CN112315999A - 用于预防和治疗猪流感的中药制剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于兽药技术领域,具体涉及一种用于预防和治疗猪流感的中药制剂及其制备方法。该中药制剂以苦木、羌活、睡莲花、一枝蒿、桃儿七、小驳骨和紫草为原料药,严格按照君臣佐使进行配伍,分别对不同中药原料进行处理,最大程度的发挥不同药物的药效,制备的中药制剂对猪流感病毒具有极好的抑制效果,在临床应用中总有效率接近100%,而且该制剂为纯中药制剂,安全无残留,在防治猪流感的同时能够保证食品安全,具有广阔的市场前景。
Description
技术领域
本发明属于兽药技术领域,具体涉及一种用于预防和治疗猪流感的中药制剂及其制备方法。
背景技术
流行性感感冒简称流感,是由A型(甲型)流感病毒引起的人兽共患传染病。不同动物感染后或同种动物感染不同血清型的病毒后表现不一,其中人、马和猪流感通常侵害上呼吸道,以发热、咳嗽、打喷嚏、呼吸困难、流鼻涕及乏力等症状为主。
此病在动物中存在历史已久,1918年猪流感在美国大流行,此后几乎每年都有发生,很快蔓延到许多国家。在我国,本病在人群中的大流行已有多次,在猪、马群中亦有爆发流行,尤其是近年来在禽类中也频频爆发流行。
流感病毒属于正黏膜病毒科,该科下设5个属,其中有3个是流感病毒属,即A型流感病毒属、B型流感病毒属和C型流感病毒属。三型流感病毒的内部核蛋白和基质蛋白的抗原性有很大差异,通过琼脂扩散等试验可将它们区分开来。这三型病毒在基因组机构和致病性方面也存在很大差异。
流感病毒对环境的抵抗力相对较弱,高热或低pH、非等渗环境和干燥均可使病毒灭活。在-70℃稳定,冻干后可保存数年。60℃经20 min可使本病毒灭活。因带有囊膜,一般消毒剂对病毒均有作用,尤其对碘蒸气和碘溶液特别敏感。
在动物流感中,猪流感是除禽流感以外经济意义最大的,而且公共卫生意义特别重要。发生猪流感时,分离到的病毒最常见的是H1N1、H3N2和H1N2亚型,它们在全世界的猪群中广泛流行。其他亚型的病毒如H3N1、H2N3、H1N7、H5N7、H9N2、H4N6、H3N3、H6N6、H5N2等也相继在猪体内被分离到,但是目前还没有证据表明这些病毒已在猪群中传播,形成了稳定的遗传谱系,对这些病毒的临床意义也不清楚。猪流感多呈流行性,猪群最早出现猪流感常与从外面引进猪有关,很多暴发是由猪只从感染群移动到易感群引起。感染群大多数猪或所有的猪都同时发病。病猪和带毒猪是主要的传染源,主要通过鼻咽途径直接传播。深秋、寒冬和早春是易发季节。
猪发生流感后,临床症状主要为:潜伏期很短,几小时到数天,自然发病平均4d,人工感染则为24~48h。突然发病,常全群几乎同时感染。病猪体温突然升高到40.3~41.5℃,有时可高达42℃食欲减退,甚至废绝,精神极度委顿,肌肉和关节疼痛,常卧地不起或钻卧在垫草中,捕捉时则发出惨叫声。呼吸急促、腹式呼吸、夹杂阵发性痉挛性咳嗽。粪便干硬。眼和鼻流岀黏性分泌物,有时鼻分泌物带有血色。病程较短,如无并发症,多数病猪可于6~7d后康复。
发病率高(接近100%),而病死率低(常不到1%)。如有继发性感染,则可使病势加重,发生纤维素性出血性肺炎或肠炎而死亡。常见的继发性呼吸道细菌感染有胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌和2型猪链球菌;常见继发性感染的呼吸道病毒有猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRSV)和猪呼吸道冠状病毒(PRCV)等。个别病例可转为慢性,持续咳嗽、消化不良、瘦弱,长期不愈,可拖延1个月以上,也常引起死亡。
没有并发症时猪流感的大体病理变化主要表现为病毒性肺炎,以尖叶和心叶最常见,但在严重病例则大半个肺受害。一般受害肺组织和正常肺组织之间分界明显,受害区域呈紫色并实变,小叶间水肿明显。在严重病例,可发生纤维素性胸膜炎。鼻、喉、气管和支气管黏膜可能有出血,充满带血的纤维素性渗出物。支气管淋巴结和纵隔淋巴结肿大充血、水肿,脾常轻度肿大,胃肠有卡他性炎症。在有并发感染尤其是细菌性感染时,病理变化常变得复杂。病理变化的严重程度与引起流行的毒株有很大关系。
根据其流行病学的特点,结合典型的临床症状和病理变化,可以做出初步诊断。确诊需通过血清学方法和病毒分离鉴定。实验室诊断方法可参考禽流感。用于病毒分离的样品以鼻腔拭子为最佳,在很小的猪亦可用咽部拭子。
主要的防控措施为严格的生物安全和合适的疫苗免疫。因为存在种间传播,所以应防止猪与其他种类动物,特别是家禽接触。怀疑有流感病毒感染的人也应防止与猪接触。疫苗免疫也是控制猪流感的有效措施,美国和欧洲都有HN1亚型和H3N2亚型的商品疫苗,最好间隔3周接种2次。在有母源抗体的情况下,应在10周龄以后免疫,以免产生干扰。使用疫苗尤应注意流行毒株的HA亚型,因为不同亚型之间没有交叉保护。
本病目前尚无特效药物疗法,主要采取综合防制措施及对症疗法。最根本的办法是注射疫苗和药物预防。
近年来,猪流感已成为影响养猪发展的一种重要的疾病。发病后及时采用对症进行治疗可显著降低动物死亡率,同时在生产过程中适当添加抗生素也可在一定程度上降低该病的发生率。但随着大量抗菌药特别是广谱抗菌药在养殖业中的广泛使用,抗菌药物的耐药性问题日趋突出,与此同时也有研究资料表明,亚抑制浓度的抗生素可以影响细菌或病毒的代谢过程而改变细菌或病毒的毒力或对环境的适应能力等,造成超级耐药菌,严重威胁着动物和人类的生命健康。
发明内容
针对目前对猪流感仍没有很好的防控措施以及存在抗生素残留的缺陷和问题,本发明提供一种用于预防和治疗猪流感的中药制剂及其制备方法。
本发明解决其技术问题所采用的方案是:一种用于预防和治疗猪流感的中药制剂,包括以下重量份的中药原料:苦木20-60份、羌活15-45份、睡莲花35-55份、一枝蒿40-60份、桃儿七40-60份、小驳骨30-50份、紫草35-60份。
上述的用于预防和治疗猪流感的中药制剂,包括以下重量份的中药原料:苦木30-50份、羌活25-35份、睡莲花40-50份、一枝蒿45-55份、桃儿七45-55份、小驳骨45-45份、紫草40-60份。
上述的用于预防和治疗猪流感的中药制剂,包括以下重量份的中药原料:苦木40份、羌活30份、睡莲花45份、一枝蒿50份、桃儿七50份、小驳骨40份、紫草50份。
本发明还提供一种用于预防和治疗猪流感的中药制剂的制备方法,包括以下步骤:
步骤一、按重量份分别称取苦木、羌活、睡莲花、一枝蒿、桃儿七、小驳骨和紫草;
步骤二、将苦木粉碎,加入等量的0.55%硫酸浸泡1-3h,然后倒入渗漉桶中用0.55%硫酸渗漉,收集渗漉液;将渗漉液的pH值调为9.5,静置2-3h后滤去沉淀,收集上清液,向上清液中加入12-18倍量的活性炭,搅拌1-3h,离心、去除活性炭;将活性炭自然干燥12-24h后用氯仿回流洗脱活性炭,收集氯仿洗脱液进行浓缩结晶;向结晶中加入2倍量的乙醚溶液,回流提取,蒸干乙醚液,用90%的乙醇重结晶,得到苦木结晶,备用;
步骤三、将羌活粉碎,加入1-3倍量乙醚提取1-3h,回收溶剂,冷藏、过滤,保存滤液和沉淀,滤液和沉淀用石油醚和乙醇重结晶,保存羌活晶体备用;
步骤四、将睡莲花粉碎,加入5-10倍量的65%乙醇提取,过滤;向滤液加入2-5倍量的水煎煮提取,过滤,滤液浓缩至浸膏,干燥粉碎得睡莲花粉末备用;
步骤五、将一枝蒿粉碎,加入3-8倍量的甲醇提取,过滤,浓缩成浸膏;向浸膏中加入2倍量的水,搅拌溶解;然后加入1倍量的4%明胶,搅拌混匀,过滤,收集滤液;蒸发浓缩至1/2体积;加入5倍量的无水乙醇,静置2h,过滤,保留滤液,滤液浓缩成浸膏、干燥、粉碎,备用
步骤六、将桃儿七粉碎,加入5-8倍量的水,煎煮、过滤,滤液浓缩至浸膏,烘干,粉碎备用;药渣用85%的乙醇回流提取,过滤,收集滤液,回收乙醇,剩余液体浓缩成浸膏、烘干、粉碎得到桃儿七粉末备用;
步骤七、将小驳骨粉碎,加入3-5倍量氯仿,回流提取,过滤,收集滤液,残渣烘干;回收滤液中的氯仿,浓缩成小驳骨浸膏、烘干、粉碎得小驳骨粉备用;
步骤八、将紫草粉碎,加入2倍量的乙醚回流提取48h,过滤,收集滤液,回收乙醚,剩余液体浓缩成浸膏;用80%的丙酮洗涤浸膏2~3次,每次收集滤液,合并滤液;4℃减压浓缩,回收丙酮;收集剩余液体,浓缩成浸膏、烘干、粉碎得紫草粉备用;
步骤九、将步骤一至八制备的粉末和晶体合并,混合均匀即得中药复方制剂。
上述的用于预防和治疗猪流感的中药制剂的制备方法,步骤二中向渗漉液中加入氨水将渗漉液pH调至9.5。
方中苦木,为方中君药,味苦,性寒,有小毒,具有清热燥湿、解毒消肿的功效,临床上主治感冒、急性扁桃体炎、肠炎、上呼道感染、细菌性痢疾、高血压等疾病。
羌活,为方中君药,性温,味辛、苦,入膀胱、肾经,具有解表散寒、祛风胜湿、止痛的功效,临床上多用于治疗风寒感冒、头痛项强、风湿痹痛、肩背酸痛等。
睡莲花,为方中臣药,具有清热补心、降热养肝、消炎止咳之功效,用于心虚、肝虚、热性感冒等疾病的治疗。
一枝蒿,为方中臣药,具有清热解毒、祛风活血、散瘀消肿、健胃消食等功效;主要用于感冒头痛、消化不良、跌打损伤、大便秘结等症。一枝蒿具有良好的抗病毒、抗炎、抗氧化、保肝降酶等生物活性。
桃儿七,为方中佐药,具有清热解毒、祛风除湿、消肿止痛、活血散瘀的功效,主治支气管炎、风湿性关节炎、月经不调,外敷用治外伤性肿胀疼痛、毒蛇咬伤等。
小驳骨,为方中佐药,治疗筋膜骨折、创伤性损伤、风湿病、淤血、血瘀、月经阻滞以及产后腹痛;具有抗炎、抗氧化和保肝、抗血管生成、免疫抑制、抗病毒等多种活性。
紫草,为方中使药,味苦、性寒,有凉血、活血、解毒等功能,可用于体表清热、内服解毒、局部伤口活血化瘀;还有显著的抗氧化、抗炎、抗菌、抗病毒、抗肿瘤的药理作用。
本发明中药制剂药效测定:
(1)本发明中药制剂对MDCK细胞毒性测定
制备长满MDCK细胞单层的96孔细胞培养板,本发明的中药制剂用DMEM培养基按照倍比法进行稀释后,使药物的终浓度为(500 g/mL、250 g/mL、125 g/mL、62. 5 g/mL、31. 25 g/mL、15. 63 g/mL、7. 81 g/mL、3.95 g/mL、1.98 g/mL、0.99 g/mL、0.49 g/mL、0.25 g/mL、0.12 g/mL、0.06 g/mL、0.03 g/mL、15.43 mg/mL、7.71 mg/mL、3.86 mg/mL、1.93 mg/mL、0.97 mg/mL、0.48 mg/mL、0.24 mg/mL),分别加入到细胞孔中,每个药物浓度做4个重复,在5% CO2、37 ℃条件下培养48 h,48 h后取出96孔板,每孔加入含2%FBS的DMEM维持液,继续培养8 h后取出培养板,测量各孔的吸光值,然后计算药物的最大安全浓度。
(2)本发明中药制剂对猪流感病毒抑制效果的测定
将本发明中药制剂按照倍比稀释法进行稀释,使药物的终浓度为(500 g/mL、250 g/mL、125 g/mL、62. 5 g/mL、31. 25 g/mL、15. 63 g/mL、7. 81 g/mL、3.95 g/mL、1.98 g/mL、0.99 g/mL、0.49 g/mL、0.25 g/mL、0.12 g/mL、0.06 g/mL、0.03 g/mL、15.43 mg/mL、7.71 mg/mL、3.86 mg/mL、1.93 mg/mL、0.97 mg/mL、0.48 mg/mL、0.24 mg/mL),按照每个浓度4次重复,分别按照每孔接入100 µL药液,接入已长满单层MDCK细胞的96孔细胞培养板内,5% CO2,37 ℃培养1 h,弃药液;再加入TCID50病毒液每孔100 µL,5% CO2,37 ℃培养1h,另设细胞对照和病毒对照(H1N1)。5% CO2,37 ℃培养5 d,每天观察细胞情况。计算本发明中药制剂在MDCK细胞上对病毒的吸附阻断浓度。
(3)本发明中药制剂在MDCK细胞上对病毒的抑制作用
用已长满单层MDCK细胞的96孔细胞板作为培养板,按照100 µL/孔将TCID50病毒液接入培养板上,5% CO2,37 ℃培养1 h,吸弃病毒液,用PBS液清洗3次,再加入倍比稀释的药液,使药物的终浓度为(500 g/mL、250 g/mL、125 g/mL、62. 5 g/mL、31. 25 g/mL、15. 63g/mL、7. 81 g/mL、3.95 g/mL、1.98 g/mL、0.99 g/mL、0.49 g/mL、0.25 g/mL、0.12 g/mL、0.06 g/mL、0.03 g/mL、15.43 mg/mL、7.71 mg/mL、3.86 mg/mL、1.93 mg/mL、0.97 mg/mL、0.48 mg/mL、0.24 mg/mL),按照100 µL/孔,每个浓度重复4次,设细胞对照组和病毒对照组。将接种好的细胞培养板放入5% CO2,37 ℃培养5 d,每天观察细胞情况;计算本发明中药制剂在MDCK细胞上对病毒的抑制浓度。
(4)本发明中药制剂在MDCK细胞上对病毒的直接灭活作用
将TCID50浓度的病毒液与倍比稀释的药液等体积混匀,使药物的终浓度为(500 g/mL、250 g/mL、125 g/mL、62. 5 g/mL、31. 25 g/mL、15. 63 g/mL、7. 81 g/mL、3.95 g/mL、1.98 g/mL、0.99 g/mL、0.49 g/mL、0.25 g/mL、0.12 g/mL、0.06 g/mL、0.03 g/mL、15.43mg/mL、7.71 mg/mL、3.86 mg/mL、1.93 mg/mL、0.97 mg/mL、0.48 mg/mL、0.24 mg/mL),5%CO2,37 ℃培养1 h,分别按照每孔100 µL,每个孔重复4次,接种到长满MDCK单层细胞的96孔板,同时设置病毒对照孔、药物对照孔和空白细胞对照,5% CO2,37 ℃培养5 d,每天观察细胞情况;计算本发明中药制剂在MDCK细胞上对病毒的直接灭活浓度。测定结果见表1。
由表1可知,本发明中药制剂对MDCK细胞的最大安全浓度为250g/ml,即中药制剂浓度在250g/ml以下时,均可进行细胞实验,对细胞没有毒性;通过本发明中药制剂对猪流感抑制效果的测定,本发明中药制剂阻断猪流感对MDCK细胞不发生病变的最小浓度为62.5g/ml;通过本发明中药制剂在MDCK细胞上对病毒的抑制作用的测定,本发明中药制剂完全抑制猪流感对MDCK细胞不发生病变的最小浓度为0.99mg/ml;通过本发明中药制剂在MDCK细胞上对病毒的直接灭活作用测定,本发明中药制剂完全灭活猪流感对MDCK细胞不发生病变的最小浓度为1.93 mg/ml,可见本发明中药制剂对细胞无毒且对猪流感病毒具有良好的抑制和灭活作用。
本发明的有益效果:本发明严格按照君臣佐使进行配伍,具有抗病毒、清热解毒、止咳平喘、抗菌消炎的功效;通过对不同原料进行处理,最大程度的发挥不同药物的药效,制备的中药制剂完全抑制猪流感对MDCK细胞不发生病变的最小浓度为0.99mg/ml,安全有效,无毒副作用,对猪流感病毒具有良好的抑制作用;在临床应用中,本发明制备的中药制剂对猪流感病猪的治疗总有效率接近100%,能够有效防治猪流感,而且本发明组方为纯中药制剂,避免了用抗生素预防和治疗的药物残留,能够确保食品安全;该中药制剂对猪流感有很好的预防和治疗作用,对慢性呼吸道传染病,咳嗽,气喘,高烧,死亡率高等具有较好的疗效,具有广阔的市场前景和较大的经济效益。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明,以便更好地理解本发明技术方案,需要说明的是:下述实施例中各中药原料在选取量上1 g为1份。
实施例1:本实施例提供一种用于预防和治疗猪流感的中药制剂,该中药制剂包括以下重量份的原料:苦木30g、羌活35g、睡莲花40g、一枝蒿45g、桃儿七45g、小驳骨35g、紫草40g。
制备方法:
步骤一、将苦木粉碎,加入等量的0.55%硫酸,浸泡2h,装入渗漉桶中,用0.55%的硫酸渗漉,收集渗漉液;用氨水调渗漉液的pH值为9.5,静置2h,滤去沉淀;向上清液中加入15倍量的活性炭,搅拌2h,离心去除活性炭;将活性炭自然干燥12h,然后用氯仿回流洗脱活性炭,收集氯仿液,用旋转蒸发仪浓缩结晶;向晶体中加入2倍量的乙醚,回流提取,蒸干乙醚液,用90%的乙醇重结晶,得到苦木晶体备用。
步骤二、将羌活粉碎,加入2倍量乙醚提取2h,回收溶剂,4℃冷藏8h,过滤,保存滤液和沉淀;4℃冷藏8h,滤液和沉淀用石油醚和乙醇重结晶,保存羌活晶体备用。
步骤三、将睡莲花粉碎,加入8倍量的65%乙醇提取,过滤;向滤液加入3倍量的水煎煮提取,过滤;滤液浓缩至浸膏,干燥粉碎得睡莲花粉备用。
步骤四、将一枝蒿粉碎,加入5倍量的甲醇提取,过滤,浓缩成浸膏;向浸膏中加入2倍量的水,搅拌溶解;然后加入1倍量的4%明胶,用以除去溶液中的鞣质,搅拌混匀,过滤,收集滤液;用旋转蒸发仪浓缩至1/2体积;加入5倍量的无水乙醇,静置2h,过滤,保留滤液,滤液浓缩成浸膏、干燥、粉碎,得到一枝蒿粉备用。
步骤五、将桃儿七粉碎,加入6倍量的水,煎煮、过滤;滤液浓缩至浸膏,烘干,粉碎备用;药渣用85%的乙醇回流提取,过滤,收集滤液,回收乙醇,剩余液体浓缩成浸膏、烘干、粉碎得到桃儿七粉备用。
步骤六、将小驳骨粉碎,加入4倍量氯仿,回流提取,过滤,收集滤液,残渣烘干;回收滤液中的氯仿,浓缩成小驳骨浸膏、烘干、粉碎备用。
步骤七、将紫草粉碎,加入2倍量的乙醚回流提取48h,过滤,收集滤液,回收乙醚,剩余液体浓缩成浸膏;用80%的丙酮洗涤浸膏2~3次,每次收集滤液,合并滤液;4℃减压浓缩,回收丙酮;收集剩余液体,浓缩成浸膏、烘干、粉碎备用。
步骤八、将步骤一至七制备的粉末和晶体合并,混合均匀即得中药制剂。
实施例2:本实施例提供一种用于预防和治疗猪流感的中药制剂,该中药制剂包括以下重量份的原料:苦木40g、羌活30g、睡莲花45g、一枝蒿50g、桃儿七50g、小驳骨40g、紫草50g。
制备方法:
步骤一、将苦木粉碎,加入等量的0.55%硫酸,浸泡2h,装入渗漉桶中,用0.55%的硫酸渗漉,收集渗漉液;用氨水调渗漉液的pH值为9.5,静置2h,滤去沉淀;向上清液中加入15倍量的活性炭,搅拌2h,离心去除活性炭;将活性炭自然干燥12h,然后用氯仿回流洗脱活性炭,收集氯仿液,用旋转蒸发仪浓缩结晶;向晶体中加入2倍量的乙醚,回流提取,蒸干乙醚液,用90%的乙醇重结晶,得到苦木晶体备用。
步骤二、将羌活粉碎,加入2倍量乙醚提取2h,回收溶剂,4℃冷藏8h,过滤,保存滤液和沉淀;4℃冷藏8h,滤液和沉淀用石油醚和乙醇重结晶,保存羌活晶体备用。
步骤三、将睡莲花粉碎,加入8倍量的65%乙醇提取,过滤;向滤液加入3倍量的水煎煮提取,过滤;滤液浓缩至浸膏,干燥粉碎得睡莲花粉备用。
步骤四、将一枝蒿粉碎,加入5倍量的甲醇提取,过滤,浓缩成浸膏;向浸膏中加入2倍量的水,搅拌溶解;然后加入1倍量的4%明胶,搅拌混匀,过滤,收集滤液;用旋转蒸发仪浓缩至1/2体积;加入5倍量的无水乙醇,静置2h,过滤,保留滤液,滤液浓缩成浸膏、干燥、粉碎,得到一枝蒿粉备用。
步骤五、将桃儿七粉碎,加入5-8倍量的水,煎煮、过滤;滤液浓缩至浸膏,烘干,粉碎备用;药渣用85%的乙醇回流提取,过滤,收集滤液,回收乙醇,剩余液体浓缩成浸膏、烘干、粉碎得到桃儿七粉备用。
步骤六、将小驳骨粉碎,加入3-5倍量氯仿,回流提取,过滤,收集滤液,残渣烘干;回收滤液中的氯仿,浓缩成小驳骨浸膏、烘干、粉碎备用。
步骤七、将紫草粉碎,加入2倍量的乙醚回流提取48h,过滤,收集滤液,回收乙醚,剩余液体浓缩成浸膏;用80%的丙酮洗涤浸膏2~3次,每次收集滤液,合并滤液;4℃减压浓缩,回收丙酮;收集剩余液体,浓缩成浸膏、烘干、粉碎备用。
步骤八、将步骤一至七制备的粉末和晶体合并,混合均匀即得中药制剂。
实施例3:本实施例提供一种用于预防和治疗猪流感的中药制剂,该中药制剂包括以下重量份的原料:苦木60g、羌活15g、睡莲花50g、一枝蒿55g、桃儿七40g、小驳骨50g、紫草35g。
制备方法同实施例2。
实施例4:本实施例提供一种用于预防和治疗猪流感的中药制剂,该中药制剂包括以下重量份的原料:苦木50g、羌活25 g、睡莲花55g、一枝蒿40g、桃儿七60g、小驳骨45g、紫草60g。
制备方法同实施例2。
实施例5:本实施例提供一种用于预防和治疗猪流感的中药制剂,该中药制剂包括以下重量份的原料:苦木20g、羌活45g、睡莲花35g、一枝蒿60g、桃儿七55g、小驳骨30g、紫草55g。
制备方法同实施例2。
对比例1:称取板蓝根40g、金银花35g、桔梗30g、陈皮25g、黄芩30g、柴胡35g、羌活30g、独活15g、川穹20g。将以上中药放入煎煮罐中加入药材3倍量的水煎煮2-3次,合并煎煮液浓缩至50ml,为单只猪剂量,对猪进行饲喂。
对比例2:称取金银花30g、女贞子20g、扁豆花35g、黄芩25g、鱼腥草20g、黄芪15g。将以上中药放入煎煮罐中加入药材3倍量的水煎煮2-3次,合并煎煮液浓缩至50ml,为单只猪剂量,对猪进行饲喂。
对比例3:称取苦木20g、羌活45g、睡莲花35g、一枝蒿60g、桃儿七55g、小驳骨30g、紫草55g。将以上中药放入煎煮罐中加入药材3倍量的水煎煮2-3次,合并煎煮液浓缩至50ml,为单只猪剂量,对猪进行饲喂。
临床应用效果:
2019年10月,商丘某猪场发现并诊断为猪流感的病猪120头。将所有病猪与健康猪进行隔离饲养,将所有病猪随机均匀分为8组,每组15只,一组一猪舍,每个猪舍的温度、湿度、卫生环境、圈舍消毒均保持一致;每组采用相同的饲喂方式,实施例1-5制备的中药制剂作为试验组1-5,对比例1-3制备的药物作为对照组1-3,按照组别顺序分别给药,每猪每天早晚各给药一次,连续用药7天,用药期间饮水自由,记录每组病猪连续用药七天后起效、治愈情况以及总有效率,结果见表2。
其中:
治愈:发热、呼吸困难、流鼻涕、乏力等临床症状完全消失,体温恢复正常,精神食欲恢复正常。
有效:发热、呼吸困难、流鼻涕、乏力等临床症状明显减轻,食欲好转,精神逐渐恢复。
无效:症状无明显改善或出现加重,精神萎靡、食欲不振。
总有效率=(治愈数+有效数)/每组总数。
由表2可以看出,采用本发明方法和组方制备的中药制剂的总有效率达到14/15及以上,对照组3采用本发明组方采用常规煎煮工艺制备的中药制剂的有效率也达到了12/15;采用实施例2制备的中药制剂的总有效率达到100%,均明显高于对照组1-2的药物,可见本发明制备的中药制剂与目前其他中药制剂相比对猪流感具有极好的治疗效果。
具体病例
具体病例1:2019年3月25日,虞城县一猪场发生疫病。该场部分育肥猪食欲不佳,病情时好时坏,猪只日渐消瘦,病情加重。猪只被毛粗乱,精神差,食欲减退,耳、鼻、四肢俱冷,舌淡苔白,体温39.8℃,自汗,尿清长,粪正常,诊断为猪流感。用本发明中药2kg 拌料1000kg,一日两次,连用3 d,让猪自由采食;用药第3天病情得到控制,开始回升至正常。
具体病例2:2019年10月13日,开封一猪场发生疫病。该场部分断奶仔猪突然不食,卧地不起,耳、鼻俱冷,体温41.1℃。患猪精神差,食欲、饮欲不振,四肢、耳、鼻不温,毛焦体瘦,行走无力,四肢运步不灵活,背拱,舌苔淡白,舌体边缘色白、中心色青紫,脉细沉无力,眼结膜苍白。诊为流感。用本发明的中药2 kg 拌料1000kg,一日两次,连用3d,让猪自由采食;用药第3天病情得到控制,开始回升至正常。再服药3天,以巩固疗效。之后随访,再无复发。
具体病例3:2020年8月29日,南阳一猪场发生疫病。该场部分母猪不食,卧地不起,耳、鼻冷,日渐加重。患病猪只精神不佳,毛焦体瘦,行走乏力,食欲不振,体温39.8℃,卧多立少,动则气喘舌色淡白,舌体绵软,眼结膜苍自,耳、鼻、四肢冰冷,脉细无力,粪、尿正常。诊为流感。用本发明的中药2 kg 拌料1000kg,一日两次,连用3d,让猪自由采食;用药第3天病情得到控制,开始回升至正常。患病猪精神好转,体温38.5℃。耳、鼻、四肢温热,舌色粉红,动不喘,眼结膜淡红,脉象有力。
以上所述仅为本发明的较佳实施例,并不限制本发明,凡在本发明的精神和原则范围内所做的任何修改、等同替换和改进,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种用于预防和治疗猪流感的中药制剂,其特征在于:包括以下重量份的中药原料:苦木20-60份、羌活15-45份、睡莲花35-55份、一枝蒿40-60份、桃儿七40-60份、小驳骨30-50份、紫草35-60份。
2.根据权利要求1所述的用于预防和治疗猪流感的中药制剂,其特征在于:包括以下重量份的中药原料:苦木30-50份、羌活25-35份、睡莲花40-50份、一枝蒿45-55份、桃儿七45-55份、小驳骨45-45份、紫草40-60份。
3.根据权利要求1或2任一项所述的用于预防和治疗猪流感的中药制剂,其特征在于:包括以下重量份的中药原料:苦木40份、羌活30份、睡莲花45份、一枝蒿50份、桃儿七50份、小驳骨40份、紫草50份。
4.一种如权利要求1-3任一项所述的用于预防和治疗猪流感的中药制剂的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤一、按重量份分别称取苦木、羌活、睡莲花、一枝蒿、桃儿七、小驳骨和紫草;
步骤二、将苦木粉碎,加入等量的0.55%硫酸浸泡1-3h,然后倒入渗漉桶中用0.55%硫酸渗漉,收集渗漉液;将渗漉液的pH值调为9.5,静置2-3h后滤去沉淀,收集上清液,向上清液中加入12-18倍量的活性炭,搅拌1-3h,离心、去除活性炭;将活性炭自然干燥12-24h后用氯仿回流洗脱活性炭,收集氯仿洗脱液进行浓缩结晶;向结晶中加入2倍量的乙醚溶液,回流提取,蒸干乙醚液,用90%的乙醇重结晶,得到苦木结晶,备用;
步骤三、将羌活粉碎,加入1-3倍量乙醚提取1-3h,回收溶剂,冷藏、过滤,保存滤液和沉淀,滤液和沉淀用石油醚和乙醇重结晶,保存羌活晶体备用;
步骤四、将睡莲花粉碎,加入5-10倍量的65%乙醇提取,过滤;向滤液加入2-5倍量的水煎煮提取,过滤,滤液浓缩至浸膏,干燥粉碎得睡莲花粉末备用;
步骤五、将一枝蒿粉碎,加入3-8倍量的甲醇提取,过滤,浓缩成浸膏;向浸膏中加入2倍量的水,搅拌溶解;然后加入1倍量的4%明胶,搅拌混匀,过滤,收集滤液;蒸发浓缩至1/2体积;加入5倍量的无水乙醇,静置2h,过滤,保留滤液,滤液浓缩成浸膏、干燥、粉碎,备用
步骤六、将桃儿七粉碎,加入5-8倍量的水,煎煮、过滤,滤液浓缩至浸膏,烘干,粉碎备用;药渣用85%的乙醇回流提取,过滤,收集滤液,回收乙醇,剩余液体浓缩成浸膏、烘干、粉碎得到桃儿七粉末备用;
步骤七、将小驳骨粉碎,加入3-5倍量氯仿,回流提取,过滤,收集滤液,残渣烘干;回收滤液中的氯仿,浓缩成小驳骨浸膏、烘干、粉碎得小驳骨粉备用;
步骤八、将紫草粉碎,加入2倍量的乙醚回流提取48h,过滤,收集滤液,回收乙醚,剩余液体浓缩成浸膏;用80%的丙酮洗涤浸膏2~3次,每次收集滤液,合并滤液;4℃减压浓缩,回收丙酮;收集剩余液体,浓缩成浸膏、烘干、粉碎得紫草粉备用;
步骤九、将以上步骤制备的药粉和晶体合并,混合均匀即得中药制剂。
5.根据权利要求4所述的用于预防和治疗猪流感的中药制剂的制备方法,其特征在于:步骤二中向渗漉液中加入氨水将渗漉液pH调至9.5。
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隋凯等: "牛感冒、吊鼻、鼻衄的诊疗", 《畜牧兽医科技信息》 * |
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