CN112375654B - 一种脂肪干细胞分离装置及分离方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种脂肪干细胞分离装置,包括离心锤、离心座和分离器,分离器包括推杆、中央筒、内筒和外筒,中央筒套设在推杆外部,内筒套设在中央筒外部,外筒套设在内筒外部,中央筒和内筒顶部中央相通,内筒的顶部设有第一网片,内筒和外筒之间设有第二网片,外筒外顶部设有针头接口,针头接口连接有密封帽,离心锤套设在外筒外部,离心座内腔底部放置有弹性体,分离器和离心锤均可位于离心座内,推杆的底部与弹性体接触,推杆可在中央筒内做升降运动,离心锤和外筒可在离心座内做升降运动。本发明还涉及一种脂肪干细胞分离方法。本发明的脂肪干细胞分离装置能够有效地分离脂肪干细胞,装置结构简单,价格低,操作简便,省时省力。
Description
技术领域
本发明涉及脂肪干细胞分离技术领域,具体涉及一种脂肪干细胞分离装置及分离方法。
背景技术
脂肪干细胞是从脂肪组织的血管基质成分(SVF)中经胶原酶消化离心得到的间充质干细胞,具有多方向分化潜能,可分化成软骨细胞、骨细胞、脂肪细胞、肌细胞等。脂肪干细胞来源广泛、无伦理限制、体内储备量大、取材容易、对机体损伤小;具有促血管化、抗凋亡、趋化修复、免疫调节等生物学功能。在保健抗衰老方面,脂肪干细胞能分泌多种细胞因子,改善内环境促进组织器官功能修复,提高老化细胞的再生功能,缓解衰老的进程,有效恢复精力和体力,改善机体功能。
脂肪干细胞是从脂肪组织中分离得到的,分离脂肪干细胞的设备有自动化设备和手工设备。脂肪干细胞全自动分离设备结构复杂,价格高,仅少量应用于临床以及部分实验室,而绝大多数情况下都是使用手工设备分离。手工设备分离的步骤繁琐、工作量大、费时费力,此外,手工设备分离需要在无菌的环境中进行,对环境要求高。
发明内容
针对现有分离脂肪干细胞方法的不足之处,本发明的第一个目的是:提供一种脂肪干细胞分离装置,该装置能够有效地分离脂肪干细胞,并且结构简单,价格低。
本发明的第二个目的是:提供一种脂肪干细胞分离方法,该方法能有效地分离脂肪干细胞,并且操作简便,省时省力。
为了达到上述目的,本发明采用如下技术方案:
一种脂肪干细胞分离装置,包括离心锤、离心座和分离器,分离器包括推杆、中央筒、内筒和外筒,中央筒套设在推杆外部,内筒套设在中央筒外部,外筒套设在内筒外部,中央筒外顶部设有螺纹接头,内筒外顶部设有第一网片,第一网片下有空隙,内筒内顶部中间设有向下的螺纹接头,内筒螺纹接头的中央有通孔,中央筒外顶部螺纹接头与内筒内顶部螺纹接头匹配对接,内筒顶部侧面设有环状密封圈,内筒外顶部和外筒内顶部形成的空间为上腔,上腔中设有第二网片,推杆的顶部设有密封碗,中央筒内腔与密封碗形成的空间为下腔。
进一步的,内筒的外侧上部设有两个环状卡槽,环状密封圈内设有两个匹配的环状卡条,环状卡条对应卡在环状卡槽中。
进一步的,第一网片和第二网片上均设有多个通孔,第一网片的通孔孔径为100um~800um,第二网片的通孔孔径为1.0mm~2.5mm。
进一步的,离心座内设有第一环状台阶和第二环状台阶,第一环状台阶用于支撑内筒,第二环状台阶用于支撑中央筒,中央筒通过固定栓固定在第二环状台阶上。
进一步的,离心锤套设在外筒外部,离心座的内腔底部放置有弹性体,分离器和离心锤均可位于离心座内,推杆的底部与弹性体接触,推杆可在中央筒内做升降运动,离心锤和外筒可在离心座内做升降运动。
进一步的,外筒的内腔顶部设有外筒网垫,外筒网垫可与第二网片接触,第一网片可与第二网片接触。
进一步的,外筒的顶部设有针头接口,针头接口上连接有密封帽。
进一步的,离心锤和外筒的离心作用力》弹性体的回弹力+破碎脂肪穿过第二网片和第一网片的阻力+环状密封圈和密封碗的摩擦阻力;弹性体的回弹力》离心锤和外筒的重力+破碎脂肪穿过第一网片和第二网片的阻力+环状密封圈和密封碗的摩擦阻力。
一种脂肪干细胞分离方法,包括以下步骤:
(1)根据脂肪组织混合液总量,选取一对或多对分离器,拧下外筒上的密封帽并安装注射针头,抽拉内筒将该混合液吸入外筒中,达到指定刻度后,拧下注射针头并安装密封帽;
(2)将离心锤套装在分离器上,然后将一对或多对分离器对称地安放在离心机的水平离心吊篮中,外筒的针头接口朝下放置,在离心力1000g~2000g条件下离心3~5分钟,离心结束后,外筒内的脂肪组织混合液分为两层,下层是膨胀液,上层是脂肪组织;
(3)取出分离器,拧下密封帽,向下按压推杆将膨胀液排出,然后再拧紧密封帽;
(4)在离心座内腔底部放置弹性体,再将分离器放入离心座内腔中,插入固定栓来固定中央筒,将离心锤套装在分离器上;
(5)将装配好的一对或多对分离器对称地安放在离心机的水平离心吊篮中,外筒的针头接口朝上放置,在离心力1500g~3500g条件下离心5~10分钟,脂肪组织由上腔进入下腔;离心结束后,弹性体回弹归位,脂肪组织由下腔进入上腔;
(6)弹性体回弹归位后再次离心,重复离心多次直至脂肪组织完全乳化,最后一次离心前先取出弹性体,再进行离心一次;
(7)离心完成后,取出离心座,取下离心锤,拔出固定栓,将分离器取出,然后将中央筒旋转取出,中央筒内的物质分为两层,下层是脂肪干细胞和基质血管片段细胞,上层是油脂;
(8)在中央筒的螺纹接头上连接废液袋软管,向上推压推杆,将中央筒内的油脂排出到废液袋中,脂肪干细胞和基质血管片段细胞留存在中央筒中。
总的说来,本发明具有如下优点:
本发明的脂肪干细胞分离装置能够替代脂肪干细胞全自动分离设备,并且能够有效地分离脂肪干细胞,装置结构简单,价格低。能与现有常规生物实验类离心机匹配使用,操作简便,省时省力。
附图说明
图1是本发明的结构示意图。
图2是本发明分离器的结构示意图。
图3是本发明分离器上部分的结构示意图。
图4是本发明分离器上部分的细节图。
图5是本发明固定栓的结构示意图。
其中:1为离心锤,1-1为耳窝,2为离心座,2-1为第一环状台阶,2-2为第二环状台阶,3为推杆,3-1为密封碗,4为中央筒,4-1为中央筒螺纹接头,5为内筒,5-1为内筒螺纹接头,5-2为第一网片,5-3为环状卡槽,6为环状密封圈,6-1为环状卡条,7为外筒,7-1为外筒网垫,7-2为针头接口,7-3为旋转耳,8为密封帽,9为弹性体,10为固定栓,11为第二网片,12为上腔,13为下腔。
具体实施方式
下面将结合附图和具体实施方式来对本发明做进一步详细的说明。
如图1和图3所示,一种脂肪干细胞分离装置,包括离心锤、离心座和分离器,分离器包括推杆、中央筒、内筒和外筒,中央筒套设在推杆外部,内筒套设在中央筒外部,外筒套设在内筒外部,中央筒外顶部设有螺纹接头,内筒外顶部设有第一网片,第一网片下有空隙,内筒内顶部中间设有向下的螺纹接头,内筒螺纹接头的中央有通孔,内筒内顶部螺纹接头与中央筒外顶部螺纹接头匹配对接,内筒顶部侧面设有环状密封圈,内筒外顶部和外筒内顶部形成的空间为上腔,上腔中设有第二网片,推杆的顶部设有密封碗,中央筒内腔与密封碗形成的空间为下腔。分离管吸入脂肪组织混合液后,上腔和下腔的总容积不变,上腔容积增大,下腔容积就减小,反之亦然。
如图1和图4所示,外筒的顶部设有针头接口,针头接口上连接有密封帽。外筒的内腔顶部设有外筒网垫,外筒的外顶部设有旋转耳,离心锤内设有与旋转耳相匹配的耳窝,旋转耳位于耳窝中。在本实施方式中,外筒呈注射器的针筒状,离心锤呈倒置的圆杯状,离心锤的上方中间开设有圆柱形通孔,外筒的针头接口和密封帽位于圆柱形通孔中;离心锤采用密度值较大的材料制成,便于增大离心时的作用力。
如图1和图4所示,内筒顶部侧面设有环状密封圈,内筒的外侧上部设有两个环状卡槽,环状密封圈内设有两个匹配的环状卡条,环状卡条对应卡在环状卡槽中。在本实施方式中,内筒外顶部设有第一网片,第一网片下有漏斗状空隙,内筒内顶部中间设有向下的螺纹接头,内筒螺纹接头内有中央通孔,中央通孔连通漏斗状空隙。
如图1至图3所示,中央筒外顶部螺纹接头与内筒内顶部螺纹接头匹配对接,中央筒和内筒可以旋转拧紧或者旋转拧开。推杆的顶部设有密封碗,推杆和密封碗可在中央筒内上下移动,中央筒与推杆和密封碗呈注射器的形状。
如图1和图5所示,离心座内设有第一环状台阶和第二环状台阶,第一环状台阶用于支撑内筒,第二环状台阶用于支撑中央筒,中央筒通过固定栓固定在第二环状台阶上。离心锤套设在外筒外部,离心座的内腔底部放置有弹性体,分离器和离心锤均可位于离心座内,推杆的底部与弹性体接触,推杆可在中央筒内做升降运动,离心锤和外筒可在离心座内做升降运动。在本实施方式中,离心座呈中空的圆杯状,离心座的上端开口,开口直径略大于离心锤的外直径,便于离心锤和外筒在离心座内升降。离心座内设有第一环状台阶和第二环状台阶分别用于支撑内筒和中央筒,提高了离心时分离器的强度。固定栓在位于第一环状台阶和第二环状台阶之间,从离心座的外部插入离心座内,用于固定中央筒,防止中央筒和内筒移动。离心座的内腔底部放置有弹性体,推杆的底部与弹性体接触,在离心时,推杆下降压缩弹簧,离心后,弹性体回弹推动推杆上升。离心座采用密度值较小的材料制成。
第一网片和第二网片上均设有多个通孔,第一网片的通孔孔径为100um~800um,第二网片的通孔孔径为1.0mm~2.5mm。第一网片和第二网片均为金属编织滤网;第一网片是采用较细的金属丝编织的滤网,有利于乳化;第二网片是采用较粗的金属丝编织的滤网,强度较高,第二网片的圆边沿光滑,便于在外筒腔内滑动。外筒的内腔顶部设有外筒网垫,外筒网垫可与第二网片接触,第一网片可与第二网片接触。外筒网垫与第二网片接触和第一网片与第二网片接触时相对旋转内筒,在接触面产生的研磨作用有利于纤维组织的破碎。
使用水平吊篮式离心机进行离心。离心锤和外筒的离心作用力》弹性体的回弹力+破碎脂肪穿过第二网片和第一网片的阻力+环状密封圈和密封碗的摩擦阻力;弹性体的回弹力》离心锤和外筒的重力+破碎脂肪穿过第一网片和第二网片的阻力+环状密封圈和密封碗的摩擦阻力。
在离心时,上腔的内容物可穿过第一网片到达下腔,在非离心时,下腔的内容物可穿过第一网片到达上腔。采用间隔式离心方式,离心次数就是切割乳化的次数。随着离心次数的增加,可提高对脂肪组织的乳化程度,最后一次离心不使用弹性体,离心后切割乳化后的脂肪组织在中央筒内分层。
通过非刃性切割方法:在离心作用力下,脂肪组织依次被挤压穿过第二网片和第一网片被破碎。脂肪干细胞的直径≤30um,第一网片的孔径远大于脂肪干细胞的直径,非刃性切割方法过程中不会损伤脂肪干细胞。离心后,乳化后的脂肪组织分层,离心沉淀物主要为脂肪干细胞和基质血管片段细胞。
一种脂肪干细胞分离方法,包括以下步骤:
(1)根据脂肪组织混合液总量,选取一对或多对分离器,拧下外筒上的密封帽并安装注射针头,抽拉内筒将该混合液吸入外筒中,达到指定刻度后,拧下注射针头并安装密封帽;
(2)将离心锤套装在分离器上,然后将一对或多对分离器对称地安放在离心机的水平离心吊篮中,外筒的针头接口朝下放置,在离心力1000g~2000g条件下离心3~5分钟,离心结束后,外筒内的脂肪组织混合液分为两层,下层是膨胀液,上层是脂肪组织;
(3)取出分离器,拧下密封帽,向下按压推杆将膨胀液排出,然后再拧紧密封帽;
(4)在离心座内腔底部放置弹性体,再将分离器放入离心座内腔中,插入固定栓来固定中央筒,将离心锤套装在分离器上;
(5)将装配好的一对或多对分离器对称地安放在离心机的水平离心吊篮中,外筒的针头接口朝上放置,在离心力1500g~3500g条件下离心5~10分钟,脂肪组织由上腔进入下腔;离心结束后,弹性体回弹归位,脂肪组织由下腔进入上腔;
(6)弹性体回弹归位后再次离心,重复离心多次直至脂肪组织完全乳化,最后一次离心前先取出弹性体,再离心一次;
(7)离心完成后,取出离心座,取下离心锤,拔出固定栓,将分离器取出,然后将中央筒旋转取出,中央筒内的物质分为两层,下层是脂肪干细胞和基质血管片段细胞,上层是油脂;
(8)在中央筒的螺纹接头上连接废液袋软管,向上推压推杆,将中央筒内的油脂排出到废液袋中,脂肪干细胞和基质血管片段细胞留存在中央筒中。
实施例一
(1)根据脂肪组织混合液总量,选取一对或多对分离器,拧下外筒上的密封帽并安装注射针头,抽拉内筒将该混合液吸入外筒中,达到指定刻度后,拧下注射针头并安装密封帽;
(2)将离心锤套装在分离器上,然后将一对或多对分离器对称地安放在离心机的水平离心吊篮中,外筒的针头接口朝下放置,在离心力1200g条件下离心5分钟,离心结束后,外筒内的脂肪组织混合液分为两层,即上腔内的脂肪组织混合液分为两层,下层是膨胀液,上层是脂肪组织;
(3)取出分离器,拧下密封帽,安装上注射针头,向下按压内筒将膨胀液排出,然后再吸入医药级聚乙二醇萃取脂肪,聚乙二醇的量约为脂肪量的10%,然后拧下注射针头并安装密封帽;
(4)在离心座内腔底部放置弹性体,再将分离器放入离心座内腔中,插入固定栓来固定中央筒,将离心锤套装在分离器上;
(5)将装配好的一对或多对分离器对称地安放在离心机的水平离心吊篮中,外筒的针头接口朝上放置,在离心力2500g条件下离心5分钟,脂肪组织和聚乙二醇混合液由上腔进入下腔;离心结束后,弹性体回弹归位,脂肪组织和聚乙二醇混合液由下腔进入上腔。弹性体回弹归位后再次离心,共离心4次;
(6)取出弹性体,在离心力3000g条件下离心10分钟,离心1次;
(7)离心完成后,取出离心座,取下离心锤,拔出固定栓,将分离器取出,然后将中央筒从内筒上旋转取出。中央筒下腔内的物质分为三层,上层为油脂层,中层为脂肪干细胞层,下层为聚乙二醇层;
(8)中央筒的螺纹接头通过三通连接器旋接一个无菌注射器和一个废液袋软管,向上推压推杆,将中央筒内的油脂排出到废液袋中,将脂肪干细胞层转移到无菌注射器内,完成分离。
通过本实施例的分离方法分离的脂肪干细胞主要用在治疗多种疾病如骨关节炎、心肌缺血、神经系统损伤方向上。骨关节炎现有的临床治疗方法疗效并不理想,随着医学及相关领域的迅速发展,再生医学利用脂肪干细胞以及细胞因子发挥治疗效应,已逐渐成为一种新的治疗手段,其种子细胞的选择成为了焦点问题。脂肪干细胞的出现,很大程度上解决了种子细胞选择的问题,有望在脂肪组织工程方向发挥重大作用。而脂肪干细胞具有在培养液中增殖较快、分化能力强、不易凋亡等特点,且在特定环境及组织条件诱导下,可分化成为软骨细胞、骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞、神经细胞等,为治疗多种疾病如骨关节炎、心肌缺血、神经系统损伤等提供了帮助。
实施例二
(1)根据脂肪组织混合液总量,选取一对或多对分离器,拧下外筒上的密封帽并安装注射针头,抽拉内筒将该混合液吸入外筒中,达到指定刻度后,拧下注射针头并安装密封帽;
(2)在离心座内腔底部放置弹性体,将分离器放入离心座内腔中,插入固定栓来固定中央筒,将离心锤套装在分离器上;
(3)将装配好的一对或多对分离器对称地安放在离心机的水平离心吊篮中,外筒的针头接口朝上放置,在离心力2500g条件下离心5分钟,脂肪组织混合液由上腔进入下腔;离心结束后,弹性体回弹归位,脂肪组织混合液由下腔进入上腔。弹性体回弹归位后再次离心,共离心6次;
(4)取下离心锤,在离心力2500g条件下离心5分钟,离心1次;
(5)离心完成后,取出离心座,拔出固定栓,将分离器取出,外筒上腔内的物质分为三层,上层为油脂层,中层为脂肪干细胞和基质血管片段细胞层,下层为膨胀液层;
(6)在外筒的针头接口上连接废液袋软管,向上推压推杆,将上腔内的油脂排出到废液袋中,然后取走废液袋软管,在外筒的针头接口上连接空气过滤器,向下拉动推杆将上腔中的膨胀液吸入到中央筒中,即下腔中;
(7)取下空气过滤器,连接密封帽,再将中央筒从内筒上旋转取出;
(8)在中央筒的螺纹接头上连接废液袋软管,推压推杆,将下腔的膨胀液排出到废液袋中,然后再吸入生理盐水洗涤下腔2次;
(9)在中央筒内吸入血小板浓缩物,然后将中央筒旋回内筒中,将血小板浓缩物注入到上腔,与脂肪干细胞和基质血管片段细胞层汇合;
(10)在离心座内腔底部放置弹性体,再将分离器放入离心座内腔中,插入固定栓来固定中央筒,将离心锤套装在分离器上;
(11)将装配好的一对或多对分离器对称地安放在离心机的水平离心吊篮中,外筒的针头接口朝上放置,在离心力2500g条件下离心5分钟,离心结束后,弹性体回弹归位,弹性体回弹归位后再次离心,共离心3次;
(12)离心完成后,分离器上腔内的物质为脂肪干细胞、基质血管片段细胞和血小板浓缩物的混合物。
通过本实施例的分离方法分离的脂肪干细胞主要用在美容抗衰老领域。脂肪细胞移植对术后远期效果的不确定性成为脂肪移植的最大缺陷,脂肪细胞异位存活率低的原因,主要是缺乏建立基质血管网络的条件。脂肪移植物中绝大多数是脂肪细胞,基质血管成分(SVF)细胞极少。虽然基质血管成分(SVF)细胞中存在脂肪干细胞,但因其数量太少无法达到理想的效果。只有在填充部位有足够的脂肪干细胞,才有很好的促血管发生能力,形成支撑和营养作用,抑制慢性炎症的发生,提高脂肪异位存活率。另外,脂肪干细胞还具有定向分化成脂肪细胞的能力。富血小板纤维蛋白(PRF)作为新一代富血小板浓缩物,其取自于自体血、制备简单,避免了伦理道德的争议及免疫排斥和血液交叉感染的风险,同时PRF中含有大量生长因子,其中血管内皮生长因子(VEGF)可以促进脂肪干细胞的增殖及向血管内皮细胞分化,对组织的生长修复起到一定作用。构建脂肪干细胞和富血小板纤维蛋白的复合体移植物,是优化的选项。
总的来说,本发明的脂肪干细胞分离装置能够替代脂肪干细胞全自动分离设备,并且能够有效地分离脂肪干细胞,装置结构简单,价格低,操作简便,省时省力。
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (6)
1.一种脂肪干细胞分离装置,其特征在于:包括离心锤、离心座和分离器,分离器包括推杆、中央筒、内筒和外筒,中央筒套设在推杆外部,内筒套设在中央筒外部,外筒套设在内筒外部,中央筒外顶部设有螺纹接头,内筒外顶部设有第一网片,第一网片下有空隙,内筒内顶部中间设有向下的螺纹接头,内筒螺纹接头的中央有通孔,内筒内顶部螺纹接头与中央筒外顶部螺纹接头匹配对接,内筒顶部侧面设有环状密封圈,内筒外顶部和外筒内顶部形成的空间为上腔,上腔中设有第二网片,推杆的顶部设有密封碗,中央筒内腔与密封碗形成的空间为下腔;离心锤套设在外筒外部,离心座的内腔底部放置有弹性体,分离器和离心锤均可位于离心座内,推杆的底部与弹性体接触,推杆可在中央筒内做升降运动,离心锤和外筒可在离心座内做升降运动;外筒的顶部设有针头接口,针头接口上连接有密封帽;离心锤和外筒的离心作用力>> 弹性体的回弹力+破碎脂肪穿过第二网片和第一网片的阻力+环状密封圈和密封碗的摩擦阻力;弹性体的回弹力>>离心锤和外筒的重力+破碎脂肪穿过第一网片和第二网片的阻力+环状密封圈和密封碗的摩擦阻力。
2.根据权利要求1所述的一种脂肪干细胞分离装置,其特征在于:内筒的外侧上部设有两个环状卡槽,环状密封圈内设有两个匹配的环状卡条,环状卡条对应卡在环状卡槽中。
3.据权利要求1所述的一种脂肪干细胞分离装置,其特征在于:第一网片和第二网片上均设有多个通孔,第一网片的通孔孔径为100um~800um,第二网片的通孔孔径为1.0mm~2.5mm。
4.根据权利要求1所述的一种脂肪干细胞分离装置,其特征在于:离心座内设有第一环状台阶和第二环状台阶,第一环状台阶用于支撑内筒,第二环状台阶用于支撑中央筒,中央筒通过固定栓固定在第二环状台阶上。
5.根据权利要求1所述的一种脂肪干细胞分离装置,其特征在于:外筒的内腔顶部设有外筒网垫,外筒网垫可与第二网片接触,第一网片可与第二网片接触。
6.一种基于权利要求1至5任一项所述的脂肪干细胞分离装置的分离方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)根据脂肪组织混合液总量,选取一对或多对分离器,拧下外筒上的密封帽并安装注射针头,抽拉内筒将该混合液吸入外筒中,达到指定刻度后,拧下注射针头并安装密封帽;(2)将离心锤套装在分离器上,然后将一对或多对分离器对称地安放在离心机的水平离心吊篮中,外筒的针头接口朝下放置,在离心力1000g~2000g条件下离心3~5分钟,离心结束后,外筒内的脂肪组织混合液分为两层,下层是膨胀液,上层是脂肪组织;(3)取出分离器,拧下密封帽,向下按压推杆将膨胀液排出,然后再拧紧密封帽;(4)在离心座内腔底部放置弹性体,再将分离器放入离心座内腔中,插入固定栓来固定中央筒,将离心锤套装在分离器上;(5)将装配好的一对或多对分离器对称地安放在离心机的水平离心吊篮中,外筒的针头接口朝上放置,在离心力1500g~3500g条件下离心5~10分钟,脂肪组织由上腔进入下腔;离心结束后,弹性体回弹归位,脂肪组织由下腔进入上腔;(6)弹性体回弹归位后再次离心,重复离心多次直至脂肪组织完全乳化,最后一次离心前先取出弹性体,再离心一次;(7)离心完成后,取出离心座,取下离心锤,拔出固定栓,将分离器取出,然后将中央筒旋转取出,中央筒内的物质分为两层,下层是脂肪干细胞和基质血管片段细胞,上层是油脂;(8)在中央筒的螺纹接头上连接废液袋软管,向上推压推杆,将中央筒内的油脂排出到废液袋中,脂肪干细胞和基质血管片段细胞留存在中央筒中。
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Citations (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN201492455U (zh) * | 2009-09-25 | 2010-06-02 | 金哲 | 用于脂肪抽取、分离和移植的装置 |
CN102631717A (zh) * | 2012-04-24 | 2012-08-15 | 祁小平 | 体外诱导病人自身外周血产生高浓度抗炎因子的装置 |
WO2013025869A1 (en) * | 2011-08-17 | 2013-02-21 | Harvest Technologies Corporation | Segregation of oils in the fractionation of aspirated adipose tissues |
WO2013150432A1 (en) * | 2012-04-02 | 2013-10-10 | Leader Medica S.R.L. | Container with separable chambers for the treatment of biological tissues by centrifugal separation |
KR101694422B1 (ko) * | 2016-06-28 | 2017-01-10 | (주) 굿모닝 바이오 | 지방줄기세포 여과용기 |
CN106701548A (zh) * | 2017-02-10 | 2017-05-24 | 柳州市妇幼保健院 | 淋巴细胞提取装置及提取方法 |
CN107904138A (zh) * | 2017-11-03 | 2018-04-13 | 浙江工业大学 | 从脂肪组织中分离含血管基质成分的脂肪组织制备装置 |
KR20180127884A (ko) * | 2017-09-01 | 2018-11-30 | (주) 굿모닝 바이오 | 지방줄기세포 추출용 용기 및 이를 이용한 지방줄기세포 추출방법 |
CN110283719A (zh) * | 2019-06-14 | 2019-09-27 | 张兰芳 | 一种整形美容用自体脂肪活性细胞过滤装置 |
CN209772420U (zh) * | 2018-12-18 | 2019-12-13 | 常州爱复康生物科技有限公司 | 高速离心机 |
CN110982672A (zh) * | 2020-01-07 | 2020-04-10 | 维堪(厦门)医疗科技有限公司 | 一种干细胞分离装置 |
CN111073802A (zh) * | 2018-10-22 | 2020-04-28 | 爱心医疗有限公司 | 脂肪干细胞分离装置 |
CN111704986A (zh) * | 2020-06-20 | 2020-09-25 | 刘新新 | 一种白血病淋巴细胞分离提取装置 |
-
2020
- 2020-11-20 CN CN202011305485.7A patent/CN112375654B/zh active Active
Patent Citations (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN201492455U (zh) * | 2009-09-25 | 2010-06-02 | 金哲 | 用于脂肪抽取、分离和移植的装置 |
WO2013025869A1 (en) * | 2011-08-17 | 2013-02-21 | Harvest Technologies Corporation | Segregation of oils in the fractionation of aspirated adipose tissues |
WO2013150432A1 (en) * | 2012-04-02 | 2013-10-10 | Leader Medica S.R.L. | Container with separable chambers for the treatment of biological tissues by centrifugal separation |
CN102631717A (zh) * | 2012-04-24 | 2012-08-15 | 祁小平 | 体外诱导病人自身外周血产生高浓度抗炎因子的装置 |
KR101694422B1 (ko) * | 2016-06-28 | 2017-01-10 | (주) 굿모닝 바이오 | 지방줄기세포 여과용기 |
CN106701548A (zh) * | 2017-02-10 | 2017-05-24 | 柳州市妇幼保健院 | 淋巴细胞提取装置及提取方法 |
KR20180127884A (ko) * | 2017-09-01 | 2018-11-30 | (주) 굿모닝 바이오 | 지방줄기세포 추출용 용기 및 이를 이용한 지방줄기세포 추출방법 |
CN107904138A (zh) * | 2017-11-03 | 2018-04-13 | 浙江工业大学 | 从脂肪组织中分离含血管基质成分的脂肪组织制备装置 |
CN111073802A (zh) * | 2018-10-22 | 2020-04-28 | 爱心医疗有限公司 | 脂肪干细胞分离装置 |
CN209772420U (zh) * | 2018-12-18 | 2019-12-13 | 常州爱复康生物科技有限公司 | 高速离心机 |
CN110283719A (zh) * | 2019-06-14 | 2019-09-27 | 张兰芳 | 一种整形美容用自体脂肪活性细胞过滤装置 |
CN110982672A (zh) * | 2020-01-07 | 2020-04-10 | 维堪(厦门)医疗科技有限公司 | 一种干细胞分离装置 |
CN111704986A (zh) * | 2020-06-20 | 2020-09-25 | 刘新新 | 一种白血病淋巴细胞分离提取装置 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
刘保池 上海:复旦大学出版社.细胞治疗临床研究.2019,第336-338页. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN112375654A (zh) | 2021-02-19 |
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