CN112655559A - 一种茶树的组培快速繁殖方法 - Google Patents
一种茶树的组培快速繁殖方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112655559A CN112655559A CN202011639873.9A CN202011639873A CN112655559A CN 112655559 A CN112655559 A CN 112655559A CN 202011639873 A CN202011639873 A CN 202011639873A CN 112655559 A CN112655559 A CN 112655559A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- culture
- tissue culture
- iba
- rapid propagation
- culture medium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Abstract
本发明属于茶树组织培养技术领域，公开了一种茶树的组培快速繁殖方法，所述茶树的组培快速繁殖方法的新生枝条腋芽茎段采用初代培养基0.1mg/L IBA+0.01mg/L TDZ+MS培养基；无菌外植体接种于继代增殖培养基0.1mg/L IBA+2mg/L 6‑BA+1.0mg/L GA3+MS培养基；小苗接种于无糖生根培养基1.0mg/L IBA+1/2MS+蛭石。本发明以提高茶树‘平阳特早’丛生芽的增殖率以及成苗率为目的，优化了茶树平阳特早组培快繁培养基的激素组合，使每月一个周期的增殖率可达到3倍以上，超过20％的芽能长成高度5cm以上、适合移栽的小苗。
Description
技术领域
本发明属于茶树组织培养技术领域，尤其涉及一种茶树的组培快速繁殖方法。
背景技术
目前，最接近的现有技术：现有技术是在组织培养中进行生根，1.生长条件：常规组织培养采用的是240ml或者300ml的小组培瓶，虽然可以透光但是利用率较低，瓶盖的遮挡也占大部分原因。组培瓶内有较高的相对湿度，低的光照强度，稀薄的CO2浓度，这些条件均不利于茶苗生长及生根。无糖生根培养的环境类似于在自然环境下，透光性好，增加光强，便于气体交换，增加容器内的换气次数，气体分布均匀，而且可采取强制性换气。2.根际环境：常规组织培养加入蔗糖，而糖的存在极易造成污染以致生根率降低，生长发育迟缓甚至死亡，也将导致叶片表层结构发育差，气孔开闭功能不强，抑制和降低茶苗的光合作用力。在琼脂中生根，根系瘦小脆弱，在移栽的过程中容易损伤或死亡。幼苗在移栽驯化前需要将组培苗根部的琼脂洗去，防止定植后病菌的侵染而影响驯化成活率，难以清洗，造成损伤，而无糖生根培养就没有这一步骤，节省了劳动力，从而降低生产成本。无糖生根培养可以改变碳源的供应方式，将常规组织培养的异养变为兼养或自养。无糖生根培养采用的培养基质是蛭石，多空的无机材料(良好的空气扩散系数)有利于根系的萌发和伸长生长。茶树的组织培养研究从二十世纪80年代就已经开始了，外植体通常采用叶片、腋芽等。但由于茶树是多年生的木本植物，生长速度慢，因此存在增殖率、成苗率较低的问题。
茶树的组织培养从19世纪80年代左右就已经有科学家开始研究了，近几年国外也有科学家对茶树的组织培养体系进行了研究，而国内相关的研究报告很少。在培养基中加入大量蔗糖，导致微生物滋生，产生大量污染。无糖生根改变碳源的提供方式可以很大程度的减少污染。直到现在也是存在增殖率低，生长速度慢，生根培养周期长的问题，在茶树栽培方面，无糖生根技术几乎没有成熟的体系，仍旧是组织培养技术用于茶树生产性育苗的瓶颈。
综上所述，现有技术存在的问题是：目前的茶树的组织培养存在增殖率低，生长速度慢，生根培养周期长。
解决上述技术问题的意义：摸索适合茶树生根条件，解决问题后可以缩短生周期。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种茶树的组培快速繁殖方法。
本发明是这样实现的，一种茶树的组培快速繁殖方法，所述茶树的组培快速繁殖方法的新生枝条腋芽茎段采用初代培养基0.1mg/L IBA+0.01mg/L TDZ+MS培养基；无菌外植体接种于继代增殖培养基0.1mg/L IBA+2mg/L6-BA+1.0mg/L GA3+MS培养基；小苗接种于无糖生根培养基1.0mg/L IBA+1/2MS+蛭石。初代培养基可以使茶苗出芽，继代增殖培养基可以增大扩繁系数为3，大量扩繁茶树组培苗，生根培养基可以提供良好的环境和营养促进茶树生根。
进一步，所述茶树的组培快速繁殖方法具体包括以下步骤：
第一步，材料于温室基质培养，采新生枝条，顶芽以下三个腋芽为标准，去掉叶片，自来水冲洗，无菌水震荡洗涤，75％酒精消毒，无菌水洗一次，HgCL2灭菌，无菌水震荡洗涤，切成1cm带腋芽茎段，插入0.1mg/L IBA+0.01mg/L TDZ+MS培养基中，暗培养，进入光培养；
第二步，将无菌外植体接种于继代培养基0.1mg/L IBA+2mg/L 6-BA+1.0mg/L GA3+MS培养基，暗培养后，继续培养；
第三步，将继代培养苗接种于增殖扩繁培养基0.1mg/L IBA+0.02mg/L TDZ+1.0mg/L AdSO4+MS培养基，暗培养后，继续培养；
第四步，选择长势一致，生命力旺盛的组培苗，切去根部愈伤，为2cm高的小苗，接种于无糖生根培养1/2MS+1.5mg/L IBA+蛭石，暗培养，继续培养。
进一步，所述第一步采新生枝条，顶芽以下三个腋芽为标准，去掉叶片，自来水冲洗2h，无菌水震荡洗涤10min，75％酒精消毒30s，无菌水洗一次。
进一步，所述第一步HgCL2灭菌8-10min，无菌水震荡洗涤6次，切成1cm带腋芽茎段。
进一步，所述第一步继续培养条件光照2000-3000lx，温度23±1℃。
进一步，所述第二步暗培养24h后，在光照2500-7500lx，温度23±1℃的条件下培养。
进一步，所述第三步暗培养24h后，在光照2500-7500lx，温度23±1℃条件下培养。
进一步，所述第四步暗培养3d，在光照2500-7500lx，温度25±1℃条件下培养。
综上所述，本发明的优点及积极效果为：本发明采用的初代培养基为0.1mg/L IBA+0.01mg/L TDZ+MS培养基，继代增殖培养基为0.1mg/L IBA+2mg/L6-BA+1.0mg/L GA3+MS培养基，无糖生根培养基为1.0mg/L IBA+1/2MS+蛭石。不仅仅加快了‘平阳特早’的繁殖速度，也缩短了‘平阳特早’生根移栽周期，更保证了茶树的优良特性，为茶产业的发展和进一步扩大提供了更便捷的途径和方法。
本发明以提高茶树‘平阳特早’丛生芽的增殖率以及成苗率为目的，优化了茶树平阳特早组培快繁培养基的激素组合，使每月一个周期的增殖率可达到3倍以上，超过20％的芽能长成高度5cm以上、适合移栽的小苗。
附图说明
图1是本发明实施例提供的茶树的组培快速繁殖方法流程图。
图2是本发明实施例提供的壮苗示意图。
图3是本发明实施例提供的无糖生根示意图。
图4是本发明实施例提供的根长示意图。
图5是本发明实施例提供的根表面积示意图。
图6是本发明实施例提供的根体积示意图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种茶树的组培快速繁殖方法，下面结合附图对本发明作详细的描述。
如图1所示，本发明实施例提供的茶树的组培快速繁殖方法包括以下步骤：
S101：以‘平阳特早’为材料，本材料于温室基质培养，采新生枝条，顶芽以下三个腋芽为标准，去掉叶片，自来水冲洗2h，无菌水震荡洗涤10min，75％酒精消毒30s，无菌水洗一次，HgCL2灭菌8-10min(视材料情况定)，无菌水震荡洗涤6次，切成1cm带腋芽茎段，插入0.1mg/L IBA+0.01mg/L TDZ+MS培养基中，暗培养48h，进入光培养。培养条件光照2000-3000lx，温度23±1℃。
S102：将无菌外植体接种于继代培养基0.1mg/L IBA+2mg/L 6-BA+1.0mg/L GA3+MS培养基，暗培养24h后，在光照2500-7500lx，温度23±1℃的条件下培养。
S103：将继代培养苗接种于增殖扩繁培养基0.1mg/L IBA+0.02mg/L TDZ+1.0mg/LAdSO4+MS培养基，暗培养24h后，在光照2500-7500lx，温度23±1℃条件下培养，30天后统计增殖率和成苗率。
S104：选择长势一致，生命力旺盛的组培苗，切去根部愈伤，为2cm高的小苗，接种于无糖生根培养1/2MS+1.5mg/L IBA+蛭石，暗培养3d，在光照2500-7500lx，温度25±1℃条件下培养。
下面结合试验对本发明的技术效果作详细的描述。
1、材料与方法
试验材料为茶树‘平阳特早’春季新萌发枝条，采自西北农林科技大学科研温室。将采集的新枝条去叶清洗干净、消毒，切成带一个腋芽的1cm长的茎段，接种培养基中进行萌发，萌发以后在新的培养基接种3-4次，即得到丛生芽团，作为实验材料。无糖生根激素IBA的浓度是1.0mg/L。
2、实验条件继代方法是将丛生芽团切开成每个带1-2个芽团的新芽团，接种到新的继代培养基。
3、细胞分裂素浓度对增殖及生长的影响，共设4个浓度梯度，为1.5、2.0、2.5、3.0。每个处理设置3个重复，每个重复接种10瓶材料。在接种后的第30天，分别对每个芽团的芽团的芽头数目及高的适合移栽的小苗进行统计，计算增殖率(观察时的芽数/接种时的芽数)以及成苗率。
培养条件是温度为23±1℃，光照时间为12h，光强2000-3000lx。实验培养基为MS基础培养基。激素浓度单位均为mg/L。
生长素采用IBA0.1 mg/L，细胞分裂素采用BA(6-苄氨基腺嘌呤)。
本发明茶树‘平阳特早’组培及无糖生根方法，与现有技术相比较具有以下优点：激素对茶树组织培养中芽增殖和生长的影响，发现对于茶组培苗的增殖，6-BA浓度在2.0mg/L左右比较合适；IBA在0.1mg/L左右较好，促进增殖的效果较明显。GA3对增殖和生长也有促进作用，特别是能够较好的促进芽头成为小苗，其浓度为1.0mg/L的时候效果最好。茶苗在组培过程中的生长变化为静止，生长快，有缓慢，所以设6-8周为周期。本发明的另一个优势是缩短炼苗的时间，直接进行无糖生根技术培养，移栽，由兼养变自养，同时也提高了幼苗成活率。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种茶树的组培快速繁殖方法，其特征在于，所述茶树的组培快速繁殖方法的新生枝条腋芽茎段采用初代培养基0.1mg/L IBA+0.01mg/L TDZ+MS培养基；无菌外植体接种于继代增殖培养基0.1mg/L IBA+2mg/L 6-BA+1.0mg/L GA3+MS培养基；小苗接种于无糖生根培养基1.0mg/L IBA+1/2MS+蛭石。
2.如权利要求1所述的茶树的组培快速繁殖方法，其特征在于，所述茶树的组培快速繁殖方法具体包括以下步骤：
第一步，材料于温室基质培养，采新生枝条，顶芽以下三个腋芽为标准，去掉叶片，自来水冲洗，无菌水震荡洗涤，75％酒精消毒，无菌水洗一次，HgCL2灭菌，无菌水震荡洗涤，切成1cm带腋芽茎段，插入0.1mg/L IBA+0.01mg/L TDZ+MS培养基中，暗培养，进入光培养；
第二步，将无菌外植体接种于继代培养基0.1mg/L IBA+2mg/L 6-BA+1.0mg/L GA3+MS培养基，暗培养后，继续培养；
第三步，将继代培养苗接种于增殖扩繁培养基0.1mg/L IBA+0.02mg/L TDZ+1.0mg/LAdSO4+MS培养基，暗培养后，继续培养；
第四步，选择长势一致，生命力旺盛的组培苗，切去根部愈伤，为2cm高的小苗，接种于无糖生根培养1/2MS+1.5mg/L IBA+蛭石，暗培养，继续培养。
3.如权利要求2所述的茶树的组培快速繁殖方法，其特征在于，所述第一步采新生枝条，顶芽以下三个腋芽为标准，去掉叶片，自来水冲洗2h，无菌水震荡洗涤10min，75％酒精消毒30s，无菌水洗一次。
4.如权利要求2所述的茶树的组培快速繁殖方法，其特征在于，所述第一步HgCL2灭菌8-10min，无菌水震荡洗涤6次，切成1cm带腋芽茎段。
5.如权利要求2所述的茶树的组培快速繁殖方法，其特征在于，所述第一步继续培养条件光照2000-3000lx，温度23±1℃。
6.如权利要求2所述的茶树的组培快速繁殖方法，其特征在于，所述第二步暗培养24h后，在光照2500-7500lx，温度23±1℃的条件下培养。
7.如权利要求2所述的茶树的组培快速繁殖方法，其特征在于，所述第三步暗培养24h后，在光照2500-7500lx，温度23±1℃条件下培养。
8.如权利要求2所述的茶树的组培快速繁殖方法，其特征在于，所述第四步暗培养3d，在光照2500-7500lx，温度25±1℃条件下培养。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011639873.9A CN112655559A (zh) | 2020-12-31 | 2020-12-31 | 一种茶树的组培快速繁殖方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011639873.9A CN112655559A (zh) | 2020-12-31 | 2020-12-31 | 一种茶树的组培快速繁殖方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN112655559A true CN112655559A (zh) | 2021-04-16 |
Family
ID=75413712
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202011639873.9A Pending CN112655559A (zh) | 2020-12-31 | 2020-12-31 | 一种茶树的组培快速繁殖方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN112655559A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114051932A (zh) * | 2021-12-02 | 2022-02-18 | 贵州大学 | 一种以茶树带腋芽茎段为外植体建立高效快繁体系的方法 |
| CN115316273A (zh) * | 2022-08-18 | 2022-11-11 | 山东农业大学 | 一种安吉白茶组织培养快速繁殖的方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104883874A (zh) * | 2012-11-16 | 2015-09-02 | 淡马锡生命科学研究院有限公司 | 麻风树属植物的直接和间接器官发生 |
| CN107232056A (zh) * | 2017-06-19 | 2017-10-10 | 西北农林科技大学 | 一种茶树组培快繁体系的建立方法 |
| CN111616052A (zh) * | 2020-05-30 | 2020-09-04 | 西北农林科技大学 | 一种苹果砧木楸子的快速繁殖及无糖生根培养方法、应用 |
-
2020
- 2020-12-31 CN CN202011639873.9A patent/CN112655559A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104883874A (zh) * | 2012-11-16 | 2015-09-02 | 淡马锡生命科学研究院有限公司 | 麻风树属植物的直接和间接器官发生 |
| CN107232056A (zh) * | 2017-06-19 | 2017-10-10 | 西北农林科技大学 | 一种茶树组培快繁体系的建立方法 |
| CN111616052A (zh) * | 2020-05-30 | 2020-09-04 | 西北农林科技大学 | 一种苹果砧木楸子的快速繁殖及无糖生根培养方法、应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 王振龙等: "《植物组织培养教程》", 30 January 2011 * |
| 程广有等: "《名优花卉组织培养技术》", 30 January 2001 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114051932A (zh) * | 2021-12-02 | 2022-02-18 | 贵州大学 | 一种以茶树带腋芽茎段为外植体建立高效快繁体系的方法 |
| CN115316273A (zh) * | 2022-08-18 | 2022-11-11 | 山东农业大学 | 一种安吉白茶组织培养快速繁殖的方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110547198B (zh) | 一种通过种子组培快繁空气凤梨的方法 | |
| CN103931497B (zh) | 一种提高火龙果组培苗成苗率的方法 | |
| CN109220791B (zh) | 一种利用鳞茎繁育朱顶红的组培方法 | |
| CN103931492A (zh) | 苹果砧木m9的组培快速育苗方法 | |
| CN111616052A (zh) | 一种苹果砧木楸子的快速繁殖及无糖生根培养方法、应用 | |
| CN112273231A (zh) | 一种诱导天门冬丛生芽增殖与植株再生的方法 | |
| CN108029559B (zh) | 一种快速培育落叶冬青组培苗的方法 | |
| CN112655559A (zh) | 一种茶树的组培快速繁殖方法 | |
| CN104604677A (zh) | 一种降低俄罗斯橡胶草组织培养褐化率的组培繁殖方法 | |
| CN102144543A (zh) | 一项铁线莲阿拉贝拉组织培养快繁技术 | |
| CN108739408B (zh) | 一种提高大叶金丝楸有效新梢分化数量的组织培养方法 | |
| CN112715367B (zh) | 一种利用硝酸镧进行毛梾组培继代增殖的方法 | |
| CN112243861B (zh) | 一种华盖木组培快繁方法 | |
| CN103155869A (zh) | 甜樱桃砧木Colt组织培养方法 | |
| CN112425506A (zh) | 一种黄金艾草的组织培养快速繁殖方法 | |
| CN104221864A (zh) | 一种柳杉无性系离体生根培养方法 | |
| CN114946655B (zh) | 一种六堡茶种苗组织培养方法 | |
| CN103609444A (zh) | 常绿萱草的组织培养法 | |
| CN114431154B (zh) | 一种通过白牛槭休眠芽无性扩繁的方法 | |
| CN104054579B (zh) | 一种油桐叶柄直接再生植株的方法 | |
| CN101543184A (zh) | 一种魔芋的开放式组织培养方法 | |
| CN109105259B (zh) | 一种青钱柳组培苗快速增殖的方法 | |
| CN112772418A (zh) | 一种秋石斛兰花芽组织培养快速繁殖的方法 | |
| CN105284617A (zh) | 一种橡胶草根段一步诱导成苗高效离体繁殖方法 | |
| CN104221851A (zh) | 一种大叶蚁塔离体培养和快速繁殖的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20210416 |
|
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |