CN112704012B - 一种长山药复壮种苗制备方法 - Google Patents

一种长山药复壮种苗制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN112704012B
CN112704012B CN202110079264.0A CN202110079264A CN112704012B CN 112704012 B CN112704012 B CN 112704012B CN 202110079264 A CN202110079264 A CN 202110079264A CN 112704012 B CN112704012 B CN 112704012B
Authority
CN
China
Prior art keywords
bulbil
test
seedlings
tube
yam
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202110079264.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN112704012A (zh
Inventor
尚勇越
尚勇进
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shanxi Juxinweiye Agricultural Technology Development Co ltd
Original Assignee
Shanxi Juxinweiye Agricultural Technology Development Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shanxi Juxinweiye Agricultural Technology Development Co ltd filed Critical Shanxi Juxinweiye Agricultural Technology Development Co ltd
Priority to CN202110079264.0A priority Critical patent/CN112704012B/zh
Publication of CN112704012A publication Critical patent/CN112704012A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN112704012B publication Critical patent/CN112704012B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G22/00—Cultivation of specific crops or plants not otherwise provided for
    • A01G22/25—Root crops, e.g. potatoes, yams, beet or wasabi
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/001—Culture apparatus for tissue culture
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P60/00—Technologies relating to agriculture, livestock or agroalimentary industries
    • Y02P60/20—Reduction of greenhouse gas [GHG] emissions in agriculture, e.g. CO2
    • Y02P60/21—Dinitrogen oxide [N2O], e.g. using aquaponics, hydroponics or efficiency measures

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Cultivation Of Plants (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

一种山药复壮种苗制备方法，其目的是效果稳定、操作简单、容易掌握；本发明应用植物组织培养技术使脱除病毒的山药微茎尖生长成苗后，通过继代培养使基数增大并在试管内生产微型零余子，收获后的零余子经过物理和化学复合处理后破除休眠，栽种到试管外的基质中发芽并生长成苗；所述继代培养是指长山药试管苗在生长为至少三节以上时，将其剪切为单节的切段，插入无菌培养基中进行培养，这些单节的茎段由腋芽生长为植株的茎叶部分，茎段下部生根生长成试管苗，如此反复不断扩大试管苗的数量。

Description

一种长山药复壮种苗制备方法
技术领域
本发明涉及农业类种苗繁育领域，具体涉及山药种苗制备方法。
背景技术
长山药的药用和食用部分是根状茎，其地下生长直立向下达一米多深，传统的种植和收获方法费工费时，因而多为零散和小规模种植，成为大规模种植的瓶颈，现在专用机械的研发和使用已经部分解决了这个问题，为大规模种植提供了条件。在此情况下，优良种质就成了首要因素。种苗的优劣严重影响产量，目前山药种苗制备方法主要有三种：一是使用山药头，取块茎有芽的一节，长约20～40cm，称为芦头;二是使用山药地下肉质块茎截段，将块茎按8～l0 cm分切成段，蔓茎由其上的隐芽生成；三是使用山药零余子，其上的隐芽可以生发成蔓茎。三种方法各有优劣，但都无法完全避免种质退化。病毒脱除技术和组织培养技术可以恢复种质起到复壮的效果，其方法是脱除病毒的原种质在无菌培养基中生长形成试管苗，生根后过度移栽至温室基质中，过度移栽需要保持适宜的湿度、温度和光照。但由于试管苗细弱，较难保持高的过度移栽成活率，运用脱除病毒的试管苗生成微型零余子，并将收获后的零余子破除休眠，栽种于基质或大田中使其发芽生长，成为一种新的复壮种苗制备方法。
发明内容
本发明目的是克服已有技术的不足，提供一种效果稳定、操作简单、容易掌握、成活率高、生产成本低的一种制备山药复壮种苗的方法。
本发明方法应用植物组织培养技术使脱除病毒的山药微茎尖生长成苗后，通过继代培养使基数增大并在试管内生产微型零余子，收获后的零余子经过物理和化学方法复合处理后破除休眠，栽种到试管外的基质中发芽并生长成苗。具体是使脱除病毒的山药微茎尖生长成七厘米以上的无菌试管苗后，在超净工作台上剪成单芽茎段，重新接入培养基，通过这种单芽茎段的多次继代繁殖使基数增大，基数根据培养室的空间和生产规模而定。在此过程中不断收获微型零余子，经过化学与物理复合的方法处理后破除休眠，批量栽种到试管外的基质如蛭石中，保持适宜温度使其发芽生长，在此过程中保持适度的湿度温度和光照，待苗长到二十公分左右时移入大田。
所述的植物组织培养技术是指山药原种质通过常规的无菌操作进行试管内的脱毒快繁，其基本方法是将生发于山药的芦头、块茎截断或零余子的茎段进行表面消毒灭菌后，接种于无菌培养基中进行初代培养和继代繁殖，生根的试管苗过渡移栽到温室/网室内的蛭石基质中，保持湿度并定期施加营养液，当苗长到20公分以上移栽至大田中常规管理。
所述的试管内生产微型零余子，是指山药试管苗在组织培养瓶内产生的直径5mm以上的植物营养繁殖体。其方法是将山药茎段经过表面消毒灭菌后，切成单芽插入初代培养基：MS+BA（6-苄氨基嘌呤）0.5 mg/L+NAA（a-萘乙酸） 0.1mg/L+琼脂7g/L，用稀盐酸或氢氧化钠溶液调节pH值至5.8。待苗长至五片叶后切成单芽接入继代培养基：MS+KT（激动素）2mg/L+NAA（a-萘乙酸） 0.01mg/L+活性炭0.5 g/L+琼脂7g/L，用稀盐酸或氢氧化钠溶液调节pH值至5.8。培养四周可生根7条，苗高7公分，生产直径大于5mm的零余子2-4个。收获零余子后将试管苗进行继代培养，如此反复不断地生产零余子。
所述的收获后的零余子经过处理后破除休眠是指来自于试管苗的微型零余子通过物理、化学或生物方法促使零余子上的隐芽萌发。本方法将试管内收获的微型零余子浸泡于以下溶液中：GA3（赤霉素）100 mg/L+ BA（6-苄氨基嘌呤）10 mg/L+ sillwet77 0.02%，将盛有零余子和溶液的烧杯或开口容器放置在抽滤瓶中抽滤三分钟，然后在自然状态和室温下放置2小时，最后将零余子在室温下自然阴干，装入玻璃瓶中于4度的低温下储存2个月。
所述继代培养是指长山药试管苗在生长为至少三节以上时，将其剪切为单节的切段，插入无菌培养基中进行培养，这些单节的茎段由腋芽生长为植株的茎叶部分，茎段下部生根生长成试管苗，如此反复不断扩大试管苗的数量。
所述过渡移栽是指将无菌苗移栽到培养瓶外或试管外基质中的过程，在此过程中幼苗逐渐适应外部环境由弱变壮，需要适合的温度湿度和光照。
所述试管外的基质是指长山药试管苗过度移栽至试管外所用的基质，本方法所用的基质为草炭、蛭石和珍珠岩的混合物，其比例为3:1:1。
本发明具备效果稳定、操作简单、容易掌握等优点，收取零余子后并不影响试管苗的扩繁。经过所述溶液处理的零余子在4度下储存2个月以破除休眠，也可以在此温度下保存更长时间以累积一定的零余子数量批量栽种。这种方式避免了幼嫩的试管苗过度移栽步骤，提高了成活率，降低了制备山药复壮种苗的生产成本。
具体实施方式
实施例1：
以山药品种“太谷长山药”（地下茎块长120厘米左右）为试验材料，2018年1月在山西巨鑫伟业农业科技开发有限公司园区内，将大田收获的零余子栽种于草炭基质内，生发蔓茎后取茎段用常规方法表面消毒灭菌，无菌操作切成单芽插入初代培养基：MS+BA（6-苄氨基嘌呤）0.5 mg/L+NAA（a-萘乙酸） 0.1mg/L+琼脂7g/L，用稀盐酸或氢氧化钠溶液调节pH值至5.8。待苗长至五片叶后切成单芽接入继代培养基：MS+KT（激动素）2 mg/L+NAA（a-萘乙酸） 0.01mg/L+活性炭0.5 g/L+琼脂7g/L，用稀盐酸或氢氧化钠溶液调节pH值至5.8。培养28天可生根7条，苗高7公分，生产直径大于5mm的零余子2-4个。收获零余子后将试管苗进行继代培养，如此不断生产零余子。将收获的零余子浸泡于以下溶液：GA3（赤霉素）100 mg/L+BA（6-苄氨基嘌呤）10 mg/L+ sillwet77 0.02%，抽滤三分钟后，在自然状态下并于室温下放置2小时，然后室温下自然阴干，装入玻璃瓶中于4度的低温下储存2个月。2019年1月将此处理的零余子栽种于装有草炭基质的穴盘中，并放置在25度左右的温室中，一个月发芽率达80%，生长良好。
实施例2：
以适宜于机械收获的短粗山药品种太谷短粗山药一号（地下茎块长60厘米左右）为试验材料，2019年1月在山西巨鑫伟业农业科技开发有限公司园区内，将大田收获的零余子栽种于草炭基质内，生发匍匐茎后取茎段用常规方法表面消毒灭菌，无菌操作切成单芽插入初代培养基：MS+BA（6-苄氨基嘌呤）0.5 mg/L+NAA（a-萘乙酸） 0.1mg/L+琼脂7g/L，用稀盐酸或氢氧化钠溶液调节pH值至5.8。待苗长至五片叶后切成单芽接入继代培养基：MS+KT（激动素）2 mg/L+NAA（a-萘乙酸） 0.01mg/L+活性炭0.5 g/L+琼脂7g/L，用稀盐酸或氢氧化钠溶液调节pH值至5.8。培养28天可生根7条，苗高7公分，生产直径大于5mm的零余子2-4个。将收获的零余子浸泡于以下溶液：GA3（赤霉素）100 mg/L+ BA（6-苄氨基嘌呤）10 mg/L+sillwet77 0.02%，抽滤三分钟后，在自然状态下并于室温下放置2小时，然后室温下自然阴干，装入玻璃瓶中于4度的低温下储存2个月。2020年1月将此处理的零余子栽种于装有草炭基质的穴盘中，并放置在25度左右的温室中，一个月发芽率达85%，生长良好。
由于山药的品种很多，存在很多短粗块茎的品种，本方法没有对短粗块茎的品种进行试验。本方法对两种长山药进行了试验，实施例1使用了一种块茎长120公分的品种，实施例2使用了一种块茎长60公分的品种，尽管相差60公分，本方法对这两个品种在试管内的继代增殖、微型零余子形成、零余子休眠破除都有效，其效果没有明显差异。

Claims (5)

1.一种山药复壮种苗制备方法，其特征是应用植物组织培养技术使脱除病毒的山药微茎尖生长成苗后，通过继代培养使基数增大并在试管内生产微型零余子，收获后的零余子经过物理和化学方法复合处理后破除休眠，栽种到试管外的基质中发芽并生长成苗；
收获后的零余子经过物理和化学方法复合处理后破除休眠是指来自于试管苗的微型零余子，与山药块茎相同也存在休眠现象，不经过休眠或休眠期不足的零余子，种在地下虽然可以发根，但不能萌芽，因此很难长出新的山药植株，需要用物理或化学方法进行处理破除休眠，促使其发芽，具体是将试管内收获的微型零余子浸泡于以下溶液中：GA3(赤霉素)100mg/L+BA(6-苄氨基嘌呤)10mg/L+sillwet77 0.02％，放入抽滤器中抽滤三分钟，然后从抽滤器中取出并于室温下放置2小时，最后将零余子室温下自然阴干，装入玻璃瓶中于4度的低温下储存2个月。
2.如权利要求1所述的山药复壮种苗制备方法，其特征是植物组织培养技术是指山药原种质通过常规的无菌操作进行试管内的病毒脱除和繁殖，其基本方法是将生发于山药的芦头、块茎截断或零余子的茎段进行表面消毒灭菌后，接种于无菌培养基中进行初代培养和继代繁殖，生根的试管苗过渡移栽到温室/网室内的蛭石基质中，保持湿度并定期施加营养液，当苗长到20公分以上移栽至大田中常规管理；或在试管内产生零余子，将收获的零余子破除休眠后，生发成苗培育生长。
3.如权利要求1或2所述的山药复壮种苗制备方法，其特征是试管内生产微型零余子是指将山药蔓茎的茎段经过表面消毒灭菌后，切成单芽插入初代培养基：MS+BA(6-苄氨基嘌呤)0.5mg/L+NAA(a-萘乙酸)0.1mg/L+琼脂7g/L，用稀盐酸或氢氧化钠溶液调节pH值至5.8，待苗长至五片叶后切成单芽接入继代培养基：MS+KT(激动素)2mg/L+NAA(a-萘乙酸)0.01mg/L+活性炭0.5g/L+琼脂7g/L，用稀盐酸或氢氧化钠溶液调节pH值至5.8，
培养四周可生根7条左右，苗高7公分左右，生产直径大于5mm的零余子2-4个；收获零余子后将试管苗继续进行继代培养，如此不断生产零余子。
4.如权利要求1或2所述的山药复壮种苗制备方法，其特征是所述继代培养是指长山药试管苗在生长为至少三节以上时，将其剪切为单节的切段，插入无菌培养基中进行培养，这些单节的茎段由腋芽生长为植株的茎叶部分，茎段下部生根生长成试管苗，如此反复不断扩大试管苗的数量。
5.如权利要求1或2所述的山药复壮种苗制备方法，其特征是所述试管外的基质是指长山药试管苗过渡移栽至试管外所用的基质，本方法所用的基质为草炭、蛭石和珍珠岩的混合物，其比例为3:1:1。
CN202110079264.0A 2021-01-21 2021-01-21 一种长山药复壮种苗制备方法 Active CN112704012B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110079264.0A CN112704012B (zh) 2021-01-21 2021-01-21 一种长山药复壮种苗制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110079264.0A CN112704012B (zh) 2021-01-21 2021-01-21 一种长山药复壮种苗制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN112704012A CN112704012A (zh) 2021-04-27
CN112704012B true CN112704012B (zh) 2023-04-14

Family

ID=75549865

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110079264.0A Active CN112704012B (zh) 2021-01-21 2021-01-21 一种长山药复壮种苗制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112704012B (zh)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103190342A (zh) * 2013-01-28 2013-07-10 湖北理工学院 蕲山药试管零余子快速繁殖方法
CN103651146A (zh) * 2013-12-26 2014-03-26 湖北省农业科学院经济作物研究所 一种生产蕲山药试管微块茎的方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103190342A (zh) * 2013-01-28 2013-07-10 湖北理工学院 蕲山药试管零余子快速繁殖方法
CN103651146A (zh) * 2013-12-26 2014-03-26 湖北省农业科学院经济作物研究所 一种生产蕲山药试管微块茎的方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
6-BA、GA3打破秋莴苣高温休眠及对生长发育的影响;成玉富等;《江苏农业研究》;20000330;第23卷(第1期);摘要 *
山药试管薯打破休眠技术研究;李丽红等;《种子》;20180725;第37卷(第7期);摘要 *
怀山药脱毒微型块茎管内管外萌发条件及生理生化机制研究;王运英;《中国优秀硕士论文全文数据库》;20170515(第5期);摘要 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN112704012A (zh) 2021-04-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103609224B (zh) 一种路易斯安娜鸢尾杂交种子萌发的方法
CN111758559B (zh) 一种蝴蝶兰与钻喙兰远缘杂交种子无菌播种及其育苗的方法
CN111616052A (zh) 一种苹果砧木楸子的快速繁殖及无糖生根培养方法、应用
US11547071B2 (en) Methods for disinfecting and inducing direct rapid proliferation of explants of Kadsura coccinea stems with buds
CN112189566A (zh) 一种砧木用樱桃苗的快速繁育方法
CN1541519A (zh) 兜兰的无菌播种和组织培养技术
CN109042330A (zh) 一种桃叶卫矛的组织培养方法
CN116686706B (zh) 一种芫花的组织培养方法
CN103155869A (zh) 甜樱桃砧木Colt组织培养方法
WO2022171212A2 (zh) 一种无刺青花椒的离体培养方法
CN114600772B (zh) 一种深山含笑的组培方法和快速繁殖方法
CN112704012B (zh) 一种长山药复壮种苗制备方法
CN112167056A (zh) 一种绿豆子叶节再生培养方法
CN109924073A (zh) 一种见血清种子无菌萌发及快速成苗方法
CN114793903A (zh) 一种脱毒草莓种苗的繁育方法
CN111149703B (zh) 一种简便高效高质量的番木瓜组培苗生根方法
CN1541518A (zh) 独角石斛兰无菌播种和试管育苗技术
JPS6258934A (ja) 組織培養によるナガイモの大量増殖法
CN107155882A (zh) 一种药用白芨无菌播种快速育苗方法
CN112293252A (zh) 一种檀香石斛的人工高效无性系繁殖方法
CN112616650A (zh) 一种扇形文心兰无菌条件下授粉及种子培育的方法
CN110547197A (zh) 一种通过空气凤梨侧芽组培快繁种苗的方法
CN105010133B (zh) 光皮桦植物组织培养方法及其培养基
CN117158320B (zh) 一种洋桔梗多品种体细胞胚高效再生体系的构建方法
CN114617062B (zh) 鳄嘴花组培快繁方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant