CN112574260A - 一种酒石酸泰乐菌素的纯化方法 - Google Patents

一种酒石酸泰乐菌素的纯化方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种酒石酸泰乐菌素的纯化方法，其工艺步骤为：1）将十六烷基三甲基溴化铵溶于乙酸乙酯中配置成反胶束萃取系统；2）将酒石酸泰乐菌素反萃取液与上述过程1）所得的反胶束萃取系统混合，缓慢搅拌萃取，静置分相，得到含有酒石酸泰乐菌素的反胶束萃取相；3）在上述反胶束萃取相中加入无机盐结晶，过滤，干燥即可得到酒石酸泰乐菌素。本发明可有效提高产品收率，提高产品质量，且工艺简便，对设备要求相对较低。

Description

一种酒石酸泰乐菌素的纯化方法
技术领域
本发明属于抗生素提纯技术领域，特别涉及一种酒石酸泰乐菌素的纯化方法。
背景技术
泰乐菌素(Tylosin)，又名泰乐星、泰乐霉素，是一种重要的畜禽专用抗生素。酒石酸泰乐菌素是泰乐菌素的酒石酸盐，分子式为2(C46H77NO17)·C4H6O6，分子量为1982.31，为白色或淡黄色粉末，易溶于水（600mg/ml）。酒石酸泰乐菌素在临床上主要用于治疗和预防由支原体、金黄葡萄球菌、化脓杆菌、肺炎双球菌、丹毒杆菌、副嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟氏菌、巴氏杆菌、螺旋体、球虫等病原体引起的各种呼吸道、肠道、生殖道和运动系统感染。
现有技术中，对于酒石酸泰乐菌素的提取纯化通常是采用如下方法：将泰乐菌素发酵液用硫酸铝调至酸性后再用液碱回调至碱性，絮凝沉淀，板框过滤，所得滤液用醋酸丁酯进行萃取、酒石酸反萃取，即得含酒石酸泰乐菌素的反萃取液；反萃取液进一步用碱（Ca(OH)2）中和、活性碳脱色、喷雾干燥塔获得酒石酸泰乐菌素成品。上述方法存在以下几个弊端：①操作过程繁琐复杂；②中和结晶过程精确控制不易，容易造成pH的过高或过低，其中pH过高时泰乐菌素容易析出，造成泰乐菌素损失，pH过低时则在喷雾干燥时，酒石酸泰乐菌素容易降解，这些都会影响产品收率。③活性炭对泰乐菌素具有一定的吸附作用，它的使用使得产品收率降低。
发明内容
本发明的目的在于克服上述现有技术的缺陷，提供一种能有效提高产品收率及产品质量，且工艺简便，对设备要求相对较低的酒石酸泰乐菌素的纯化方法。
为实现上述发明目的所采取的技术方案为：
一种酒石酸泰乐菌素的纯化方法，其特征在于其工艺步骤为：
1）将十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）溶于乙酸乙酯中配置成反胶束萃取系统；
2）将酒石酸泰乐菌素反萃取液与上述过程1）所得的反胶束萃取系统混合，缓慢搅拌萃取，静置分相，得到含有酒石酸泰乐菌素的反胶束萃取相；
3）在上述反胶束萃取相中加入无机盐结晶，过滤，干燥即可得到酒石酸泰乐菌素。
所述反胶束萃取系统的浓度为5~30mmol/L。
所述酒石酸泰乐菌素反萃取液和反胶束萃取系统的混合比例为1~3:1~3，以体积比计。
过程2）中，所述萃取时，控制萃取温度30~60℃，萃取时间15~40min。
所述无机盐为NaCl或Na2HPO4。
所述无机盐用量为酒石酸泰乐菌素反萃取液中酒石酸泰乐菌素折干十亿的二十万分之一至三十万分之一。
本发明采用反胶束萃取法进行酒石酸泰乐菌素的纯化，即以表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵-乙酸乙酯溶液作为反胶束萃取系统对酒石酸泰乐菌素反萃取液进行萃取，之后再以盐析结晶的方式将酒石酸泰乐菌素从反胶束萃取系统中结晶析出，该方法同现有的碱中和、活性炭脱色、喷雾干燥提取法相比具有以下技术优势：①本发明的操作步骤相对简单，且整个过程中剔除了碱中和步骤，避免了结晶过程中的 pH 控制过高或过低对产品收率的影响；②本发明无需使用活性炭脱色，从而避免了活性炭对酒石酸泰乐菌素产品的吸附作用，进而提高了产品收率；③通过对利用此方法得到的盐析成品检测，发现总杂含量明显降低，说明一般杂质（如 DMT、RRT0.78 等）在十六烷基三甲基溴化铵—乙酸乙酯溶液作为反胶束萃取系统中有较高的溶解度，在盐析结晶时可淘汰掉大部分杂质，有利于提高产品的纯度；④本发明的所有操作均是在常压下进行操作，故对设备要求不高。
具体实施方式
下面用实例，对本技术方案进行具体的描述，应该理解的是，实例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。本发明的范围与核心内容依据权利要求书加以确定。
酒石酸泰乐菌素反萃取液的制备过程为：
1）发酵液预处理：取泰乐菌素发酵液50L，用硫酸铝调节pH至3.0～4.5，搅拌10min，待pH稳定；再用30%NaOH溶液回调pH至4.5～6.0，搅拌10min后静置30min，使蛋白质得到充分絮凝。此时禁止开启搅拌和空气对絮凝物进行搅拌，防止絮凝好的料液被打散不利于板框过滤。用板框过滤，滤饼用适量纯化水进行顶洗，顶洗液与滤液合并得滤液约40L，滤液效价为 8000～12000U/ml。
2）萃取：用连续逆流萃取法按照滤液：醋酸丁酯=1:2～5（v:v）用醋酸丁酯对滤液进行萃取。控制滤液进料流量为10～25m3/h连续进料，萃取温度控制为38～45℃；进行一级萃取时用30%NaOH溶液调节pH至8.6～9.6，萃取完毕后，用离心机分离，水相用醋酸丁酯进行二级萃取，萃取pH控制为8.8～9.8，萃取完毕后，用离心机分离，合并醋酸丁酯相。按照工艺参数用适量纯化水对醋酸丁酯相进行洗涤，以除去水溶性杂质。
3）反萃取：按照工艺参数用纯化水进行反萃取。通过用5%酒石酸溶液调节pH至2.0～5.0使醋酸丁酯中的泰乐菌素碱转化为酒石酸泰乐菌素从而被萃取到水相中。反萃取温度控制在3.0～10.0℃之间，一级反萃取后重相pH控制在3.8～5.0之间，继续搅拌30min后静置30min；分相得到的水相进行二级反萃取，二级反萃取pH控制在2.0～3.5之间，继续搅拌30min后静置30min，分相，合并水相合并水相即为酒石酸泰乐菌素反萃取液，所得体积约4，效价为70000～90000U/ml。
以下实施例和对比实施例中所提到的酒石酸泰乐菌素反萃取液均为采用此法制备得到的酒石酸泰乐菌素反萃取液。
实施例 1
将十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）溶于乙酸乙酯中制成 20mmol/L 的 CTAB-乙酸乙酯溶液作为反胶束萃取系统。
取 4L 效价为 70000U/ml 的酒石酸泰乐菌素反萃取液与 CTAB-乙酸乙酯溶液反胶束萃取系统按照体积比为 1:2 的比例混合，在30℃条件下，对酒石酸泰乐菌素进行缓慢搅拌萃取 20min 后，静置分相，得到含有酒石酸泰乐菌素的反胶束萃相8L，效价为38840U/ml。
向反胶束萃取相中加入 0.056kg NaCl（酒石酸泰乐菌素反萃取液十亿的二十万分之一）使酒石酸泰乐菌素从反胶束中结晶析出从而使酒石酸泰乐菌素与反胶束体系得到分离。过滤、干燥得到成品。萃取收率为 97.1%，A 组分含量为 87.8%，总组分（A、B、C、D）为96.7%。
实施例2
将十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）溶于乙酸乙酯中制成25mmol/L的CTAB- 乙酸乙酯溶液作为反胶束萃取系统。
取 4L 效价为 70000U/ml 的酒石酸泰乐菌素反萃取液与 CTAB-乙酸乙酯溶液反胶束萃取系统按照体积比为 1:1 的比例混合，在 45℃条件下，对酒石酸泰乐菌素进行缓慢搅拌萃取 30min 后，静置分相，得到含有酒石酸泰乐菌素的反胶束萃相 4L，效价为77440U/ml。
向反胶束萃取相中加入0.056kg NaCl（酒石酸泰乐菌素反萃取液十亿的二十万分之一）使酒石酸泰乐菌素从反胶束中结晶析出从而使酒石酸泰乐菌素与反胶束体系得到分离。过滤、干燥得到成品。萃取收率为96.8%，A组分含量为88.5%，总组分（A、B、C、D）为97.1%。
实施例3
将十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）溶于乙酸乙酯中制成30mmol/L的CTAB- 乙酸乙酯溶液作为反胶束萃取系统。
取 4L 效价为 70000U/ml 的酒石酸泰乐菌素反萃取液与 CTAB-乙酸乙酯溶液反胶束萃取系统按照体积比为 2:1 的比例混合，在 60℃条件下，对酒石酸泰乐菌素进行缓慢搅拌萃取 35min 后，静置分相，得到含有酒石酸泰乐菌素的反胶束萃相2L，效价为155200U/ml。
向反胶束萃取相中加入0.056kg NaCl（酒石酸泰乐菌素反萃取液十亿的二十万分之一）使酒石酸泰乐菌素从反胶束中结晶析出从而使酒石酸泰乐菌素与反胶 束体系得到分离。过滤、干燥得到成品。萃取收率为97.0%，A组分含量为87.6%，总组分（A、B、C、D）为96.9%。
实施例4
将十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）溶于乙酸乙酯中制成30mmol/L的CTAB-乙酸乙酯溶液作为反胶束萃取系统。
取 4L 效价为 70000U/ml 的酒石酸泰乐菌素反萃取液与 CTAB-乙酸乙酯溶液反胶束萃取系统按照体积比为 3:1 的比例混合，在 50℃条件下，对酒石酸泰乐菌素进行缓慢搅拌萃取 35min 后，静置分相，得到含有酒石酸泰乐菌素的反胶束萃相1.3L，效价为238523U/ml。
向反胶束萃取相中加入0.056kg NaCl（酒石酸泰乐菌素反萃取液十亿的二十万分之一）使酒石酸泰乐菌素从反胶束中结晶析出从而使酒石酸泰乐菌素与反胶束体系得到分离。过滤、干燥得到成品。萃取收率为96.9%，A组分含量为87.6%，总组分（A、B、C、D）为96.9%。
对比实施例1
用25%氢氧化钙溶液调节酒石酸泰乐菌素反萃取的pH至6.8，再加入反萃取液体积3‰（单位：kg）的活性炭和硅藻土进行脱色，用板框进行初过滤和复过滤得到精制液，精制液采用喷雾干燥的方法除去溶剂得到酒石酸泰乐菌素成品。结晶收率为93.3%，A组分含量为85.0%，总组分为95.7%。
对比实施例2
用20%氢氧化钙溶液调节酒石酸泰乐菌素反萃取的pH至6.7，再加入反萃取液体积5‰（单位：kg）的活性炭和硅藻土进行脱色，用板框进行初过滤和复过滤得到精制液，精制液采用喷雾干燥的方法除去溶剂得到酒石酸泰乐菌素成品。结晶收率为93.7%，A组分含量为86.1%，总组分为94.9%。
对比实施例3
用30%氢氧化钙溶液调节酒石酸泰乐菌素反萃取的pH至7.3，再加入反萃取液体积4‰（单位：kg）的活性炭和硅藻土进行脱色，用板框进行初过滤和复过滤得到精制液，精制液采用喷雾干燥的方法除去溶剂得到酒石酸泰乐菌素成品。结晶收率为93.5%，A组分含量为85.4%，总组分为94.8%。

Claims (6)

1.一种酒石酸泰乐菌素的纯化方法，其特征在于其工艺步骤为：
1）将十六烷基三甲基溴化铵溶于乙酸乙酯中配置成反胶束萃取系统；
2）将酒石酸泰乐菌素反萃取液与上述过程1）所得的反胶束萃取系统混合，缓慢搅拌萃取，静置分相，得到含有酒石酸泰乐菌素的反胶束萃取相；
3）在上述反胶束萃取相中加入无机盐结晶，过滤，干燥即可得到酒石酸泰乐菌素。
2.按照权利要求1所述的酒石酸泰乐菌素的纯化方法，其特征在于所述反胶束萃取系统的浓度为5~30mmol/L。
3.按照权利要求1所述的酒石酸泰乐菌素的纯化方法，其特征在于所述酒石酸泰乐菌素反萃取液和反胶束萃取系统的混合比例为1~3:1~3，以体积比计。
4.按照权利要求1所述的酒石酸泰乐菌素的纯化方法，其特征在于，过程2）中，所述萃取时，控制萃取温度30~60℃，萃取时间15~40min。
5.按照权利要求1所述的酒石酸泰乐菌素的纯化方法，其特征在于，过程3）中，所述无机盐为NaCl、NaH2PO4或Na2HPO4。
6.按照权利要求1或5所述的酒石酸泰乐菌素的纯化方法，其特征在于所述无机盐用量为酒石酸泰乐菌素反萃取液中酒石酸泰乐菌素折干十亿的二十万分 之一至三十万分之一。
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Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3318867A (en) * 1964-08-20 1967-05-09 Upjohn Co Process for separating nitrogen-basic materials from aqueous solution
US5100662A (en) * 1989-08-23 1992-03-31 The Liposome Company, Inc. Steroidal liposomes exhibiting enhanced stability
CN1224021A (zh) * 1998-01-22 1999-07-28 清华大学 用环烷酸萃取体系提取和纯化抗生素
US20080051326A1 (en) * 2004-11-12 2008-02-28 Alexander Dylan C Antiinfective Lipopeptides
CN102703549A (zh) * 2012-06-05 2012-10-03 宁夏泰瑞制药股份有限公司 一种提高泰乐菌素组分a转化率的方法
CN103275155A (zh) * 2013-06-28 2013-09-04 宁夏泰瑞制药股份有限公司 一种泰乐菌素磷酸盐或酒石酸盐晶体的制备方法
WO2017123315A2 (en) * 2016-01-12 2017-07-20 Aradigm Corporation Nanocrystals formed in a microenvironment
CN111004293A (zh) * 2019-11-21 2020-04-14 宁夏泰益欣生物科技有限公司 一种克林霉素磷酸酯的纯化方法

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3318867A (en) * 1964-08-20 1967-05-09 Upjohn Co Process for separating nitrogen-basic materials from aqueous solution
US5100662A (en) * 1989-08-23 1992-03-31 The Liposome Company, Inc. Steroidal liposomes exhibiting enhanced stability
CN1224021A (zh) * 1998-01-22 1999-07-28 清华大学 用环烷酸萃取体系提取和纯化抗生素
US20080051326A1 (en) * 2004-11-12 2008-02-28 Alexander Dylan C Antiinfective Lipopeptides
CN102703549A (zh) * 2012-06-05 2012-10-03 宁夏泰瑞制药股份有限公司 一种提高泰乐菌素组分a转化率的方法
CN103275155A (zh) * 2013-06-28 2013-09-04 宁夏泰瑞制药股份有限公司 一种泰乐菌素磷酸盐或酒石酸盐晶体的制备方法
WO2017123315A2 (en) * 2016-01-12 2017-07-20 Aradigm Corporation Nanocrystals formed in a microenvironment
CN111004293A (zh) * 2019-11-21 2020-04-14 宁夏泰益欣生物科技有限公司 一种克林霉素磷酸酯的纯化方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
商瑞等: "农用抗生素分离纯化的研究进展", 《广东农业科学》 *
王等: "抗生素提取技术及研究进展", 《中国抗生素杂志》 *

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