CN112500538A - 一种甜菊糖苷ra分离纯化用分子印迹材料及其应用 - Google Patents

一种甜菊糖苷ra分离纯化用分子印迹材料及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN112500538A
CN112500538A CN202011354644.2A CN202011354644A CN112500538A CN 112500538 A CN112500538 A CN 112500538A CN 202011354644 A CN202011354644 A CN 202011354644A CN 112500538 A CN112500538 A CN 112500538A
Authority
CN
China
Prior art keywords
stevioside
molecularly imprinted
graphene oxide
imprinted material
separating
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202011354644.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN112500538B (zh
Inventor
邢飞
邢伟
王淑娟
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Bengbu Huadong Biological Technology Co ltd
Original Assignee
Bengbu Huadong Biological Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bengbu Huadong Biological Technology Co ltd filed Critical Bengbu Huadong Biological Technology Co ltd
Priority to CN202011354644.2A priority Critical patent/CN112500538B/zh
Publication of CN112500538A publication Critical patent/CN112500538A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN112500538B publication Critical patent/CN112500538B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
    • C08F292/00—Macromolecular compounds obtained by polymerising monomers on to inorganic materials
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/22—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising organic material
    • B01J20/26—Synthetic macromolecular compounds
    • B01J20/268—Polymers created by use of a template, e.g. molecularly imprinted polymers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
    • C07H1/06—Separation; Purification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/20—Carbocyclic rings
    • C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
    • C07H15/256—Polyterpene radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J9/00—Working-up of macromolecular substances to porous or cellular articles or materials; After-treatment thereof
    • C08J9/26—Working-up of macromolecular substances to porous or cellular articles or materials; After-treatment thereof by elimination of a solid phase from a macromolecular composition or article, e.g. leaching out
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J2201/00—Foams characterised by the foaming process
    • C08J2201/04—Foams characterised by the foaming process characterised by the elimination of a liquid or solid component, e.g. precipitation, leaching out, evaporation
    • C08J2201/042—Elimination of an organic solid phase
    • C08J2201/0422—Elimination of an organic solid phase containing oxygen atoms, e.g. saccharose
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J2351/00—Characterised by the use of graft polymers in which the grafted component is obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds; Derivatives of such polymers
    • C08J2351/10—Characterised by the use of graft polymers in which the grafted component is obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds; Derivatives of such polymers grafted on to inorganic materials

Abstract

本发明提出了一种甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料及其应用，所述分子印迹材料是采用下述方法制备得到：将含乙烯基的硅烷偶联剂与氧化石墨烯进行表面修饰反应，得到乙烯基功能化的氧化石墨烯；将乙烯基功能化的氧化石墨烯与模板分子甜菊糖苷RA、4‑乙烯基吡啶、4‑乙烯基苯硼酸以及乙二醇二甲基丙烯酸酯在乙腈中进行聚合反应后，再脱除模板分子，即得到所述甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料。本发明所述分子印迹材料对甜菊糖苷RA这一特定组分具有优异的特异选择性，因此可以获得高效的分离纯化效率。

Description

一种甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料及其应用
技术领域
本发明涉及分离纯化技术领域，尤其涉及一种甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料及其应用。
背景技术
甜叶菊(Stevia rebaudiana Bertoni)又称甜草、甜菊等，原产于巴拉圭、巴西等国家，其叶含有甜菊糖苷，甜菊糖苷是一种高甜度、低热量的新型天然甜味剂，主要是从菊科植物甜叶菊的叶子中提取的几种甜叶菊糖苷的混合物，主要成分是Rebaudioside A(RA)—莱鲍迪苷A。由于来自甜叶菊的甜菊糖苷类化合物因其甜度高、热量低、无毒性、耐高温、耐酸碱和水溶性好等优点，因此受到了科学界、产业界等多个领域的广泛重视，其中含量相对丰富的莱鲍迪苷A(甜菊糖苷RA)、甜菊糖等已广泛应用于饮料、食品、调味剂、酒类、乳制品等食品加工领域。
随着甜菊糖苷的需求不断扩大，提高甜菊糖苷的产量越来越显得重要，特别是能提高甜菊糖苷RA的产量。目前工业规模高纯RA生产，需经过甜菊糖苷提取、提取液除杂脱色、RA重结晶分离纯化等多步工艺，才可得到纯度不低于90％的RA产品。由于多步工艺存在耗时较长、有机溶剂污染等问题，造成了现有分离纯化技术的选择性不强，操作步骤多，耗时费力等问题。
分子印迹技术是一种对于目标分子具有特异性识别的技术，对于目标分子它具有选择性分离和提取的能力而越来受到广大关注。现有技术中虽然公开有分子印迹聚合物来对甜菊糖苷RA进行识别并吸附选择，但由于甜叶菊中含有多种与莱鲍迪苷A结构相近的类化合物，其对莱鲍迪苷A的识别能力和吸附选择性还有待加强。
发明内容
基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料及应用，该分子印迹材料对甜菊糖苷RA这一特定组分具有优异的特异选择性，因此可以获得高效的分离纯化效率。
本发明提出的一种甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料，该分子印迹材料是采用下述方法制备得到：
将含乙烯基的硅烷偶联剂与氧化石墨烯进行表面修饰反应，得到乙烯基功能化的氧化石墨烯；将乙烯基功能化的氧化石墨烯与模板分子甜菊糖苷RA、4-乙烯基吡啶、4-乙烯基苯硼酸以及乙二醇二甲基丙烯酸酯在乙腈中进行聚合反应后，再脱除模板分子，即得到所述甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料。
优选地，所述含乙烯基的硅烷偶联剂为3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷。
优选地，所述含乙烯基的硅烷偶联剂与氧化石墨烯的质量体积比为1g:0.1-1mL。
优选地，所述乙烯基功能化的氧化石墨烯具体是通过将氧化石墨烯与3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷分散于乙醇中，再在60-80℃下反应2-6h得到。
优选地，所述乙烯基功能化的氧化石墨烯与模板分子甜菊糖苷RA、4-乙烯基吡啶、4-乙烯基苯硼酸以及乙二醇二甲基丙烯酸酯的用量比为3-7g:1g:6-9g:1-3g:33-48g；
所述乙烯基功能化的氧化石墨烯与乙腈的质量体积比为1g:120-220mL。
优选地，所述聚合反应的引发剂包括溴化铜、N，N，N'，N'，N”-五甲基二亚乙基三胺以及偶氮二异丁腈；
优选地，溴化铜、N，N，N'，N'，N”-五甲基二亚乙基三胺以及偶氮二异丁腈与乙二醇二甲基丙烯酸酯的用量比为0.01-0.1g:0.01-0.1g:0.01-0.2g:1g。
优选地，所述聚合反应的温度为40-60℃，时间为10-16h。
优选地，所述脱除模板分子的洗脱剂为甲醇和乙酸的混合溶剂，其体积比优选为8:2。
本发明提出一种分离纯化甜菊糖苷RA的方法，其包括：将权利要求1-9任一项所述分子印迹材料装柱后，再对包含甜菊糖苷RA的样品溶液进行过柱处理。
优选地，所述包含甜菊糖苷RA的样品溶液为甜叶菊水提液。
本发明所述分子印迹材料通过含乙烯基的硅烷偶联剂对氧化石墨烯进行表面修饰，硅烷偶联剂与氧化石墨烯反应生成Si-O-Si共价键，因此可将乙烯基接枝于石墨烯表面，此后再将乙烯基功能化的氧化石墨烯与功能单体4-乙烯基吡啶、4-乙烯基苯硼酸以及模板分子(甜菊糖苷RA)在一定条件下进行聚合，使功能单体以及氧化石墨烯很好地与模板分子相结合，之后再进行洗脱时就会在聚合物表面形成与模板分子(甜菊糖苷RA)专一性识别的空洞，这种空洞可以专一性识别模板分子(甜菊糖苷RA)。
本发明中，一方面，采用乙烯基功能化的氧化石墨烯参与印迹材料的聚合反应，其可以有效控制分子印迹聚合物的形貌呈现，从而有效地提高分子印迹材料的比表面积，增加了印迹位点和吸附效率；另一方面，采用4-乙烯基吡啶、4-乙烯基苯硼酸的功能单体，二者与模板分子(甜菊糖苷RA)之间形成可逆共价键和氢键的协同效应，因此大大改善了分子印迹材料对模板分子(甜菊糖苷RA)的选择性，具有更加显著的模板分子识别性能和抗干扰能力。
具体实施方式
下面，通过具体实施例对本发明的技术方案进行详细说明，但是应该明确提出这些实施例用于举例说明，但是不解释为限制本发明的范围。
实施例1
本实施例提出的一种甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料，其是采用下述方法制备得到：
S1、将1g鳞片石墨和120mL浓硫酸、15mL浓磷酸混匀后，加入6g KMnO4在30℃下搅拌反应1.5h，再滴加H2O2(30wt％)溶液，至反应液变为金黄色，加入盐酸后离心洗涤，去离子水洗涤至pH呈中性，干燥，得到氧化石墨烯；将1g氧化石墨烯加入到30mL乙醇中超声分散均匀，再加入0.5mL 3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷，在80℃下搅拌反应4h，蒸干溶剂后，乙醇洗涤，60℃下真空干燥过夜，得到乙烯基功能化的氧化石墨烯；
S2、将1g乙烯基功能化的氧化石墨烯、0.2g甜菊糖苷RA、1.5g 4-乙烯基吡啶、0.4g4-乙烯基苯硼酸和8g乙二醇二甲基丙烯酸酯加入180mL乙腈中，室温下超声分散均匀，得到混合溶液；在混合溶液中通氮气排空氧气后，再加入0.2g溴化铜，0.3g N，N，N'，N'，N”-五甲基二亚乙基三胺和0.4g偶氮二异丁腈，密封条件下，在50℃水浴振荡器中振荡反应12h，冷却至室温后，将所得产物洗涤，烘干，研磨成粉，再用甲醇/乙酸(8/2，v/v)的混合溶剂索氏提取24h，除去模板分子甜菊糖苷RA，直到洗脱剂中检测不到模板分子，再用甲醇洗涤至中性，60℃下真空干燥过夜，得到所述甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料。
实施例2
本实施例提出的一种甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料，其是采用下述方法制备得到：
S1、将1g鳞片石墨和120mL浓硫酸、15mL浓磷酸混匀后，加入6g KMnO4在30℃下搅拌反应1.5h，再滴加H2O2(30wt％)溶液，至反应液变为金黄色，加入盐酸后离心洗涤，去离子水洗涤至pH呈中性，干燥，得到氧化石墨烯；将1g氧化石墨烯加入到30mL乙醇中超声分散均匀，再加入0.5mL 3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷，在80℃下搅拌反应4h，蒸干溶剂后，乙醇洗涤，60℃下真空干燥过夜，得到乙烯基功能化的氧化石墨烯；
S2、将1g乙烯基功能化的氧化石墨烯、0.15g甜菊糖苷RA、0.9g 4-乙烯基吡啶、0.45g 4-乙烯基苯硼酸和5g乙二醇二甲基丙烯酸酯加入120mL乙腈中，室温下超声分散均匀，得到混合溶液；在混合溶液中通氮气排空氧气后，再加入0.5g溴化铜，0.5g N，N，N'，N'，N”-五甲基二亚乙基三胺和0.5g偶氮二异丁腈，密封条件下，在40℃水浴振荡器中振荡反应16h，冷却至室温后，将所得产物洗涤，烘干，研磨成粉，再用甲醇/乙酸(8/2，v/v)的混合溶剂索氏提取24h，除去模板分子甜菊糖苷RA，直到洗脱剂中检测不到模板分子，再用甲醇洗涤至中性，60℃下真空干燥过夜，得到所述甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料。
实施例3
本实施例提出的一种甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料，其是采用下述方法制备得到：
S1、将1g鳞片石墨和120mL浓硫酸、15mL浓磷酸混匀后，加入6g KMnO4在30℃下搅拌反应1.5h，再滴加H2O2(30wt％)溶液，至反应液变为金黄色，加入盐酸后离心洗涤，去离子水洗涤至pH呈中性，干燥，得到氧化石墨烯；将1g氧化石墨烯加入到30mL乙醇中超声分散均匀，再加入0.5mL 3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷，在80℃下搅拌反应4h，蒸干溶剂后，乙醇洗涤，60℃下真空干燥过夜，得到乙烯基功能化的氧化石墨烯；
S2、将1g乙烯基功能化的氧化石墨烯、0.3g甜菊糖苷RA、2.7g 4-乙烯基吡啶、0.3g4-乙烯基苯硼酸和14g乙二醇二甲基丙烯酸酯加入220mL乙腈中，室温下超声分散均匀，得到混合溶液；在混合溶液中通氮气排空氧气后，再加入0.15g溴化铜，0.2g N，N，N'，N'，N”-五甲基二亚乙基三胺和0.5g偶氮二异丁腈，密封条件下，在60℃水浴振荡器中振荡反应10h，冷却至室温后，将所得产物洗涤，烘干，研磨成粉，再用甲醇/乙酸(8/2，v/v)的混合溶剂索氏提取24h，除去模板分子甜菊糖苷RA，直到洗脱剂中检测不到模板分子，再用甲醇洗涤至中性，60℃下真空干燥过夜，得到所述甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料。
对比例1
本对比例提出的一种甜菊糖苷RA分离纯化用非分子印迹材料，其是采用下述方法制备得到：
S1、将1g鳞片石墨和120mL浓硫酸、15mL浓磷酸混匀后，加入6g KMnO4在30℃下搅拌反应1.5h，再滴加H2O2(30wt％)溶液，至反应液变为金黄色，加入盐酸后离心洗涤，去离子水洗涤至pH呈中性，干燥，得到氧化石墨烯；将1g氧化石墨烯加入到30mL乙醇中超声分散均匀，再加入0.5mL 3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷，在80℃下搅拌反应4h，蒸干溶剂后，乙醇洗涤，60℃下真空干燥过夜，得到乙烯基功能化的氧化石墨烯；
S2、将1g乙烯基功能化的氧化石墨烯、1.5g 4-乙烯基吡啶、0.4g 4-乙烯基苯硼酸和8g乙二醇二甲基丙烯酸酯加入180mL乙腈中，室温下超声分散均匀，得到混合溶液；在混合溶液中通氮气排空氧气后，再加入0.2g溴化铜，0.3g N，N，N'，N'，N”-五甲基二亚乙基三胺和0.4g偶氮二异丁腈，密封条件下，在50℃水浴振荡器中振荡反应12h，冷却至室温后，将所得产物洗涤，烘干，研磨成粉，得到所述甜菊糖苷RA分离纯化用非分子印迹材料。
对比例2
本对比例提出的一种甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料，其是采用下述方法制备得到：
S1、将1g鳞片石墨和120mL浓硫酸、15mL浓磷酸混匀后，加入6g KMnO4在30℃下搅拌反应1.5h，再滴加H2O2(30wt％)溶液，至反应液变为金黄色，加入盐酸后离心洗涤，去离子水洗涤至pH呈中性，干燥，得到氧化石墨烯；
S2、将1g氧化石墨烯、0.2g甜菊糖苷RA、1.5g 4-乙烯基吡啶、0.4g 4-乙烯基苯硼酸和8g乙二醇二甲基丙烯酸酯加入180mL乙腈中，室温下超声分散均匀，得到混合溶液；在混合溶液中通氮气排空氧气后，再加入0.2g溴化铜，0.3g N，N，N'，N'，N”-五甲基二亚乙基三胺和0.4g偶氮二异丁腈，密封条件下，在50℃水浴振荡器中振荡反应12h，冷却至室温后，将所得产物洗涤，烘干，研磨成粉，再用甲醇/乙酸(8/2，v/v)的混合溶剂索氏提取24h，除去模板分子甜菊糖苷RA，直到洗脱剂中检测不到模板分子，再用甲醇洗涤至中性，60℃下真空干燥过夜，得到所述甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料。
对比例3
本对比例提出的一种甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料，其是采用下述方法制备得到：
S1、将1g鳞片石墨和120mL浓硫酸、15mL浓磷酸混匀后，加入6g KMnO4在30℃下搅拌反应1.5h，再滴加H2O2(30wt％)溶液，至反应液变为金黄色，加入盐酸后离心洗涤，去离子水洗涤至pH呈中性，干燥，得到氧化石墨烯；将1g氧化石墨烯加入到30mL乙醇中超声分散均匀，再加入0.5mL 3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷，在80℃下搅拌反应4h，蒸干溶剂后，乙醇洗涤，60℃下真空干燥过夜，得到乙烯基功能化的氧化石墨烯；
S2、将1g乙烯基功能化的氧化石墨烯、0.2g甜菊糖苷RA、1.5g 4-乙烯基吡啶和8g乙二醇二甲基丙烯酸酯加入180mL乙腈中，室温下超声分散均匀，得到混合溶液；在混合溶液中通氮气排空氧气后，再加入0.2g溴化铜，0.3g N，N，N'，N'，N”-五甲基二亚乙基三胺和0.4g偶氮二异丁腈，密封条件下，在50℃水浴振荡器中振荡反应12h，冷却至室温后，将所得产物洗涤，烘干，研磨成粉，再用甲醇/乙酸(8/2，v/v)的混合溶剂索氏提取24h，除去模板分子甜菊糖苷RA，直到洗脱剂中检测不到模板分子，再用甲醇洗涤至中性，60℃下真空干燥过夜，得到所述甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料。
试验例1
一种分离纯化甜菊糖苷RA的方法，其具体包括：
(1)将甜叶菊干叶粉碎至30目后，按照料液比1:5加入500mL去离子水中，室温下(25℃)超声辅助提取20min(超声功率360W，每工作10s，停5s)，过滤，滤渣拧干后重复提取两次，合并滤液，得到甜叶菊水提液；
(2)将100mg实施例1制得的分子印迹材料加入3mL乙醇水(4:1，v/v)混合溶剂中，湿法装填到3mL色谱柱中，填料的顶端和底端分别盖装有聚丙烯筛板，用3mL的纯水淋洗后，将10mL上述经过精制处理的甜菊糖苷水提液以0.1mL/min的流速过柱上样，先采用20mL纯水进行洗脱，除去杂质，再采用3mL乙醇水(1:4，v/v)混合溶剂进行洗脱，除去甜菊糖S，最后采用6mL乙醇水(2:1，v/v)混合溶剂进行洗脱，收集洗脱液，分离得到甜菊糖苷RA，对其进行HPLC分析，其纯度为98.9％，回收率为95.1％。
甜菊糖苷RA的回收率(R，％)按下式计算：
Figure BDA0002802273580000091
其中，m0和m1分别为吸附到色谱柱上的甜菊糖苷RA的量和洗脱下来的甜菊糖苷RA的量。
试验例2
一种分离纯化甜菊糖苷RA的方法，除了采用100mg实施例2制得的分子印迹材料，其它操作和试验例1相同。
将分离得到的甜菊糖苷RA进行HPLC分析，其纯度为98.2％，回收率为95.6％。
试验例3
一种分离纯化甜菊糖苷RA的方法，除了采用100mg实施例3制得的分子印迹材料，其它操作和试验例1相同。
将分离得到的甜菊糖苷RA进行HPLC分析，其纯度为97.7％，回收率为96.3％。
试验例4
一种分离纯化甜菊糖苷RA的方法，除了采用100mg对比例1制得的非分子印迹材料，其它操作和试验例1相同。
将分离得到的甜菊糖苷RA进行HPLC分析，其纯度为57.2％，回收率为42.3％。
试验例5
一种分离纯化甜菊糖苷RA的方法，除了采用100mg对比例2制得的分子印迹材料，其它操作和试验例1相同。
将分离得到的甜菊糖苷RA进行HPLC分析，其纯度为61.1％，回收率为55.8％。
试验例6
一种分离纯化甜菊糖苷RA的方法，除了采用100mg对比例3制得的分子印迹材料，其它操作和试验例1相同。
将分离得到的甜菊糖苷RA进行HPLC分析，其纯度为80.5％，回收率为75.2％。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料，其特征在于，所述分子印迹材料是采用下述方法制备得到：
将含乙烯基的硅烷偶联剂与氧化石墨烯进行表面修饰反应，得到乙烯基功能化的氧化石墨烯；将乙烯基功能化的氧化石墨烯与模板分子甜菊糖苷RA、4-乙烯基吡啶、4-乙烯基苯硼酸以及乙二醇二甲基丙烯酸酯在乙腈中进行聚合反应后，再脱除模板分子，即得到所述甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料。
2.根据权利要求1所述甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料，其特征在于，所述含乙烯基的硅烷偶联剂为3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷。
3.根据权利要求1或2所述甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料，其特征在于，所述含乙烯基的硅烷偶联剂与氧化石墨烯的质量体积比为1g:0.1-1mL。
4.根据权利要求1-3任一项所述甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料，其特征在于，所述乙烯基功能化的氧化石墨烯具体是通过将氧化石墨烯与3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷分散于乙醇中，再在60-80℃下反应2-6h得到。
5.根据权利要求1-4任一项所述甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料，其特征在于，所述乙烯基功能化的氧化石墨烯与模板分子甜菊糖苷RA、4-乙烯基吡啶、4-乙烯基苯硼酸以及乙二醇二甲基丙烯酸酯的用量比为3-7g:1g:6-9g:1-3g:33-48g；
所述乙烯基功能化的氧化石墨烯与乙腈的质量体积比为1g:120-220mL。
6.根据权利要求1-5任一项所述甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料，其特征在于，所述聚合反应的引发剂包括溴化铜、N，N，N'，N'，N”-五甲基二亚乙基三胺以及偶氮二异丁腈；
优选地，溴化铜、N，N，N'，N'，N”-五甲基二亚乙基三胺以及偶氮二异丁腈与乙二醇二甲基丙烯酸酯的用量比为0.01-0.1g:0.01-0.1g:0.01-0.2g:1g。
7.根据权利要求1-6任一项所述甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料，其特征在于，所述聚合反应的温度为40-60℃，时间为10-16h。
8.根据权利要求1-7任一项所述甜菊糖苷RA分离纯化用分子印迹材料，其特征在于，所述脱除模板分子的洗脱剂为甲醇和乙酸的混合溶剂，其体积比优选为8:2。
9.一种分离纯化甜菊糖苷RA的方法，其特征在于，其包括：将权利要求1-9任一项所述分子印迹材料装柱后，再对包含甜菊糖苷RA的样品溶液进行过柱处理。
10.根据权利要求9所述的分离纯化甜菊糖苷RA的方法，其特征在于，所述包含甜菊糖苷RA的样品溶液为甜叶菊水提液。
CN202011354644.2A 2020-11-26 2020-11-26 一种甜菊糖苷ra分离纯化用分子印迹材料及其应用 Active CN112500538B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011354644.2A CN112500538B (zh) 2020-11-26 2020-11-26 一种甜菊糖苷ra分离纯化用分子印迹材料及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011354644.2A CN112500538B (zh) 2020-11-26 2020-11-26 一种甜菊糖苷ra分离纯化用分子印迹材料及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN112500538A true CN112500538A (zh) 2021-03-16
CN112500538B CN112500538B (zh) 2022-12-27

Family

ID=74966635

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202011354644.2A Active CN112500538B (zh) 2020-11-26 2020-11-26 一种甜菊糖苷ra分离纯化用分子印迹材料及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112500538B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114478666A (zh) * 2021-12-31 2022-05-13 蚌埠市华东生物科技有限公司 一种从甜叶菊中提取高纯甜菊糖苷的方法
CN114539561A (zh) * 2022-02-22 2022-05-27 武夷学院 一种石墨烯基铜离子印迹水凝胶的制备方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104098739A (zh) * 2013-04-09 2014-10-15 江南大学 莱鲍迪苷a分子印迹聚合物的制备方法
CN104262536A (zh) * 2014-09-15 2015-01-07 江苏大学 一种活性/可控氧化石墨烯表面离子印迹聚合物及其制备方法与应用
CN105440197A (zh) * 2016-01-08 2016-03-30 谱赛科（江西）生物技术有限公司 一种甜菊糖苷分离纯化的吸附树脂的制备方法及应用技术
CN110183574A (zh) * 2019-01-14 2019-08-30 苏州福赛思生物科技有限公司 一种苯硼酸基聚合物载体及其选择性吸附糖类物质的应用
CN110292915A (zh) * 2019-07-19 2019-10-01 华中师范大学 表面分子印迹石墨烯整体纤维及其制备方法和应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104098739A (zh) * 2013-04-09 2014-10-15 江南大学 莱鲍迪苷a分子印迹聚合物的制备方法
CN104262536A (zh) * 2014-09-15 2015-01-07 江苏大学 一种活性/可控氧化石墨烯表面离子印迹聚合物及其制备方法与应用
CN105440197A (zh) * 2016-01-08 2016-03-30 谱赛科（江西）生物技术有限公司 一种甜菊糖苷分离纯化的吸附树脂的制备方法及应用技术
CN110183574A (zh) * 2019-01-14 2019-08-30 苏州福赛思生物科技有限公司 一种苯硼酸基聚合物载体及其选择性吸附糖类物质的应用
CN110292915A (zh) * 2019-07-19 2019-10-01 华中师范大学 表面分子印迹石墨烯整体纤维及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
叶发银: "高纯度莱鲍迪苷A的制备和甜菊苷的酶法改性研究", 《中国优秀博硕士学位论文全文数据库 工程科技I辑》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114478666A (zh) * 2021-12-31 2022-05-13 蚌埠市华东生物科技有限公司 一种从甜叶菊中提取高纯甜菊糖苷的方法
CN114539561A (zh) * 2022-02-22 2022-05-27 武夷学院 一种石墨烯基铜离子印迹水凝胶的制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN112500538B (zh) 2022-12-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN112500538B (zh) 一种甜菊糖苷ra分离纯化用分子印迹材料及其应用
US10759827B2 (en) Method for separating and purifying mogroside V by subcritical water desorption technology
CN108690101A (zh) 用于富集衍生自甜叶菊的糖苷组合物中的新蛇菊苷b和/或新蛇菊苷d的方法
CN112341579B (zh) 一种甜菊糖苷分离纯化用吸附树脂及其应用
CN106967142B (zh) 一种同时提取罗汉果甜苷v、ⅵ和11-o基苷v的方法
CN108929408A (zh) 一种甜菊糖印迹材料的制备方法及应用
CN115197287A (zh) 综合提取甜茶中的甜茶苷、槲皮素和鞣花酸的方法及其应用
CN101100477A (zh) 一种从甜菊糖中提取高纯度莱鲍迪a甙的方法
CN107709346B (zh) 用于分离银胶菊的异戊二烯组分的方法
CN105199101B (zh) 一种二肽聚乙烯亚胺聚合物及其制备方法与应用
CN112500440B (zh) 一种从甜叶菊中提取莱鲍迪苷a的方法
JPS5852999B2 (ja) ステビオサイドノセイセイホウ
CN1616402A (zh) 一种绿原酸提取分离的方法
WO2016161686A1 (zh) 一种从脱脂麦胚中提取制备高纯度棉子糖的工艺
CN112851739B (zh) 一种从罗汉果、甜茶或甜叶菊絮凝渣中回收甜苷的方法
CN111072747A (zh) 一种人参皂苷及其超声提取方法
CN112300231B (zh) 一种提取高纯度甜菊糖苷的方法
CN101475621B (zh) 一种用色谱柱纯化氯法拉滨的方法
CN107032983A (zh) 一种利用大孔吸附树脂从发酵液中提取分离琥珀酸的方法
CN111153909A (zh) 一种粉防己中甲、乙素双模板分子印迹提纯方法
CN113784772B (zh) 从角豆提取物中分离松醇的方法
Li et al. Recovery of ganoderic acids from Ganoderma lucidum mycelia by macroporous adsorption resins
CN108033986B (zh) 甜菊素的制备方法
CN102875607B (zh) 一种棉籽糖的分离纯化方法
CN109499517A (zh) 一种类牡丹花状SnS纳米材料的制备方法及应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
PE01 Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right
PE01 Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right

Denomination of invention: A Molecular Imprinting Material for Separation and Purification of Stevia Glycoside RA and Its Application

Granted publication date: 20221227

Pledgee: Agricultural Bank of China Limited Wuhe County Branch

Pledgor: BENGBU HUADONG BIOLOGICAL TECHNOLOGY Co.,Ltd.

Registration number: Y2024980005085