CN112472735A - 增强骨密度组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种组合物，该组合物包括：氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软骨素、淫羊藿提取物、丹参提取物和骨碎补提取物。本发明的组合物通过氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软骨素、淫羊藿提取物、丹参提取物和骨碎补提取物的协同作用，配合科学的配方和合理的制备工艺，保留有效成分，在增加骨密度、治疗骨质疏松方面具有很好的功效。

Description

增强骨密度组合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明属于食品、生物医药领域，具体地，本发明涉及组合物、组合物的制备方法、组合物的用途、药物组合物，其中组合物包含氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软骨素、淫羊藿提取物、丹参提取物和骨碎补提取物。

背景技术

骨质疏松症(osteoporosis，OP)是最常见的骨骼疾病，是一种以骨量低，骨组织微结构损坏，导致骨脆性增加，易发生骨折为特征的全身性骨病。2001年美国国立卫生研究院(National Institutes of Health，NIH)将其定义为以骨强度下降和骨折风险增加为特征的骨骼疾病，提示骨量降低是骨质疏松性骨折的主要危险因素，但还存在其他危险因素。骨质疏松症可发生于任何年龄，但多见于绝经后女性和老年男性。骨质疏松症分为原发性和继发性两大类。原发性骨质疏松症包括绝经后骨质疏松症(Ⅰ型)、老年骨质疏松症(Ⅱ型)和特发性骨质疏松症(包括青少年型)。绝经后骨质疏松症一般发生在女性绝经后5～10年内；老年骨质疏松症一般指70岁以后发生的骨质疏松；特发性骨质疏松症主要发生在青少年，病因尚未明。

目前治疗和预防骨质疏松、提高骨密度的方法主要为使用钙剂、维生素D、骨吸收抑

制剂、骨形成促进剂等，如：双膦酸盐、降钙素、雌激素、选择性雌激素受体调节剂、RANKL抑制剂、甲状旁腺激素类似物、活性维生素D及其类似物、维生素K2类、锶盐。

而上述药物主要为西医化学合成药物，存在一定的副作用，且价格昂贵，因此提供一种健康有效、毒副作用低、价格低廉的增强骨密度的组合物很有必要。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。

在本发明的第一方面，本发明提出了一种组合物。根据本发明的实施例，所述组合物包括：氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软骨素、淫羊藿提取物、丹参提取物和骨碎补提取物。根据本发明实施例的组合物各组分均为食药同源的材料，发明人经过大量的试验筛选，寻找到氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软骨素、淫羊藿提取物、丹参提取物和骨碎补提取物进行复配，最大程度发挥各组分之间的协同增效作用，使所述组合物发挥强效的增加骨密度的作用，并且毒副作用低，适合长期服用，用于预防或治疗与骨密度下降有关的疾病。

根据本发明的实施例的，上述组合物还可以进一步包括如下附加技术特征至少之一：

根据本发明的实施例，所述组合物包括：150～250质量份氨基葡萄糖盐酸盐、150～200质量份硫酸软骨素、10～100质量份淫羊藿提取物、30～40质量份丹参提取物和20～30质量份骨碎补提取物。发明人经过精心地实验设计，发现采用上述配比可以最大程度发挥组合物增强骨密度的作用，特别是对于老年性骨质疏松及绝经后骨质疏松具有显著效果。现有技术中已经公开的具有预防或治疗骨质疏松的药物众多，发明人经过大量的理论分析和实验验证优化了配方，改变上述配方中的一个或多个组分，所得配方效果不及本配方。此外，发明人经过大量实验发现，上述配方中各组分配比具有良好的预防骨质疏松的作用，其他配比不及本方好。

发明人发现，从中医的角度分析,引发“骨质疏松”的原因主要是肝肾阴虚、血虚。病变脏腑为肾、肝，保健法则为补肾壮骨/滋补肝肾、活血化瘀。

淫羊蕃:归肝、肾经。补肾阳，强筋骨。

骨碎补：归肝、肾经。疗伤止痛，补肾强骨；用于跌扑闪挫，筋胃折伤等。

丹参：归心、肝经。具有活血祛瘀的作用。

发明人将淫羊蕾、骨碎补、丹参配伍使用，通过补肾壮胃/滋补肝肾、活血化瘀，从而达到增加骨密度的功能。

发明人发现，加入另外两种原料——氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软胃素可以更好地达到预防和治疗骨质疏松的目的，利用中、西医理论科学组方，最终确定本方配伍。根据本发明的实施例，氮基葡萄糖是一类广泛存在于人和动物软骨、肌腱和韧带中的天然氨基葡聚糖，同时也是构成关节软骨的主要成分，能够预防和改善骨关节病，对受损的软骨组织进行修复。氨基葡萄糖能降低促炎症转录因子的浓度，增强软骨特定部位的韧性，并且通过抑制水解酶的活性和减少脂质、蛋白质的氧化来阻止胶原蛋白变性；氨基葡萄糖通过刺激黏多糖的生化合成及增加骨骼钙质的摄取量来提高骨与软骨组织的代谢功能与营养吸收，亦能改善及增强滑膜液的黏稠度，同时氨基葡萄糖也是蛋白多糖合成的基本物质，可以特异性地作用于关节软骨，恢复软骨细胞正常的代谢功能，刺激软骨细胞产生具有正常多聚体结构的蛋白多糖，亦可抑制损伤软骨的酶如胶原蛋白酶和磷脂酶A2的活性。硫酸软骨素是一类硫酸化的糖胺聚糖，存在于人和动物结缔组织中，主要分布于软骨、骨、肌腱、肌膜和血管壁中，具有明显的亲软骨性，可优先进入软骨组织，保护软骨，从而达到治疗骨关节炎的作用，同时，硫酸软骨素还具有良好的增加骨密度、预防骨质疏松的作用。

根据本发明的具体实施例，绝经后雌激素水平降低，雌激素对破骨细胞的抑制作用减弱，破骨细胞的数量增加、凋亡减少、寿命延长，导致其骨吸收功能增强，施用本发明实施例的动物模型可以显著改善骨质疏松症状，骨密度和骨钙含量显著增加。

根据本发明的实施例，进一步包括辅料，所述辅料选自下列至少之一：糊精、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、薄膜包衣粉、硬脂酸镁，其中，所述薄膜包衣粉包括：丙烯酸树脂、滑石粉、红氧化铁、紫氧化铁、羟丙甲纤维素和聚乙二醇。根据本发明实施例的组合物，选用上述辅料可以最大程度保证主料药效，并且利于制备，所制备的组合物便于保存、携带及使用。

根据本发明的实施例，所述辅料包括：140～150质量份糊精、40～50质量份交联聚维酮、20～30质量份交联羧甲基纤维素钠、20～30质量份薄膜包衣粉和1～10质量份硬脂酸镁。根据本发明的实施例，薄膜包衣片为用水溶性物质的薄层或薄膜覆盖的压制片，此外，薄膜包衣还可以包括，但不限于，羟乙基纤维素、羧甲基纤维素钠和邻苯二甲酸乙酸纤维素酯。此外，需要注意的是，本发明提供的组合物可以以压制片、研制片、可咀嚼锭剂、速溶片、复压片、或肠溶片、糖衣或薄膜衣片来提供。肠溶片是用能抗胃酸作用但在肠中溶解或崩解的物质包衣的压制片，从而防止了活性成分接触胃的酸性环境。肠包衣包括，但不限于，脂肪酸、脂肪、水杨酸苯酯、蜡、紫胶、氨化紫胶和邻苯二甲酸乙酸纤维素酯。糖衣片为糖衣包围的压制片，其可利于掩盖令人不愉快的味道或气味并且能防止片剂氧化。此外本发明的组合物还可以包括一种或多种载体或赋形剂组合，所述载体和赋形剂包括粘合剂、崩解剂、控释聚合物、润滑剂、稀释剂和/或着色剂。增香剂和甜味剂在形成咀嚼片和锭剂时特别有用。

根据本发明的实施例，所述组合物包括：200质量份氨基葡萄糖盐酸盐、170质量份硫酸软骨素、50质量份淫羊藿提取物、33.5质量份丹参提取物、25质量份骨碎补提取物、144.5质量份糊精、42质量份交联聚维酮、28质量份交联羧甲基纤维素钠、21质量份薄膜包衣粉和7质量份硬脂酸镁。根据本发明实施例的组合物可以显著提高骨密度，副作用低，中药配伍合理，适于长期服用以预防骨质疏松，特别是老年骨质疏松。

根据本发明的实施例，所述组合物可以进一步包括其他治疗骨质疏松的药物，所述组合物与其他药物进行协同，发挥协同增效作用，进一步提高骨密度。

根据本发明的实施例，所述组合物进一步包括下列至少之：鲑降钙素、依降钙素、利塞磷酸铵、双膦酸盐类、阿仑膦酸钠、依替膦酸二钠和雷洛昔芬。

根据本发明的实施例，所述组合物呈片剂、丸剂、散剂或胶囊制剂。本发明提供的组合物可以以软胶囊或硬胶囊来提供，其可以由明胶、甲基纤维素、淀粉或海藻酸钙来制备。所述硬明胶胶囊也称为干填充胶囊(DFC)，由两段组成，一段塞入另一段中，因此完全包封了活性成分。软弹性胶囊(SEC)是软的、球形壳，比如明胶壳，其通过加入甘油、山梨醇或类似的多元醇塑化。软明胶壳可以包含防腐剂来预防微生物生长。合适的防腐剂为如本发明所述的那些，包括尼泊金甲酯和尼泊金丙酯，以及山梨酸。本发明提供的固体剂型可以包囊在胶囊中。所述胶囊也可以采用如本领域技术人员已知的涂层，从而改善或维持活性成分的溶出。本发明提供的药物组合物可以以颗粒剂和粉剂来提供，以重构成液体剂型。在非泡腾颗粒剂或粉剂中使用的药学上可接受的载体和赋形剂可以包括稀释剂、甜味剂和润湿剂。在泡腾颗粒剂或粉剂中使用的药学上可接受的载体和赋形剂可以包括有机酸和二氧化碳源。

在本发明的第二方面，本发明提出了一种制备在本发明第一方面所提出的组合物的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：将丹参提取物、骨碎补提取物、淫羊藿提取物和交联聚维酮混合，以便获得所述组合物。根据本发明实施例的方法，首先将上述几味中药材料与交联聚维酮混合，在保证中药材料药效的前提下，调节其释放速度，亲水化上述中药成分中的各种不溶性分子，以稳定各成分。

根据本发明的实施例的，上述方法还可以进一步包括如下附加技术特征至少之一：

根据本发明的实施例，所述方法进一步包括：将上述步骤中所得产物与氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软骨素和糊精混合，以便获得第一混合物；将所述第一混合物与乙醇混合，以便获得所述组合物。根据本发明实施例的方法，将糊精与氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软骨素及上述步骤产物进行混合可以有效防止药物之间相互作用，提高生物利用度。本发明制备工艺简单、利于大规模生产，可以保证药物的有效性。

根据发明的实施例，也可以将预定量的丹参提取物、骨碎补提取物、淫羊藿提取物、交联聚维酮、氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软骨素和糊精直接混合，以便的到所述组合物。

根据本发明的实施例，所述乙醇的用量为：每100g所述第一混合物与30mL的50％～70％乙醇混合。

根据本发明的实施例，所述乙醇的用量为：每100g所述第一混合物与30mL的60％乙醇混合。

根据本发明的实施例，所述乙醇也可使用常用湿润剂代替，如水等。

根据本发明的具体实施例，首先将淫羊藿提取物、骨碎补提取物、丹参提取物、氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软骨素、糊精、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠及硬脂酸镁过80目筛，称量，备用；将丹参提取物、骨碎补提取物、淫羊藿提取物及交联聚维酮混合，混合约15分钟后为混合粉A，然后混合粉A与氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软骨素及糊精混合，混合约15分钟后为混合粉B，备用；将混合粉B进行制软材，每100g混合粉加入60％的乙醇30ml制得合格软材，以“手握成团，轻触即散”为度；将合格软材18目筛制粒，60℃干燥、干燥时间约2小时，控制水分≤8％；干颗粒18目筛整粒，得整粒后颗粒；取称量好的交联羧甲基纤维素钠及硬脂酸镁，与整粒后颗粒进行总混，混合时间约10分钟，得总混颗粒。

在本发明的第三个方面，本发明提出了上述组合物在制备药物中的用途，所述药物用于增加骨密度。根据本发明的实施例，所述组合物可以用于增加骨密度，治疗骨质疏松，可以用于制备预防或治疗骨质疏松的药物，也可以用于制备治疗或预防由骨质疏松症引起的其他疾病，如骨折等。

本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。

具体实施方式

下面详细描述本发明的实施例，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。

此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括至少一个该特征。在本发明的描述中，“多个”的含义是至少两个，例如两个，三个等，除非另有明确具体的限定。

下面参考具体实施例，对本发明进行描述，需要说明的是，这些实施例仅仅是描述性的，而不以任何方式限制本发明。

实施例1

配方如表1所示。

表1：配方

以上共制成1000片

1、过筛、称量：首先将淫羊藿提取物、骨碎补提取物、丹参提取物、氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软骨素、糊精、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠及硬脂酸镁过80目筛。称量，备用；

2、混合：先将丹参提取物、骨碎补提取物、淫羊藿提取物及交联聚维酮混合，混合约15分钟后为混合粉A，然后混合粉A与氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软骨素及糊精混合，混合约15分钟后为混合粉B，备用；

3、制软材：将混合粉B进行制软材，每100g混合粉加入60％的乙醇30ml制得合格软材，以“手握成团，轻触即散”为度；

4、制粒、干燥：将合格软材18目筛制粒，60℃干燥、干燥时间约2小时，控制水分≤8％；

5、整粒：干颗粒18目筛整粒，得整粒后颗粒；

6、总混：取称量好的交联羧甲基纤维素钠及硬脂酸镁，与整粒后颗粒进行总混，混合时间约10分钟，得总混颗粒；

7、压片：将总混颗粒进行压片，片剂规格0.7g/片，片重差异控制在±5％以内。

8、包衣:将薄膜包衣粉加入75％乙醇中搅拌溶解，得浓度为10％的包衣液。素片置包衣锅中用包衣液均匀包衣。片重增加3％左右。锅体转速每分钟1-3转、进风温度60-65℃，出风温度约50℃。

9、内包装：采用口服固体高密度聚乙烯瓶，标准符合YBB00122002《口服固体药用高密度聚乙烯瓶》的要求，进行内包装，60片/瓶，送出洁净区。

10、外包装：装箱。外包材符合GB/T 6543《运输包装用单瓦楞纸箱和双瓦楞纸箱》的规定。

11、检验、入库：包装好的成品按照质量标准规定进行检验，合格后入库。

备注：所用乙醇符合GB10343《食用酒精》的相关要求，纯化水符合《中华人民共和国药典》二部的要求，使用时用纯化水将乙醇配制成所需浓度。

实施例2增强骨密度实验

1材料与方法

1.1样品

实施例1方法所制备的产物，规格：0.7g/片；

对照品1：康恩贝牌氨糖软骨素加钙片(广东仙乐制药有限公司)，规格：1.0g/片；

对照品2：健力多氨糖软骨素钙片(汤臣倍健股份有限公司)，规格：1.02g/片。

1.2实验动物与条件

SPF级成年雌性Wistar大鼠70只购自辽宁长生生物技术有限公司，实验动物许可证号：SCXK(辽)2015-0001在SPF级动物实验中心(屏障环境)饲养(许可证号：

2011007)，温度为21℃～23℃，湿度为55％～58％。实验动物所用的清洁级饲料购自北京科澳协力饲料有限公司(许可证号：SCXK(京)2014-0010)。

1.3剂量设计

实验设7组，分别为实施例1方法所制备的产物三个剂量组：卵巢切除+0.35g/kg·bw组、卵巢切除+0.70g/kg·bw组、卵巢切除+2.10g/kg·bw组(相当于实施例1方法所制备的产物人体推荐剂量的5、10和30倍)；对照组1(康恩贝牌氨糖软骨素加钙片)：卵巢切除+0.67g/kg·bw组(相当于康恩贝牌氨糖软骨素加钙片人体推荐剂量的10倍)；对照组2：(健力多氨糖软骨素钙片)：卵巢切除+0.68g/kg·bw组(相当于健力多氨糖软骨素钙片人体推荐剂量的10倍)，以及假手术+去离子水组和卵巢切除+去离子水组。

1.4仪器与试剂

原子吸收分光光度计(AA7002，北京东西分析仪器有限公司)、HOLOGIC Discovery双能X线骨密度仪(哈尔滨医科大学第二附属医院)、动物天平、电子天平、灌胃针、注射器、加样器、试管、离心管、动物解剖器材、游标卡尺、代谢鼠笼、105摄氏度烘箱。硝酸、高氯酸、氧化镧、钙单元素标准溶液(1000μg/mL，北京北化康泰临床试剂有限公司)。

1.5试验方法

1.5.1饲料配方

饲料配方如表2所示：

表2：饲料成分

成分	含量(％)
		酪蛋白	23
DL-蛋氨酸	0.3
		玉米淀粉	32
蔗糖	30
		纤维	5
玉米油	5
		混合矿物盐<sup>1</sup>	3.5
混合维生素<sup>2</sup>	1
		二酒石酸胆盐	0.2

1)含有(mg/kg饲料)：MnSO₄ 110，CuSO₄ 0.8，FeSO₄ 1.2，KI 18.0，ZnSO₄ 2,960，CaHPO₄ 2,890，MgSO₄ 1.25×10⁴

2)含有(/kg饲料)：VitA1.4×10⁴IU，VitD l,500IU，VitE 120mg，VitK 3mg，VitBi12mg，VitB₂ 20mg，VitB₆ 12mg，VitB₁₂ 0.03mg，烟酸60mg，泛酸24mg，叶酸6mg，生物素0.54mg。

1.5.2试验方案

雌性Wistar大鼠70只，适应性饲养7天后随机分成7组，每组10只，单笼饲养。去势手术安排：假手术+去离子水组，鼠经腹腔注射30mg/kg·bw的戊巴比妥钠溶液麻醉，在严格无菌操作下，腹位固定后于腹中线距阴道口3-4cm处去毛，分别用碘酒和酒精消毒，待稍干后切开皮肤和腹肌约2-3cm，腹肌和皮肤分层缝合后，再次消毒。最后经后肢肌肉注射2万U青霉素；卵巢切除+去离子水组、雷允上牌固葆片三个剂量组、对照组1和对照组2，麻醉方法同上，在严格无菌操作下，腹位固定后于腹中线距阴道口3-4cm处去毛，分别用碘酒和酒精消毒，待稍干后切开皮肤和腹肌约2-3cm，切口视野可见白色脂肪，拨开脂肪层找到子宫后，轻轻将一侧子宫角拉出，在其末端可见被脂肪团包裹的卵巢。分离脂肪团，便可见粉红色或黄红色的卵巢，以止血钳夹住卵巢，然后将卵巢下输卵管(包括脂肪)用丝线结扎，剪除卵巢(检查是否完全剪除)，顺势将子宫角送回腹腔中，同法剪除另侧卵巢，腹肌和皮肤分层缝合后，再次消毒。最后经后肢肌肉注射2万U青霉素。为保证手术成功，大鼠摘除卵巢后5天，进行阴道涂片检查(用滴管吸取少量生理盐水，轻轻插入阴道l-2cm，冲洗数次后吸出，涂于玻片上，镜下观察)，每天一次，连续7天，以检查大鼠卵巢是否完全摘除；如涂片成动情反应(镜下见大量半透明、扁平的表皮细胞)，表明动物卵巢切除不完全，应弃去不用。

切除大鼠双侧卵巢5天后，按照1.3剂量设计，卵巢切除三个剂量组(灌胃液的配制：分别取实施例1方法所制备的产物3.5g、7.0g、21.0g，加去离子水定容至100ml，配制成0.35g/kg·bw、0.70g/kg·bw、2.10g/kg·bw的灌胃液)、对照组1(灌胃液的配制：取康恩贝牌氨糖软骨素加钙片6.7g，加去离子水定容至100ml，配制成0.67g/kg·bw的灌胃液)和对照组2(灌胃液的配制：取健力多氨糖软骨素钙片6.8g，加去离子水定容至100ml，配制成0.68g/kg·bw的灌胃液)；经口给予假手术+去离子水组和卵巢切除+去离子水组动物等容积的去离子水。所有动物灌胃剂量均为10ml/kgbw，每日1次，连续灌胃90天，每周称体重并按体重调整灌胃量。

1.5.3体重测定

禁食12小时后，测定体重，每周1次。

1.5.4股骨重量测定

动物喂养3个月后处死，剥离出双侧股骨，于105℃烘箱中烘烤8h，烤至恒重，冷却至室温后，称量骨干重。

1.5.5股骨骨密度测定和骨钙含量的测定

股骨骨密度测定：股骨中点测量点的确定：测量股骨全长通过其中点，沿横截面方向划一直线，此为股骨中点测量点(截面)。股骨远心端测量点的确定：于股骨远心端关节凹槽最下缘处确定测量点，通过此点划与上述股骨中点处标记平行的直线，此为股骨远心端测量点(截面)。骨密度仪校准后测量股骨中点及股骨远心端的骨密度。

骨钙含量的测定：准确称量烤至恒重的股骨整体，放入经盐酸处理干燥清洁的150ml三角瓶中，加入硝酸+高氯酸(4：1)混合酸15-20ml，在电热板上加热消化至冒白烟并透明无色。加数毫升去离子水，煮沸以赶除剩余的酸。重复2次，定容后，用原子吸收分光光度计测定。

1.6数据处理及结果判定

试验数据釆用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值<F_0.05，结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F_0.05，P≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计：对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。

结果判定：卵巢切除+溶剂组骨钙含量或骨密度显著低于假手术组，表明造成大鼠骨密度低下模型；卵巢切除+受试物组的骨钙含量或骨密度较卵巢切除+溶剂组显著增加，而其他指标(体重除外)不显著低于卵巢切除+溶剂组，且实施例1方法所制备的产物人体推荐量10倍的骨钙含量或骨密度组效果与对照组相当，可判定受试物具有增加骨密度功能作用，且在所述的用量范围内，增加骨钙含量或骨密度的效果良好。

2结果

2.1受试物对大鼠体重的影响：

由表3可见，去势手术各组实验前体重无显著性差异(P>0.05)；实验中期和末期，卵巢切除+去离子水组体重显著高于假手术+去离子水组(P<0.01)，表明成功建立骨密度显著降低模型。

表3：受试物对大鼠体重的影响

注：P^##同一列中的各组与假手术+去离子水组比较时的P值，P<0.01；P*同一列中的各组与卵巢切除+去离子水组比较时的P值，P<0.05；P**同一列中的各组与卵巢切除+去离子水组比较时的P值，P<0.01。

2.2受试物对大鼠股骨重量和骨钙含量的影响：

由表4可见，给予受试物90天后，卵巢切除+去离子水组骨钙含量显著低于假手术+

去离子水组(P<0.01)，造模成功。

表4：受试物对大鼠股骨重量和骨钙含量的影响

受试物	组别	动物数	股骨重量(g)	骨钙含量(mg/g)
					-	假手术+去离子水	10	0.769±0.029	205.0±14.89**
-	卵巢切除+去离子水	10	0.749±0.030	181.9±16.66<sup>##</sup>
					实施例1方法所制备的产物	卵巢切除+0.35g/kg·bw	10	0.756±0.034	187.1±13.32<sup>##</sup>
实施例1方法所制备的产物	卵巢切除+0.70g/kg·bw	10	0.763±0.053	191.3±11.25<sup>#</sup>
					实施例1方法所制备的产物	卵巢切除+2.10g/kg·bw	10	0.783±0.037	193.8±6.52*
康恩贝牌氨糖软骨素加钙	卵巢切除+0.67g/kg·bw	10	0.761±0.078	190.3±9.44<sup>#</sup>
					健力多氨糖软骨素钙片	卵巢切除+0.68g/kg·bw	10	0.762±0.045	191.8±10.54<sup>#</sup>

注：P^#同一列中的各组与假手术+去离子水组比较时的P值，P<0.05；P^##同一列中的各组与假手术+去离子水组比较时的P值，P<0.01；P*同一列中的各组与卵巢切除+去离子水组比较时的P值，P<0.05；P**同一列中的各组与卵巢切除+去离子水组比较时的户值，P<0.01。

2.3受试物对大鼠骨密度的影响:

由表5可见，给予受试物90天后，卵巢切除+去离子水组骨密度显著低于假手术+去离子水组(P<0.05，P<0.01)，各剂量组股骨远心端骨密度均显著高于卵巢切除+去离子水组(P<0.01)。

表5：受试物对大鼠骨密度的影响

注：P^#同一列中的各组与假手术+去离子水组比较时的P值，P<0.05；P^##同一列中的各组与假手术+去离子水组比较时的P值，P<0.01；P**同一列中的各组与卵巢切除+去离子水组比较时的P值，P<0.01。

试验结果表明，经口给予大鼠不同剂量的雷允上牌固葆片90天，实验前各组体重无显著性差异(P>0.05)，实验中期和后期，卵巢切除+去离子水组体重显著高于假手术+去离子水组(P<0.01)，股骨骨钙含量和骨密度均显著低于假手术+去离子水组(P<0.05，P<0.01)，成功建立骨密度显著降低模型。

经口给予大鼠不同剂量的实施例1方法所制备的产物、康恩贝牌氨糖软骨素加钙片和健力多氨糖软骨素钙片90天，试验结果表明，实施例1方法所制备的产物各剂量组骨钙含量高于卵巢切除+去离子水组(P<0.05，P<0.01)，且人体推荐剂量的10倍剂量组(0.70g/kg·bw)与人体推荐剂量的10倍剂量组的康恩贝牌氨糖软骨素加钙片(0.67g/kg·bw)及健力多氨糖软骨素钙片(0.68g/kg·bw)增加骨钙含量效果相当；实施例1方法所制备的产物各剂量组远心端骨密度显著高于卵巢切除+去离子水组(P<0.01)，且人体推荐剂量的10倍剂量组(0.70g/kg·bw)与人体推荐剂量的10倍剂量组的康恩贝牌氨糖软骨素加钙片(0.67g/kg·bw)及健力多氨糖软骨素钙片(0.68g/kg·bw)增加远心端骨密度效果相当。

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。

尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。

Claims (10)

1.一种组合物，其特征在于，包括：氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软骨素、淫羊藿提取物、丹参提取物和骨碎补提取物。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，包括：150～250质量份氨基葡萄糖盐酸盐、150～200质量份硫酸软骨素、10～100质量份淫羊藿提取物、30～40质量份丹参提取物和20～30质量份骨碎补提取物。

3.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，进一步包括辅料，所述辅料选自下列至少之一：糊精和交联聚维酮；

任选地，所述辅料选自下列至少之一：140～150质量份糊精和40～50质量份交联聚维酮。

4.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于，包括：200质量份氨基葡萄糖盐酸盐、170质量份硫酸软骨素、50质量份淫羊藿提取物、33.5质量份丹参提取物、25质量份骨碎补提取物、144.5质量份糊精、42质量份交联聚维酮、28质量份交联羧甲基纤维素钠、21质量份薄膜包衣粉和7质量份硬脂酸镁。

5.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，进一步包括下列至少之一：鲑降钙素、依降钙素、利塞磷酸铵、双膦酸盐类、阿仑膦酸钠、依替膦酸二钠和雷洛昔芬。

6.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物呈片剂、丸剂、散剂或胶囊制剂。

7.一种制备权利要求1～6任一项所述组合物的方法，其特征在于，包括：

将丹参提取物、骨碎补提取物、淫羊藿提取物和交联聚维酮混合，以便获得所述组合物。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，进一步包括：

将权利要求5所述方法中的所得产物与氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软骨素和糊精混合，以便获得第一混合物；

将所述第一混合物与乙醇混合，以便获得所述组合物。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述乙醇的用量为：

每100g所述第一混合物与30mL的50％～70％乙醇混合；

任选地，所述乙醇的用量为：每100g所述第一混合物与30mL的60％乙醇混合。

10.权利要求1～6任一项所述组合物在制备药物中的用途，所述药物用于增加骨密度。