CN112812991B - 一种抗草莓死棵的复合微生物菌剂 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种抗草莓死棵的复合微生物菌剂，包括：枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、绿色木霉菌和哈茨木霉；所述枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、绿色木霉菌和哈茨木霉的质量比为(55‑60)：(15‑20)：(5‑10)：(1‑5)：(1‑5)。本发明的复合微生物菌剂对引起根腐病的真菌病原菌如腐霉、尖孢镰刀菌、立枯丝核菌、疫霉等均有较强的抑制作用，可以有效的预防根腐病及茎基腐病，降低草莓死棵发病率。
Description
技术领域
本发明涉及微生物肥料技术领域，具体涉及一种抗草莓死棵的复合微生物菌剂。
背景技术
近年来由于大量使用化肥、未腐熟的畜禽粪便以及多年连续重茬种植导致土传病害严重，加上管理不当等原因，导致草莓死棵现象严重。随着绿色生态农业的发展，农业部对肥料、农药提出了一系列的要求和限制。微生物肥以其独特的功效性能，在提高土壤肥力、防控病害、提高品质、活化土壤、抗重茬防土传病害等各方面逐渐得到市场认可。
土壤生态被破坏，土传病害频发，根腐病、炭疽病、枯萎病等是引发草莓死棵的重大原因之一。而这些土传病害的病原菌包括真菌与细菌，市面上的杀菌剂往往只针对一类菌起作用。这样往往导致农药的大量使用，连年使用后不但导致病原菌耐药性提高，同时导致农残过高。微生物菌剂通过抗生、拮抗及营养位点的竞争可以起到对病原菌的抑制作用，不会产生耐药性及农残高的问题。由于导致死棵病害的病原菌往往不止一种，包括各种真菌及细菌，导致单一的微生物菌剂往往达不到很好的抑制病原菌的效果。因此，多种类微生物复合的菌剂-复合微生物菌群会逐渐成为未来菌剂的发展方向。但将多种类微生物进行复合时，由于不同种类的微生物的生理生化特性不同，微生物之间可能会存在拮抗、促生等不同的作用关系，因此，如何将多种类的微生物有机的复合在一起仍是目前的技术难点所在。
发明内容
针对上述现有技术，本发明的目的是提供一种抗草莓死棵的复合微生物菌剂。本发明的复合微生物菌剂对引发草莓死棵的真菌性病原菌和细菌性病原菌均有显著的抑制作用，可以有效降低草莓死棵发病率。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
本发明的第一方面，提供一种复合微生物菌剂，包括：枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)、绿色木霉菌(Trichoderma viride)和哈茨木霉(Trichodermaharzianum)；
所述枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、绿色木霉菌和哈茨木霉的质量比为(50-60)：(15-20)：(5-10)：(1-5)：(1-5)。
优选的，所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为ACCC04367，所述地衣芽孢杆菌的保藏编号为ACCC02045，所述解淀粉芽孢杆菌的保藏编号为ACCC60382，所述绿色木霉菌的产品编号为BNCC341615，所述哈茨木霉的保藏编号为ACCC31707。
优选的，所述复合微生物菌剂中的总活菌浓度≥100亿/g。
进一步的，所述复合微生物菌剂中还包括：载体和助剂；所述助剂为润湿剂、悬浮剂和保护剂中的一种或多种。
优选的，所述载体的加入量为复合微生物菌剂总重量的1-5％，润湿剂的加入量为复合微生物菌剂总重量的0.5-1％，悬浮剂的加入量为复合微生物菌剂总重量的1-2％，保护剂的加入量为复合微生物菌剂总重量的1-2％。
更优选的，所述载体选自膨润土、碳酸钙、凹凸棒土、硅藻土或高岭土中的一种或多种，所述润湿剂选自烷基萘磺酸盐、烷基萘磺酸缩聚物盐、茶皂素或十二烷基苯磺酸钠中的一种或多种；所述悬浮剂选自拉开粉、亚甲基二萘磺酸钠或D909S中的一种或多种，所述保护剂选自糊精、抗坏血酸或荧光增白剂。
优选的，所述复合微生物菌剂为液体制剂或固体制剂。
本发明的第二方面，提供上述复合微生物菌剂在抗草莓死棵中的应用。
上述应用中，所述复合微生物菌剂通过抑制引发草莓死棵的真菌性病原菌和细菌性病原菌的繁殖来降低草莓死棵发病率。
本发明的第三方面，提供一种降低草莓死棵发病率的方法，包括以下步骤：
向草莓育苗基质中添加所述复合微生物菌剂，每方草莓育苗基质中添加1-2kg所述复合微生物菌剂；
或者，将所述复合微生物菌剂作为底肥基施，复合微生物菌剂的施用量为2-3kg/亩；
或者，在草莓生长期间，结合浇水将所述复合微生物菌剂进行冲施，复合微生物菌剂的施用量为1-2kg/亩；
或者，在草莓生长期间，将所述复合微生物菌剂稀释后进行灌根，复合微生物菌剂的施用量为1-2kg/亩。
本发明的有益效果：
(1)本发明通过枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、绿色木霉菌(Trichoderma viride)、哈茨木霉(Trichoderma harzianum)之间的相互配合，共同达到促进土壤有机质分解、提高土壤肥力、改善土壤结构、增加土壤有益微生物菌群、抑制病原微生物、预防减少土传病害的发生、减少化肥及农药使用量的作用。
(2)本发明提供的复合微生物菌剂能够协同作用，对引起根腐病的真菌病原菌，如腐霉、尖孢镰刀菌、立枯丝核菌、疫霉等有较强的抑制作用，可以有效的预防根腐病及茎基腐病，绿色安全，无农药残留。
(3)本发明的复合微生物菌剂能够通过抗生及拮抗作用，抑制根腐病病原菌的繁殖，使草莓死棵发病率降低30％以上。
附图说明
图1：本发明的复合微生物菌剂对土壤有机质的分解效果；其中，A：对蛋白的分解效果；B：对脂肪的分解效果。
图2：本发明的复合微生物菌剂对引起根腐病的真菌性病原的抑菌效果；其中，A：腐霉，B：尖孢镰刀菌，C：立枯丝核菌，D：疫霉。
具体实施方式
应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
正如背景技术部分所介绍的，导致死棵病害的病原菌往往不止一种，包括各种真菌及细菌，因此单一的微生物菌剂往往达不到很好的抑制病原菌的效果。
基于此，本发明的目的在于开发一种抗草莓死棵的复合微生物菌剂。由于不同种类的微生物的生理生化特性不同，微生物之间可能会存在拮抗、促生等不同的作用关系，因此，如何将多种类的微生物有机的复合在一起仍是目前的技术难点所在。
本发明首先将多种具有抑菌效果的不同种类的微生物复合在一起，考察其复合之后对微生物给自生长的影响。通过大量筛选试验发现，枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)、绿色木霉菌(Trichoderma viride)和哈茨木霉(Trichodermaharzianum)这5种微生物复合之后，对彼此的生长不存在拮抗作用，可以组合使用。
进一步的，由于微生物的特性所致，即使同一种的微生物的不同单株，其性能也会存在显著差异。为获得最优的抗草莓死棵效果，本发明在筛选得到的上述五种微生物复合的基础上，又从每一种微生物目前所存在的单株中进行优选，最终得到本发明优选的抗草莓死棵的复合微生物菌剂组合，其由保藏编号为ACCC04367枯草芽孢杆菌、保藏编号为ACCC02045的地衣芽孢杆菌、保藏编号为ACCC60382的解淀粉芽孢杆菌、产品编号为BNCC341615的绿色木霉菌、保藏编号为ACCC31707哈茨木霉按质量比(55-60)：(15-20)：(5-10)：(1-5)：(1-5)混合而成。
本发明的抗草莓死棵的复合微生物菌剂，其各组分之间具有协同增效作用。本发明通过其对导致草莓死棵的真菌性病原菌和细菌性病原菌的抑菌效果来证实其协同增效作用。试验所采用的真菌性病原菌为尖孢镰刀菌，细菌性病原菌为青枯假单胞菌，通过平板对峙试验考察抑菌效果，结果如下：
上述结果表明，本发明的复合微生物菌剂在抑制引发草莓死棵的真菌性病原菌和细菌性病原菌方面具有显著的协同增效作用。
进一步的，本发明优选的抗草莓死棵的复合微生物菌剂对土壤有机质也具有较优的分解效果。本发明采用酪素培养基考察其对蛋白的分解效果(图1A)，采用三丁酸甘油酯琼脂培养基考察其对脂肪的分解效果(图1B)。结果表明，本发明的抗草莓死棵的复合微生物菌剂对蛋白、脂肪等有机质均具有一定的分解能力。
为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本申请的技术方案，以下将结合具体的实施例详细说明本申请的技术方案。
本发明实施例中所用的试验材料均为本领域常规的试验材料，均可通过商业渠道购买得到。其中：
枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和哈茨木霉均购自中国农业微生物菌种保藏管理中心，其中，枯草芽孢杆菌的保藏编号为ACCC04367，地衣芽孢杆菌的保藏编号为ACCC02045，解淀粉芽孢杆菌的保藏编号为ACCC60382，哈茨木霉的保藏编号为ACCC31707。绿色木霉菌购自北纳生物，其产品编号为BNCC341615。
实施例1：抗草莓死棵的复合微生物菌剂
复合微生物菌剂由枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、绿色木霉菌(Trichoderma viride)和哈茨木霉(Trichoderma harzianum)组成。
所述枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、绿色木霉菌和哈茨木霉的质量比为60：20：10：5：5。
所制备的复合微生物菌剂中的总活菌浓度为100亿/g。
实施例2：抗草莓死棵的复合微生物菌剂
复合微生物菌剂由复合微生物、载体、润湿剂、悬浮剂和保护剂组成，所述复合微生物、载体、润湿剂、悬浮剂和保护剂的重量比为90:5:1:2:2；
其中，所述复合微生物由枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、绿色木霉菌(Trichoderma viride)和哈茨木霉(Trichoderma harzianum)按重量比50:20:10:5:5组成。
所述载体为膨润土，所述润湿剂为十二烷基苯磺酸钠，所述悬浮剂为拉开粉，所述保护剂为糊精。
所制备的复合微生物菌剂中的总活菌浓度为100亿/g。
本实施例制备的复合微生物菌剂符合可湿性粉剂的性能指标(表1)，水不溶物低于0.5％，可满足滴灌要求。
表1：复合微生物菌剂的性能指标
| 项目 | 可湿性粉剂指标 | 复合微生物菌剂 |
| 有效菌数/(亿/g)≥ | 100 | 100 |
| pH值 | 6.0-7.5 | 6.5 |
| 水分/(％)≤ | 4.0 | 4.0 |
| 悬浮率(有效成分)/(％)≥ | 70 | 75 |
| 湿润时间/(min)≤ | 3 | 2 |
| 细度(75μm)/(％)≥ | 98 | 98 |
应用例1：
1.试验地点：章丘草莓种植基地。
2.试验方法：
试验分成两组，分别为微生物菌剂组和CK组，其中，微生物菌剂组在草莓苗期冲施实施例1制备的抗草莓死棵的复合微生物菌剂，冲施量为2kg/亩，冲施时，将复合微生物菌剂用水按重量比1:1000稀释后进行使用；CK组冲施等量的水。
微生物菌剂组和CK组的施肥及其他田间管理等操作一致。
在草莓移栽初期，统计草莓死棵数，结果见表2。
表2：草莓死棵及发病率统计
| 组别 | 草莓株数(亩) | 死棵数(亩) | 发病率 |
| CK | 5614 | 2000 | 35.6％ |
| 微生物菌剂 | 5560 | 280 | 5.03％ |
应用例2：
1.试验地点：章丘草莓种植基地。
2.试验方法：
试验分成两组，分别为微生物菌剂组和CK组，其中，微生物菌剂组在草莓苗期滴灌实施例2制备的抗草莓死棵的复合微生物菌剂，复合微生物菌剂的施用量为0.5kg/亩；CK组滴灌等量的水。
微生物菌剂组和CK组的施肥及其他田间管理等操作一致。
在草莓移栽初期，统计草莓死棵数，结果见表3。
表3：草莓死棵及发病率统计
| 组别 | 草莓株数(亩) | 死棵数(亩) | 发病率 |
| CK | 5500 | 2005 | 36.5％ |
| 微生物菌剂 | 5510 | 198 | 3.6％ |
以上所述仅为本申请的优选实施例而已，并不用于限制本申请，对于本领域的技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种复合微生物菌剂，其特征在于，包括：枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、绿色木霉菌和哈茨木霉；
所述枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、绿色木霉菌和哈茨木霉的质量比为60：20：10：5：5；
所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为ACCC04367，所述地衣芽孢杆菌的保藏编号为ACCC02045，所述解淀粉芽孢杆菌的保藏编号为ACCC60382，所述绿色木霉菌的产品编号为BNCC341615，所述哈茨木霉的保藏编号为ACCC31707；
所述复合微生物菌剂中的总活菌浓度≥100亿/g。
2.根据权利要求1所述的复合微生物菌剂，其特征在于，所述复合微生物菌剂中还包括：载体和助剂；所述助剂为润湿剂、悬浮剂和保护剂中的一种或多种；
所述载体的加入量为复合微生物菌剂总重量的1-5％，润湿剂的加入量为复合微生物菌剂总重量的0.5-1％，悬浮剂的加入量为复合微生物菌剂总重量的1-2％，保护剂的加入量为复合微生物菌剂总重量的1-2％。
3.根据权利要求2所述的复合微生物菌剂，其特征在于，所述载体选自膨润土、碳酸钙、凹凸棒土、硅藻土或高岭土中的一种或多种，所述润湿剂选自烷基萘磺酸盐、烷基萘磺酸缩聚物盐、茶皂素或十二烷基苯磺酸钠中的一种或多种；所述悬浮剂选自拉开粉、亚甲基二萘磺酸钠或D909S中的一种或多种，所述保护剂选自糊精、抗坏血酸或荧光增白剂。
4.根据权利要求1-3任一项所述的复合微生物菌剂，其特征在于，所述复合微生物菌剂为液体制剂或固体制剂。
5.权利要求1-4任一项所述的复合微生物菌剂在抗草莓死棵中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述复合微生物菌剂通过抑制引发草莓死棵的真菌性病原菌和细菌性病原菌的繁殖来降低草莓死棵发病率。
7.一种降低草莓死棵发病率的方法，其特征在于，包括以下步骤：
向草莓育苗基质中添加权利要求1-4任一项所述的复合微生物菌剂，每方草莓育苗基质中添加1-2kg所述复合微生物菌剂；
或者，将所述权利要求1-4任一项所述的复合微生物菌剂作为底肥基施，复合微生物菌剂的施用量为2-3kg/亩；
或者，在草莓生长期间，结合浇水将权利要求1-4任一项所述的复合微生物菌剂进行冲施，复合微生物菌剂的施用量为1-2kg/亩；
或者，在草莓生长期间，将权利要求1-4任一项所述的复合微生物菌剂稀释后进行灌根，复合微生物菌剂的施用量为1-2kg/亩。
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