CN112811609A - 重金属吸附及亚硝酸盐降解用微生态颗粒的制备方法 - Google Patents
重金属吸附及亚硝酸盐降解用微生态颗粒的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112811609A CN112811609A CN202011534186.0A CN202011534186A CN112811609A CN 112811609 A CN112811609 A CN 112811609A CN 202011534186 A CN202011534186 A CN 202011534186A CN 112811609 A CN112811609 A CN 112811609A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bacterial
- heavy metal
- particles
- microecological
- preparing
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
- C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F2101/00—Nature of the contaminant
- C02F2101/10—Inorganic compounds
- C02F2101/16—Nitrogen compounds, e.g. ammonia
- C02F2101/166—Nitrites
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F2101/00—Nature of the contaminant
- C02F2101/10—Inorganic compounds
- C02F2101/20—Heavy metals or heavy metal compounds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F2103/00—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated
- C02F2103/20—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated from animal husbandry
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Hydrology & Water Resources (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Environmental & Geological Engineering (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种重金属吸附及亚硝酸盐降解用微生态颗粒的制备方法，涉及水产养殖水质改良领域，选取芽孢杆菌菌株HS‑12进行活化与培养，获得HS‑12菌液，HS‑12菌液通过离心得到菌泥并添加冻干保护剂冻干后，得到HS‑12菌粉，将HS‑12菌粉配制成共混材料并造粒，将制备的颗粒浸泡于氯化钙溶液中交联、冻干去除水分得到所需HS‑12固定化微生态颗粒。本发明的有益效果是：通过贝壳粉与海藻酸钠交联同时筛选得到能在重金属富集的条件下仍能进行好氧反硝化的菌株HS‑12，以海藻酸钠与钙离子反应生成海藻酸钙为颗粒提供骨架，其交联孔径大，有利于具有物理吸附作用的贝壳粉发挥物理吸附作用及菌株HS‑12的缓释及交联微生态环境内发挥功效，可实现同步进行重金属吸附及氮污染降解。
Description
技术领域
本发明涉及水产养殖水质改良领域，具体而言，涉及一种重金属吸附及亚硝酸盐降解用微生态颗粒的制备方法，尤其适用于解决的氮污染及重金属污染水体的同步治理。
背景技术
几十年以来，我国水产养殖业的发展取得了举世瞩目的成就，带来了巨大的经济利益，然而许多水产养殖主体对象缺乏对水产养殖业生态问题严重性的充分认识，更缺乏解决问题的方法理论指导，为了提高单位水体的养殖产量，片面追求高产，往往过分地加大放养密度，过度投饵、施肥，一方面导致水体中有机物、氮、磷猛增，藻类大量繁殖，水体透明度下降，水质恶化；水体中过量的有机质分解不仅消耗水体中的溶解氧，使水体环境处于缺氧状态，同时还释放出许多有害物质，如氨氮、亚硝酸氮和硫化氢等，直接或间接地危害水体中的养殖生物，使得养殖水体中生物多样性下降，优质水产品种的养殖受到水质和饵料生物的限制。另一方面使水体受到严重的重金属污染，如砷、铬、镉、铅等相关物质；水体中过量的重金属会对周边的水源土壤等生态环境造成严重的污染。
对养殖水体及自然水域水体进行水质原位改良和有害物质的去除，在保证水产养殖品安全的基础上达到水产养殖水资源循环利用，并实现生态环境的自然与人工双重恢复具有重要意义。因此，近年来对水质进行原位改良和有害物质的去除受到了广泛的研究，中国专利CN104498382B和CN101565239A分别采用沼泽红假单胞菌与枯草芽孢杆菌、粪产碱杆菌与节杆菌来对水体进行净化，但只能实现氮污染清除；中国专利CN107583618A采用海藻酸钠/贻贝壳粉微球对水体进行净化，但只能实现重金属物理吸附、而中国专利CN208151154U采用污水循环处理系统来对水体进行净化，但存在需较大占地空间，设备投入成本高且不能原位清除的缺点。
发明内容
针对现有技术中存在的需较大占地空间，设备投入成本高且不能原位清除；只能实现氮污染清除或重金属物理吸附的问题，本发明公开一种重金属吸附及亚硝酸盐降解用微生态颗粒的制备方法，包括如下步骤：
步骤一，制备菌液，取芽孢杆菌菌株HS-12接种至培养基中活化，得到种子液，并按2～5％的接种量接种至培养基培养一段时间后，得到HS-12菌液；
步骤二，制备菌粉，通过离心倾去菌液上层清液，得到菌泥并添加冻干保护剂冻干后，得到HS-12菌粉；
步骤三，制备微生态颗粒，将海藻酸钠水溶液、HS-12菌粉、贝壳粉和高岭土混合均匀并造粒，将制备的颗粒浸泡于氯化钙溶液中交联、冻干去除水分即得到所需HS-12固定化微生态颗粒。
优选地，步骤一中将芽孢杆菌菌株HS-12接种至培养基中，在37℃、180rpm下活化16h，制得种子液。
优选地，步骤一中种子液按3％接种量接种至LB培养基中，于37℃、180rpm下培养24h得到HS-12菌液。
优选地，步骤二中离心转速为8000rpm，时间为10min。
优选地，步骤二中冻干保护剂包括占菌泥重量百分比5％的蔗糖和占菌泥重量百分比0.1％的海藻糖。
优选地，步骤二中冻干采用在-30℃至-15℃温度下预冻8-16h，再在冻干机冻干48h，得到所述菌粉。
优选地，步骤二中在冻干后得到的菌粉中添加空载体，将菌粉活菌数调整至6.14×108cfu/g。
优选地，步骤三中各组分的重量配比为：
优选地，步骤三中所述海藻酸钠水溶液中海藻酸钠的浓度为4％。
优选地，步骤三中所述贝壳粉和高岭土的细度为400目。
更优选地，一种重金属吸附及亚硝酸盐降解用微生态颗粒的制备方法，包括如下步骤：
步骤一，取芽孢杆菌菌株HS-12接种至培养基中活化，在37℃、180rpm下活化16h，制得种子液，并按2～5％的接种量接种至培养基培养一段时间后，得到HS-12菌液；
步骤二，将HS-12菌液在离心转速为8000rpm下离心10min倾去菌液上层清液，得到菌泥并添加由包括占菌泥重量百分比5％的蔗糖和占菌泥重量百分比0.1％的海藻糖制成的冻干保护剂后在-30℃至-15℃温度下预冻8-16h，再在冻干机冻干48h，得到HS-12菌粉，HS-12菌粉经添加空载体，将菌粉活菌数调整至6.14×108cfu/g；
步骤三，按3-4g柠檬酸钠、1-2g磷酸二氢钾、3-5g牛肉膏、10-20g胰蛋白胨、2-11mg维生素C、1-7mg维生素B1、1-7mg维生素B6、1-7mg维生素B12、10mg芦荟萃取物、1L水比例配制成促生剂溶液。
步骤四，将环己烷和二氯甲烷按1:1体积比混合作为有机相；将6g乙二胺加入到10mL蒸馏水中，加入5mL的促生剂溶液，同时加入冰醋酸调节pH值为8-9作为水相。
步骤五，将配制好的有机相150mL加入到250mL三口瓶中，加入0.4g的司盘85，再滴加上述配制的水相，30s内转速调至2000r/min进行乳化，乳化10min后，开始取样观察，每隔5min取样1次，用显微镜观察乳化液的稳定情况和粒径大小，再通过Motic Images 2000测量软件检测和分析乳液液滴的大小和均匀情况，得到稳定的W/O乳化液。
步骤六，准确称取20.3g的对苯二甲酰氯溶于50mL有机相中得到溶液a，在60r/min搅拌下，将溶液a逐渐滴加到W/O乳化液中，滴加溶液a后，每隔2-3min取样观察1次，通过显微镜观察聚合物壁材生成情况及生成微胶囊的形貌和大小，直至连续3次观察结果相同时，反应结束；将反应后的微胶囊用无水乙醇进行多次洗涤，去除有机溶剂和未反应的对苯二甲酰氯，过滤，低温烘干，最后得到球形结构、平均粒径为2μm左右的水溶性促生剂微胶囊。
步骤七，称取浓度为4％的海藻酸钠水溶液300-400g、HS-12菌粉100-200g、400目贝壳粉200-300g和400目高岭土200-300g混合均匀并造粒，制备成直径为5mm的均匀颗粒后，浸泡于0.5mol/L的氯化钙溶液中交联18h、冻干去除水分后与水溶性促生剂微胶囊按质量比15:1充分混匀，即得到所需HS-12固定化微生态颗粒。
有益效果：
采用本发明技术方案产生的有益效果如下：
(1)通过贝壳粉与海藻酸钠交联同时筛选得到能在重金属富集的条件下仍能进行好氧反硝化的菌株HS-12，以海藻酸钠与钙离子反应生成海藻酸钙为颗粒提供骨架，其交联孔径大，有利于具有物理吸附作用的贝壳粉发挥物理吸附作用及菌株HS-12的缓释及交联微生态环境内发挥功效，可实现同步进行重金属吸附及氮污染降解，可用于氮污染及重金属污染清除及过程预防，并且占地空间小，设备投入成本低；
(2)本发明的HS-12固定化微生态颗粒体积小，使用时占地空间小，对水产养殖水、城市公园水池、生活废水进行处理时，可实现原位处理，净化水资源；
(3)本发明的HS-12固定化微生态颗粒以海藻酸钠与钙离子反应生成海藻酸钙为颗粒提供骨架，其交联孔径大，有利于具有物理吸附作用的贝壳粉发挥物理吸附作用，故可对现有污水处理装置改良填料，提高污水处理效果；
(4)本发明中采用的贝壳粉可以一定程度上实现废弃贝壳的高值化应用。
(5)本发明中通过添加水溶性促生剂微胶囊，使得在使用HS-12固定化微生态颗粒时，其中水溶性促生剂微胶囊遇水溶解后释放促生剂，不仅可以促进好氧反硝化的菌株HS-12生长繁殖，提高水中含氧量，使水体迅速由厌氧转变为好氧环境，而且还可激活水环境中具有降解污染物能力的土著微生物，利用生物竞争淘汰的方法，提高具有降解污染物能力的土著微生物地生态位，使其迅速繁殖，优化群落结构，进一步提高水环境中的含氧量，提高环境的自净能力，使污染物就地降解或转化成无害物质。
具体实施方式
为使本发明实施方式的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明的实施例，对本发明实施方式中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施方式是本发明一部分实施方式，而不是全部的实施方式。基于本发明中的实施方式，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式，都属于本发明保护的范围。因此，以下对在实施例中提供的本发明的实施方式的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施方式。基于本发明中的实施方式，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式，都属于本发明保护的范围。
本实施方式通过选取芽孢杆菌菌株HS-12进行活化与培养，获得HS-12菌液，HS-12菌液通过离心得到菌泥并添加冻干保护剂冻干后，得到HS-12菌粉，将HS-12菌粉配制成共混材料并造粒，将制备的颗粒浸泡于氯化钙溶液中交联、冻干去除水分得到所需HS-12固定化微生态颗粒。具体方案如下：
步骤一，取芽孢杆菌菌株HS-12接种至培养基中活化，在37℃、180rpm下活化16h，制得种子液，并按2～5％的接种量接种至培养基培养一段时间后，得到HS-12菌液；
步骤二，将HS-12菌液在离心转速为8000rpm下离心10min倾去菌液上层清液，得到菌泥并添加由包括占菌泥重量百分比5％的蔗糖和占菌泥重量百分比0.1％的海藻糖制成的冻干保护剂后在-30℃至-15℃温度下预冻8-16h，再在冻干机冻干48h，得到HS-12菌粉，HS-12菌粉经添加空载体，将菌粉活菌数调整至6.14×108cfu/g；
步骤三，称取浓度为4％的海藻酸钠水溶液300-400g、HS-12菌粉100-200g、400目贝壳粉200-300g和400目高岭土200-300g混合均匀并造粒，制备成直径为5mm的均匀颗粒后，浸泡于0.5mol/L的氯化钙溶液中交联18h、冻干去除水分即得到所需HS-12固定化微生态颗粒。
作为一种优选的实施方式，步骤一中种子液按3％接种量接种至LB培养基中，于37℃、180rpm下培养24h得到HS-12菌液。
作为一种更优选的实施方式，一种重金属吸附及亚硝酸盐降解用微生态颗粒的制备方法，包括如下步骤：
步骤一，取芽孢杆菌菌株HS-12接种至培养基中活化，在37℃、180rpm下活化16h，制得种子液，并按3％的接种量接种至LB培养基中，于37℃、180rpm下培养24h得到HS-12菌液；
步骤二，将HS-12菌液在离心转速为8000rpm下离心10min倾去菌液上层清液，得到菌泥并添加由包括占菌泥重量百分比5％的蔗糖和占菌泥重量百分比0.1％的海藻糖制成的冻干保护剂后在-30℃至-15℃温度下预冻8-16h，再在冻干机冻干48h，得到HS-12菌粉，HS-12菌粉经添加空载体，将菌粉活菌数调整至6.14×108cfu/g；
步骤三，按3-4g柠檬酸钠、1-2g磷酸二氢钾、3-5g牛肉膏、10-20g胰蛋白胨、2-11mg维生素C、1-7mg维生素B1、1-7mg维生素B6、1-7mg维生素B12、10mg芦荟萃取物、1L水比例配制成促生剂溶液。
步骤四，将环己烷和二氯甲烷按1:1体积比混合作为有机相；将6g乙二胺加入到10mL蒸馏水中，加入5mL的促生剂溶液，同时加入冰醋酸调节pH值为8-9作为水相。
步骤五，将配制好的有机相150mL加入到250mL三口瓶中，加入0.4g的司盘85，再滴加上述配制的水相，30s内转速调至2000r/min进行乳化，乳化10min后，开始取样观察，每隔5min取样1次，用显微镜观察乳化液的稳定情况和粒径大小，再通过Motic Images 2000测量软件检测和分析乳液液滴的大小和均匀情况，得到稳定的W/O乳化液。
步骤六，准确称取20.3g的对苯二甲酰氯溶于50mL有机相中得到溶液a，在60r/min搅拌下，将溶液a逐渐滴加到W/O乳化液中，滴加溶液a后，每隔2-3min取样观察1次，通过显微镜观察聚合物壁材生成情况及生成微胶囊的形貌和大小，直至连续3次观察结果相同时，反应结束；将反应后的微胶囊用无水乙醇进行多次洗涤，去除有机溶剂和未反应的对苯二甲酰氯，过滤，低温烘干，最后得到球形结构、平均粒径为2μm左右的水溶性促生剂微胶囊。
步骤七，称取浓度为4％的海藻酸钠水溶液300-400g、HS-12菌粉100-200g、400目贝壳粉200-300g和400目高岭土200-300g混合均匀并造粒，制备成直径为5mm的均匀颗粒后，浸泡于0.5mol/L的氯化钙溶液中交联18h、冻干去除水分后与水溶性促生剂微胶囊按质量比15:1充分混匀，即得到所需HS-12固定化微生态颗粒。
下面通过几组实施例和对比例对采用本实施方式技术方案得到的HS-12固定化微生态颗粒的有益效果进行进一步的说明。
实施例一：
本实施例为功能菌的筛选方法，具体步骤如下：
称取400目贝壳粉200-300g与海藻酸钠12-16g进行交联，在重金属富集、NO2-N浓度为2.0000mg/L的条件下并进行无菌处理后，接种不同菌种，筛选仍能进行好氧反硝化的菌株，在本实施例中将进行筛选的菌种系统命名为HS-i(其中i指代任意自然数)，分别在24h、48h、72h、96h、120h、144h、168h时，检测各菌种的生物量和降解率，其中生物量为OD600检测，具体数据如表1和表2所示。
实施例二：
本实施例为不同重金属富集情况下HS-12对NO2-N的降解效果，具体步骤如下：
步骤一，取芽孢杆菌菌株HS-12接种至培养基中活化，在37℃、180rpm下活化16h，制得种子液，并按3％接种量接种至LB培养基中，于37℃、180rpm下培养24h得到HS-12菌液。
步骤二，配制1L的富集As离子、NO2-N为2.0000mg/L的混合液并命名为As组，同理获得Hg组、Cr组、Cd组、Pb组，对照组为无金属离子组。
步骤三，取10％HS-12菌液分别接种至As组、Hg组、Cr组、Cd组、Pb组及无金属离子组中，在2h、4h、6h、8h、24h时检测各组NO2-N的降解效果，具体数据如表3所示。
实施例三
本实施例为制备HS-12固定化微生态颗粒，具体步骤如下：
步骤一与实施例二中的步骤一相同，故在此不再累述。
步骤二，将HS-12菌液在离心转速为8000rpm下离心10min倾去菌液上层清液，得到菌泥并添加由包括占菌泥重量百分比5％的蔗糖和占菌泥重量百分比0.1％的海藻糖制成的冻干保护剂后在-30℃至-15℃温度下预冻8-16h，再在冻干机冻干48h，得到HS-12菌粉，HS-12菌粉经添加空载体，将菌粉活菌数调整至6.14×108cfu/g；
步骤三，按3-4g柠檬酸钠、1-2g磷酸二氢钾、3-5g牛肉膏、10-20g胰蛋白胨、2-11mg维生素C、1-7mg维生素B1、1-7mg维生素B6、1-7mg维生素B12、10mg芦荟萃取物、1L水比例配制成促生剂溶液。
步骤四，将环己烷和二氯甲烷按1:1体积比混合作为有机相；将6g乙二胺加入到10mL蒸馏水中，加入5mL的促生剂溶液，同时加入冰醋酸调节pH值为8-9作为水相。
步骤五，将配制好的有机相150mL加入到250mL三口瓶中，加入0.4g的司盘85，再滴加上述配制的水相，30s内转速调至2000r/min进行乳化，乳化10min后，开始取样观察，每隔5min取样1次，用显微镜观察乳化液的稳定情况和粒径大小，再通过Motic Images 2000测量软件检测和分析乳液液滴的大小和均匀情况，得到稳定的W/O乳化液。
步骤六，准确称取20.3g的对苯二甲酰氯溶于50mL有机相中得到溶液a，在60r/min搅拌下，将溶液a逐渐滴加到W/O乳化液中，滴加溶液a后，每隔2-3min取样观察1次，通过显微镜观察聚合物壁材生成情况及生成微胶囊的形貌和大小，直至连续3次观察结果相同时，反应结束；将反应后的微胶囊用无水乙醇进行多次洗涤，去除有机溶剂和未反应的对苯二甲酰氯，过滤，低温烘干，最后得到球形结构、平均粒径为2μm左右的水溶性促生剂微胶囊。
步骤七，称取浓度为4％的海藻酸钠水溶液300-400g、HS-12菌粉100-200g、400目贝壳粉200-300g和400目高岭土200-300g混合均匀并造粒，制备成直径为5mm的均匀颗粒后，浸泡于0.5mol/L的氯化钙溶液中交联18h、冻干去除水分后与水溶性促生剂微胶囊按质量比15:1充分混匀，即得到所需HS-12固定化微生态颗粒。
实施例四：
本实施例为HS-12固定化微生态颗粒对重金属离子的吸附效果，具体步骤如下：
各称取40g的HS-12固定化微生态颗粒与贝壳粉，分别投入浓度相同的重金属离子溶液中，分别在30min、60min、100min、180min、330min、400min、520min、600min、660min、720min、1400min进行吸附效果检测，具体数据如表4所示。
实施例五：
本实施例为鲟鱼池挂袋试验，具体步骤如下：
将1kg的HS-12固定化微生态颗粒装入挂袋中，取鲟鱼池的池水进行NO2-N与NH3-N检测并记录初始值，将挂袋放入50m2鲟鱼池中，每隔一天对鲟鱼池的池水进行NO2-N与NH3-N检测，具体数据如表5所示。
表1各菌种不同时间的降解率
表2各菌种不同时间的生物量
由表2可知，HS-8在48h、HS-12在24h、HS-15在72h时其OD600分别为0.81、0.90、0.90，而其它测试菌种的OD600则明显较低，说明HS-8、HS-12、HS-15三种菌种均能在重金属富集的条件下很好地生存繁殖，但从表1中可知，HS-8在测试时间内的降解率除24h的37％外，余者皆在56％-60％内，HS-15在测试时间内的降解率仅有在48h时为78％，余者皆在25％-40％，而HS-12的降解率在测试时间中均不低于97％，而其它测试菌种的降解率皆低于60％，由此说明，HS-12在重金属富集的条件下，进行好氧反硝化的效率显著优于其它测试菌种，而在表2中HS-12在24h后OD600大幅降低是由于NO2-N的急剧减少使得HS-12缺乏维持生存繁殖必需的氮源，故选取HS-12作为功能菌。
表3重金属富集情况下HS-12对NO2-N的降解效果
由表3可知，重金属富集情况下，在4h内各组中的HS-12进行复壮过程，所以各组的NO2-N降解效果不明显，而在4-6h时各组中的HS-12开始快速繁殖，需要大量的氮源，故各组中的NO2-N浓度急剧减少。
表4重金属离子吸附效果的对比表
由表4可知，在相同条件下，HS-12固定化微生态颗粒对重金属离子的吸附效果明显优于贝壳粉，而且随着时间的推移HS-12固定化微生态颗粒与贝壳粉间吸附效果的差异越明显；说明以海藻酸钠与钙离子反应生成海藻酸钙为颗粒提供骨架，其交联孔径大，更有利于具有物理吸附作用的贝壳粉发挥物理吸附作用。
表5鲟鱼池挂袋试验结果
由表5可知，在投放挂袋后，鲟鱼池池水中的NO2-N在一天内全部被清除，并持续维持九天，在第十一天时鲟鱼池池水的NO2-N明显上升，其浓度为0.453mg/L但仍低于初始值，在第十二天时鲟鱼池池水的NO2-N下降至0.040mg/L并维持池水中NO2-N低浓度，而鲟鱼池池水的NH3-N的浓度在十二天内维持在0.86mg/L至1.88mg/L范围内，显而易见，其浓度皆低于初始值，但在十二天后NH3-N的浓度大幅升高，并明显高于初始浓度，故使用本发明的HS-12固定化微生态颗粒对鲟鱼池池水进行处理，只需在池中投放挂袋并每隔12天进行一次挂袋更换即可确保对池水中的NO2-N和NH3-N进行持续净化，高效便捷地保证了鲟鱼池池水的水质，且使用时操作简单，占据空间小，投入成本低，可实现原位处理。
以上所述仅为本发明的优选实施方式而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
序列表
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1459
<212> DNA
<213> 芽孢杆菌(2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum)
<400> 1
cccccttggc ggcgtgctaa tacatgcaag tcgagcggac agatgggagc ttgctccctg 60
atgttagcgg cggacgggtg agtaacacgt gggtaacctg cctgtaagac tgggataact 120
ccgggaaacc ggggctaata ccggatggtt gtttgaaccg catggttcaa acataaaagg 180
tggcttcggc taccacttac agatggaccc gcggcgcatt agctagttgg tgaggtaacg 240
gctcaccaag gcaacgatgc gtagccgacc tgagagggtg atcggccaca ctgggactga 300
gacacggccc agactcctac gggaggcagc agtagggaat cttccgcaat ggacgaaagt 360
ctgacggagc aacgccgcgt gagtgatgaa ggttttcgga tcgtaaagct ctgttgttag 420
ggaagaacaa gtaccgttcg aatagggcgg taccttgacg gtacctaacc agaaagccac 480
ggctaactac gtgccagcag ccgcggtaat acgtaggtgg caagcgttgt ccggaattat 540
tgggcgtaaa gggctcgcag gcggtttctt aagtctgatg tgaaagcccc cggctcaacc 600
ggggagggtc attggaaact ggggaacttg agtgcagaag aggagagtgg aattccacgt 660
gtagcggtga aatgcgtaga gatgtggagg aacaccagtg gcgaaggcga ctctctggtc 720
tgtaactgac gctgaggagc gaaagcgtgg ggagcgaaca ggattagata ccctggtagt 780
ccacgccgta aacgatgagt gctaagtgtt agggggtttc cgccccttag tgctgcagct 840
aacgcattaa gcactccgcc tggggagtac ggtcgcaaga ctgaaactca aaggaattga 900
cgggggcccg cacaagcggt ggagcatgtg gtttaattcg aagcaacgcg aagaacctta 960
ccaggtcttg acatcctctg acaatcctag agataggacg tccccttcgg gggcagagtg 1020
acaggtggtg catggttgtc gtcagctcgt gtcgtgagat gttgggttaa gtcccgcaac 1080
gagcgcaacc cttgatctta gttgccagca ttcagttggg cactctaagg tgactgccgg 1140
tgacaaaccg gaggaaggtg gggatgacgt caaatcatca tgccccttat gacctgggct 1200
acacacgtgc tacaatggac agaacaaagg gcagcgaaac cgcgaggtta agccaatccc 1260
acaaatctgt tctcagttcg gatcgcagtc tgcaactcga ctgcgtgaag ctggaatcgc 1320
tagtaatcgc ggatcagcat gccgcggtga atacgttccc gggccttgta cacaccgccc 1380
gtcacaccac gagagtttgt aacacccgaa gtcggtgagg taacctttta ggagccagcc 1440
gccgaaggtg acaggaagg 1459
Claims (10)
1.一种重金属吸附及亚硝酸盐降解用微生态颗粒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤一，制备菌液，取芽孢杆菌菌株HS-12接种至培养基中活化，得到种子液，并按2～5％的接种量接种至培养基培养一段时间后，得到HS-12菌液；
步骤二，制备菌粉，通过离心倾去菌液上层清液，得到菌泥并添加冻干保护剂冻干后，得到HS-12菌粉；
步骤三，制备微生态颗粒，将海藻酸钠水溶液、HS-12菌粉、贝壳粉和高岭土混合均匀并造粒，将制备的颗粒浸泡于氯化钙溶液中交联、冻干去除水分即得到所需HS-12固定化微生态颗粒。
2.根据权利要求1所述的一种重金属吸附及亚硝酸盐降解用微生态颗粒的制备方法，其特征在于，步骤一中将芽孢杆菌菌株HS-12接种至培养基中，在37℃、180rpm下活化16h，制得种子液。
3.根据权利要求1所述的一种重金属吸附及亚硝酸盐降解用微生态颗粒的制备方法，其特征在于，步骤一中种子液按3％接种量接种至LB培养基中，于37℃、180rpm下培养24h得到HS-12菌液。
4.根据权利要求1所述的一种重金属吸附及亚硝酸盐降解用微生态颗粒的制备方法，其特征在于，步骤二中离心转速为8000rpm，时间为10min。
5.根据权利要求1所述的一种重金属吸附及亚硝酸盐降解用微生态颗粒的制备方法，其特征在于，步骤二中冻干保护剂包括占菌泥重量百分比5％的蔗糖和占菌泥重量百分比0.1％的海藻糖。
6.根据权利要求1所述的一种重金属吸附及亚硝酸盐降解用微生态颗粒的制备方法，其特征在于，步骤二中冻干采用在-30℃至-15℃温度下预冻8-16h，再在冻干机冻干48h，得到所述菌粉。
7.根据权利要求1所述的一种重金属吸附及亚硝酸盐降解用微生态颗粒的制备方法，其特征在于，步骤二中在冻干后得到的菌粉中添加空载体，将菌粉活菌数调整至6.14×108cfu/g。
8.根据权利要求1所述的一种重金属吸附及亚硝酸盐降解用微生态颗粒的制备方法，其特征在于，步骤三中各组分的重量配比为：
9.根据权利要求8所述的一种重金属吸附及亚硝酸盐降解用微生态颗粒的制备方法，其特征在于，步骤三中所述海藻酸钠水溶液中海藻酸钠的浓度为4％。
10.根据权利要求9所述的一种重金属吸附及亚硝酸盐降解用微生态颗粒的制备方法，其特征在于，步骤三中所述贝壳粉和高岭土的细度为400目。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011534186.0A CN112811609A (zh) | 2020-12-23 | 2020-12-23 | 重金属吸附及亚硝酸盐降解用微生态颗粒的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011534186.0A CN112811609A (zh) | 2020-12-23 | 2020-12-23 | 重金属吸附及亚硝酸盐降解用微生态颗粒的制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN112811609A true CN112811609A (zh) | 2021-05-18 |
Family
ID=75853613
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202011534186.0A Pending CN112811609A (zh) | 2020-12-23 | 2020-12-23 | 重金属吸附及亚硝酸盐降解用微生态颗粒的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN112811609A (zh) |
Citations (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1990853A (zh) * | 2005-12-28 | 2007-07-04 | 上海创博生态工程有限公司 | 微生物亚硝酸盐降解剂及制作方法 |
| WO2012160526A2 (en) * | 2011-05-23 | 2012-11-29 | Ofir Menashe | Formulations of microorganism comprising particles and uses of same |
| CN102899269A (zh) * | 2012-09-18 | 2013-01-30 | 宁波大学 | 海水环境中氯氰菊酯降解菌及其分离纯化和应用 |
| CN103693753A (zh) * | 2013-12-20 | 2014-04-02 | 大连赛姆生物工程技术有限公司 | 防海参重金属、化学残留和抗生素残留的海参养殖水质修复剂及其制法和用途 |
| CN104152377A (zh) * | 2014-07-31 | 2014-11-19 | 上海交通大学 | 耐受重金属的好氧反硝化菌株及其应用 |
| CN104232541A (zh) * | 2014-09-17 | 2014-12-24 | 鲁东大学 | 一种促进海马健康养殖的芽孢杆菌及其培养方法 |
| CN104498382A (zh) * | 2014-09-30 | 2015-04-08 | 国家海洋局第三海洋研究所 | 一种应用于水产养殖环境改良的微生物制剂及其制备方法 |
| CN106754829A (zh) * | 2016-12-06 | 2017-05-31 | 鲁东大学 | 一种利用芽孢杆菌hs17发酵生产壳聚糖酶的方法及其应用 |
| CN107583618A (zh) * | 2017-09-27 | 2018-01-16 | 浙江海洋大学 | 一种海藻酸钠/贻贝壳粉微球及其用途 |
| CN108913628A (zh) * | 2018-07-27 | 2018-11-30 | 江苏恒顺醋业股份有限公司 | 一株索诺拉沙漠芽孢杆菌及其应用 |
| CN109305701A (zh) * | 2017-07-26 | 2019-02-05 | 江苏康渔生物科技有限公司 | 氨氮化合物和重金属等指标超标的污水污泥的处理方法 |
| CN110921850A (zh) * | 2020-02-10 | 2020-03-27 | 广州赛太特生物医学科技有限公司 | 一种利用微生物处理污水的方法 |
-
2020
- 2020-12-23 CN CN202011534186.0A patent/CN112811609A/zh active Pending
Patent Citations (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1990853A (zh) * | 2005-12-28 | 2007-07-04 | 上海创博生态工程有限公司 | 微生物亚硝酸盐降解剂及制作方法 |
| WO2012160526A2 (en) * | 2011-05-23 | 2012-11-29 | Ofir Menashe | Formulations of microorganism comprising particles and uses of same |
| CN102899269A (zh) * | 2012-09-18 | 2013-01-30 | 宁波大学 | 海水环境中氯氰菊酯降解菌及其分离纯化和应用 |
| CN103693753A (zh) * | 2013-12-20 | 2014-04-02 | 大连赛姆生物工程技术有限公司 | 防海参重金属、化学残留和抗生素残留的海参养殖水质修复剂及其制法和用途 |
| CN104152377A (zh) * | 2014-07-31 | 2014-11-19 | 上海交通大学 | 耐受重金属的好氧反硝化菌株及其应用 |
| CN104232541A (zh) * | 2014-09-17 | 2014-12-24 | 鲁东大学 | 一种促进海马健康养殖的芽孢杆菌及其培养方法 |
| CN104498382A (zh) * | 2014-09-30 | 2015-04-08 | 国家海洋局第三海洋研究所 | 一种应用于水产养殖环境改良的微生物制剂及其制备方法 |
| CN106754829A (zh) * | 2016-12-06 | 2017-05-31 | 鲁东大学 | 一种利用芽孢杆菌hs17发酵生产壳聚糖酶的方法及其应用 |
| CN109305701A (zh) * | 2017-07-26 | 2019-02-05 | 江苏康渔生物科技有限公司 | 氨氮化合物和重金属等指标超标的污水污泥的处理方法 |
| CN107583618A (zh) * | 2017-09-27 | 2018-01-16 | 浙江海洋大学 | 一种海藻酸钠/贻贝壳粉微球及其用途 |
| CN108913628A (zh) * | 2018-07-27 | 2018-11-30 | 江苏恒顺醋业股份有限公司 | 一株索诺拉沙漠芽孢杆菌及其应用 |
| CN110921850A (zh) * | 2020-02-10 | 2020-03-27 | 广州赛太特生物医学科技有限公司 | 一种利用微生物处理污水的方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Xiong et al. | Biological denitrification using polycaprolactone-peanut shell as slow-release carbon source treating drainage of municipal WWTP | |
| Shan et al. | Ammonia removal from prawn aquaculture water using immobilized nitrifying bacteria | |
| CN104475444A (zh) | 生物炭固定化复合污染降解菌颗粒制备及用途、使用方法 | |
| CN111254137A (zh) | 一种固定化炭藻材料及其制备方法、用途 | |
| CN106635909B (zh) | 一种原油降解混合菌、菌剂及其应用 | |
| CN109439571A (zh) | 一种氨氮去除菌剂 | |
| CN111333200B (zh) | 一种包埋固定化微生物颗粒、制备方法及污水处理方法 | |
| CN109455828A (zh) | 一种固定化微生物在畜禽养殖废水处理中的应用方法 | |
| CN111944799B (zh) | 一种包埋脱氮硫杆菌的固定化颗粒的制备方法和应用 | |
| CN108328737B (zh) | 一种基于人工湿地强化处理养殖废水的微生态基质、其制备方法及其应用 | |
| CN106676038A (zh) | 一种脱氨氮的复合微生物菌剂及其应用 | |
| Zhang et al. | A novel magnetic microparticles as biocarriers for promoting enrichment of nitrifying bacteria | |
| CN108424865A (zh) | 一株可降解石油并耐受石油的固氮菌pj 3-5及其应用 | |
| CA2957653C (en) | Biocomposite material for purification of sewage waters from nitrite, nitrate and phosphate ions | |
| CN108753647B (zh) | 一种除砷固载化小球及其用途 | |
| Ren et al. | Hydrogel microbial reactor based on microbially induced calcium precipitation for the removal of calcium, cadmium and nitrate from groundwater | |
| CN106701632B (zh) | 一株耐冷草假单胞菌及其在污水处理中的应用 | |
| Guolan et al. | Study on the physiology and degradation of dye with immobilized algae | |
| CN108570325B (zh) | 用于高盐土壤修复的微生物制剂及其制备方法 | |
| CN112811609A (zh) | 重金属吸附及亚硝酸盐降解用微生态颗粒的制备方法 | |
| CN114250187B (zh) | 一种去除水体中tbbpa的方法、微生物菌株及微生物菌剂 | |
| CN115386520A (zh) | 一株嗜吡啶红球菌rl-gz01菌株及其应用 | |
| CN112126641B (zh) | 一种贝壳-二氧化硅微生物固定载体及其制备方法 | |
| CN110241110B (zh) | 利用磁性纳米颗粒固定化邻苯二甲酸二丁酯降解菌的方法及应用 | |
| CN113526676A (zh) | 一种可强化脱氮的人工湿地系统 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210518 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |