CN112353947A - 一种含二甲双胍和抗体药物偶联物的药物组合物及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种含抗体药物偶联物和二甲双胍的联合用药组合物，该联合用药组合物能有效抑制肿瘤细胞的增殖，对肿瘤治疗具有显著疗效，其抗肿瘤作用显著优于单一用药，具有显著的增效作用。另外，二甲双胍与一、二线化疗药或靶向药相较，价格低廉，减轻了患者的经济负担，是一种高效低毒的肿瘤治疗药物组合物。

Description

一种含二甲双胍和抗体药物偶联物的药物组合物及其应用
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域，尤其涉及一种抗肿瘤的联合用药组合物及其应用。
背景技术
抗体药物偶联物(Antibody Drug Conjuate，ADC)，ADC由三部分组成：抗体，细胞毒素与连接两者的连接头。将单克隆抗体与细胞毒素偶联后，抗体药物偶联物利用单克隆抗体的靶向性，特异性地识别癌细胞表面的受体，并与受体结合，然后进入到细胞内部，利用细胞内的蛋白酶释放细胞细胞毒素阻止癌细胞繁殖与杀灭癌细胞。现有技术一般采用哺乳动物细胞培养生产表达抗体，经过高度纯化后的抗体与细胞毒素MMAE通过连接子偶联，获得抗体药物偶联物。抗体药物偶联技术使小分子毒素药物与生物蛋白融为一体，兼具二者之长，成为新一代治疗产品，在极大增强药效的同时减少毒副作用。
专利申请(CN105008398A或WO2015074528A1)公开了一种人源化RC48抗体药物偶联物(RC48 ADC，disitamab vedotin)，其中人源化RC48抗体为一种靶向Her2的单克隆抗体，细胞毒素选自Monomethyl AuristatinE(MMAE)，该细胞毒素属于海兔毒素肽的衍生物。接头选择Maleimido-Caproyl-Valine-Citrulline-p-AminoBenzyloxy(mc-VC-PAB)，重组人源化抗Her2单抗-MMAE偶联物中的单抗与MMAE通过半胱氨酸与接头相连组成。
二甲双胍(Metformin，简称Met)，是治疗2型糖尿病的首选药物和联合治疗方案中的基础治疗药物，应用于临床已有50多年的历史，是目前全球应用最广泛的口服降糖药之一。目前二甲双胍在各国糖尿病治疗指南中均被推荐为首选用药，且无禁忌症。自2005年以来，越来越多的数据表明，二甲双胍具有降低胰腺癌、肺癌等多种肿瘤发生的作用。在临床上发现糖尿病和癌症存在相互关系已经不止50年，早在1959年就有相关论述发表。II型糖尿病患者发生肝癌、胰腺癌和子宫内膜肿瘤的概率为一般人的2倍或更高，发生结直肠癌、乳腺癌和膀胱癌的概率为一般人的1.2—1.5倍。并且，糖尿病能够显著增加癌症的死亡率，与未患有糖尿病的乳腺癌患者相比，患有糖尿病的乳腺癌患者的5年死亡风险增加1.39倍。
联合用药(Drug combination)是指为了达到治疗目的而采用的两种或两种以上药物同时或先后应用。联合用药往往会发生体内或体外药物的相互影响。对于某些药物组合，联合治疗还允许产生最佳组合剂量来使副作用最小化；两种化合物的联合治疗可获得未预料到的协同作用和引发非由单一化合物诱导的效应。
衡量联合用药作用的方法有多种，其中最简单的为代数和相加法，即EA+B＝EA+EB，EA为药物A在某剂量下单用时产生的效应，EB是药物B在某剂量下单用时产生的效应，EA+B为A药和B药分别以各自单用时的剂量合并使用时产生的效应。但此方法只适用于极其明显的增强现象(强协同)，会使许多独立相加的现象达不到要求水平而被判断为药物的拮抗作用。最常用的为金正均法及Chou-Talalay合并指数CI(combination index)法。金正均法公式为EA+B＝EA+EB-EA·EB，此法常用于评价A药和B药在体内合并使用时的效果。合并指数法是从通用的质量作用定律概念衍化出来，CI值可由CompuSyn软件根据A、B药物的单药IC50及联用药效计算得出，多用于评价A药和B药在体外合并使用时的效果，此法已被西方医药界所广泛应用。
因此，本发明的目的在于：通过对肿瘤细胞增殖的抑制作用及对小鼠模型肿瘤组织生长抑制作用的研究，提供了一种含抗体药物偶联物和二甲双胍的联合用药组合物；实现了以下技术效果：抗体药物偶联物和二甲双胍联合用药能有效抑制肿瘤细胞的增殖，对肿瘤治疗具有显著疗效，其抗肿瘤作用显著优于单一用药，具有显著的增效作用，是一种高效低毒的肿瘤治疗药物组合物。
发明内容
本发明提供了一种含二甲双胍和抗体药物偶联物的联合用药组合物，联用药物之一为临床上应用最广泛的降糖药物—二甲双胍，且采用的临床常规剂量，安全性高。二甲双胍与一、二线化疗药或靶向药相较，价格低廉，减轻了患者的经济负担，大幅度降低了靶向药生产公司的时间成本和经济成本。二甲双胍和抗体药物偶联物的联合用药组合物能有效抑制肿瘤细胞的增殖，对肿瘤治疗具有显著疗效，其抗肿瘤作用显著优于单一用药，具有显著的增效作用，是一种高效低毒的肿瘤治疗药物组合物。
具体的，本发明提供了联合用药组合物，其包含抗体药物偶联物和二甲双胍。
进一步的，所述抗体药物偶联物中所述抗体为抗HER2单克隆抗体，其中所述抗体与一个或多个细胞毒素偶联，所述细胞毒素为MMAE或MMAF及其洐生物或DM1、DM4及其洐生物。
进一步的，所述抗体包含重链和轻链，其中(i)所述重链包含三个CDR区，其中所述CDR区的氨基酸序列分别具有如SEQ ID NO：1、2和3所示的氨基酸序列；和(ii)所述轻链包含三个CDR区，其中所述CDR区的氨基酸序列分别具有如SEQ ID NO：4、5和6所示的氨基酸序列。
进一步的，所述抗体是人源化抗体；其中所述细胞毒素与所述抗体通过接头偶联。
进一步的，所述接头与所述抗体通过巯基连接；其中所述接头选自mc-vc-pAB和mc。
进一步的，所述抗体药物偶联物为disitamab vedotin。
进一步的，所述抗体药物偶联物和二甲双胍分别、同时或顺序施用。
进一步的，所述抗体药物偶联物和二甲双胍同时施用。
进一步的，所述二甲双胍使用剂量为1～1.5g/天。
本发明进一步提供了抗体药物偶联物和二甲双胍联合用药组合物在制备用于治疗或预防癌症的药物中的用途，其中所述癌症为HER2阳性癌症。
进一步的，所述癌症为乳腺癌、卵巢癌或胃癌。
附图说明
图1RC48ADC单药及二甲双胍单药抗瘤药效
图2RC48ADC与二甲双胍联合不同时间的合并药效
图3RC48ADC与二甲双胍联合使用的体内药效评价
具体实施方式
下面将通过实施例对本发明进行进一步地阐述，需要说明的是，以下实施例是对本发明进行进一步地阐述和解释，而不应被看作是对本发明的限制。
实施例1：抗体纯化
基于专利申请(CN105008398A或WO2015074528A1)实施例公开的相关方法获得了鼠源单克隆抗体mRC48以及相关人源化抗体RC48，其包含人IgG1κ重链恒定区和重链可变区RC48-VH，以及人IgG1κ轻链恒定区和轻链可变区RC48-VL，将上述扩增到的各片段分别亚克隆到表达载体pcDNA3.0上。将构建的不同质粒转染到悬浮CHO细胞(Invitrogen)中。在标准条件下培养，待培养基中的营养物质耗尽、细胞不再进一步生长时放罐，采用离心或过滤的方法将细胞分离出去，取上清液，抗体蛋白存在于上清液中，上ProteinA亲和层析柱进行第一步纯化，
洗脱下来的目的蛋白，上阳离子填料层析柱进行第二步纯化，收集目的蛋白峰，然后上第三步柱以目的蛋白穿透模式进行第三步纯化，纯化后的蛋白经过各项指标检测合格后，然后进行超滤浓缩，蛋白浓度达到约20-30mg/ml，此即为抗体蛋白原液，可在-80℃长期保存。
实施例2：人源化抗体RC48和细胞毒素偶联
将TCEP(Tris-2-carboxyethyl-phosphine)母液溶于偶联缓冲液中，先用偶联缓冲液稀释，与人源化抗体RC48按照体积比1：1(v:v＝1：1)混合，TCEP与抗体的终浓度摩尔比1.9：1，于25℃搅拌反应2.5h。TCEP还原可重复性好，还原后自由巯基数可以达到3.5-4.5。
还原后抗体可直接进行后续偶联。配制10mmol/L细胞毒素(vc-MMAE、vc-MMAF、mc-MMAF)溶于DMSO(dimethyl sulfoxide，二甲亚砜)，按照细胞毒素与巯基的摩尔比1.1:1缓慢加药，于25℃搅拌反应2h。用DTNB法于412nm检测自由巯基浓度(接近0)，纯化除去残余未反应细胞毒素以及DMSO等游离小分子，SDS-PAGE电泳及SEC、HPLC法检测偶联情况。偶联反应可重复性好，打开的自由巯基可以偶联完全，得到RC48ADC，RC48ADC偶联度在3.5-4.5。
实施例3：RC48ADC和二甲双胍单药的体外抗癌活性
(1)药物处理
汇合度为80％左右的SK-BR-3、NCI-N87或SK-OV-3细胞，经胰酶消化后，新鲜培养基重悬细胞并计数，将细胞浓度稀释为5×104/ml，100μl/孔接种到96孔板中，37℃、5％CO2培养箱中培养24h，加入梯度浓度的RC48ADC或二甲双胍处理72h，每个浓度梯度设3-6个复孔，同时设置空白对照孔(无药物处理细胞对照孔)。
(2)细胞增殖能力测定
弃掉培养基，用无血清培养基配置10％CCK8稀释液，每孔加100ul，培养箱内孵育1-4小时。酶标仪检测450nm条件下各孔的吸光度(OD值)并计算增殖抑制率。细胞增殖抑制率(％)＝(1-药物组平均OD值/空白对照组平均OD值)×100％。
(3)结果分析
如图1所示，RC48ADC单药对3种HER2阳性的肿瘤细胞(SK-BR-3、NCI-N87及SK-OV-3)的增殖均有显著的抑制作用，IC50值分别为4.91ng/ml、14.54ng/ml及11.28ng/ml。二甲双胍单药也表现出了显著的抗瘤能力，作用于SK-BR-3、NCI-N87及SK-OV-3细胞时的IC50值分别为2.59mg/ml、4.48mg/ml及7.98mg/ml。
实施例4：RC48ADC和二甲双胍联合用药的体外抗瘤效果评价
(1)药物处理
汇合度为80％左右的SK-BR-3、NCI-N87或SK-OV-3细胞，经胰酶消化后，新鲜培养基重悬细胞并计数，将细胞浓度稀释为5×104/ml，100μl/孔接种到96孔板中，37℃、5％CO2培养箱中培养24h后，恒定浓度的RC48ADC(～IC50)分别与不同浓度的二甲双胍配比组成多个联用组并同时处理细胞，每个联用组设置3-6个重复，同时设置空白对照孔，72h后检测细胞活力。
(2)细胞增殖能力测定
弃掉培养基，用无血清培养基配置10％CCK8稀释液，每孔加100ul，培养箱内孵育1-4小时。酶标仪检测450nm条件下各孔的吸光度(OD值)并计算增殖抑制率。
(3)联合效果评价
利用Chou-Talalay法，即联合指数(combination index，CI)法评价RC48ADC与二甲双胍联合施用在不同配比下作用72h对以上3种细胞增殖抑制的协同/拮抗作用。根据两种药物单用及联用时的剂量—效应数据，利用CompuSyn软件可计算不同配比条件下两种药物联用的CI值，CI值可评价两种药物的联用效果，评价标准如表1所示。
表1 CI值与联用效果
Figure BDA0002792555470000061
(4)结果分析
对于抗癌或抗病毒药物，高药效条件下(如肿瘤细胞增殖抑制率>80％)的联用效果(协同/拮抗/相加)比低药效条件下(如肿瘤细胞增殖抑制率<20％)的联用效果更能反映两种药物在临床治疗中的联用药效。结果如表2-4所示，在SK-BR-3、NCI-N87及SK-OV-3细胞中，抑制率≥80％时，两种药物联用表现为协同或强协同，且药效越高，协同作用越强。
表2 SK-BR-3细胞中二甲双胍对RC48ADC的抑瘤能力有协同作用
Figure BDA0002792555470000062
Figure BDA0002792555470000071
表3 NCI-N87细胞中二甲双胍对RC48ADC的抑瘤能力有协同作用
Figure BDA0002792555470000072
表4 SK-OV-3细胞中二甲双胍对RC48ADC的抑瘤能力有协同作用
Figure BDA0002792555470000073
Figure BDA0002792555470000081
实施例5：RC48ADC在高药效(高剂量)条件下与二甲双胍联用的体外抗瘤效果评价
(1)药物处理
汇合度为80％左右的NCI-N87细胞，经胰酶消化后，新鲜培养基重悬细胞并计数，将细胞浓度稀释为5×104/ml，100μl/孔接种到96孔板中，37℃、5％CO2培养箱中培养24h后，恒定浓度的RC48ADC(～IC70)分别与不同浓度的二甲双胍配比组成多个联用组并同时处理细胞，每个联用组设置3-6个重复，同时设置空白对照孔，72h后检测细胞活力。
(2)细胞增殖能力测定
弃掉培养基，用无血清培养基配置10％CCK8稀释液，每孔加100ul，培养箱内孵育1-4小时。酶标仪检测450nm条件下各孔的吸光度(OD值)并计算增殖抑制率。
(3)联合效果评价
利用Chou-Talalay法评价RC48ADC与二甲双胍联合施用在不同配比下作用72h对NCI-N87细胞增殖抑制的协同/拮抗作用。
(4)结果分析
100ng/ml RC48ADC单药对NCI-N87增殖抑制率高达70％，此剂量(药效)条件下的RC48ADC与二甲双胍联用依然有协同作用且同样具有药物剂量(药效)依赖性，剂量(药效)越高协同效果越强，联合药效>80％时，表现为协同或强协同(表5)。
表5 NCI-N87细胞中大剂量(高药效)RC48ADC与二甲双胍的联用效果
Figure BDA0002792555470000082
Figure BDA0002792555470000091
实施例6：RC48ADC与二甲双胍联用不同时间的体外抗瘤效果评价
(1)药物处理
汇合度为80％左右的SK-BR-3细胞，经胰酶消化后，新鲜培养基重悬细胞并计数，将细胞浓度稀释为5×104/ml，100μl/孔接种到96孔板中，37℃、5％CO2培养箱中培养24h后，分别用3ng/ml RC48ADC或梯度浓度(2、4、6、8、10mg/ml)的二甲双胍或两者同时处理细胞。每个样品孔设置3-6个重复，同时设置空白对照孔。分别在药物处理24h、48h及72h后检测细胞活力。
(2)细胞增殖能力测定
弃掉培养基，用无血清培养基配置10％CCK8稀释液，每孔加100ul，培养箱内孵育1-4小时。酶标仪检测450nm条件下各孔的吸光度(OD值)并计算增殖抑制率。
(3)联合效果评价
利用简单代数和相加法评价RC48ADC与二甲双胍联合施用在不同配比下作用24h、48h对NCI-N87细胞增殖抑制的协同/拮抗作用；利用Chou-Talalay法评价RC48ADC与二甲双胍联合施用在不同配比下作用72h对NCI-N87细胞增殖抑制的协同/拮抗作用。
(4)结果分析
结果如图2所示，3ng/ml RC48ADC与2、4、6、8、10mg/ml二甲双胍同时施用24h或48h时联合药效≥两种药物单药药效之和，表现为明显的协同。两种药物联用72h时，虽然联合药效略小于单药药效之和，但其CI值分别为0.68，0.66，0.23，0.14及0.12，表现为协同及强协同。综上所述，3ng/ml RC48ADC与2～10mg/ml二甲双胍联用24h、48h、72h均表现为协同作用，且联用药效越高时，协同效果越强。
实施例7：RC48ADC和二甲双胍联合用药的体内抗瘤效果评价
(1)HER2+++胃癌MiniPDX模型构建20只BALB/c nude小鼠，雌性，4-8周龄，体重18-22g，购买于江苏集萃药康生物科技有限公司(SCXK(苏)2018-0008)，合格证号：201903761，实验动物使用许可证号：SYXK(沪)2015-0015。所有的裸小鼠饲养于SPF级动物房IVC恒温恒压系统中，其中温度20～26℃，湿度40～70％，光照周期12小时明12小时暗。每个笼盒内饲养2只裸小鼠，笼盒大小为325mm×210mm×180mm，笼盒内使用垫料为玉米芯，每周更换两次。在整个实验过程中，所有实验小鼠均可以自由饮食，饲料和水均经过高压灭菌，每周更换2次。所有出入动物饲养室或实验操作人员均穿戴灭菌实验服、一次性医用口罩和橡胶手套。每只饲养笼均有对应的明确的详细标签，标签内容包括：IACUC批准号(LDIACUC007)、动物数目、性别、品系、接收日期、项目编号、组别、目前实验阶段和实验负责人等。复苏HER2+++胃癌PDX模型，待肿瘤长至500-800mm3时，分别手术无菌摘取肿瘤组织，于生物安全柜中去除非肿瘤组织和坏死组织；将肿瘤组织切成1-3mm3小块，使用消化液37℃消化肿瘤块1-2小时，之后过70μm筛网收集细胞悬液，1200rpm离心3分钟去除上清，使用10mL含1％FBS的PBS重悬细胞并血球计数板计数；去除鼠源细胞后，1200rpm离心3分钟去除上清，用细胞培养液PC-1(不含血清)重悬细胞，血球计数板计数，调整细胞密度。将细胞悬液灌装至MiniPDX装置中；按照体重对小鼠进行随机分组；将MiniPDX装置接种至小鼠背部皮下，接种当天为第0天，整个实验进行7天，实验结束后安乐死小鼠，取出MiniPDX装置，用Cell Titer-Glo进行细胞活力检测。
(2)药物处理
将实验小鼠按体重随机分为6组，每组2只，每只小鼠接种3个MiniPDX装置，具体施用方式见表6。
表6分组和施用
Figure BDA0002792555470000101
Figure BDA0002792555470000111
注：N：MiniPDX装置重复数量；i.v.：尾静脉注射施用；i.p.：腹腔注射施用；QD：每天一次；QW：每周一次；施用体积：根据荷瘤鼠体重调整施用体积(0.1mL/10g)。
(3)评估指标
肿瘤细胞相对增殖率(T/C)(％)＝(V药物处理组d7-V对照组d0)/(V对照组d7-V对照组d0)x100。(V药物处理组d7：第7天施用组荧光值；V对照组d7：第7天对照组荧光值；V对照组d0：第0天对照组荧光值)。施用后小鼠体重增长变化比率：RCBW(％)＝(BWi–BW0)/BW0×100，BWi为开始施用后的平均体重，BW0为首次施用时的平均体重。
(4)联合效果评价
利用金正均法评价RC48ADC与二甲双胍联合施用在miniPDX模型中抑瘤效应的协同/拮抗作用。计算合并效应时按照以下公式：q＝EA+B/(EA+EB-EA·EB)，q>1.15时为协同作用，0.85≤q≤1.15时为加和作用，q<0.85时为拮抗作用。
(5)结果分析
结果如图3所示，在HER2+++人源性胃癌MiniPDX药效模型中，1.5mg/kg RC48ADC单药单次静脉注射一周后肿瘤细胞增殖抑制率为60％(p＝0.025*)，50mg/kg与200mg/kg Met单药对肿瘤细胞增殖无抑制作用，反而有轻微的促进作用，但这种促进作用无统计学意义(p值分别为0.613、0.604)。1.5mg/kg RC48ADC与50mg/kg Met联合使用对肿瘤细胞的增殖抑制率提高至71％(p＝0.009**)，经计算此剂量条件下，联用q值为1.30，表现为协同作用。1.5mg/kg RC48ADC与100mg/kg Met联合使用对肿瘤细胞的增殖抑制率提高至91％(p＝0.001**)，联用q值为1.67，同样表现为协同作用。此外，治疗期间，所有治疗组均未出现体重明显下降和其他异常临床症状，表明所有小鼠对治疗均耐受性良好。
本发明已通过各具体实施例作了举例说明。但是，本领域普通技术人员能够理解，本发明并不限于各具体实施方式，普通技术人员在本发明的范文内可以作出各种改动或变型，并且在本说明书中各处提及的各个技术特征可以相互组合，而仍不背离本发明的精神和范围。这样的改动和变型均在本发明的范围之内。
序列表
<110> 荣昌生物制药（烟台）股份有限公司
<120> 一种含二甲双胍和抗体药物偶联物的药物组合物及其应用
<130> 2020
<160> 10
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 11
<211> 5
<212> PRT
<213> 未知(Unknown)
<400> 11
Asp Tyr Tyr Ile His
1 5
<210> 11
<211> 17
<212> PRT
<213> 未知(Unknown)
<400> 11
Arg Val Asn Pro Asp His Gly Asp Ser Tyr Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Asp
<210> 12
<211> 9
<212> PRT
<213> 未知(Unknown)
<400> 12
Ala Arg Asn Tyr Leu Phe Asp His Trp
1 5
<210> 13
<211> 11
<212> PRT
<213> 未知(Unknown)
<400> 13
Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala Val Ala
1 5 10
<210> 14
<211> 7
<212> PRT
<213> 未知(Unknown)
<400> 14
Trp Ala Ser Ile Arg His Thr
1 5
<210> 15
<211> 7
<212> PRT
<213> 未知(Unknown)
<400> 15
His Gln Phe Ala Thr Tyr Thr
1 5
<210> 16
<211> 115
<212> PRT
<213> 未知(Unknown)
<400> 16
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Gln Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Val Asn Pro Asp His Gly Asp Ser Tyr Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Asp Lys Ala Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Asp Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Asn Tyr Leu Phe Asp His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser
115
<210> 17
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<212> PRT
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<400> 17
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Ile Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys His Gln Phe Ala Thr Tyr Thr Phe
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100 105
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<211> 445
<212> PRT
<213> 未知(Unknown)
<400> 18
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Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Gln Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Val Asn Pro Asp His Gly Asp Ser Tyr Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Asp Lys Ala Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Asp Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Asn Tyr Leu Phe Asp His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro
115 120 125
Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val
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145 150 155 160
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275 280 285
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<211> 212
<212> PRT
<213> 未知(Unknown)
<400> 19
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Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
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Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser
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180 185 190
Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn
195 200 205
Arg Gly Glu Cys
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Claims (10)

1.联合用药组合物，其包含抗体药物偶联物和二甲双胍。
2.根据权利要求1所述的联合用药组合物，其中所述抗体药物偶联物中所述抗体为抗HER2单克隆抗体，其中所述抗体与一个或多个细胞毒素偶联，所述细胞毒素为MMAE、MMAF及其洐生物或DM1、DM4及其洐生物。
3.根据权利要求2所述的联合用药组合物，其中所述抗体包含重链和轻链，其中(i)所述重链包含三个CDR区，其中所述CDR区的氨基酸序列分别具有如SEQ ID NO：1、2和3所示的氨基酸序列；和(ii)所述轻链包含三个CDR区，其中所述CDR区的氨基酸序列分别具有如SEQID NO：4、5和6所示的氨基酸序列。
4.根据权利要求2所述的联合用药组合物，其中所述抗体是人源化抗体；其中所述细胞毒素与所述抗体通过接头偶联。
5.根据权利要求4所述的联合用药组合物，其中所述接头与所述抗体通过巯基连接；其中所述接头选自mc-vc-pAB和mc。
6.根据权利要求1所述的联合用药组合物，其中所述抗体药物偶联物为disitamabvedotin。
7.根据权利要求1所述的联合用药组合物，其中所述抗体药物偶联物和二甲双胍分别、同时或顺序施用。
8.根据权利要求1所述的联合用药组合物，其中所述抗体药物偶联物和二甲双胍同时施用。
9.根据权利要求1所述的联合用药组合物，其中所述二甲双胍使用剂量为1～1.5g/天。
10.抗体药物偶联物和二甲双胍联合用药组合物在制备用于治疗或预防癌症的药物中的用途，其中所述癌症为HER2阳性癌症，优选癌症为乳腺癌、卵巢癌或胃癌。
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