获得料液，离心所述料液并去除上清，将离心沉淀物通过聚四氟乙烯(PTFE)过滤纯化。
进一步的，所述纯化工艺如下：将离心沉淀物装入底部具有PTFE过滤膜的柱子，依次向柱子中注入纯水及碱液，待柱子成为白色半透明状再加入纯水至流出液为中性。
本发明第四方面，提供第一方面所述液体敷料、第二方面所述皮肤外用组合物在制备皮肤修复药物和日化产品中的应用。
优选的，所述皮肤修复药物用于下列任意一种用途：
(1)原发性或继发性皮肤敏感症状；(2)皮肤日晒损伤；(3)皮肤伤口愈合；(4)皮肤色素沉淀。
优选的，所述日化产品包括但不限于洁面产品、护理产品及化妆品。
进一步的，所述洁面产品包括但不限于洗面奶、洁面皂、卸妆产品；所述护理产品包括但不限于护肤水、护肤乳、护肤霜、防晒霜、护肤油等。
为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本发明的技术方案，以下将结合具体的实施例详细说明本发明的技术方案。
实施例1
本实施例中，提供一种采用利用木醋杆菌和粘变形杆菌进行混合菌发酵制备液体敷料的方法，发酵液配方为：葡萄糖0.4％，果糖4％，蛋白胨3％，硝酸钾0.15％，磷酸钠0.2％，氯化钾0.3％，pH值为8.5，在18℃发酵16h，保持发酵液溶氧10mg/L，然后流加5％蔗糖继续发酵20h，流加量为100mL/h。
将培养好的发酵液进行瞬间高温处理，135℃维持5s。然后急速降温至30℃，然后加入蛋白酶150r/min处理30min。将处理好的发酵液进行离心8000r/min,10min，除去上清液。
将离心沉淀物装入底部具有孔径为0.45umPTFE过滤膜的柱子，在柱子的上部先注入纯水1h,流速控制为1L/min,后注入0.5g/L氢氧化钠溶液浸泡32h,每隔8h注入新的氢氧化钠一次，待柱子成为白色半透明状，再注入纯水1.5L/min，直至流出液为中性。
将纯化好的料液，加入甘油使其终浓度为0.4％，适当乳化即可得到此新型液体敷料。所述纯化后的液体敷料如附图2所示。
实施例2
本实施例中，提供一种采用木醋杆菌与明串珠菌进行混合发酵的方式，所述木醋杆菌为木醋杆菌(Gluconacetobacterxylinus)ATCC23767，所述明串珠菌为柠檬明串珠菌(Leuconostoc citreum)N21，保藏编号为CGMCC No.15015。
所述混合菌株的发酵液配方如下：葡萄糖0.5％，果糖3％，蛋白胨4％，硝酸钾0.18％，磷酸钠0.18％，氯化钾0.35％，pH值为8.5。在20℃发酵12h，保持发酵液溶氧8mg/L，然后流加3％蔗糖继续发酵18h，流加量为90mL/h。
将培养好的发酵液进行瞬间高温处理，135℃维持5s。然后急速降温至30℃，然后加入蛋白酶150r/min处理30min。将处理好的发酵液进行离心8000r/min,10min，除去上清液。
将离心沉淀物装入底部具有孔径为0.45umPTFE过滤膜的柱子，在柱子的上部先注入纯水1h，流速控制为1L/min,后注入0.5g/L氢氧化钠溶液浸泡32h,每隔8h注入新的氢氧化钠一次，待柱子成为白色半透明状，再注入纯水1.5L/min，直至流出液为中性。
将纯化好的料液，加入石蜡油使其终浓度为0.4％，适当乳化即可得到此新型液体敷料。
实施例3
本实施例中，将所述实施例1中制备的液体敷料应用于人面部，并对效果进行了VISIA皮肤检测，VISIA皮肤检测是运用先进的光学成像，RBX和软件科技，即时测出和分析表皮的斑点、毛孔、皱纹和皮肤纹理，以及由于紫外线照射而产生的皮下血管和色素性病变，如卟啉(油脂)、褐色斑、红斑等，并揭示了由它们而引起的如黄褐斑、痤疮、酒渣鼻和蜘蛛状静脉瘤等潜在危险。
从附图中可以看出，所述受试者在使用液体敷料前面部痤疮比较严重，尤其是额头、脸颊和下巴，每天涂抹一次液体敷料，连续使用5天后，痤疮症状明显改善，VISIA检测结果面部的斑点明显减少，皮肤受损程度明显改善。
实施例4
本实施例中，将实施例1中应用于皮肤疾病患者。所述受试者为临床上的一个乳腺癌患者，经过放疗治疗后，引起了急性放射性皮炎，皮肤表面形成水肿性红斑、发亮有水疱形成，部分皮肤破溃形成糜烂面，经过每天涂抹液体敷料，9天后溃烂面基本痊愈，14天后，急性放射性皮炎症状消失。
实施例5
本实施例中，针对不同组合的菌株发酵效果进行了考察，结果如图5所示，其中，其中，A：巴氏醋杆菌+粘变形杆菌，B：木醋杆菌+粘变形杆菌，C：葡糖醋杆菌+明串珠菌，D：木醋杆菌+明串珠菌。
通过实施例1中所述条件进行发酵，测得纤维素丝和β-葡聚糖的产率如下图5所示，另外利用场发射电镜SEM对产生的纤维素丝进行观察，直径在30nm-60nm之间所占的比例如图6所示。
实施例6
本实施例中，提供一种适用于液体敷料发酵的生物反应器，所述生物反应器的结构如附图6所示。所述生物反应器包括反应器主体100及通气装置。所述反应器主体100为罐体，所述通气装置包括向反应器主体内部延伸的搅拌装置及分布于反应器主体外部的通气管路。所述反应器主体100顶部具有进料口101、加料口102及出气口104，底部具有放料口123。
所述进料口101用于投加物料，口径较大。所述加料口102用于发酵过程中培养基的流加、微量元素的流加、以及调节pH值所需酸碱的流加；所述出气口104用于排出发酵过程中发生的气体，并且，所述出气口末端设置单向阀，用于防止其他气体进入反应器内部；所述放料口123用于转移反应器主体中的物料。
所述搅拌装置包括设置于反应器主体中心轴线上的中心管117，及在中心管117外侧环绕的桨叶118。所述中心管的内径为30mm。
所述桨叶118为管状，与中心管117腔体连通，所有桨叶的同一侧分布通孔121，所述反应器主体100内部通过通孔121与通气管路连通。所述桨叶118向反应器主体100顶部方向延伸，与中心管117的夹角为45度。所有的桨叶118在中心管的延伸方向上呈“互生结构”分布，每个节点上只设置一个桨叶，桨叶之间错落分布，并且沿中心管117呈螺旋状排列。如附图6所示，所述中心管的横切面方向上，所述桨叶夹角为120度。即，俯视所述反应器主体117时，能够看到的桨叶数量为三个。
所述中心管117的端部以及桨叶118的端部向反应器主体100内部膨出，并且桨叶118的端部具有喷嘴式气体分布器120。
另外，所述通气装置还包括空气通入装置及蒸汽通入装置。所述中心管117延伸向反应器主体100外部的一端设置进气口103，所述进气口103为三通结构，分别连接空气通入装置及蒸汽通入装置。
其中，所述空气通入装置包括空气压缩机112、空气储罐111，所述空气储罐111用于储存空气压缩机112中压缩后的空气，所述空气储罐111与进气口103连接的管路上依次设置空气总阀门110、空气过滤器109及空气阀门108。
所述蒸汽通入装置包括蒸汽发生器107，所述蒸汽发生器107通向进气口103的管路上依次设置蒸汽过滤器106及蒸汽阀门105。
所述反应器主体100的外部具有夹套，所述夹套呈U型套设于反应器主体外部。所述夹套靠近反应器主体100下方具有夹套进水口113，上方具有夹套出水口114，通过循环恒温水调节和维持反应器中物料的发酵温度。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (18)
1.一种液体敷料，其特征在于，所述液体敷料中包括β-葡聚糖及纤维素丝；
所述β-葡聚糖结构如下式所示：
所述液体敷料的制备方法，通过发酵混合菌株获得，所述混合菌株包括产纤维素丝的巴氏醋杆菌、木醋杆菌、葡糖醋杆菌、八叠球菌、农杆菌中的一种和产β-葡聚糖的粘变形杆菌、放射性土壤杆菌、白色念球菌、酵母菌、明串珠菌中的一种；
所述产纤维素丝的为巴氏醋杆菌、木醋杆菌、葡糖醋杆菌中的一种；
所述产β-葡聚糖的菌为粘变形杆菌、明串珠菌中的一种。
2.一种皮肤外用组合物，其特征在于，所述组合物中包括权利要求1所述液体敷料。
3.如权利要求2所述皮肤外用组合物，其特征在于，所述组合物中，还包括皮肤修复成分、美白成分、抗炎成分、表面活性剂。
4.如权利要求3所述皮肤外用组合物，其特征在于，所述组合物为一种膏剂、散剂、洗剂、醑剂、酊剂、油剂、涂膜制剂或贴剂。
5.权利要求1所述液体敷料的制备方法，其特征在于，所述制备方法通过发酵混合菌株获得，所述混合菌株包括产纤维素丝的巴氏醋杆菌、木醋杆菌、葡糖醋杆菌、八叠球菌、农杆菌中的一种和产β-葡聚糖的粘变形杆菌、放射性土壤杆菌、白色念球菌、酵母菌、明串珠菌中的一种；
所述产纤维素丝的为巴氏醋杆菌、木醋杆菌、葡糖醋杆菌中的一种；
所述产β-葡聚糖的菌为粘变形杆菌、明串珠菌中的一种。
6.如权利要求5所述液体敷料的制备方法，其特征在于，所述混合菌株为巴氏醋杆菌与粘变形杆菌的混合，或木醋杆菌与粘变形杆菌的混合，或葡糖醋杆菌与明串珠菌的组合，或木醋杆菌与明串珠菌的组合。
7.如权利要求6所述液体敷料的制备方法，其特征在于，所述混合菌株是采用木醋杆菌与明串珠菌进行混合发酵，所述木醋杆菌为木醋杆菌（Gluconacetobacter xylinus）ATCC23767，所述明串珠菌为柠檬明串珠菌（Leuconostoc citreum）N21，保藏编号为CGMCCNo.15015。
8.如权利要求5所述液体敷料的制备方法，其特征在于，所述混合菌株的发酵液中，碳源为葡萄糖、蔗糖、果糖、糖蜜中的一种或几种的混合；氮源为蛋白胨、氨水、铵盐、硝酸盐、尿素中的一种或几种的混合；无机盐为硫酸盐、磷酸盐、氯化物中的一种或几种的混合。
9.如权利要求8所述液体敷料的制备方法，其特征在于，所述发酵液成分及质量分数如下：葡萄糖0.3~0.5%，果糖3~5%，蛋白胨2~4%，硝酸钾0.1~0.2%，磷酸钠0.15~0.25%及氯化钾0.2~0.4%。
10.如权利要求9所述液体敷料的制备方法，其特征在于，所述混合菌株的发酵液配方如下：葡萄糖0.4%，果糖4%，蛋白胨3%，硝酸钾0.15%，磷酸钠0.2%，氯化钾0.3%，pH值为8.5。
11.如权利要求9所述液体敷料的制备方法，其特征在于，所述混合菌株的发酵液配方如下：葡萄糖0.5%，果糖3%，蛋白胨4%，硝酸钾0.18%，磷酸钠0.18%，氯化钾0.35%，pH值为8.5。
12.如权利要求5所述液体敷料的制备方法，其特征在于，所述混合菌株发酵方式如下：在15~20℃发酵12~18h，这期间保持发酵液溶氧8~12mg/L，然后流加3~7%蔗糖继续发酵18~22h，流加量为90~110mL/h。
13.如权利要求12所述液体敷料的制备方法，其特征在于，所述混合菌株于生物反应器中进行发酵，所述生物反应器中具有搅拌装置，所述搅拌装置包括向反应器主体内部延伸的搅拌装置及分布于反应器主体外部的通气管路；
所述搅拌装置为位于反应器主体中心的中心管，在中心管外侧环绕若干桨叶，所述桨叶具有空腔，与中心管腔体连通，桨叶的一侧分布有通孔，所述反应器主体内部通过通孔与通气管路连通。
14.如权利要求12所述液体敷料的制备方法，其特征在于，所述制备方法中，还包括后处理，所述后处理包括以下步骤：将发酵完成的发酵液进行瞬时高温处理，待发酵液降温至30-40℃，加入蛋白酶处理获得料液，离心所述料液并去除上清液，将离心沉淀物通过聚四氟乙烯过滤纯化。
15.如权利要求14所述液体敷料的制备方法，其特征在于，所述过滤纯化工艺如下：将离心沉淀物装入底部具有PTFE过滤膜的柱子，依次向柱子中注入纯水及碱液，待柱子成为白色半透明状再加入纯水至流出液为中性。
16.权利要求1所述液体敷料、权利要求2-4任一所述皮肤外用组合物在制备皮肤修复药物和日化产品中的应用。
17.如权利要求16所述液体敷料、皮肤外用组合物在制备皮肤修复药物和日化产品中的应用，其特征在于，所述皮肤修复药物用于下列任意一种用途：
（1）原发性或继发性皮肤敏感症状；（2）皮肤日晒损伤；（3）皮肤伤口愈合；（4）皮肤色素沉淀；
或，所述日化产品包括洁面产品、护理产品及化妆品。
18.如权利要求17所述液体敷料、皮肤外用组合物在制备皮肤修复药物和日化产品中的应用，其特征在于，所述洁面产品包括洗面奶、洁面皂、卸妆产品；所述护理产品包括护肤水、护肤乳、护肤霜、防晒霜、护肤油。
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Denomination of invention: A liquid dressing, skin topical composition, preparation method and application thereof Effective date of registration: 20230904 Granted publication date: 20220927 Pledgee: Ji'nan finance Company limited by guarantee Pledgor: SHANDONG NAMEIDE BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd. Registration number: Y2023980055212 |
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