CN112493365A - 一种添加海洋寡糖的宠物食品及制备方法 - Google Patents

一种添加海洋寡糖的宠物食品及制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种添加海洋寡糖的宠物食品及制备方法，原料包括以下组分：鸡胸肉泥63～89份、褐藻寡糖2～8份、牛肉泥5～10份、淀粉3～6份、植物油0.5～2份、食盐0.1～1份、水12～20份。本发明针对宠物肠道健康，添加平均分子量在3000范围内的褐藻寡糖，能显著促进双歧杆菌和乳酸杆菌等肠道益生菌的生长，抑制病原菌、腐败菌等有害菌的生长，起到了改善肠道微生态环境和净化肠道的作用，能提高免疫力，改善内分泌系统，促进营养物质的吸收，从而达到改善肠道感染等疾病；采用褐藻寡糖作为宠物食品添加剂，不但能够调节肠道菌群提高宠物自身免疫力，而且安全、绿色、无毒，利于规模化推广应用。

Description

一种添加海洋寡糖的宠物食品及制备方法
技术领域
本发明涉及宠物食品领域，具体地说是一种添加海洋寡糖的宠物食品及其制备方法。
背景技术
近年来，养宠物已经逐渐成为一种时尚，越来越多的家庭开始饲养宠物。宠物主人对待宠物也格外上心，像对待自己的孩子一样照顾。养宠物时需要给宠物喂食它们喜欢的食物，于是宠物食品受到越来越多人的关注，宠物食品行业也因此逐步发展。由线上宠物供应商进行的一项调查显示，尽管经济状况不好，宠物狗主人仍然会选择购买优质宠物食品。调查结果表明，有约70％的宠物狗主人会购买优质宠物食品。有30％的宠物狗主人会为因为狗的皮肤、体重、肠胃过敏、老龄等问题，从而选择购买特制宠物食品。目前，关于宠物食品的研究已经成为行业的热点。
褐藻寡糖（Alginate oligosaccharides），又名褐藻胶寡糖是由褐藻胶经过降解得到的低聚物。褐藻胶( Alginate) 是一种由 β-1，4-D-甘露糖醛酸( M) 和 α-1，4-L-古罗糖醛酸( G) 2 种单体通过1，4-糖苷键链接而成的线性多糖聚合物，主要来自于海带、马尾藻、巨藻等褐藻类植物，具有抗肿瘤、增强免疫、促生长等多种生理活性，但由于其自身是一种高聚合度的物质，分子质量较大，不易溶解，且黏度较大，实际应用有一定的局限性。褐藻胶分子结构中含有大量的羟基，酶解可以改变糖分子伸展结构，使糖羟基暴露，改善其性能。褐藻胶寡糖作为褐藻胶的降解产物，是由 2 ～ 20 个单糖分子通过糖苷键连接而成的聚合物，由于其相对分子质量低，具有溶解性能好、机体吸收利用率高、稳定性好等特性。目前关于褐藻寡糖在宠物食品中的应用研究相对较少，提升褐藻寡糖在宠物食品中的应用对于提升宠物食品营养价值、拓展海洋生物资源利用率具有重要意义。
发明内容
为了克服现有技术中的不足，本发明提供一种添加海洋寡糖的宠物食品及其制备方法，所述添加海洋寡糖的宠物食品安全、绿色、无毒，能够调节肠道生理健康和具有免疫调节双重作用。
为了达到上述目的，本发明通过以下技术方案来实现的：
一种宠物食品组合物,其特征在于,按重量份计,其制备原料包括以下组分：鸡胸肉泥63～89份、褐藻寡糖2～8份、牛肉泥5～10份、淀粉3～6份、植物油0.5～2份、食盐0.1～1份、水12～20份。
优选的，一种宠物食品组合物,其特征在于,按重量份计,其制备原料包括以下组分：鸡胸肉泥72～80份、褐藻寡糖4～7份、牛肉泥6～8份、淀粉4～5份、植物油0.5～2份、食盐0.1～1份、水12～20份。
最优的，一种宠物食品组合物,其特征在于,按重量份计,其制备原料包括以下组分：鸡胸肉泥78份、褐藻寡糖5.5份、牛肉泥7.5份、淀粉5份、植物油1.5份、食盐0.5份、水18份。
上述宠物食品组合物通过如下步骤制备：将上述原料按配比投入搅拌机中搅拌均匀，无菌分装即可。
上述褐藻寡糖的平均分子量在3000道尔顿以内。
上述褐藻寡糖通过如下工艺步骤制备：
（1）褐藻胶的溶解：将15-25克褐藻胶溶解于1500-2500ml蒸馏水中，成为0.5-1.5%的褐藻胶溶液，磁力搅拌器上50-70℃加热搅拌使之完全溶解；
（2）褐藻胶的酶解：将已经溶解好的褐藻胶溶液加入褐藻胶裂解酶5-15ml，磁力搅拌器上55-65℃反应3-8h；
（3）酶解液灭活：将酶解后的液体80-100℃灭活15-35min；
（4）酶解液离心：酶解的产物8000-14000r/min，高速离心5-15min；
（5）酶解液冻干：酶解液真空冷冻干燥后的褐藻寡糖粉末；
（6）低聚褐藻寡糖制备：酶解的褐藻寡糖用Sephadex 凝胶柱进行层析分离，收集褐藻胶低聚糖组分，浓缩干燥。
上述褐藻胶裂解酶通过如下步骤制备：
（1）海水1000ml，加入50克海带粉和10克硝酸钾，以NaOH水溶液调节初始pH为6.5-7.5，灭菌并冷却至室温；
（2）加入100ml活化后的微生物发酵菌种，20-30℃震荡培养45-50h，离心取上清液；
（3）加入5-15克聚醚酰亚胺，离心除掉絮状沉淀；
（4）上清液上Sepharose 色谱柱洗脱，得到褐藻胶裂解酶。
上述微生物发酵菌种为假单胞菌 Pesudomonas aeruginosa AlgL。
本发明具有如下有益效果：
1、本发明提供了一种添加海洋寡糖的宠物食品，针对宠物肠道健康，添加平均分子量在3000范围内的褐藻寡糖，能显著促进双歧杆菌和乳酸杆菌等肠道益生菌的生长，抑制病原菌、腐败菌等有害菌的生长，起到了改善肠道微生态环境和净化肠道的作用，能提高免疫力，改善内分泌系统，促进营养物质的吸收，从而达到改善肠道感染等疾病；
2、实验结果表明褐藻寡糖作为一种宠物食品添加剂，能够调节肠道菌群提高宠物自身免疫力，且安全、绿色、无毒。
具体实施方式
在下述实施例及对比例中，褐藻寡糖通过如下步骤制备：
1、制备褐藻胶裂解酶：
（1）海水1000ml，加入50克海带粉和10克硝酸钾，以NaOH水溶液调节初始pH为6.5-7.5，灭菌并冷却至室温；
（2）加入100ml活化后的微生物发酵菌种假单胞菌 Pesudomonas aeruginosaAlgL，20-30℃震荡培养50h，离心取上清液；
（3）加入15克聚醚酰亚胺，离心除掉絮状沉淀；
（4）上清液上Sepharose 色谱柱洗脱，得到褐藻胶裂解酶；
2、制备褐藻寡糖：
（1）褐藻胶的溶解：将25克褐藻胶溶解于2500ml蒸馏水中，成为1.5%的褐藻胶溶液，磁力搅拌器上50-70℃加热搅拌使之完全溶解；
（2）褐藻胶的酶解：将已经溶解好的褐藻胶溶液加入褐藻胶裂解酶5-15ml，磁力搅拌器上55-65℃反应6h；
（3）酶解液灭活：将酶解后的液体80-100℃灭活30min；
（4）酶解液离心：酶解的产物10000r/min，高速离心15min；
（5）酶解液冻干：酶解液真空冷冻干燥后的褐藻寡糖粉末；
（6）低聚褐藻寡糖制备：酶解的褐藻寡糖用Sephadex 凝胶柱进行层析分离，收集褐藻胶低聚糖组分，浓缩干燥。
实施例1
一种宠物食品组合物,按重量份计,其制备原料包括以下组分：鸡胸肉泥78份、褐藻寡糖5.5份、牛肉泥7.5份、淀粉5份、植物油1.5份、食盐0.5份、水18份；
上述宠物食品组合物通过如下步骤制备：将上述原料按配比投入搅拌机中搅拌均匀，无菌分装即可。
实施例2
一种宠物食品组合物,按重量份计,其制备原料包括以下组分：鸡胸肉泥72～80份、褐藻寡糖4份、牛肉泥8份、淀粉4份、植物油2份、食盐1份、水20份；
上述宠物食品组合物通过如下步骤制备：将上述原料按配比投入搅拌机中搅拌均匀，无菌分装即可。
实施例3
一种宠物食品组合物,按重量份计,其制备原料包括以下组分：鸡胸肉泥72～80份、褐藻寡糖7份、牛肉泥8份、淀粉5份、植物油2份、食盐1份、水12份；
上述宠物食品组合物通过如下步骤制备：将上述原料按配比投入搅拌机中搅拌均匀，无菌分装即可。
实施例4 动物实验
①试验动物及分组：选用健康纯种小型宠物犬，雌雄各半，体重1-1.5kg。按随机分组的方法将小鼠分为六组，每组5只，分别饲喂普通宠物食品（不含褐藻寡糖宠物饲料，空白对照组）、实施例1-3所述宠物食品、对比例1宠物食品（实施例1中褐藻寡糖为市售酶解褐藻寡糖，分子量与实施例1等同）；
②投喂量及方法：各组连续投食I4天，投食完取小鼠盲肠内含物与粪便进行肠道菌的计数分析；
③培养基：双歧杆菌采用BL培养基；乳杆菌采用LBs培养基；肠球菌采用胆盐一七叶普一叠氮钠培养基；拟杆菌采用Bds培养基；肠杆菌采用EMB培养基：粪便样品稀释液采用液体硫乙醇酸盐培养基；盲肠内含物稀释液采用KH2P04 4.5g , Na2HPO4 6.0g，L一盐酸半胱氨酸0.5g，吐温一80 0.5ml，琼脂1g，加蒸馏水稀释至1000ml，115℃ 灭菌20min；
④小鼠检测材料的取得和测定：取小鼠粪便0.2-0.4g，加入液体硫乙醇酸盐培养基，梯度稀释，使其重量百分比浓度为原液的10-1，10-2，10-3，10-4，10-5，10-6，10-7，10-8，10-9，10-10，选取合适的稀释度涂于各种选择性培养基上，每个稀释度做三个平板，培养后进行计数(活菌数/克粪便标本)，取平均值，同时挑选特征性菌落，进行形态和生化形状检测鉴定，确定其菌属。其中EMB培养基，胆盐一七叶昔一叠氮钠培养基37℃ ,需氧培养24-48小时，其余厌氧菌厌氧培养48-72小时；结果如表1所示：
表1:褐藻胶连续喂食后宠物犬各种肠道菌群数量检测结果(X±Sn=10)
Figure RE-482484DEST_PATH_IMAGE003
将盲肠内含物用稀释液洗出，梯度稀释，使其重量百分比浓度为原液的10-1，10-2，10-3，10-4，10-5，10-6，10-7，10-8，10-9，10-10，选取合适的稀释度涂于各种选择性培养基上，每个稀释度做三个平板，培养后进行计数(活菌数/克粪便标本)，取平均值，同时挑选特征性菌落，进行形态和生化形状检测鉴定，确定其菌属。其中EMB培养基，胆盐一七叶昔一叠氮钠培养基37℃,需氧培养24-48小时，其余厌氧菌厌氧培养48--72小时；结果如表2所示：
表2:褐藻寡糖连续喂食后宠物犬盲肠菌群数量检测结果(X±Sn=10)
Figure RE-172408DEST_PATH_IMAGE006
从表1和表2可见，喂食褐藻寡糖食品的宠物犬肠胃中的双歧杆菌、乳杆菌、大肠杆菌与拟杆菌的数值发生变化。与普通食品组相比，褐藻寡糖食品组宠物犬肠胃中的双歧杆菌和乳杆菌的数量明显的增加（P＜0.05), 褐藻寡糖食品组宠物犬肠胃中的大肠杆菌与拟杆菌数量明显的降低（P＜0.05)。
经上述表格比较可知，添加了褐藻胶的宠物食品对宠物肠胃内的双歧杆菌和乳杆菌的数量都有所增加，能有效抑制大肠杆菌与拟杆菌的生长，增进宿主健康。褐藻寡糖作为一种宠物食品添加剂，能够调节肠道菌群提高宠物自身免疫力，且安全、绿色、无毒。
以上实施例仅用于说明本发明的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实施例对被发明进行了详细的说明，但对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而对这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。

Claims (8)

1.一种宠物食品组合物,其特征在于,按重量份计,其原料包括以下组分：鸡胸肉泥63～89份、褐藻寡糖2～8份、牛肉泥5～10份、淀粉3～6份、植物油0.5～2份、食盐0.1～1份、水12～20份。
2.根据权利要求1所述的一种宠物食品组合物,其特征在于,按重量份计,所述宠物食品组合物的原料包括以下组分：鸡胸肉泥72～80份、褐藻寡糖4～7份、牛肉泥6～8份、淀粉4～5份、植物油0.5～2份、食盐0.1～1份、水12～20份。
3.根据权利要求1所述的一种宠物食品组合物,其特征在于,按重量份计,所述宠物食品组合物的原料包括以下组分：鸡胸肉泥78份、褐藻寡糖5.5份、牛肉泥7.5份、淀粉5份、植物油1.5份、食盐0.5份、水18份。
4.根据权利要求1所述的一种宠物食品组合物,其特征在于,所述宠物食品组合物通过如下步骤制备：将原料按配比投入搅拌机中搅拌均匀，无菌分装即可。
5.根据权利要求1所述的一种宠物食品组合物,其特征在于,所述褐藻寡糖的平均分子量在3000道尔顿以内。
6.根据权利要求1所述的一种宠物食品组合物,其特征在于,所述褐藻寡糖通过如下工艺步骤制备：
（1）褐藻胶的溶解：将15-25克褐藻胶溶解于1500-2500ml蒸馏水中，成为0.5-1.5%的褐藻胶溶液，磁力搅拌器上50-70℃加热搅拌使之完全溶解；
（2）褐藻胶的酶解：将已经溶解好的褐藻胶溶液加入褐藻胶裂解酶5-15ml，磁力搅拌器上55-65℃反应3-8h；
（3）酶解液灭活：将酶解后的液体80-100℃灭活15-35min；
（4）酶解液离心：酶解的产物8000-14000r/min，高速离心5-15min；
（5）酶解液冻干：酶解液真空冷冻干燥后的褐藻寡糖粉末；
（6）低聚褐藻寡糖制备：酶解的褐藻寡糖用Sephadex 凝胶柱进行层析分离，收集褐藻胶低聚糖组分，浓缩干燥。
7.根据权利要求6所述的一种宠物食品组合物,其特征在于,所述褐藻胶裂解酶通过如下步骤制备：
（1）海水1000ml，加入50克海带粉和10克硝酸钾，以NaOH水溶液调节初始pH为6.5-7.5，灭菌并冷却至室温；
（2）加入100ml活化后的微生物发酵菌种，20-30℃震荡培养45-50h，离心取上清液；
（3）加入5-15克聚醚酰亚胺，离心除掉絮状沉淀；
（4）上清液上Sepharose 色谱柱洗脱，得到褐藻胶裂解酶。
8.根据权利要求7所述的一种宠物食品组合物,其特征在于,所述微生物发酵菌种为假单胞菌 Pesudomonas aeruginosa AlgL。
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