CN112811752B - 一种用于修复水产养殖底质的复合微生态缓释颗粒及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于修复水产养殖底质的复合微生态缓释颗粒及其应用。所述的复合微生态缓释颗粒由低温三层滚粒技术制得，包括菌酶内核、营养层和缓释层，所述菌酶内核包括脱氮副球菌、粪肠球菌、凝结芽孢杆菌、碱性蛋白酶、低温淀粉酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶和载体，所述营养层包括乳酸菌培养物、黄腐酸钾和腐殖酸钠，所述缓释层包括褐藻酸钠；所述载体包括凹凸棒土，其中脱氮副球菌采用的是保藏编号为CGMCC No.20363的脱氮副球菌GBW‑HB1904。所述复合微生态缓释颗粒可快速降至水底并缓慢溶解，改善水产养殖池塘底质，为养殖动物提供健康的生活环境，而且对环境友好。

Description

一种用于修复水产养殖底质的复合微生态缓释颗粒及其应用

技术领域

本发明属于水产养殖生物技术应用领域，具体涉及一种用于修复水产养殖底质的复合微生态缓释颗粒及其应用。

背景技术

水产养殖业集约化程度越来越高，养殖池塘生态平衡被严重打破，导致养殖池塘环境水质恶化，给养殖动物健康带来危害，也增加了养殖风险。微生态制剂的引入是在人为干预下通过提高池塘益生菌的含量增强了池塘的净化能力，目前常见的益生菌主要是经过水体流动使益生菌遍布整个水体，促进了水体中益生菌的生态平衡，保证了中上层水体的稳定性。但大部分的饲料残饵、粪便、死藻等有机质会沉降在池塘底部，池底的污染程度远高于中上层水体，污染物长期积累后厌氧腐败，造成持续的有害物质释放，严重影响了养殖池塘整体环境，加重了水体的净化压力。

池塘底部污染以有机物污染为主，可借助生物酶类和脱氮类益生菌促进含氮有机物分解为无毒害的无机盐类，供水生植物循环利用，从而达到有效去污的作用。并且，要采用微生物技术干预池塘底部问题，需要针对性将这些生物制剂投放到池塘底部，在靶向部位集中发挥作用。

发明内容

本发明提供了一种用于修复水产养殖底质的复合微生态缓释颗粒及其应用。所述的复合微生态缓释颗粒含有多种菌株和酶类，并通过低温滚粒工艺制成，投放到养殖水中可快速降到水体底部，并缓慢溶解释放，进而起到很好的改善养殖池塘底质环境的作用。

为实现上述发明目的，本发明通过下述技术方案予以实现：

本发明提供了一种用于修复水产养殖底质的复合微生态缓释颗粒，所述复合微生态缓释颗粒包括菌酶内核、营养层和缓释层；

所述菌酶内核包括脱氮副球菌、粪肠球菌、凝结芽孢杆菌、碱性蛋白酶、低温淀粉酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶和载体。

进一步的，所述营养层包括乳酸菌培养物、黄腐酸钾和腐殖酸钠；所述缓释层包括褐藻酸钠；所述载体包括凹凸棒土。

所述凹凸棒土包括极小颗粒状凹凸棒土和普通凹凸棒土；所述极小颗粒状凹凸棒土的直径为0.5~1.0mm。

进一步的，所述复合微生态缓释颗粒各组分的含量为：

脱氮副球菌 10~20kg/吨；

粪肠球菌 10~20kg/吨；

凝结芽孢杆菌 10~20kg/吨；

碱性蛋白酶 100~200kg/吨；

低温淀粉酶 50~150kg/吨；

木聚糖酶 10~40kg/吨；

甘露聚糖酶 10~50kg/吨；

乳酸菌培养物 280~300kg/吨；

黄腐酸钾 40~50kg/吨

腐殖酸钠 40~50kg/吨；

褐藻酸钠 5~10kg；

极小颗粒状凹凸棒土 4~5kg；

普通凹凸棒土 200~400kg。

最优的，所述复合微生态缓释颗粒各组分的含量为：

脱氮副球菌 20kg/吨；

粪肠球菌 20kg/吨；

凝结芽孢杆菌 20kg/吨；

碱性蛋白酶 150kg/吨；

低温淀粉酶 150kg/吨；

木聚糖酶 10kg/吨；

甘露聚糖酶 10kg/吨；

乳酸菌培养物 300kg/吨；

黄腐酸钾 50kg/吨

腐殖酸钠 50kg/吨；

褐藻酸钠 10kg；

极小颗粒状凹凸棒土 5kg；

普通凹凸棒土 205kg。

进一步的，所述脱氮副球菌采用的是保藏编号为CGMCCNo.20363的脱氮副球菌GBW-HB1904。

进一步的，所述脱氮副球菌GBW-HB1904的生长温度范围为15～40℃。

进一步的，所述脱氮副球菌GBW-HB1904的生长溶氧含量为0.2～4mg/L。

进一步的，所述脱氮副球菌菌含量≥200×10⁸CFU/g，所述凝结芽孢菌含量≥200×10⁸CFU/g，所述粪肠球菌菌含量≥3000×10⁸CFU/g，所述碱性蛋白酶菌含量≥20万U/g，所述低温淀粉酶酶活≥5000U/g，所述木聚糖酶酶活≥2000U/g，所述甘露聚糖酶酶活≥10万U/g。

进一步的，所述复合微生态缓释颗粒的制备步骤如下：

（1）将脱氮副球菌在改良NB培养基中，在pH 7.0-7.5，温度为30℃的恒温摇床中培养20h制得种子液，再按10%的体积比接种至发酵培养基中，调整罐压为0.1MPa，温度28~32℃，溶氧≥30%，搅拌速度为180rpm，发酵18-20h，得到脱氮副球菌发酵菌液，再利用真空干燥法制得脱氮副球菌菌粉；

（2）将所述脱氮副球菌菌粉、粪肠球菌菌粉、凝结芽孢杆菌菌粉、碱性蛋白酶、低温淀粉酶、木聚糖酶和甘露聚糖酶混合均匀，以极小颗粒状凹凸棒土作为载体，将这两者混合后，加入其质量8-10%体积的水，逐渐转入到滚粒机中，以60r/min的转速，滚成直径为1-2mm的颗粒，得到菌酶内核，干燥后备用；

（3）将乳酸菌培养物、黄腐酸钾和腐殖酸钠混合均匀后，逐渐添加到滚粒机中，以所述菌酶内核为载体，以60r/min的转速滚成直径为2~3mm的颗粒，得到具有营养层的微生态颗粒；

（4）以所述微生态颗粒为载体，将褐藻酸钠与普通凹凸棒土按1:40-50的质量比混合后，逐步添加到滚粒机中，以60r/min的转速滚成直径为3~4mm的颗粒后，抛光10min，得到微生态缓释颗粒；于25~35℃下晾晒8~12h干燥至水分＜12%，得到复合微生态缓释颗粒。

本发明还提供了所述的复合微生态缓释颗粒在用于制备修复水产动物养殖底质的生物制剂中的应用。

进一步的，在应用时，将所述复合微生态缓释颗粒以200~300g/亩的用量直接抛洒到水产动物养殖池塘中。

进一步的，所述水产动物包括南美白对虾和河蟹。

进一步的，所述复合微生态缓释颗粒能够有效的分解养殖底质中的底泥干物质。

进一步的，所述复合微生态缓释颗粒能够减少弧菌数量。

与现有技术相比，本发明方法的优点和技术效果是：

1、本发明的复合微生态缓释颗粒采用低温三层滚粒技术将多种菌株和生物酶类混合制作而成，颗粒含三层，为菌酶内核、营养层和缓释层，每层都有独特的功能，投入水体可快速沉降到池塘底部，并且逐渐释放，使生物酶和益生菌与底泥中有机质充分接触以便发挥作用。该复合微生态缓释颗粒中适合水产养殖池塘环境的碱性蛋白酶和低温淀粉酶可以直接作用于池底含氮有机物，配合非淀粉多糖酶（木聚糖酶和甘露聚糖酶）分解植物性污染物细胞壁，联合促进了底部有机物的分解，使池底干物质消失率达到40%，再结合乳酸菌类（粪肠球菌、凝结芽孢杆菌）和脱氮副球菌低耗氧的益生菌，将分解后游离的氮进一步利用。

2、所述的复合微生态缓释颗粒制备方法简单，使用方便，其可以快速的降到水体底部，并缓慢溶解释放，能够改善水产的养殖水体环境，明显减少弧菌数量，恢复并增加水体的净化能力，进而使水质清澈，分解池底和池底植物表面的有机杂质，把底泥转换成池底植物能够利用的营养物质，进而促进池底植物的生长，进而起到很好的修复土塘养殖底质的作用，能为养殖动物提供健康的生活环境，而且环境友好不会产生二次污染，因此具有很好的使用前景。

附图说明

图1为脱氮副球菌GBW-HB1904在改良NB固体培养基平板上的菌落形态特征；

图2为复合微生态缓释颗粒的菌酶内核图；

图3为复合微生态缓释颗粒的外观；

图4为复合微生态缓释颗粒的横截面；

图5为是不同配方的复合微生态缓释颗粒对底泥干物质损失率影响图；

图6为使用复合微生态缓释颗粒前后养殖池塘弧菌的变化图；

图7为使用复合微生态缓释颗粒前后养殖池塘水色变化图；

图8为使用复合微生态缓释颗粒前后养殖池塘水色、底泥和料台变化图。

具体实施方式

结合以下具体实例对本发明的技术方案作进一步详细的说明。

下述实施例中，如无特殊说明，所使用的实验方法均为常规方法，所用材料、试剂等均可从生物或化学试剂公司购买。

实施例1

1、脱氮副球菌GBW-HB1904的筛选与纯化

取垃圾渗滤液与食品厂腌制食品废水各5g，加入100mL的PBS缓冲溶液中，振荡30min，使样品充分混匀，1000rpm离心2min，收集样品上清液，备用。取5mL上述样品上清液，分别加入到装有100mL高盐度硝态氮降解菌富集筛选液体培养基（葡萄糖10g，NaNO₃ 2g，Na₂CO₃ 1.5g，K₂HPO₄ 1.0g，MgSO₄·7H₂O 0.05g，FeSO₄·7H₂O 0.5g，NaCl 40g，pH 7.0-8.0，蒸馏水1L）的锥形瓶中，30℃，160rpm恒温摇床培养2d，富集3次。取培养的菌悬液梯度稀释后取100μL涂布于高盐度硝态氮降解菌富集筛选固体培养基（葡萄糖10g，NaNO₃ 2g，Na₂CO₃ 1.5g，K₂HPO₄ 1.0g，MgSO₄·7H₂O 0.05g，FeSO₄·7H₂O 0.5g，NaCl 40g，琼脂粉15g，pH 7.0～8.0，蒸馏水1L）上，置于30℃培养箱培养。在48h之后，挑取不同形态单菌落在改良营养肉汤（NB）固体培养基（牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化钠5g，NaNO₃2g/L、FeSO₄·7H₂O 0.05g/L、MgSO₄·7H₂O 0.1g/L、琼脂粉15g、水1L、pH 7.0～7.5）上划线培养，重复分离纯化3次，最后得到单菌落，将该单菌落命名为GBW-HB1904。如图1所示，所述菌株GBW-HB1904在改良NB固体培养基平板上的菌落为圆形，乳白色，直径0.2-0.4 mm，表面光滑湿润有光泽，中间略凸起，不透明，边缘整齐，无晕环。

2、脱氮副球菌GBW-HB1904的鉴定

以所述的菌株GBW-HB1904的DNA为模板，使用16S rRNA通用引物进行扩增，扩增片段进行序列测定，将得到的菌株GBW-HB1904的16S rDNA测序结果与GenBank中的序列进行比对分析，结果显示，菌株GBW-HB1904与Paracoccus denitrificans的同源性最高，因此确定该菌株GBW-HB1904为脱氮副球菌。

将筛选到的菌株GBW-HB1904进行菌种保藏，所述脱氮副球菌GBW-HB1904的保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC）；地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏日期：2020年07月15日；脱氮副球菌Paracoccus denitrificans的保藏编号为：CGMCC No.20363。

3、脱氮副球菌GBW-HB1904的生理生化特征

将制得的GBW-HB1904菌液在改良NB培养基中进一步培养后，根据《伯杰细菌鉴定手册》的菌株生理生化检测方法对脱氮副球菌GBW-HB1904进行检测。脱氮副球菌GBW-HB1904在15～40℃温度范围都能正常生长，最适生长温度为28～32℃；在pH值6～9的范围内均能生长，最适生长pH值为7.0～8.0；在溶氧含量0.2～4mg/L范围内都能正常生长，最适生长溶解氧浓度在1～3mg/L，脱氮副球菌GBW-HB1904属于兼性厌氧菌；并且该菌能够产生尿素酶、β-葡萄糖苷酶和甘油，同时还能够降解动力-硝酸盐和西蒙式枸橼酸盐及分解半固体琼脂。另外，脱氮副球菌GBW-HB1904适宜生长的培养基配方如下：葡萄糖50g/L、玉米浆干粉10 g/L、NaCl 5g/L、NaNO₃ 2g/L、KH₂PO₄ 0.2g/L、FeSO₄·7H₂O 0.05g/L、Na₂HPO₄ 5g/L、MgSO₄·7H₂O 0.1g/L、余量为水，液体培养基的pH为7.0～7.5。

4、脱氮副球菌GBW-HB1904菌粉的制备

将脱氮副球菌GBW-HB1904接种至改良NB培养基中，在pH 7.0-7.5，温度为30℃的恒温摇床中培养20h，得到脱氮副球菌GBW-HB1904种子液；将脱氮副球菌GBW-HB1904种子液按10%的体积比接种至发酵培养基中，调整罐压为0.1MPa，温度28～32℃，溶氧≥30%，搅拌速度为180rpm，发酵20h，得到脱氮副球菌GBW-HB1904发酵菌液，再将发酵菌液利用真空干燥法制备成脱氮副球菌GBW-HB1904菌粉。

实施例2

一种用于修复水产养殖底质的复合微生态缓释颗粒包括如下组分（每吨含）：

脱氮副球菌GBW-HB1904 10~20kg；

粪肠球菌 10~20kg；

凝结芽孢杆菌 10~20kg；

碱性蛋白酶 100~200kg；

低温淀粉酶 50~150kg；

木聚糖酶 10~40kg；

甘露聚糖酶 10~50kg；

乳酸菌培养物 280~300kg；

黄腐酸钾 40~50kg；

腐殖酸钠 40~50kg；

褐藻酸钠 5~10kg；

极小颗粒状凹凸棒土 4~5kg；

普通凹凸棒土 200~400kg。

上述菌含量或酶活力单位分别为：脱氮副球菌GBW-HB1904≥200×10⁸CFU/g，凝结芽孢杆菌≥200×10⁸CFU/g，粪肠球菌≥3000×10⁸CFU/g；蛋白酶≥20万U/g，低温淀粉酶≥5000U/g，木聚糖酶≥2000U/g，甘露聚糖酶≥10万U/g。所述脱氮副球菌GBW-HB1904使用的是实施例1制备的菌粉，所述凝结芽孢杆菌、粪肠球菌使用的均为市售的干燥菌粉，极小颗粒状凹凸棒土的直径为0.5-1.0mm，并且乳酸菌培养物、黄腐酸钾、腐殖酸钠、褐藻酸钠、极小颗粒状凹凸棒土、普通凹凸棒土均为市售商品原料。

所述的复合微生态缓释颗粒采用低温三层滚粒技术制作，具体步骤如下：

（1）第一层菌酶内核的制备：将实施例1制备得到的脱氮副球菌GBW-HB1904菌粉、粪肠球菌干燥菌粉、凝结芽孢杆菌干燥菌粉、碱性蛋白酶、低温淀粉酶、木聚糖酶和甘露聚糖酶混合均匀，以极小颗粒状凹凸棒土（0.5-1.0mm）作为原始载体，将这两者混合后，加入其质量10%的水，逐渐转入到滚粒机中，转速为60r/min，滚成直径为1-2mm的颗粒，得到菌酶内核（图2），干燥后备用；

（2）第二层营养层的制备：将市售的乳酸菌培养物（纳普源-乳酸菌培养物）、黄腐酸钾和腐殖酸钠混合均匀后，逐渐添加到滚粒机中，以菌酶内核为载体，转速为60r/min，滚成直径为2~3mm的颗粒，得到具有营养层的微生态颗粒；

（3）第三层缓释层的制备：以微生态颗粒为载体，将褐藻酸钠与普通凹凸棒土按1:40混合后，逐步添加到滚粒机中，转速为60r/min，滚成直径为3~4mm的颗粒后，抛光10min，得到微生态缓释颗粒；此时该颗粒的水分在20%~25%，于25~35℃下晾晒8~12h使水分降低至＜12%，即可如图3和4所示的复合微生态缓释颗粒。

实施例3：复合微生态缓释颗粒对底泥干物质消失率的影响

将养殖中后期池塘底泥干燥粉碎后，过60目筛，取12个250mL锥形瓶，分为4组：对照组、配方1组、配方2组、配方3组，配方如表1所示，每组3个重复，分别加入5g过筛后的池塘底泥、100ml纯净水、0.2g对应配方的复合微生态缓释颗粒，对照组加0.2g高温灭活的配方1的颗粒，然后pH调至8.0，25℃分解1天后测定各组干物质损失率。测定方法为：将分解后的底泥水样，用在抽滤泵上用滤纸抽滤，抽滤上残留物105℃烘干4h至恒重，并称重。计算干物质消失率=（G-G1）/G*100%（G为分解前底泥样品干重，G1为分解后底泥样品干重）。

表1复合微生态缓释颗粒的分组配方

成分	配方1（kg）	配方2（kg）	配方3（kg）
				脱氮副球菌	10	20	20
凝结芽孢杆菌	10	20	20
				粪肠球菌	10	20	20
碱性蛋白酶	100	150	150
				低温淀粉酶	50	100	150
木聚糖酶	10	10	10
				甘露聚糖	10	10	10
黄腐酸钾	50	50	50
				腐殖酸钠	50	50	50
褐藻酸钠	10	10	10
				乳酸菌培养物	300	300	300
极小颗粒状凹凸棒土	5	5	5
				普通凹凸棒土	385	255	205
合计	1000	1000	1000

所述菌酶原料生物量保证值为：脱氮副球菌200×10⁸CFU/g，凝结芽孢200×10⁸CFU/g，粪肠球菌3000×10⁸CFU/g，碱性蛋白酶20万U/g，低温淀粉酶5000U/g，木聚糖酶2000U/g，甘露聚糖酶10万U/g。

结果如图5所示，配方组的底泥干物质消失率均显著高于对照组，且以配方3最优，比对照组干物质消失率高39.99%，说明本发明的复合微生态缓释颗粒对底泥干物质的分解起到了显著的促进作用。

实施例4

2020年3月27日江苏省如东县小棚养殖池塘，放养南美白对虾苗种5万/棚（0.5亩·米），4月22日出现南美白对虾活力弱，吃料慢的问题，经检测发现水体弧菌超标。使用过硫酸氢钾颗粒8小时后，全池抛洒按配方3制成的复合微生态缓释颗粒，用量为200g/亩。如图6所示，3天后检测弧菌数量明显减少，7天后弧菌数量进一步减少，说明使用复合微生态缓释颗粒可改善养殖水体环境，使致病菌减少。

实施例5

2020年5月28日江苏省兴化市永丰镇河蟹养殖池塘，河蟹规格为3壳，出现水草长势不好，没有活力的问题，并伴随着池塘水质浑浊。使用按配方3制成的复合微生态缓释颗粒200g/亩，全池抛洒。如图7所示，使用后第六天池塘水质较清爽，浑浊减轻；水草叶面干净，长势明显。这是由于使用复合微生态缓释颗粒前水草叶面有挂脏，导致水草活力不佳，长势慢，对水体的净化能力减弱，进而水质浑浊；而本发明的复合微生态缓释颗粒为复合菌与复合酶组成，能快速分解池底有机杂质，改良水池底部环境，把底泥转换成水草能够利用的营养物质，进而促进水草生长，并且可以分解水草叶面上的有机杂质，使水草叶面干净。

实施例6

2020年7月27日北海市合浦县党江镇渔江4个南美白对虾土塘，面积分别为1亩、2亩、3亩、3亩，放养密度平均在7万苗/亩，放苗127天，虾苗规格50~60尾/斤，出现的主要问题是水质有机质较多，水体透明度较低，镜检发现裸藻较多，同时土塘的底泥黑、脏，导致对虾料台和对虾体表挂脏。当天上午使用按配方3制成的复合微生态缓释颗粒300g/亩向土塘抛洒；如图8所示，两天后，土塘的水质变得较为清爽，透明度提高10cm左右，底泥由黑色开始变黄。

水体浑浊和出现不良藻类的主要原因在于，当持续出现高温天气时，藻类的新陈代谢旺盛，每天会有一部分死藻沉入底部，当有机质累计过多时就给不良藻类（蓝藻、裸藻、甲藻等）提供所需营养，尤其夏季高温天气容易出现返底现象，水体表层会伴随着很多悬浮颗粒。底部有机质在没有经过改底类的产品进行分解和氧化时，会逐渐变黑，在使用复合微生态缓释颗粒后，其对土塘底部的有机质进行了有效的分解释放，在改善底质的同时还起到肥水净水的作用，进而起到了修复土塘养殖底质的作用。

以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。

Claims (7)

1.一种用于修复水产养殖底质的复合微生态缓释颗粒，其特征在于：所述复合微生态缓释颗粒包括菌酶内核、营养层和缓释层；

所述菌酶内核包括脱氮副球菌、粪肠球菌、凝结芽孢杆菌、碱性蛋白酶、低温淀粉酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶和载体；所述营养层包括乳酸菌培养物、黄腐酸钾和腐殖酸钠；所述缓释层包括褐藻酸钠；所述载体包括凹凸棒土；所述凹凸棒土包括极小颗粒状凹凸棒土和普通凹凸棒土；所述极小颗粒状凹凸棒土的直径为0.5~1.0mm；

所述脱氮副球菌采用的是保藏编号为CGMCC No.20363的脱氮副球菌GBW-HB1904。

2.根据权利要求1所述的复合微生态缓释颗粒，其特征在于：所述复合微生态缓释颗粒各组分的含量为：

脱氮副球菌 10~20kg/吨；

粪肠球菌 10~20kg/吨；

凝结芽孢杆菌 10~20kg/吨；

碱性蛋白酶 100~200kg/吨；

低温淀粉酶 50~150kg/吨；

木聚糖酶 10~40kg/吨；

甘露聚糖酶 10~50kg/吨；

乳酸菌培养物 280~300kg/吨；

黄腐酸钾 40~50kg/吨

腐殖酸钠 40~50kg/吨；

褐藻酸钠 5~10kg；

极小颗粒状凹凸棒土 4~5kg；

普通凹凸棒土 200~400kg。

3.根据权利要求2所述的复合微生态缓释颗粒，其特征在于：所述脱氮副球菌菌含量≥200×10⁸CFU/g，所述凝结芽孢菌菌含量≥200×10⁸CFU/g，所述粪肠球菌菌含量≥3000×10⁸CFU/g，所述碱性蛋白酶菌菌含量≥20万U/g，所述低温淀粉酶酶活≥5000U/g，所述木聚糖酶酶活≥2000U/g，所述甘露聚糖酶酶活≥10万U/g。

4.根据权利要求2所述的复合微生态缓释颗粒，其特征在于：所述复合微生态缓释颗粒的制备步骤如下：

（1）将脱氮副球菌在培养基中30℃培养18-20h后制得种子液，再按10%的体积比接种至发酵培养基中，发酵18-20h得到脱氮副球菌发酵菌液，再利用真空干燥法制得脱氮副球菌菌粉；

（2）将所述脱氮副球菌菌粉、粪肠球菌菌粉、凝结芽孢杆菌菌粉、碱性蛋白酶、低温淀粉酶、木聚糖酶和甘露聚糖酶混合均匀，以极小颗粒状凹凸棒土作为载体，将这两者混合后，加入其质量8-10%体积的水，逐渐转入到滚粒机中，滚成直径为1-2 mm的颗粒，得到菌酶内核，干燥后备用；

（3）将乳酸菌培养物、黄腐酸钾和腐殖酸钠混合均匀后，逐渐添加到滚粒机中，以所述菌酶内核为载体，滚成直径为2~3mm的颗粒，得到具有营养层的微生态颗粒；

（4）以所述微生态颗粒为载体，将褐藻酸钠与普通凹凸棒土按1:40-50的质量比混合后，逐步添加到滚粒机中滚成直径为3~4mm的颗粒后，抛光10min，得到微生态缓释颗粒；干燥至水分＜12%，得到复合微生态缓释颗粒。

5.权利要求1-4任一项所述的复合微生态缓释颗粒在用于制备修复水产动物养殖底质的生物制剂中的应用。

6.根据权利要求5所述的复合微生态缓释颗粒在用于制备修复水产动物养殖底质的生物制剂中的应用，其特征在于，在应用时，将所述复合微生态缓释颗粒以200~300g/亩的用量直接抛洒到水产动物的养殖池塘中。

7.根据权利要求6所述的复合微生态缓释颗粒在用于制备修复水产动物养殖底质的生物制剂中的应用，其特征在于，所述水产动物包括南美白对虾和河蟹。

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