CN112569280A - 一种黄连大黄组合物在制备治疗肝损伤药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种黄连大黄组合物在制备治疗肝损伤药物中的应用。该黄连大黄组合物按重量份计包括50～200份黄连提取物和50～200份大黄提取物。本发明运用传统医药宝库，选用纯中药治疗肝损伤，按照中医基础理论组方，经严格筛选，结合现代先进工艺制法组合而成，该组合物可达到治疗肝损伤的药效。经过动物模型实验证明，黄连和大黄配合作用，能够修复模型小鼠急性肝损伤和大鼠黄疸性肝损伤，对于发展利肝护胆相关药物的中成药具有广阔的应用前景。

Description

一种黄连大黄组合物在制备治疗肝损伤药物中的应用
技术领域
本发明涉及中药组合物技术领域，尤其涉及一种黄连大黄组合物在制备治疗肝损伤药物中的应用。
背景技术
中药治疗肝炎不仅毒副作用小，而且在降脂、降酶、保肝、利胆、抗纤维化、减轻肝组织炎症、修复受损的肝细胞、降低纤维化程度、从而阻止其病变的进一步发展并使肝脏功能恢复等方面显示出其独特的优势。但是，由于肝炎疾病防治的复杂性，目前还缺乏疗效确切的肝炎治疗药物，研究开发治疗肝炎的优良中药具有十分重要的意义。
发明内容
有鉴于此，有必要提供一种黄连大黄组合物在制备治疗肝损伤药物中的应用，该黄连大黄组合物用以解决现有中药作用疗效不显著，作用单一，针对性较差和治疗周期长的问题。
本发明提供一种黄连大黄组合物在制备治疗肝损伤药物中的应用，所述黄连大黄组合物按重量份计包括50～200份黄连提取物和50～200份大黄提取物。
具体的，所述黄连提取物的制备步骤为：
取黄连药材，干燥，粉碎成粗粉，用乙醇溶液回流提取，过滤得滤液，浓缩至稠膏状，冷冻干燥，粉碎，即得黄连有效成分提取物。
进一步的，所述乙醇溶液体积浓度为60～80％，使用量为7～10倍质量的黄连药材。
具体的，所述大黄提取物的制备步骤为：
取大黄药材，干燥，粉碎成粗粉，加水回流提取，过滤得滤液，进行第一次浓缩；
加入乙醇进行沉淀处理，静置分层，去上层清液进行第二次浓缩；
第二次浓缩液进行萃取，得萃取液与醇沉物混合均匀后，减压干燥，粉碎，即得大黄有效成分提取物。
进一步的，所述大黄提取物的制备步骤中相关的控制条件为：
加水量为大黄药材质量7～10倍量；
第一次浓缩条件为：于50℃下浓缩至密度1.0～1.2g/mL的浓缩液；
乙醇沉淀处理的调节为：加入体积量为6～8倍第一次浓缩液体积量的乙醇，静置时间为34h以上；
第二次浓缩条件为：于50℃下取乙醇沉淀后的上清液减压浓缩，回收乙醇至浓缩液密度为1.0～1.2g/mL；
萃取条件为：采用1.0～1.65倍体积量的正丁醇萃取。
进一步的，所述黄连大黄组合物按重量份计还包括0.4～1份淀粉、0.1～0.5份环糊精、0.01～0.1份微晶纤维素。
更进一步的，所述的黄连大黄组合物按重量份计还包括0.1～0.5份滑石粉。
有益效果：
本发明运用传统医药宝库，选用纯中药治疗肝损伤，按照中医基础理论组方，经严格筛选，结合现代先进工艺制法组合而成，该组合物可达到治疗肝损伤的药效。经过动物模型实验证明，黄连和大黄配合作用，能够修复模型小鼠急性肝损伤和大鼠黄疸性肝损伤，对于发展利肝护胆相关药物的中成药具有广阔的应用前景。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
黄连大黄组合物
本发明实施例提供一种黄连大黄组合物，按重量份计包括50～200份黄连提取物和50～200份大黄提取物。
黄连为毛茛科植物黄连Coptis chinensis franch.、三角叶黄连Coptisdeltoidea C.Y.Cheng et Hsiao或云连Coptis teeta wall.的干燥根茎。黄连为清热解毒要药，主要用于湿热痞满，呕吐吞酸，泻痢，黄疸，高热神昏，心烦不寐，血热吐衄，痈肿疖疮，目赤牙痛，消渴，外治湿疹、湿疮、耳道流脓。主要含有盐酸小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀等生物碱，其中小檗碱为其主要有效成分。药材的道地性是影响药材品质的重要因素之一。
大黄为蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatum L.、唐古特大黄Rheum tanguticumMaxim.ex Balf.或药用大黄Rheum officinale Baill.的干燥根及根茎。大黄具有泻下攻积，清热泻火，凉血解毒，逐瘀通经，利胆退黄的功效。大黄主要用于实热积滞便秘，血热吐衄，目赤咽肿，痈肿疔疮，肠痈腹痛，淤血经闭，产后瘀阻，跌打损伤，湿热痢疾，黄疸尿赤，淋证，水肿等。主要含有蒽醌及其苷类、蒽酮及其苷类、二苯乙烯类、多糖类等化学成分。
本发明以中国药典一部收载的黄连、大黄为研究开发的原料药材，为临床有效验方；以中医理论与现代药理学研究成果为指导，结合临床实践，通过疗效、药理学研究显示：二者配伍后应用，抗肝损伤作用优于单方。
黄连具有清热燥湿，泻火解毒的功效；大黄具有泻下攻积，清热泻火，凉血解毒，逐瘀通经，利胆退黄的功效。二者配伍，以黄连为君药，善守，配伍大黄，善下行，二药相须为用，一走一守，降火泻热，凉血解毒之力大增，既能清气分实热，又能泻血分火毒，且具有下结除滞、涤肠通便之功；二药合用，发挥协同作用，较之单味药物的疗效更佳，并可以发挥中医药的配伍优势，降低副作用并提高疗效。本发明是发掘祖国传统医药学宝库，选用纯中药治疗肝损伤，按照中医基础理论组方，经严格筛选，结合现代先进工艺制法组合而成，该组合物可达到治疗肝损伤的药效。
具体的，本发明提供的黄连提取物的具体制备步骤为：
取黄连药材，干燥，粉碎成粗粉，用乙醇溶液回流提取，过滤得滤液，浓缩至稠膏状，冷冻干燥，粉碎，即得黄连有效成分提取物。其中，乙醇溶液体积浓度为60～80％，使用量为8～15倍质量的黄连药材。优选的，乙醇溶液体积浓度为65％，使用量为9倍质量的黄连药材。
具体的，本发明提供的大黄提取物的具体制备步骤为：
取大黄药材，干燥，粉碎成粗粉，加水回流提取，过滤得滤液，进行第一次浓缩；
加入乙醇进行沉淀处理，静置分层，去上层清液进行第二次浓缩；
第二次浓缩液进行萃取，得萃取液与醇沉物混合均匀后，减压干燥，粉碎，即得大黄有效成分提取物。
进一步的，大黄提取物的制备步骤中相关的控制条件为：
加水量为大黄药材质量5～15倍量；
第一次浓缩条件为：于50℃下浓缩至密度1.0～1.2g/mL的浓缩液；优选地，浓缩至浓缩液的密度为1.15g/mL；
乙醇沉淀处理的调节为：加入体积量为3～7倍第一次浓缩液体积量的乙醇，静置时间为34h以上；优选地，乙醇的加入量为5倍第一次浓缩液体积量；
第二次浓缩条件为：于50℃下取乙醇沉淀后的上清液减压浓缩，回收乙醇至浓缩液密度为1.0～1.2g/mL；优选地，减压浓缩至浓缩液密度为1.12mg/mL；
萃取条件为：采用1.0～2.0倍体积量的正丁醇萃取；优选地，采用1.5倍体积量的正丁醇进行萃取。
进一步的，本发明实施例提供的黄连大黄组合物按重量份计还包括0.4～1份淀粉、0.1～0.5份环糊精、0.01～0.1份微晶纤维素。
进一步的，本发明实施例提供的按重量份计还包括0.1～0.5份滑石粉。
本发明实施例还提供一种用于治疗肝损伤的复方制剂，包括将上述述黄连大黄组合物及药学上可接受的辅料；制剂为胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、口服液等口服制剂或注射剂型。
为便于将上述关于黄连大黄组合物的具体实施例进行统计和分析，将其列入表1-2。表1列举了黄连提取步骤和大黄提取步骤条件不同的实施例，表2列举了黄连大黄组合物配方不同的实施例。
表1
Figure BDA0002850555840000051
Figure BDA0002850555840000061
表2
Figure BDA0002850555840000062
Figure BDA0002850555840000071
黄连大黄组合物修复肝损伤作用
阳性对照药品；取肝加欣片，临用前用0.5％CMC-Na配制成所需浓度混悬液备用。
复方黄连组合物；取上述实施例和对比例制备的黄连大黄组合物，临用前用0.5％CMC-Na配制成所需浓度混悬液备用。
实验动物：SPF级昆明种小鼠，体重20±2g。
实验方法：小鼠适应性喂养2天，随机分成8组，分别为正常对照组、模型对照组、GJX组(阳性药对照组)和治疗组，每组雌雄各半。
CCl4致急性肝损伤：各给药组每日灌胃给药2次，GJX组给药剂量为500.0mg/kg，治疗组给药剂量分别为30.0mg/kg，HL组给药剂量为30mg/kg，DH组给药剂量为30mg/kg，正常对照组、模型对照组给予同体积0.5％CMC-Na溶液，连续给药6天，于末次给药后2小时造模。除空白对照组外，其余各组腹腔注射0.15％四氯化碳豆油溶液0.2ml/10g体重，造模后禁食不禁水15小时之后摘眼球取血，取离心血清测定谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)，结果见表1，统计方法采用组间比较t检验。
异硫氰酸1-萘酯致肝损伤：各给药组每日灌胃给药2次，GJX组给药剂量为400.0mg/kg，治疗组合物给药剂量分别为24.0mg/kg，正常对照组、模型对照组给予同体积0.5％CMC-Na溶液，连续给药3天，于第一次给药后禁食不禁水24小时。除空白对照组外，其余各组腹腔注射异硫氰酸1-萘酯60mg/kg体重(造模体积1ml/100g)，造模1小时后给予动物饲料。末次给药后禁食16小时，股动脉取血处死大鼠，取离心血清测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)活性，结果见表3，统计方法采用组间比较t检验。
表3复方黄连组合组修复肝损伤作用(X±SD),
与模型组对照比较：*表示p<0.05，**表示p<0.01
Figure BDA0002850555840000081
Figure BDA0002850555840000091
由表3可知：
1、四氯化碳能够导致小鼠血清转氨酶显著升高，与对照组比较，有统计学差异，证明造模成功。异硫氰酸1-萘酯能够导致大鼠血清转氨酶和碱性磷酸酶显著升高，与对照组比较，有统计学差异，证明造模成功。
2、黄连大黄组合物治疗组中实施例1～18均能使得四氯化碳及异硫氰酸1-萘酯致小鼠肝损伤的相关酶活性显著低于模型对照组，与阳性对照组水平相当。这说明，采用本发明提供的黄连大黄组合物能够修复四氯化碳致使的急性肝损伤及异硫氰酸1-萘酯致大鼠黄疸性肝损伤。
3、进一步比较发现，实施例1～18中，实施例1～14提供的组合物对于降低各种相关酶酶活具有更佳的效果，且实施例2提供的组合物对于的相关酶活最低。这表明，当黄连提取物和大黄提取物以重量份200份和100份混合的组合物，其对肝脏保护作用最佳；且对应的黄连提取物和大黄提取物必须采用本发明提供的提取方法。
4、进一步比较发现，相对于实施例1～18，对比例1～16提供的组合物无法显著降低各种相关酶酶活，且对比例13、14基本与模型对照组水平相当。这表明，当黄连提取物和大黄提取物未以本发明限定的配方量进行混合时，其无法产生对肝脏的修复作用，二者用量需要精密配合才能实现该功能。这与“黄连作为君药，善守，配伍大黄，善下行，二药相须为用”的中药理论不谋而合。
5、进一步发现，对比例5和6在大黄提取过程中第一次浓缩未在上述限定的范围内，对比例9和10第二次浓缩后的浓度并未在上述限定的范围内。这导致对比5和6在四氯化碳致损伤的作用中，ALT酶酶活突然显著升高，甚至高于模型对照组；而对比例9和10在异硫氰酸1-萘酯致肝损伤的作用中，ALP酶酶活奇异地显著高于模型对照组。这一现象可能与第一次浓缩过程中过高或过低的浓缩液密度，可能导致蛋黄黄总鞣质类和有机酸类的浓度不同，进而在经过乙醇沉淀处理后，再进行第二次浓缩使得最终的提取物中这两种物质含量发生了显著变化，进而影响最终提取物对肝损伤酶活升高的作用发生显著变化。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种黄连大黄组合物在制备治疗肝损伤药物中的应用，其特征在于，所述黄连大黄组合物按重量份计包括50～200份黄连提取物和50～200份大黄提取物。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述黄连提取物的制备步骤为：
取黄连药材，干燥，粉碎成粗粉，用乙醇溶液回流提取，过滤得滤液，浓缩至稠膏状，冷冻干燥，粉碎，即得黄连有效成分提取物。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述乙醇溶液体积浓度为60～80％，使用量为7～10倍质量的黄连药材。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述大黄提取物的制备步骤为：
取大黄药材，干燥，粉碎成粗粉，加水回流提取，过滤得滤液，进行第一次浓缩；
加入乙醇进行沉淀处理，静置分层，去上层清液进行第二次浓缩；
第二次浓缩液进行萃取，得萃取液与醇沉物混合均匀后，减压干燥，粉碎，即得大黄有效成分提取物。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述大黄提取物的制备步骤中相关的控制条件为：
加水量为大黄药材质量7～10倍量；
第一次浓缩条件为：于50℃下浓缩至密度1.0～1.2g/mL的浓缩液；
乙醇沉淀处理的调节为：加入体积量为6～8倍第一次浓缩液体积量的乙醇，静置时间为34h以上；
第二次浓缩条件为：于50℃下取乙醇沉淀后的上清液减压浓缩，回收乙醇至浓缩液密度为1.0～1.2g/mL；
萃取条件为：采用1.0～1.65倍体积量的正丁醇萃取。
6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述黄连大黄组合物按重量份计还包括0.4～1份淀粉、0.1～0.5份环糊精、0.01～0.1份微晶纤维素。
7.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述黄连大黄组合物按重量份计还包括0.1～0.5份滑石粉。
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