CN112807263A

CN112807263A - 一种抗衰老组合物及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN112807263A
Application number: CN202110226001.8A
Authority: CN
Inventors: 曹茜; 周秋娜; 金荣熙; 李健生; 姚清; 尹锺赫; 金延埈
Original assignee: Cosmax China Cosmetics Co Ltd
Current assignee: Cosmax China Cosmetics Co Ltd; Cosmax China Inc
Priority date: 2021-03-01
Filing date: 2021-03-01
Publication date: 2021-05-18

Abstract

本发明属于日用护肤品技术领域，涉及一种抗衰老组合物及其制备方法和应用，该抗衰老组合物包含金银花提取物、杜仲叶提取物、萱草花提取物。本发明根据咖啡酰在奎尼酸上的结合部位和数目不同，生成的绿原酸产物种类也不同特点，基于有效成分“绿原酸”，创新性地把富含不同种类绿原酸的金银花提取物、杜仲叶提取物、萱草花提取物作为活性成分并复配使用，各组分之间协同增效，能够有效且持续地清除DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基，以及抑制p38级联磷酸化和上调核因子κB(nuclear factor kappa‑B,NF‑κB)信号通路抑制白介素‑8(interleukin‑8,IL‑8)的产生，即抑制低密度脂蛋白的氧化，启动抗老修护，改善皮肤的整体质感和外观。

Description

一种抗衰老组合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于日用护肤品技术领域，涉及一种抗衰老组合物及其制备方法和应用。

背景技术

随着人类生活环境和生活方式的不断变化，以及整个人类社会加速进入人口老化，健康长寿的话题越来越受到人们的关注。衰老是生命过程中不可避免的自然规律，而皮肤作为人体的第一道屏障，皮肤时时刻刻都在衰老、老化，其弹性慢慢降低，并变得越来越薄、越来越脆弱和松弛，给人的直观印象就是长皱纹。皮肤老化一般有自然老化和光老化。前者主要指随着年龄增长，由机体内存在的如遗传、重力、内分泌及免疫功能等不可抗因素引起的老化；后者主要是由于紫外线的作用，加快了自然衰老的进程，而气候变化以及环境污染等一系列环境暴露对皮肤的光老化也有着直接的影响。抗衰老的途径，主要包括：保护皮肤免受外界环境刺激；对皮肤细胞进行修复和补充营养；清除细胞内的多余自由基。皮肤抗衰老是防止皮肤因时间推移而发生逐渐性的功能和器质性退性改变，表现为防止出现皱纹、干燥、起屑、松弛和色斑。抗衰老化妆品就是实现抗衰老功效的化妆品，是重要的功效型化妆品之一，而一种能够同时抑制自然老化和光老化的护肤产品，则是市场的热切需求。

现有化妆品中的化学原料除了含有一定的毒性，它还严重地污染环境，破坏土地和水源。因此在配方的研制中，天然功能性植物在化妆品上的推广应用，既有良好社会效果，同时也降低产品使用者的过敏几率，是广大消费者的主要诉求，具有较好的社会前景。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的上述问题，提供一种抗衰老组合物及其制备方法和应用。

为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明是通过以下技术方案实现：

本发明的第一方面，提供一种抗衰老组合物，该抗衰老组合物包含金银花提取物、杜仲叶提取物、萱草花提取物。

进一步地，如上所述的抗衰老组合物，所述金银花提取物、杜仲叶提取物、萱草花提取物的质量份配比为1-3:1-3:1-3。

进一步地，如上所述的抗衰老组合物，所述金银花提取物、杜仲叶提取物、萱草花提取物的质量份配比为2-3:2-3:1。

本发明的第二方面，提供抗衰老组合物在制备改善皮肤微循环的化妆品中的应用。

进一步地，如上所述的应用，所述化妆品为水剂、乳剂、喷雾、膏霜、凝胶剂或面膜。

本发明的第三方面，提供一种化妆品，包括如上所述的抗衰老组合物以及用于制备化妆品的赋形剂。所述赋形剂可以是液体赋形剂或固体赋形剂。如片剂中的黏合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂；中药丸剂中的酒、醋、药汁等；半固体制剂软膏剂、霜剂中的基质部分；液体制剂如化妆品中的防腐剂、抗氧剂、矫味剂、芳香剂、助溶剂、乳化剂、增溶剂、渗透压调节剂、着色剂等均可称为赋形剂，也可以称为辅料。

进一步地，如上所述的化妆品，所述抗衰老组合物占化妆品的质量百分比为0.5-5％。

本发明的第四方面，提供一种抗衰老组合物的制备方法，包括如下步骤：

(1)将植物原料药分别粉碎后，按配比称取，混匀；

(2)加入去离子水提取，植物原料药与去离子水的质量比为1:20-1:50，浸润1-3小时；水浴，温度为40-50℃时加入纤维素酶、果胶酶、酸性蛋白酶，纤维素酶、果胶酶、酸性蛋白酶的质量份配比为1-3：1-3：1-3，所加入的酶总质量占植物原料药总质量的10％-20％，搅拌10-30分钟，升温至70-80℃时水浴回流提取1-3小时；

(3)将步骤(2)得到的提取液冷却至20-30℃，用100-200目纱布过滤，得初滤液；

(4)向步骤(3)得到的初滤液中加入澄清剂，静置后离心30-60分钟，离心转速为5000-10000rpm；用微滤膜过滤后得到二次滤液；

(5)将步骤(4)得到的二次滤液减压浓缩，加入1-3倍量无水乙醇溶液回流提取3-5小时；过滤，减压浓缩回收乙醇，得浓缩液；重复多次，合并浓缩液；

(6)将步骤(5)得到的溶液用超滤膜进行过滤，收集滤液，得到富含绿原酸的抗衰老植物提取物组合物。

进一步地，如上所述的制备方法，所述微滤膜的孔径为0.1-1.0μm，所述超滤膜的孔径为0.01-0.05μm。

进一步地，如上所述的制备方法，所述二次滤液减压浓缩至原重量的1/2-1/5。

本发明中，金银花是忍冬科植物忍冬未开放的花蕾或初开的花，具有清热解毒、凉散风热等功效。现代药理学表明，金银花的主要化学成分有挥发油类、黄酮类、酚酸类、三萜皂苷类等，其中酚酸类成分“异绿原酸”是其主要有效成分，具有较好的广谱抗菌、抗炎等作用。

本发明中，杜仲已有长久的药用历史，传统用杜仲树皮入药。目前对于杜仲的研究大多集中在杜仲皮和杜仲胶，而对资源更丰富的杜仲叶研究较少。杜仲叶活性成分和药理作用与杜仲皮相似，甚至一些成分含量远远高于杜仲皮。杜仲叶的活性成分包括黄酮类、环烯醚萜类、苯丙素类、木脂素类、多糖类以及杜仲橡胶等。主要药理作用为降血压、降血脂、降血糖、抗炎抗病毒、抗疲劳、强筋健骨、抗衰老等。

本发明中，萱草，又名忘忧草，是百合科萱草属多年生植物，在我国各地多有种植。明代李时珍在《本草纲目》中称其有“安神醒脑，增智宽胸，美容养血，解热消毒，除烦通乳之功效”。现代研究萱草花具有补脑健智，化瘀止血，通络止痛，消炎抗菌等功效，它具有增强免疫力，活血化瘀，保肝抗炎，抗菌抗病毒，抑制肿瘤，清除氧自由基和抑菌作用等多种作用。

本发明中，绿原酸是由咖啡酸与奎尼酸生成的缩酚酸，是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物。作为是一种广泛存在植物中的多酚类次生代谢产物,具有很强抗氧化和抗炎特性。儿茶酚结构的存在为自由基提供了结合位点。

本发明的有益效果是：

本发明根据咖啡酰在奎尼酸上的结合部位和数目不同，生成的绿原酸产物种类也不同特点，基于有效成分“绿原酸”，创新性地把富含不同种类绿原酸的金银花提取物、杜仲叶提取物、萱草花提取物作为活性成分并复配使用，各组分之间协同增效，能够有效且持续地清除DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基，以及抑制p38级联磷酸化和上调核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路抑制白介素-8(interleukin-8,IL-8)的产生，即抑制低密度脂蛋白的氧化，启动抗老修护，改善皮肤的整体质感和外观。

当然，实施本发明的任一产品并不一定需要同时达到以上的所有优点。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1能够有效抗衰老的植物提取组合物的制备

(1)将植物原料药分别粉碎后，按配比称取，混匀；

其中，澄清剂为天然澄清剂、壳聚糖、果汁澄清剂、明胶、蛋清中的至少一种。

其中，微滤膜的孔径为0.1-1.0μm，超滤膜的孔径为0.01-0.05μm。

其中，二次滤液减压浓缩至原重量的1/2-1/5。

实施例2不同比例组合物复配抗氧化功效评价

将三种植物提取物按照下表比例进行复配，得到组合物1-15，对比例1-3。

(1)DPPH自由基清除测试

精密移取2.0mL50％乙醇的DPPH溶液(0.2mmol/L)，加入2.0mL受试液，混合后充分摇匀，30min后，于517nm处测定其吸光度A，平行测定3次，取平均值，以维生素C为阳性对照。按以下公式计算各受试液对DPPH自由基的清除率：

DPPH清除率(％)＝[1-(A_i-A_j)/A₀]×100％

式中：A_i为加入受试物后反应的吸光度；

A_j为受试液自身吸光度；

A₀为未加受试液的空白值。

(2)OH自由基清除测试

采用Fenton反应产生羟自由基。依次加入1.0mL的FeSO₄溶液(9.0mmol/L)、1.0mL水杨酸乙醇溶液(9.0mmol/L)和1.0mL受试液，混合后充分摇匀，再加入1.0mLH₂O₂溶液(8.8mmol/L)，于37℃下反应30min，于510nm处测定吸光度A，平行测定3次，取平均值，以维生素C为阳性对照。按以下公式计算各受试液对OH自由基清除率：

OH清除率(％)＝(A₀-A_X-A_X0)/A₀×100％

式中：A₀为空白对照液的吸光度；

A_X为加入受试液后反应的吸光度；

A_X0为不加H₂O₂的受试物的吸光度。

(3)O_2-自由基清除测试

取4.0mL Tris-HCl缓冲溶液(pH8.2，50.0mmol/L)，加入1.0mL受试液，于25℃水浴保温10min。加入0.1mL邻苯三酚溶液(25.0mmol/L)，混合后充分摇匀，保温5min，滴加几滴盐酸溶液(10.0mmol/L)结束反应，于325nm处测定吸光度A，平行测定3次。以维生素C为阳性对照。按以下公式计算各受试液对O_2-自由基清除率：

O_2-清除率(％)＝[A₀-(A₁-A₂)]/A₀×100％

式中：A₀为空白对照液的吸光度；

A₁为加入受试液后反应的吸光度；

A₂为不加邻苯三酚的受试液的吸光度。

维生素C和各组合物浓度相同，均为0.1mg/ml,每次数据做五个平行实验，取平均值，三组测试结果如下表：

上述试验结果表明，测试例1-15组合物相对维C组，对照组都具有良好的清除DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基，但相同条件下组合物比例不同，对各种自由基的清除强弱也会有影响，其中组合物5、11、13的自由基清除率最大。组合物11效果最好。

实施例3

在具体实施方式中，本发明提供了一种能够有效抗衰老的面膜肌底液的配方工艺，具体配方如下：

添加本发明提取物，组合物5、11、13加入下表面膜肌底液配方中，添加量为1％，制得面膜肌底液样品1-3。

组合物5	组合物11	组合物13
			样品1	样品2	样品3

(1)MTT细胞毒性测试

在96well multi plate(corning)中按照1×10⁴cells/well的密度接种含有10％牛血清的DMEM培养基和角质形成细胞(HaCaT)各100μL，培养24小时后换成无血清培养基。在无血清培养基中分别加入上述实施例中组合物5、11、13进行处理后培养24小时。之后去除培养基，用20μL的MTT溶液进行处理，在37℃下使其反应2小时。在去除MTT溶液的细胞中加入200μL异丙醇，轻轻地震荡30min，完全溶解结晶甲臜，在570nm处测定吸光度，根据如下公式计算细胞存活率。

细胞存活率(％)＝样品吸光度值/对照组吸光度平均值×100％

对照组不加入样品进行试验。细胞毒性相关结果见下表：

(2)安全性测试(人体皮肤斑贴试验)

选取实施例2中组合物5、11、13按照上述配方制成面膜肌底液，取适量各组合物比例制备的面膜肌底液样品1-3。

组合物5	组合物11	组合物13
			样品1	样品2	样品3

选取15名年龄为20-50岁之间的无皮肤病过敏史的健康受试者，斑贴方法：选用合格的斑试器，以封闭式斑贴试验方式，取约15μL样品1-3的样品滴于斑试器内，外用专用胶带贴覆于受试者背部，每个受试者贴20个斑试器，分别贴试样品1-3的肌底液样品，24小时后除去受试物，去除后分别于0.5、6、12、24、48小时观察皮肤反应，按照《护肤品卫生规范》中皮肤反应等级标准记录其结果。

试验结果：人体皮肤斑贴试验结果显示所有受试者通过斑贴试验，在0.5、6、12、24、48小时观察皮肤反应，其中0例出现皮肤红斑、丘疹、水疱等不良反应，说明本发明的产品安全，无刺激。

(3)人群测试

受试样品：样品1-3的有效抗衰老的面膜肌底液，以不含植物提取组合物的实施例3配方为对照组。

受试人群：60人，无皮肤过敏史，符合受试者志愿入选标准，年龄18-35岁之间，分成4组，每组15人。面部有明显的暗黄，粗糙，皱纹等不良状态。

测试方法：取适量受试样品于涂在已清洁的患处，每天2次，早晚各1次，持续4周。受试者在使用期间保持良好作息时间和饮食习惯，4周后统计受试者的反馈情况。其中面部纹理得到改善、皮肤变得细腻有光泽为显著；面部纹理略微改善、皮肤略微细腻为有效；其他为无效。具体结果见下表：

绿原酸是一种苯丙酸类物质，是由咖啡酸和奎宁酸形成的酯，它存在于茵陈、金银花等常见中草药中，具有较强的广谱抗菌作用，其抗氧化能力要强于咖啡酸、对羟基苯甲酸、阿魏酸、丁香酸、丁基羟基茴香醚(BHA)和生育酚，能够清除自由基、抗衰老。

目前化妆品领域中，对于绿原酸的应用，大多是运用金银花提取物，种类较为单一，且对于富含绿原酸、资源较为丰富的杜仲叶应用较少。本申请的发明人经过广泛深入的研究，选取富含不同种类“绿原酸”的植物作为天然来源，通过选取金银花提取物、杜仲叶提取物，萱草花提取物的两种或多种进行科学配比，形成可以有效抗衰老的活性组合物。该组合物之间通过不同机理而起到协同增效作用，相对于单个活性组分，组合物具有显著的清除自由基的优势；各组分协同增效，能够有效且持续地清除DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基，还可抑制低密度脂蛋白的氧化，启动抗老修护，改善皮肤的整体质感和外观。

以上公开的本发明优选实施例只是用于帮助阐述本发明。优选实施例并没有详尽叙述所有的细节，也不限制该发明仅为具体实施方式。显然，根据本说明书的内容，可作很多的修改和变化。本说明书选取并具体描述这些实施例，是为了更好地解释本发明的原理和实际应用，从而使所属技术领域技术人员能很好地理解和利用本发明。本发明仅受权利要求书及其全部范围和等效物的限制。

Claims

1.一种抗衰老组合物，其特征在于，该抗衰老组合物包含金银花提取物、杜仲叶提取物、萱草花提取物。

2.根据权利要求1所述的抗衰老组合物，其特征在于，所述金银花提取物、杜仲叶提取物、萱草花提取物的质量份配比为1-3:1-3:1-3。

3.根据权利要求2所述的抗衰老组合物，其特征在于，所述金银花提取物、杜仲叶提取物、萱草花提取物的质量份配比为2-3:2-3:1。

4.权利要求1-3任一项所述的抗衰老组合物在制备改善皮肤微循环的化妆品中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述化妆品为水剂、乳剂、喷雾、膏霜、凝胶剂或面膜。

6.一种化妆品，其特征在于：包括权利要求1-3任一项所述的抗衰老组合物以及用于制备化妆品的赋形剂。

7.根据权利要求6所述的化妆品，其特征在于：所述抗衰老组合物占化妆品的质量百分比为0.5-5％。

8.一种制备根据权利要求1-3任一项所述抗衰老组合物的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将植物原料药分别粉碎后，按配比称取，混匀；

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于：所述微滤膜的孔径为0.1-1.0μm，所述超滤膜的孔径为0.01-0.05μm。

10.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于：所述二次滤液减压浓缩至原重量的1/2-1/5。